CN1698898A

CN1698898A - 生物降解型眼植入剂

Info

Publication number: CN1698898A
Application number: CN 200510046302
Authority: CN
Inventors: 何伟
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2005-04-25
Filing date: 2005-04-25
Publication date: 2005-11-23

Abstract

本发明涉及医药领域，是一种生物降解型眼植入剂。本发明包括作为主要载体的壳聚糖和有效药物成分；制成薄膜、管状、栓剂、微粒等，植入眼组织后，可在局部缓慢释放有效药物成分，一定时期后自身被降解吸收，不需用手术取出。主要适用于眼科手术后、眼外伤及其他需要长期给药的多种眼科疾患，本发明治疗范围广且治疗效果好。

Description

生物降解型眼植入剂

所属技术领域

本发明涉及眼科治疗用的植入剂，尤其是包括作为主要载体的壳聚糖和有效药物成分的一种生物降解型眼植入剂。

背景技术

现今，全身给药(口服或注射)和局部给药(眼药水/药膏点眼或局部注射)是治疗眼病的最常用给药途径，但许多眼科疾病的治疗常因药物难以透入眼内而受到困扰。全身给药后受血—眼屏障、血浆蛋白结合等多种因素影响，药物进入眼内的量很少，难以达到有效的治疗浓度；局部点眼后由于受泪液的稀释、冲洗，大部分药物或渗出眼外或从泪小管排出，仅有很小部分通过角膜进入眼内，而抵达玻璃体及眼后节组织的药量则更少，另外，长期频繁的点眼给患者的生活带来不便，其中的防腐剂成分也造成干眼症等一系列并发症。为此，长期以来研究眼科局部用药缓释制剂就成为各国眼科药物工作者的追求目标。

国外一些著名眼科制药机构研发出了一些可长期局部起效的眼用药剂。如曲安奈德是合成的皮质类固醇，现临床用于治疗黄斑水肿，玻璃体注射给药，可长期维持作用。但其玻璃体腔注射给药的方式有一系列的并发症，如：视网膜脱离、玻璃体积血、白内障等，这便限制了其临床广泛应用。另该制剂的微小颗粒悬浮于玻璃体内，影响眼内间质的清晰度，也妨碍临床应用。

发明内容

为了解决上述存在的问题，本发明提供一种应用范围广、治疗效果好的生物降解型眼植入剂，本发明可使有效药物成分长期在眼内达到有效治疗浓度，主要适用于眼科手术后、眼外伤及其他需要长期给药的多种眼科疾患。

本发明提供生物降解型眼植入剂，包括作为主要载体的壳聚糖和有效药物成分，其重量比1∶0.001～1。所述的壳聚糖的脱乙酰度为75～95％。

还包括胶原和聚乳酸，壳聚糖与胶原与聚乳酸的重量比1∶0∶0～1∶0.8∶0.8。

所述有效药物成分为生长因子或其单克隆抗体或其受体的单克隆抗体或抗炎药物或环孢霉素A的一种或几种。

所述生长因子可为转化生长因子、成纤维细胞生长内子、血小板源性生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子、肿瘤坏死因子、白细胞介素-1、纤维粘连蛋白、血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子等。

所述有效药物成分为抗真菌药物，如氟康唑、纳他霉素等。

所述有效药物成分为神经营养因子，如脑源性神经营养因子、碱性成纤维细胞生长因子等。

所述的抗炎药物为地塞米松、氧氟沙星、三羟皮质类固醇等。

本发明还提供上述生物降解型眼植入剂的制备方法。

制备方法如下：(1)采用脱乙酰度为75～95％的壳聚糖，以1～6％(重量百分比)比例加入2％醋酸溶液中，(根据不同需要加入一定比例胶原、消旋聚乳酸)混合，摇匀；(2)逐渐加入有效药物成分，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.01％～0.2％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，封袋备用。

本发明可制成薄膜、微粒、片状、杆状、栓剂等，植入机体组织后，可在体内进行降解而被吸收，因而不需用手术取出释药后的植入剂。

下面结合病症进行详细说明：

1)用于青光眼滤过术中以提高手术成功率的添加性药膜

青光眼是一种常见的可致盲的眼病，已居致盲眼病的第二位。滤过性手术对于大部分青光眼患者来说仍是控制眼压、维持视功能的最主要的途径。而术后滤过道瘢痕化是导致手术失败的主要因素。实验研究和临床应用证实，辅以抗增殖药物(丝裂霉素、5-氟尿嘧啶/5-FU等)，可明显抑制瘢痕形成，提高手术成功率，但由此产生的毒副作用不容忽视。随着分子生物学的发展，青光眼术后伤口愈合过程及其调节机制进一步得以阐明，在滤过术后伤口的瘢痕化过程中各种生长因子(转化生长因子、成纤维细胞生长内子、血小板源性生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子、肿瘤坏死因子、白细胞介素-1、纤维粘连蛋白等) (英文缩写分别为TGF、FGF、PDGF、IGF、EGF、TNF、IL-1、FN，)起关键作用。它们的抗体及各自受体的抗体被证实有抗瘢痕的作用，但连续结膜下给药的方式限制了临床的应用。

