CN1398186A - 含有起抑制雄性生殖毒性作用的果胶的药物组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及含有起抑制雄性生殖毒性作用的果胶的药物组合物。该药物组合物以受药者每公斤体重1微克至1000毫克的有效量口服给药。它可以用作为对于包括二噁英的环境激素产生的精子数量和活动性下降和雄性不育的预防剂/治疗剂。
Description
发明背景
发明领域
本发明涉及含有起抑制雄性生殖毒性作用的果胶的药物组合物。
现有技术的描述
近年来成为话题并且在美国、欧洲、日本等受到密切关注的所谓“环境激素”的内分泌系统干扰物质,是干扰内分泌系统功能的化学物质并且在体内有类似激素的活性。这种物质的例子是诸如各种工业化学产品、杀虫剂及除草剂之类的农业化学药品、有机重金属、焚烧炉中产生的二噁英、植物雌激素之类的激素类似物、二乙基乙烯雌酚之类的药用合成雌激素,以及其它食品或食品添加剂。这些物质中受到特别关注的是二噁英。
二噁英是有两个与两个氧原子化学地键合的苯环的有机化合物。普通可得到的二噁英是苯环中的氢被氯取代的氯代二噁英。有数十种氯原子数量和取代位置不同的二噁英。最有毒性而且最稳定的是有四个氯取代基的2,3,7,8-TCDD(四氯代苯并-p-二噁英)。由于二噁英易于在焚烧家庭垃圾或软化汽油时产生,它对环境更加有危害性(见S.Alex.villalobs,Michael J Anderson,and Peter Kelley,1996.“Dioxinline Properties of a TrichloroethyleneCombustion-Generated Aerosol,Environmental Health Perspectives”,104.p734-p743)。
二噁英一般经消化道、皮肤和呼吸器官吸收。二噁英吸收率随着品种、溶剂、二噁英同系物及异构体、同时摄取的物质、给药量、及年龄等而不同。吸收的二噁英一般积累在肝脏和脂性组织中,并且极少排出体外。
从动物实验可清楚地了解二噁英的毒性作用。据报告称,即使少量的二噁英,也会引起皮肤病,及引起肝脏毒性、肝癌及肝脏畸形。近年对人体进行的实验也证实了二噁英的危害。特别是,二噁英造成激素分泌失衡、降低生殖能力及免疫力、使生殖器畸变、抑制生长,并且导致癌症。从这样的实验充分地知道所述雄性生育能力下降可以是精子减少、精液减少、睾丸素浓度下降、精子活动性降低、变性精子数量增加、生殖器畸形、前列腺疾病,以及其它与生殖有关的组织中出现的问题。尽管对环境激素的毒性进行了积极的研究,但是还没有充分地研究对环境激素的预防剂/治疗剂。最近公知,绿茶提取物(以表儿茶精(epicatechin)和表没食子儿茶精(epigallocatechin)为有效成份)及人参提取物对抑制降低生殖能力的毒性有效。试验中,对豚鼠进行人参给药。检测结果表明显著抑制睾丸重量下降、输精管变细、胚上皮毁损、胚细胞变形等(见W.Kim,S.Hwang,H.Song,and S.Kim,“Panax Ginseng Protect the Testis Against2,3,7,8-Tetrachlorodibenzo-p-dioxin Induced Testicular Damage inGuinea Pigs”,BJU International 1999:83:842-849)。
当前尚没有揭示用果胶抑制环境激素引起的雄性生殖毒性。
美国专利5,834,442和5,895,784揭示了一种受药者口服调整pH值的柑桔果胶抑制原发肿瘤的方法。
国际申请第WO 9710727号公开揭示了使用酶减少血清从含果胶水性载体分离的方法。
WO 9631239揭示了可用于预防和治疗哺乳动物腹泻及胃溃疡的药物,其含有果胶和磷脂的混合物。
发明概述
多次实验后本申请人发现果胶对于抑制由包括二噁英的环境激素引起的雄性生殖毒性起作用。
果胶大量含于植物的初级细胞壁和中间板。果胶的主要生理作用是连接和保护细胞结构并且对保水力起作用。果胶含有部分多糖酸甲酯及其钠、钾、钙及铵盐。与果胶的功能性紧密相关的甲酯基团易于被碱水解,并且依水解率不同而具有各种功能性。
