CN1699298A - Pgpr生长促进剂和使用它来培养农作物的方法 - Google Patents
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Abstract
为了诱导复合生长促进和因此带来最有效的生长促进可能性,本发明提供一种含有微生物制剂的生长促进剂,所述微生物制剂包括至少两种或多种选自土壤微生物的PGPR菌株,且其中之一必定为AP162的一种混合物。因此,有可能克服由传统的随机使用PGPR菌株的方法造成的缺点,如高生产成本负担和低生长促进作用。此外,采用本发明所述的生长促进剂用于培养农作物如卷心菜、黄瓜、大豆、红辣椒和番茄,可以在较短的时期内培养出优良品种的农作物,从而提高了适销性和产量,同时减少了肥料的使用量,使能够不破坏土壤聚集体而连续耕种。
Description
技术领域
本发明涉及一种通过混合从土壤中分离的PGPR菌株中的筛选菌株而制备的生长促进剂,更具体地说涉及一种使用土壤微生物的生长促进剂,所述微生物能根据相应农作物的特性,对培养的农作物例如卷心菜、黄瓜、红辣椒和番茄带来最有效的生长促进,以及一种使用该生长促进剂培养农作物的方法。
背景技术
一般地,在大多数农场中,大量的化学肥料和农用化学品被用于实现持续的农作物培养和农场农作物产量增加,其中农场农作物采用温室和用于培养高收益作物的塑料薄膜温室来培养。其结果是,土壤遭受了物理化学特性的极度恶化,例如,各种盐类的累积,农用化学品的滞留,土壤酸化,土壤聚集体的破坏,等等,使得其几乎不可能培养高品质农作物。由于这些原因,化学肥料和农用化学品的使用被从政府层次进行调控。
此外,近来,有机生长的农作物,例如,不使用农用化学品培养的农作物,在消费者中吸引了大量的注意,随后促进了采用天敌或有机耕种培养的活动。因此,可以预见在不久的将来,对化学肥料和农用化学品使用的调控将更严格。
但是,仅使用不含农用化学品的天敌或有机耕种存在许多缺点,例如难于保持农作物的适销性,较高的生产成本,和批量生产的不可行性,因此需要更广泛的研究。作为一种选择,为了解决这些问题,近来提出了使用从土壤中分离的微生物来进行耕种。
通常,每克肥沃的土壤中栖息着成千上万的微生物。在这些微生物中,具有农业应用功能的有效微生物,尤其是具有较好特性的菌株被命名为植物生长促进根圈细菌(PGPR),这些细菌经分离提取和培养,并随后用作农作物生长促进剂或作为肥料。
如上文所述,作为PGPR菌株,由能促进农作物生长的物质如植物激素或赤霉素产生的微生物,和具有抑制导致各种农作物疾病的病原微生物生长或能分泌杀死病原细菌的抗体物质的功能的拮抗微生物被主要地筛选和使用。
此外,通常采用能分泌各种酶以快速降解顽固的非生物降解的有机物如纤维蛋白或木质素的微生物,或采用能溶解不可溶磷酸盐以提高磷酸盐肥料的施肥效果的微生物,或采用能固定空气中的氮同时能在大豆、花生、苜蓿等的根部保持共生的微生物,或采用能捕食有害生物体如线虫的微生物。
这些有效的微生物典型地能分泌各类酶、生理活性物质、氨基酸、植物生长必须的核苷酸、及其类似物。依次地,这些物质直接或间接的被植物根部所吸收,已知这些物质有助于扩大丰收,同时还有助于质量的提高如味道、香味、颜色,并且收获的产物和营养成分的存储性增强。
同时,作为采用土壤微生物培养农作物的方法,如上文所述,可提及名称为“固氮细菌肥料的生产”的韩国专利No.2548和名称为“新的芽孢杆菌菌株和采用其的生长促进剂”的韩国专利申请No.1997-25148。日本公开特许公报平4-108706,5-194951,6-16519和6-80490中提到了采用包括蓝-绿藻在内的微生物作为肥料或土壤改良剂的例子。另外,韩国专利申请No.1996-033250也公开了一种土壤改良剂,其中放线菌属、根瘤菌属和光合细菌被吸附于多孔物质上,并公开了其生产方法。
然而,上述提到的传统技术只带来了零星的效果,因为其仅简单地采用土壤微生物作为传统肥料添加剂或土壤改良剂组分。此外,直到现在,采用微生物对农作物的生长促进和产量增加仍然只有很少的效果。
