CN1307867C - 茅苍术组培繁殖的种质保存方法 - Google Patents

茅苍术组培繁殖的种质保存方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1307867C
CN1307867C CNB2005100378590A CN200510037859A CN1307867C CN 1307867 C CN1307867 C CN 1307867C CN B2005100378590 A CNB2005100378590 A CN B2005100378590A CN 200510037859 A CN200510037859 A CN 200510037859A CN 1307867 C CN1307867 C CN 1307867C
Authority
CN
China
Prior art keywords
atractylis lancea
test
tissue culture
quality
medium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CNB2005100378590A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1653889A (zh
Inventor
吴沿友
李萍萍
李西腾
赵新政
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangsu University
Original Assignee
Jiangsu University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangsu University filed Critical Jiangsu University
Priority to CNB2005100378590A priority Critical patent/CN1307867C/zh
Publication of CN1653889A publication Critical patent/CN1653889A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1307867C publication Critical patent/CN1307867C/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明提供了茅苍术组培繁殖的种质保存技术，包括选用优良无性系的根茎为外植体，在附加不同种类和浓度激素的MS培养基上直接诱导出芽，然后通过增殖、继代、生根、试管苗移栽，完成优质资源的种质保存过程。本发明技术稳定可靠，可重复性强，种质保存的时间长，经过保存的茅苍术的试管苗，移栽到田间后苗齐、生长健壮，抗性强、生长势优于种子培育的苗且能保持培养前的无性系的优良性状。

