CN1513346A

CN1513346A - 中草药复方提纯饲料添加剂及其制备方法

Info

Publication number: CN1513346A
Application number: CNA2003101167121A
Authority: CN
Inventors: 焰杨; 杨焰; 成辉; 朱文涛
Original assignee: Xinjiang Tecon Animal Husbandry Biological Technology Co ltd
Current assignee: Xinjiang Tecon Animal Husbandry Biological Technology Co ltd
Priority date: 2003-04-23
Filing date: 2003-11-18
Publication date: 2004-07-21
Anticipated expiration: 2023-11-18
Also published as: CN1224329C

Abstract

本发明属于中草药复方提纯饲料添加剂及其制备方法，其配制比例(重量份)：淫羊藿12－8、党参8－12、黄芪8－12、甘草5－9，将上述四味药材饮片中加入浓度为50％的乙醇，其重量为药材饮片重的10－14倍，进行回流提取3次，每次提取1.5小时，每次加10－14倍量，其浓度50％的乙醇；合并3次的提取液，进行过滤；将滤液浓缩至密度为1.30g/cm³的浸膏，浓缩温度为60℃－65℃；减压干燥，干燥温度为70℃－8S℃，将干燥后的结块粉碎成40－60目的细粉，包装出厂。用本工艺提出的添加剂既保证了中草药原有的疗效，又使中药材中的多种有效活性成分能够被较多的提取。本添加剂不及能够增强禽畜的免疫力，增强体质，减少疾病的发生，而且无毒副作用，不含激素，抗生素，可以提高禽畜的生长速度和成活率。

Description

中草药复方提纯饲料添加剂及其制备方法

技术领域

本发明属于用纯中草药提取物取代抗生素，作为饲料添加剂及其生产方法，特别是中草药复方提纯饲料添加剂及其制备方法。

背景技术

抗生素作为饲料添加剂在饲料工业中的应用，已有40多年的历史。曾对预防动物疾病，促进动物生长及其提高养殖业产量起到了积极的作用。但是，近年来经科学研究发现，人类健康常见的癌症、畸形、抗药性和某些中毒现象与人们所使用的肉、蛋、奶中的抗生素、激素和其他合成药物的残留有关。人往往是终端生物富集着，有毒物质在人体内积蓄越来越多，因而提出在饲料中限制抗生素的使用。

为了提高畜禽的免疫力，又使饲料中不含激素、抗生素。提出了用纯中药取代抗生素作为饲料添加剂，申请号：96117411.0，名称：“中草药高效饲料精”，由多种微量元素和中草药：陈皮、山楂、贯仲、首乌、麦芽、山药、茯苓、建曲等组成，添加于喂养猪等动物的饲料中。还有申请号：97108261，名称：中草药促长饲料添加剂及其制备方法，其配方包括有中草药、化合物、矿物质，其中：中草药占80％，化合物占12％，矿物质占7.6％-7.9％，微生物阿维菌素占0.1-0.4％。中草药可采用神曲、枣仁、鹤虱等。其制备方法为先将中草药进行粉碎、发酵、浓缩提取汁液，然后将中草药汁液与其它配方原料按比例混合。用该饲料喂养禽畜能明显促使禽畜生长增重，预防疾病，无毒副作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种中草药复方提纯饲料添加剂及其制备方法，采用独特的中草药配方，将中草药的有效成分提出制成饲料添加剂。用纯中草药提取物取代抗生素作为饲料添加剂，不仅能够增强畜禽的免疫力，增强体质，减少疾病的发生，而且无毒副作用，不含激素、抗生素，无药物残留。可以提高畜禽的生长速度和成活率。

本发明的另一个目的是提供中草药复方提纯饲料添加剂的制备方法。其提取中草药有效成分纯度高，可以降低饲料中添加剂量。

本发明中草药复方提纯饲料添加剂是由下列组分制成的：(用量为重量份)

