CN1590540A - 一种制备洗涤红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞的方法及装置 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种制备洗涤红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞的方法及装置。采用底部带有过滤器的采血袋,将其挂在操作柜的挂钩上,组合加液器操作时挂在操作柜的最上层挂钩上,位于采血袋的上方,靠重力作用对采血袋进行加液,与真空泵相连的负压密封箱放在操作柜的最下层,采血袋的下方,内装血浆袋和废液袋,密封箱与真空泵相连,使密封箱内为负压状态,开启采血袋及组合时机袋的开关,对血液迅速进行抽滤分离血浆、血细胞、洗涤等处理,可以制备洗涤红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞。本发明解决了以往技术操作时因反复洗涤易造成污染和保存期短问题。有利于采供血的进一步集中化管理,适合在医院血库和血站应用。
Description
技术领域
本发明涉及一种制备洗涤红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞的方法及装置,属于血液分离及其制品的制备技术领域。
背景技术
目前,分离血浆和洗涤血细胞等过程均采用离心后虹吸或分浆夹挤压去除上清液等方法,容易造成血细胞的污染和损失,所需设备和环境要求严格,不适合在医院血库内操作,用此方法制备的洗涤红细胞成本高,保存期很短,制备冰冻解冻去甘油红细胞需要反复的离心和洗涤处理过程,更容易受到污染,保存期更短,严重限制了洗涤红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞血液制品的临床应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种制备洗涤红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞的方法,采用负压抽滤方式,对血液进行抽滤分离和洗涤处理,克服了以往技术容易造成污染和红细胞储存期短的缺陷。
本发明的目的还在于提供一种用于制备洗涤红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞的装置。
本发明的构思是这样的。使用带有过滤器的专用采血袋,在无菌情况下采集血液,将血浆袋和废液袋置于负压密封箱内,负压密封箱与真空泵连接,使血浆袋和废液袋内处于负压状态,对血液快速进行抽滤分离和洗涤,采血袋采用一次性无菌无热源的塑料制品,密闭操作,时间短,可以减少血细胞的浪费和污染,所需设备和操作技术简单,便于在血站和医院血库内进行,冰冻红细胞在血站内直接超低温冰冻,在医院血库中储存或冰冻下运输;冰冻红细胞升温速融后,洗涤、去甘油同样在负压下进行,洗涤后即可得到解冻去甘油红细胞,灌注生理盐水,即可输血。
具体地,本发明的方法包括以下步骤:
(一)制备洗涤红细胞和冰冻红细胞
(1)使用带有过滤器的采血袋在无菌情况下采集血液;
(2)将采血袋与带有组合加液器的组合试剂袋连接,组合试剂袋位于采血袋的上方;
(3)将血浆袋和废液袋放入负压密封箱内,关闭负压密封箱,使血浆袋和废液袋与采血袋的排液口相连接,负压密封箱放在采血袋的下方,并与真空泵连接;
(4)开启真空泵,使负压密封箱内呈负压状态;
(5)血浆袋和废液袋内呈负压状态下,向采血袋内依次加入相应试剂,对血液进行抽滤、洗涤和消毒,放出血浆和废液,制得洗涤红细胞;或在采血袋内加入甘油保存液,以备保存;
