CN1383831A - 一种制备浓缩血小板的方法及装置 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种制备浓缩血小板的方法及装置,它包括原料血,其特征是对原料血进行轻离心,轻离心后收集上层富血小板血浆和白膜层制成混悬液,对混悬液进行变速离心,分出混悬液中多余的血浆得浓缩混悬液,将浓缩混悬液摇匀后静置,然后用悬挂器对浓缩混悬液悬挂轻离心,收集上层富血小板血浆,即浓缩血小板PC,为方便操作采用了双通道多联血袋,本发明具有Pt浓度高、单位血小板含量大、输血安全性好、血小板结构功能完整等特点。
Description
本发明涉及一种血液的成分制备,具体地说是一种制备浓缩血小板的方法及装置。
经湖南省卫生厅99048号医药卫生科技项目查新报告书查新,目前国内外制备浓缩血小板(PC)的手工方法主要有两种,即富血小板血浆(PRP)法和白膜(BC)法(以下简称PRP法和BC法)。PRP法制得的PC单位血小板含量低。PC的原国家标准为:Pt≥4.8×1010/2u,WBC≤5.0×106/2u,RBC≤2.0×109/2u,因成份工作者在实际操作中发现富血小板血浆法制备PC的Pt含量难达到原国家标准,所以卫生部卫医发[2000]184号文件将PC的标准调整为:Pt≥4.0×1010/2u,WBC≤5.0×106/2u,RBC≤2.0×109/2u。PRP法制得的PC中RBC和WBC残存大。WBC残存是衡量PC输注安全性的一个重要指标。PRP法制得的PC常会导致一次输入患者体内的WBC过多,多次反复输用可诱发血小板输注无效,甚至可以诱发不可治死亡率达90%和输血相关的移植物抗宿主病(TA-GVDH)。PRP法制备过程会破坏血小板的结构和功能,产生细胞因子,且操作耗时,制备前血液要复苏一个小时,制备后要再悬浮一个小时,不利于急诊病人的治疗。BC法制得的PC减小了PC中RBC和WBC的残存量,输血安全性较PRP法制得的PC有了大幅提高,简化了操作,但BC法制得的PC的单位Pt含量比PRP法制得的PC还要低,成年人每次输注进入体内的WBC数约为2×107个/次,还可以进一步降低。BC法制备PC只可以200ml作为制备单位,临床输血不方便。
本发明的目的是提供一种能克服传统手工血小板制备方法存在的缺陷和不足,减小制备过程对Pt结构和功能的破坏,提高单位浓缩血小板悬液的血小板含量,降低PC中WBC和RBC的残存量,降低PC的治疗成本,增加血小板输注安全性的浓缩血小板的制备方法及装置。
本发明是采用以下技术方案来实现其发明目的的:
本发明采用新的Pt收集技术,即对原料血进行轻离心,轻离心后收集上层富血小板血浆和白膜层制成混悬液;然后对混悬液进行无聚集重离心,即对混悬液进行变速离心,分出混悬液中多余的血浆得浓缩混悬液;将浓缩混悬液摇匀后静置;为减小RBC和WBC的沉降阻力,用悬挂器对浓缩混悬液悬挂轻离心,收集上层富血小板血浆,即浓缩血小板PC,悬挂器呈“ ”形,上端为悬挂钩,下端为平衡尾。为方便操作,本发明采用了双通道多联血袋,即在现有的树枝血袋上,在与抗凝剂袋相邻的转移袋上加设有一根与主管道相连的管道。
本发明所述的轻离心条件为:离心力RCF 720-1120g,离心时间t 6-l5min,温度T 20-24度。
本发明所述的变速离心的条件为:初始离心条件为离心力RCF1800-4050g,离心时间t 3-10min,温度T 20-24度,后离心条件为离心力RCF 1500-1800g,离心时间t 10-20min,温度T 20-24度,其变速过程在20-120S内完成。
本发明所述的悬挂轻离心的条件为:离心力RCF 160-320g,离心时间t 5-12min,温度T 20-24度。
由于采用以上技术方案,本发明完美地实现了其发明目的,创造性的采用三步离心制备浓缩血小板PC,即轻离心,收集到全血中86.6%±4.9%的全血小板,提高了Pt的初收集率;变速离心, 有效解决了Pt在少RBC状态下重离心易发生聚集的难题,保持了Pt结构和功能的完整性;悬挂离心,减小了RBC和WBC的沉降阻力,使之与富血小板血浆有效分离。为了方便操作,还采用了双通道多联血袋。本发明具有以下优点:①Pt浓度高。在我们的测试组中,本发明所制得的PC的Pt浓度为(1080±484)×1010/L,PRP法制得的PC为(898±238)×1010/L,BC法制得的PC为(564±196)×1010/L。②单位血小板含量大。每两单位PC,本发明制得的PC含Pt(7.65±3.10)×1010/2u,PRP法制得的PC含Pt(4.49±1.49)×1010/2u,BC法制得的PC含Pt(4.27±1.20)×1010/2u,经t检验本发明制得的PC血小板单位含量同BC法制得的PC和PRP法制得的PC存在着显著性差异。本发明制得的PC血小板浓度高,符合成份输血的原则,有利于提高疗效;单位Pt含量大,可以节省血源,降低治疗费用。③输注安全性好。WBC的残存是衡量PC输注安全性的一个重要指标。PRP法制得的PC常会导致一次输入患者体内的WBC过多,多次反复输用可诱发血小板输注无效。BC法的输血安全性好,输用BC法制得的PC每次进入受血者体内的WBC数约为2×107个,因而输用BC法制得的PC比输用PRP法制得的PC输血反应少,输血效果好。输用本发明制得的PC进入患者体内的WBC数为1×107个左右,比BC法制得的PC降低了1倍,因而具有更好的输血安全性。④血小板结构功能完整。本发明采用了少红细胞状态下Pt的不凝集成膜技术,保持了Pt结构和功能的完整性,因而本发明制得的PC的细胞因子水平低,血小板活性强。⑤方便快捷。本发明不像PRP法,原料血要静置一个小时后才可以开始PC制备。本发明在制备PC过程中没有血小板的凝集,无需再悬浮(需1-2h)。⑥本发明最后一步采用的是悬挂离心,由于该离心方法RBC和WBC的沉降阻力小,所以用一个很小的离心力就可以使RBC、WBC沉降干净,并且沉降物中富血小板血浆残存少。
附图说明:
图1为双通道多联血袋的连接示意图;
图2为另一种双通道多联血袋的连接示意图;
图3为悬挂器的示意图。
下面结合附图对本发明作进一步说明。
实施例1:
一种制备浓缩血小板悬液的方法,它包括原料血采集,为方便操作,本发明采用了双通道多联血袋,如图1所示,即在现有的四联树枝血袋上,在与抗凝剂袋3相邻的转移袋A上加设有一根与主管道相连的管道,其技术特点是采用新的Pt收集技术,即对抗凝剂袋3中的原料血(400ml)进行轻离心,离心力RCF:720g,离心时间t:15min,温度T:22度,轻离心后收集上层富血小板血浆和50g白膜层通过管道分离到转移袋A中制成混悬液,将代浆液袋4中的代浆液通过管道送入抗凝剂袋3;然后对混悬液进行无聚集重离心,即对混悬液进行变速离心,变速离心的初始离心条件为离心力RCF:1800g,离心时间t:10min,温度T:20度,后离心条件为离心力RCF:1500g,离心时间t:20min,温度T:20度,变速过程在90S内完成,将混悬液中上层贫血小板血浆通过管道分离到转移袋B中得浓缩混悬液;将浓缩混悬液摇匀后静置;为减小RBC和WBC的沉降阻力,用悬挂器对浓缩混悬液悬挂轻离心,如图3所示,悬挂器呈“ ”形,上端为悬挂钩1,下端为平衡尾2,悬挂离心为离心力RCF:160g,离心时间t:12min,温度T:20度,收集上层富血小板血浆,分离至代浆液袋中,即浓缩血小板PC。
实施例2:其轻离心力RCF:1120g,离心时间t:6min,温度T:24度;变速离心的初始离心条件为离心力RCF:4050g,离心时间t:3min,温度T:24度,后离心条件为离心力RCF:1800g,离心时间t:10min,温度T:24度,变速过程在20S内完成; 悬挂离心为离心力RCF:320g,离心时间t:5min,温度T:24度,余同实施例1。
实施例3:本发明采用的双通道多联血袋的连接如图2所示,其轻离心力RCF:900g,离心时间t:10min,温度T:22度;变速离心的初始离心条件为离心力RCF:2600g,离心时间t:5min,温度T:22度,后离心条件为离心力RCF:1600g,离心时间t:12min,温度T:22度,变速过程在30S内完成;悬挂离心为离心力RCF:200g,离心时间t:8min,温度T:22度,余同实施例1。
Claims (7)
1、一种制备浓缩血小板的方法,它包括原料血,其特征是对原料血进行轻离心,轻离心后收集上层富血小板血浆和白膜层制成混悬液;对混悬液进行变速离心,分出混悬液中多余的血浆得浓缩混悬液;将浓缩混悬液摇匀后静置;然后对浓缩混悬液悬挂轻离心,收集上层富血小板血浆,即浓缩血小板PC。
2、根据权利要求1所述的一种制备浓缩血小板的方法,其特征是所述的轻离心条件为:离心力RCF 720-1120g,离心时间t 6-15min,温度T 20-24度。
3、根据权利要求1所述的一种制备浓缩血小板的方法,其特征是所述的变速离心的条件为:初始离心条件为离心力RCF 1800-4050g,离心时间t 3-10min,温度T 20-24度,后离心条件为离心力RCF 1500-1800g,离心时间t 10-20min,温度T 20-24度,其变速过程在20-120S内完成。
4、根据权利要求1所述的一种制备浓缩血小板的方法,其特征是所述的悬挂轻离心的条件为:离心力RCF 160-320g,离心时间t 5-12min,温度T 20-24度。
5、一种用于实施权利要求1所述方法的装置悬挂器,其特征是它呈“ ”形,上端为悬挂钩[2],下端为平衡尾[1]。
6、一种用于实施权利要求1所述方法的装置双通道多联血袋,它包括抗凝剂袋[3]、转移袋、代浆液袋[4],抗凝剂袋[3]、转移袋、代浆液袋[4]上分别设有一根管道与主管道相连,成树枝状,其特征是在转移袋上加设有一根与主管道相连的管道。
7、根据权利要求6所述的一种用于制备浓缩血小板悬液的双通道多联血袋,其特征是所述的转移袋与抗凝剂袋[3]相邻。
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