现在,本发明人利用土壤微生物开发出了一种生长促进剂,其可根据相应农作物的特性提供最有效的生长促进,同时通过筛选从土壤中分离的PGPR菌株额外提供互补效应,并开发了一种采用该生长促进剂培养农作物的方法。
发明内容
因此,本发明是在考虑到上述问题的基础上提出的,本发明的一个目的是提供一种根据相应农作物的特性使用提取自土壤的PGPR菌株从而为农作物提供最有效的生长促进的生长促进剂。
本发明的另一目的是提供一种能提高农作物如卷心菜、黄瓜、大豆、红辣椒和番茄的生产效率的培养农作物的方法。
具体实施方式
根据本发明,上述和其他目的可通过提供一种生长促进剂来实现,所述生长促进剂含有一种包括提取自土壤的菌株的微生物制剂并含有或不含肥料组分,其中所述的微生物制剂必定含有短杆芽孢杆菌菌株AP162(Brevibacillus laterosporus strain AP162),并且其中混合有选自枯草芽孢杆菌菌株GB03(Bacillus subtilis strain GB03)、短小芽孢杆菌菌株AP62(Bacilluspumilus strain AP62)、蜡状芽孢杆菌菌株AP73(Bacillus cereus strain AP73)、解淀粉芽孢杆菌菌株IN937a(Bacillus amyloliquefaciens strain IN937a)、枯草芽孢杆菌菌株AP40(Bacillus subtilis strain AP40)、和短小芽孢杆菌菌株AP70(Bacillus pumilus strain AP70)中的至少一种。上述菌株都可以从美国典型培养物保藏中心(ATICC,P.O.Box 1549,Manassas,VA 20108,USA)获得。
下面将详细描述根据本发明的生长促进剂。
从前文中可以看出,在土壤微生物中,存在各种具有能产生可促进植物生长的物质如植物激素或赤霉素,或抑制导致各种农作物疾病的病原微生物的生长和能分泌杀死病原细菌的抗生素物质的功能的有效微生物。
根据本发明,在从上文提到的有效微生物中分离的植物生长促进根圈细菌(PGPR)中,筛选出对农作物生长促进具有最大效果的短杆芽孢杆菌菌株AP162(Brevibacillus laterosporus strain AP162)(以下称为‘AP162’)。同样的,还筛选出枯草芽孢杆菌菌株GB03(Bacillus subtilis strain GB03)(以下称为‘GB03’)、短小芽孢杆菌菌株AP62(Bacillus pumilus strain AP62)(以下称为‘AP62’)、蜡状芽孢杆菌菌株AP73(Bacillus cereus strain AP73)(以下称为‘AP73’)、解淀粉芽孢杆菌菌株IN937a(Bacillus amyloliquefaciensstrain IN937a)(以下称为‘IN937a’)、枯草芽孢杆菌菌株AP40(Bacillus subtilisstrain AP40)(以下称为‘AP40’)、和短小芽孢杆菌菌株AP70(Bacillus pumilusstrain AP70)(以下称为‘AP70’),并且对每一筛选出的菌株进行培养。含有包括AP162的至少两种或多种菌株的混合物的微生物制剂被用于农作物的培养,并对农作物的生长促进显示出良好的效果。
也就是,实验发现一种必定含有AP162且含有选自GB03,AP62,AP73,IN937a,AP40和AP70中的至少一种菌株的混合物,与上述提到的每一菌株单独使用或除了AP162外的两种或多种菌株混合使用的情况相比,极大地提高了生长促进的效果。可以相信,当AP162与其他菌株混合时,所得混合物可产生互补效应,进一步诱导了农作物的生长促进。
这些AP162,GB03,AP62,AP73,IN937a,AP40,AP70菌株通常提取分离自土壤,并随后进行培养。作为培养方法,优选的是将细菌菌株培养于胰蛋白酶大豆培养基(Tryptic Soy Broth medium)在28±1℃的温度下培养2-3天,随后储存在存储培养物中直至使用。
另一种方法包括将由含有水并具有5-10重量%的糖和微量的元素如Zn,Al,Fe,Mn等的10重量%的废蜜糖组成的培养基进行灭菌,随后冷却,并在该培养基中于28℃的温度下将提取的细菌菌株培养3至4天。该培养方法的优点在于可以相对较低的成本实施。
