CN112410260A - 一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，选取荧光假单胞菌10份、苏云金芽孢杆菌5份、侧孢短芽孢杆菌3份、球形芽孢杆菌8份、发根农杆菌5份、吲哚黄杆菌4份和水50份，将荧光假单胞菌10份、苏云金芽孢杆菌5份、侧孢短芽孢杆菌3份、球形芽孢杆菌8份、发根农杆菌5份、吲哚黄杆菌4份均单独放入到培养基内，得到需要生物制剂原料。该防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，具有良好的促根生长效果，并可预防和抑制作物的青枯病、姜瘟病等土传病害的发生，同时可产生生长素类物质，促进作物根系生长，对病虫害均有很好的较好的防治效果，且具有解磷、解钾、固氮等生物活性，有利于提高蔬菜产量。
Description
技术领域
本发明涉及防治蔬菜病虫害技术领域，具体为一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法。
背景技术
病虫害是病害和虫害的并称，常对农、林、牧业等造成不良影响。在蔬菜种植过程中病虫害的发生无法避免，可以运用综合防治技术确保蔬菜绿色、安全、无污染。综合防治技术包括农业防治技术、物理防治技术、生物防治技术、化学防治技术等。
现有的蔬菜种植过程中需要使用生物制剂清洗液，但现在的生物制剂清洗液不能使得蔬菜具有解磷、解钾、固氮等生物活性，不能有利于提高作物产量，防虫害效果低，不能大量增生高度分支的根系，抗消毒剂性能低等，因此需要新的防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法。
发明内容
（一）解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，具备具有解磷、解钾、固氮等生物活性，有利于提高作物产量，防虫害效果强，大量增生高度分支的根系，抗消毒剂性能强等优点，解决了蔬菜容易受到病虫害的问题。
（二）技术方案
为实现上述具有解磷、解钾、固氮等生物活性，有利于提高作物产量，防虫害效果强，大量增生高度分支的根系，抗消毒剂性能强目的，本发明提供如下技术方案：一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、选取PGPR生物制剂原料
选取荧光假单胞菌10～20份、苏云金芽孢杆菌5～10份、侧孢短芽孢杆菌3～6份、球形芽孢杆菌8～16份、发根农杆菌5～15份、吲哚黄杆菌4～8份和水50～80份，将荧光假单胞菌10～20份、苏云金芽孢杆菌5～10份、侧孢短芽孢杆菌3～6份、球形芽孢杆菌8～16份、发根农杆菌5～15份、吲哚黄杆菌4～8份均单独放入到培养基内，以温度30～40摄氏度和湿度55%～75%下培养3～5天，得到需要生物制剂原料。
S2、原料的组合
将得到生物制剂原料荧光假单胞菌10～20份、苏云金芽孢杆菌5～10份、侧孢短芽孢杆菌3～6份、球形芽孢杆菌8～16份、发根农杆菌5～15份、吲哚黄杆菌4～8份，从单独的培养基中移至统一的大培养基中，继续培养1～4天，然后将得到融合的大培养基中的菌种分离出来，得到组合菌。
S3、制备生物制剂清洗液
将水50～80份放入蒸馏釜内加热蒸馏5～8小时，得到纯净无菌的水50～80份，在选取搅拌釜，通过高温蒸汽喷入到搅拌釜内，以高温对搅拌釜内壁进行高温杀菌，在将水50～80份放入搅拌釜内，搅拌釜将水50～80份先加热至100摄氏度沸腾，同时搅拌轴以500～600r/min持续不断的进行搅拌，在搅拌冷却至25～35摄氏度，将得到组合菌放入到搅拌釜内进行搅拌，且搅拌轴以800～900r/min搅拌10～30分钟，得到充分混合的生物制剂清洗液。
S4、清洗
将得到的生物制剂清洗液放入到喷药机内，且在喷药机内放入5～10升液体，放入1～2升的清水，保证清洗液和清水的比例为5：1，在定植时通过喷药机的喷嘴对蔬菜的根系进行喷洒清洗，同时，在清洗后准备一个容积为2～3升盆，在盆内放入1～3升的清洗液和清水的比例为5：1的混合液，将清洗后的蔬菜根系放入的清洗液内浸泡30～40分钟，最后移植到土壤内。
