CN1396269A - 一种用于同时检测多种细菌的寡核苷酸探针 - Google Patents
一种用于同时检测多种细菌的寡核苷酸探针 Download PDFInfo
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Abstract
一套用于同时检测多种细菌的寡核苷酸探针，属于微生物检测领域。探针设计在16s rRNA基因的可变区，具有较高的灵敏度和特异性，尤其适用于基于基因芯片原理的检测。在一定的使用条件下可以同时检测埃希氏菌属、志贺氏菌属、沙门氏菌属、弧菌属、葡萄球菌属、变形杆菌属、厌氧芽孢杆菌属、链球菌属、军团杆菌、铜绿假单胞菌等14个种属的细菌。可用于疾病诊断、抗菌素筛选、环境检测、食物中毒检测、细菌学分类与流行病学调查。
Description
本发明属本发明属于微生物检测技术、尤其是致病菌的核酸检测技术范畴。本发明涉及一套能够同时检测多种细菌的寡核苷酸探针、它的序列、它的使用方法和它的用途。
由致病菌引起的疾病每年导致成千上万人的死亡和无法估量的经济损失，因此，致病菌的快速、准确检测与鉴定是控制细菌性疾病发生及疾病诊断与治疗的重要手段。现有的细菌检测方法包括传统的细菌培养方法及生化鉴定、免疫学方法，这些方法存在操作繁琐、费时费力、检测效率低等缺点。基因芯片技术是近几年来迅速发展起来的新技术，利用它进行细菌检测具有快速、准确、高效等优越性，也是将来检测技术发展的方向。基因芯片技术检测的基础是设计一系列高灵敏度、高特异度、相互匹配的探针，固定在玻璃片等固相载体上，利用探针与样品的杂交反应，一次实验就可以确定样品中细菌的种类，大大提高检测效能，同时节省了人、财、物力(Anthony RM，Brown TJ and French GL.Rapid diagnosis ofbacteria by universal amplification of 23 S Ribosomal DNA followed byhybridization to an oligonucleotide array.J Clin Microbiol，2000，38：781-788.)。
本发明涉及的寡核苷酸探针全部为自行设计，探针设计在细菌16srRNA基因的可变区，目前尚未见国内外报道相同的序列及检测细菌的范围。
本发明的目的是提供一套用于同时检测多种细菌的寡核苷酸探针序列以及这套探针的使用方法和用途。这套探针特别适用于基于基因芯片原理(核酸杂交)的检测技术，将全套探针或其中的一部分固定在玻璃片等固相载体上，即可成为用于不同检测目的的基因芯片，能够快速、准确、高效地检测出样品中的细菌：包括埃希氏菌属、志贺氏菌属、沙门氏菌属、弧菌属、葡萄球菌属、变形杆菌属、厌氧梭状芽孢杆菌属、链球菌属的细菌以及军团杆菌、结核分枝杆菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、单核增生李斯特氏菌、铜绿假单胞菌、空肠弯曲菌等。如果制备成相应的试剂盒，可以广泛应用于临床细菌性疾病的诊断、抗生素筛选、环境监测与评价、食品卫生监督与检疫、食物中毒快速检测，以及细菌学分类与流行病学调查研究等方面。
本发明的目的是这样实现的：
这一套寡核苷酸探针设计在细菌16s rRNA基因的可变区，长度为20-28个碱基不等。每条探针的碱基序列可以与16s rRNA基因上特定区域DNA正链的碱基序列一致，也可以与16s rRNA基因上这一特定区域DNA负链的碱基序列一致。同一次杂交反应中使用的所有探针上述一致性相同。
每条探针的碱基序列与16s rRNA基因上特定区域DNA负链的碱基序列一致为准，本发明的整套探针的序列及其可以达到的检测功能是：
1 gtacaaggcccgggaacgtattcacc 与所有真细菌杂交，用于检测所有真
细菌
2 gacataaggggcatgatgatttgacgt 与革兰氏染色阳性细菌杂交，用于检
测革兰氏阳性细菌
3 gtcgtaagggccatgatgacttgacgt 与革兰氏染色阴性细菌杂交，用于检
测革兰氏阴性细菌
4 gtcatgaatcacaaagtggtaagcgc 与肠道细菌杂交，用于检测肠道细菌
5 acgacgcactttatgaggtccgcttg 与大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌杂
交，用于检测这三属细菌
6 gctcctaaaaggttactccaccggct 用于检测金黄色葡萄球菌的探针
