CN1679794A - 具有强效抑制酪氨酸酶活性的中药组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有强效抑制酪氨酸酶活性的中药组合物及其应用。本发明的中药组合物由川芎提取物浸膏、当归提取物浸膏、白蒺藜提取物浸膏、白僵蚕提取物浸膏、牡丹皮提取物浸膏、白附子提取物浸膏、五倍子提取物浸膏等7种中药提取物浸膏复配而成。本发明的中药提取物组合物可用于配制化妆品，该化妆品具有抑制黑色素合成，预防皮肤老化，治疗皮肤斑点和雀斑或怀孕期间的色素沉着，保护皮肤和美白皮肤的功能。另外，本发明的中药提取物组合物还可用于配制果蔬保鲜剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种复配的中药组合物，该组合物具有强效抑制酪氨酸酶活性的功能，特别是能抑制皮肤黑色素的形成。该组合物可以应用于皮肤美白剂、去斑药物和果蔬保鲜等方面。
背景技术
酪氨酸酶(tyrosinase)普遍存在于人和动植物体内，是皮肤黑色素(melanin)生物合成和水果褐变过程中必不可少的关键酶。酪氨酸(tyrosine)在酪氨酸酶的作用下生成多巴(dopa)和多巴醌(dopaquinone)，经重排后进一步生成多巴色素(dopachrome)、5，6-二羟基吲哚(5，6-dihydroxyindole)、吲哚醌(indole-5，6-quinone)，最终合成黑色素(melanin)，其反应附图1所示。
迄今为止，对黑色素合成的抑制研究主要集中在酪氨酸酶抑制剂的开发上。代表性的酪氨酸酶抑制剂主要有对苯二酚(氢醌)、L-抗坏血酸(维生素C)、曲酸、超氧化物歧化酶(SOD)等合成的化合物。这些酪氨酸酶抑制剂现在已经被开发使用，但存在着各种问题。例如，对苯二酚(氢醌)及其衍生物刺激性大，易引起皮肤过敏和引发皮肤色素异常症等副作用；L-抗坏血酸(维生素C)、曲酸及其衍生物存在着化学性质不稳定，易变色，难于被皮肤吸收等缺陷；超氧化物歧化酶(SOD)不稳定，活性难以长时间保持，同时具有吸收难的问题。
由于酪氨酸酶的存在，给我们的生活和生产带来了许多的危害和不便，主要有如下两个方面。
1、黑色素是苯酚衍生物的大分子物质，身体中过量黑色素的形成和积累，导致皮肤变色，在皮肤上形成雀斑、黄褐斑等皮肤病，促进皮肤老化，甚至可能导致皮肤癌的产生；
2、对于水果和食品，由于过多黑色素的合成，导致水果变色，质量下降。
爱美之心，人皆有之，皮肤的祛斑美白化妆品研究一直化妆品行业的热门话题，具有祛斑美白概念的化妆品也是最畅销的化妆品。但是，目前许多祛斑美白化妆品以氨基氯化汞等违禁品作为美白剂，而造成许多美容事故，所以寻找安全无毒高效的酪氨酸酶抑制剂是祛斑美白化妆品的发展方向。从市场发展形势和消费心理看，化妆品正在形成天然化、功能化的新趋势。“组分天然化”、“回归大自然”的呼声已成为世界化妆品工业的潮流。
果蔬保鲜是当前我省和我国农业面临的一个迫待解决的课题，有些农产品，例如荔枝和蘑菇等，由于得不到及时有效的保鲜方法处理，每年给我省经济带来巨大的损失。而酪氨酸酶参与了许多果蔬的褐变反应，是这些果蔬变褐生斑而失鲜的主要原因。所以，欲从生化保鲜的新角度，深入研究某些果蔬中酪氨酸酶的活力调控机理，通过寻找酪氨酸酶的特效抑制剂用于果蔬保鲜是一种可取的有效方法。
发明内容
本发明的目的是为了克服化学合成的酪氨酸酶抑制剂的缺陷，提供一种中药提取物组合物，该中药提取物组合物对酪氨酸酶活性具有强效的抑制作用，能预防黑色素的生物合成，而且具有性质稳定和对皮肤刺激性小等优点。
本发明的另一目的是将该中药提取物组合物用作抑制黑色素合成的产品的有效成分，制出性质稳定、效果良好的美白化妆品、去斑化妆品和果蔬保鲜剂等。
