CN1853100A - 具有降低的假阳性和假阴性读数灵敏性的图像比色测试器具 - Google Patents

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Abstract

一种层叠式测试器具，其包含：位于透光基材片(31)一侧上的指示剂层(32)，和位于基材片另一侧上的颜料层(35)。

Description

具有降低的假阳性和假阴性读数灵敏性的图像比色测试器具
对相关申请的交叉引用
本申请要求提交于2003年9月19日的第60/504,066号美国临时专利申请的优先权，其全部内容被作为参考纳入本文。
                          发明背景
1.发明的技术领域
本发明属于提供可见读出的临床用测试器具领域，更具体地涉及使用比色指示器来显示图像或符号的测试器具，该图像或符号指示样品中某一具体物质的存在与否、某物质的浓度高低、pH的高低或对样品中所需或非所需病情的任何此类指示。
2.现有技术描述
产生可视觉检测正号(plus sign)以指示阴道分泌物样品中阴道病菌存在的测试器具在以下的美国专利(发明人为Paul J.Lawrence等)中有所揭示：第5,660,790号(出版于1997年8月26日)；第5,897,834号(出版于1999年4月27日)；第5,910,447号(出版于1999年6月8日)；第6,099,801号(出版于2000年8月8日)；第6,113,856号(出版于2000年9月5日)；和第6,200,817(出版于2001年3月13日)。在这些专利中揭示了两种不同的测试：阴道分泌物的pH测试，在该测试中pH为4.7或更高被用来作为感染的指示；以及胺测试，在该测试中挥发性胺的存在被用来作为感染的另一指示。这些专利中的器具是层叠的测试卡片，而测试则是通过将阴道分泌物样品用药签施加在卡片的表面上，然后检测卡片表面符号的出现来进行的。这两种测试中的每一种中，阴性测试结果显示为由单条水平条带形成的“负”号，而阳性结果则显示为由两条在直角相交的条带形成的“正”号。该正号由两条可独立工作但相交的条带组成：一条水平条带(阳性对照)；和第二垂直条带(测试响应)。该水平条带因此似乎与测试结果无关，从而作为指示引起两条带中颜色变化的指示物正常发挥功能的阳性对照。因此，如果在施加样品后没有任何条带出现，则认为该测试器具不可用并应将其丢弃；若出现单一条带(“负”号)，则说明该器具具有功能且测试结果是阴性的；而两条条带均出现(形成“正”号)，则指示该器具具有功能且测试结果是阳性的。
正号和负号也可由以下专利中所揭示的测试器具产生：发明人均为WilliamE.Brown，III等的美国专利第4,916,056号(出版于1990年4月10日)和第5,008,080号(出版于1991年4月16日)。这些专利中的测试涉及的是免疫结合而不是pH变化，但如Lawrence等人的专利一样，其测试结果也是用正号和负号来显示的，其中正号是在两条独立工作但相交的条带变得可见时形成的，而负号则是在两条条带中的仅一条条带变得可见时形成的。本段落中和上一段落中的所有专利以其全文作为参考纳入本文。
由于此类产品小型的性质和简便的可见读出，执业医师和实验室技术人员认为此类产品很有用且有效。正是由于这些器具易于使用，它们也受到未受过临床训练的消费者和其它个人的欢迎。这一点在Lawrence等人发明的器具上尤为现实，该器具的测试操作包括：简单地将样品用药签施加于器具表面上，然后观察器具上显现出何种符号。然而，在某些情况下，使用者(尤其是为未经训练的个人)会错误地读取该器具，报告出既非假阳性也非假阴性的结果。
错误读取的一个来源是由以下造成的：两条独立的、可分的但相交的条带的独立响应以及各条带的响应可在某种程度上随施加于器具的样品量和样品中被分析物的浓度而变化。两条相交条带间颜色强度的微小差别会令使用者把一条条带看作是另一条条带的比色物，并由此在读出阳性结果之前等待垂直条带的颜色与水平条带清晰相配。阳性结果会因此被解释为阴性(即，假阴性)。
在任何颜色变化发生前，当相交的水平和垂直条带的轮廓可见时，甚至当轮 仅模糊可见时，错误读取的另一个来源产生了。这一问题可存在于任何图像  中，本文的术语“图像的”和“图像”是指任何类似图像的符号，其形成表示它的含义。在Lawrence等人和Brown等人的器具中，所述图像是指示阴性结果的负号(当仅有一条条带显现时)或是指示阳性结果的正号(当两条条带都显现时)。该图像也可为单一的正号，其作为整体显现出来且不具备仅使负号部分显现出来的能力。其它形式或形状的图像将很容易显现出来。使用这些图像中的任何一种，错误读出可因该器具的构造而起：其构造通常包含数层，其中的一层或更多层形成该图像的轮廓。在某些情况下，例如，该图像是由覆盖在指示剂层上的具有图像状开口的沟道层形成的，该指示剂层延伸于该器具的整个侧面之上或至少位于开口边界之上。该沟道层使得样品(和任何存在的被分析物)能够只与指示剂层中位于开口正下方的部分相接触。由于沟道层的光反射率可能不同于指示剂层的光反射率，即使该沟道层完全透明，开口的边界也可被凑近该器具观察的人看到。在另一种情况下，由具有图像形状且位于任何下层之上的指示剂层本身形成图像。由于高度的差异(即使该差异是很小的)，虽然图像后面的记录(filed)与图像是相同颜色的(测试前)，图像的边缘仍模糊可见。对于不熟练的或未经训练的使用者，当结果事实上是阴性时，该可见性会导致其读出阳性测试结果(即，假阳性)。厚度的差异可通过在与图像邻接的区域淀积材料来使其最小化或消除，该淀积所使用的材料在与样品或被分析物接触时均不会变色。然而，图像和周围材料将会由此成为不同的化学组合物。其本身会产生虽然轻微但已足以使得两种材料间的边界间视觉上可辨认的颜色差异。而且，如果存在指示剂层可扩散到周围材料的风险并从而使得读出模糊，警示或用于防止该情况发生的结构特征也会导致轮廓可见。
                           发明概述
目前已经发现测试器具(device)上图像的错误读出(例如，上文所描述的那些)，可通过将器具构造成层叠物(laminate)而减轻或消除，该层叠物包括在其层间的透光不透液层，该层的一侧被指示剂层所覆盖，而另一侧则与颜料层所覆盖，该颜料层的颜色与在指示阳性测试结果的颜色变化前的指示剂层的颜色相同。由于透光不透液层可用作在其两侧之上施加其它层的适宜基片，并且其通常为平而薄的，因此在本文中也被称为“基材片”。该图形可通过覆盖指示剂层的沟道层来形成，或通过限制指示剂层的大小和形状以使指示剂层本身形成图像。在各种情况下，颜料层延伸出图像区域，且较佳为覆盖图像区。如本文所述，该测试器具包括含有有色区的划定的测试区，其包括在发生阳性测试结果时发生颜色变化的图像区，和围绕该图像区以使得图像在图像区变色之前基本不可见的不变区(或域)。因此，图像区是位于测试区之中且小于测试区的有限区域。虽然在优选的实施方式中，测试区是一个较小的、仅覆盖器具总面积一部分的区域，但测试区本身可延伸过该器具的整个长度和宽度。