淫羊藿12-18、党参8-12、黄芪8-12、甘草5-9

制备本发明饲料添加剂的配方优选重量(份)配比范围是：

淫羊藿14-16、党参9-11、黄芪9-11、甘草6-8

制备本发明饲料添加剂的配方最佳重量(份)配比是：

淫羊藿15、党参10、黄芪10、甘草7

中药复方提纯饲料添加剂的制备方法是：

1、按上述配方分别称取四味药材饮片，加入浓度为50％的乙醇，其重量为四味药材饮片重量的10-14倍，进行回流提取3次，每次提取1.5小时，每次加10-14倍量，其浓度50％的乙醇；2、合并3次的提取液，进行过滤；3、将滤液浓缩至密度为1.30g/cm³的浸膏，浓缩温度为60℃-65℃；4、减压干燥，干燥温度为70℃-85℃，将干燥后的结块粉碎成40-60目的细粉，包装出厂。

本发明的制备工艺吸取了我国传统的稠浸膏和干浸膏的提取制备方法，又融合了现代重要药品生产中使用的微量剂的提取工艺方法。既保证了中草药原有的疗效，又使中药材中的多种有效活性成分能够被较多的提取。

本品处方中主要药材淫羊藿含淫羊藿苷(Icariin)、淫羊霍次苷I(IcarisideI)、去氢淫羊藿素-3-O-a-鼠李糖苷(Anhydroicaritin-3-O-a-rhamnoside)、淫羊藿素-3-O-a-鼠李糖苷(Icaritin-3-O-a-rhamnoside)和榭皮素及其-3-O-β-D-葡萄糖苷。

黄芪含有皂苷类、多糖类、黄酮类、氨基酸类和无机类等成分。皂苷类有大豆皂苷I(Soyasapogenoside)、黄芪苷I、II、IV，胡罗卜苷。已分离出均一的3种多糖，黄芪多糖I(Astraglan I)为杂多糖，分子量36300，由D-葡萄糖：D-半乳糖、L-阿拉伯糖(1.75∶1.63∶1)组成；黄芪多糖II的分子量12300，黄芪多糖III的分子量34600。黄酮类有芒柄花黄素(7-羟基-4′甲氧基异黄酮)、毛蕊异黄酮(7，3′-Dihydroxy-4′-methoxyisoflavone)、9，10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、2′-羟基-3′，4′-二甲氧基异黄烷-7-O-β-D-葡萄糖苷、3′-羟基-4′-甲氧基异黄酮7-O-β-D-葡萄糖苷、L-3-羟基-9-甲氧基紫檀烷，并含有21种氨基酸，其中7中含量较高，含天冬酰胺、刀豆氨酸、脯氨酸、γ-氨基丁酸。还有甜菜碱、亚麻酸等以及铁、锰、锌等无机元素。

甘草含三萜类化合物有甘草甜素(Glycyrrhizin)，主要系甘草酸(Glycyrrhizicacid)的钾、钙盐，为干草的甜味成分；黄酮类化合物有甘草苷(Liquiritin)、甘草苷元(Liquiritigenin)、异甘草苷(Isoliquiritin)、异甘草苷元(Iso liquiritigenin)、新甘草苷、新异甘草苷、己甘草呋喃糖苷、鼠李糖异甘草苷、另外还有铝、钾、钙等微量元素。

党参含糖和苷类，四种新型的含果糖的水溶性杂多糖Cp-1、Cp-2、Cp-3、Cp-4、丁香苷β-D-吡喃葡萄糖己苷、α-D-呋喃果糖乙醇苷、党参苷I；生物碱及含氮成分有胆碱、党参酸、5-羟基-2-羟甲基吡定、烟碱、三萜及其它成分有齐墩果酸、党参内酯、5-强甲醇脂肪酸醛；无机元素有铁、锌、铜等；氨基酸有苏氨酸、天门冬氨酸、异亮氨酸等。

本发明的饲料添加剂经新疆饲料产品质量监督检验站检验，检验结果见表1。

表1

序号	检验项目	单位	标准值	判定值	检验结果	判定
序号	检验项目	单位	标准值	判定值	检验结果	判定	1	水分	％	≤12.0	≤12.0	10.1(+)	合格

2	细菌总数	个/g	＜5.0×10³	＜5.0×10³	3.1×10³	合格
2	细菌总数	个/g	＜5.0×10³	＜5.0×10³	3.1×10³	合格	3	总生物碱	％	≥0.3	≥0.3	1.7	合格
4	总皂苷	％	≥0.6	≥0.6	5.3	合格	3	总生物碱	％	≥0.3	≥0.3	1.7	合格
4	总皂苷	％	≥0.6	≥0.6	5.3	合格	5	霉菌总数	个/g	＜6.0×10²	＜6.0×10²	5.5×10²	合格