Description

茅苍术组培繁殖的种质保存方法
技术领域
本发明涉及植物的种质保存方法，特指茅苍术组培繁殖的种质保存技术。
技术背景
茅苍术(Atractylodes lancea(thunb.)DC)为菊科植物，是多年生草本植物。茅苍术是道地中药材，可用于治疗消化不良、胃痛及夜盲症等症，科学研究正不断丰富人类对它的药理认识。现在人们还利用它预防感冒和SARS、治疗窦性心动过速、糖尿病、细菌性痢疾等上。
但是，由于生态环境的破坏和过去掠夺式的采挖，野生茅苍术的资源日渐稀缺，已处于濒危状态。药材市场上茅苍术是有价无货的。目前，全国各大药材市场上均为北苍术，其质量和疗效均逊于茅苍术。除了保护茅苍术的生境外，人工驯化和栽培就成为拯救茅苍术资源的重要手段。目前的研究发现，野生茅苍术具有多种类型，各种类型的产量和品质具有较大的差异，因此栽培优质茅苍术成为高产优质栽培的关键。而选择优良无性系，保存优质种质资源又是栽培优质茅苍术的关键。
茅苍术的繁殖主要通过两种途径：一是有性繁殖，即通过种子繁衍下一代种苗；由于，野生茅苍术具有多种类型，长期混栽，将会引起不同类型的茅苍术之间的天然杂交，种质资源迅速退化。另一种繁殖途径是无性繁殖，即通过分根的方法，这类繁殖方法受季节性及自然条件的限制，同时一旦母株感染了病虫害等，通过无性繁殖很快地造成病菌蔓延，也将使茅苍术的产量和质量受到很大影响。因此，很有必要利用组织培养技术来解决茅苍术优质资源的种质保存问题。但迄今未有茅苍术优质资源的种质保存成功的报道。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术中存在的问题，提供一种茅苍术种质保存技术，该技术不受自然条件或地区差异的限制，有利于种质的长期保存，随时能提供优质纯化的种苗，且保存后栽培的幼苗生长快，能使茅苍术达到优质高产。
为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下技术方案：
茅苍术组培繁殖的种质保存方法，包括选用无性系的根茎为外植体，在附加激素的MS培养基上直接诱导出芽，芽经增殖、继代、生根、试管苗移栽，完成优质资源的种质保存过程，基本培养基选用MS附加蔗糖3％、琼脂0.8％；芽诱导和增殖培养基选用MS+6-BA 2.0～3.0mg/l+NAA0.1～0.2mg/l；继代培养基选用MS+6-BA 1.0mg/l+NAA0.05～0.1mg/l；生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg/l或1/2MS+IBA1.0mg/l，pH5.4～5.8，常规高压灭菌；试管苗培养条件选20±2℃；光照12h/d，光照强度1500～2000Lux。
上述方法可选用生殖生长期的根茎为外植体。
上述方法根茎的取材时期选择进人生殖生长期、植株开始结实的季节。
上述方法外植体选择长度0.5-1.5厘米的根茎。
上述方法可以根据需要进行继代培养，常规情况应每隔1-2月继代培养一次。
试管苗的移栽选择在生根培养10-15天后，小苗茎叶长4-6厘米时，在移栽前2-3天打开瓶盖，待叶色加深，再移栽到温室，开始一周使湿度保持在90％以上，其后使湿度保持在75％左右，10-15天后栽到露地，再经一月定植田间。
与常规方法相比，本发明的优点在于：
1、与以种子进行种质保存的方法相比，本发明不受自然条件或地区差异的限制。种子繁殖受所在地区的气候及地理条件的限制，而本发明是通过对营养体进行组织培养获得种苗，不受气候条件的限制，由于组培苗能长期继代培养保存，因此一旦需要可以随时提供种苗。
2、方便保存后的栽培：由于组培苗繁殖系数高，速度快，可以迅速提供优质苗，移栽后的苗的生长速度快，有利于大规模的栽培。
3、减少常规的无性系种质保存的用地：常规的无性系保存种质需要占用一定的土地，且易感染病毒、病害造成种质资源退化。利用本发明技术，可以减少用地，同时可以对生长过弱、严重感染病毒、病害的无性系在培养基上进行脱毒培养，使无性系复壮、纯化，达到种质长期保存的目的。
4、本发明技术稳定可靠，可重复性强，可以满足既扩繁又保存种质资源的目的。
5、本发明技术提供的种质资源移栽到田间后苗齐、生长健壮，抗性强、生长势胜于种子培育的苗且能保持培养前的无性系的优良性状。
附图说明
图1为继代培养9次的组培苗
具体实施方式
下面用实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但本发明的内容并不局限于此。
实施例一：
选用茅苍术优良无性系的根茎为外植体，根茎的取材时期选在当年10月份，外植体选择长度0.5厘米的根茎。在附加不同种类和浓度激素的MS培养基上直接诱导出芽，然后通过增殖、继代、生根到试管苗移栽培完成种质保存过程；
上述繁殖的培养基选用MS附加蔗糖3％、琼脂0.8％，芽诱导和增殖培养基选用MS+6-BA2.0mg/l+NAA0.1mg/l；继代培养基选用MS+6-BA 1.0mg/l+NAA0.05mg/l；生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg/l，pH为5.5，常规高压灭菌；试管苗培养条件选20±2℃；光照12h/d，光照强度为1500Lux，继代培养1次。
试管苗的移栽选择在生根培养10天后，小苗茎叶长4厘米时，在移栽前2天打开瓶盖，待叶色加深，再移栽到温室，开始一周使湿度保持在90％以上，其后使湿度保持在75％左右，10天后栽到露地，再经一月定植田间。
定植后的组培苗生长健壮整齐，通过一系列生物学性状调查及统计，组培小苗表现出与上代母株极大的一致性，同一来源的无性系的田间植株长势整齐，各无性系之间仍保持原有品系的明显特征。
实施例二：
选用茅苍术优良无性系的根茎为外植体，根茎的取材时期选在当年12月份，外植体选择长度1.0厘米的根茎。在附加不同种类和浓度激素的MS培养基上直接诱导出芽，然后通过增殖、继代、生根到试管苗移栽培完成种质保存过程；
上述繁殖的培养基选用MS附加蔗糖3％、琼脂0.8％，芽诱导和增殖培养基选用MS+6-BA3.0mg/l+NAA0.2mg/l；继代培养基选用MS+6-BA 1.0mg/l+NAA0.1mg/l；生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/l，pH为5.6，常规高压灭菌；试管苗培养条件选20±2℃；光照12h/d，光照强度为1800Lux，继代培养1次。
试管苗的移栽选择在生根培养12天后，小苗茎叶长5厘米时，在移栽前3天打开瓶盖，待叶色加深，再移栽到温室，开始一周使湿度保持在90％以上，其后使湿度保持在75％左右，12天后栽到露地，再经一月定植田间。
定植后的组培苗生长健壮整齐，通过一系列生物学性状调查及统计，组培小苗表现出与上代母株极大的一致性，同一来源的无性系的田间植株长势整齐，各无性系之间仍保持原有品系的明显特征。
实施例三：
选用茅苍术优良无性系的根茎为外植体，根茎的取材时期选在后一年2月份，外植体选择长度1.5厘米的根茎。在附加不同种类和浓度激素的MS培养基上直接诱导出芽，然后通过增殖、继代、生根到试管苗移栽培完成种质保存过程；
上述繁殖的培养基选用MS附加蔗糖3％、琼脂0.8％，芽诱导和增殖培养基选用MS+6-BA2.0mg/l+NAA0.1mg/l；继代培养基选用MS+6-BA 1.0mg/l+NAA0.05mg/l；生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg/l，pH为5.8，常规高压灭菌；试管苗培养条件选20±2℃；光照12h/d，光照强度为2000Lux，继代培养1次。
试管苗的移栽选择在生根培养15天后，小苗茎叶长6厘米时，在移栽前2天打开瓶盖，待叶色加深，再移栽到温室，开始一周使湿度保持在90％以上，其后使湿度保持在75％左右，15天后栽到露地，再经一月定植田间。
定植后的组培苗生长健壮整齐，通过一系列生物学性状调查及统计，组培小苗表现出与上代母株极大的一致性，同一来源的无性系的田间植株长势整齐，各无性系之间仍保持原有品系的明显特征。
实施例四：
取用材料为实施例一中继代培养1次的组培苗，继续继代培养，8次后再进行生根和试管苗的移栽，如图1所示，通过田间生物学性状调查及统计发现，通过300多天继代保存后的试管苗仍保持良好的生活力，同一来源的无性系植株，田间生长势整齐，仍保持原有无性系的明显特征。由此可以看出本发明对茅苍术种质的保存表现出明显的效果。