7 cgacggctagctccaaatggttactg 血浆凝固酶阴性葡萄球菌检测探针
8 cggctagctccaaaaggttactctag 血浆凝固酶阴性葡萄球菌检测探针
9 tcacggtcttgcgtcttattgtacctac 用于检测肉毒梭状芽孢杆菌的探针
10 tagataatcggcttcgggcgtctccaac 用于检测艰难梭菌的探针
11 gaactgagactggtttttaagtttggct 用于检测产气荚膜梭菌的探针
12 ccctagagcataaggggcatgatgattt 用于检测破伤风梭菌的探针
13 ccgaagttaagctacctacttcttttac 用于检测福氏志贺氏菌的探针
14 gaaggttaagctacctacttcttttagc 用于检测宋内志贺氏菌的探针
15 cgaactgggacatattttatagatttgc 用于检测空肠弯曲菌的探针
16 aggtcgccccttcgccgccctctgtatc 用于检测嗜肺军团杆菌的探针
17 cgatccgaactgagaccggcttttaagg 用于检测结核分枝杆菌的探针
18 tactcgtaagggccatgatacgacttaa 用于检测普通变形杆菌的探针
19 cgcggcttggcaaccctttgtaccgacc 用于检测铜绿假单胞菌的探针
20 actgagaatagttttatgggattagg 用于检测单核增生李斯特氏菌的探针
21 gctccaccttcgcggtattcgctgccct 用于检测霍乱弧菌的探针
22 tcactttcgcaagttggccgccctctgt 用于检测河弧菌的探针
23 tggtaagcgtccccccgtagttgaaac 用于检测副溶血性弧菌的探针
24 tacgacagactttatgtggtccgcttgc 用于检测小肠结肠炎耶尔森氏菌探针
25 agattggctttaagagattagcttgccg 用于检测乙型溶血性链球菌的探针
26 atccccaccttcctccagtt 作为实验阳性对照的探针
利用上述的整套探针或其一部分，可以通过杂交反应对样品中的相应细菌进行检测。具有较高的灵敏度和特异性，尤其适用于基于基因芯片原理的检测。在进行基于基因芯片原理的检测时，需要把探针全部或其中一部分用适当的方法固定在固相载体上(如玻璃片、硅片、聚丙烯膜、硝酸纤维素膜、尼龙膜等)，成为n×n排布的探针阵列，即为基因芯片。然后利用一对或多于一对的PCR引物扩增待检样品中的细菌，选择引物的要求是能够扩增出所有细菌的包含探针所在区域的片段。在扩增的同时引入荧光标记或其它适宜的标记。扩增产物作为探针检测的靶，在一定条件下与基因芯片共保温20分钟至数小时，利用荧光扫描仪或相应的其它检测设备即可检测到杂交信号。根据信号出现的位置可以判断出细菌的种类。
除了基于基因芯片原理的检测外，这套探针也可以用于基于反向斑点杂交检测：首先将探针固定在合适的载体上，再提取待检细菌核酸，并对细菌的核酸进行标记，然后，将标记好的核酸与载体上的探针进行杂交反应，最后，通过合适的反应进行检测。
实施例：
为了进一步说明一套用于同时检测多种细菌的寡核苷酸探针的实现方法和用途，参照以下实施例进行说明，实施例是为了解释而不是以任何方式限制本发明。
首先以采用玻璃片作为固相载体制备基因芯片为例，普通玻璃片使用前需要进行醛基化处理以引入醛基基团，市售的醛基化的玻璃片可以直接使用。每条寡核苷酸探针的3’端或者5’端需要进行氨基化修饰，3’端的氨基化修饰可以在寡核苷酸合成开始时引入，5’端氨基化修饰可以合成后进行。通过机械手打印、喷印或者手工点样将探针点涂在玻璃片上，可以将26条探针点在一个3.5×3.0mm的区域内，形成6×5阵列，点之间的距离为0.5mm。探针末端的氨基与玻璃片上的醛基结合使得探针固定在玻璃片上。点好的玻片置于低温干燥处，放置过夜。然后，为了封闭玻璃片上未与寡核苷酸结合的醛基，按照以下程序对玻片进行处理：
0.2％SDS(十二烷基硫酸钠)洗2次，每次5min；
纯水(25℃)洗2次，每次5min；
纯水(95℃)洗1次，洗2min，凉至室温；
迅速将玻片放入封闭液洗(1.3g硼氢化钠溶在375ml磷酸缓冲液中，
再向溶液加入125ml无水乙醇)10min；
0.2％SDS(25℃)洗3次，每次1min；
纯水(25℃)洗2次，每次1min；
玻片自然干燥，立即投入使用。