本发明选取这些生长因子及相应受体的单克隆抗体的一种或几种作为有效药物成分，制备出添加性药膜，滤过术中采用结膜下或巩膜瓣下一次性植入的方式，依靠壳聚糖自身的抗瘢痕、抗炎作用和药膜的机械阻隔保证滤过道的通畅，增加滤过手术的成功率。该膜性眼植入剂复合的有效药物主要为细胞因子及其受体的单克隆抗体，因此无明显的毒副作用，并采用术中一次性给药的方式，避免了反复结膜下注射，便于临床应用；另药膜一定时期后可降解吸收，降解产物无毒副作用。

2)人工晶体携带型缓释药物套管

目前现有的人工晶体结构本身不携带有药物，因此对白内障患者做完人工晶体植入手术后，需对术后患者进行点药治疗。对术后眼部消炎一般使用激素类及非激素类抗炎药进行2～3个月的连续点眼药治疗，一天需点药3～6次。预防术后的葡萄膜炎及纤维增生，防止急性虹膜睫状体炎等症，防止后发性白内障及黄斑水肿的发生；同时配合使用广普抗菌药物如氧氟沙星滴眼液，抑制细菌性结膜炎、角膜炎、泪囊炎、术后感染等外眼感染。另外，一般情况下，在术后第1，2，7，15，30，60天时需要到医院复诊。因此现有的晶体有以下不足：术后护理时间长；术后炎症比较常见，易出现后囊混浊，机化组织增生导致后发性白内障；使用点眼的方法使得眼内药物浓度出现周期性偏高、偏低、短缺现象，波动较大，不能平稳抗菌抗炎，且在前房内的药物不能达到有效浓度时，极易导致各类炎症的发生；频繁的点眼给患者增加了生活的不便；眼水中的防腐剂成分致使干眼症的发生。

本发明选用地塞米松等激素类药物和上述瘢痕化过程中起决定作用的生长因子相关抗体作为有效药物成分，制备出了人工晶体携带型缓释药物套管。术中，于植入晶体前将其固定在晶体袢根部，与晶体一同植入囊袋内。该缓释药物套管不影响人工晶体的植入，术后可在患眼中持续平稳地释放有效药物成分，达到有效控制白内障手术术后炎症反应、降低后发性白内障的发生率的作用。

3)玻璃体腔缓释药栓

①PVR(增殖性玻璃体视网膜病变)是视网膜脱离手术失败的最普遍原因，皮质类激素和抗代谢药物被证明有抗增殖作用，但由于药物在玻璃体内半衰期短而须反复玻璃体内注射方能维持有效药物浓度。因此带来的一系列并发症如：视网膜脱离、玻璃体积血、白内障等，限制了其应用。

本发明选用地塞米松等激素类药物和上述瘢痕化过程中起决定作用的生长因子相关抗体作为有效药物成分，研制出玻璃体腔缓释药栓，术中由玻璃体切除穿刺口向玻璃体腔一次性植入该药栓。药栓由缝线固定于睫状体平坦部，使得有效药物成分在玻璃体内达到长期有效浓度。药栓一定时期后可降解吸收，降解产物对网膜无毒副作用。

②眼穿通伤手术后皮质激素是不可替代的治疗手段，临床上常用球结膜下注射或全身给药，其每日注射的痛苦及全身给药的不良反应是其缺点。本发明采用如上①所述的药栓，术中采用一次性睫状体平坦部植入玻璃体腔的方式给药，克服了以往治疗的缺点，起到了更好的抑制炎症反应及组织增生的作用。

③葡萄膜炎是一种慢性而又难治的眼科疾患，常需要一定时期内维持全身和局部应用皮质激素类抗炎药。但长期全身应用激素产生的一系列并发症和反复结膜下注射方式的局部给药一直困扰着眼科医生。本发明以地塞米松等激素类药物为有效药物成分，研制的玻璃体腔缓释药栓可采用一次性睫状体平坦部植入的方式给药，使得有效药物成分在眼内局部达到长期有效浓度，解决了全身用药副作用大和局部频繁给药不便和难以起效的缺点，提高了该难治眼病的治愈率。

④各种原因导致的视神经萎缩一直是眼科的难治性疾患。本发明以神经营养因子(脑源性神经营养因子/BDNF、碱性成纤维细胞生长因子/bFGF等)为有效药物成分，研制的玻璃体腔缓释药栓对该类眼疾治疗效果显著。

⑤目前对于眼内新生血管形成性疾病(如糖网症、视网膜静脉阻塞、湿性老年性黄斑变性、病理性近视等)尚无有效治疗方法。本发明以三羟皮质类固醇(THS)及促新生而管生成的生长因子(血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子等) (英文缩写分别为VEGF、HGF、FGF等)及其受体的抗体为有效药物成分，研制的玻璃体腔缓释药栓对该类眼疾的治疗有一定效果。