根据本发明的目的，本发明人通过对酪氨酸酶活性的深入研究，进行了天然物质的提取，并对提取物浸膏进行反复选择和组合，发明了一种强效抑制酪氨酸酶活性的中药提取物组合物，以重量百分比计，由以下物质组成：
川芎提取物浸膏 5～30
当归提取物浸膏 5～30
白蒺藜提取物浸膏 5～30
白僵蚕提取物浸膏 5～30
牡丹皮提取物浸膏 5～30
白附子提取物浸膏 5～30
五倍子提取物浸膏 5～30
本发明的另一目的，是提供了一种化妆品物质，其中含有作为有效成分的中药提取物组合物，该化妆品物质具有抑制黑色素合成，治疗皮肤斑点、雀斑、黄褐斑和色素沉着，预防皮肤老化，保护皮肤和美白皮肤的功能。
本发明的另一目的，是提供一种果蔬保鲜剂，其中作为预防变黑的有效成分的中药提取物组合物，用于水果和蔬菜等食品中。
对本发明的详细说明：
本发明涉及川芎、当归、白蒺藜、白僵蚕、牡丹皮、白附子和五倍子等多种天然物质的提取物组合物对酪氨酸酶的活性的抑制。为了制备以上各种单一中药提取物浸膏，发明人采用微波辅助提取技术，考察了提取剂选择、液料质量比、提取时间、微波功率等因素对提取效果及提取物对酪氨酸酶的相对抑制率的影响，筛选出了最佳的提取工艺条件，见表1所示。
发明人按最佳提取工艺条件进行了川芎、当归、白蒺藜、白僵蚕、牡丹皮、白附子等多种天然物质的提取，并用活性炭对提取液进行脱色，过滤，滤液用旋转蒸发仪真空浓缩至膏状后，真空干燥，得到各种单一中药的提取物浸膏，如表1所示。
表1
| 天然物质 | 提取剂 | 液料质量比 | 提取时间 | 微波功率 | 浸膏产率 |
| 川芎当归白蒺藜白僵蚕牡丹皮白附子 | 90％乙醇90％乙醇水70％乙醇70％乙醇水 | 20∶116∶120∶116∶116∶120∶1 | 7min5min5min7min6min7min | 450W450W450W450W450W450W | 4.59％46.5％16.6％15.8％22.8％20.9％ |
| 五倍子 | 70％乙醇 | 16∶1 | 7min | 450W | 19.5％ |
根据黑色素形成的反应机理和酪氨酸酶在一系列反应中的作用，本发明采用酪氨酸酶活性的相对抑制率检测方法如下：先将酪氨酸酶抑制剂(提取物浸膏、提取物组合物或者对照品)用蒸溜水溶解，制成质量浓度为0.1mg/mL的抑制剂溶液。按表2准确吸取提取物溶液、pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液和质量分数为0.1％的多巴溶液，充分混合，于25℃孵育5min后，加入活度为110U/mL的酪氨酸酶溶液，再在25℃下孵育10min，迅速转移至比色皿中，在475nm处测吸光度。使用曲酸、氢醌、抗坏血酸、熊果苷作为对照物。
表2
| 反应液成分 | 1组 | 2组 | 3组 | 4组 |
| 提取物溶液 /mL磷酸盐缓冲溶液 /mL多巴溶液 /mL酪氨酸酶溶液 /mL总体积 /mL | 210.53.5 | 2.513.5 | 1110.53.5 | 11.513.5 |
按下式计算抑制剂对酪氨酸酶的相对抑制率(I，简称抑制率，下同)。
式中：A1、A2、A3、A4分别为1组～4组溶液的吸光度。
测试结果见表3所示。
表3
| 物质 | 抑制剂溶液含量(mg/mL) | 抑制率(％) | |
| 单一中药提取物 | 川芎提取物浸膏(A)当归提取物浸膏(B)白蒺藜提取物浸膏(C)白僵蚕提取物浸膏(D)牡丹皮提取物浸膏(E)白附子提取物浸膏(F)五倍子提取物浸膏(G) | 5555555 | 75.173.843.866.782.847.165.3 |