Claims (5)

1、一种茅苍术组培繁殖的种质保存方法，其特征在于：种质保存过程为选用无性系的根茎为外植体，在附加激素的MS培养基上直接诱导出芽，芽经增殖、继代、生根、再用试管苗移栽，其中基本培养基选用MS附加蔗糖3％、琼脂0.8％，芽诱导和增殖培养基选用MS+6-BA 2.0～3.0 mg/l+NAA0.1～0.2mg/l；继代培养基选用MS+6-BA 1.0 mg/l+NAA0.05～0.1mg/l；生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg/l或1/2MS+IBA1.0mg/l，pH5.4～5.8，常规高压灭菌；试管苗培养条件选20±2℃；光照12h/d，光照强度1500～2000Lux。
2、根据权利要求1所述的一种茅苍术组培繁殖的种质保存方法，其特征是选用生殖生长期的根茎为外植体。
3、根据权利要求2所述的一种茅苍术组培繁殖的种质保存方法，其特征是选择长度0.5～1.5厘米的根茎作为外植体。
4、根据权利要求1所述的一种茅苍术组培繁殖的种质保存方法，其特征是每隔1-2月继代培养一次。
5、根据权利要求1所述的一种茅苍术组培繁殖的种质保存方法，其特征是试管苗的移栽选择在生根培养10～15天后，小苗茎叶长4～6厘米时，在移栽前2～3天打开瓶盖，待叶色加深，再移栽到温室，开始一周使湿度保持在90％以上，其后使湿度保持在75％左右，10～15天后栽到露地，再经一月定植田间。
CNB2005100378590A 2005-02-25 2005-02-25 茅苍术组培繁殖的种质保存方法 Expired - Fee Related CN1307867C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2005100378590A CN1307867C (zh) 2005-02-25 2005-02-25 茅苍术组培繁殖的种质保存方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2005100378590A CN1307867C (zh) 2005-02-25 2005-02-25 茅苍术组培繁殖的种质保存方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1653889A CN1653889A (zh) 2005-08-17
CN1307867C true CN1307867C (zh) 2007-04-04