优选的，所述步骤S1中选取的荧光假单胞菌10～20份、苏云金芽孢杆菌5～10份、侧孢短芽孢杆菌3～6份、球形芽孢杆菌8～16份、发根农杆菌5～15份、吲哚黄杆菌4～8份有效活菌数至少为1～2亿/ml，且在培养基内培养后能够达到5～6亿/ml。
优选的，所述步骤S1中培养基的琼脂培养基，且培养基的面积为10～20平方米。
优选的，所述步骤S2中菌种分离首先配方换算在容器中加入少量蒸馏水，加入淀粉和少量冷水调成糊状，然后进行加热溶解，同时加热边搅拌以防止烧焦，然后调PH，用盐酸或NaOH把培养基调节到PH8～9，最后用滤纸或棉花进行过滤，过滤后将其三角瓶中灭菌，得到分离液，将培养基放入到分离液内，进行分离。
优选的，所述步骤S2将菌从单独的培养基中移至统一的大培养基中，直接将单独的培养基放入到大培养基内。
优选的，所述步骤S3中搅拌釜为搪瓷搅拌釜，且在进行杀菌时，直接将高温蒸汽通过喷嘴喷射在搪瓷搅拌釜的内表面，且在同一区域喷射杀菌120～160秒。
优选的，所述步骤S4中进行喷洒植物根系时，将植物根系斜45度对准喷嘴，同时在喷洗时保证每株蔬菜根系喷洒清洗时间为120～140秒。
优选的，所述步骤S4中将清洗液和清水的比例为5：1的混合液倒入2～3升盆内时，保证盆内的进行了杀菌。
（三）有益效果
与现有技术相比，本发明提供了一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，具备以下有益效果：
1、该防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，通过生物制剂清洗液内存在的荧光假单胞菌、苏云金芽孢杆菌和侧孢短芽孢杆菌能够具有良好的促根生长效果，并可预防和抑制青枯病、姜瘟病等土传病害的发生，同时可产生生长素类物质，促进作物根系生长，对病虫害均有很好的较好的防治效果，且具有解磷、解钾、固氮等生物活性，有利于提高蔬菜产量。
2、该防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，通过球形芽孢杆菌、发根农杆菌和吲哚黄杆菌，可以诱导蔬菜产生发状根，大量增生高度分支的根系，达到大量吸收养分快速生长的目的，同时对除草的消毒剂具有一定的抵抗作用。
具体实施方式
下面将结合本发明的实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例一：
一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，包括以下步骤：
S1、选取PGPR生物制剂原料
选取荧光假单胞菌10份、苏云金芽孢杆菌5份、侧孢短芽孢杆菌3份、球形芽孢杆菌8份、发根农杆菌5份、吲哚黄杆菌4份和水50份，将荧光假单胞菌10份、苏云金芽孢杆菌5份、侧孢短芽孢杆菌3份、球形芽孢杆菌8份、发根农杆菌5份、吲哚黄杆菌4份均单独放入到培养基内，以温度30摄氏度和湿度55%下培养3天，得到需要生物制剂原料，选取的荧光假单胞菌10份、苏云金芽孢杆菌5份、侧孢短芽孢杆菌3份、球形芽孢杆菌8份、发根农杆菌5份、吲哚黄杆菌4份有效活菌数至少为1亿/ml，且在培养基内培养后能够达到5亿/ml，培养基的琼脂培养基，且培养基的面积为10平方米。
S2、原料的组合
将得到生物制剂原料荧光假单胞菌10份、苏云金芽孢杆菌5份、侧孢短芽孢杆菌3份、球形芽孢杆菌8份、发根农杆菌5份、吲哚黄杆菌4份，从单独的培养基中移至统一的大培养基中，继续培养1天，然后将得到融合的大培养基中的菌种分离出来，得到组合菌，菌种分离首先配方换算在容器中加入少量蒸馏水，加入淀粉和少量冷水调成糊状，然后进行加热溶解，同时加热边搅拌以防止烧焦，然后调PH，用盐酸或NaOH把培养基调节到PH8，最后用滤纸或棉花进行过滤，过滤后将其三角瓶中灭菌，得到分离液，将培养基放入到分离液内，进行分离，将菌从单独的培养基中移至统一的大培养基中，直接将单独的培养基放入到大培养基内。
S3、制备生物制剂清洗液
将水50份放入蒸馏釜内加热蒸馏5小时，得到纯净无菌的水50份，在选取搅拌釜，通过高温蒸汽喷入到搅拌釜内，以高温对搅拌釜内壁进行高温杀菌，在将水50份放入搅拌釜内，搅拌釜将水50份先加热至100摄氏度沸腾，同时搅拌轴以500r/min持续不断的进行搅拌，在搅拌冷却至25摄氏度，将得到组合菌放入到搅拌釜内进行搅拌，且搅拌轴以800r/min搅拌10分钟，得到充分混合的生物制剂清洗液，搅拌釜为搪瓷搅拌釜，且在进行杀菌时，直接将高温蒸汽通过喷嘴喷射在搪瓷搅拌釜的内表面，且在同一区域喷射杀菌120秒。
S4、清洗
将得到的生物制剂清洗液放入到喷药机内，且在喷药机内放入5升液体，放入1升的清水，保证清洗液和清水的比例为5：1，在定植时通过喷药机的喷嘴对蔬菜的根系进行喷洒清洗，同时，在清洗后准备一个容积为2升盆，在盆内放入1升的清洗液和清水的比例为5：1的混合液，将清洗后的蔬菜根系放入的清洗液内浸泡30分钟，最后移植到土壤内，将清洗液和清水的比例为5：1的混合液倒入2升盆内时，保证盆内的进行了杀菌，进行喷洒植物根系时，将植物根系斜45度对准喷嘴，同时在喷洗时保证每株蔬菜根系喷洒清洗时间为120秒。
实施例二：
一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，包括以下步骤：
S1、选取PGPR生物制剂原料
选荧光假单胞菌15份、苏云金芽孢杆菌6份、侧孢短芽孢杆菌5份、球形芽孢杆菌10份、发根农杆菌7份、吲哚黄杆菌5份，将荧光假单胞菌15份、苏云金芽孢杆菌6份、侧孢短芽孢杆菌5份、球形芽孢杆菌10份、发根农杆菌7份、吲哚黄杆菌5份均单独放入到培养基内，以温度35摄氏度和湿度65%下培养4天，得到需要生物制剂原料，选取的荧光假单胞菌15份、苏云金芽孢杆菌6份、侧孢短芽孢杆菌5份、球形芽孢杆菌10份、发根农杆菌7份和吲哚黄杆菌5份有效活菌数至少为1.5亿/ml，且在培养基内培养后能够达到5.5亿/ml，培养基的琼脂培养基，且培养基的面积为15平方米。
S2、原料的组合
将得到生物制剂原料荧光假单胞菌15份、苏云金芽孢杆菌6份、侧孢短芽孢杆菌5份、球形芽孢杆菌10份、发根农杆菌7份、吲哚黄杆菌5份，从单独的培养基中移至统一的大培养基中，继续培养2天，然后将得到融合的大培养基中的菌种分离出来，得到组合菌，菌种分离首先配方换算在容器中加入少量蒸馏水，加入淀粉和少量冷水调成糊状，然后进行加热溶解，同时加热边搅拌以防止烧焦，然后调PH，用盐酸或NaOH把培养基调节到PH8.5，最后用滤纸或棉花进行过滤，过滤后将其三角瓶中灭菌，得到分离液，将培养基放入到分离液内，进行分离，将菌从单独的培养基中移至统一的大培养基中，直接将单独的培养基放入到大培养基内。
S3、制备生物制剂清洗液
将水60份放入蒸馏釜内加热蒸馏7小时，得到纯净无菌的水60份，在选取搅拌釜，通过高温蒸汽喷入到搅拌釜内，以高温对搅拌釜内壁进行高温杀菌，在将水60份放入搅拌釜内，搅拌釜将水60份先加热至100摄氏度沸腾，同时搅拌轴以550r/min持续不断的进行搅拌，在搅拌冷却至30摄氏度，将得到组合菌放入到搅拌釜内进行搅拌，且搅拌轴以580r/min搅拌20分钟，得到充分混合的生物制剂清洗液，搅拌釜为搪瓷搅拌釜，且在进行杀菌时，直接将高温蒸汽通过喷嘴喷射在搪瓷搅拌釜的内表面，且在同一区域喷射杀菌140秒。
S4、清洗
将得到的生物制剂清洗液放入到喷药机内，且在喷药机内放入7升液体，放入1.5升的清水，保证清洗液和清水的比例为5：1，在定植时通过喷药机的喷嘴对蔬菜的根系进行喷洒清洗，同时，在清洗后准备一个容积为2.5升盆，在盆内放入2升的清洗液和清水的比例为5：1的混合液，将清洗后的蔬菜根系放入的清洗液内浸泡35分钟，最后移植到土壤内，将清洗液和清水的比例为5：1的混合液倒入2.5升盆内时，保证盆内的进行了杀菌，进行喷洒植物根系时，将植物根系斜45度对准喷嘴，同时在喷洗时保证每株蔬菜根系喷洒清洗时间为130秒。
实施例三：
一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，包括以下步骤：
S1、选取PGPR生物制剂原料
