CN1324251A - 刺激前塞波素受体活性的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用编码前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的DNA或RNA分子转染细胞,刺激细胞中前塞波素(prosaposin)受体活性的方法。所述DNA或RNA分子可以体内给药,也可以用于转染离体神经细胞或神经干细胞,然后将细胞重新导入个体中。

Description

刺激前塞波素受体活性的方法
                     发明领域
本发明涉及用编码前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的DNA或RNA转染细胞，刺激前塞波素(prosaposin)受体活性的方法。
                     发明背景
前塞波素(prosaposin)，一种70千道尔顿的糖蛋白，是四种需要糖鞘脂被溶酶体水解酶水解的热稳定糖蛋白的前体(Kishimoto等，脂类研究杂志(J.Lipid Res.)33:1255-1267,1992)。前塞波素(prosaposin)在溶酶体中被蛋白水解加工成塞波素(saposin)A、B、C和D，它们是前塞波素(prosaposin)中的四个串联片断(O’Brien等，FASEB J.,5:301-308,1991)。所有四种塞波素(saposin)结构上彼此类似，包括六个半胱氨酸，一个糖苷化位点和保守的脯氨酸残基。
如美国专利No.5571787和国际申请PCT/US94/08453中所述，前塞波素(prosaposin)、塞波素(saposin)C和来源于或与塞波素(saposin)C(18-聚肽和22-聚肽)相关的各种肽诱导神经突生长、防止神经细胞死亡并刺激成髓鞘作用。这些属于“前塞波素(prosaposin)受体激动剂”家族成员的蛋白质和肽也促进神经保护作用，可以用于治疗各种神经病包括糖尿病性神经病和红豆彬醇诱导的神经病。神经营养和髓鞘营养活性进一步定位于塞波素(saposin)C的12-聚体区(氨基酸18-19)(LIDNNKTEKEIL；SEQ ID NO:1)。免疫组织化学研究表明前塞波素(prosaposin)定位于大神经元群中，包括上肢和下肢运动神经元。前塞波素(prosaposin)结合细胞表面受体，刺激32P整合入几种蛋白质。
应用神经营养肽作为治疗剂存在其自身的限制，包括易于蛋白水解。在神经系统中，期望治疗剂穿过血脑屏障。虽然上述18-聚体可以穿过血脑屏障，但外周细胞和/或中枢神经系统增强产生的前塞波素(prosaposin)、塞波素(saposin)C或与其相关肽将会在预防和治疗神经退化性疾病和成髓鞘疾病方面有益。
前塞波素(prosaposin)受体在美国专利NO.5571787中描述。该受体也结合塞波索(saposin)C和前塞波素(prosaposin)受体激动剂，包括上述12-聚体。鉴定前塞波素(prosaposin)受体激动剂的方法在美国专利申请序列号No.081896181中描述。因为发现了前塞波素(prosaposin)受体激动剂的神经营养、神经保护、和髓鞘营养活性，许多研究者已经论证了各种这类激动剂的体外和体内应用(O’Brien等，美国国家科学院科学进展(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A)91:681-685,1994；Sano等，生物化学和生物物理研究通讯(Biochem.Biophys.Res.Commun.)204:994-1000,1994；Kotani等，神经化学杂志(J.Neuro Chem)66:2197-2200,1996；Kotsni等，神经化学杂志，66:2019-2025；Qi等，生物化学杂志(J.Biol.Chem.)271:6874-6880,1996)。
应用基因治疗对疾病进行的治疗性处理涉及将新的遗传信息转移并暂时或稳定地整合到细胞中(参见Crystal等，科学，270:404-410,1995综述)。通过将编码所需功能的正常等位基因重新导入，来纠正遗传缺陷已经获得成功(Rosenberg，等，新英格兰医学杂志(New Engl.J.Med.)323:570,1990；Boris-lawrie等，Ann.N.Y.Acad.Sci.716:59,1994；Wirel等，科学，262:533,1993)。
为了确保在治疗髓鞘疾病的神性退化中的治疗有效性，需要将前塞波素(prosaposin)和前塞波素(prosaposin)受体激动剂短暂或稳定地传送到神经细胞中。本发明提供了该传送方法。