本发明的饲料添加剂中含有生物碱、皂苷类、多糖、有机酸等活性成分。它可以直接杀菌、抑菌，又可以通过大量活性物质调节机体免疫功能和新陈代谢，增强体液免疫和细胞免疫功能。

委托新疆农业大学在军户迪卡种猪场进行仔猪饲喂的饲料中加入本发明的添加剂，与不加本发明添加剂对照组的对比试验，仔猪饲喂试验结果见表2。

表2

组别	出生重	断奶量	始重	末重	总增重	日增重	比较
组别	出生重	断奶量	始重	末重	总增重	日增重	比较	试验组(32头)	1.40	7.45	10.39	23.94	13.55	0.45	0
对照组(32头)	1.39	7.53	10.29	22.77	12.48	0.42	-0.03	试验组(32头)	1.40	7.45	10.39	23.94	13.55	0.45	0

从表2可以看出，试验猪的日增重与对照组相比，在饲料中加入本发明的添加剂后，显著提高了仔猪的增重水平，提高幅度达7.14％。

表3为仔猪饲料利用情况表。

表3

组别	每组窝数	头均耗料(kg/头·日)	头均增重(kg/头·日)	料重比	比较
组别	每组窝数	头均耗料(kg/头·日)	头均增重(kg/头·日)	料重比	比较	试验组(32头)	4	0.931	0.45	2.07	0
对照组(32头)	4	0.894	0.42	2.13	±0.06	试验组(32头)	4	0.931	0.45	2.07	0

从表3可以看出，就料重而言，实验组略好于对照组，料重下降了2.9％。

委托新疆农业大学对蛋鸡饲喂试验结果见表4。

表4试验期内各组之间的产蛋率和采食量比较表

周龄	试验组(400只)				对照组(400只)
	试验组(400只)				对照组(400只)				产蛋率(％)	采食量(g)	破蛋数(枚)	软蛋数(枚)	产蛋率(％)	采食量(g)	破蛋数(枚)	软蛋数(枚)
	50周	79.09	126.56	5	4	78.37	127.65	3	产蛋率(％)	采食量(g)	破蛋数(枚)	软蛋数(枚)	产蛋率(％)	采食量(g)	破蛋数(枚)	软蛋数(枚)	10
51周	50周	79.09	126.56	5	4	78.37	127.65	3	80.40	126.80	7	5	78.30	127.41	4	7	10
51周	52周	78.58	129.78	4	1	75.42	129.78	9	80.40	126.80	7	5	78.30	127.41	4	7	2

结果：50周产蛋率提高0.92％；51周产蛋率提高2.7％；52周产蛋率提高4.2％。试验期内采食量无显著差异(p＜0.05)。

本发明饲料添加剂对奶牛饲养效果的试验，见表5、表6。

表5两组奶牛产奶性能情况

组别头试验始重结束重头增重日均产乳乳脂率折4％标准校正体重后头日耗头日耗奶料比

数天数 (kg) (kg) (kg) 量(kg) (％) 乳量(kg) 的产乳量精料精料

(kg) (kg) (kg)

试验组 5 30 542.8±7.7 544.59±7.7 1.79 19.5±1.21 3.51 18.07±1.12 18.55±1.12 8 24.8 2.32∶1

对照组 30 543.1±7.8 544.74±7.9 1.60 180±1.25 3.52 16.70±1.16 17.14±1.16 8 23.9 2.14∶1

注：每增重1kg体重折奶8kg计算

表6两组奶牛经济效益情况分析

组别头试验头日产乳收入头日饲料费头日均

数天数产乳量单价金额耗粘料单价耗粗料单价合计获毛利

(kg) (元/kg) (元) (kg) (元/kg) (kg) (元/kg) (元) (元)

