CN1706386A - 恩诺沙星混悬液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明恩诺沙星混悬液及其制备方法属于畜牧药物制剂技术领域，本发明的恩诺沙星混悬液，包括以重量比计的组分：恩诺沙星8－12份、油酸正丁酯3－8份、聚山梨酯3－8份、丙二醇30－50份，加水至100份。本发明恩诺沙星混悬液是应用D相乳化法制备的，其性状为白色、稍粘稠混悬液。本发明制剂能够缓慢释放药物有效成分，提高药物的生物利用度，增强药物的疗效，一次用药能维持有效血药浓度的时间可达48小时，本混悬乳剂每2天用药1次，制剂的生产不需要特殊溶媒，成本低，生产工艺简单，易于实现产业化。

Description

恩诺沙星混悬液及其制备方法

技术领域

本发明属于畜牧药物制剂技术领域，尤其是一种混悬剂及其制备方法。

背景技术

恩诺沙星是一种广谱喹诺酮类抗菌药物，抗菌谱广，抗菌力强，由于恩诺沙星的代谢产物环丙沙星仍然具有抗菌作用，因而该药是治疗细菌性感染的理想药物。有研究证实，在应用恩诺沙星经子宫内灌注治疗奶牛子宫内膜炎时，恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星在乳汁中消除迅速，用药12h后，HPLC即检测不到残留药物，故恩诺沙星在乳汁中不会形成残留，因此，应用恩诺沙星治疗奶牛等畜禽疾病，对生产无抗奶等畜禽产品，保障消费者身体健康具有积极意义。

随着集约化饲养程度的提高，临床用药也逐渐变成了一项较为繁忙的工作，尤其是一些需要特殊疗法的疾病，更为临床治疗带来了不便，因此，研制高效药物乃成为临床治疗工作的迫切需求。例如奶牛子宫内膜炎是一种常见的产科疾病，该病对奶牛业的危害非常严重，经济损失巨大，而现在临床使用的奶牛子宫内膜炎治疗药物多为常规剂型，其治疗效果不仅不尽如意，而且还需要多次用药，由于治疗奶牛子宫内膜炎的最佳用药途径是子宫内用药，然而子宫内用药操作繁琐，且需要一定的技术水平，因而给临床用药带来了许多不便。如果应用长效制剂治疗奶牛子宫内膜炎，不仅能够降低用药次数，减少用药造成的麻烦，节省人力和物力，而且还能维持良好的治疗效果，因此，开展长效制剂的研究工作对畜禽临床治疗具有重要意义。

目前，恩诺沙星制剂的剂型主要为粉剂和注射制剂，但注射剂均为常规水剂，并且含量较低，药物浓度多为0.25％、0.5％和2.5％，由于药物浓度低，药效持续时间短，因而存在注射剂量大，注射次数多等缺点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种药效持续时间长、用药次数少、成本低的恩诺沙星混悬液；

本发明的另一个目的在于提供一种恩诺沙星混悬液的制备方法。

为实现上述目的，本发明的恩诺沙星混悬液包括以重量比计的组分：恩诺沙星8-12份、油酸正丁酯3-8份、聚山梨酯3-8份、丙二醇30-50份，加水至100份。

其中还包括抗氧化剂0.5份和防腐剂0.0005份。

优选地，恩诺沙星10份、油酸正丁酯5份、聚山梨酯5份、丙二醇40份。

更优选地，恩诺沙星10g、油酸正丁酯5g、聚山梨酯5g、丙二醇40g。

本发明的恩诺沙星混悬液的制备方法包括步骤：

(1)将恩诺沙星、油酸正丁酯、聚山梨酯、丙二醇和蒸馏水灭菌后贮存备用；

(2)取所述聚山梨酯于搅拌缸中，然后加入油酸正丁酯，将两者搅拌均匀；

(3)将所述丙二醇加入步骤(2)的溶液中，混匀；

(4)向步骤(3)的溶液中缓慢加入所述蒸馏水，并不断搅拌，制成乳剂基质；

(5)向步骤(4)的基质中加入恩诺沙星，搅拌均匀，灌装，密封即得。

本发明的恩诺沙星混悬液的优点和积极效果在于：

(1)恩诺沙星是疏水性药物，在混悬液中除一小部分溶解于溶液外，大部分以晶体形式存在，用药后吸收缓慢，可显著延长疗效，一次用药可维持有效血药浓度的时间为24-48小时，而常规药物药效仅可持续6-12小时。