                     发明概述
本发明的一个实施方式是应用一种操作上编码前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的分离的DNA或RNA分子治疗神经退化性疾病或成髓鞘疾病。优选地，前塞波素(prosaposin)受体激动剂选自塞波素(saposin)C、包括塞波素(saposin)C的氨基酸18-29的肽和包括SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的肽。在该优选实施方式的一个方面，DNA或RNA分子是一种表达载体。该表达载体优选选自腺病毒载体、逆转录病毒载体、质粒载体和质粒-质脂体载体。有利的是，所述疾病选自多发性硬化、脊髓损伤、黄斑变性、肌萎缩性脊髓侧索硬化、脊斑状萎缩、后灰质综合症、肌营养不良、外周神经疾病、中风、和外周神经损伤。该优选实施方式的另一个方面，该疾病产生于前炎症细胞因子诱导的细胞凋亡引起的疾病。优选地，该疾病是脑梗塞或心肌梗塞。该优选实施方式的另一方面，该药物以适于选自静脉内、脑脊液内、肌内、真皮内、皮下、颅内、硬膜外、局部、鼻内、透粘膜和口服给药途径的剂型存在。优选地，该药物是对人使用。在该优选实施方式的另一方面，已经将DNA或RNA分子转染或感染到哺乳动物神经细胞中。有利的是，DNA或RNA分子在一种表达载体中。优选地，所述表达载体选自腺病毒载体、逆转录病毒载体、质粒载体和质粒-脂质体载体。在该优选实施方式的另一方面，细胞是被包封的。优选地，所述包封的细胞适于鞘内或颅内移植。在该优选实施方式的另一方面，细胞是神经干细胞。优选地，所述干细胞是选自神经元、星形细胞和少突神经胶质细胞的前体。优选的，所述药物包括操作上编码前塞波素(prosaposin)受体激动剂的DNA分子。
本发明还提供了病毒载体，包括操作上编码前塞波素(prosaposin)受体激动剂的DNA或RNA分子。
本发明的另一个实施方式是制备重组前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的方法，包括以下步骤：给哺乳动物施用一种操作上编码前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的分离的DNA或RNA分子；从哺乳动物分离体液；从体液中分离前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂。优选地，所述体液选自血液、乳汁、脑脊液和精液。
优选实施方式的详细描述
本发明包括一种改善神经保护作用和治疗神经退化或成髓鞘疾病的方法，包括将编码前塞波素(prosaposin)、前塞波素(prosaposin)受体激动剂例如塞波素(saposin)C和包括塞波素(saposin)C的氨基酸8-29在内的肽的DNA或RNA分子在体内或离体传送给神经细胞。在该方法中，前塞波素(prosaposin)/前塞波素(prosaposin)受体激动剂的浓度增加，或者前塞波素(prosaposin)受体的浓度增加，其本身将结合更多的循环系统中的前塞波素(prosaposin)/受体激动剂，并产生增强的神经保护作用和/或轴突生成作用。受体激动剂是一种与细胞表面受体亲合并刺激通常由内源性物体刺激的生理活性的化合物。因此，受体激动剂既结合受体又刺激其活性。在另一个优选实施方式中，将编码前塞波素(prosaposin)受体的DNA或RNA分子传送给神经细胞。
一种人塞波素(saposin)C中天然存在的、并且包括SEQ ID NO:1所示活动的轴突——促进区的15-聚体(TKLIDNNKTEKEILD；SEQ IDNO:2)进行如下修饰，以便降低其在体内被蛋白酶水解的易感性：用D-ala取代lys2，以增强对外肽酶的抗性；用ala取代lys8，以增强对胰蛋白酶的消化抗性；删除lys11，以增强对胰蛋白酶的抗性。另外，用tyr取代asp15，以提供碘化作用位点。因此，得到的肽，TX14(A)不含胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的酶切位点。
SEQ ID NO:1可以进行如下修饰，仍保留神经营养和髓鞘营养活性：Leu1和Ile2是必需的；Asp3是任意氨基酸；Asn4和Asn5是必需的；Lys6是任意氨基酸，优选不是赖氨酸或精氨酸；Thr7是必需的；Glu8是带电荷氨基酸；Lys9缺失或为一种带电荷氨基酸；Glu10是任意氨基酸；Ile11和Leu12是任意氨基酸。这些指导原则产生下列共有序列：LIX1NNX2TX3X4X5X6X7(SEQ ID NO:3)
用编码前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的DNA或RNA分子瞬时或稳定地转染或感染神经细胞群，在这些细胞中，如果在组成型启动子的控制下则连续产生前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂，或者如果在可诱导启动子的控制下则短暂产生前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂。前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂在胞内的大量产生，通过刺激前塞波素(prosaposin)受体和启动级联反应而提高了前塞波素(prosaposin)活性水平，导致神经保护作用、神经退化的抑制和髓鞘形成的抑制。
在本发明的一个优选实施方式中，将编码前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的DNA或RNA置于真核细胞表达载体中离体转染或感染从患神经退化或成髓鞘病个体得到的神经细胞。然后将该转染或感染细胞重新导入患者。所述细胞包括Schwann细胞、少突神经胶质细胞、胶质细胞、星形细胞和树状细胞。可以将这些被转染的细胞移植到合适的神经位置，包括脑、脑脊髓液和外周神经。
神经元和胶质可以来源于正常的胎儿前体细胞(Mckay，科学276:66-71,1997)。成人神经系统也含有多能性的神经元、星形细胞和少突神经胶质细胞前体(Reynolds等，科学255:1707,1992；Gritti等，神经学杂志(J.Neurosci.)16:1091,1995；Johe等，Genes Dev.10:3129,1996)。体外增殖的成人和胎儿CNS的培养细胞可以分化，表现出神经元具有的形态学和电生理学特征：再生和突触结构(Gritti等，同上；Vicario-Abejon等，神经元15:105,1995；Mckay等，同上)。
在另一个优选实施方式中，从哺乳动物，优选人体内得到上述多能神经干细胞，离体培养、用编码前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的表达载体转染或感染，然后重新导入所述哺乳动物。含这种蛋白质或肽的干细胞之后分化成特定类型的神经细胞并连续产生肽。
这类真核细胞表达载体中的一些是已知的并可从商业获得。构建这些表达载体的标准技术是已知的，可以在参考文献中找到，例如，Sambrook等，分子克隆：实验室指南，Cold Spring Harbor LaboratoryPress,Cold Spring Harbor,NY,1989，或者在任何广泛提供的有关重组DNA技术的实验室手册中找到。提供了大量连接DNA片断的方法。对于它们的选择取决于DNA片断末端的性质，本领域普通技术人员可以容易确定。
优选的表达载体包括病毒载体例如逆转录病毒载体，腺病毒载体和腺相关病毒载体，也可以使用疱疹病毒载体。这些病毒不会将它们的基因整合到宿主DNA中；但是，它们被吸引到神经元中，其中一些保留其中含有的或多或少无害状态的病毒和外源DNA序列。因此应用疱疹病毒载体对于目标为神经性疾病的治疗是理想的。Miller等详细讨论了这些常用的基因治疗载体(FASEB F,9:190-199,1995)。
这种表达载体通常还含有一种可选择的标记，例如抗生素抗性，以便筛选表达了治疗蛋白质或肽的细胞。虽然离体细胞转染的优选方法是电穿孔，但也可以考虑其它方法，包括磷酸钙沉淀、微注射和细胞融合。Felguer等描述了基因传送系统(Hum.Gene Ther.8:511-512,1997)，其包括基于阳离子脂类的传送系统(Lipoplex)，基于多聚阳离子的传送系统(Polyplex)、和二者的混合(Lipopolyplex)，它们都可以用于本发明。
含有编码前塞波素(prosaposin)，塞波素(saposin)C、来源于它们的神经营养肽或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的DNA或RNA的表达载体的构建体可以通过两种方法体内施用给神经细胞。在第一种方法中，按照下述程序离体进行基因治疗，即用标准转染或感染方法在实验室中将一种表达盒序列转移到来自患神经疾病或成髓鞘疾病个体的细胞中，然后将修饰后的细胞转移回到个体中。或者，可以直接将表达盒序列直接转移到个体中进行体内基因转移。在这两种方法中，有助于将盒序列传递到它能发挥适当功能的胞内部位的载体通常有利于转移方法。Hodgson(Exp.Opin.Ther.Patents,5:459-468,1995)详细探讨了基因治疗的载体系统。表达盒序列通常含有适当的异源启动子用于驱动基因表达。所述启动子是本领域已知的，包括例如，SV40和巨细胞病毒(CMV)启动子。组成性、可诱导的和组织特异性启动子的应用都在本发明范围内。其它核苷酸序列元件可以整合到表达载体中，以促进DNA整合到染色体中，DNA的表达和载体的克隆。例如，启动子和增强子上游或编码区的终止子下游的存在能够有利于表达载体中包含的DNA或RNA的表达。
在本发明的一个实施方式中，直接将含目标DNA或RNA的表达载体注射到血液中。在另一个实施方式中，通过直接颅内注射或注射到脑脊液中施用表达载体。在这两种方式中，均使用药物可接受载体，例如磷酸盐缓冲的盐水(PBS)或乳酸盐Ringer’s液。也可以注射药物可接受载体中的纯化DNA的适当编码片断(“裸DNA”)，而不是包含DNA片断的表达载体。或者，可以将组合物直接局部注射施用到外周神经组织；或者可以系统给药。可以考虑各种常规给药方式，包括静脉内、肌内、真皮内、皮下、脑脊液内、颅内、硬膜外、局部、鼻内、透粘膜、和口服。
表达前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的转染或感染细胞也可以包封到生物相容性聚合物膜中。这些材料的一些例子为聚丙烯腈氯乙烯(PAN/PVC)丙烯酸共聚物，水凝胶例如海藻酸盐或琼脂、混合酯、纤维素、聚四氟乙烯/聚丙烯(Lum等，糖尿病(Diabetes),40:1511-1516,1991；Aebischet等，实验神经学(Exp.Nenrol),111-269-275,1991；Liu等，人类基因治疗(Hum.Gene Ther.)4:291-301,1993；Hill等，细胞移植(Cell Transplantation)1:168,1992)和聚乙二醇(PEG)敷形涂覆构型(U.S.5529914)。将包封的细胞移植到患神经退化疾病或成脊鞘疾病的动物中。这些选择通渗膜允许氧气和其它营养进入，但排除抗体和免疫系统的细胞，因此防止这些细胞作为外源物质被识别，允许移植细胞连续产生神经营养蛋白或肽。对于该技术的综述参见Lanza等，外科学(Surgery),121:1-9,1997。例如，将包封细胞移植到患肌萎缩性脊髓侧索硬化患者的腰椎鞘内空间，移植到脑间隙区治疗帕金森氏症。有几个研究组已经报道了包封基因工程操作的细胞并将其移植到哺乳动物中(Sagot等，欧洲神经科学杂志(Eur.J.neurosci.)7:1313-1322,1995；Sagen等，神经科学杂志(J.neurosci.13:2415-2423,1993；Aebischer等，天然药物(Nature Medicine),2:696-699,1996)。
这种组合物可以以单位剂量形式包装和给药，例如作用剂量等于施用给患者的日剂量的可注射组合物或局部制剂，或者作为控释组合物。含在PBS中的或冻干形式的日剂量活性成分的隔片密封小管也是单位剂量的例子。
在本发明的另一个优选实施方式中，含目标DNA或RNA的表达载体通过移植材料在体内局部施用到神经细胞，例如，聚乳酸、聚半乳酸、再生胶原、多层脂质体和其它一些包含可以与生物活性组合物配成制剂的生物可侵蚀或生物或降解材料的常规存储制剂。当移植后，这些材料逐步破坏，将活性材料释放到周围组织中。生物侵蚀、生物降解和其它存储制剂当然考虑用于本发明。灌注泵、骨架捕获系统和透皮给药装置也可以考虑。
本发明的DNA或RNA构建体也可以便利地包封到胶束或脂质体载体中。脂质体包封技术是公知的。通过应用能够与目标组织结合和促进与细胞质膜融合的受体、配体或抗体，可以将脂质体靶向特定组织。制备这些制剂是本领域公知的(Radin等，酶学方法(Metheds Enzymol)98:613-618,1983)。另一种制备脂质体的方法涉及，例如，应用LipofecinTM和LipofeetamineTM试剂(GIBCO BRL,Gaitherburg,MD)。编码前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的DNA或RNA也可以与受体配体结合，例如运铁蛋白，其将基因运输到细胞表面和/或通过受体——介导的胞吞作用促进基因进入细胞。
本发明的基因治疗方案可以用于治疗中枢和外周神经系统的疾病。后灰质综合症的特征在于肌疲劳，对伴生的肌力衰弱和肌萎缩耐受性降低。据信该疾病部分由类似于肌萎缩性脊髓侧索硬化中存在的脊髓运动神经元破坏导致。例如由糖尿病或化疗引起的外周神经损伤和外周神经疾病，包括最常见的外周神经疾病，可以用本发明的方法治疗。这些神经疾病包括脊髓损伤、肌退化、肌萎缩性脊髓侧索硬化、杜-阿氏肌萎缩、后-灰质综合症、肌营养不良、外周神经病、中风和外周神经损伤。任何中枢或外周神经系统的外伤性或缺血性损伤也可以应用本发明的方法治疗。
在上述方法中，可以在体内和体外治疗细胞以促进髓磷脂形成或防止脱髓鞘化。在离体应用中，将转染的神经细胞重新转移到个体中，将连续表达编码的前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂，有几种中枢神经系统的疾病导致神经纤维脱髓鞘，包括多发性硬化、急性扩散性脑白质炎、进行性多病灶脑白质炎、异染性脑白质营养不良和肾上腺脑白质营养不良。外周神经系统脱髓鞘病的一个例子是Guillain-Barre综合症。可以施用编码前塞波素(prosaposin)、塞波素(saposin)C、来源于塞波素(saposin)C或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的神经营养肽的cDNA的表达载体治疗这些疾病，减缓和中止脱骨髓鞘作用的进程。
缺氧不是心脏组织破坏的最后结果。该过程引发由原炎症细胞因子启动的细胞凋亡。本方法也可以用于抑制脑梗塞、心肌梗塞和充血性心力衰竭过程中发生的细胞凋亡。如U.S.临时申请序列号60/058352所述，前塞波素(prosaposin)和前塞波素(prosaposin)受体激动剂可以用于抑制这种细胞凋亡。
在另一个优选实施方式中，用编码重组前塞波素(prosaposin)，塞波素(saposin)C或其它前塞波素(prosaposin)受体激动剂的表达载体转染的哺乳动物用作这些材料的来源。前塞波素(prosaposin)是一种在各种体液包括乳汁、脑脊液和精液浆中发现的完整膜和分泌蛋白。因此，体内产生的前塞波素(prosaposin)、塞波素(saposin)C其它前塞波素(prosaposin)受体激动剂将出现在这些体液中，可以用作这些分子的来源。前塞波素(prosaposin)如US5571787所述纯化。前塞波素(prosaposin)受体激动剂通过标准亲合色谱法应用抗所述激动剂的抗体纯化。
                      序列表(1)总信息：
(ⅰ)申请人：MYELOS CORPORATION
(ⅱ)发明题目：刺激前塞波素受体活性的方法
(ⅲ)序列数：3
(ⅳ)通讯地址：
    (A)收件人：Knobbe,Martens,Olson&Bear
    (B)街道：620Newport Center Drive,16th Floor
    (C)城市：Newport Beach
    (D)洲：CA
    (E)国家：美国
    (F)邮政编码：92660
(ⅴ)计算机可读形式：
    (A)介质类型：软盘
    (B)计算机：IBM PC兼容机
    (C)操作系统：DOS
    (D)软件：FastSEQ for Windows Version2.0
(ⅵ)目前的申请资料：
    (A)申请号：
    (B)申请日：
    (C)分类号：
(ⅶ)在先申请资料：
    (A)申请号：09/149977
    (B)申请日：1998年9月9日
(ⅷ)代理人/代理资料：
    (A)姓名：Bartfeld,Neil S
    (B)登记号：39901
    (C)文档号：MYELOS.012VPC
(ⅸ)通讯资料：
    (A)电话：619-235-8550
    (B)传真：619-235-0176(2)SEQ ID NO:1的资料：
(ⅰ)序列特征：
    (A)长度：12个氨基酸
    (B)类型：氨基酸
    (C)链型：单链
    (D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:1:Leu Ile Asp Asn Asn Lys Thr Glu Lys Glu Ile Leu1               5                   10(2)SEQ ID NO:2的资料：
(ⅰ)序列特征：
    (A)长度：15个氨基酸
    (B)类型：氨基酸
    (C)链型：单链
    (D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:2:Thr Lys Leu Ile Asp Asn Asn Lys Thr Glu Lys Glu Ile Leu Asp1               5                  10                  15(2)SEQ ID NO:3的资料：
(ⅰ)序列特征：
    (A)长度：12个氨基酸
    (B)类型：氨基酸
    (C)链型：单链
    (D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特性：
    (A)名称/关键词：其它
    (B)位置：3...3
    (D)其它信息：任何氨基酸
    (A)名称/关键词：其它
    (B)位置：6...6
    (D)其它信息：任何氨基酸
    (A)名称/关键词：其它
    (B)位置：8...8
    (D)其它信息：带电荷氨基酸
    (A)名称/关键词：其它
    (B)位置：9...9
    (D)其它信息：不存在或带电荷氨基酸
    (A)名称/关键词：其它
    (B)位置：10...10
    (D)其它信息：带电荷氨基酸
    (A)名称/关键词：其它
    (B)位置：11...11
    (D)其它信息：任何氨基酸
    (A)名称/关键词：其它
    (B)位置：12...12
    (D)其它信息：任何氨基酸
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:3:Leu Ile Xaa Asn Asn Xaa Thr Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa1              5                    10

Claims (20)

1．一种分离的、操作上编码前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的DNA或RNA分子在制备治疗神经退化疾病或成髓鞘疾病的药物中的应用。
2．权利要求1的应用，其中所述前塞波素(prosaposin)受体激动剂选自塞波素(saposin)C、包括塞波素(saposin)C的氨基酸18-29的肽、和包括SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的肽。
3．权利要求1的应用，其中所述DNA或RNA分子存在于一种表达载体中。
4．权利要求3的应用，其中所述表达载体选自腺病毒载体、逆转录病毒载体、质粒载体、和质粒-脂质体载体。
5．权利要求1的应用，其中所述疾病选自多发性硬化、脊髓损伤、黄斑变性、肌萎缩性脊髓侧索硬化、脊髓斑状退化、后-灰质综合症、肌营养不良、外周神经疾病、中风、和外周神经损伤。
6．权利要求1的应用，其中所述疾病由前炎症细胞因子-诱导的细胞凋亡引起。
7．权利要求6的应用，其中所述疾病是脑梗塞或心肌梗塞。
8．权利要求1的应用，其中所述药物的剂型为适于通过选自静脉内、脑脊液内、肌内、真皮内、皮下、颅内、硬膜外、局部、鼻内、透粘膜、和口服的给药途径给药的剂型。
9．权利要求1的应用，其中所述药物是用于人的。
10．权利要求1的应用，其中DNA或RNA分子已经转染或感染到哺乳动物的神经细胞中。
11．权利要求10的应用，其中所述DNA或RNA分子存在于一种表达载体中。
12．权利要求11的应用，其中所述表达载体选自腺病毒载体、逆转录病毒载体、质粒载体、和质粒-脂质体载体。
13．权利要求10的应用，其中所述细胞是被包封的。
14．权利要求13的应用，其中所述被包封细胞适于鞘内或颅内移植。
15．权利要求10的应用，其中所述细胞为神经干细胞。
16．权利要求15的应用，其中所述于细胞选自神经元、星型细胞和少突神经胶质细胞的前体。
17．权利要求1的应用，其中所述药物包括操作上编码所述前塞波素(prosaposin)受体激动剂的DNA分子。
18．一种病毒载体，包括操作上编码前塞波素(prosaposin)受体激动剂的DNA或RNA分子。
19．一种制备重组前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的方法，包括以下步骤：
给哺乳动物施用一种分离的、操作上编码前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂的DNA或RNA分子；
从所述哺乳动物中分离体液；和
从所述体液中分离所述前塞波素(prosaposin)或前塞波素(prosaposin)受体激动剂。
20．权利要求19的方法，其中所述体液选自血液、乳汁、脑脊液和精液。
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