在本发明的另一些优选的实施方式中，该测试器具包括在测试区中的阳性对照区，其在空间上与图像区分离，并明显小于图像区。在这些实施方式中，阳性对照物起到与上文所提到的Lawrence等和Brown等专利中所揭示的器具中的阳性对照物相同的目的，但并不形成阳性测试结果图像的一部分。除了它们在空间上的分离之外，阳性对照物和测试图像优选在大小和形状上有所不同，意图通过分离、大小和形状差异来消除使用者头脑中对于对照信号和阳性测试信号间的混淆。
也已发现当在阴道分泌物样品上进行对挥发性胺的测试时，利用上文引用的Lawrence等人的专利中的颜色变化方法，使用其它专利中所揭示的层叠排列或本文所揭示的任何层叠排列，均足以指示细菌性阴道病，从而使得单一的挥发性胺测试可取代基于Amsel指标的传统诊断方法。细菌性阴道病(BV)的Amsel指标是以Amsel，R等人的报告(Am.J.Med.74：14-22，1983年)为基础的，它提出了BV诊断中共同获得的4个指标：阴道分泌物样品的pH值的上升(通常为4.5或以上，现在为4.7或以上)、“臭味”测试(将样品用碱处理，然后通过嗅觉测试检测胺的气味)、阴道分泌物同质性和线索细胞(clue cells)的存在。根据Amsel指标来检测阳性结果，必须符合pH值的上升，同时还符合其余三项指标中的至少两项。本发明立足于仅使用胺测试一项就可作为有效的诊断方法的发现之上。
本发明的其它特征、实施方式和优点将通过下文的描述得到呈现。
                       附图的简要描述
图1为本发明的测试器具的平面图，其包含两个测试区，一个用来确定液体样品中特定的pH阈值是否已被超过，而另一个则用来确定样品中挥发性胺的存在。
图2为在两个区域都施予对于两个测试均为阳性的样品后的图1所示测试器具的平面图。
图3为形成图1和图2所示的pH测试区的一种层叠排列的透视图。
图4为形成图1和图2所示的pH测试区的另一种层叠排列的透视图。
图5为形成图1和图2所示的胺测试区的一种层叠排列的透视图。
图6为形成图1和图2所示的胺测试区的另一种层叠排列的透视图。
                   发明详述及优选实施方式
在本发明的各种实施方式中，指示剂层在本文中也被称为“被分析物指示剂层”，它是一层发生颜色变化从而指示阳性测试结果的指示剂层。可在本发明的器具上进行测试的样品是液体样品，包括生物液体样品，而阳性测试结果则是由于指示剂和样品中的某成分间发生化学反应而在指示剂中产生的可视觉检测的颜色变化。由此，该阳性测试结果的产生可能由于：样品中不同物种的存在、不同物种的缺乏(即该物种的存在将抑制该反应)、样品的pH高于或低于某一转变点(transition point)、或样品的任何此类作为需要被确定存在的某一状况的指示的性质或特性。在很多情况下，被分析物指示剂层中的指示剂将是pH指示剂，当pH越过转变点的时候，该指示剂将会发生可见的颜色变化。许多常用的pH指示剂均可使用。当然，对指示剂的选择取决于转变点和具体的被分析物。该层本身较佳由液体可渗透的亲水性聚合物构成，该聚合物用作浸渍指示剂的基质。
颜料层是一个在被分析物指示剂层发生任何变化(施予样品后)之前，基本上与被分析物指示剂层没有可辨认的色差的层。因此，颜料层可以是与被分析物指示剂层相同的组合物，并通过位于被分析物层和颜料层之间从而使两者不会互相接触的基材片来防止其颜色变化。基材片对样品液是不渗透的，从而使得该样品不会渗透过该片。也可通过将保护密封层覆于颜料层之上来防止颜料层与样品的接触。或者，且优选该颜料层为彩色油墨，该彩色油墨与指示剂层的化学组成不同、且不与被分析物反应、或至少在与样品接触时不会发生反应或颜色变化，不论样品中是否存在被分析物。可使用常用的市售油墨或油墨组合物。
将被分析物指示剂层与颜料层分离开并且还对液体样品不渗透的基材片是光可透过性的，从而使得颜料层透过该基材片可见，即从基材片的指示剂侧可见。较佳地，该基材片是透明而无色的。目前优选的基材片材料是聚对苯二酸乙二醇酯薄膜(fill)，例如MYLAR(Du Pont de Nemours & Co.，威明顿，特拉华州，美国)。在很多情况下，基材片上的涂层可增强施加于其上的层的层粘附性，尤其当颜料和指示剂层在制造该器具的操作中或在其使用中易于被损坏时。此类损坏例如在以不透过基材片的溶剂溶液施涂上述层时发生。例如，用水性和醇溶剂淀积的层与MYLAR间粘附得不好。聚酰胺是一种优选的、具有改善的粘附性的涂层材料。
通过将被分析物指示剂层中的颜色变化限制到一个测试区中的限定区域可形成图像。这可通过用沟槽层来覆盖被分析物指示剂层(该沟槽层带有图像状的开口，用以暴露出被分析物指示剂层中的图像状区域)，或通过形成图像状的被分析物指示剂层，而使邻接部分不含指示剂来完成。当使用沟槽层时，沟槽层优选为透明的。如上文所提到的指出的，可将图像设定为任何形状或形式，优选为可将阳性测试结果信息传递给使用者的形状或形式。优选正号，尤其是一旦由于颜色变化而可见时，就完全被与颜色变化前的图像颜色相同的区域所包围的那种正号。
在除了测试图像以外还包含阳性对照物的实施方式中，如上文所提到的阳性对照物优选在空间上与测试图像分离并具有不同的大小和形状。阳性对照物本身是一种图像，在具有正号形测试图像的实施方式中，适宜的阳性对照图像是圆点，该圆点具有大体上小于正号的直径，以遵循阳性对照物第二的原则。阳性对照图像本身是一种指示剂，但其接触任何样品时，不论该样品中是否含有会使测试图像中产生颜色变化的被分析物(或缺少该被分析物或在其它化学条件下)都会发生颜色变化。在施用样品以前，阳性对照图像会显示出与测试图像和测试区背景都相同的颜色。虽然阳性对照图像中颜色的变化是以一种不同的方式响应样品而非响应被分析物而产生的，阳性对照图像中的颜色变化优选与测试图像相同。该不同可为不同的转变点或其它作为阳性对照物和指示阳性测试结果有所区别的特征。
测试图像和阳性对照图像优选包含在测试装置上的同一测试区中，并指导使用者将样品施用在整个测试区上，以使得测试图像和阳性对照物都能与样品接触。因此，优选的测试区为小到足以易于用可包含在单个药签中(例如Q型-头部或其它消费者可收纳于药箱中的常用的工具)的样品量来涂覆。为了同时容纳两种图像并使样品以打圈的动作施加，测试区较为便利的形状是椭圆形、卵形、或具有弧形末端的较宽的条形。