(2)疗效好，较常规药物可提高治愈率为5％-8％。

(3)较常规药物用药次数少，常规药物每天需用药1-2次，而本药物可1-2天用药1次。

(4)本发明的恩诺沙星混悬液，注射剂量少，每次注射量仅为常规药物的1/4，且每天最多才需注射1次，本发明降低注射剂量，减少用药次数，方便临床用药，降低用药成本，节省人力和物力。

本发明的恩诺沙星混悬液的制备方法的优点和积极效果在于：本发明采用D相乳化法，把多元醇作为第四种组分加入油、水、乳化剂组成的体系中，而形成的微细珠滴的乳状液的方法。本发明的方法生产药物制剂不仅可以提高药物的生物利用度，促进药物在机体内的吸收，增加难溶性药物的溶解度，增强药物的稳定性，增强药物的疗效，而且生产成本低，生产工艺简单。

具体实施方式

实施例1：制备10％恩诺沙星混悬液

(1)将恩诺沙星10g、油酸正丁酯5g、聚山梨酯5g、丙二醇40g和适量蒸馏水灭菌后贮存备用；

(2)取聚山梨酯于搅拌缸中，然后加入油酸正丁酯，将两者搅拌均匀；

(3)将丙二醇加入步骤(2)的溶液中，混匀；

(4)向步骤(3)的溶液中缓慢加入蒸馏水至100g，并加入抗氧化剂0.5g、防腐剂0.0005g，不断搅拌，制成乳剂基质；

(5)向步骤(4)的基质中加入的恩诺沙星，搅拌均匀，灌装，密封即得。

实施例2：制备12％恩诺沙星混悬液

(1)将恩诺沙星12g、油酸正丁酯3g、聚山梨酯8g、丙二醇40g和适量蒸馏水灭菌后贮存备用；

(2)取聚山梨酯于搅拌缸中，然后加入油酸正丁酯，将两者搅拌均匀；

(3)将丙二醇加入步骤(2)的溶液中，混匀；

(4)向步骤(3)的溶液中缓慢加入蒸馏水至100g，并加入抗氧化剂0.5g、防腐剂0.0005g，不断搅拌，制成乳剂基质；

(5)向步骤(4)的基质中加入的恩诺沙星，搅拌均匀，灌装，密封即得。

实施例3：制备8％恩诺沙星混悬液

(1)将恩诺沙星8g、油酸正丁酯8g、聚山梨酯3g、丙二醇50g和适量蒸馏水灭菌后贮存备用；

(2)取聚山梨酯于搅拌缸中，然后加入油酸正丁酯，将两者搅拌均匀；

(3)将丙二醇加入步骤(2)的溶液中，混匀；

(4)向步骤(3)的溶液中缓慢加入蒸馏水至100g，并加入抗氧化剂0.5g、防腐剂0.0005g，不断搅拌，制成乳剂基质；

(5)向步骤(4)的基质中加入的恩诺沙星，搅拌均匀，灌装，密封即得。

实施例4：制备9％恩诺沙星混悬液

按照实施例1所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料：恩诺沙星9g、油酸正丁酯4g、聚山梨酯6g、丙二醇35g、抗氧化剂0.5g和防腐剂0.0005g和蒸馏水45.4995g。

实施例5：制备11％恩诺沙星混悬液

按照实施例1所述的方法，不同之处是选用下列重量的原料：恩诺沙星11g、油酸正丁酯6g、聚山梨酯4g、丙二醇45g、抗氧化剂0.5g和防腐剂0.0005g和蒸馏水33.4995g。

本发明所制备的恩诺沙星混悬液的质量控制

1、物理性状

本发明的恩诺沙星混悬液为乳白色、稍粘稠的混悬型液体，长期静置后会有分层，上层为无色或略呈淡黄色的液体，下层为乳白色混悬物，振荡后为均匀的乳白色混悬液，药液pH值为5.9-6.9。

2、药物含量测定

(1)工作曲线的绘制

精确称取干燥至恒重的恩诺沙星对照品10mg，置于100ml容量瓶中，用0.1mol/L的盐酸溶液稀释至刻度，制成贮备液，分别精取贮备液适量分置100ml容量瓶中，用0.1mol/L的盐酸溶液稀释至刻度，制成2、3、4、5、7、9、10μg/ml的标准液，于271nm波长处测定吸收度，以吸收值A值对浓度C值进行回归，得回归方程A＝0.1089C-0.0247，r＝0.9998。在含恩诺沙星2.0-9.0μg/ml范围内，吸收度与药物浓度线性关系良好。

(2)回收率测定

取8％、10％和12％三种不同浓度的恩诺沙星混悬液适量，按上述方法用0.1mol/L的盐酸溶液稀释至恩诺沙星浓度为2.0-9.0μg/ml范围的溶液，测定每个样品上清液的吸收度，并计算其平均回收率。结果见表1，其平均回收率为99.87％±0.58％。

              表1  不同浓度样品中恩诺沙星回收率测定结果

序号	实际量(mg/ml)	测得量(mg/ml)	回收率(％)
				01	100.00	100.53±0.82	100.53
02	120.00	119.35±0.16	99.46
				03	150.00	149.43±0.91	99.62

(3)药物含量测定

随机抽取5批恩诺沙星混悬液5支，分别精取0.5ml混悬液样品，用0.1mol/L的盐酸溶液稀释至恩诺沙星浓度为5.0μg/ml的溶液，以0.1mol/L的盐酸作空白对照，在271nm波长处测定稀释样品上清液的吸收度，由回归方程计算出乳剂样品中恩诺沙星的含量。结果测定的恩诺沙星量分别为实际量的100.34％、100.44％、99.73％、99.45％、99.42％，符合质量要求。

3、稳定性试验

(1)粘度测定

取出口内径为1.2mm，上口内径为2.7mm的1ml玻璃吸管，分别吸取不同批次的微乳基质1ml，在室温条件下，记录微乳从1ml刻度垂直下降至0.4ml刻度，即流出0.4ml微乳基质所需要的时间(s)，结果粘乳剂的稠度为2-3s。

(2)光加速试验

将制备的不同批次的恩诺沙星混悬液样品，密封后置光照度为3000LX的环境中放置10天，并在放置的0、5、7和10天采取样品，观察乳剂的物理性状、沉降体积比、药物絮凝情况、颗粒大小，并测定药物含量。结果5个批次混悬液样品的物理性状、沉降体积比、药物颗粒大小及含量等指标均未见变化，表明混悬液对光具有稳定性。

(3)加温加湿试验

将制备的不同批次恩诺沙星混悬液样品置于水套式电热恒温培养箱内，调整培养箱温度为37±1℃，相对湿度为60％±5％，定期观察3个月，每月取样1次，检查恩诺沙星混新型悬液样品的物理性状、沉降体积比、药物絮凝情况、颗粒大小，并测定药物含量。结果混悬液样品定期观察3个月，其质量指标均未见明显变化，说明本发明的恩诺沙星混悬液的稳定性良好。

(4)重分散性

将不同批次的恩诺沙星混悬液静止放置数天或数月，然后轻轻翻转摇晃混悬液数次，使其再分散成均匀的混悬体系，结果经数次摇晃后，恩诺沙星混悬液均能变为均匀的混悬性液体，且瓶底无药物沉淀。

6、药代动力学试验

(1)试验动物

试验动物为5只体重1.5-2kg的健康家兔，按照常规方式饲养，饲料中未添加任何药物。

(2)用药方法

肌肉一次注射10％恩诺沙星混悬液0.1ml/kg体重，即注射恩诺沙星10mg/kg体重。

(3)血样采集

在用药后1、2、4、8、12、24、36、48h分别采取血样2ml，注入装有1％肝素的离心管中，3000r/min离心15min，制备血浆，置-20℃冰箱保存待测。

(4)血药浓度测定

取血浆1ml，加20％三氯乙酸0.25ml，沉淀蛋白，置-4℃冰箱冷藏15min，4000r/min离心15min，吸取上清液适量，过已经活化的C18柱，待流尽后，用水1-2ml洗涤液洗涤，至流出液为中性，吹干。用洗脱液以上洗脱样品，收集洗脱液，取20μl用高压液相色谱测定。

将样品测定所得峰面积代入回归方程，计算出固相萃取洗脱液中的土霉素浓度，然后按下述公式计算注药后不同时间血样的血药浓度C(μg/ml)＝X×V₂×V₄/V₁×V₃×R。

(5)血药浓度测定结果

在注射10％恩诺沙星混悬液后不同时间，家兔血样的血药浓度测定结果见表2。

       表2  10％恩诺沙星新型混悬乳液在兔体内的的血药浓度(μg/ml)

时间(h)	1	2	4	8	12	24	36	48
									平均浓度	3.49	3.34	3.24	1.24	1.10	0.87	0.81	0.59
±SD	0.22	0.38	0.31	0.39	0.25	0.51	0.32	0.09

以血浆恩诺沙星浓度0.5μg/ml为最小有效浓度，从表2可知，10％恩诺沙星混悬液能够维持有效血药浓度的时间为48h，因此，按每2天注药一次，即可达到理想疗效。

本发明的恩诺沙星混悬液是应用D相乳化法制备的一种长效缓释制剂，由于恩诺沙星是疏水性药物，在混悬液中除一小部分溶解于溶液外，大部分以晶体形式存在，能够缓慢释放药物有效成分，延缓药物吸收，维持机体长时间的有效血药浓度，可显著延长疗效，一次用药可维持有效血药浓度48小时，每1-2天用药1次即可；

同时由于制剂中恩诺沙星含量高，所以还能降低用药成本，减少用药次数，并为临床用药带来许多方便。因此本发明的恩诺沙星混悬液不仅注射剂量少，具有良好的治疗效果，而且使用方便，用药次数少，节省人力和物力。本发明的恩诺沙星混悬液是目前临床治疗畜禽疾病的较为理想的一种新型制剂。

本发明的恩诺沙星混悬液的制备方法的优点和积极效果在于：本发明采用D相乳化法，把多元醇作为第四种组分加入油、水、乳化剂组成的体系中，而形成的微细珠滴的乳状液的方法，D相又称表面活性剂相，是由非离子表面活性剂、多元醇、水组成的微乳状液体系，在搅拌条件下，在D相中加入油可以形成透明的O/D型凝胶状的乳状液，用水稀释后可得到O/W型乳液，应用该乳液体系生产药物制剂具有提高药物的生物利用度，促进药物在机体内的吸收，增加难溶性药物的溶解度，增强药物的稳定性，增强药物的疗效，生产成本低，生产工艺简单等优点，是目前制药业一种理想的新型药物载体系统。

以上为本发明的最佳实施方案，本领域的普通技术人员能够依据本发明公开的内容显而易见地想到的一些雷同、替代方案，均应落入本发明保护的范围。

Claims (5)

1.一种恩诺沙星混悬液，其特征是包括以重量比计的组分：恩诺沙星8-12份、油酸正丁酯3-8份、聚山梨酯3-8份、丙二醇30-50份，加水至100份。

2.根据权利要求1所述的恩诺沙星混悬液，其特征是还包括抗氧化剂0.5份和防腐剂0.0005份。

3.根据权利要求1所述的恩诺沙星混悬液，其中所述恩诺沙星10份、油酸正丁酯5份、聚山梨酯5份、丙二醇40份。

4.根据权利要求1所述的恩诺沙星混悬液，其中所述恩诺沙星10g、油酸正丁酯5g、聚山梨酯5g、丙二醇40g。

5.根据权利要求1所述的恩诺沙星混悬液，其特征在于包括以下步骤：

(1)将恩诺沙星、油酸正丁酯、聚山梨酯、丙二醇和蒸馏水灭菌后贮存备用；

(2)取所述聚山梨酯于搅拌缸中，然后加入油酸正丁酯，将两者搅拌均匀；

(3)将所述丙二醇加入步骤(2)的溶液中，混匀；

(4)向步骤(3)的溶液中缓慢加入所述蒸馏水，并不断搅拌，制成乳剂基质；

(5)向步骤(4)的基质中加入恩诺沙星，搅拌均匀，灌装，密封即得。