试验组 5 30 18.55 1.60 29.68 8 1.50 24.8 0.10 14.48 15.2

对照组 5 30 17.14 1.60 27.42 8 1.50 23.9 0.10 14.39 13.03

注：在实验中未测定干草饲喂量，措意效益分析中未计算干草成本

从表可以看出，试验组日均产乳量为19.5±1.21kg，对照组为18.0±1.25kg，经t检验，两组差异显著(P＜0.05)。

校正体重后的产乳量：试验组为18.55±1.12kg，对照组为17.14±1.16kg，两组差异显著(P＜0.05)。

本次试验证明泌乳奶牛日粮中添加本发明饲料添加剂提高了乳牛的产奶量和奶品质等生产性能，该产品不影响奶牛正常生理代谢，成本低，应用后经济效益显著。

本发明饲料添加剂对小鼠免疫功能的影响

摘要：目的：研究本发明饲料添加剂对小鼠免疫功能的影响。方法：将ICR小鼠分为益绿素8g/kg，4g/kg，2g/kg三组和空白对照组(给予NS)，采用小鼠免疫器官称重法；小鼠碳粒廓清法；血清溶血素测定法，观察对小鼠免疫系统的影响。结果：本发明饲料添加剂8g/kg，4g/kg组能显著提高小鼠胸腺指数，脾指数，小鼠碳粒廓清率及血清溶血素抗体形成。

试验结果见表7、表8、表9。

表7本发明饲料添加剂对小鼠胸腺及脾脏指数的影响(x±s)

组别动物数胸腺指数脾指数(n) (mg/kg) (mg/kg)
组别动物数胸腺指数脾指数(n) (mg/kg) (mg/kg)	生理盐水(NS) 10 2.89±0.57 2.37±0.32本发明饲料添加剂8g/kg 10 3.53±0.66^* 2.93±0.41^本发明饲料添加剂4g/kg 10 3.34±0.70^ 2.84±0.53本发明饲料添加剂2g/kg 10 3.09±0.64 3.01±0.81

^*P＜0.05与NS组比较

表8本发明饲料添加剂对小鼠碳粒廓清率的影响(x±s)

组别动物数 (nK×100^-2 α值
组别动物数 (nK×100^-2 α值	生理盐水(NS) 10 5.73±2.04 7.69±1.08本发明饲料添加剂8g/kg 10 7.94±1.95^* 8.71±1.10^本发明饲料添加剂4g/kg 10 8.03±2.20^ 8.84±1.27本发明饲料添加剂2g/kg 10 7.14±1.15 8.46±1.19

^*P＜0.05与NS组比较

表9本发明饲料添加剂对小鼠血清溶血素抗体的影响(x±s)

组别动物数(n) HC₅₀
组别动物数(n) HC₅₀	生理盐水(NS) 10 77.94±10.90本发明饲料添加剂8g/kg 10 90.21±7.84^本发明饲料添加剂4g/kg 10 89.76±5.37^本发明饲料添加剂2g/kg 10 85.67±4.39

^*P＜0.05与NS组比较

本发明饲料添加剂8k/kg，4k/kg组均能显著提高小鼠胸腺指数和脾指数；本发明饲料添加剂8k/kg，4k/kg组均能显著提高小鼠碳粒廓清率；本发明饲料添加剂8k/kg，4k/kg组均能提高小鼠血清溶血素抗体形成。2g/kg也能提高各指标水平，但与NS组相比没有显著区别。

本发明饲料添加剂能促进小鼠免疫器官生长，提高巨噬细胞吞噬能力，促进T细胞介导的推迟性变态反应，对小鼠非特异性免疫、细胞免疫及体液免疫有促进作用。

本发明饲料添加剂组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验。

目的：在加与不加S9活化系统的情况下，检测本发明饲料添加剂对组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌是否具有突变作用。

配制方法：精确称量本发明饲料添加剂以50％乙醇溶解，配制成0.5、2、5、20和50mg/ml的5个浓度。

对照品：阳性对照；阿的平，对硝基喹啉，甲基甲烷磺酸酯，2-氨基芴，二-羟基蒽醌。

溶剂对照：50％乙醇。空白对照：不加受试物和溶剂。

菌株：实验菌株名称：组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌(S.Typhimurium)，四株菌株为TA₉₇、TA₉₈、TA₁₀₀、 TA₁₀₂。

试验分活化实验(+S₉)及非活化实验(-S₉)，同时设相应的阳性和阴性对照组。试验结果见表10。

表10本发明饲料添加剂Ames试验结果(6皿均值±标准值)