4)抑制角膜移植排斥反应的植入药膜

角膜移植是治疗难治性角膜病变的有效方法，虽然因角膜特殊的解剖结构和免疫学特点，角膜移植在器官移植成功率最高，但排斥反应仍然是该手术失败的主要原因。环孢霉素A(CsA)对角膜移植排斥反应有很好的抑制作用，特别是对高危病例(如角膜血管化或有排斥反应史的病例)具有良好的疗效。但全身应用伴随很多不良反应如胃肠道刺激，肝、肾毒性等；滴眼液点眼由于角膜透性低和迅速从结膜囊内冲走等缺点，亦不是最好的治疗方法。

本发明将CsA作为有效药物成分，研制出CsA缓释药膜，采用角膜移植术中结膜下一次性植入的方式给药，解决了全身应用副作用大和局部点眼效果差的缺点，大大提高了角膜移植手术的成功率。

5)替代羊膜用于眼表重建的药膜

眼表是指位于上下睑缘之间的包括角结膜在内的区域，有人统计，在眼科门诊就医的病人中有20％以上是眼表疾病患者。

翼状胬肉是最常见的眼表疾病，手术切除后的极大复发率一直困扰着广大眼科学者。有人采用人羊膜移植的方法大大降低了其术后复发率，但医用羊膜的取材、保存不便和使用前要经过严格的乙肝、爱滋病病毒排查等缺点限制了其在临床的广泛应用。本发明研制的以抗瘢痕及促上皮生长的药物为有效药物成分的缓释膜剂，可以起到与羊膜相似降低胬肉术后复发率的作用，且克服了羊膜的取材、保存、使用不便的缺点。同时该缓释膜剂还可用于睑球粘连分离手术中。

烧伤(热灼伤、酸碱化学伤)导致的角膜急性糜烂溶解属于难治性眼外伤疾患，有人用羊膜覆盖术提高了该组眼病的治疗成功率。本发明研制的交联EGF、bFGF等促修复细胞因子药物的膜剂同样提高了该组眼病的治愈率。

蚕食性角膜溃疡是一种与免疫相关的难治性角膜溃疡，现有药物和手术治疗的成功率均较低，板层角膜移植和羊膜移植一定程度提高了治愈率。本发明以环孢霉素A、地塞米松及促组织上皮修复细胞因子为有效药物成分，制备了用于治疗该眼病的膜型药剂，效果显著。在此基础上本发明还进一步研发出了治疗真菌性(以氟康唑为有效药物成分)角膜溃疡的药膜。

本发明眼植入剂选用壳聚糖作为缓释药物的载体的主要成分，它是一种新型天然生物材料，有良好的生物相容性，无抗原性，在体内可降解，无有害降解产物，根据脱乙酰度的大小可调整药物缓释速率。另外，其自身亦有一定的抗炎、止血、抗瘢痕等作用。其价格低廉、来源广泛，便于进行规模生产和实现产业化，是一种安全有效、使用方便、与人眼组织有良好的生物相容性并可长期保存的眼科治疗用新型缓释药剂。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步具体描述，但本发明的实施方式不限于此。

实验例1

用于青光眼滤过术中以提高手术成功率的添加性药膜

选取24只12～14周龄体重在1.5～2.5kg的新西兰大耳白兔(雌雄不限)，15g/L巴比妥钠静注全麻，进行模拟人眼的经典青光眼滤过术(上穹隆为基底的结膜瓣，角膜缘为基底的4×4mm距形巩膜瓣，小梁切去大小为1×1.5mm)，随机分为两组，由同一熟练手术医生完成手术。实验组在缝合巩膜瓣之前，以巩膜瓣下及结膜下一次性植入略小于巩膜瓣的该添加性药膜，按常规步骤完成其余手术操作。对照组为空白组，术中未添加药物。术后观察一个月，记录眼压、滤过泡情况，并于术后7、14、21、28天分别用气栓法处死动物，取手术区角巩膜组织标本，进行病理、组织化学染色检查。结果：24眼术前平均眼压为2.85kPa，植入药膜眼术后1、2、3、4周眼压分别为1.42、1.51、1.59、1.86kPa，对照组术后眼压分别为1.44、1.94、2.26、2.87kPa。实验组与对照组相比：植入添加性药膜眼低于对照眼，术后1、2周差异无显著性，p＞0.05，术后3、4周差异有显著性，p＜0.05。植入添加性药膜眼术后1～4周眼压分别与术前平均眼压2.85kPa比较，差异有显著性p＜0.05。滤过泡情况：按Khaw法分级滤过泡，术后14天对照眼滤过泡分级值为0，植入添加性药膜眼为1.8；差异有显著性，即对照组术后2周滤过泡消失，植入添加性药膜组术后2～4周仍可见。局部组织标本的病理、组织化学染色检查：显示植入添加性药膜组局部仅有少量炎症细胞浸润，滤过道成纤维细胞相对较少，28天时药膜基本消失，滤过道仍通畅；对照组滤过道成纤维细胞较多，7天生长最为旺盛，滤过道即大部分阻塞，14天变为不活跃的细胞，28天成纤维细胞基本消失，代以胶原沉积。

此动物实验表明，该植入剂可有效抑制青光眼滤过术后的瘢痕化过程，保持滤过道通畅，增加青光眼滤过手术成功率。

实验例2

人工晶体携带型缓释药物套管

选取30只12～14周龄体重在1.5～2.5kg的新西兰大耳白兔(雌雄不限)，15g/L巴比妥钠静注全麻，进行模拟人眼晶体植入手术(单眼)，随机分为两组，由同一熟练手术医生完成手术。实验组植入携带有该缓释药物套管的人工晶体，对照组植入同型号未携带该缓释药物套管的人工晶体。术后对照组通过人工操作滴眼(0.1％地塞米松，每日四次)，实验组不予点眼只给常规包眼。术后观察一个月，并每天抽取前房水进行药物浓度测定。结果实验组术后第1天房水中地塞米松浓度高达2.15μg/ml，而且0.15μg/ml～0.38μg/ml的有效药物浓度可保持15天左右，15天以后房水中地塞米松的浓度慢慢衰减至无法测出；对照组每天测得的地塞米松浓度波动较大，常常低于有效药物浓度，在0.08～0.20μg/ml间，平均为0.16μg/ml。实验组15只兔术眼无一只出现明显炎症反应(前房tydall(-)～(+))；对照组术眼均出现不同程度炎症反应(前房内tydall(+)～(++++))，两只继发眼内炎。于术后15、20、30天对实验组兔进行气栓法处死，进行组织病理学检查，未发现明显眼内毒性反应，套管载体可于20～30天内完全代谢消失。

此动物实验表明，该人工晶体携带型缓释药物套管可在眼内缓慢释放药物，使一定时期药物达有效浓度。15天左右的局部有效浓度，有效的控制了沿着，这恰好是白内障术后反应最重的时期。

另将该人工晶体携带型缓释药物套管在本院进行临床应用，选取志愿者中50名50～60岁年龄组的双眼白内障患者，排除其它眼部疾患，由同一熟练超乳手术医生进行手术，进行一眼植入携带有该缓释药物套管的人工晶体，对侧眼植入同型号未携带该缓释药物套管的人工晶体。术后2周内密切观察，并进行长达1年的随访。结果显示：植入该缓释药物套管的眼对该植入剂耐受良好，2周内均未出现明显炎症反应(前房tydall(-)～(+))及眼内毒性(角膜内皮情况术前后变化与对侧无明显差异p＞0.05)。一年的随访结果显示后发性白内障的发生率(4％)较未植入侧(18％)明显降低。表明该人工晶体携带型缓释药物套管用于人体有较好的的安全性和可耐受性，并可明显降低后发性白内障的发生率。

实验例3

玻璃体腔缓释药栓

1)选取24只12～14周龄体重在1.5～2.5kg的新西兰大耳白兔(雌雄不限)，随机分为两组，15g/L巴比妥钠静注全麻，采用中轴部玻璃体切除联合成纤维细胞注入术构建兔PVR模型，对照组即封闭玻璃体切除的穿刺口，完成手术；实验组术中从玻切穿刺口向玻璃体腔一次性植入该玻璃体腔缓释药栓，并用缝线固定于局部。术后观察2个月，第1、3、5、7天，以后每周1次，用裂隙灯检查实验兔眼前节有无炎性反应，间接检眼镜观察眼底。2个月时处死进行组织病理学检查。结果：眼前节反应：术后1～3天各组实验兔角膜透明，房水闪光1～2级；5天后反应减轻；约1周消失。眼后节病变：术后1～3周，各组兔眼病变过程相似，各组兔眼玻璃体腔均不同程度残余条索状物，未出现髓线抬高现象。术后3～4周对照组牵引条索明显，视网膜出现牵拉裂孔，局部视网膜脱离，严重者出现大范围视网膜脱离，可见片状增殖膜；实验组眼内改变不明显。两组平均PVR等级分布比较：对照组2周时1.47±0.44，4周时1.75±0.56，6周时2.55±0.72，8周时2.68±0.40；植入该玻璃体药栓组2周时1.00±0.00，4周时1.00±0.00，6周时0.89±0.54，8周时0.89±0.38，组PVR明显较对照组轻微，有显著性差异。组织病理学检查：术后8周，组植入该玻璃体药栓兔眼组织病理切片HE染色观察，视网膜厚度正常，各层结构清晰，未见细胞丢失、坏死及萎缩改变；对照组兔眼视网膜表现为视网膜神经上皮层不完整，视网膜前可见片状增殖膜。

此动物实验证实了玻璃体切割术中植入该玻璃体腔缓释药栓能抑制和延缓PVR发生。

2)选取24只12～14周龄体重在1.5～2.5kg的新西兰大耳白兔(雌雄不限)，随机分为两组。15g/L巴比妥钠静注全麻，行眼赤道后穿刺，挤出0.5ml玻璃体，缝合伤口，注入平衡盐液恢复眼压，完成眼穿通伤兔膜型。实验组继续手术植入药栓，对照组(空白组)即完成手术。实验组12点位行睫状体平坦部穿刺，植入同1)所用之药栓，置于局部玻璃体腔，缝线固定。术后1、4、7、14、28天检查眼底及玻璃体情况，术后7、14天行造影检查眼底，28天处死动物进行组织病理检查。结果：两组视网膜脱离情况：植入药栓组0级9只眼，1级12只眼，2级2只眼，3级1只眼；对照组0级0只眼，1级6只眼，2级12只眼，3级6只眼，植入药栓组明显低于对照组，差异显著，p＜0.05。玻璃体混浊情况：植入药栓组0级7只眼，1级11只眼，2级4只眼，3级2只眼；对照组0级1只眼，1级8只眼，2级8只眼，3级7只眼，植入药栓组明显低于对照组，差异显著，p＜0.05。荧光造影检查：植入药栓组眼底清晰可见，无荧光遮蔽；对照组玻璃体混浊，眼底模糊，有荧光遮蔽，伤口附近有血管渗漏。28天组织病理学检查结果未见眼底网膜有毒性反应。

此动物实验表明，该玻璃体腔缓释药栓可有效减轻眼穿通伤后的炎症反应，并减少组织增生，降低视网膜脱离继发损害的发生率。

3)购买慢性全葡萄膜炎兔膜型20只(中国医科大学动物实验基地提供)，随机分为两组。15g/L巴比妥钠静注全麻，实验组12点位行睫状体平坦部穿刺，植入玻璃体腔缓释药栓，置于局部玻璃体腔，缝线固定。对照组行局部点眼(0.1％地塞米松，每日四次)。观察3个月，定期用裂隙灯检查眼前节、眼底镜检查眼底及玻璃体，每周玻璃体腔抽液测药物浓度。3个月后气栓法处死动物，组织病理学检查。结果：植入玻璃体腔缓释药栓组玻璃体腔地塞米松有效浓度2.5±1.2μg/ml可维持长达3个月，以后局部地塞米松的浓度慢慢衰减至无法测出；对照组每周测得的地塞米松浓度波动较大，药物浓度只达0.08～0.20μg/ml，平均为0.16μg/ml，二者存在显著差异。植入剂治疗组的前房闪辉在一周内由3级改善至1级，玻璃体混浊程度一周内由4级改善至1级，眼底亦清晰可见；对照组改善情况不明显，玻璃体混浊程度3周后始改善，方模糊可见眼底。组织病理学检查：三个月时植入的药栓大部分降解，存留约20％，未见眼内网膜毒性反应。

此动物实验证实该玻璃体腔缓释药栓对慢性葡萄膜炎的治疗可起到较好的效果。

4)选取24只12～14周龄体重在1.5～2.5kg的新西兰大耳白兔(雌雄不限)，15g/L巴比妥钠静注全麻，以球后夹持视神经的方法制作视神经萎缩兔膜型，随机分为两组，实验组于12点位睫状体平坦部植入神经营养因子(脑源性神经营养因子/BDNF，碱性成纤维细胞生长因子/bFGF等)为有效药物成分的该药栓，置于局部玻璃体腔，缝线固定；对照组为空白组。术后常规涂红霉素眼膏预防感染(日一次，共7天)。术后观察2个月，之后气栓法处死动物，取视网膜铺片并进行节细胞计数，并进行组织病理检查。结果：植入组和空白对照组节细胞密度分别为为2 088和1 897个/mm³，组间比较，差异无显著意义(方差分析，P＞0.05)；节细胞平均存活率分别为59.98％、49.48％，两比较，差异有显著意义(t检验，P＝0.034)。组织病理学检查：术后2个月，植入的药栓大部分降解，存留约35％，未见眼内网膜毒性反应。

此动物实验表明该药栓对视神经萎缩有一定的治疗作用。

5)以高浓度氧(98％)培养幼兔12只，制作新生血管性眼病兔模型。眼底检查见大量新生血管后，用于实验。用0.01g/L速麻安2号注射液0.15ml/kg臀部肌注，麻醉后固定，睫状体平坦部植入以三羟皮质类固醇(THS)及促新生血管生成的生长因子(VEGF、HGF、FGF等)及其受体的抗体为有效药物成分的该种缓释药栓，术后常规涂红霉素眼膏预防感染(日一次，共7天)。术后观察2个月，每周行眼底检查，4周时行荧光血管造影检查，气栓法处死动物，行组织病理学检查。结果：眼底检查平均2周始见新生血管消退，4周后消退明显。4周时行荧光血管造影检查，仅见少量荧光渗漏；2个月后术眼标本组织病理学检查见网膜厚度正常，各层结构清晰，未见新生血管；植入的药栓大部降解，尚存约30％，未见眼内毒性反应。