第二步是通过PCR制备基因芯片检测的靶序列。引物选择在细菌的16s rRNA基因的保守区，其扩增的区域包含探针所在的区域。利用经过荧光标记的上游引物：5′AAC TGG AGG AAG GTG GGG AT 3′和非标记的下游引物：5′AGG AGG TGA TCC AAC CGC A 3′扩增待检样品，扩增产物长度约为370bp，不需要进行产物的纯化，取1μl与4μl杂交液(6×SSC，0.2％SDS，5×Denhardt’s，10μg/ml鲑鱼精DNA)混合，加热到98℃变性5min，然后迅速置于冰上，5min后取出混合液2μl，点在探针阵列区域，小心地盖上盖玻片，注意盖玻片与载玻片之间不可留有气泡。放入杂交盒，向盒内加入10μl 3×SSC以保持湿度。拧紧杂交盒的螺丝，放入55℃水浴锅内杂交1h。取出杂交盒，拿出玻片，立即投入1×SSC(0.2％SDS)洗30s，再投入杂交液0.1×SSC(0.2％SDS))洗30s，最后在0.1×SSC中洗10s，并在空气中干燥。
第三步是芯片检测与结果分析，采用ScanArray 3000芯片检测仪，选择需要的区域进行扫描，一般扫描1-2次。最后利用Imagene4.0软件对结果进行分析、处理。根据信号出现的位置可以判断出细菌的种类，达到检测的目的。
Claims (7)
1、一套用于同时检测多种细菌的寡核苷酸探针，在一定的使用条件下，能够检测出实验样品中的细菌及其种类，其特征在于探针的序列、探针的使用方法及用途三个方面。
2、根据专利要求1所述的一套寡核苷酸探针，其特征在于，探针设计在细菌16s rRNA基因的可变区，长度为20-28个碱基不等。每条探针的碱基序列可以与16s rRNA基因上特定区域DNA正链的碱基序列一致，也可以与16s rRNA基因上这一特定区域DNA负链的碱基序列一致。同一次杂交反应中使用的所有探针上述一致性相同。
3、根据专利要求1所述的一套寡核苷酸探针，其特征在于，以每条探针的碱基序列与16s rRNA基因上特定区域DNA负链的碱基序列一致为准，本发明的整套探针的序列及其可以达到的检测功能是：
1 gtacaaggcccgggaacgtattcacc 与所有真细菌杂交，用于检测所有
真细菌
2 gacataaggggcatgatgatttgacgt 与革兰氏染色阳性细菌杂交，用于
检测革兰氏阳性细菌
3 gtcgtaagggccatgatgacttgacgt 与革兰氏染色阴性细菌杂交，用于
检测革兰氏阴性细菌
4 gtcatgaatcacaaagtggtaagcgc 与肠道细菌杂交，用于检测肠道细
菌
5 acgacgcactttatgaggtccgcttg 与大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌
杂交，用于检测这三属细菌
6 gctcctaaaaggttactccaccggct 用于检测金黄色葡萄球菌的探针
7 cgacggctagctccaaatggttactg 血浆凝固酶阴性葡萄球菌检测探针
8 cggctagctccaaaaggttactctag 血浆凝固酶阴性葡萄球菌检测探针
9 tcacggtcttgcgtcttattgtacctac 用于检测肉毒梭状芽孢杆菌的探针
10 tagataatcggcttcgggcgtctccaac 用于检测艰难梭菌的探针
11 gaactgagactggtttttaagtttggct 用于检测产气荚膜梭菌的探针
12 ccctagagcataaggggcatgatgattt 用于检测破伤风梭菌的探针
13 ccgaagttaagctacctacttcttttac 用于检测福氏志贺氏菌的探针
14 gaaggttaagctacctacttcttttagc 用于检测宋内志贺氏菌的探针
15 cgaactgggacatattttatagatttgc 用于检测空肠弯曲菌的探针
16 aggtcgccccttcgccgccctctgtatc 用于检测嗜肺军团杆菌的探针
17 cgatccgaactgagaccggcttttaagg 用于检测结核分枝杆菌的探针
18 tactcgtaagggccatgatacgacttaa 用于检测普通变形杆菌的探针
19 cgcggcttggcaaccctttgtaccgacc 用于检测铜绿假单胞菌的探针
20 actgagaatagttttatgggattagg 用于检测单核增生李斯特氏菌的探
针
21 gctccaccttcgcggtattcgctgccct 用于检测霍乱弧菌的探针