剂量(mg/皿)	TA₉₇ TA₉₈ TA₁₀₀ TA₁₀₂
	TA₉₇ TA₉₈ TA₁₀₀ TA₁₀₂	-S₉ +S₉ -S₉ +S₉ -S₉ +S₉ -S₉ +S₉
	0.050.20.52.05.0空白对照溶剂对照阳性对照*	-S₉ +S₉ -S₉ +S₉ -S₉ +S₉ -S₉ +S₉	135±9 139±9 37±5 39±4 144±10 148±7 242±11 245±11137±13 133±10 36±4 34±5 143±9 145±10 243±7 249±10136±7 137±13 37±2 36±7 145±11 147±11 250±12 243±9128±11 138±14 35±3 38±4 139±6 138±11 244±13 246±11110±10 137±7 36±5 33±4 138±9 137±7 239±9 239±13141±15 137±9 34±3 36±5 140±8 148±8 246±13 251±10138±17 140±17 33±4 34±4 143±9 150±10 244±7 249±151931±143 1467±121 826±60 2493±215 1599±100 1526±111 2370±234 857±46

*阳性物：不加用S₉：TA₉₇ 7500μg/皿阿的平；TA₉₈ 200μg/皿对硝基喹啉；TA₁₀₀及TA₁₀₂1μl/皿甲基甲烷磺酸酯；加用：S₉：TA₉₇、TA₉₈、TA₁₀₀10g/皿2-氨基芴；TA₁₀₂50μg/皿1.8-二羟基蒽醌

9.结论

各试验组4个菌株加与不加S9活化系统回变菌落菌数均未超过阴性对照回变菌落数的2倍，固可认为本发明饲料添加剂的Ames试验为阴性结果。

本发明饲料添加剂的体内、外抗氧化试验，观察本发明饲料添加剂对小鼠肝脏脂质过氧化物生成的影响，以判断其抗氧化活性，结果见表11、表12。

表11本发明饲料添加剂对小鼠肝脏过氧化脂质生成的影响(体外试验)

组别动物数浓度 MDA IC₅₀(n) (μg/ml) nmol/g μg/ml
组别动物数浓度 MDA IC₅₀(n) (μg/ml) nmol/g μg/ml	NS 10 130.71±28.44VitaminE 10 0.01 41.80±10.21^**本发明饲料添加剂10 0.1 120.54±13.810.5 102.18±11.65^ 1.1±0.21 61.84±10.06^*5 22.79±5.18^10 20.84±7.43^**

^***P＜0.001 ^**P＜0.01 ^*P＜0.05均与NS组比较

表12本发明饲料添加剂对小鼠肝脏过氧化脂质生成的影响(体内试验)

组别动物数剂量 MDA(n) (g/kg) nmol/g
组别动物数剂量 MDA(n) (g/kg) nmol/g	NS 10 10.61±3.62VitaminE 10 0.075 5.44±2.05^本发明饲料添加剂 10 1 5.71±2.14^10 2 3.78±1.85^*10 4 5.03±2.11^

^***P＜0.001 ^**P＜0.01与NS组比较

体外试验结果表明：本发明饲料添加剂对小鼠肝脏过氧化脂质的生成有明显的抑制作用。其半数抑制浓度(IC₅₀)为1.1±0.2μg/ml。体内试验表明：本发明饲料添加剂对小鼠肝脏过氧化脂质的生成有明显的抑制作用。

肝脏中含有丰富的线粒体、内质网和高尔基复合体，这些细胞器膜在没有抗氧化药物的作用下易产生脂质过氧化反应，这主要是由于机体内活性氧、自由基过多而引起的。可造成细胞膜流动性下降、蛋白质变性、酶失活、DNA链断裂、生物结构受损及致机体细胞解体死亡^[2]。很多疾病的发生均与自由基引发脂质过氧有关，本发明饲料添加剂能够抑制该反应，可以减少与之相关的疾病发生。

本发明饲料添加剂对实验性大肠杆菌病的预防与治疗效果试验报告

一、材料与方法

(一)药物：受试药物是本发明饲料添加剂。对照抗菌药物为新疆天康药业生产的恩诺沙星。本发明饲料添加剂1∶6水剂的制备；取药1份加水10份，将药粉放入水中浸泡15分钟，煮熬至沸腾改用火熬10分钟，并使本发明饲料添加剂的最终含量为1∶6(kg/6ml)。

(二)大肠杆菌标准菌株、复状及菌液制备：本使用用鸡源性大肠杆菌O_7H标准株，购于中国兽药检查所。使用前首先在普通琼脂培养基上复状，然后接种于肉汤中培养24小时，制成菌液，最后测定其含菌量并稀释成所需浓度。