(6)取下采血袋,将其在-80℃超低温保存,即得冰冻红细胞。
(二)制备解冻去甘油红细胞(所用装置与制备洗涤红细胞相同)
(1)取出装有甘油保存液的采血袋,放入37℃恒温水浴箱,使其融化;
(2)连接好带有组合加液器的组合试剂袋和负压密封箱,组合试剂袋中分别装有9%氯化钠溶液、6%羟乙基淀粉溶液、0.9%氯化钠溶液和含1%过氧化氢的无菌无热源的生理盐水,将废液袋放入负压密封箱内,关闭负压密封箱,负压密封箱的抽气管与真空泵连接;
(3)将组合试剂袋与装有甘油保存液的采血袋进液口相连,使采血袋的排液口与放在负压密封箱内的废液袋的进液管连接;
(4)开启真空泵,使负压密封箱内的废液袋处于负压状态,先抽滤出甘油保存液,用9%氯化钠溶液和6%羟乙基淀粉溶液洗涤第1次,再用6%羟乙基淀粉溶液和0.9%氯化钠溶液洗涤第2次,洗涤完成后,直接灌注等量的含1%过氧化氢的无菌无热源的生理盐水,制得解冻去甘油红细胞。
本发明的方法使用以下装置完成。其结构中包括带有组合加液器的组合试剂袋、底部带有过滤器的采血袋,组合试剂袋在采血袋的上方,采血袋的下方为负压密封箱,内装血浆袋和废液袋,负压密封箱的抽气管与真空泵相连,组合加液器的加液管分别与组合试剂袋、采血袋的进液口相连接,采血袋的排液口与负压密封箱内的血浆袋和废液袋的进液管连接。
上述装置具有柜式结构,带有组合加液器的组合试剂袋(瓶)挂在操作柜的最上层挂钩上,靠重力作用对采血袋进行加液,与真空泵相连的负压密封箱放在操作柜的最下层,采血袋的下方,开启真空泵,使处于负压密封箱内的血浆袋和废液袋为负压状态,拧开组合加液器及采血袋的相应开关,可完成对血液的抽滤、洗涤和去甘油保存液的操作。
本发明取得的技术进步在于:本方法及装置能够迅速分离血浆和血细胞,对血细胞进行洗涤处理,制备的血细胞悬液适合临床上大部分病人直接应用;本发明可以专门制备去白细胞的红细胞悬液,有利于推广普及应用洗涤红细胞尤其是冰冻解冻去甘油红细胞;冰冻红细胞在冰冻状态下保存期限延长,可达10年,远远长于在4℃条件下,血细胞的21天或35天保存期;可以避免血资源的浪费;在血站超低温冰柜中可以大量储存或在冰冻状态下运输,有利于实现采供血的集中化管理,可以隔几个月、一年甚至更长时间,血站按照预定的数量向医院血库运送一次血液制品;所用装置结构简单、适用,操作方便,便于在医院血库推广应用。
附图说明
图1是用于本发明方法制备洗涤红细胞的装置示意图。
图2是用于本发明的方法制备解冻去甘油红细胞的装置示意图。
图3是过滤器的滤膜示意图。
图4是过滤器的滤芯及支架示意图。
图5是过滤器的密封圈示意图。
图6是过滤器的外架示意图。
需要说明的是图1和图2所示的装置结构是相同的,并无本质区别。
图中各标号代表的含义如下:
1、操作柜 2、组合试剂袋挂钩 3-1、3-2、3-3、3-4、组合试剂袋 4-1、4-2、4-3、4-4、4-5组合加液器 5、带过滤器的采血袋 6、滤膜过滤器 7-1、采血袋进液口 7-2、7-3、7-4、采血袋排液口 8、8-1、8-2、血浆袋、废液袋进液管 9、负压密封箱 10、负压密封箱上盖 11、负压密封箱排气管 12、抽气管13、真空泵 14-1、14-2、14-3、14-4、血浆袋、废液袋。
具体实施方式
以下参照附图及实施例说明本发明。
实施例1
本实施例参照附图进行叙述。