然后,从如上培养的细菌菌株培养物中筛选出包括AP162的两种或多种菌株,并根据期望的用途,将其混合制成微生物制剂。将制备出的微生物制剂与各种肥料组分混合,从而制成液体或固体的生长促进剂。
首先,本发明提供一种通过将硝酸盐和腐植酸盐(一种有机物质)以及堆肥提取物混合而制备的液体生长促进剂。
更具体地说,本发明提供一种通过,基于生长促进剂的总重量,将10-15重量%的微生物制剂,3-5重量%的硝酸盐,1-3重量%的腐植酸盐和80-90重量%的堆肥提取物混合而制备的液体生长促进剂。
此时,当混合两种或多种细菌菌株培养物时,将该微生物制剂用水稀释至总细菌浓度为2.5×107cfu/ml。每种菌株之间的混合比例保持在1∶1。此外,为了植物生长的促进,最优选的是包括两种或多种细菌菌株混合物的微生物制剂的含量为基于生长促进剂总量的10-15重量%。
所述硝酸盐为选自尿素、硝酸铵和硝酸钙中的一种或多种物质。该硝酸盐用于使微生物悬浮从而提高可存储性。该硝酸盐优选的是以基于生长促进剂总量的3-5重量%的量来使用。低于上述范围时,可存储性不足。高于上述范围时,高的硝酸盐浓度会对有关系的微生物产生有害影响。
所述腐植酸盐用作微生物的营养源。其使用量优选为基于生长促进剂总量的1-3重量%。低于该范围时,由于营养供应不足,微生物活性降低。高于该范围时,微生物的活性没有明显的变化。因此,从经济的角度而言,优选以在上述范围之内的量加入腐植酸盐。
所述堆肥提取物是从通过堆积稻草、牧草、落叶及其类似物并将其堆肥而获得的分解肥料中得到的提取物。其含有氮、磷酸和钾,以及多种有机物质,并对农作物具有良好的、长时间的作用,并用于增加土壤的持水能力、吸收养分的能力、和物理特性,并防止土壤酸化。堆肥提取物的用量优选为占生长促进剂总量的80-90重量%。这是因为,在该范围以下,不能体现出上述提到的效果,而在该范围以上,微生物制剂的含量降低,导致农作物生长促进效果不良的问题。
在混合步骤中为了获得额外的效果,可以加入选自壳聚糖、园圃土和鸡粪肥中的一种或多种物质。每一种这类添加剂额外地以2-5重量%的量添加,用于进一步活化农作物生长。
此外,从上文中可见,本发明提供一种粉状或颗粒状的生长促进剂,其通过在矿物质、泥煤和有机物如米糠上吸附含有选自GB03、AP62、AP73、IN937a、AP40和AP70中的至少一种,且必定含有AP162的一种混合物的微生物制剂来制备。
因此,本发明提供一种固体生长促进剂,其通过向含有2-3重量%壳聚糖的园圃土中添加所述微生物制剂从而使含水量为10±1%的方法来制备。
类似地,在这种情况下,当混合两种或多种细菌菌株培养物时,总细菌浓度保持为2.5×107cfu/ml。它们之间的混合比例保持为1∶1的比例。
因此,本发明提供含有一种微生物制剂的液体或固体生长促进剂,所述微生物制剂含有选自土壤微生物的至少两种或多种PGPR菌株的混合物,其中之一必定为AP162,以带来最有效的生长促进可能。因此,其可以克服传统的随机使用PGPR菌株的方法带来的缺点,如高生产成本负担和低生长促进作用。
此外,本发明提供一种培养方法,其包括如下步骤:将用水浸泡的农作物种子或幼苗的根组织浸入到通过上述方法制备的生长促进剂中,将其取出并栽培或播种于田间或温室中,并施用60毫升的剩下的生长促进剂至近根部的土壤,间隔14天施用等量的生长促进剂3次。
更具体地说,如上文所述采用一种通过筛选和混合GB03、AP62、AP73、IN937a、AP40和AP70中的至少一种菌株,并必定含有AP162而制备的微生物制剂来制备生长促进剂。将制备出的生长促进剂与水以1∶1的比例混合,以稀释50%,从而使生长促进剂达到合适的微生物浓度。
感兴趣的种子或幼苗的根组织被浸入稀释的生长促进剂中,并随后播种于田间或苗圃。大约60毫升的在播种种子或幼苗后剩下的生长促进剂被施用于根部周围的土壤中。播种后,用60毫升的生长促进剂每间隔14天重复上述过程3次,从而完成总共4次的施用。
此时,第一次和第二次的施用采用100%的生长促进剂,第三次采用75%,第四次采用50%,可以达到较佳效果。
