CN1434125A - 利用提取甾体皂甙元的残渣生产单细胞蛋白的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用提取甾体皂甙元的残渣生产单细胞蛋白的方法，包括菌种选择、菌种生产和单细胞蛋白生产，其特征在于：选择下列酵母菌群作菌种假囊酵母、丝孢酵母、假丝酵母、油脂酵母、汉逊酵母、扣囊拟内孢酵母、酒精酵母，经琼脂斜面培养基、试管、三角瓶、麦芽汁培养基扩大培养后再经母罐培养、繁殖罐培养、车间扩大培养获取生产菌种，各菌种混合后加入到经高压灭菌后的残渣作固体发酵，温度为28－32℃，时间为5－7天出料，熟化、膨化干燥后即为单细胞蛋白，本发明不但利用了甾体皂甙元生产的残渣，减少的废渣对环境污染，变废为宝，而且通过残渣生产出的单细胞蛋白质量高。
Description
技术领域：
本发明涉及一种蛋白质生产方法，尤其是一种利用提取甾体皂甙元的残渣生产单细胞蛋白的方法。
背景技术：
众所周知在生产甾体皂甙元过程中会产生较大数量的残渣，这种残渣中含有大量淀粉及其它营养物质，过去这种富有营养的物质统统被抛弃，不但大量浪费资源，而且还污染环境，同时单细胞蛋白是饲喂动物最好的蛋白质来源，因此如何运用大量废弃的甾体皂甙生产过程中的下脚料来生产单细胞蛋白深受人们关注，人们在这方面也曾进行过偿试，但由于选材及工艺方面存在的问题，一直未见有成功的报道。
本发明的内容：
本发明的目的在于克服现有技术不足，提供一种利用提取甾体皂甙元的残渣生产单细胞蛋白的方法，本发明目的通过下述技术方案来实现：
①选择下列酵母菌群作菌种
假囊酵母Eremotnecium 丝孢酵母Trichosporon.spp
假丝酵母Candida utilis 油脂酵母Lipomyces.spp
汉逊酵母Hansenula.spp 扣囊拟内孢酵母Endomycopsis
酒精酵母Alcoholyeast
②菌种生产，将上述各菌种分别经琼脂斜面培养基、试管、三角瓶、麦芽汁培养基扩大培养后再经母罐培养、繁殖罐培养、车间扩大培养获取生产菌种，母罐、繁殖罐和车间扩大培养均用改进的麦芽汁培养基；即麦芽汁培养基中加入10-50％重量份的残渣，其中母罐培养基中加入10-20％重量份的残渣，繁殖罐培养基中加入30-40％重量份的残渣，车间生产菌种培养基中加入50％重量份的残渣。菌种生产按常规酵母菌生产工艺进行，各阶段培养时间在18-36小时，温度在25-32℃条件下进行。菌种含量一般在20-30亿/ml个，将上述各生产菌种混合备用。各菌种混合用量为假囊酵母∶丝孢酵母∶假丝孢酵母∶油脂酵母∶汉逊酵母∶扣囊拟内孢酵母∶酒清酵母＝1∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2重量比，
③单细胞蛋白生产，甾体皂甙生产的残渣经高压灭菌后，加入复合菌种，搅拌混合后加入冷开水，并用10％盐酸液调PH至5-5.5，残渣∶菌种∶冷开水＝100∶4-6∶60-80重量比，置入具有控湿控温的发酵塔内作固体发酵，温度为28-32℃，时间为5-7天。当活细胞数达到20-30亿个/克时即可出料，熟化、膨化干燥后即为单细胞蛋白，可作饲喂动物的饲料，考虑到运输、储藏和使用方便，可将上述单细胞蛋白再行粉碎后通过成型机造颗。
本发明选取了在甾体皂甙元残渣中菌体生长速度快、繁殖能力强，产率高，合成蛋白质能力强，蛋白质含量高，杂食性强，能充分利用残渣中营养物并具有适应PH较低培养基的酵母菌种。
本发明不但利用了甾体皂甙元生产的残渣，减少的废渣对环境污染，变废为宝，而且通过残渣生产出的单细胞蛋白质量高。经检测本发明生产的单细胞蛋白营养成份如表1及各种氨基酸，维生素含量见表2。
表1 复合酵母菌生产单细胞蛋白营养成份表
| 成份 | 水份 | 粗蛋白质 | 粗脂肪 | 可消化率 | 粗纤维 | 灰分 |
| 数量(％) | 6 | 41 | 2.3 | 35.1 | 5.6 | 7.3 |
表2 复合酵母生产单细胞蛋白的氨基酸、维生素含量表
| 名 称 | 含量(氨基酸8/100d克)(维生素mg/kg) | 名 称 | 含量(氨基酸g/100)(维生素mg/kg) |
| 天门冬氨酸 | 5.3 | 异亮氨酸 | 2.4 |