| 中药提取物组合物(A+B+C+D+E+F+G) | 5 | 92 | |
| 对照品 | 曲酸氢醌抗坏血酸熊果苷 | 5555 | 56785241 |
表3显示，本发明得到的中药提取物组合物对酪氨酸酶的相对抑制率，比各种单一中药的提取物浸膏对酪氨酸酶的相对抑制率高得多，说明提取物浸膏间具有协同作用，将多种中药提取物复配有利于提高对酪氨酸酶的相对抑制率。另外，本发明得到的中药提取物组合物对酪氨酸酶的相对抑制率，也比对照品曲酸、氢醌、抗坏血酸、熊果苷对酪氨酸酶的相对抑制率高得多，说明本发明得到的中药提取物组合物是一种强效的酪氨酸酶抑制剂。
本发明得到的一种强效抑制酪氨酸酶活性的中药提取物组合物，不含化学合成的物质，无毒、无副作用，安全可靠。可为皮肤直接提供和滋养其正常生理过程中的营养组分，促进皮肤新陈代谢，可使皮肤自然地洁白、柔嫩，对色素斑有明显的淡褪效果，可以用于预防和治疗皮肤变色、雀斑、斑点和怀孕过程中的色素沉着。发明的中药提取物组合物可以用作化妆品物质，可以加入皮肤营养霜或乳液、洁面乳、祛斑霜或乳液，以便发挥抑制黑色素生物合成，预防皮肤老化，保护皮肤和美白皮肤的功能。另外，发明的中药提取物组合物还可以用作果蔬保鲜剂，用作预防果蔬变黑，保持果蔬新鲜。
具体实施方式
以下通过具体实施例来对本发明作进一步的说明，但这些实施例只是为了说明，不是对本发明的限制。
实施例一 美白营养霜的制备
表4给出含有中药提取物组合物美白营养霜配方，各物质的用量用质量分数表示。
表4
| 组成 | 配方一 | 配方二 | 配方三 | 配方四 |
| 组分A：液体石蜡二甲基硅氧烷棕榈酸异丙酯肉豆蔻酸异丙酯羊毛脂地蜡蜂蜡凡士林十六十八醇单甘酯组分B：甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯甲基葡萄糖苷聚氧乙烯(20)醚倍半硬脂酸酯烷基磷酸钾盐聚氧乙烯(2)硬脂醇醚聚氧乙烯(21)硬脂醇醚甘油丙二醇中药提取物组合物水组分C：香精、防腐剂 | 155647511345余量适量 | 1367356112245余量适量 | 1547468122.53.55余量适量 | 127433242324.55余量适量 |
美白营养霜的制备方法：将配方表中的组分A混合，加热至85℃，熔化搅拌均匀，作为油相；将配方表中的组分B混合，加热至85℃，搅拌溶解均匀，作为水相。将油相加入水相中，搅拌均匀后乳化均质7分钟后，搅拌冷却至50℃时，加入组分C，搅拌均匀，冷却至35℃，即为美白营养霜。
实施例二 美白润肤乳液的制备
表5给出含有中药提取物组合物美白营养乳液配方，各物质的用量用质量分数表示。
表5
| 组成 | 配方一 | 配方二 | 配方三 | 配方四 |
| 组分A：硬脂酸 | 5 | 3 | 2 |
| 单甘酯十六十八醇白油棕榈酸异丙酯羊毛脂二甲基硅氧烷组分B：甘油三乙醇胺鲸蜡醇硫酸钠油醇醚-15中药提取物组合物尿囊素去离子水组分C香精、防腐剂 | 11431470.7550.2余量适量 | 1153460.650.3余量适量 | 1254310550.3余量适量 | 1133158450.3余量适量 |
美白润肤乳液的制备方法：将配方表中的组分A混合，加热至85℃，熔化搅拌均匀，作为油相；将配方表中的组分B混合，加热至85℃，搅拌溶解均匀，作为水相。将油相加入水相中，搅拌均匀后乳化均质7分钟后，搅拌冷却至50℃时，加入组分C，搅拌均匀，冷却至35℃，即为美白润肤乳液。
实施例三 美白洗面奶的制备
表6给出含有中药提取物组合物美白洗面奶配方，各物质的用量用质量分数表示。