如图1所示,制备洗涤红细胞的方法所用装置,采血袋5的底部带有滤膜过滤器6,由带微孔的圆形滤膜、圆形密封圈、带筛孔的滤芯以及圆形过滤器外架构成,带微孔的滤膜放在带筛孔的滤芯上面,由密封圈密封,上面加盖过滤器外架,整个过滤器通过支架固定于采血袋的底部,带筛孔的滤芯与采血袋的排液口连通并紧固连接,带有组合加液器4-1、4-2、4-3、4-4的组合试剂袋3-1、3-2、3-3、3-4挂在操作柜1的最上层挂钩2上,位于采血袋5的上方,靠重力作用对采血袋5进行加液,组合加液器为五通管架,其中带有开关的管4-1、4-2、4-3、4-4分别与组合试剂袋连接,管4-5与采血袋5的进液口7-1连接,与真空泵13相连的负压密封箱9放在操作柜的最下层,采血袋5的下方,内装血浆袋和废液袋14-l、14-2、14-3、14-4。制备洗涤红细胞的操作过程为:在采血前,采血袋5内首先根据采血量加入血液保养液,根据采血量选用400ml或200ml的采血袋,无菌操作采取所需的血量,自体储血者则可以根据情况进行消毒处理;采血结束后把采血管分段热合密封后预留出交叉配血用的血液,剪去多余的部分,制作洗涤红细胞时可以做交叉配血用;如果制作冰冻红细胞,只能预先留出一段空的采血管,把制备好的冰冻解冻去甘油红细胞灌注其中,分段热合密封,把血浆袋的导管灌注血浆,分段热合密封,与冰冻红细胞一起标记冰冻保存,交叉配血用。首先把血浆袋和废液袋进液管的针头、开关、导管、分别从负压密封箱9的箱盖10上穿出,引出箱外,盖好上盖10使之密封,使采血袋5过滤器6朝下挂在操作柜的挂钩上,并与组合加液器相连,按照无菌操作的要求用75%酒精消毒后,把组合加液器的4-5针头从头部刺入采血袋5的进液管7-1中,把血浆袋和废液袋的进液管8-1、8-2的两个针头分别从头部刺入采血袋的两个排液管7-3、7-4中,负压密封箱9的抽气管12与真空泵13连接,打开真空泵13的电源,开始抽气,拧开血浆袋排液口的开关,抽滤血浆,抽滤结束后关闭,这一袋血浆可用来制作冰冻血浆用,充分利用血液资源,把血浆袋的导管灌注血浆,分段热合密封,与冰冻红细胞一起标记冰冻保存,交叉配血用;拧开组合加液袋的生理盐水的加液管开关,向采血袋中加入生理盐水,加满后关闭,将采血袋轻轻颠倒混均,拧开废液袋的开关,抽滤完毕后拧上,可反复执行这一过程直到洗净为止,特殊情况下需要去除白细胞时可连接白细胞过滤器,过滤去除白细胞,也可以进行辅照处理,灭活白细胞,准备光敏消毒时,加入光敏剂后拧上其开关,光照进行消毒,消毒结束后把光敏剂抽滤入废液袋中;拧开生理盐水袋开关重复进行洗涤过程,直到洗净为止,制备洗涤红细胞时可以加入100ml或200ml生理盐水或不含抗凝剂的红细胞保养液;准备冰冻保存时,拧开组合试剂袋中的甘油保存液袋的开关,在30分钟内缓慢加入甘油保存液,振荡混均,室温平衡30分钟后,拔下组合加液器4-5和进液管8-1、8-2的两个针头,消毒后盖上帽,关闭真空泵13的电源,可以在采血袋和过滤器中部热合密封,防止污染,把血细胞和内有血浆的热合密封的血浆袋导管直接置-80℃冰柜超低温冰冻保存。
如图2所示的制备解冻去甘油红细胞的装置图,它与制备洗涤红细胞的不同之处仅在于负压密封箱内放置的均为废液袋,采血袋5的排液管7-2与废液袋的进液管8连接。首先,在融化红细胞时先把所加用试剂,真空泵和负压密封箱检查无误放在相应位置,负压密封箱9的抽气管12与真空泵13相连接,连接好电源,把负压密封箱9内的废液袋的针头、开关、导管从负压密封箱9的上盖10中穿过,然后盖好上盖10,使其密封,把所加用试剂的组合试剂袋分别挂在操作柜1的组合试剂袋挂钩2上,把针头、开关、部分导管从加液器底板的开口引出到加液器下面;把装有冰冻红细胞的采血袋放入37℃恒温水浴箱中速融,在10分钟内融化,迅速把采血袋5挂在操作柜的挂钩上,组合加液器的下方,消毒后无菌操作,把与废液袋14-1、14-2、14-3、14-4相连的废液袋进液管8的针头与采血袋5的排液口7-2相连,把组合加液器管4-5与采血袋进液管7-1相连,开启真空泵,拧开废液袋的开关,抽滤出甘油保存液,拧上开关,重复上述的洗涤步骤,用9%氯化钠溶液和6%羟乙基淀粉溶液洗涤第1次,再用6%羟乙基淀粉溶液和0.9%氯化钠溶液洗涤第2次,洗涤完成后,采血量为200ml的灌注100ml生理盐水,采血量为400ml的灌注200ml生理盐水;融化后马上输血的红细胞悬液可以在洗涤后直接灌注等量的含1%过氧化氢的无菌无热源的生理盐水,也可以用不含有抗凝剂的其它几种红细胞保存液保存红细胞,制得解冻去甘油红细胞。
Claims (4)
1、一种制备洗涤红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞的方法,其特征在于包括如下步骤:
(一)制备洗涤红细胞和冰冻红细胞
(1)使用带有过滤器的采血袋在无菌情况下采集血液;
(2)将采血袋与带有组合加液器的组合试剂袋连接,组合试剂袋位于采血袋的上方;
(3)将血浆袋和废液袋放入负压密封箱内,关闭负压密封箱,使血浆袋和废液袋与采血袋的排液管相连接,负压密封箱放在采血袋的下方,并与真空泵连接;
(4)开启真空泵,使负压密封箱内呈负压状态;
(5)血浆袋和废液袋内呈负压状态下,向采血袋内依次加入相应试剂,对血液进行抽滤、洗涤和消毒,放出血浆和废液,制得洗涤红细胞;或在采血袋内加入甘油保存液,以备保存;
(6)取下采血袋,将其在-80℃超低温保存,即得冰冻红细胞;
(二)制备解冻去甘油红细胞
(1)取出装有甘油保存液的采血袋,放入37℃恒温水浴箱,使其融化;
(2)连接好带有组合加液器的组合试剂袋和负压密封箱,组合试剂袋中分别装有9%氯化钠溶液、6%羟乙基淀粉溶液、0.9%氯化钠溶液和含1%过氧化氢的无菌无热源的生理盐水,将废液袋放入负压密封箱内,关闭负压密封箱,负压密封箱的抽气管与真空泵相连;
(3)将组合试剂袋与装有甘油保存液的采血袋进液口相连,使采血袋的排液口与放在负压密封箱内的废液袋连接;
(4)开启真空泵,使负压密封箱内的废液袋处于负压状态,先抽滤出甘油保护液,用9%氯化钠溶液和6%羟乙基淀粉溶液洗涤第1次,再用6%羟乙基淀粉溶液和0.9%氯化钠溶液洗涤第2次,洗涤完成后,直接灌注等量的含1%过氧化氢的无菌无热源的生理盐水,制得解冻去甘油红细胞。
2、一种用于权利要求1所述的制备洗涤红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞方法的装置,其特征在于结构中包括采血袋(5),采血袋(5)的底部带有过滤器(6),在采血袋(5)的上方是组合试剂袋(3-1、3-2、3-3、3-4),采血袋(5)的下方为负压密封箱(9),内装血浆袋和废液袋(14-1、14-2、14-3、14-4),负压密封箱(9)的抽气管(12)与真空泵(13)相连,负压密封箱(9)内的血浆袋和废液袋(14-1、14-2、14-3、14-4)处于负压状态。
3、按权利要求2所述的用于制备洗涤红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞方法的装置,其特征在于:装置具有柜式结构,组合试剂袋挂在操作柜(1)的最上层挂钩(2)上,靠重力作用对采血袋(5)进行加液,负压密封箱(9)位于操作柜的最下方。
4、按权利要求2或3所述的用于制备洗涤红细胞和冰冻解冻去甘油红细胞方法的装置,其特征在于:所说的过滤器为滤膜过滤器,由带有微孔的滤膜、密封圈、带筛孔的滤芯以及过滤器外架构成,带微孔的滤膜放在带筛孔的滤芯上面,由密封圈密封,上面加盖过滤器外架,通过支架固定在采血袋(5)的底部,滤芯和采血袋的排液口紧固相连。
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