| 苏氨酸 | 2.9 | 亮氨酸 | 4 |
| 丝氨酸 | 2.3 | 酪氨酸 | 1.6 |
| 谷氨酸 | 7.8 | 苯丙氨酸 | 2.1 |
| 甘氨酸 | 2.6 | 赖氨酸 | 3.3 |
| 丙氨酸 | 4.5 | 组氨酸 | 1.01 |
| 胱氨酸 | 0.35 | 精氨酸 | 3.01 |
| 缬氨酸 | 4.2 | 色氨酸 | 0.43 |
| 蛋氨酸 | 1.1 | 脯氨酸 | 1.2 |
| 维生素B1 | 6.1 | 维生素B6 | 17 |
| 维生素B2 | 46.8 | 维生素B7 | 1.4 |
| 维生素B3 | 69 | 叶 酸 | 3.1 |
| 维生素B4 | 2853 | 维生素B12 | 0.06 |
| 维生素PP | 485 |
具体实施方式：
实施例1：
1、选取培育菌种行扩大培养，选取假囊酵母、丝孢酵母、假丝酵母、油脂酵母、汉逊酵母、扣囊拟内孢酵母、酒精酵母作菌种种源，各菌种分别先在普通琼脂斜面培养基上30℃培育24小时后，依次接种到试管和三角瓶麦芽汁培养基中扩大培养，扩大培养后的菌种通过小母罐、大母罐和繁殖罐再扩大培养、最后通过车间扩大培养即为生产用菌种，小母罐、大母罐、繁殖罐及车间扩大培养，均用改进的麦芽汁培养基，小母罐麦芽汁培养基中加入10％重量份残渣，大母罐麦芽汁中加入20％重量份残渣，繁殖罐加麦芽汁培养基中加入30-40％重量份残渣，车间生产的培养基中加入麦芽汁50％重量份残渣，每种培养均在30℃培养18-36小时，本实施例选用母罐培养18小时，繁殖罐培养24小时车间扩大培养36小时。
2、将各种培养好的生产菌种按1∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2重量比，混合作复合菌种备用，本实施例选用重量比为1∶0.9∶1.2∶1.2∶1.1∶0.9∶1.2。
3、将提取甾体皂甙元白的下脚料经灭菌处理后，加入复合菌种和凉开水，无菌水更好，并用提取甾体皂甙所产生的废酸液调PH于5(用10％盐酸也可)，下脚料∶复合菌种∶水＝100∶5∶70重量比混合均匀后置于有控湿控温的发酵塔中作固体发酵，发酵湿度控制在85-90％，发酵温度控制在30℃，发酵时间为6天。一般测定活菌总数达20-30亿个/克时即可出料，再经100℃蒸1小时熟化，再置入膨化机膨化干燥即为单细胞蛋白，考虑到运输和使用方便，本实施例将干燥好的单细胞蛋白进行粉碎并制粒。
实施例2：
1、选取培育菌种行扩大培养，选取假囊酵母、丝孢酵母、假丝酵母、油脂酵母、汉逊酵母、扣囊拟内孢酵母、酒精酵母作菌种种源，各菌种分别先在普通琼脂斜面培养基上32℃培育24小时后，依次接种到试管和三角瓶麦芽汁培养基中扩大培养，扩大培养后的菌种通过小母罐、小母罐、大母罐、繁殖罐及车间扩大培养，均用改进的麦芽汁培养基，小母罐麦芽汁培养基中加入10％重量份残渣，大母罐麦芽汁中加入20％重量份残渣，繁殖罐加麦芽汁培养基中加入30-40％重量份残渣，车间生产的培养基中加入麦芽汁50％重量份残渣，大母罐和繁殖罐扩大培养、最后通过车间扩大培养即为生产用菌种，每种培养均在32℃培养18-36小时，本实施例选用母罐培养20小时，繁殖罐培养36小时车间扩大培养24小时。
2、将各种培养好的生产菌种按1∶1.2∶0.9∶0.9∶0.9∶1.1∶1.2重量比混合作复合菌种备用。
3、将提取甾体皂甙元白的下脚料经灭菌处理后，加入复合菌种和凉开水，并用提取甾体皂甙所产生的废酸液调PH于5.5(用10％盐酸也可)，下脚料∶复合菌种∶水＝100∶6∶80重量比，混合均匀后置于有控湿控温的发酵塔中作固体发酵，发酵湿度控制在85-90％，发酵温度控制在30℃，发酵时间为6天。一般测定活菌总数达20-30亿个/克时即可出料，再经100℃蒸1小时熟化，再置入膨化机膨化干燥即为单细胞蛋白。
实施例3：