(三)体外抑菌试验：将受试药物本发明饲料添加剂做成不同浓度(2.55、5％、10％、和20％)的水剂，分别浸泡特制专用纸片、制成药敏片；然后用常规方法作药敏试验，测定其抑菌圈大小，检验其对实验菌的抑菌作用，同时以不同浓度(1000ppm、500ppm、50ppm和25ppm)的恩诺沙星对照。

(四)实验动物及其饲养：950只1日龄商品代雄型蛋鸡雏(购于北京种禽公司)，饲养于天康公司的实验动物室内，作常规免疫(包括ND、IBD和IB)所用的饲料不含抗菌药物，由新疆农业大学动医系特别试验前抽查5％的鸡雏，剖检观察并作细菌学检查(重点是大肠杆菌)，以确认其为无相关病菌感染的健康鸡。

(五)攻毒剂量的确定(预试验)：80只14日龄健康鸡，分为4组，每组20只，3组为感染组，1组为对照组。感染组又分高剂量组(每只鸡接种0.9亿菌)，中剂量组(每只接0.6亿菌)和低剂量组(接0.3亿)；对照鸡接0.5ml生理盐水。据发病、病变和致死情况。最后确定0.6亿菌量为本试验攻毒量。

(六)主试验：将700只试验鸡随机分为6组。

1、中药预防组：100只，1-20日龄以0.3％的本发明饲料添加剂拌料，21日龄攻毒(肌肉注射大肠杆菌0.6亿，0.5ml)，21-33日龄以0.25％的浓度拌料。

2、中药治疗组：100只，21日龄攻毒，22-33日龄自由饮用含药量1/6的药水。

3、抗菌素预防组：100只，1-33日龄以30ppm的恩诺沙星饮水，21日龄攻毒。

4、抗菌素治疗组：100只，21日龄攻毒，22-33日龄以50ppm的恩诺沙星饮水。

5、健康攻毒对照组：150只，21日龄攻毒，不做其他处理。

6、对照组： 150只，21日龄肌肉注射生理盐水0.5ml，不做其他处理。

表13各组及病理剖检和菌检率的动态变化

	肝周炎	心包炎	脾肿大	气囊炎	菌检率
	肝周炎	心包炎	脾肿大	气囊炎	菌检率	攻毒第3天中预组中治组抗预组抗治组攻毒组健康组	60％(3/5)0％(0/5)0％(0/5)0％(0/5)80％(4/5)0％(0/5)	60％(3/5)20％(1/5)0％(0/5)0％(0/5)80％(4/5)0％(0/5)	60％(3/5)0％(0/5)20％(0/5)0％(0/5)80％(4/5)0％(0/5)	40％(3/5)20％(1/5)20％(1/5)0％(0/5)100％(5/5)0％(0/5)	80％(4/5)40％(2/5)20％(1/5)0％(0/5)80％(4/5)0％(0/5)

攻毒第6天中预组中治组抗预组抗治组攻毒组健康组	80％0％0％0％100％0％	100％0％0％0％100％0％	60％20％0％0％80％0％	80％0％0％0％80％0％	60％20％0％0％40％0％
攻毒第6天中预组中治组抗预组抗治组攻毒组健康组	80％0％0％0％100％0％	100％0％0％0％100％0％	60％20％0％0％80％0％	80％0％0％0％80％0％	60％20％0％0％40％0％	攻毒第8天中预组中治组抗预组抗治组攻毒组健康组	60％0％0％0％80％0％	60％0％0％0％80％0％	80％0％20％0％80％0％	60％0％0％0％60％0％	20％0％0％0％20％0％
攻毒第10天中预组中治组抗顶组抗治组攻毒组健康组	40％0％0％0％0％0％	0％0％0％0％40％0％	0％0％0％0％20％0％	0％0％0％0％0％0％	0％0％0％0％0％0％	攻毒第8天中预组中治组抗预组抗治组攻毒组健康组	60％0％0％0％80％0％	60％0％0％0％80％0％	80％0％20％0％80％0％	60％0％0％0％60％0％	20％0％0％0％20％0％

注：(1)每次剖检各组鸡均为5只

(2)12天以后各组鸡趋于平稳，病理变化消失，菌检率趋于零。

二、试验结果

(一)临床症状：健康对照、抗菌素预防和抗菌素治疗三组鸡在攻毒后未出现明显症状；中药治疗组用药1天后(23日龄)只有5％的鸡有食欲下降和精神不振；中药预防和攻毒对照三组，在攻毒后约有90％的鸡表现为严重的食欲下降和精神萎顿，持续5-7天。