此动物实验表明该药栓对新生血管性眼病有很好的治疗作用。

实验例4

抑制角膜移植排斥反应的植入药膜

选取24只12～14周龄体重在1.5～2.5kg的新西兰大耳白兔(雌雄不限)，15g/L巴比妥钠静注全麻，模拟人穿透性角膜移植术进行同种异体兔眼角膜移植实验，(供体角膜植片取自12只家兔，手术由同一熟练手术医生完成)。随机分为两组，实验组在缝合供体角膜植片后，结膜下植入以CsA为有效药物成分的缓释药膜；对照组术中不植入药膜，采用术后人工操作滴眼(环孢霉素A滴眼液，每日四次)。术后3个月内定期裂隙灯观察术眼眼前节、角膜植片情况，于术后1、2、4、8、12周时气栓法处死动物，检测全身及角膜、结膜、巩膜和房水内药物浓度。结果显示，兔眼对该植入剂有良好的耐受性，未发现局部组织有炎症、坏死及纤维增生等病理改变。3个月内植入组局部药物浓度(ng/g)较平稳，平均为：角膜0.4、结膜3～4、巩膜2、虹膜2、睫状体0.5～1、房水和晶状体未测出，外周血未测出；对照组为：角膜0.2、结膜0.2～0.5、巩膜0.2、虹膜、睫状体、房水和晶状体及外周血均未测出。3个月时该药膜已被完全降解吸收。植入组角膜植片成活率(11/12)显著高于对照组(7/12)。

此动物实验显示植入的药膜可使CsA在局部达高浓度，提高角膜移植手术成功率；全身未检测出CsA则避免了该药带来的全身不良反应。

实验例5

替代羊膜用于眼表重建的药膜

选取24只12～14周龄体重在1.5～2.5kg的新西兰大耳白兔(雌雄不限)，15g/L巴比妥钠静注全麻，制作碱烧伤至角膜上皮广泛缺损兔模型，剪取略大于兔眼角膜的以bFGF、EGF为有效药物成分该种缓释药膜，上并行间断缝合；设立羊膜覆盖治疗组作为对照组。结果：羊膜组角膜上皮2周内完全修复/角膜透明率(9/12)，药膜组角膜上皮2周内完全修复/角膜透明率(10/12)。表明本药膜可起到与羊膜类似的作用效果，用于眼表重建。

购买真菌性角膜溃疡兔膜型16只(中国医科大学动物实验基地提供)，剪取略大于兔眼角膜的以抗真菌药(氟康唑)为有效药物成分的该种缓释药膜，覆于病眼角膜上，间断缝合固定；设立对照组，以普芬(氟康唑滴眼液)每日四次点病眼。观察2周，以裂隙灯下溃疡病灶愈合/显著缩小为治疗有效标准，结果显示植入缓释药膜组治有效率(7/8)明显高于对照组(3/8)。

我院将以低浓度丝裂霉素、TGF-beta2的单克隆抗体、EGF为有效药物成分的药膜进行临床实验：选取我院门诊诊断明确的翼状胬肉患者43名(年龄36～65岁，男18人、女25人，复发性胬肉9例)采用胬肉切除术中联合自制药膜移植，术后观察2周，随访一年半未。结果：患者对该药膜耐受良好，局部无明显炎症及组织增生，一年半随访期内未见一例复发。另，我院用以CsA、地塞米松及促组织上皮修复细胞因子(EGF、bFGF等)为有效药物成分的该种药膜治疗两例蚕食性角膜溃疡获得成功。两例患者为我院门诊诊断明确，均表现为单眼周边角膜的慢性、进行性溃疡，进行性缘呈穿凿样，无穿孔，一例患者合并有类风湿性关节炎，病程2月余，在外院给抗生素眼药水治疗无效。我院诊断明确后，行切除坏死角膜表层组织，同时作临近病灶区的球结膜切除，烧灼止血后，剪取与角结膜创面同形大小的药膜，用10-0尼龙线间断缝合，术后给以氧氟沙星眼膏日一次涂术眼，共7天。术后观察2周，随访6个月。结果：患者对该药膜耐受良好，局部无明显炎症及组织增生，局部角膜组织于7天始透明，结膜创面愈合良好，半年随访期内未见复发。

实施例1(用于青光眼滤过术中添加性药膜)

(1)采用脱乙酰度为80％的壳聚糖，以4％比例加入2％醋酸溶液中，混合，摇匀；(2)逐渐加入致终浓度为50mg/ml TGF-β2的单克隆抗体(商品名CAT-152，购于英国剑桥抗体技术公司)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.1％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，流涎成膜，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

青光眼用膜厚约0.1～0.5mm，根据术者习惯术中剪取略小于巩膜瓣大小植入。

使用方法：青光眼滤过术中准备缝合巩膜瓣之前，以巩膜瓣下及结膜下一次性植入的方法应用；使用前需用生理盐水浸泡复水。

实施例2(用于青光眼滤过术中添加性药膜)

(1)采用脱乙酰度为90％的壳聚糖，以5％比例加入2％醋酸溶液中，混合，摇匀；(2)逐渐加入致各自终浓度为15mg/ml碱性成纤维细胞生长因子的单克隆抗体、碱性成纤维细胞生长因子II型受体的单克隆抗体(均购于晶美生物公司)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.05％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，流涎成膜，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

使用方法如实施例1。

实施例3(人工晶体携带型缓释药物套管)

(1)采用脱乙酰度为95％的壳聚糖，以4％比例加入2％醋酸溶液中，混合，摇匀；(2)逐渐加入抗炎药物地塞米松(地塞米松/上述的混合液为1.5/100，W/W)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.05％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

人工晶体携带型缓释药物套管制成中空管状，便于应用，内径约0.3～0.5mm外径约1.5mm长约1.5mm。

使用方法：人工晶体植入术中，晶体植入前，将缓释药物套管套入晶体襻，置于根部，再进行晶体植入。

实施例4(人工晶体携带型缓释药物套管)

(1)采用脱乙酰度为93％的壳聚糖，以5％比例加入2％醋酸溶液中，混合，摇匀；(2)逐渐加入抗炎药物地塞米松(地塞米松/上述的混合液为1/100，W/W)及致终浓度为25mg/ml的TGF-β2的单克隆抗体(商品明CAT-152，购于英国剑桥抗体技术公司)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.05％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

实施例5(玻璃体腔缓释药栓)

(1)采用脱乙酰度为90％的壳聚糖，以5％比例加入2％醋酸溶液中，加入适量胶原及聚乳酸(壳聚糖/胶原/聚乳酸比例为8/1/1，W/W/W)，混合，摇匀；(2)逐渐加入抗炎药物地塞米松(地塞米松/上述的混合液为2/100，W/W)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.2％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

玻璃体腔缓释药栓制成中空管状，便于缝线，内径约0.3～0.5mm外径约1.5mm长约1.5mm。

使用方法：睫状体平坦部穿刺切口，将药栓塞入玻璃体腔，并以缝线固定于局部，封闭穿刺口。

实施例6(玻璃体腔缓释药栓)

(1)采用脱乙酰度为90％的壳聚糖，以5％比例加入2％醋酸溶液中，加入适量胶原及聚乳酸(壳聚糖/胶原/聚乳酸比例为6/1/3，W/W/W)，混合，摇匀；(2)逐渐加入抗炎药物地塞米松(地塞米松/上述的混合液为2/100，W/W)及致终浓度为25mg/ml TGF-β2的单克隆抗体(商品明CAT-152，购于英国剑桥抗体技术公司)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.1％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

实施例7(玻璃体腔缓释药栓)

采用脱乙酰度为90％的壳聚糖，以3％比例加入2％醋酸溶液中，加入适量胶原及聚

乳酸(壳聚糖/胶原/聚乳酸比例为6/2/2，W/W/W)，混合，摇匀；(2)逐渐加入BDNG(脑源性神经营养因子)(BDNG/上述的混合液为0.5/100，W/W)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.01％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

实施例8(玻璃体腔缓释药栓)

采用脱乙酰度为92％的壳聚糖，以4％比例加入2％醋酸溶液中，加入适量胶原及聚乳酸(壳聚糖/胶原/聚乳酸比例为7/2/1，W/W/W)，混合，摇匀；(2)逐渐加入BDNG(脑源性神经营养因子)(BDNG/上述的混合液为0.3/100，W/W)及bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)(bFGF/混合液为0.3/100，W/W)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.05％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

实施例9(玻璃体腔缓释药栓)

采用脱乙酰度为90％的壳聚糖，以4％比例加入2％醋酸溶液中，加入适量胶原及聚乳酸(壳聚糖/胶原/聚乳酸比例为6/2/2，W/W/W)，混合，摇匀；(2)逐渐加入三羟皮质类固醇(THS)(THS/上述的混合液为1/100，W/W)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)和肝细胞生长因子(HGF)的抗体(购于晶美生物公司)(致终浓度为25mg/ml)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.05％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

实施例10(玻璃体腔缓释药栓)

采用脱乙酰度为92％的壳聚糖，以5％(重量比)比例加入2％醋酸溶液中，加入适量胶原及聚乳酸(壳聚糖/胶原/聚乳酸比例为6/2/2，W/W/W)，混合，摇匀；(2)逐渐加入三羟皮质类固醇(THS)(THS/上述的混合液为1/100，W/W)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)和肝细胞生长因子(HGF)的抗体(购于晶美生物公司)(致终浓度为20mg/ml)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.1％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

实施例11(抑制角膜移植排斥反应的植入药膜)

采用脱乙酰度为90％的壳聚糖，以5％(重量比)比例加入2％醋酸溶液中，混合，摇匀；(2)逐渐加入抗炎药物地塞米松(地塞米松/上述的混合液为1/100，W/W)及环孢霉素A(CsA)(CsA/上述的混合液为2/100，W/W)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.05％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

抑制角膜移植排斥反应的植入药膜的膜略厚0.3～0.8mm，剪成环状，内径12.5mm外径14mm。

使用方法：角膜移植术中，缝合固定供体角膜后，植入药膜于结膜下，封闭结膜切口，使用前药膜需用生理盐水浸泡复水。

实施例12(抑制角膜移植排斥反应的植入药膜)

采用脱乙酰度为85％的壳聚糖，以4％(重量比)比例加入2％醋酸溶液中，混合，摇匀；(2)逐渐加入环孢霉素A(CsA)(CsA/上述的混合液为2.5/100，W/W)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.1％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

实施例13(替代羊膜用于眼表重建的药膜)

(1)采用脱乙酰度为90％的壳聚糖，以4％(重量比)比例加入2％醋酸溶液中，加入适量胶原及聚乳酸(壳聚糖/胶原/聚乳酸比例为8/1/1，W/W/W)，混合，摇匀；(2)逐渐加入碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)(bFGF/上述的混合液为0.2/100，W/W)及表皮生长因子(EGF)(EGF/混合液为0.2/100，W/W)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.1％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

替代羊膜用于眼表重建的药膜膜略厚0.3～0.8mm，根据创面剪取类似的适当大小、形状。

使用方法：剪取适当大小、形状的药膜，同羊膜移植/覆盖术中羊膜的使用方法用于各手术中。使用前药膜需用生理盐水浸泡复水。

实施例14(替代羊膜用于眼表重建的药膜)

(1)采用脱乙酰度为90％的壳聚糖，以3％(重量比)比例加入2％醋酸溶液中，加入适量胶原及聚乳酸(壳聚糖/胶原/聚乳酸比例为7/2/1，W/W/W)，混合，摇匀；(2)逐渐加入丝裂霉素(致终浓度0.01％)及表皮生长因子(EGF)(购买于晶美生物公司)(EGF/上述的混合液为0.2/100，W/W)、TGF-β2的单克隆抗体(商品明CAT-152，购于英国剑桥抗体技术公司)(致终浓度为20mg/ml)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.1％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

实施例15(替代羊膜用于眼表重建的药膜)

(1)采用脱乙酰度为90％的壳聚糖，以4％(重量比)比例加入2％醋酸溶液中，加入适量胶原及聚乳酸(壳聚糖/胶原/聚乳酸比例为7/2/1，W/W/W)，混合，摇匀；(2)逐渐加入环孢霉素A(CsA)(CsA/混合液为3/100，W/W)及表皮生长因子(EGF)(购买于晶美生物公司)(EGF/混合液为0.2/100，W/W)、地塞米松(地塞米松/混合液为1/100，W/W)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.05％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

实施例16(用于治疗真菌性角膜溃疡的药膜)

(1)采用脱乙酰度为90％的壳聚糖，以4％(重量比)比例加入2％醋酸溶液中，加入适量胶原及聚乳酸(壳聚糖/胶原/聚乳酸比例为6/2/2，W/W/W)，混合，摇匀；(2)逐渐加入氟康唑(氟康唑/上述的混合液为2/100，W/W)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.15％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

药膜略厚0.3～0.8mm，剪取略大于创面大小的药膜。

使用方法：使用前药膜需用生理盐水浸泡复水，刮除局部坏死组织后以类似结膜覆盖术的方法间断逢于溃疡灶之上。

实施例17(用于治疗真菌性角膜溃疡的药膜)

采用脱乙酰度为90％的壳聚糖，以3％(重量比)比例加入2％醋酸溶液中，加入适量胶原及聚乳酸(壳聚糖/胶原/聚乳酸比例为7/1/2，W/W/W)，混合，摇匀；(2)逐渐加入氟康唑(氟康唑/上述的混合液为1.5/100，W/W)，充分混合60分钟；(3)在200转/分搅拌下逐滴加入0.2％的碳二亚胺(EDC)交联剂交联；(4)灌入模具，静置半小时，脱模，生理盐水洗脱；(5)冻干机冻干，钴60消毒灭菌，真空封袋备用。

药膜略厚0.3～0.8mm，根据创面剪取类似的适当大小、形状。

Claims

1、一种生物降解型眼植入剂，其特征在于：包括作为主要载体的壳聚糖和有效药物成分。

2、根据权利要求1所述的一种生物降解型眼植入剂，其特征在于：所述的壳聚糖的脱乙酰度为75～95％，壳聚糖与有效药物成分的重量比1∶0.001～1。

3、根据权利要求1所述的一种生物降解型眼植入剂，其特征在于：还包括胶原和聚乳酸，壳聚糖与胶原与聚乳酸的重量比1∶0∶0～1∶0.8∶0.8。

4、根据权利要求1或2或3所述的一种生物降解型眼植入剂，其特征在于：所述有效药物成分为生长因子或其单克隆抗体或其受体的单克隆抗体或抗炎药物或环孢霉素A的一种或几种。

5、根据权利要求1或2或3所述的一种生物降解型眼植入剂，其特征在于：所述有效药物成分为抗真菌药物。

6、根据权利要求1或2或3所述的一种生物降解型眼植入剂，其特征在于：所述有效药物成分为神经营养因子。

7、根据权利要求4所述的一种生物降解型眼植入剂，其特征在于：所述生长因子为转化生长因子、成纤维细胞生长内子、血小板源性生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子、肿瘤坏死因子、白细胞介素-1、纤维粘连蛋白、血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子。

8、根据权利要求4所述的一种生物降解型眼植入剂，其特征在于：所述的抗炎药物为地塞米松、氧氟沙星、三羟皮质类固醇。

9、根据权利要求5所述的一种生物降解型眼植入剂，其特征在于：所述抗真菌药物为氟康唑、纳他霉素。

10、根据权利要求6所述的一种生物降解型眼植入剂，其特征在于：所述神经营养因子为脑源性神经营养因子、碱性成纤维细胞生长因子。