1、选取培育菌种行扩大培养，选取假囊酵母、丝孢酵母、假丝酵母、油脂酵母、汉逊酵母、扣囊拟内孢酵母、酒精酵母作菌种种源，各菌种先在普通琼脂斜面培养基上25℃培育24小时后，依次接种到试管和三角瓶麦芽汁培养基中扩大培养，扩大培养后的菌种通过小母罐、大母罐和繁殖罐培养、最后通过车间扩大培养即为生产用菌种，小母罐、大母罐、繁殖罐及车间扩大培养，均用改进的麦芽汁培养基，小母罐麦芽汁培养基中加入10％重量份残渣，大母罐麦芽汁中加入20％重量份残渣，繁殖罐加麦芽汁培养基中加入30-40％重量份残渣，车间生产的培养基中加入麦芽汁50％重量份残渣，每种培养均在25℃培养18-36小时，本实施例选用母罐培养18小时，繁殖罐培养24小时车间扩大培养36小时。
2、将各种培养好的生产菌种按1∶1.1∶1.1∶1.2∶1.1∶1.2∶0.9重量比混合作复合菌种备用。
3、将提取甾体皂甙元白的下脚料经灭菌处理后，加入复合菌种和凉开水，并用提取甾体皂甙所产生的废酸液调PH于5.3(用10％盐酸也可)，下脚料∶复合菌种∶水＝100∶4∶60重量比，混合均匀后置于有控湿控温的发酵塔中作固体发酵，发酵湿度控制在85-90％，发酵温度控制在30℃，发酵时间为6天。一般测定活菌总数达20-30亿个/克时即可出料，再经100℃蒸1小时熟化，再置入膨化机膨化干燥即为单细胞蛋白。考虑到运输和使用方便，本实施例将干燥好的单细胞蛋白进行粉碎并制粒。
实施例4：
1、选取培育菌种行扩大培养，选取假囊酵母、丝孢酵母、假丝酵母、油脂酵母、汉逊酵母、扣囊拟内孢酵母、酒精酵母作菌种种源，各菌种分别先在普通琼脂斜面培养基上29℃培育24小时后，依次接种到试管和三角瓶麦芽汁培养基中扩大培养，扩大培养后的菌种通过小母罐、大母罐和繁殖罐培养、最后通过车间扩大培养即为生产用菌种，小母罐、大母罐、繁殖罐及车间扩大培养，均用改进的麦芽汁培养基，小母罐麦芽汁培养基中加入10％重量份残渣，大母罐麦芽汁中加入20％重量份残渣，繁殖罐加麦芽汁培养基中加入30-40％重量份残渣，车间生产的培养基中加入麦芽汁50％重量份残渣，每种培养均在28℃培养18-36小时，本实施例选用母罐培养18小时，繁殖罐培养24小时车间扩大培养36小时。
2、将各种培养好的生产菌种按1∶1∶1∶1∶1∶1∶1重量比混合作复合菌种备用。
3、将提取甾体皂甙元白的下脚料经灭菌处理后，加入复合菌种和凉开水，并用提取甾体皂甙所产生的废酸液调PH于5.4(用10％盐酸也可)，下脚料∶复合菌种∶水＝100∶5∶70重量比，混合均匀后置于有控湿控温的发酵塔中作固体发酵，发酵湿度控制在85-90％，发酵温度控制在30℃，发酵时间为6天。一般测定活菌总数达20-30亿个/克时，即可出料，再经100℃蒸1小时熟化，再置入膨化机膨化干燥即为单细胞蛋白。
Claims (2)
1、一种利用提取甾体皂甙元的残渣生产单细胞蛋白的方法，包括菌种选择、菌种生产和单细胞蛋白生产，其特征在于：
①选择下列酵母菌群作菌种
假囊酵母Eremotnecium 丝孢酵母Trichosporon.spp
假丝酵母Candida utilis 油脂酵母Lipomyces.spp
汉逊酵母Hansenula.spp 扣囊拟内孢酵母Endomycopsis
酒精酵母Alcoholyeast
②菌种生产，将上述各菌种分别经琼脂斜面培养基、试管、三角瓶、麦芽汁培养基扩大培养后再经母罐培养、繁殖罐培养、车间扩大培养获取生产菌种，母罐、繁殖罐和车间扩大培养均用改进的麦芽汁培养基，各阶段培养时间在18-36小时，温度在25-32℃条件下进行，将上述各生产菌种混合备用，各菌种混合用量为假囊酵母∶丝孢酵母∶假丝孢酵母∶油脂酵母∶汉逊酵母∶扣囊拟内孢酵母∶酒清酵母＝1∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2∶0.9-1.2重量比；
③单细胞蛋白生产，甾体皂甙生产的残渣经高压灭菌后，加入复合菌种，搅拌混合后加入冷开水，并用10％盐酸液调PH至5-5.5，残渣∶菌种∶冷开水＝100∶4-6∶60-80重量比，置入具有控湿控温的发酵塔内作固体发酵，温度为28-32℃，时间为5-7天出料，熟化、膨化干燥后即为单细胞蛋白。
2、根据权利要求1所说的利用提取甾体皂甙元的残渣生产单细胞蛋白的方法，其特征在于：所述的改进麦芽汁培养基为麦芽汁培养基中加入10-50％重量份甾体皂甙元提取后的残渣。
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