(二)各组鸡病理剖检及细菌检出率的动态变化：详见表13。

(三)各组鸡增重率的动态变化及最终死亡率：见表14。

表14各组鸡体重动态变化及总死亡率

攻毒前攻毒后6天攻毒后12天攻毒后20天总死亡率
攻毒前攻毒后6天攻毒后12天攻毒后20天总死亡率	中预组198克 252 346 478 8％(8/100)中治组201克 294 335 476 2％(2/100)抗预组201克 296 402 565 1％(1/100)抗治组206克 298 407 471 0％(0/100)攻毒组192克 255 336 466 12％(18/50)健康组198克 285 373 512 0％(0/150)

注：每次称重时，各组体重数据为30-80只的平均体重。

三、讨论与结果

(一)受试本发明饲料添加剂体外无抑制作用：药敏试验表明，2.5％、5％、10％、20％的本发明饲料添加剂体外皆不抑菌，而对照药物恩诺沙星1000ppm、500ppm、50ppm和25ppm皆抑菌。因此可以推论受试体外对大肠杆菌无抑制作用。由于中药的特殊性(由植物细胞组成，非单一化学成分)，虽然本发明饲料添加剂体外不抑菌，但不表示其体内就必然不抑菌。

(二)本试验条件下拌料给药对鸡大肠杆菌有预防作用：中药预防组的临床症状和病理剖检变化较抗生素组重，攻毒后10天明显下降，这表明从1-33日龄在饲料中添加0.3-0.25％的本发明饲料添加剂对鸡大肠杆菌病有预防作用。

(三)试验条件下本发明饲料添加剂水煎剂饮水给药对鸡大肠杆菌病有较好的治疗作用：从发病情况、临床症状、感染率、剖检变化、增重率和死亡率等多方面看，攻毒后，2-12天以1∶6的水煎剂混饮给与本发明饲料添加剂，对鸡大肠杆菌病较好的治疗作用，但其疗效稍差于恩诺沙星预防和治疗组。有趣的是用药6天时，本组鸡的增重率与健康鸡、抗菌药预防(治疗)鸡基本一致，但给药12天时却显著下降，说明以高浓度本发明饲料添加剂饮水给药不宜超过8日，否则会逐渐显现出毒性作用。

(四)小结：本发明饲料添加剂能够有效地替代抗生素。

具体实施方式

按下述配比称取原料(千克)

淫羊藿15、党参10、黄芪10、甘草7。

生产方法如下：

1、按上述配方分别称取四味药材饮片，加入浓度为50％的乙醇，其重量为四味药材饮片重量的12倍，进行回流提取3次，每次提取1.5小时，每次加12倍量，其浓度50％的乙醇；2、合并3次的提取液，进行过滤；3、将滤液浓缩至密度为1.30g/cm³的浸膏，浓缩温度为60℃-65℃；4、减压干燥，干燥温度为80℃，将干燥后的结块粉碎成60目的细粉，包装出厂。

Claims

1、一种中草药复方提纯饲料添加剂，其特征是：它是由下列重量配比的原料制成的制剂：

淫羊藿12-18、党参8-12、黄芪8-12、甘草5-9。

2、据权利要求1所述的中草药复方提纯饲料添加剂，其特征是：各原料的重量配比是：

淫羊藿14-16、党参9-11、黄芪9-11、甘草6-8。

3、据权利要求1所述的中草药复方提纯饲料添加剂，其特征是：各原料的重量配比是：

淫羊藿15、党参10、黄芪10、甘草7。

4、一种中草药复方提纯饲料添加剂的制备方法，其特征是：①、按上述配方分别称取四味药材饮片，加入浓度为50％的乙醇，其重量为四味药材饮片重量的10-14倍，进行回流提取3次，每次提取1.5小时，每次加10-14倍量，其浓度50％的乙醇；②、合并3次的提取液，进行过滤；③、将滤液浓缩至密度为1.30g/cm³的浸膏，浓缩温度为60℃-65℃；④、减压干燥，干燥温度为70℃-85℃，将干燥后的结块粉碎成40-60目的细粉，包装出厂。