CN1827134A - 治疗急性支气管炎的急支泡腾片及制备方法和质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种治疗急性支气管炎的急支泡腾片及制备方法和质量控制方法，它是用鱼腥草、金荞麦、四季青、麻黄、紫菀、前胡、枳壳、甘草和适量辅料制备而成的；与现有技术相比，本发明泡腾片具有溶解快，生物利用度高，稳定性好的优点，而且携带和服用方便；其毒性低，使用安全，疗效显著，还能提高患者依从性，方便患者用药。此外，本发明质量控制方法精密度高，重现性好，可操作性强，回收率高，能有效保证该制剂的临床疗效。

Description

治疗急性支气管炎的急支泡腾片及制备方法和质量控制方法

技术领域：本发明涉及一种治疗急性支气管炎的急支泡腾片及制备方法和质量控制方法，属于中药技术领域。

背景技术：急性支气管炎属于中医“肺咳-暴咳”之范畴。其病位在肺，其发病以风邪为先导，或夹寒、或夹热，或夹燥。风邪犯肺，肺失宣疏，津液失于输布而成痰，风痰阻肺，肺气上逆而致咳嗽。治宜疏风祛邪，理肺止咳，佐以化痰。呼吸道感染则为细菌或病毒感染，常伴有咳嗽、咳痰、哮喘，治疗应以抗感染为主，辅以止咳化痰药物。急支类制剂由鱼腥草、四季青、麻黄、前胡、枳壳等中药组成，具有消炎、止咳、化痰等作用，临床用于急性支气管炎、感冒后咳嗽及慢性支气管炎急性发作有明显的疗效，优于其它化痰止咳类药物，副作用少，但目前尚未有泡腾片供应；因此，将现有急支颗粒改剂为泡腾片，能显著提高其生物利用度，更好的提高患者依从性，方便患者用药。另外，为全面考察和控制本发明制剂的质量，保证其临床疗效，需要制定合理而稳定的质量控制方法。

发明内容：

本发明的目的在于：提供一种治疗急性支气管炎的急支泡腾片及制备方法和质量控制方法，本发明在现有技术的基础上，提供了一种溶解快、生物利用度高、稳定性好，且服用方便的新型制剂-泡腾片，并研究制订了更为科学合理的制备工艺和质量控制方法，以有效地控制和提高产品质量，从而确保其临床疗效。

本发明是这样构成的：它是用鱼腥草900g、金荞麦900g、四季青900g、麻黄180g、紫菀450g、前胡270g、枳壳270g、甘草90g和微晶纤维素170g、低取代羟丙基纤维素100g、微粉硅胶100g、交联聚乙烯吡咯烷酮250g、碳酸氢钠350g、枸橼酸255g、富马酸145g、阿司帕坦10g制备而成的。

本发明所述泡腾片的制备方法为：取鱼腥草、枳壳加4倍量水提取挥发油4小时，蒸馏后的水溶液滤过，滤液与挥发油分别另器收集，金荞麦、四季青、麻黄、紫菀、前胡和甘草六味加10倍量水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至60℃相对密度为1.30的稠膏，80℃减压干燥，粉碎，过80目筛；与微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、微粉硅胶、交联聚乙烯吡咯烷酮、阿司帕坦、碳酸氢钠、枸橼酸、富马酸混合均匀，加入挥发油密闭，压片，包装即得。

泡腾片的质量控制方法为：所述质量控制方法主要包括性状、鉴别、检查以及含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括对制剂中麻黄和枳壳的薄层色谱鉴别；含量测定是对制剂中总黄酮的含量测定。

麻黄的鉴别方法是以盐酸麻黄碱对照品为对照，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1为展开剂的薄层色谱法；枳壳的鉴别方法是以柚皮苷对照品为对照，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下层溶液为展开剂的薄层色谱法。

具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部：

(1)取本制剂2片，研细，加水30ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用20％氢氧化钠溶液调节pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加3→10盐酸乙醇溶液5ml溶解，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(2)取本制剂3片，研细，加水20ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用乙醚振摇提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铝甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

总黄酮的含量测定方法是以芦丁对照品为对照的紫外分光光度法。

具体的含量测定方法为：

对照品溶液的制备  精密称取120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；

标准曲线的制备  精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化铝溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸钾缓冲液3ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，以相应试剂为空白，照中国药典2005年版一部附录V分光光度法，在272nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂，研成细粉，取细粉约1.5g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，残渣加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，合并滤液，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加0.1mol/L三氯化铝溶液3ml”起，依法测定吸收度；从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量，计算，即得；

本制剂每片含总黄酮以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于10mg。

本发明所述质量控制方法包括：

性状：药物为淡棕色至棕色片；气香，味甜、微苦；

鉴别：(1)取本制剂2片，研细，加水30ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用20％氢氧化钠溶液调节pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加3→10盐酸乙醇溶液5ml溶解，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(2)取本制剂3片，研细，加水20ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用乙醚振摇提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铝甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录ID片剂项下有关的各项规定；

含量测定：对照品溶液的制备精密称取120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；

标准曲线的制备  精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化铝溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸钾缓冲液3ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，以相应试剂为空白，照中国药典2005年版一部附录V分光光度法，在272nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂，研成细粉，取细粉约1.5g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，残渣加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，合并滤液，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加0.1mol/L三氯化铝溶液3ml”起，依法测定吸收度；从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量，计算，即得；

本制剂每片含总黄酮以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于10mg。

急性支气管炎基本病机是风邪犯肺，肺失宣疏，津液失于输布而成痰，风痰阻肺，肺气上逆而致咳嗽。治宜疏风祛邪，理肺止咳，佐以化痰。呼吸道感染则为细菌或病毒感染，常伴有咳嗽、咳痰、哮喘，治疗应以抗感染为主，辅以止咳化痰药物。本方中鱼腥草与四季青清热解毒，对各种细菌有抑制作用和一定抗病毒作用。金荞麦清热解毒，清肺化痰，利咽，用于肺热咳嗽，咽喉肿痛等。麻黄发汗解表、宣肺平喘，用于外感风寒表实证、咳嗽气喘等。紫菀化痰止咳，用于咳嗽气逆，痰吐不爽，肺虚久咳，痰中带血。前胡散风清热，降气化痰；用于风热咳嗽痰多，痰热喘满，咯痰黄稠。枳壳能下气化痰，有较强的抗过敏活性。甘草具补脾、润肺、解毒、调和诸药的功能，主治咳嗽、支气管炎等。诸药合用，共奏化痰止咳之功效，具有抗炎、镇咳、祛痰等作用，对治疗急慢性支气管炎及所引起的咳嗽、多痰等症状疗效显著。

与现有技术相比，本发明泡腾片具有溶解快，生物利用度高，稳定性好的优点，而且携带和服用方便，尤其适用于儿童、老年人和不易吞服固体制剂的人群使用；其毒性低，使用安全，具有抗炎、镇咳、祛痰等作用，对治疗急慢性支气管炎及所引起的咳嗽、多痰等症状疗效显著，还能提高患者依从性，方便患者用药。此外，本发明质量控制方法精密度高，重现性好，可操作性强，回收率高，能有效保证该制剂的临床疗效。

申请人进行了一系列试验来选择本发明药物制剂的制备工艺和质量控制方法，以保证其科学、合理、可行，并具有良好的治疗效果。

一、制备工艺研究

1.挥发油提取时间的确定

试验方法：取一个处方量鱼腥草及枳壳，提取挥发油，提取时间分别为3小时、4小时、5小时，比较其出油率，确定最佳挥发油提取时间，试验结果如下：

提取时间(小时)	挥发油量(ml)	出油率(％，ml/g)
			3	3.8	0.32

4	4.9	0.42
			5	5.0	0.43

试验结果表明，挥发油提取时间为4小时，其生药材中的挥发油已基本提取完全，因此确定挥发油提取时间为4小时。

2.提取加水量的确定

试验方法：取一个处方量的药材，分别加12倍、10倍、8倍、6倍量的水提取，以出膏量(干膏)作评价指标，确定最佳提取加水量，试验结果如下：

提取加水量(倍)	出膏量(g)
		12	235
10	230
		8	206
6	172

试验果表明，采用加10倍量水提取时较为适宜，其出膏量明显高于加8倍量及6倍量时的出膏量，与加12倍量水提取时出膏量无明显差别，因此提取加水量确定为10倍量。

3.制剂处方工艺筛选

组成	处方1	处方2	处方3	处方4
					急支干浸膏粉(g)	一个处方量	一个处方量	一个处方量	一个处方量
糊精(g)	200g	-	-	-
					甘露醇(g)	-	-	-	-
微晶纤维素(g)	-	200	300	170
					交联聚乙烯吡咯烷酮(g)	100	-	-	250
低取代羟丙基纤维素(g)	50	150	100	100
					微粉硅胶(g)	50	150	100	100
阿司帕坦(g)	10	-	-	10
					碳酸氢钠(g)	465	400	425	350
枸橼酸(g)	380	300	320	255
					富马酸(g)	210	200	270	145

结果：

处方一在压片过程中稍有粘冲现象；

处方二所得片子片面光滑，但崩解不合格，有时会产生粘冲现象，口味较差；

处方三所得片子片面光滑，但崩解不合格，口味较差；

处方四所得片子片面光滑，崩解合格，口味适宜。

最终确定急支泡腾片处方及制备工艺如下：

干浸膏粉(一个处方药材所提)

微晶纤维素                  170g

交联聚乙烯吡咯烷酮          250g

低取代羟丙基纤维素          100g

微粉硅胶                    100g

碳酸氢钠                    350g

枸橼酸                      255g

富马酸                      145g

阿司帕坦                    10g

共制成1000片，每片重1.60g。

制备工艺：取处方量的干浸膏粉，与低取代羟丙基纤维素、微粉硅胶、交联聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、碳酸氢钠、富马酸、枸橼酸及阿司帕坦混合均匀，加入挥发油，密闭，压片，包装，即得。

4.三批中试产品的试验结果

批号	050501	050502	050503
				生药材投入量(kg)	39.60	39.60	39.60
提取挥发油药材投入料(kg)	11.70	11.70	11.70
				挥发油量(ml)	48.1	49.5	47.3
出油率(％ml/g)	0.41	0.42	0.40
				水提取药材投入量(kg)	27.90	27.90	27.90
浸膏量(kg)	6.28	6.17	6.39
				出膏率(％)	22.51	22.11	22.90
碳酸氢钠(kg)	3.50	3.50	3.50
				微晶纤维素(kg)	1.70	1.70	1.70
低取代羟丙纤维素(kg)	1.00	1.00	1.00
				交联聚乙烯吡咯烷酮(kg)	2.50	2.50	2.50
阿司帕坦(kg)	0.10	0.10	0.10

微粉硅胶(kg)	1.00	1.00	1.00
				枸橼酸(kg)	2.55	2.55	2.55
富马酸(kg)	1.45	1.45	1.45
				理论产量(片)	10000	10000	10000
实际产量(片)	8580	8412	8688
				成品率(％)	85.80	84.12	86.88

结论：本制剂三批中试产品试制结果表明，其工艺合理、稳定，成品收得率较高，所得成品经质量检验，结果表明均符合规定。

二、本产品的毒理试验

小鼠20只，以本产品2片冲水溶解之后0.88g生药/ml灌胃，耐受最大浓度为0.4ml/10g，ig给药，每隔4h给药1次，1天内共4次。给药后连续观察7天，未见小鼠死亡，未见小鼠外观、活动、饮食、体重等出现异常反应。

此时小鼠灌胃的1日最大耐受量为140.8g/kg.此剂量相当于人临床1日口服量的320倍，表明该药毒性较小。

本产品由麻黄、前胡、紫菀等八味中药组成，方中无毒性药材，经查阅相关文献未见该药的毒副作用与明显不良反应的报道。

三、本产品的药效学研究

药效学试验的结果如下：

1、抗炎作用：本产品对巴豆油所致的小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用，说明该药对炎症早期的血管通透性增加、渗出和水肿有显著的抑制作用。

2、镇咳作用：本产品对小鼠氨水引咳有明显的镇咳作用。

3、祛痰作用：祛痰实验(酚红法)也显示本产品具有较显著的祛痰作用，其镇咳祛痰作用均显示一定的量效关系。

四、质量控制方法研究

(一)样品及对照品来源

样品：本申请人自制，批号为：050501、050502、050503。

对照品来源：芦丁对照品来源于中国药品生物制品检定所，批号：0080-9705。

盐酸麻黄碱对照品来源于中国药品生物制品检定所，批号：171242-200404。

柚皮苷对照品来源于中国药品生物制品检定所，批号：110722-200309。

(二)性状

本制剂为中药浸膏粉加适量辅料，混合压片而成，经多批样品试制，确定本制剂性状为：药物为淡棕色至棕色片；气香，味甜、微苦。

(三)鉴别

国家药品监督管理局新药转正标准第二十一册收载的急支颗粒质量标准鉴别项制订了麻黄、枳壳两味药材的定性鉴别。本发明用薄层的方法对本制剂主药麻黄、枳壳进行鉴别。

1、麻黄的薄层鉴别

(1)取本制剂2片，研细，加水30ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用20％氢氧化钠溶液调节pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加盐酸乙醇溶液(3→10)5ml溶解，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(8∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(2)点样量的选择

经实验选择供试品溶液与对照品溶液各点样5μl与供试品溶液点样10μl、对照品溶液点样5μl，结果发现供试品溶液点样10μl、对照品溶液点样5μl时斑点较好，较为清晰。故本标准将供试品溶液点样10μl、对照品溶液点样5μl作为点样量。

(3)专属性实验

取缺麻黄的阴性样品约1.1g，同供试品法操作制成阴性供试品溶液，展开后在对照品处无相应斑点，说明阴性样品对本实验无干扰。

2、枳壳的薄层鉴别

(1)取本制剂3片，研细，加水20ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用乙醚振摇提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(32∶17∶5)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铝甲醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

(2)点样量的选择

经实验选择供试品溶液与对照品溶液各点样2μl、5μl和对照品溶液点样5μl、供试品溶液点样10μl，结果发现供试品溶液与对照品溶液各点样5μl时斑点较好，较为清晰。故本标准对照品溶液与供试品溶液选用5μl作为点样量。

(3)专属性实验

取缺枳壳的阴性样品约1.0g，同上法操作制成阴性供试品溶液，展开后在对照品处无相应斑点，说明阴性样品对本实验无干扰。

(四)检查

1、崩解时限

(1)选择依据

本品为泡腾片剂，根据中国药典2000年版一部附录X IIA项下关于泡腾片剂的相关描述进行崩解时限检测。

(2)检测方法

取本制剂1片，置盛有200ml25℃水的250ml烧杯中，有许多气泡放出，当气泡停止逸出时，片剂完全分散在水中，无聚集的颗粒剩余。取本制剂6片，同法测定，各片均应在5分钟内崩解完毕。

(3)检测结果

       表1崩解时限检查结果

批号	050501	050502	050503
				崩解时限	4分	4分	4分

2、砷盐  按中国药典2000年版一部附录IX F砷盐检查法第一法进行检查，结果符合规定。

          表2砷盐测定结果

批号	050501	050502	050503
				砷盐	＜5ppm	＜5ppm	＜5ppm

3、重金属  按中国药典2000年版一部附录IX E重金属检查法第二法进行检查，结果符合规定。

          表3重金属测定结果

批号	050501	050502	050503
				重金属	＜10ppm	＜10ppm	＜10ppm

4、片重差异

本制剂片重大于0.3g，按2000年版中国药典一部规定片重差异应在±5％以内。取本制剂三批样品20片检查，结果见下表4。

                    表4片重差异检查结果

本制剂三批样品测定结果表明，片重差异均在规定范围之内。

5、微生物限度

照微生物限度检查法(中国药典2000年版一部附录XIII)检查，三批样品的检查结果见下表。

            表5微生物限度检查结果

批号	050501	050502	050503
				细菌数(个/g)	符合规定	符合规定	符合规定
霉菌数(个/g)	符合规定	符合规定	符合规定
				大肠杆菌(个/g)	未检出	未检出	未检出
活螨(个/g)	未检出	未检出	未检出

(五)含量测定

对照品溶液的制备  精密称取120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml含无水芦丁0.1mg)。

标准曲线的制备  精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化铝溶液3ml、醋酸-醋酸钾缓冲液(pH5.5)3ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，以相应试剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录V)，在272nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

测定法  取本制剂，研成细粉，取细粉约1.5g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，残渣加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，合并滤液，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。精密量取2ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加0.1mol/L三氯化铝溶液3ml”起，依法测定吸收度。从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量，计算，即得。

本品每片含总黄酮以芦丁(C₂₇H₃₀O₁₆)计，不得少于10mg。

1、方法

(1)仪器与试药：

紫外分光光度计756MC(上每第三分析仪器厂)。

芦丁对照品来源于中国药品生物制品检定所，批号：0080-9705。

水为重蒸馏水。

供试品(急支泡腾片)批号：050501、050502、050503。

(2)检测波长的选择：

量取芦丁对照品溶液在紫外分光光度计上测定紫外光谱图，在400～200nm波长范围内扫描，结果在272nm波长处有最大吸收峰，故选择272nm作为检测波长。

(3)对照品溶液的制备：

精密称取120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml含无水芦丁0.1mg)。

2、提取条件的选择：

(1)提取溶剂的比较

取本制剂，研成细粉，取细粉约1.5g，精密称定，加甲醇50ml超声处理30分钟，滤过，残渣加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，合并滤液，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。精密量取2ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加0.1mol/L三氯化铝溶液3ml”起，依法测定吸收度。从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量，计算，即得。另一份以乙醇作为提取溶剂，同法配制。

表6提取溶剂的比较结果

溶媒	含量(mg/g)
		甲醇	10.91
乙醇	6.66

结果显示，以甲醇提取比乙醇作为溶剂提取效率更高。因此选用甲醇作为提取溶剂。

(2)提取方法选择：

照供试品溶液配制方法，一份超声1小时另一份回流提取1小时，结果见下表。

表7提取方法的比较结果

方法	含量(mg/g)
		超声	10.91
回流	10.74

结果显示超声提取的含量较高，因此选用超声作为提取方法。

(3)提取次数选择：

照供试品溶液配制方法，一份超声30分钟一次，残渣未超声；另一份超声30分钟，残渣再超声30分钟。结果见下表。

表8提取次数的比较结果

时间(min)	含量(mg/g)
		超声30分一次	10.10
超声30分二次	10.91

结果显示超声30分二次可以提取完全。

3、标准曲线的绘制

精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化铝溶液3ml、醋酸-醋酸钾缓冲液(pH5.5)3ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，以相应试剂为空白，照分光光度法(中国药典2000年版一部附录V)，在272nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。回归方程为：Y＝0.0107+0.0407X，r＝0.9998测定结果见下表。

                             表9线性考察

浓度(μg/ml)	4.002	8.004	12.006	16.008	20.01
						吸收度	0.168	0.340	0.505	0.663	0.821

结果表明芦丁对照品在4.002μg/ml～20.01μg/ml范围内吸收度与浓度具有良好的线性关系。

4、精密度试验：取本制剂(批号：050501)按上法配制供试品溶液，重复测定5次，结果RSD为0.15％(n＝5)，结果见下表。

                      表10精密度试验结果

编号	1	2	3	4	5
						吸收度	0.564	0.565	0.564	0.565	0.566
平均吸收度	0.565
						RSD(％)	0.15

5、重现性试验

按供试品配制方法配制5份供试品，分别测定每份样品含量，结果平均含量为10.98mg/g，RSD为0.88％(n＝5)，结果见下表。

                             表11重现性试验结果

编号	1	2	3	4	5
						含量(mg/g)	11.07	10.99	10.85	10.93	11.08
平均含量(mg/g)	10.98
						RSD(％)	0.88

6、回收率试验

精密称取一已知含量的供试品(批号：050501)，分别添加芦丁对照品(浓度为8.088mg/ml)1ml，按上述的方法制成供试品溶液，依法进行测定，计算回收率，测定结果见下表。

                               表12回收率试验结果

次数	样品原有量(mg)	标样添入量(mg)	实测量(mg)	回收量(mg)	回收率(％)
						1	8.2635	8.088	16.3026	8.2146	99.41
2	8.2427	8.088	16.2548	8.1668	99.08
						3	8.2471	8.088	16.2713	8.1833	99.23
4	8.2381	8.088	16.2625	8.1745	99.23
						5	8.2449	8.088	16.3057	8.2177	99.67
平均回收率(％)		99.32
						RSD(％)		0.23

7、稳定性试验

取供试品溶液一份，每隔一定时间测定，测得吸收度如下表，结果表明，供试品溶液在室温下放置24小时内稳定。测定结果见下表。

                       表13稳定性试验结果

时间	0hr	6hr	12hr	18hr	24hr
						0.15	0.565	0.564	0.563	0.563	0.562
平均吸收度	0.563
						RSD(％)	0.20

8、样品的测定及含量限度的确定

按供试品溶液的配制方法，对十批样品进行含量测定，以确定其含量限度，十批样品的含量测定结果见下表。

                    表14含量测定结果

测试药品	十批产品
				样品批号	050401	050402	050403
含量(mg/片)	14.50	14.52	15.04
				样品批号	050404	050405	050406
含量(mg/片)	15.17	14.99	15.12
				样品批号	050407	-	-
含量(mg/片)	15.42	-	-
				样品批号	050501	050502	050503
含量(mg/片)	18.23	16.91	16.47

最后确定其含量限度为10mg/片，应符合规定。

具体实施方式：

本发明的实施例1：鱼腥草900g、金荞麦900g、四季青900g、麻黄180g、紫菀450g、前胡270g、枳壳270g、甘草90g和微晶纤维素170g、低取代羟丙基纤维素100g、微粉硅胶100g、交联聚乙烯吡咯烷酮250g、碳酸氢钠350g、枸橼酸255g、富马酸145g、阿司帕坦10g

取鱼腥草、枳壳加4倍量水提取挥发油4小时，蒸馏后的水溶液滤过，滤液与挥发油分别另器收集，金荞麦、四季青、麻黄、紫菀、前胡和甘草六味加10倍量水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至60℃相对密度为1.30的稠膏，80℃减压干燥，粉碎，过80目筛；与微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、微粉硅胶、交联聚乙烯吡咯烷酮、阿司帕坦、碳酸氢钠、枸橼酸、富马酸混合均匀，加入挥发油密闭，压制成1000片，包装即得。本产品溶于适量水后口服，一次4片，一日3～4次；小儿酌减。

本发明的实施例2：所述质量控制方法包括以下内容：

性状：药物为淡棕色至棕色片；气香，味甜、微苦；

鉴别：(1)取本制剂2片，研细，加水30ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用20％氢氧化钠溶液调节pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加3→10盐酸乙醇溶液5ml溶解，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(2)取本制剂3片，研细，加水20ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用乙醚振摇提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铝甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录ID片剂项下有关的各项规定；

含量测定：对照品溶液的制备精密称取120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；

标准曲线的制备精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化铝溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸钾缓冲液3ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，以相应试剂为空白，照中国药典2005年版一部附录V分光光度法，在272nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法取本制剂，研成细粉，取细粉约1.5g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，残渣加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，合并滤液，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加0.1mol/L三氯化铝溶液3ml”起，依法测定吸收度；从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量，计算，即得；

本制剂每片含总黄酮以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于10mg。

本发明的实施例3：质量控制方法可以包括以下内容：

性状：药物为淡棕色至棕色片；气香，味甜、微苦；

鉴别：取本制剂2片，研细，加水30ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用20％氢氧化钠溶液调节pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加3→10盐酸乙醇溶液5ml溶解，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

含量测定：对照品溶液的制备  精密称取120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；

标准曲线的制备  精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化铝溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸钾缓冲液3ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，以相应试剂为空白，照中国药典2005年版一部附录V分光光度法，在272nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂，研成细粉，取细粉约1.5g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，残渣加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，合并滤液，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加0.1mol/L三氯化铝溶液3ml”起，依法测定吸收度；从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量，计算，即得；

本制剂每片含总黄酮以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于10mg。

本发明的实施例4：质量控制方法可以包括以下内容：

性状：药物为淡棕色至棕色片；气香，味甜、微苦；

鉴别：取本制剂3片，研细，加水20ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用乙醚振摇提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铝甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录ID片剂项下有关的各项规定。

本发明的实施例5：质量控制方法可以包括以下内容：

性状：药物为淡棕色至棕色片；气香，味甜、微苦；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录ID片剂项下有关的各项规定；

含量测定：对照品溶液的制备  精密称取120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；

标准曲线的制备  精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化铝溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸钾缓冲液3ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，以相应试剂为空白，照中国药典2005年版一部附录V分光光度法，在272nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂，研成细粉，取细粉约1.5g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，残渣加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，合并滤液，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加0.1mol/L三氯化铝溶液3ml”起，依法测定吸收度；从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量，计算，即得；

本制剂每片含总黄酮以芦丁C₂₇H₃₀O₁₆计，不得少于10mg。

Claims (8)

1.一种治疗急性支气管炎的急支泡腾片，其特征在于：它是用鱼腥草900g、金荞麦900g、四季青900g、麻黄180g、紫菀450g、前胡270g、枳壳270g、甘草90g和微晶纤维素170g、低取代羟丙基纤维素100g、微粉硅胶100g、交联聚乙烯吡咯烷酮250g、碳酸氢钠350g、枸橼酸255g、富马酸145g和阿司帕坦10g制备而成的。

2.如权利要求1所述治疗急性支气管炎的急支泡腾片的制备方法，其特征在于：取鱼腥草、枳壳加4倍量水提取挥发油4小时，蒸馏后的水溶液滤过，滤液与挥发油分别另器收集，金荞麦、四季青、麻黄、紫苑、前胡和甘草六味加10倍量水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至60℃相对密度为1.30的稠膏，80℃减压干燥，粉碎，过80目筛；与微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、微粉硅胶、交联聚乙烯吡咯烷酮、阿司帕坦、碳酸氢钠、枸橼酸、富马酸混合均匀，加入挥发油密闭，压片，包装即得。

3.如权利要求1或2所述治疗急性支气管炎的急支泡腾片的质量控制方法，其特征在于：所述质量控制方法主要包括性状、鉴别、检查以及含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括对制剂中麻黄和枳壳的薄层色谱鉴别；含量测定是对制剂中总黄酮的含量测定。

4.按照权利要求3所述治疗急性支气管炎的急支泡腾片的质量控制方法，其特征在于：麻黄的鉴别方法是以盐酸麻黄碱对照品为对照，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1为展开剂的薄层色谱法；枳壳的鉴别方法是以柚皮苷对照品为对照，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下层溶液为展开剂的薄层色谱法。

5.按照权利要求3或4所述治疗急性支气管炎的急支泡腾片的质量控制方法，其特征在于：具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部：

(1)取本制剂2片，研细，加水30ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用20％氢氧化钠溶液调节pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加3→10盐酸乙醇溶液5ml溶解，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(2)取本制剂3片，研细，加水20ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用乙醚振摇提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铝甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

6.按照权利要求3所述治疗急性支气管炎的急支泡腾片的质量控制方法，其特征在于：总黄酮的含量测定方法是以芦丁对照品为对照的紫外分光光度法。

7.按照权利要求3或6所述治疗急性支气管炎的急支泡腾片的质量控制方法，其特征在于：具体的含量测定方法为：

对照品溶液的制备  精密称取120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；

标准曲线的制备  精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化铝溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸钾缓冲液3ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，以相应试剂为空白，照中国药典2005年版一部附录V分光光度法，在272nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂，研成细粉，取细粉约1.5g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，残渣加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，合并滤液，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加0.1mol/L三氯化铝溶液3ml”起，依法测定吸收度；从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量，计算，即得；

本制剂每片含总黄酮以芦丁C27H30016计，不得少于10mg。

8.按照权利要求3所述治疗急性支气管炎的急支泡腾片的质量控制方法，其特征在于：所述质量控制方法包括：

性状：药物为淡棕色至棕色片；气香，味甜、微苦；

鉴别：(1)取本制剂2片，研细，加水30ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用20％氢氧化钠溶液调节pH值10～12，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，每次15ml，合并乙醚液，水浴蒸干，残渣加3→10盐酸乙醇溶液5ml溶解，水浴蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶冰醋酸∶水＝8∶2∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％茚三酮乙醇溶液，于105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

(2)取本制剂3片，研细，加水20ml，微热使发泡完全后冷至室温，过滤，滤液用乙醚振摇提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，水溶液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯提取液，置水浴上蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝32∶17∶5的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铝甲醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

检查：应符合中国药典2005年版一部附录ID片剂项下有关的各项规定；

含量测定：对照品溶液的制备  精密称取120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；

标准曲线的制备  精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置25ml量瓶中，各加入0.1mol/L三氯化铝溶液3ml、pH5.5的醋酸-醋酸钾缓冲液3ml，加水稀释至刻度，摇匀，放置30分钟，以相应试剂为空白，照中国药典2005年版一部附录V分光光度法，在272nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法  取本制剂，研成细粉，取细粉约1.5g，精密称定，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，残渣加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，合并滤液，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取2ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加0.1mol/L三氯化铝溶液3ml”起，依法测定吸收度；从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量，计算，即得；

本制剂每片含总黄酮以芦丁C27H30016计，不得少于10mg。