可通过任选地将不透明的白色层覆盖在颜料层的整个外侧面(即，在与颜料层被基材板占据的那一侧的反面)来进一步确保测试器具下背景色的一致和不变，以提供更为一致的图像中(即在测试图像和阳性对照图像中)颜色变化的检测。当颜料层、被分析物指示剂层和阳性对照物可容许少量的光透过时，这一方法尤为有效。
还发现当颜料层由与被分析物指示剂层相同的材料形成时，背景色将显得与测试图像的颜色(在图像中发生颜色变化之前)更为一致，且当将外部透明涂覆层置于颜料层之上时(即一旦将颜料层施加于基材片底部表面上后，就将外部透明涂覆层施加于该颜料材料之上)，图像轮廓更不可见。虽然发明人不打算被这一解释所约束，但确信用于外部透明涂层的溶剂系统(在本文的优选实施方式中为正丙醇)会很小程度地渗透过颜料层，并产生轻微的颜色变化，该颜色变化使得测试图像轮廓更为模糊。
作为另一选择，当颜料层由与被分析物指示剂层相同的材料形成时，由于在用保护涂层处理时暴露于对象或液体、或与对象或液体接触，该颜料层可免遭破坏或颜色变化。该涂层可为器具底面上的最外层，也可为与沟槽层或该器具其它任何惰性、非多孔性层相同的材料。该保护层可为透光的或不透明的。聚酰胺是该层的优选材料。
可在符合上文描述的器具上进行的测试的两个例子是：在上文参考的Lawrence等人的专利中所描述的pH测试和胺测试。这两种不同的测试对阴道分泌物样品进行，并用于诊断细菌性阴道病。
pH测试
pH测试指示样品的pH是否为4.7或更高，并作为细菌性阴道病的数个指标中的一个。pH测试中的被分析物指示剂层是一种包含以下物质的组合物的淀积材料：(i)pH指示剂，其具有可电离的酚基团和带负电荷的基团；和(ii)聚合物基质，其中的聚合物包含将指示剂固定在基质中的季铵基团。已知很多种带有可电离的酚基团和带负电荷的基团的pH指示剂。优选的带负电荷的基团为硫酸盐和磺酸盐基团。带有可电离的酚基团和带负电荷的基团的pH指示剂的例子是：
酸性蓝92(阿那佐林钠，CAS No.3861732)
酸性蓝29(CAS No.5850351)
酸性茜素紫N(CAS No.2092559)
溴酚蓝(3′，3″，5′，5″-四溴酚磺酞，CAS No.155399)
溴氯酚蓝(3′，3″-二溴-5′，5″-二氯酚磺酞，CAS No.102185 52 4)
溴甲酚绿(3′，3″，5′，5″-四溴-间-甲酚磺酞，CAS No.76 60 8)
氯酚红(3′，3″-二氯苯酚磺酞，CAS No.4430 20 0)
溴甲酚紫(5′，5″-二溴-邻-甲酚磺酞，CAS No.115 40 2)
二水合茜素氨羧络合剂((3，4-二羟基-2-蒽醌基)-甲基亚氨基二乙酸，CASNo.3952 78 1)
一水合茜素红S(3，4-二羟基-9，10-二氧代-2-蒽磺酸的钠盐，CASNo.130223)
溴百里酚蓝(3′，3″-二溴百里酚磺酞，CAS No.76 59 5)
亮黄(CAS No.3051 11 4)
酚红(苯酚磺酞，CAS No.34487 61 1)
甲酚红(3′，3″-二甲基苯酚磺酞，CAS No.1733 12 6)
间-甲酚紫(2′，2″-二甲基苯酚磺酞，CAS No.230301 7)
百里酚蓝(2′，2″-二甲基-3′，3″-二异丙基苯酚磺酞，CAS No.76 61 9)
硝嗪黄(2-(2，4-二硝基苯偶氮基)萘酚-3，6-二磺酸的二钠盐，CAS No.542307 4)
所有这些指示剂均可从供应商处很容易地购得。优选的指示剂是溴酚蓝、溴氯酚蓝、溴甲酚蓝、溴甲酚紫、溴百里酚蓝、亮黄和硝嗪黄。
聚合物中的季铵基可为能够表现出足以形成对指示剂中的负电荷基团的离子吸引的正电荷的任何此类基团。优选的季铵基为低级烷基铵基，其中烷基为C1-C4烷基。尤为优选三甲基铵基。聚合物组成中的季铵基的量可在一个宽的范围内变化，这取决于所预期的颜色转变点在何处(即，在何pH值)。在本发明的许多应用中，季铵基的量要选择在比指示剂转变点中点值低约1.0-3.0个pH单位，优选为低约1.5-2.5个pH单位，其中优选低约2.0个pH单位。季铵基的量也可用所得聚合物的碱值(alkali value)来表示，即每克干燥聚合物所含碱性季铵基所相当的KOH毫克数。在本发明的大多数实施中，碱值为约5-50，优选约15-40。
形成基质的聚合物优选为多孔(或为可透水的)和亲水性的。聚合物的亲水特性由季铵基或由聚合物结构中的其它基团引起。对样品成分惰性、固体的并能形成薄层、涂层或层的任何聚合物均可使用。该聚合物在水性介质中应为大部分不溶的，尤其是用于本发明的那些设计用来测试阴道分泌物的实施方式中的阴道分泌物中，该聚合物还优选为透明的。例子为丙烯酸聚合物，尤其是丙烯酸和甲基丙烯酸酯的共聚物，以及二乙氨基乙基纤维素。可从供应商处获得的两种目前优选的聚合物为EUDRAGITRL PO和EUDRAGITRS PO AmmonioMethacrylate Copolymers，它们是丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯、乙酯和三甲基氨乙酯的共聚物盐酸盐。季铵基作为甲基丙烯酸的三甲基氨乙基酯单元存在于这些聚合物上，其占聚合物重量的10.4％(RL PO)或5.6％(RS PO)。碱值相应为28.1和15.2。这些聚合物可从Rohm Tech Inc.购得(马尔登，马塞诸塞州，美国)。
用硝嗪黄和EUDRAGIT RL PO的三甲基氨乙酯的组合物来解释如何获得不同的pH转变点。不存在季铵基时的硝嗪黄的转变点为约pH6.6。使用含有聚合物占25％和硝嗪黄占0.2-0.34％的液体溶液时，转变点将为pH4.7。含有25.0％聚合物和0.36％硝嗪黄时，转变点将为pH4.4。含25.0％聚合物和0.4％硝嗪黄时，转变点将为pH4.4。含25.0％聚合物和0.6％硝嗪黄时，转变点将为pH4.3。所有百分比均为重量百分比。
对于硝嗪黄和EUDRAGIT RL PO，其比例(表示为聚合物中KOH当量与硝嗪黄的重量比)优选为约1.0∶1-6.0∶1，更优选为约1.5∶1-3.5∶1。对于EUDRAGIT RLPO而言，优选的聚合物对硝嗪黄的重量比为约50-250，更优选为约75-125。如果聚合物和指示剂以液体溶液形式施涂，则溶液中的聚合物优选为约12％-35％，硝嗪黄优选为约0.05％-1.0％(均为重量比)。
