CN1381561A - 一种用软材料制备的培养器 - Google Patents

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芮和恺
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Abstract

本发明涉及一种用软材料制备的培养器。所用制备培养器的软材料包括聚乙烯(PE)、聚氯乙烯(PVC)、聚丙烯(PP)、尼龙(nylon)、聚酯(polyester)等,可方便地通过焊接或吹塑方法制成各种形状,克服了传统培养器易碎、价贵的缺点,具有制备、灭菌简便,成本低廉及使用多种培养方式操作等特点,特别适用于植物细胞等的中试和大规模培养,具有很好的实用价值。

Description

一种用软材料制备的培养器
本发明涉及实验设备，具体涉及一种用软材料制备的培养器。
由于生态环境和植物资源的破坏，以及人类对植物资源需求的急剧增加，许多植物已经出现了供不应求的现象。近几十年来，生物技术的飞跃发展为植物的生产提供了新的机遇。迄今为止，在生物工程领域里具有经济价值的植物生产方式有快速繁殖(试管苗、鳞茎、球茎、芽和茎尖的快速繁殖)、细胞培养(冠瘿组织、愈伤组织的悬浮培养)和转基因植物(转基因植物器官毛状根及转基因植物的培养)培养。上述培养通常在固体培养基(例如含琼脂的培养基)和液体培养液中进行。液体培养液所用的培养器及使用方法如下：(1)硬质材料(例如玻璃、硬质塑料等)制成的培养器，例如玻璃瓶、塑料瓶等进行静止培养、通气培养或振荡培养。硬质材料制成的培养器虽然价格低廉，但当其体积较大时灭菌较为因难，而且玻璃制成的培养器较易破碎，故不适宜于大规模的培养，通常用于小规模的培养。(2)发酵罐(例如气升式发酵罐，搅拌式发酵罐等)培养，其优点是培养条件可以自动控制和记录，可以进行大规模的培养。例如日本已用20吨的发酵罐来培养人参细胞。发酵罐培养的缺点是设备昂贵，从而培养物的成本提高，许多植物培养物因为培养成本太高而无法进行产业化生产。
本发明的目的是要克服现有培养器的不足，提供一种不易碎、易灭菌、价格低廉，适用于中试和产业化生产的新型软材料制成的培养器。
本发明公开的新型软材料培养器构成包括：培养器袋身、袋身顶部具有两个塞子，其中一个塞子上带有两根插入深度不同的通气管，在通气管与空气接触处带有滤膜孔径小于0.2μ的过滤器。所用制备培养器的软材料包括聚乙烯(PE)、聚氯乙烯(PVC)、聚丙烯(PP)、尼龙(nylon)、聚脂(polyester)、乙烯-乙烯醇共聚物(EVOH)、乙烯—醋酸乙烯共聚物(EVA)、聚偏二氯乙烯(PVDC)、涂胶织物中的一种或者它们中的数种的复合物。
本发明公开的新型软材料制备的培养器可方便地通过焊接或吹塑方法制成各种形状，如圆柱体、球形、椭圆形、菱形、锥形、正方形或长方形等，可批量生产，一次性使用。
本发明公开的新型软材料制备的培养器可通过辐照灭菌方式灭菌，如经过1-15KGY剂量的60Co-r射线辐照后成为无菌培养器。
本发明的另一目的是公开上述软材料培养器在中试及大规模培养中的应用。
本发明培养器特别适用于为植物细胞、冠瘿组织、毛状根、芽、鳞茎、球茎、茎尖、幼苗等的培养。
培养方法可采用：
(1)振荡培养。
(2)通入无菌空气培养。
(3)边振荡边通入无菌空气，或振荡与通入无菌空气交替进行培养。
下面结合附图具体描述本发明培养器的构成。图中各序号分别表示：
1培养器
2(a)载有管子的塞子，2(b)塞子
3硬质管
4过滤器(滤膜孔径小于0.2μL)
5出气棒(管)
6软管
7培养液
8进气
9出气
具体操作如下：
将无菌的培养器置于超净工作台上，在无菌操作的条件下，小心地取出培养器上部的塞头2(b)，向培养器中投入培养物(植物细胞、冠瘿组织、毛状根、芽、鳞茎、茎尖、幼苗等)，然后再注入已灭菌的培养液(例如MS0培养液)，用塞头2(b)将塞口塞紧。
用空气压缩泵使空气从8处进入软管，然后通过过滤器4以后成为无菌空气，后者通过出气棒(管)进入培养液和培养器，培养器中的空气通过硬质管3和过滤器4经过9排入大气。
本发明公开的新型培养器，采用软材料制成，克服了传统培养器易碎、价贵的缺点，具有制备、灭菌简便，成本低廉，可采用多种培养方式操作等特点，特别适用于植物细胞、冠瘿组织、毛状根、芽、鳞茎、球茎、茎尖、幼苗等的中试和大规模培养，具有很好的实用价值。
实施例1  培养器的制作
取厚度为0.2-0.6mm的聚乙烯薄膜，裁剪为宽30cm长30cm的薄膜块6块。取其中的一块并剪出直径为5cm的洞二个，分别用塑料焊接机将聚乙烯塞口焊接在薄膜的洞口上，制作成培养器的上部。然后将培养器的上部和其余5块聚乙烯薄膜用塑料焊接机焊接成培养器。选择直径大小与塞口2相吻合的橡皮塞将塞口2塞住并使之紧密不透空气。用打孔器在2(a)塞子上打二个孔，按图上的标志分别装上硬管、软管、出气棒(管)和过滤器。上述培养器用聚氯乙烯袋密封后用1-15KGY剂量的60Co-γ射线辐照后成为无菌培养器。实施例2  培养器的制作
聚丙烯粒料经50-80℃干燥后进入吹塑机的料筒，料筒的温度保持在215-310℃以使聚丙烯粒料熔化，用挤出法将熔化的聚丙烯制成管状型胚，然后趁热将型胚夹入吹塑的阴模内，通入压缩空气进行吹胀，使其达到模腔的形样，经过冷却定型后打开模具即可获得上部具有二个塞口的各种形状及不同容积的培养器，这些培养器按附图上的标志分别装上硬管，软管、出气棒(管)和过滤器，然后用聚氯乙烯袋密封，用1-15KGY剂量的60Co-γ射线辐照后成为无菌培养器。
实施例3
将实施例1或2制得的容积为10L的无菌聚乙烯培养器置于超净工作台中，在无菌操作的条件下，小心地取出培养器上部的塞头2(b)，投入鲜重为50.3g的土贝母毛状根，然后加入已灭菌的MS0培养液5.0L，用塞头2(b)将塞口塞紧，在室温为24-26℃的条件下不断通入无菌空气进行培养，经4周培养后获得新鲜的土贝母毛状根665.9g。
实施例4
将实施例1或2制得的容积为20L的无菌聚丙烯培养器置于超净工作台中，在无菌操作的条件下，小心地取出培养器上部的塞头2(b)，向其中投入鲜重为143.0g的土贝母毛状根，然后加入已灭菌的MS0培养液13.5L，用塞头2(b)将袋口塞紧，在室温24～26℃条件下不断通入无菌空气进行培养。经过4周培养后获得新鲜的土贝母毛状根1939.2g。

Claims (4)

1.一种用软材料制备的培养器，包括袋身、袋身顶部具有两个塞子，其中一个塞子上带有两根插入深度不同的通气管，在通气管与空气接触处带有滤膜孔径小于0.2μ的过滤器，其特征在于所述的培养器由聚乙烯、聚氯乙烯、聚丙烯、尼龙、聚脂、乙烯—乙烯醇共聚物、乙烯—醋酸乙烯共聚物、聚偏二氯乙烯、涂胶织物中的一种或者它们中的数种的复合物制成。
2.一种如权利要求1所述的用软材料制备的培养器，其特征在于所述的培养器采用辐照灭菌方法灭菌。
3.一种如权利要求1所述的用软材料制备的培养器，其特征在于所述的培养器可以是各种形状。
4.一种如权利要求1所述的用软材料制备的培养器在实验及生产中的应用，其特征在于所述的培养器可以用于植物细胞、冠瘿组织、毛状根、芽、鳞茎、球茎、茎尖、幼苗等的中试及大规模培养。
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