因此,当使用土壤微生物的生长促进剂被施用于农作物如卷心菜、黄瓜、大豆、红辣椒和番茄时,可以在较短时期内培养出良好品种的农作物,从而提高了适销性和产量,同时减少了肥料的使用量,使能够不破坏土壤聚集体而连续耕种。
现在,将参考下面的实施例对本发明进行详细的描述。这些实施例用于描述本发明,其不能被解释为对本发明范围和精神的限定。
实施例
制备实施例
从提取自土壤微生物的PGPR菌株中筛选出短杆芽孢杆菌菌株AP162(Brevibacillus laterosporus strain AP 162),枯草芽孢杆菌菌株GB03(Bacillussubtilis strain GB03),短小芽孢杆菌菌株AP62(Bacillus pumilus strain AP62),蜡状芽孢杆菌菌株AP73(Bacillus cereus strain AP73),解淀粉芽孢杆菌菌株IN937a(Bacillus amyloliquefaciens strain IN937a),枯草芽孢杆菌菌株AP40(Bacillus subtilis strain AP40),和短小芽孢杆菌菌株AP70(Bacillus pumilusstrain AP70),并在胰蛋白酶大豆培养基(Tryptic Soy Broth)(DIFCO公司)上于28℃的温度下培养3天。从中,选择性地挑选一种或两种或多种菌株并混合,然后用水稀释至菌株总浓度为2.5×107cfu/ml从而制备各种微生物制剂。在此,混合的菌株之间的混合比例保持在1∶1的比例。
将14克配制完成的微生物制剂与4克硝酸盐(尿素∶硝酸铵∶硝酸钙=2∶1∶1)、2克腐植酸盐、和80克堆肥提取物混合以制备液体生长促进剂。如果需要,将每种2.5克的壳聚糖、苗圃土或鸡粪肥选择性地添加至上述制备的生长促进剂中。
实施例1
卷心菜的培养
作为实验组,将已浸入如制备实施例1中制备得到的生长促进剂中1小时的卷心菜种子播种于保持在室温的塑料薄膜温室中。将60毫升(cc)播种后剩余的生长促进剂施用于根部周围的土壤。14天后,在额外施用另一份60毫升生长促进剂后将卷心菜再培养15天。
此外,作为对照组,将卷心菜在相同条件下培养15天,所不同的是不使用生长促进剂,而且种子不采用生长促进剂进行处理,或仅采用壳聚糖、园圃土和鸡粪肥施肥。
表1显示了分别收获使用生长促进剂培养卷心菜的实验组和不使用生长促进剂培养卷心菜的对照组后测量得到的卷心菜叶子和根的重量,以及农作物的总重量。
表1
使用的菌株/添加剂 | 卷心菜的生长速率 | |||
叶的重量(克) | 根的重量(克) | 总重量(克) | ||
实验组 | GB03 | 0.253 | 0.094 | 0.347 |
AP62 | 0.259 | 0.145 | 0.404 | |
AP73 | 0.204 | 0.149 | 0.353 | |
IN937a | 0.285 | 0.177 | 0.462 | |
AP162 | 0.652 | 0.734 | 1.386 | |
AP40 | 0.335 | 0.255 | 0.590 | |
AP70 | 0.581 | 0.642 | 1.223 | |
AP162+AP70 | 1.121 | 1.408 | 2.529 | |
AP62+AP70 | 0.974 | 1.120 | 2.094 | |
IN937a+AP40+AP70 | 0.945 | 1.075 | 2.020 | |
AP162+GB03 | 0.986 | 1.140 | 2.126 | |
AP162+AP73 | 1.012 | 1.170 | 2.182 | |
GB03+AP62+AP70 | 0.965 | 1.030 | 1.995 | |
AP62+AP73+AP162 | 0.995 | 1.104 | 2.099 | |
AP162+AP70/壳聚糖 | 1.284 | 1.385 | 2.669 | |
AP162+AP70/园圃土 | 1.297 | 1.326 | 2.623 | |
AP162+AP70/鸡粪肥 | 1.269 | 1.412 | 2.681 | |
对照组 | 未处理 | 0.261 | 0.096 | 0.357 |
壳聚糖 | 0.253 | 0.095 | 0.348 | |
园圃土 | 0.246 | 0.098 | 0.344 | |
鸡粪肥 | 0.279 | 0.106 | 0.385 |
实施例2
黄瓜的培养
作为实验组,将已浸入如制备实施例1中制备得到的生长促进剂中1小时的黄瓜种子播种于保持在室温的塑料薄膜温室中,并按与实施例1相同的方式培养15天。
此外,作为对照组,将黄瓜在相同条件下培养15天,所不同的是不使用生长促进剂,并且种子不使用生长促进剂进行处理,或仅采用壳聚糖、园圃土和鸡粪肥施肥。
表2显示了分别收获使用生长促进剂培养黄瓜的实验组和不使用生长促进剂培养黄瓜的对照组后测量得到的黄瓜叶子和根的重量,以及农作物的总重量。
表2
使用的菌株/添加剂 | 黄瓜的生长速率 | |||
叶的重量(克) | 根的重量(克) | 总重量(克) | ||
实验组 | GB03 | 0.852 | 0.514 | 1.366 |
AP62 | 0.878 | 0.539 | 1.417 | |
AP73 | 0.850 | 0.504 | 1.354 | |
IN937a | 0.550 | 0.413 | 0.963 | |
AP162 | 0.962 | 0.663 | 1.625 | |
AP40 | 0.806 | 0.517 | 1.323 | |
AP70 | 0.781 | 0.431 | 1.212 | |
AP162+AP70 | 1.526 | 0.871 | 2.397 | |
AP70+AP62 | 1.416 | 0.789 | 2.205 | |
AP62+AP40 | 1.424 | 0.821 | 2.245 | |
AP162+AP62+AP70 | 1.651 | 1.223 | 2.874 | |
IN937a+AP40+AP70 | 1.352 | 0.813 | 2.165 | |
AP162+GB03+AP62 | 1.653 | 1.275 | 2.878 | |
AP162+AP62 | 1.648 | 1.212 | 2.860 | |
GB03+AP62+AP70 | 1.369 | 0.911 | 2.280 | |
AP62+AP73+AP162 | 1.662 | 1.240 | 2.902 | |
AP162+AP62+AP70/壳聚糖 | 1.733 | 1.239 | 2.972 | |
AP162+AP70/园圃土 | 1.728 | 1.239 | 2.967 | |
AP162+AP62+AP70/鸡粪肥 | 1.812 | 1.157 | 2.969 | |
对照组 | 未处理 | 0.727 | 0.366 | 1.093 |
壳聚糖 | 0.729 | 0.349 | 1.078 | |
园圃土 | 0.728 | 0.354 | 1.082 | |
鸡粪肥 | 0.730 | 0.355 | 1.085 |
实施例3
大豆的培养
作为实验组,将已浸入如制备实施例1中制备得到的生长促进剂中1小时的大豆种子播种于保持在室温的塑料薄膜温室中,并按与实施例1相同的方式培养15天。
此外,作为对照组,将大豆在相同条件下培养15天,所不同的是不使用生长促进剂,而且种子不采用生长促进剂进行处理,或仅采用壳聚糖、园圃土和鸡粪肥施肥。
表3显示了分别收获使用生长促进剂培养大豆的实验组和不使用生长促进剂培养大豆的对照组后测量得到的大豆叶子和根的重量,以及农作物的总重量。
实施例4
番茄的培养
作为实验组,将已浸入如制备实施例1中制备得到的生长促进剂中1小时的番茄种子播种于保持在室温的塑料薄膜温室中,并按与实施例1相同的方式培养15天。
此外,作为对照组,将番茄在相同条件下培养15天,所不同的是不使用生长促进剂,而且种子不采用生长促进剂进行处理,或仅采用壳聚糖、园圃土和鸡粪肥施肥。
表4显示了分别收获使用生长促进剂培养番茄的实验组和不使用生长促进剂培养番茄的对照组后测量得到的番茄叶子和根的重量,以及农作物的总重量。
表3
使用的菌株/添加剂 | 大豆的生长速率 | |||
叶的重量(克) | 根的重量(克) | 总重量(克) | ||
实验组 | GB03 | 1.244 | 1.068 | 2.312 |
AP62 | 1.516 | 1.105 | 2.621 | |
AP73 | 1.283 | 0.922 | 2.205 | |
IN937a | 1.738 | 1.228 | 2.966 | |
AP162 | 1.527 | 1.022 | 2.549 | |
AP40 | 1.647 | 1.384 | 3.031 | |
AP70 | 1.528 | 0.931 | 2.459 | |
IN937a+AP162 | 2.713 | 1.166 | 3.879 | |
IN937a+AP40 | 2.621 | 1.164 | 3.785 | |
IN937a+AP40+AP162 | 2.940 | 1.269 | 4.209 | |
AP162+AP40 | 2.079 | 1.642 | 3.721 | |
AP162+AP73 | 1.442 | 1.215 | 2.657 | |
GB03+AP62+AP70 | 1.379 | 1.104 | 2.483 | |
IN937a+GB03+AP162 | 2.729 | 1.116 | 3.845 | |
IN937a+AP40+AP162 | 2.812 | 1.200 | 4.012 | |
IN937a+AP73+AP40 | 2.836 | 1.277 | 4.113 | |
AP62+AP73+AP162 | 2.179 | 0.975 | 3.154 | |
IN937a+AP40+AP162/壳聚糖 | 2.912 | 1.244 | 4.156 | |
IN937a+AP40+AP162/园圃土 | 2.926 | 1.236 | 4.162 | |
IN937a+AP40+AP162/鸡粪肥 | 3.012 | 1.177 | 4.189 | |
对照组 | 未处理 | 1.539 | 0.781 | 2.320 |
壳聚糖 | 1.601 | 0.785 | 2.386 | |
园圃土 | 1.612 | 0.779 | 2.391 | |
鸡粪肥 | 1.578 | 0.754 | 2.332 |
表4
使用的菌株/添加剂 | 番茄的生长速率 | |||
叶的重量(克) | 根的重量(克) | 总重量(克) | ||
实验组 | GB03 | 0.522 | 0.233 | 0.755 |
AP62 | 0.379 | 0.115 | 0.494 | |
AP73 | 0.589 | 0.199 | 0.788 | |
IN937a | 0.718 | 0.369 | 1.087 | |
AP162 | 0.634 | 0.299 | 0.933 | |
AP40 | 0.809 | 0.291 | 1.100 | |
AP70 | 0.621 | 0.232 | 0.853 | |
AP162+AP40 | 1.875 | 1.001 | 2.876 | |
IN937a+AP40 | 1.869 | 1.055 | 2.924 | |
AP162+GB03+AP70 | 1.923 | 0.820 | 2.743 | |
AP162+AP73 | 1.912 | 0.739 | 2.651 | |
AP162+AP62 | 1.909 | 0.740 | 2.649 | |
IN937a+AP40+AP162 | 2.113 | 1.066 | 3.179 | |
AP73+AP40 | 1.887 | 0.902 | 2.789 | |
AP62+AP70+AP162 | 1.901 | 0.920 | 2.821 | |
AP40+AP162/壳聚糖 | 2.227 | 0.989 | 3.216 | |
AP40+AP162/园圃土 | 2.316 | 0.971 | 3.287 | |
AP40+AP162/鸡粪肥 | 2.322 | 0.983 | 3.305 | |
对照组 | 未处理 | 0.378 | 0.132 | 0.510 |
壳聚糖 | 0.369 | 0.128 | 0.497 | |
园圃土 | 0.384 | 0.131 | 0.515 | |
鸡粪肥 | 0.392 | 0.135 | 0.527 |
实施例5
红辣椒的培养
作为实验组,将已浸入如制备实施例1中制备得到的生长促进剂中1小时的红辣椒种子播种于保持在室温的塑料薄膜温室中,并按与实施例1相同的方式培养15天。
此外,作为对照组,将红辣椒在相同条件下培养15天,所不同的是不使用生长促进剂,而且种子不采用生长促进剂进行处理,或仅采用壳聚糖、园圃土和鸡粪肥施肥。
表5显示了分别收获使用生长促进剂培养红辣椒的实验组和不使用生长促进剂培养红辣椒的对照组后测量得到的红辣椒叶子和根的重量,以及农作物的总重量。
表5
使用的菌株/添加剂 | 红辣椒的生长速率 | |||
叶的重量(克) | 根的重量(克) | 总重量(克) | ||
实验组 | GB03 | 0.449 | 0.304 | 0.753 |
AP62 | 0.589 | 0.278 | 0.867 | |
AP73 | 0.573 | 0.510 | 1.083 | |
IN937a | 0.551 | 0.401 | 0.952 | |
AP162 | 0.554 | 0.403 | 0.957 | |
AP40 | 0.756 | 0.469 | 1.225 | |
AP70 | 0.771 | 0.627 | 1.398 | |
AP162+AP40 | 0.998 | 0.513 | 1.511 | |
IN937a+AP40 | 0.964 | 0.522 | 1.486 | |
AP162+GB03+AP70 | 1.162 | 0.509 | 1.671 | |
AP162+AP73 | 0.885 | 0.497 | 1.382 | |
AP162+AP62 | 0.747 | 0.492 | 1.239 | |
IN937a+AP40+AP162 | 1.235 | 0.518 | 1.753 | |
AP73+AP40 | 0.925 | 0.436 | 1.361 | |
AP40+AP70+AP162 | 1.178 | 0.789 | 1.967 | |
AP70+AP40+AP162/壳聚糖 | 1.291 | 0.811 | 2.102 | |
AP70+AP40+AP162/园圃土 | 1.278 | 0.831 | 2.109 | |
AP70+AP40+AP162/鸡粪肥 | 1.389 | 0.824 | 2.213 | |
对照组 | 未处理 | 0.608 | 0.413 | 1.021 |
壳聚糖 | 0.612 | 0.511 | 1.123 | |
园圃土 | 0.611 | 0.487 | 1.098 | |
鸡粪肥 | 0.621 | 0.509 | 1.130 |
如表1至5所见,虽然结果的数值存在轻微的差异,当与采用单一PGPR菌株或两种或多种除了AP162以外的菌株用于农作物培养,和无PGPR菌株用于农作物培养的对照组相比时,采用两种或多种PGPR菌株,且其中之一必为AP162的混合物培养时,每一种农作物均显示出生长速率显著提高。
然而,研究发现,根据其种类的不同,每一种农作物具有不同的菌株组合配对来实现其生长速率提高的最大化。即,对每一农作物显示出最优化生长速率的各自的混合如下:用于卷心菜的AP162和AP70混合物,用于黄瓜的AP162和AP62混合物,用于大豆的AP162、AP40和IN937a混合物,用于番茄的AP162和AP40混合物,用于红辣椒的AP162、AP40和AP70混合物。
如上文所述,为了诱导复合生长促进并因此带来最有效的生长促进可能性,本发明提供一种含有微生物制剂的生长促进剂,所述微生物制剂包括至少两种或多种选自土壤微生物的PGPR菌株,且其中之一必定为AP162的一种混合物。因此,其可以克服传统的随机使用PGPR菌株的方法带来的缺点,如高生产成本负担和低生长促进作用。