阳性对照图像中的指示剂是转变点比测试指示剂的转变点至少低约0.7个pH单位的pH指示剂。当阳性对照图像与pH介于其转变点和测试指示剂转变点之间的液体接触时，阳性对照图像的颜色变化可告知使用者阳性对照图像中的指示剂处于有功能状态，由此可逻辑外延到意味着两种指示剂都处于有功能状态。阳性对照图像的颜色变化还指示施予器具上的样品量是足够的。优选两种指示剂发生相同的颜色变化。例如，如果测试指示剂的转变点为pH4.7，则阳性对照图像优选具有pH4.0或更低的转变点，最优选为pH3.5或更低。
当pH指示剂层的转变点为4.7时，在阳性对照图像中有用的指示剂的例子为硝嗪黄和溴甲酚绿的混合物。这种混合物中的硝嗪黄和溴甲酚绿的重量比可改变，而不同的比例会产生不同的转变点。然而，通常最佳的结果是在重量比(溴甲酚绿比硝嗪黄)为约0.05-20.0，优选为约0.5-5.0时获得的。
用于测试图像和阳性对照图像中的聚合物和指示剂组合物优选形成均一、透明且透水的固体薄层，且当与水性液体接触时既不溶解也不破裂。出于不同的目的，附加成分可包含在各层中或在形成各层的组合物中。例如，可包括用于在某一表面上涂布或施用片层成分的媒介物，以及干燥剂、渗透剂、用于促进聚合物被样品湿润的试剂和用于促进在基材片表面上沉积混合物或将混合物粘附于其上的试剂。
用作被分析物指示剂层和阳性对照物的支持物的基材片可被配制为能够稳定指示剂并使指示剂易于施用。能达到这些目的的基材片的例子是：用乙基纤维素或类似的涂层涂覆以提高指示剂附着性的聚对苯二酸乙二醇酯薄膜，例如MYLARS(Du Pont de Nemours & Co.，威明顿，特拉华，美国)。该涂层也可含有酸以进一步控制淀积在涂层上的指示剂的pH。在涂层的不同区域可存在不同量的酸，从而对测试指示剂和对照指示剂中各自的pH控制起到协助作用。
虽然本发明的测试和测试器具可用于测试来自任何来源的水性液体，本发明最主要的兴趣在于生物液体，例如尿液、唾液、血液、脑脊液和阴道分泌物。如上所述，对于阴道分泌物本发明应用的最主要例子是用于检测细菌性阴道病。也可为了其它目的用本发明来检测阴道分泌物，例如测试伴随羊膜破裂而发生的pH变化(从4.5上升到7.0或更高)。本发明的兴趣不仅仅在于测试人的液体，还在于检测动物(例如家畜和宠物)的液体。例子是通过确定牛奶的pH是否达到或超过约6.8的阈值来检测奶牛中的乳腺炎胺测试
除了被分析物指示剂和阳性对照层，胺测试还包括可立即进入液体样品的固体的气体释放层，且被分析物指示剂层是不能渗透水性液体样品或其非气体形式的任何组分但可透气的层。该气体释放层是与样品中的铵盐发生反应并将它们转化成挥发性胺的碱性固体层。然后挥发性胺透过可透气被分析物指示剂层，在该指示剂层中挥发性胺导致了指示剂的颜色变化。
术语“挥发性胺”和“被挥发的胺”包括仅轻度挥发性的胺、以及能以较快的速度逸入大气中的高度挥发性的胺。轻度挥发性胺是那些仅在液体表面形成一个气体薄层而没有显著量扩散入大气的胺。然而，该气体薄层足以透过可透气指示剂层。该气体释放层中固体碱的选择并不严格且可变化。通常，可使用碱金属和碱土金属的铝酸盐、碳酸盐和氢氧化物。采用铝酸钠、碳酸钠或氢氧化镁通常可获得最佳的效果。尤为优选的是铝酸钠。
可透气但不透水的层例如可用固化为多孔固体的疏水性聚合物形成。适合的聚合物是那些在水性液体(尤其是阴道分泌物)中不溶的并易于形成薄层、涂层或层的聚合物。这些薄层、涂层或层不会在接触样品时溶解或分散成微粒形式或破裂。这种聚合物的例子是乙基纤维素、醋酸纤维素和硝酸纤维素。尤为优选的是乙基纤维素。或者，指示剂可位于被疏水性透气层覆盖的亲水性透水聚合物中。
可使用暴露于非质子化胺中会发生颜色变化的任何指示剂，并优选在可能呈酸性的液体样品中的胺。溴甲酚绿此类指示剂中的一个例子，且其可同时用于此处和用于pH测试。其它的例子为溴酚蓝、溴甲酚紫、溴氯酚蓝、硝嗪黄和那些上文列出的各种其它指示剂。
气体释放层和透气指示剂层排列于测试器具中，从而使得气体释放层中的碱和透气层中的指示剂可仅在施用液体样品时相互接触。这些层的排列使得使用者可先将样品与气体释放层接触(优选施用药签)，然后再使同一样品接触透气指示剂层，从而样品在接触气体释放层后释放出的气体可透过透气层并由此到达指示剂。
胺测试所用的基材片可与pH测试中使用的相同，尤其是当两者包含于同一测试器具中时。出于与上文对pH测试描述中所揭示的相同原因和要达到的相同效果，可在基材片上施加涂层。
为了进一步保护透气层中的指示剂而不接触液态胺，可在指示剂层上覆盖透气但不透液体的附加层。这一保护或屏障层可由在透气指示剂层中使用的同种聚合物构成。乙基纤维素在此再次成为优选。
胺测试中的阳性对照指示剂是在施予样品后，无论样品中存在挥发性胺与否都会发生颜色变化的任何指示剂。该颜色变化可由于样品中的非挥发性胺或由于气体释放层中的固体碱通过施加物药签被引入样品。固定的基质可为亲水性聚合物，而与上文所述的优选用于pH测试中的聚合物相同的聚合物在此也可使用。可使用与透气指示剂层中使用的指示剂相同的指示剂。施予阳性对照指示剂(该指示剂无论样品中是否含有挥发性胺都会发生颜色变化)的一种方法是将指示剂结合在不仅透气而且可透过液体的基质中，并使该对照指示剂置于不被透气不透液层保护的位置。
虽然本发明涉及广范围的结构和实施方式，可通过对具体实施方式的详尽综述来最好地获得对本发明的根本概念和原则及其新颖性方面的理解。这些在图中有所描述并在下文中进行阐述。
                         附图详述
图1和2描述了包含分离的pH测试区和胺测试区的单个测试器具11。该器具的大小与普通信用卡大小接近(在图中放大以便于说明)，并用层叠塑料制成。图1显示了施加任何样品前的器具，而图2则显示了相继在两个测试区都施加样品后的器具，且两种测试中的测试结构均为阳性。该卡片包括：划定轮廓的椭圆形区域12，其作为在pH测试中施加阴道样品的测试区；第二划定轮廓区域13，其也为椭圆形，并作为在胺测试中施加阴道样品的测试区。在各个测试区中有测试图像14、15和阳性对照图像16、17，测试图像显示为正号，而阳性对照图像显示为圆点，它们都仅在图2中可见。在器具的表面印有多种标记(未标明数字)以指导使用者，标记指示应将样品收集在棉制药签上，然后应将药签先施涂在pH测试区然后施涂在胺测试区。标记还指示药签应以打圈的动作，从各个测试中的测试区边缘开始向中心螺旋式移动。
图3所示为器具的pH测试部分的层叠排列实施例的透视图。在其上施加各层的基底是基材片31，它是由非多孔材料构成的透明固体片，并对于不论是在施加各层时或是在进行测试时与其接触的所有物质都呈化学惰性。通过指示剂层32与透明沟槽层33的组合形成了测试图像，沟槽层仅允许液体从正号形的开口34中通过。颜料层35被施加于基材片31的底面，而当颜料层是与指示剂层32相同的材料时，在颜料层的底面施加透明的聚酰胺层36。在沟槽层34之上施加作为分离层37的阳性对照图像。此外，任选的层包括：并列的涂层38、39，它们都是透明的，覆盖在基材片之上(位于与指示剂层32、沟槽层33和对照图像层37相同的一侧)；以及位于基材片底面的不透明白色层40。涂层38、39是以不同pH的溶液施加的，用来帮助将测试指示剂(指示剂层32)的pH转变点控制在4.7并将对照试剂(阳性对照37)的pH转变点控制在4.0。任选地，如上文所述，可用单个涂层代替图示的38、39两个涂层，优选是与指示剂层32的pH相匹配的单个涂层。沟槽层33、指示剂层32和颜料层35都如图1和2中的椭圆测试区12的形状成形。
图4显示了同一pH测试的另一种排列方式。这种排列不同于图3所示之处在于：图3中填满椭圆形测试区的指示剂层32被更小的、图像形的指示剂层41所替代，且完全去除了沟槽层34。
用于形成图3和图4中所示的不同层的材料的例子如下所述：
基材片31为MYLAR片，厚度为10毫寸(0.001英寸，0.00254厘米)
用于增强对pH转变点控制的38、39各为以15％正丙醇溶液施涂的乙基纤维素，该溶液含有浓度足以使测试图像部分38的溶液pH为2.2并使阳
性对照部分39的溶液pH为4.6的马来酸
附着促进层36是聚酰胺，其以20％聚酰胺的正丙醇醋酸酯和正丙醇(50∶30重量比)混合物溶液的形式施加
指示剂层32、41是黄色、透明的，其各自以以下组合物的溶液形式施加：
25.0％EUDRAGIT RL PO、0.34％硝嗪黄、8.6％山梨醇(70％水溶液)、
10.0％2-乙氧基乙醇、12.4％去离子水和43.66％的1-丙醇
阳性对照层37也是黄色、透明的，其以以下组合物的溶液形式施加：
25.0％EUDRAGIT RL PO、0.17％硝嗪黄、0.30％溴甲酚绿、8.6％山
梨醇(70％水溶液)、30.0％2-乙氧基乙醇、12.4％去离子水、0.65％2-磺基苯甲酸酐(用于防潮)和22.8％的1-丙醇
沟槽层33是透明的乙基纤维素，其以15％乙基纤维素的30％正丙醇溶液的形式施加
颜料层35是惰性黄色油墨，由99.3％Pantone Yellow、0.145％Process Blue、0.29％Black和0.28％Warm Red混合物组成
不透明白色层40是CUSTAGLOSS纯、不透明，白色油墨#1010
在目前优选的实施方式中，各椭圆形测试区为0.391英寸(0.99cm)宽、0.2975英寸(0.756cm)高，测试指示剂(“正”号)为0.17英寸(0.43cm)长、0.0553英寸(0.140cm)宽的条带，阳性对照点的直径为0.075英寸(0.190cm)。
图5所示为器具的胺测试部分层叠排列一个实施例的透视图。其中，在其上施加各层的pH测试部分中的基底是透明固体基材片51，其为对于不论是在施加各层时或是在进行测试时与其接触的所有物质都呈化学惰性的非多孔材料。通过指示剂层52与透明沟槽层53的组合形成了测试图像，沟槽层53具有可通过液体的正号形开口54。位于基材片51底面的是颜料层55，该颜料层施加于透明的聚酰胺层56之上，当颜料层是与指示剂层52相同的材料时，在颜料层的底面施加透明的聚酰胺层56。在沟槽层34之上的是透气不透液层57、阳性对照图像58和气体释放层59。不透明白色层60位于基材片51的底面。透气不透液层57、沟槽层53、指示剂层52和颜料层55都如图1和2中的椭圆测试区13的形状成形。
图6显示了胺测试的另一种结构。和另一pH测试中一样，这一结构中的测试图像由指示剂层单独形成而不是由指示剂层和沟槽层构成。因此，本图与图5中的排列不同之处在于：图5中填满椭圆形测试区的指示剂层52被更小的、图像形的指示剂层61所替代，且去除了沟槽层54。所有其它层都和图5中与其标号相同的相应部分相同。
用于形成图5和6中所示的层的材料的例子如下(所有百分比均为质量百分比)：
基材片51是MYLAR片，厚度为10毫寸(0.001英寸，0.00254厘米)
指示剂层52、61是黄色、透明的，其各自以以下组合物的溶液形式施加：
1.8％溴甲酚绿、12％乙基纤维素和86.2％乙醇沟槽层53是澄清的聚酰胺，其以20％聚酰胺的正丙醇醋酸酯和正丙醇(50∶
30重量比)混合物溶液的形式施加透气层57是无色透明的，并以10％乙基纤维素的正丙醇溶液的形式施加阳性对照层58是黄色、透明的，且以以下组合物的溶液形式施加：
25.0％EUDRAGIT RL PO、0.17％硝嗪黄、0.1％溴甲酚绿、30.0％
2-乙氧基乙醇、6.0％去离子水、36.9％1-丙醇和2.0％2-磺基苯甲酸酐(用于防潮)颜料层55是惰性黄色油墨，由99.3％Pantone Yellow、0.145％Process
Blue、0.29％Black和0.28％Warm Red构成气体释放层59是铝酸钠，其以含有28％铝酸钠、18％聚乙烯、3％麦
芽糖糊精和51％去离子水的溶液形式施用不透明白色层60是CUSTAGLOSS纯、不透明，白色油墨#1010在这一优选实施方式中，正号和阳性对照点的尺寸与在pH测试中所提到的那些相同，外加由含有相对于用120-150毫升0.01 N的盐酸滴定量的铝酸钠的固体碱弧线形成的气体释放层。
通过以下的实施例对本发明进行进一步的说明。
                          实施例1
本实施例说明了存在于基材片底面上的颜料层在降低形成于基材片上表面上的初始测试图像可见性中的益处。“初始”是指对还未经历任何颜色变化的测试器具结构进行观察，该颜色变化是由与被分析物的反应造成的。所使用的器具是如上所述的胺测试器具，测试图像由位于指示剂层之上覆盖整个测试区的沟槽层形成。该沟槽层具有可暴露出部分指示剂层的开口，所暴露出的指示剂层部分具有测试图像的形状。将不含有颜料层55和不透明白色层59的具有图5所示构造物的结构与仅缺少不透明白色层59的结构相比较。因此，两种构造物中的差别在于颜料层55在一种构造物中不存在，而在另一构造物中存在。颜料层中所用的颜料与指示剂层中的指示剂材料相同。
在不施予任何测试样品或被分析物的情况下，对这些构造物进行肉眼检查。因此，该比较是在指示剂发生任何颜色变化之前的基础上进行的。当通过肉眼检查对两种结构物进行比较时，正号层在不含有颜料层的构造物中微弱可见，这一可见性是由沟槽层中的开口边缘造成的。该可见性在含有颜料层的构造物中明显较小。
另外制备了两种构造物，它们都含有颜料层，且都缺少不透明白色层，但一种构造物含有作为外层覆盖于颜料层之上的透明聚酰胺保护层。通过再次肉眼检查来比较未受任何样品或被分析物影响的这两种构造物，结果显示在含有透明保护层的构造物中图像轮廓的可见性更为降低。
                          实施例2
本实施例说明了存在于颜料层下方的透明保护层在降低形成于基材片上表面上的初始测试图像可见性中的益处，该颜料层存在于基材片的底面上。也使用了如上所述的胺测试器具，测试图像由正号形的指示剂层形成。制备了数个具有与图6所示类似结构的构造物，包括具有不透明白色层59的一些构造物和没有不透明白色层59的一些构造物。在这些组中的每个组中包括还含有聚酰胺层或不含有聚酰胺层的构造物。在同时含有不透明白色层和聚酰胺层的构造物中，聚酰胺位于颜料层和不透明白色层之间。如实施例1中一样，在所有例子中用于颜料层的颜料均与用作指示剂层中的指示剂的材料相同。
在不暴露在任何测试样品或被分析物的情况下，对各种构造物进行肉眼检查，结果显示聚酰胺层同时降低了两种情况下(即具有或不具有附加的不透明白色层)正号图像轮廓的可见性。
                          实施例3
本实施例说明了把市售油墨复合物用作颜料层，以取代不发生变化且受保护的指示剂层。市售油墨复合物与指示剂在化学性质上是不同的，并设计为在任何测试条件下暴露于任何测试材料时不会变色。使用市售油墨复合物的优点在于它们可以受控的形式进行配制，从而无需层发生颜色变化就可获得独特的颜色或颜色品质。
本实施例中的实验是采用上文所述的胺实验器具进行的，测试图像则是由正号形指示剂层形成的。采用了相同的试剂和材料，除了颜料层用各种由四种标准原色印刷油墨组成的复合物进行替代，这些原色印刷油墨均可市售获得，并凭经验进行掺混以使其尽可能接近地匹配正号形指示剂层的颜色。四种复合物如下所述(所有百分比均为重量百分比)：
 油墨复合物号     1   2   3     4
 透明白色不透明白色MagentaPantone yellowRubin redBlack     95.6％0.5％0.25％3.65％0％0％   86.8％0.5％0.5％1.20％0％0％   48.4％0％0％51.5％0.18％0％     12.8％0％0％86.1％0.7％0.3％
将各种油墨复合物以两种形式中的一种施加于分离的测试叠层，这两种形式为：第一种如图6所示，将油墨层施加在透明基材片的底面；以及第二种，将油墨层施加在透明基材片的上面并直接位于正号形指示剂层之下。通过将固体三甲胺的盐酸盐以不同浓度溶解在由7％(重量比)丙醇的蒸馏水溶液构成的溶剂体系中制备了测试溶液。使用了1mM和5mM的浓度，并在平行测试中采用了不含三甲胺的溶剂体系作为对照。将测试溶液和对照液施涂于按照两种形式构成的层叠物。
然后，通过肉眼观察确定各层叠物上正号的可见性，即在围绕正号周围的背景中的任何颜色变化。在施涂任何测试溶液或对照液前，在两种形式的所有油墨复合物中，正号的轮廓几乎完全不可见。施予对照液后，除了复合物1号外，所有的油墨复合物中正号的轮廓仍保持几乎完全不可见。施予测试溶液后，第一种形式的层叠物(含有位于指示剂层和油墨复合物之间的透明基材片)所产生的结果要优于第二种形式的层叠物(指示剂层和油墨复合物位于基材片的同一侧)。第二种形式层叠物的油墨复合物显示出微弱的颜色变化，减少了正号与背景间的对比，而在第一种形式的层叠物中未看到此种变化。
                          实施例4
本实施例比较了在本发明的叠层物上用上文所述的优选配方与采用目前销售供医师用的COLORPHASTpH测试条(由EM Science制造，Gibbstown，新泽西，美国USA，currently sold for use by physicians.)所进行的pH测试。测试卡由采用上文所述优选组合物的正号形指示剂层构成，颜料层则为施加在透明基材片底面的市售油墨组合物。该油墨复合物为99.3％Pantone Yellow、0.14％Process Blue、0.28％Black和0.28％Warm Red。测试在472例阴道分泌物样品上进行。
在472例样品中，根据COLORPHAST pH测试条的测试，有232例显示出阴性测试结果(即，pH＜4.7)，而在这些样品中，有185例根据本发明的测试卡的测试也显示阴性结果，或者说一致水平达到79.7％。COLORPHAST pH测试条测得的阳性(pH≥4.7)测试结果数为240例，在这些样品中有185例在本发明的测试元素上测得阳性，或者说一致水平达到91.7％。由此，总精度达86％。
                         实施例5
本实施例采用传统的Amsel指标来核对实施例4进行的测试中不一致的结果。如上文所述，细菌性阴道病(BV)的Amsel指标是以Amsel，R等人的报告(Am.J.Med.74：14-22，1983年)为基础的，它提出了BV诊断中共同获得的4个指标：阴道分泌物样品的pH值的上升(通常为4.5或以上，现在为4.7或以上)、“臭味”测试(whiff test，将样品用碱处理，然后通过嗅觉测试检测胺的气味)、阴道分泌物同质性和线索细胞的存在。根据Amsel指标来检测阳性结果，必须符合pH值的上升，同时还符合其余三项指标中的至少两项。
用其余的三项Amsel指标(臭味测试、阴道分泌物同质性和线索细胞的存在)来测试实施例中不一致的97个样品。用COLORPHAST pH测试条测得的阴性结果而用本发明的测试层叠物测得阳性结果的47例样品中，仅有1例用Amsel指标检测为阳性。用COLORPHAST pH测试条测得的阳性结果而用本发明的叠层物测得阴性结果的20例样品中，有19例用Amsel指标检测为阴性。由此得出阳性结果一致性为99.5％，阴性结果的一致性为81.6％，而总精度达90％。
                          实施例6
本实施例比较了在本发明的叠层物上用上文所述的优选配方进行的胺测试和采用Amsel指标中的“臭味测试”进行的胺测试。该叠层由上文所述优选胺测试组合物的正号形指示剂层构成，颜料层则为施加于透明基材片底面的市售油墨组合物。该油墨复合物为99.3％Pantone Yellow、0.14％Process Blue、0.28％Black和0.28％Warm Red。根据本发明和臭味测试的测试均在464例阴道分泌物样品上进行。
在测试的样品总数中，有157例通过臭味测试显示阳性反应，在这些样品中，用本发明的叠层物则有142例给出阳性结果，表现出90.4％的阳性一致性。在测试的总数中，有307例通过臭味测试给出阴性结果，在这些样品中，用本发明的叠层物有268例也给出阴性结果，表现出87％阴性结果一致性。由此总计得出88.3％的总精度。
                          实施例7
再次使用Amsel指标来核对在实施例6的胺测试中不一致的样品。此处相同的是，如果由于阴道感染而测得胺，则其它三个Amsel指标中的至少2个将为阳性。
对两组测试中不一致的54例胺测试样品进行其余的3项Amsel指标测试。阳性一致性上升至94.2％，阴性一致性则上升至88.7％，总精度达到91％。
                          实施例8
本实施例比较了本发明组合的pH和胺测试(采用前述实施例中的层叠物)和COLORPHAST pH测试和Amsel指标中标准臭味测试的组合的结果。只有当pH和胺测试都给出阳性结果时，才认为采用本发明的层叠物获得的结果是阳性的，其它情况都认为是阴性，即当pH和胺测试两者都给出阴性结果或其一给出阴性结果时。参比测试也指定了同样的方式——当两者均为阳性时为阳性，任何一种测试或两者均为阴性则为阴性。
在464例阴道分泌物样品中，有149例样品用COLORPHAST/臭味测试测得阳性，而有140例使用本发明的层叠物测得阳性。同样，有315例样品用COLORPHAST/臭味测试测得阴性，而有291例用本发明的层叠物测得阴性。仅在33例中发生不一致。由此表现出94.0％的阳性一致性，92.4％的阴性一致性，以及93.0％的总精度。
                          实施例9
和用于pH和胺测试的单独测试元件一样，采用Amsel指标核对本发明组合测试和COLORPHAST/臭味测试的组合测试中的结果偏差，以推定地诊断BV。在24例用COLORPHAST/臭味测试测得阴性的样品中，仅9例根据Amsel指标为临床上的BV阳性。在9例用COLORPHAST/臭味测试测得阳性而用本发明的组合测试测得阴性的样品中，根据Amsel指标有6例为临床上的BV阴性。因此，采用Amsel指标来核对由不同测试中获得的不一致结果，阳性一致性上升至98.0％，阴性一致性上升至95.2％，且总精度上升至96.1％。
                          实施例10
本实施例说明了将本发明的层叠物与两种附加的Amsel指标联合使用来确定BV的存在与否。首先，对研究组中的所有妇女进行全部4种指标的测试：采用COLORPHAST pH测试条来测定pH、用臭味测试来测定胺、用肉眼检查液体的粘着和同质、并显微检查线索细胞的存在。然后在同组妇女中采用同样的4种指标来重复检验，但用本发明的pH和胺测试层叠物替代COLORPHAST和臭味测试。
研究组由取自464名妇女的阴道分泌物样品组成。以使用COLORPHAST和臭味测试获得的Amsel指标结果为基准，妇女中的156名(33.6％)被分类为BV阳性，308名(66.4％)被分类为BV阴性。在156例阳性中，有152例在采用本发明的层叠物时也被分类为阳性(结合对阴道分泌物稠度和线索细胞的存在的测定)。在308例阴性中，有292例在采用本发明的层叠物对指标进行再次测试时也被分类为阴性(结合阴道分泌物稠度和线索细胞的存在)。由此表现出97.4％的阳性一致性，94.8％的阴性一致性和95.6％的总精度。
采用革兰染色测试来核对20例不一致的测试结果，这种染色测试是诊断BV中独立的一种方法，当革兰染色数为7及以上时认为BV阳性。在使用COLORPHAST和臭味测试获得的Amsel指标为BV阴性而采用本发明的层叠物测得的Amsel指标为BV阳性的16例样品中，通过革兰染色测试有7例为临床上的BV阳性。相反的，在使用COLORPHAST和臭味测试获得的Amsel指标结果为BV阳性而采用本发明的层叠物测得BV阴性的4例样品中，通过革兰染色测试无一例为临床上的阴性。由此通过采用革兰染色测试核对不一致结果，灵敏度(阳性测试结果相对于革兰染色测试的阳性测试结果的百分比)仍为97.4％，特异性(阴性测试结果相对于革兰染色测试的阴性测试结果的百分比)上升至97.0％，且总一致性上升至97.2％。
                          实施例11
本实施例说明了在本发明的层叠物上进行的pH和胺测试以其本身作为BV的联合测试指标。与Amsel指标(使用COLORPHAST测试条测试pH，并使用臭味测试来检测胺)进行比较，并用革兰染色测试(革兰染色数为7及以上则仍未BV阳性)来核对层叠物和COLORPHAST/臭味测试中不一致的结果。当一种或两种测试都给出阴性结果，该诊断被仍未是阴性。
在测试的464例阴道样品中，156例(33.6％)通过Amsel指标为阳性，而在这156例中，有142例经本发明的层叠物也测得阳性。通过Amsel指标测为阴性的数量为308例(66.4％)，而在这308例中，有286例使用本发明的层叠物同样测得阴性。由此显示出91.0％的灵敏度，92.9％的特异性，92.2％的总精度。
然后，用革兰染色来核对36例不一致的测试结果。用Amsel指标测为阴性而用本发明的测试测为阳性的22例中，有7例经革兰染色测为BV阳性。用Amsel指标测为阳性而用本发明的测试测为阴性的14例中，无一例经革兰染色测为临床上的BV阴性。
由此，通过采用革兰染色核对不一致的测试结果，有163例样品经革兰核对的Amsel指标测定为BV阳性，在这些样品中，有149例样品经本发明的层叠物测试也为阳性。类似地，有301例样品经革兰核对的Amsel指标测定为阴性，在这些样品中，有286例样品经本发明的层叠物测试也为阴性。由此，灵敏度上升至91.4％，特异性上升至95.0％，且精度上升至93.8％。
                          实施例12
本实施例说明了在本发明的测试卡上进行胺测试，以此作为对线索细胞的测试。在本实施例中使用了与实施例6中所用相同的胺测试材料和层叠结构。与显微检测线索细胞进行了比较，并用革兰染色来核对测试卡结论与显微评估不一致的结果。在对线索细胞的显微检测中，当多于20％的存在于阴道分泌物样品中的阴道表皮细胞由线索细胞构成时，则认为其为阳性。和前述的实施例中一样，在本发明的层叠物上进行的胺测试中，当可见的正号出现时认为其为阳性，正号不出现时则认为其为阴性。
在前述实施例中检测的464例阴道分泌物样品中，有160例经显微观察被认为是线索细胞阳性。在160例线索细胞阳性的这些样品中，有140例经本发明的胺测试也为阳性。经显微检测为线索细胞阴性的样品数为304例，在这些样品中，有263例经本发明的胺测试也为阴性。由此，显示出87.5％的阳性一致性，86.5％的阴性一致性，87％的总精度。
然后通过革兰染色测试对测试结果不一致的61例进行了核对。显微检测呈线索细胞阴性而本发明的胺测试呈阳性的41例样品中，有4例通过革兰染色分析呈临床上的BV阳性。类似地，显微指标呈阳性而本发明的胺测试呈阴性的20例样品中，有6例通过革兰染色分析呈临床上的BV阳性。因此，采用革兰染色核对上述数据后，阳性一致性上升至87.9％，且总精度上升至89％。
                          实施例13
本实施例通过将本发明的胺测试结果与用Amsel指标进行的标准细菌性阴道病测试的结果相比较，说明了本发明的胺测试以其本身用于细菌性阴道病的有效性。代表了本发明的测试材料和构造物与上文中实施例6所用的那些是相同的。代表了本发明的测试和采用Amsel指标的测试的两种测试均在相同的464例阴道分泌物样品上进行。
在测试的总样品数中，有156例样品用Amsel指标测定为阳性，其中的142例经本发明的层叠物测试也为阳性，表现出91.0％的灵敏度。在测试的总数中，有308例样品用臭味测试测定为阴性，在这些样品中，有269例经本发明的层叠物测试也为阴性，表现出87.3％的阴性一致性。总精度为88.6％。由此，表明可以单独的胺测试为基础以高精度诊断细菌性阴道病。
                          实施例14
通过革兰染色测试对上一实施例中不一致的样品进行核对。测试间不一致的胺测试样品的数量为53例，通过革兰染色分析，灵敏度上升至91.4％，特异性上升至89.4％，且总精度上升至90.0％。因此，本发明的胺测试层提供了与用四种Amsel指标的方式确定BV相当的精度。
提供上文的描述主要是为了举例说明。在不脱离本发明的精神和范围下，可以不同的方式对本发明的结构、尺寸、试剂和其它材料、程序步骤和其它参数进行进一步的改良或取代，这一点对于本领域的熟练技术人员而言是显而易见的。

Claims (20)

1.一种测试器具，其用于分析液体样品中是否存在所选被分析物，所述测试器具包括：
透光不透液的基材片，在其一侧涂覆有被分析物指示剂层，在相对一侧涂覆有颜料层，所述被分析物指示剂层与所述被分析物反应，在该反应中所述被分析物指示剂层中产生颜色变化，且当所述被分析物指示剂层处于未反应状态时，所述颜料层与被分析物指示剂层不具有视觉可辨的颜色差异，所述颜料层完全覆盖所述基材片上的所选测试区，和
用来将所述被分析物指示剂层中的所述颜色变化限制在限定区域中的装置，所述限定区域在所述测试区之中并小于所述测试区，从而使得所述测试区中邻接区域不发生变化。
2.如权利要求1所述的测试器具，其特征在于，所述被分析物指示剂层完全覆盖所述所选测试区，且用于限制所述颜色变化的所述装置是放在所述被分析物指示剂层之上的沟槽层，所述沟槽层具有暴露出所述被分析物指示剂层的所述限定区域的开口。
3.如权利要求1所述的测试器具，其特征在于，用于限制所述颜色变化的所述装置是仅施加在所述限定区域的所述被分析物指示剂层，所述邻接区域中没有所述被分析物指示剂层。
4.如权利要求2所述的测试器具，其特征在于，所述沟槽层是透明的。
5.如权利要求1所述的测试器具，其特征在于，所述基材片是透明的。
6.如权利要求1所述的测试器具，其特征在于，所述颜料层与所述被分析物是不反应的。
7.如权利要求1所述的测试器具，其特征在于，所述限定区域的形状是正号，且围绕所述正号的所述邻接区域接触正号的所有边界。
8.如权利要求1所述的测试器具，其特征在于，其还包括对照指示剂层，不论所述样品中是否存在所述被分析物，所述对照指示剂层与所述样品反应，在该反应中所述对照指示剂层中产生颜色变化，以及用来将所述对照指示剂层中的所述颜色变化限制在限定区域中的装置，该限定区域与所述被分析物指示剂层中的所述颜色变化的所述限定区域分离开。
9.如权利要求1所述的测试器具，其特征在于，所述颜料层与基材片相对的一侧涂覆有不透明白色层。
10.如权利要求1所述的测试器具，其特征在于，所述被分析物指示剂层是浸渍有化合物的亲水性可透过液体的聚合物，所述化合物包含可电离的酚基团和带负电荷的基团，所述聚合物含有足量的季铵基以在用水性液体样品湿润聚合物时将所述化合物抗扩散地固定住，并使得所述反应在等于或大于转变点时发生，所述转变点的范围为4.6-4.8。
11.如权利要求10所述的测试器具，其特征在于，所述化合物为选自下组的一员：溴酚蓝、溴氯酚蓝、溴甲酚绿、溴甲酚紫、溴百里酚蓝、亮黄和硝嗪黄，且所述季铵基是三-(C1-C4烷基)铵基。
12.如权利要求10所述的测试器具，其特征在于，所述化合物是硝嗪黄，且所述季铵基是三甲基铵基。
13.如权利要求1所述的测试器具，其特征在于，所述被分析物指示剂层是透气但不透水性液体、并用与胺接触时会发生颜色变化的化合物浸渍的材料基质，且所述测试器具还包含一层固体碱。
14.如权利要求13所述的测试器具，其特征在于，所述化合物是选自下组的一员：溴甲酚绿、溴酚蓝、溴甲酚紫、溴氯酚蓝和硝嗪黄。
15.一种通过分析病人阴道分泌物样品鉴定细菌性阴道病病情的方法，所述方法包括将所述样品施涂于固体碱和透气但不透水性液体的材料的透气指示剂层，所述透气指示剂层用与胺接触时发生可检测转变的指示剂浸渍，使所述胺渗透入相关连的所述透气指示剂层中，所述方法不用再分析所述样品的pH或分析所述样品中线索细胞的存在。
16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述指示剂是与气态胺接触时发生颜色变化的可见指示剂。
17.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述指示剂是溴甲酚绿。
18.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述固体碱是选自下组中的一员：碱金属和碱土金属的铝酸盐、碳酸盐和氢氧化物。
19.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述固体碱是选自下组中的一员：铝酸钠、碳酸钠和氢氧化镁。
20.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述透气但不透过水性液体的材料是乙基纤维素。
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Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

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