选取荧光假单胞菌20份、苏云金芽孢杆菌10份、侧孢短芽孢杆菌6份、球形芽孢杆菌16份、发根农杆菌15份、吲哚黄杆菌8份和水80份，将荧光假单胞菌20份、苏云金芽孢杆菌10份、侧孢短芽孢杆菌6份、球形芽孢杆菌16份、发根农杆菌15份、吲哚黄杆菌8份均单独放入到培养基内，以温度40摄氏度和湿度75%下培养5天，得到需要生物制剂原料，选取的荧光假单胞菌20份、苏云金芽孢杆菌10份、侧孢短芽孢杆菌6份、球形芽孢杆菌16份、发根农杆菌15份、吲哚黄杆菌8份有效活菌数至少为2亿/ml，且在培养基内培养后能够达到6亿/ml，培养基的琼脂培养基，且培养基的面积为20平方米。
S2、原料的组合
将得到生物制剂原料荧光假单胞菌20份、苏云金芽孢杆菌10份、侧孢短芽孢杆菌6份、球形芽孢杆菌16份、发根农杆菌15份、吲哚黄杆菌8份，从单独的培养基中移至统一的大培养基中，继续培养4天，然后将得到融合的大培养基中的菌种分离出来，得到组合菌，菌种分离首先配方换算在容器中加入少量蒸馏水，加入淀粉和少量冷水调成糊状，然后进行加热溶解，同时加热边搅拌以防止烧焦，然后调PH，用盐酸或NaOH把培养基调节到PH9，最后用滤纸或棉花进行过滤，过滤后将其三角瓶中灭菌，得到分离液，将培养基放入到分离液内，进行分离，将菌从单独的培养基中移至统一的大培养基中，直接将单独的培养基放入到大培养基内。
S3、制备生物制剂清洗液
将水80份放入蒸馏釜内加热蒸馏8小时，得到纯净无菌的水80份，在选取搅拌釜，通过高温蒸汽喷入到搅拌釜内，以高温对搅拌釜内壁进行高温杀菌，在将水80份放入搅拌釜内，搅拌釜将水80份先加热至100摄氏度沸腾，同时搅拌轴以600r/min持续不断的进行搅拌，在搅拌冷却至35摄氏度，将得到组合菌放入到搅拌釜内进行搅拌，且搅拌轴以900r/min搅拌30分钟，得到充分混合的生物制剂清洗液，搅拌釜为搪瓷搅拌釜，且在进行杀菌时，直接将高温蒸汽通过喷嘴喷射在搪瓷搅拌釜的内表面，且在同一区域喷射杀菌160秒。
S4、清洗
将得到的生物制剂清洗液放入到喷药机内，且在喷药机内放入10升液体，放入2升的清水，保证清洗液和清水的比例为5：1，在定植时通过喷药机的喷嘴对蔬菜的根系进行喷洒清洗，同时，在清洗后准备一个容积为3升盆，在盆内放入3升的清洗液和清水的比例为5：1的混合液，将清洗后的蔬菜根系放入的清洗液内浸泡40分钟，最后移植到土壤内，将清洗液和清水的比例为5：1的混合液倒入3升盆内时，保证盆内的进行了杀菌，进行喷洒植物根系时，将植物根系斜45度对准喷嘴，同时在喷洗时保证每株蔬菜根系喷洒清洗时间为140秒。
该防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，通过生物制剂清洗液内存在的荧光假单胞菌、苏云金芽孢杆菌和侧孢短芽孢杆菌能够具有良好的促根生长效果，并可预防和抑制青枯病、姜瘟病等土传病害的发生，同时可产生生长素类物质，促进作物根系生长，对病虫害均有很好的较好的防治效果，且具有解磷、解钾、固氮等生物活性，有利于提高蔬菜产量；通过球形芽孢杆菌、发根农杆菌和吲哚黄杆菌，可以诱导蔬菜产生发状根，大量增生高度分支的根系，达到大量吸收养分快速生长的目的，同时对除草的消毒剂具有一定的抵抗作用。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (8)
1.一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、选取PGPR生物制剂原料
选取荧光假单胞菌10～20份、苏云金芽孢杆菌5～10份、侧孢短芽孢杆菌3～6份、球形芽孢杆菌8～16份、发根农杆菌5～15份、吲哚黄杆菌4～8份和水50～80份，将荧光假单胞菌10～20份、苏云金芽孢杆菌5～10份、侧孢短芽孢杆菌3～6份、球形芽孢杆菌8～16份、发根农杆菌5～15份、吲哚黄杆菌4～8份均单独放入到培养基内，以温度30～40摄氏度和湿度55%～75%下培养3～5天，得到需要生物制剂原料，
S2、原料的组合
将得到生物制剂原料荧光假单胞菌10～20份、苏云金芽孢杆菌5～10份、侧孢短芽孢杆菌3～6份、球形芽孢杆菌8～16份、发根农杆菌5～15份、吲哚黄杆菌4～8份，从单独的培养基中移至统一的大培养基中，继续培养1～4天，然后将得到融合的大培养基中的菌种分离出来，得到组合菌，