Family

ID=34894390

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB2005100378590A Expired - Fee Related CN1307867C (zh) 2005-02-25 2005-02-25 茅苍术组培繁殖的种质保存方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN1307867C (zh)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102061334B (zh) * 2010-02-05 2012-11-28 南京中医药大学 鉴别道地药材茅苍术的特异dna分子标记及其制备方法和其应用
CN102726293A (zh) * 2012-06-27 2012-10-17 中国热带农业科学院椰子研究所 一种槟榔种质资源离体保存的方法
CN102763591B (zh) * 2012-07-05 2013-11-13 中国农业科学院作物科学研究所 一种白术的保存方法以及再培养方法
CN103960129B (zh) * 2014-04-24 2016-03-16 江苏农林职业技术学院 一种茅苍术组培快繁的方法
CN104982336A (zh) * 2015-07-28 2015-10-21 江苏大学 一种茅苍术人工种子制作方法
CN105993956B (zh) * 2016-06-14 2018-09-25 江苏茅山地道中药材种植有限公司 一种茅苍术快速繁殖方法
CN108575749A (zh) * 2018-04-24 2018-09-28 镇江市德尔生物制品研究所有限公司 茅苍术无菌苗培养基及应用其的茅苍术无菌苗培养工艺
CN115281085A (zh) * 2022-07-08 2022-11-04 内蒙古民族大学 北苍术组织培养繁殖方法
CN115362937B (zh) * 2022-08-26 2023-04-07 中国中医科学院中药研究所 一种苍术试管苗及其培养方法与一种移栽苍术试管苗的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
苍术及其异域变种 胡世林，冯学锋，吉力，聂淑琴，中草药，第31卷第10期 2000 *
苍术及其异域变种 胡世林，冯学锋，吉力，聂淑琴，中草药，第31卷第10期 2000;茅苍术快速繁殖 巢建国，谈献和，张瑜等，中药材，第24卷第7期 2001;茅山物产—茅苍术 万永红，植物杂志，第6卷 2001 *
茅山物产—茅苍术 万永红，植物杂志，第6卷 2001 *
茅苍术快速繁殖 巢建国，谈献和，张瑜等，中药材，第24卷第7期 2001 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN1653889A (zh) 2005-08-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1307867C (zh) 茅苍术组培繁殖的种质保存方法
Zeng et al. In vitro propagation of Paphiopedilum orchids
Divakaran et al. Conservation of Vanilla species, in vitro
Vogel et al. Influence of IAA, TDZ, and light quality on asymbiotic germination, protocorm formation, and plantlet development of Cyrtopodium glutiniferum Raddi., a medicinal orchid
Deb et al. Asymbiotic seed germination and in vitro seedling development of Cymbidium aloifolium (L.) Sw.: a multipurpose orchid
Patel et al. Regeneration of Stevia plant through callus culture
Arya et al. Micropropagation of Leptadenia reticulata—a medicinal plant
CN101040602A (zh) 滇桂艾纳香药材的快速繁殖方法
Shekhawat et al. An improved micropropagation protocol by ex vitro rooting of Passiflora edulis Sims. f. flavicarpa Deg. through nodal segment culture
Guzmán et al. Increasing anther culture efficiency in rice (Oryza sativa L.) using anthers from ratooned plants
CN115537346A (zh) 促进西藏虎头兰生长分化的胶膜菌及其应用
Suri et al. Plantlet regeneration and bulbil formation in vitro from leaf and stem explants of Curculigo orchioides, an endangered medicinal plant
Gezahegn et al. In vitro regeneration of disease free enset [Ensete ventricosum (Welw) Cheesman] planting materials from bacterial wilt diseased plants using shoot tip culture
CN105475129A (zh) 一种竹叶兰组培快繁的方法
Lakho et al. Optimizing in vitro nutrient and ex vitro soil mediums-driven responses for multiplication, rooting, and acclimatization of pineapple
Grigoriadou et al. In vitro propagation of Primula veris L. subsp. veris (Primulaceae): A valuable medicinal plant with ornamental potential
CN103548695B (zh) 一种岩黄连组织培养快速繁殖方法
CN102084813A (zh) 金线莲无糖组织培养方法
CN1475107A (zh) 半夏规模化组培快繁方法
CN109566417B (zh) 一种虫草参的组织培养方法
CN1157107C (zh) 金钗石斛的快速繁殖方法
CN1076161C (zh) 除虫菊组培繁殖和种质保存方法
CN108450328A (zh) 一种鳄嘴花组织培养快速繁殖方法
Sharma et al. In vitro adventitious rooting of Cornus florida microshoots
CN103583367B (zh) 三倍体丹参脱毒新品种的快速选育方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C19 Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee