CN1814625A - 一种壳聚糖钙的制备方法及其在创伤止血中的应用 - Google Patents
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Abstract
一种壳聚糖钙的制备方法,其特征是将壳聚糖与氯化钙或醋酸钙或葡萄糖酸钙或乳酸钙或苹果酸钙或柠檬酸苹果酸钙的粉状固体混合,或使壳聚糖与氯化钙或醋酸钙或葡萄糖酸钙或乳酸钙或苹果酸钙或柠檬酸苹果酸钙的水溶液反应,经过滤、洗涤、脱水、干燥、粉碎、灭菌,制得壳聚糖钙。按本发明的方法制备的壳聚糖钙是一种新型止血剂,能够通过多种途径起到止血作用,包括作用于血液中的红细胞,抑制体内溶解纤维蛋白,激活凝血酶,从而起到止血作用,能明显地缩短凝血时间,同时该壳聚糖钙还具有抑菌、抗菌、镇痛、促进创伤愈合的作用,并且制备方法简单,使用方便。
Description
技术领域
本发明涉及一种壳聚糖钙的制备方法,并将其用于创伤或手术止血。
背景技术
壳聚糖是一种天然高分子聚阳离子多糖,生物相容性好,无免疫原性,无毒副作用,同时具有止血、抗菌、抗感染作用,并能促进创伤愈合,这些都赋予了壳聚糖用作止血敷料或止血剂的良好性能。以壳聚糖为原料之一制备创伤止血材料已有报道,主要是以壳聚糖或壳聚糖衍生物与其它材料复合,制成止血海绵或止血膜。这些相关壳聚糖止血材料的报道中制备工艺复杂。
发明内容
本发明的目的是提供一种止血剂壳聚糖钙的制备方法和该止血剂在创伤或手术止血中的应用,以提高止血效果,缩短凝血时间,同时发挥该止血剂的抑菌、抗菌、镇痛、促进创伤愈合的作用,以期作为一种新型止血敷料或止血剂或止血药物进行开发。
一种壳聚糖钙的制备方法,其特征是将壳聚糖与氯化钙或醋酸钙或葡萄糖酸钙或乳酸钙或苹果酸钙或柠檬酸苹果酸钙的粉状固体混合,或使壳聚糖与氯化钙或醋酸钙或葡萄糖酸钙或乳酸钙或苹果酸钙或柠檬酸苹果酸钙的水溶液反应,经过滤、洗涤、脱水、干燥、粉碎、灭菌,制得壳聚糖钙。
按本发明的方法制备的壳聚糖钙是一种新型止血剂,能够通过多种途径起到止血作用,包括作用于血液中的红细胞,抑制体内溶解纤维蛋白,激活凝血酶,从而起到止血作用,能明显地缩短凝血时间,同时该壳聚糖钙还具有抑菌、抗菌、镇痛、促进创伤愈合的作用,并且制备方法简单,使用方便。
具体实施方式
一、壳聚糖钙的制备
实施例1
(1)壳聚糖的制备:取蟹壳或虾壳粉碎成10目的粗粉,按下列步骤进行处理。
①蟹壳或虾壳脱钙:称取100g蟹壳或虾壳,加入1.0mol/L的盐酸500ml,搅拌0.5~3小时脱钙质,过滤,得固形物。再加入0.5mol/L的盐酸800ml,重复上述过程,得固形物。用去离子水将固形物洗至pH5~7,过滤,得脱钙蟹壳或脱钙虾壳。
上述蟹壳或虾壳脱钙中使用的盐酸水溶液的浓度可以是0.5~2.0mol/L,用量可以是400ml~1000ml。
②脱蛋白质、脱色素:将上述脱钙蟹壳或脱钙虾壳置烧杯中,加入0.5mol/L的氢氧化钠水溶液600ml,90℃加热反应0.5~1小时,滤过,得固形物,如此再处理3次,得蟹壳甲壳素或虾壳甲壳素。
脱蛋白、脱色素使用的氢氧化钠水溶液的浓度可以是0.1~1.0mol/L,用量可以是400ml~1000ml。
③脱乙酰基:将蟹壳甲壳素或虾壳甲壳素置于烧杯中,加入10mol/L的氢氧化钠水溶液800ml,90~100℃加热反应10小时。滤过,所得固形物用去离子水洗至中性,固形物70℃干燥,粉碎成80目~200目细粉,得壳聚糖粉末状固体。
脱乙酰基使用的氢氧化钠水溶液的浓度可以是5~12mol/L,用量可以是400ml~1000ml。上述的加热反应温度可以是80~100℃。
(2)壳聚糖钙的制备:称取上述壳聚糖粉末状固体10g,置洁净的玻璃研钵中,加入0.5g氯化钙,均匀研磨成细粉,高压灭菌,得壳聚糖钙。
所使用的壳聚糖分子量范围为10KD~1000KD,脱乙酰度为60%~100%。壳聚糖与氯化钙的重量比例可以是10∶0.01~2。将氯化钙改为醋酸钙或葡萄糖酸钙或乳酸钙或苹果酸钙或柠檬酸苹果酸钙,也能达到同样的效果。
按实施例1的方法制备的壳聚糖钙是一种白色或浅黄色粉末状固体,无味,不溶于水和碱性水溶液,可溶解于酸性水溶液,常温下稳定。
实施例2
(1)壳聚糖的制备:同实施例1之(1)的步骤。
(2)壳聚糖钙的制备:称取0.5g氯化钙,置烧杯中,加入去离子水200ml,搅拌溶解,得氯化钙水溶液。称取壳聚糖粉末状固体10g,倒入氯化钙水溶液中,室温下搅拌0.5小时,过滤,得固形物。将固形物用去离子水洗涤3次,每次20分钟,过滤,得固形物。再经95%的乙醇水溶液脱水,过滤,得固形物。固形物60~70℃干燥,粉碎,60Co辐照灭菌,得壳聚糖钙。
所使用的壳聚糖分子量范围为10KD~1000KD,脱乙酰度为60%~100%。壳聚糖与氯化钙的重量比例可以是10∶0.01~2。将氯化钙改为醋酸钙或葡萄糖酸钙或乳酸钙或苹果酸钙或柠檬酸苹果酸钙,也能达到同样的效果。60Co辐照灭菌可以改为高压蒸汽灭菌或环氧乙烷熏蒸灭菌,也能达到同样的效果。
按实施例2的方法制备的壳聚糖钙是一种白色或浅黄色粉末状固体,无味,不溶于水和碱性水溶液,可溶解于酸性水溶液,常温下稳定。
二、壳聚糖钙对大白鼠的止血试验
采用Wistar大白鼠作为试验动物,大白鼠40只,雌雄兼半,体重250g±20。试验分3组:棉纱布对照组,壳聚糖试验组,壳聚糖钙试验组,每组10只。分别以30mg/Kg体重腹腔注射2%戊巴比妥钠麻醉,将大白鼠腹部朝上固定在手术架上,用剃须刀片将腹部毛发剃去,并用新洁尔灭棉球进行皮肤消毒。用消毒的刀片在腹部去毛部位做1.5cm长、2mm深的切口,有血流出。棉纱布对照组大鼠沿切口用无菌双层纱布包扎;壳聚糖试验组大鼠在切口处撒约2mm厚的无菌壳聚糖粉末;壳聚糖钙I试验组在大鼠切口处撒约2mm的无菌壳聚糖钙I粉末(按实施例1的方法制备的壳聚糖钙);壳聚糖钙II试验组在大鼠切口处撒约2mm的无菌壳聚糖钙II粉末(按实施例2的方法制备的壳聚糖钙)。手术中观察每只大鼠创面出血情况,记录凝血时间,以评价壳聚糖、壳聚糖钙对手术刀口创伤的止血效果。术后大鼠正常饲养,每天观察大鼠刀口愈合情况,以评价壳聚糖、壳聚糖钙对大鼠伤口愈合的影响。结果列于下表:
组别 | 动物数(只/组) | 平均凝血时间(min) | 平均刀口愈合天数 |
棉纱布对照组壳聚糖试验组壳聚糖钙I试验组壳聚糖钙II试验组 | 10101010 | 3.5±0.52.3±0.31.5±0.21.6±0.2 | 5天2天2天2天 |
以上试验结果证明,按实施例1和实施例2的方法制备的壳聚糖钙的止血效果明显优于壳聚糖和棉纱布,因此壳聚糖钙作为一种新型止血敷料或止血剂或止血药物进行开发,前景广阔。
Claims (4)
1、一种壳聚糖钙的制备方法,其特征是将壳聚糖与氯化钙或醋酸钙或葡萄糖酸钙或乳酸钙或苹果酸钙或柠檬酸苹果酸钙的粉状固体混合,或使壳聚糖与氯化钙或醋酸钙或葡萄糖酸钙或乳酸钙或苹果酸钙或柠檬酸苹果酸钙的水溶液反应,经过滤、洗涤、脱水、干燥、粉碎、灭菌,制得壳聚糖钙。
2、如权利要求1所述的制备方法,其特征是所述的壳聚糖分子量范围为10KD~1000KD,脱乙酰度为60%~100%;该壳聚糖与氯化钙或醋酸钙或葡萄糖酸钙或乳酸钙或苹果酸钙或柠檬酸苹果酸钙的重量比例为10∶0.01~2。
3、如权利要求1所述的制备方法,其特征是所述的灭菌为高压蒸汽灭菌或60Co辐照灭菌或环氧乙烷熏蒸灭菌。
4、权利要求1所述的壳聚糖钙在创伤止血或手术止血中的应用。
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