22 tcactttcgcaagttggccgccctctgt 用于检测河弧菌的探针
23 tggtaagcgtccccccgtagttgaaac 用于检测副溶血性弧菌的探针
24 tacgacagactttatgtggtccgcttgc 用于检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的
探针
25 agattggctttaagagattagcttgccg 用于检测乙型溶血性链球菌的探针
26 atccccaccttcctccagtt 作为实验阳性对照的探针
4、根据专利要求1所述的一套寡核苷酸探针，其特征在于，与16s rRNA基因上特定区域DNA正链的碱基序列一致的探针与上述的26条探针检测功能一致，碱基序列分别反向互补。
5、根据专利要求1所述的一套寡核苷酸探针，其特征在于，利用上述的整套探针或其一部分，可以通过杂交反应对样品中的相应细菌进行检测。具有较高的灵敏度和特异度，尤其适用于基于基因芯片原理的检测。
6、根据专利要求1所述的一套寡核苷酸探针，其特征在于，利用上述的整套探针，可以同时检测区分的细菌有埃希氏菌属、志贺氏菌属、沙门氏菌属、弧菌属、葡萄球菌属、变形杆菌属、厌氧梭状芽孢杆菌属、链球菌属的细菌以及军团杆菌、结核分枝杆菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、单核增生李斯特氏菌、铜绿假单胞菌、空肠弯曲菌等。
7、根据专利要求1所述的一套寡核苷酸探针，其特征在于，这一套寡核苷酸探可以用于临床疾病诊断、抗菌素筛选、环境检测与评价、食品卫生监督与检疫、食物中毒快速检测、细菌学分类与流行病学调查。
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|---|---|
| CN (1) | CN1396269A (zh) |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1300338C (zh) * | 2004-07-09 | 2007-02-14 | 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 | 曲霉菌基因检测芯片及其制作方法和使用方法 |
| CN1304599C (zh) * | 2004-10-21 | 2007-03-14 | 复旦大学附属华山医院 | 耐药菌检测芯片及其制备方法和应用方法 |
| CN100427610C (zh) * | 2005-04-15 | 2008-10-22 | 博奥生物有限公司 | 革兰氏阳性细菌种属鉴定与耐药基因检测方法及其专用试剂盒 |
| CN101407839A (zh) * | 2008-11-27 | 2009-04-15 | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 | 一种应用悬浮芯片技术检测福氏志贺氏菌方法 |
| CN101440403A (zh) * | 2008-11-27 | 2009-05-27 | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 | 一种应用悬浮芯片技术检测霍乱弧菌o139方法 |
| CN101475986B (zh) * | 2009-01-20 | 2010-05-12 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 一种对多种弧菌进行基因检测的共检芯片及其检测与应用 |
| CN101831505A (zh) * | 2010-05-21 | 2010-09-15 | 武汉大学 | 一种检测临床常见病原微生物的基因芯片 |
| CN1993482B (zh) * | 2004-08-04 | 2010-12-29 | 三得利控股株式会社 | 细菌检测器具、细菌检测方法及细菌检测试剂盒 |
| CN101240335B (zh) * | 2007-02-09 | 2011-02-02 | 天津生物芯片技术有限责任公司 | 检测奶制品中常见致病菌的基因芯片和试剂盒 |
| CN101469326B (zh) * | 2007-12-25 | 2011-05-04 | 天津生物芯片技术有限责任公司 | 一种对奇异变形杆菌的its特异的核苷酸及其应用 |