一般地,果胶易于水解并且有强吸水性。另外,果胶在水中形成亲水的胶体溶液,并且显现有高的粘度。
果胶当前用于许多行业,诸如糖果、食品添加剂、乳制品及化妆品。对医药领域的应用应当给与特别的关注。据认为果胶是有各种治疗作用的预防性食品。已经发现的果胶的作用之一是防止重金属或者放射性金属中毒。根据实验结果,果胶有与铅、汞、镉、钼、锰之类的重金属形成良好的络合物的能力及与钴、锶、铯、锆和钌之类的放射性金属形成良好的络合物的能力。因此果胶可防止金属中毒并且在金属于体内长期积累的过程中产生良好的作用。
另外,果胶降低血清胆固醇并且促进肠蠕动,从而解除便秘。它还降低糖尿病患者的血糖浓度,并对减肥和治疗胃肠失调有效。这些作用已经由实验证实了。当前已经将果胶用于以上的指征,并且正在研究果胶的其它应用方面。
GaLP-吡喃半乳糖
GaLUA-半乳糖诺品酸
L-Rhap-L-鼠李吡喃糖
L-Araf-L-呋喃糖。
本申请中所用术语“药用果胶”有别于一般的低级果胶,而在下文中指酯化度(果胶中的有机酸甲酯化度)低于50的。然而,本发明不受限于药用果胶(即,抑制雄性生殖毒性)。
本发明中使用的果胶可以用本发明人以前的申请,韩国专利申请(1999年10月19日提交)10-1999-45200号公开的方法制备。根据本方法,果胶可以通过下述步骤得到:干燥柑桔、苹果、橙、柠檬或类似果物的果肉、把干燥了的果肉切成碎末,水解和提取果胶、然后用膜式过滤器浓缩和干燥。该方法还含有相继地用碱和酸处理果胶并且用醇去掉水份进行提纯的步骤。
使用由上述方法制备的高纯度果胶,本发明可以产生优良的抑制包括二噁英在内的环境激素造成的雄性生殖毒性。
本申请中所使用的术语“雄性生殖毒性”指精子数量减少、精液减少、睾丸素浓度降低、精子活动性下降、变性精子数量增加、生殖器畸形、前列腺疾病和与生殖相关的其它组织中的类似问题的雄性生育能力下降。
为了达到本发明的主要目的,提供含有果胶的药物组合物,更优选地含有药用果胶的药物组合物。
本发明的一个实施例提供口服的药物组合物,其含有用于抑制由环境激素引起的雄性生殖毒性的果胶。因此可以以液体配方形式诸如凝胶、溶液或者悬浮液的形式制备含果胶的组合物,也可以以固体单位剂量形式诸如压片或者胶囊之类的形式制备含果胶的组合物。制备这种液体配方或者固体单位剂量形式的组合物的方法及这些方法所用的载体是相关技术中所公知的。在本发明的范围内可以附加地使用分散剂、乳化剂、表面活性剂、流动性控制剂、保存剂、调节剂等等。
尽管本申请人提出本发明的药物组合物优选地为口服形式,本申请中所述绝不应当解释为限制所述药物组合物的给药途径。本发明还考虑联合用药。换言之,可以与公知的对环境激素防护生育能力有效的成份(例如人参提取物及绿茶提取物)一起进行果胶给药。本发明所用的果胶可以用药理上可接受的载体给药,优选地利用适于特定的给药方法的无毒性载体给药。可以把果胶配制得以适于公知的给药方法。
果胶可以配制成不同于上述剂型的其它各种形式,诸如食品,包括保健食品和食物添加剂。
对于口服给药,配方应当含有足以产生对抗由环境激素包括二噁英引起的雄性生殖毒性的抑制作用的量的果胶。因此,本发明的药物组合物可以含有每公斤体重1微克至1000毫克量的果胶。果胶的治疗有效量按照受药者的年龄、性别、状态、饮食等等确定。“治疗有效量”指有效地得到根据本发明所要求的结果而没有任何药理副作用的量。所述所要求的结果是抑制附睾重量下降、抑制精子数量或者活性等的下降。
果胶可以用单一单位剂量的形式给药,也可以用分开的多剂量形式给药。
附图说明
图1是示出各实验组的图表。
图2是示出果胶对由TCDD引起的雄性生殖毒性的预防作用的附睾重量关系的图表。
图3是示出果胶对由TCDD引起的雄性生殖毒性的预3作用的精囊重量关系的图表。
图4是示出果胶对由TCDD引起的雄性生殖毒性的预防作用的精子活动性关系的图表。
图5是示出果胶对由TCDD引起的雄性生殖毒性的预防作用的精子数量关系的图表。
发明详述
本发明人进行了以下的实验研究果胶如何对二噁英引起的雄性生殖毒性起作用。
以下各例说明本发明而不以任何方式限制本发明的范围。
实施例1
材料和方法
(1)实验动物
三组,每组各含十只四周龄的雄性SD大鼠(斯普拉-道来氏大鼠),在实验室中饲养以适应环境。当SD大鼠五周龄时(110~120克),用之于实验。