此外,采用本发明所述的生长促进剂用于培养农作物如卷心菜、黄瓜、大豆、红辣椒和番茄,可以在较短的时期内培养出优良品种的农作物,从而提高了适销性和产量,同时减少了肥料的使用量,使能够不破坏土壤聚集体而连续耕种。
虽然为了详细说明的目的公开了本发明的优选实施例,但本领域的熟练技术人员应当理解其各种改进、添加和替换都是可能的,其并不背离如附属的权利要求书所公开的本发明的范围和主旨。
Claims (15)
1.一种生长促进剂,其含有一种包括提取自土壤的菌株的微生物制剂并含有或不含肥料组分,其中所述的微生物制剂必定含有短杆芽孢杆菌菌株AP162(Brevibacillus laterosporus strain AP162),并且其中混合有选自枯草芽孢杆菌菌株GB03(Bacillus subtilis strain GB03)、短小芽孢杆菌菌株AP62(Bacillus pumilus strain AP62)、蜡状芽孢杆菌菌株AP73(Bacillus cereusstrain AP73)、解淀粉芽孢杆菌菌株IN937a(Bacillus amyloliquefaciens strainIN937a)、枯草芽孢杆菌菌株AP40(Bacillus subtilis strain AP40)、和短小芽孢杆菌菌株AP70(Bacillus pumilus strain AP70)中的至少一种。
2.如权利要求1所述的生长促进剂,其中每一菌株以1∶1的比例混合于微生物制剂中,且混合的菌株的总浓度稀释至2.5×107cfu/ml。
3.如权利要求2所述的生长促进剂,其中硝酸盐、腐植酸盐和堆肥提取物作为肥料组分被一起混合在微生物制剂中。
4.如权利要求3所述的生长促进剂,其中与肥料组分混合时,混合有10-15重量%的微生物制剂、3-5重量%的硝酸盐、1-3重量%的腐植酸盐、和80-90重量%的堆肥提取物。
5.如权利要求4所述的生长促进剂,其中硝酸盐选自尿素,硝酸铵和硝酸钙,且单独使用或以其任何组合的方式使用。
6.如权利要求5所述的生长促进剂,其中在混合步骤中,额外和可选择地添加2-5重量%的壳聚糖、2-5重量%的园圃土或2-5重量%的鸡粪肥。
7.如权利要求2所述的生长促进剂,其中微生物制剂被加入到含有2-3重量%壳聚糖的园圃土中从而具有10±1%的含水量。
8.如权利要求1至7中任意一项所述的生长促进剂,其中在用于卷心菜的生长促进剂的情况中,所述微生物制剂包括AP162和AP70的菌株混合物。
9.如权利要求1至7中任意一项所述的生长促进剂,其中在用于黄瓜的生长促进剂的情况中,所述微生物制剂包括AP162和AP62的菌株混合物。
10.如权利要求1至7中任意一项所述的生长促进剂,其中在用于大豆的生长促进剂的情况中,所述微生物制剂包括AP162,AP40和IN937a的菌株混合物。
11.如权利要求1至7中任意一项所述的生长促进剂,其中在用于番茄的生长促进剂的情况中,所述微生物制剂包括AP162和AP40的菌株混合物。
12.如权利要求1至7中任意一项所述的生长促进剂,其中在用于红辣椒的生长促进剂的情况中,所述微生物制剂包括AP162,AP70和AP40的菌株混合物。
13.一种生产生长促进剂的方法,包括如下步骤:
采用传统方法,从土壤中分别选择性地分离和培养AP162,GB03,AP62,AP73,IN937a,AP40和AP70菌株;
通过将必定含有的AP162与选自GB03,AP62,AP73,IN937a,AP40和AP70菌株中的至少一种菌株混合,以制备微生物制剂;和
将所述微生物制剂与硝酸盐、腐植酸盐,一种有机物质,和堆肥提取物混合。
14.一种培养农作物的方法,包括如下步骤:
将权利要求1中的生长促进剂稀释至50%的浓度;
将一用水浸泡的农作物种子或幼苗的根组织浸入所述稀释的生长促进剂中1小时,并取出;和
在田间或温室中栽培或播种,并施用60毫升的剩下的生长促进剂至近根部的土壤,间隔14天施用等量的生长促进剂3次。
15.如权利要求14所述的方法,其中对土壤施用生长促进剂是通过第一次和第二次采用100%生长促进剂施用,第三次采用75%施用和第四次采用50%施用来进行的。
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