| WO2012126152A1 (zh) * | 2011-03-24 | 2012-09-27 | 中国人民解放军第四军医大学 | 热缩组合式微通道芯片、制备及应用方法 |
| CN112481395A (zh) * | 2019-09-12 | 2021-03-12 | 深圳华大生命科学研究院 | 艰难梭菌耐药/低敏感进化分支snp标记及菌株类别鉴定方法和应用 |
-
2001
- 2001-07-16 CN CN01120290A patent/CN1396269A/zh active Pending
Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1300338C (zh) * | 2004-07-09 | 2007-02-14 | 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 | 曲霉菌基因检测芯片及其制作方法和使用方法 |
| CN1993482B (zh) * | 2004-08-04 | 2010-12-29 | 三得利控股株式会社 | 细菌检测器具、细菌检测方法及细菌检测试剂盒 |
| CN1304599C (zh) * | 2004-10-21 | 2007-03-14 | 复旦大学附属华山医院 | 耐药菌检测芯片及其制备方法和应用方法 |
| CN100427610C (zh) * | 2005-04-15 | 2008-10-22 | 博奥生物有限公司 | 革兰氏阳性细菌种属鉴定与耐药基因检测方法及其专用试剂盒 |
| CN101240335B (zh) * | 2007-02-09 | 2011-02-02 | 天津生物芯片技术有限责任公司 | 检测奶制品中常见致病菌的基因芯片和试剂盒 |
| CN101469326B (zh) * | 2007-12-25 | 2011-05-04 | 天津生物芯片技术有限责任公司 | 一种对奇异变形杆菌的its特异的核苷酸及其应用 |
| CN101407839A (zh) * | 2008-11-27 | 2009-04-15 | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 | 一种应用悬浮芯片技术检测福氏志贺氏菌方法 |
| CN101440403A (zh) * | 2008-11-27 | 2009-05-27 | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 | 一种应用悬浮芯片技术检测霍乱弧菌o139方法 |
| CN101407839B (zh) * | 2008-11-27 | 2013-03-20 | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 | 一种应用悬浮芯片技术检测福氏志贺氏菌方法 |
| CN101440403B (zh) * | 2008-11-27 | 2013-03-20 | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 | 一种应用悬浮芯片技术检测霍乱弧菌o139方法 |
| CN101475986B (zh) * | 2009-01-20 | 2010-05-12 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 一种对多种弧菌进行基因检测的共检芯片及其检测与应用 |
| CN101831505A (zh) * | 2010-05-21 | 2010-09-15 | 武汉大学 | 一种检测临床常见病原微生物的基因芯片 |
| WO2012126152A1 (zh) * | 2011-03-24 | 2012-09-27 | 中国人民解放军第四军医大学 | 热缩组合式微通道芯片、制备及应用方法 |
| CN112481395A (zh) * | 2019-09-12 | 2021-03-12 | 深圳华大生命科学研究院 | 艰难梭菌耐药/低敏感进化分支snp标记及菌株类别鉴定方法和应用 |
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| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
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