S3、制备生物制剂清洗液
将水50～80份放入蒸馏釜内加热蒸馏5～8小时，得到纯净无菌的水50～80份，在选取搅拌釜，通过高温蒸汽喷入到搅拌釜内，以高温对搅拌釜内壁进行高温杀菌，在将水50～80份放入搅拌釜内，搅拌釜将水50～80份先加热至100摄氏度沸腾，同时搅拌轴以500～600r/min持续不断的进行搅拌，在搅拌冷却至25～35摄氏度，将得到组合菌放入到搅拌釜内进行搅拌，且搅拌轴以800～900r/min搅拌10～30分钟，得到充分混合的生物制剂清洗液，
S4、清洗
将得到的生物制剂清洗液放入到喷药机内，且在喷药机内放入5～10升液体，放入1～2升的清水，保证清洗液和清水的比例为5：1，在定植时通过喷药机的喷嘴对蔬菜的根系进行喷洒清洗，同时，在清洗后准备一个容积为2～3升盆，在盆内放入1～3升的清洗液和清水的比例为5：1的混合液，将清洗后的蔬菜根系放入的清洗液内浸泡30～40分钟，最后移植到土壤内。
2.根据权利要求1所述的一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，其特征在于，所述步骤S1中选取的荧光假单胞菌10～20份、苏云金芽孢杆菌5～10份、侧孢短芽孢杆菌3～6份、球形芽孢杆菌8～16份、发根农杆菌5～15份、吲哚黄杆菌4～8份有效活菌数至少为1～2亿/ml，且在培养基内培养后能够达到5～6亿/ml。
3.根据权利要求1所述的一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，其特征在于，所述步骤S1中培养基的琼脂培养基，且培养基的面积为10～20平方米。
4.根据权利要求1所述的一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，其特征在于，所述步骤S2中菌种分离首先配方换算在容器中加入少量蒸馏水，加入淀粉和少量冷水调成糊状，然后进行加热溶解，同时加热边搅拌以防止烧焦，然后调PH，用盐酸或NaOH把培养基调节到PH8～9，最后用滤纸或棉花进行过滤，过滤后将其三角瓶中灭菌，得到分离液，将培养基放入到分离液内，进行分离。
5.根据权利要求1所述的一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，其特征在于，所述步骤S2将菌从单独的培养基中移至统一的大培养基中，直接将单独的培养基放入到大培养基内。
6.根据权利要求1所述的一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，其特征在于，所述步骤S3中搅拌釜为搪瓷搅拌釜，且在进行杀菌时，直接将高温蒸汽通过喷嘴喷射在搪瓷搅拌釜的内表面，且在同一区域喷射杀菌120～160秒。
7.根据权利要求1所述的一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，其特征在于，所述步骤S4中进行喷洒植物根系时，将植物根系斜45度对准喷嘴，同时在喷洗时保证每株蔬菜根系喷洒清洗时间为120～140秒。
8.根据权利要求1所述的一种防治蔬菜病虫害的根际促生菌清洗定植方法，其特征在于，所述步骤S4中将清洗液和清水的比例为5：1的混合液倒入2～3升盆内时，保证盆内的进行了杀菌。
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| CN116790426A (zh) * | 2023-06-16 | 2023-09-22 | 西南大学 | 一株减少植物磷肥施用的黄杆菌菌株及其应用 |
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| JP2015188374A (ja) * | 2014-03-28 | 2015-11-02 | 公益財団法人東洋食品研究所 | 養液栽培方法および養液栽培に使用する菌株 |
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