美白洗面奶的制备方法：将配方表中的组分A混合，加热至85℃，熔化搅拌均匀，作为油相；将配方表中的组分B混合，加热至85℃，搅拌溶解均匀，作为水相。将油相加入水相中，搅拌均匀后乳化均质7分钟后，搅拌冷却至50℃时，加入组分C，搅拌均匀，冷却至35℃，即为美白洗面奶。
表6
| 组成 | 配方一 | 配方二 | 配方三 | 配方四 |
| 组分A： |
| 白油油醇硬脂酸组分B：十八酸聚氧乙烯醚失水山梨醇单酯脂肪酸聚氧乙烯醚磺基琥珀酸单酯二钠三乙醇胺月桂醇硫酸钠水溶性羊毛脂甘油中药提取物组合物去离子水组分C：香精、防腐剂 | 12221253余量适量 | 256223余量适量 | 252.522143余量适量 | 202143余量适量 |
实施例四 美白按摩霜的制备
表7给出含有中药提取物组合物美白按摩霜配方，各物质的用量用质量分数表示。
表7
| 组成 | 配方一 | 配方二 |
| 组分A：硬脂酸白油肉豆蔻酸异丙酯凡士林白蜡羊毛脂十六十八醇组分B：聚氧乙烯(75)羊毛脂硬脂酸单甘油酯失水山梨醇倍半油酸酯Tween-60丙二醇三乙醇胺去离子水组分C：香精、防腐剂 | 62010123753余量适量 | 92025542150.7余量适量 |
美白按摩霜的制备方法：将配方表中的组分A混合，加热至85℃，熔化搅拌均匀，作为油相；将配方表中的组分B混合，加热至85℃，搅拌溶解均匀，作为水相。将油相加入水相中，搅拌均匀后乳化均质7分钟后，搅拌冷却至50℃时，加入组分C，搅拌均匀，冷却至35℃，即为美白按摩霜。
实施例五 果蔬保鲜剂的制备
表9给出含有中药提取物组合物美白按摩霜配方，各物质的用量用质量分数表示。
表9
| 物质 | 配方一 | 配方二 |
| 海藻酸钠偏磷酸钠磷酸二氢钠焦亚硫酸钠柠檬酸中药提取物组合物水 | 1210.53余量 | 10.50.13余量 |
配制方法：按配方将各种物质溶解于水中，搅拌均匀即为果蔬保鲜剂。
按照实施例一中的配方一制备含有中药提取物组合物的美白营养霜和不含有中药提取物组合物的美白营养霜各1份，作为实验用制剂，前者为样品，后者为对照品，选择50名20岁-50岁的妇女作为试用对象。每日早晚洗脸后，在面部左脸和左手前臂涂用样品，在右脸和右手前臂涂用对照品。使用1月后，按下列标准，使用色差仪评价使用效果。
标准：“++”表示斑点、雀斑明显减退；“+”表示斑点、雀斑有减退；“-”表示无变化。
对于每个试用者，使用色差仪测量使用前后前臂部位皮肤的光亮度，并观察脸部雀斑、斑点的变化情况。结果如表10所示。
表10
| 制剂 | 祛斑美白作用 | 皮肤光亮度(色差平均值) | |||
| ++ | + | - | 使用前 | 使用后 | |
| 样品 | 37 | 11 | 2 | 63 | 39.6 |
| 对照品 | 1 | 5 | 44 | 62 | 59 |
由表10可知，本发明所述的添加了中药提取物组合物的化妆品成品具有很好的祛斑美白作用，在防止和改善由日晒、老化等因素引起的皮肤变黑和变暗，斑点和雀斑方面是有效的。
Claims (4)
1、具有强效抑制酪氨酸酶活性的中药组合物，其特征在于以重量百分比计，由以下物质组成：
川芎提取物浸膏 5～30
当归提取物浸膏 5～30
白蒺藜提取物浸膏 5～30
白僵蚕提取物浸膏 5～30
牡丹皮提取物浸膏 5～30
白附子提取物浸膏 5～30
五倍子提取物浸膏 5～30。
2、权利要求1所述的具有强效抑制酪氨酸酶活性的中药组合物在配制皮肤美白剂上的应用。
3、权利要求1所述的具有强效抑制酪氨酸酶活性的中药组合物在配制皮肤美白剂上的应用。
4、权利要求1所述的具有强效抑制酪氨酸酶活性的中药组合物在配制皮肤美白剂上的应用。
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