(2)实验材料
避光保存的2,3,7,8-四氯代苯并-p-二噁英(TCDD)(NIH,美国)溶于丙酮,用玉米油稀释,以15微克/公斤的浓度腹腔内一次给药。果胶溶于消毒蒸馏水中,口服给药,每天给药量为50毫克/公斤。
(3)实验分组
实验分组为:(A)组在TCDD给药之前一周起给以果胶,(B)组仅给以TCDD,(C)组仅给以生理盐水。各组详情示于图1中。
分析及结果
(1)前列腺重量和精囊重量
分析
分离大鼠的前列腺和精囊,去除连接的脂肪组织后称重。
结果
用大鼠的体重除前列腺和精囊的重量。对每组十只大鼠的分析结果如下:
表1
给以果胶和TCDD | 仅给以TCDD | 对照组 | |
前列腺/体重(单位:%)(均值×100±标准差) | 0.0282±0.0053 | 0.0285±0.0063 | 0.0361±0.0077 |
精囊/体重(单位:%)(均值×100±标准差) | 0.2920±0.0482 | 0.2578±0.0589 | 0.3355±0.0851 |
此结果详示于图2和图3。
与对照组相比较,给以TCDD的两组显示前列腺和精囊对体重的比下降。当给以果胶时,前列腺恢复了31.2%。然而,精囊重量没有显著性改变。
(2)精子活动性
分析
切下右后附睾后置于预热至37.5℃的含有35毫升的HBSS(汉克氏平衡氯化钠溶液)的平皿中。避开血管,用手术刀(15号)在附睾上切两或三个切口。把平皿加盖然后缓慢搅拌。用滴管移液两或三次后把一或两滴滴至加热至37.5℃的载玻片上。用100倍的光学显微镜观察总数200个精子,计算具有活动性的精子百分比。
结果
观察的200个精子中有活动性的精子百分比如下:
表2
给以果胶和TCDD | 仅给以TCDD | 对照组 | |
活动性(单位:%) | 63.38±4.22 | 53.71±4.43 | 76.13±4.16 |
该结果详示于图4中。
在给以TCDD的两组中,精子的活动性显著下降。给以果胶的组活动性提高了40.5%。
(3)精子数量
分析
连皮剥离的右睾丸进行称重,然后投入到锥形管中,管内加入20毫升消毒蒸馏水。把睾丸进行均浆后用超声波处理5分钟。取出2毫升,加8毫升消毒蒸馏水稀释五次。把稀释了的睾丸移入血球计数器,在400倍的光学显微镜下对精子计数。表达式为:
精子数量×矩形因数×血球计数器因数×稀释倍数/睾丸重量=精子数量×1×104×(20×5)/睾丸重量
结果
表3
给以果胶和TCDD | 仅给以TCDD | 对照组 | |
精子数量/睾丸重量[单位:(#/克)×106)] | 93.74±15.40 | 89.66±8.61 | 108.84±5.59 |
该结果详示于图5。
由TCDD显著降低了的精子数量通过果胶给药提高了21.3%。
TCDD公知为二噁英类中最强的环境激素。该实验还表明给以TCDD显著地降低了精子数量、降低了精子活动性、并且减轻了精囊和前列腺的重量。相反,果胶抑制了作为环境激素的TCDD的作用,并且提高了精子的数量和活动性,增加了精囊和前列腺的重量。因此,可见果胶有效地防止由包括二噁英的环境激素造成的雄性生殖力下降。
如上例所证实,果胶对于由于二噁英中毒产生的精囊和前列腺重量降低及精子数量和活动性下降有抑制或者预防作用。因此,果胶可以用作对于包括二噁英的环境激素造成的雄性生殖力下降的预防剂/治疗剂。
Claims (6)
1.一种药物组合物,含有治疗有效量的果胶,用于抑制雄性生殖毒性。
2.如权利要求1所述的药物组合物,其特征在于,所述果胶的治疗有效量是每公斤体重1微克至1000毫克。
3.如权利要求1所述的药物组合物,其特征在于,该组合物口服给药。
4.如权利要求1所述的药物组合物,其特征在于,该组合物还包括药理上可接受的载体。
5.如权利要求1所述的药物组合物,其特征在于,所述的雄性生殖毒性包括精子数量降低、精液减少、睾丸素浓度降低、精子活动性下降、变性精子数量增加,生殖器畸变、前列腺疾病、及其它与生殖相关的组织的问题。
6.如权利要求1所述的药物组合物,其特征在于,该组合物还含有任何其它的具有保护雄性生殖力的药性的有效成份。
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |