CN1306947C - 从富硒茶叶中制备抗肝癌组分的方法及其产品 - Google Patents

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Abstract

本发明从富硒茶叶中制备抗肝癌组分的方法及其产品，属于茶叶深加工技术领域。浓度80-120mg Se L-1富硒茶叶的生产调节剂按用量4-10g Se亩-1喷施于茶树老叶，喷施后7-20天采摘茶叶，所采茶叶为一芽一叶到一芽三叶，将鲜叶加工成商品绿茶。将富硒茶叶粉碎，过60-100目，以茶叶1∶水(8-12)的比例加入沸水，在沸水浴中浸提2-3h，提取2-3次，合并每次提取的滤液，40-60℃真空浓缩后，冷冻干燥得固体粉末即为从富硒茶叶中制备抗肝癌组分产品；本发明产品具有显著的抗肝癌活性，抗肝癌作用与抗癌药物5-氟脲嘧啶无显著差异。

Description

从富硒茶叶中制备抗肝癌组分的方法及其产品
一、技术领域
本发明从富硒茶叶中制备抗肝癌组分，属于茶叶深加工技术领域，用于研制开发高效安全抗肝癌药物。
二、背景技术
流行病学、实验室和临床等的研究均表明硒具有化学防癌的潜力，硒能显著降低乳腺癌、皮肤癌、结肠癌、肝癌等多种癌的发生率，膳食添加硒能有效的防止各种化学或病毒诱导的肿瘤和癌症的发生率。
食物中硒的化学形态的差异决定了硒的抗癌活性的高低。以硒代蛋氨酸的硒源能有效提高机体硒浓度，但其生物活性较差，抗癌活性很低。而硒代甲基半胱氨酸在体内能生成高生物活性的甲基硒醇，而具有很高的抗癌活性。
植物性来源的硒在食品中主要以硒-甲基硒代半胱氨酸(Se-MSC)的形态存在，Se-MSC具有很高的抗癌活性。富硒甘蓝、大蒜、洋葱中的硒主要以硒代甲基半胱氨酸形式存在。富硒酵母和富硒蘑菇及肉类中以硒代蛋氨酸形式存在，硒代蛋氨酸进入人体后能非特异性的和体蛋白结合构成白蛋白和血红蛋白，容易在体内蓄积，造成毒性，其抗癌活性低。无机硒盐具有较高的抗癌活性，但其代谢产物硒化氢能杀死癌细胞，也能使正常细胞坏死，容易引起炎症。寻求一种高效和安全的膳食硒添加方式对肿瘤的化学防治是非常重要。
美国、英国学者对富硒食品方面的研究主要是富硒大蒜，富硒甘蓝，富硒酵母，富硒洋葱的抗突变作用和抗肿瘤作用。同时发现了维生素E与硒的协同生物效应。茶叶为中国的特有经济作物，茶叶具有广泛的生物学效应，特别是抗突变和抗肿瘤作用，绿茶具有抗癌功能，可以增强人体对癌症的防御能力，绿茶提取物能有效遏制癌和肿瘤发展，同时不损害正常细胞。
流行病学数据表明我国人群低硒摄入量硒与肝癌的高发病率与死亡率呈负相关，抗肿瘤药物的副作用较大。我国从上世纪80年代起开始研究膳食添加硒提高人群硒摄入量。硒强化盐能有效降低肝癌的发病率，但其代谢产物硒化氢具有很大的毒性。有机硒食品的发展，从富硒酵母、富硒蘑菇、富硒大豆等的开发，能有效提高机体硒的浓度，但其抗癌或抗肿瘤活性较低。寻求一种安全和生物活性高的富硒食品，预防肿瘤的发生。
三、发明内容
技术问题
本发明的目的是提供一种从富硒茶叶中制备抗肝癌组分的方法。通过该方法制得的富硒茶叶组分具有较高的抗肝癌活性。
技术方案
1、从富硒茶叶中制备抗肝癌组分的方法，其特征在于：
(1)使用浓度为80-120mg SeL-1富硒茶叶生产调节剂按照用量4-10g Se亩-1喷施于茶树老叶，喷施后7-20天采摘茶叶，所采茶叶为一芽两叶到一芽三叶，将鲜叶加工成富硒商品绿茶；
(2)将富硒茶叶粉碎，过60-100目，以重量比计，茶叶∶水为1∶8-12的比例加入沸水，在沸水浴中浸提2-3h，冷却过滤，滤渣再次加入等量的沸水，同样提取2-3次，合并每次提取的滤液，经40-60℃真空浓缩后，冷冻干燥得固体粉末，即为从富硒茶叶中制备获得的抗肝癌组分产品。
在富硒茶叶生产过程中，一次喷施后所制作的茶叶为同一批次富硒茶叶；在茶叶采收14-28周后，再次按上述方法进行富硒茶叶的生产调节剂的喷施，7-15天以后采收所制作的富硒茶叶，为另一批次。
有益效果
(1)富硒绿茶含茶叶有效成分，又具高的含硒量，本发明提供从富硒茶叶中制备抗肝癌组分的方法。通过该方法制得的富硒茶叶组分具有较高的抗肝癌活性，富硒茶叶的高抗癌活性为肿瘤的化学防治提供重要的途径。
(2)本发明的实施可以大大提高夏、秋茶的经济效益。
(3)富硒茶提取物具有显著的抗肝癌作用：
动物实验证明(表1)，在相同剂量2.0μg kg-1时，富硒茶叶2提取物的抑瘤率为61.79％，高于富硒茶叶1提取物的抑瘤率55.60％。在剂量1.0μg Se kg-1，三种茶叶提取物及亚硒酸钠的抑瘤率分别为41.95％、49.43％、53.77％和36.33％。两种富硒茶提取物的抑瘤率要高于等剂量的普通茶叶提取物和亚硒酸钠的抑瘤率，在等摄入量时富硒茶叶的抗癌活性显著高于普通茶叶和亚硒酸盐，表明富硒茶叶中硒的化学形态与普通茶叶和亚硒酸盐的差异性。同时，随着摄入量的提高，富硒茶叶提取物的抑瘤率提高，其抗肝癌活性与抗癌药物5-氟脲嘧啶无显著差异。
五、发明的具体实施方式
实施示例1(夏茶)
1、富硒茶叶制备：按国家发明专利(公开日：2003.7.23，公开号：CN1430897A)一种富硒茶叶的生产调节剂及其用法，制备富硒肥料，叶面喷施茶树制备富硒茶叶。
在江苏省宜兴市富坤富硒茶叶有限公司茶场，茶园面积5亩，2004年7月30日喷施富硒肥料，浓度100mg Se L-1和用量5g Se亩-1喷施于茶树老叶，喷施后8天采摘茶叶，所采茶叶为一芽两叶，将鲜叶加工成商品绿茶。
2、从富硒茶叶中制备抗肝癌组分：
(1)将富硒茶叶粉碎，过80目；
(2)取1kg粉碎的茶叶，加入沸水10kg，在沸水浴中浸提3h，冷却过滤，滤渣再次加入10kg沸水，在沸水浴中浸提2.5h，冷却过滤，滤渣再次加入10kg沸水，在沸水浴中浸提2h，冷却过滤，弃去滤渣；
(3)合并3次提取的滤液，50℃真空浓缩至200mL以下，冷冻干燥得固体粉末288.6克，即为获得的富硒茶叶1提取物产品。
实施示例2(秋茶)
1、富硒茶叶制备：
在江苏省南京浦桥农业开发有限公司江浦赭落山茶场，茶园面积3亩，2004年9月5日喷施富硒肥料，浓度100mg Se L-1和用量5g Se亩-1喷施于茶树老叶，喷施后12天采摘茶叶，所采茶叶为一芽一叶，将鲜叶加工成商品富硒绿茶。
2、从富硒茶叶中制备抗肝癌组分：
(1)将富硒茶叶粉碎，过100目；
(2)取2kg粉碎的茶叶，加入沸水24kg，在沸水浴中浸提3h，冷却过滤，滤渣再次加入24kg沸水，在沸水浴中浸提3h，冷却过滤，弃去滤渣；
(3)合并2次提取的滤液，55℃真空浓缩至500mL以下，冷冻干燥得固体粉末457.2克，即为获得的富硒茶叶2提取物产品。
以上获得的富硒茶提取物抗肝癌动物试验：
动物实验证明(表1)，在相同剂量2.0μg kg-1时，富硒茶叶2提取物的抑瘤率为61.79％，高于富硒茶叶1提取物的抑瘤率55.60％。在剂量1.0μg Se kg-1，三种茶叶提取物及亚硒酸钠的抑瘤率分别为41.95％、49.43％、53.77％和36.33％。两种富硒茶提取物的抑瘤率要高于等剂量的普通茶叶提取物和亚硒酸钠的抑瘤率，在等摄入量时富硒茶叶的抗癌活性显著高于普通茶叶和亚硒酸盐，表明富硒茶叶中硒的化学形态与普通茶叶和亚硒酸盐的差异性。同时，随着摄入量的提高，富硒茶叶提取物的抑瘤率提高，其抗肝癌活性与抗癌药物5-氟脲嘧啶无显著差异。
表1  富硒茶叶提取物抗小鼠移植性肝癌的作用
处理     剂量(μg kg-1)   瘤重(g)   抑瘤率(％)   脾指数(mg kg-1)  胸腺指数(mg kg-1)
阳性对照普通茶提取物富硒茶叶1提取物富硒茶叶2提取物亚硒酸钠5-氟脲嘧啶     01.01.02.01.02.01.00   1.778±0.5731.032±0.3160.899±0.3030.789±0.2700.822±0.2010.679±0.2981.132±0.2640.625±0.226 41.9549.4355.6053.7761.7936.3364.84   54.47±13.15abd60.51±2.66ad46.44±20.35bd38.01±8.40b43.19±7.59b46.27±6.57b71.48±22.13c48.66±10.68d  25.76±10.47a16.52±3.78b18.00±4.96b16.41±3.64b20.00±6.73b19.49±5.47b12.75±6.20c16.92±6.81b
*同列数据值后不同字母代表在P＜0.05显著差异。

Claims (2)

1、一种从富硒茶叶中制备抗肝癌组分的方法，其特征在于：
(1)制备富硒茶叶生产调节剂：按重量计，将猪粪2-3份、蚕粪1-2份投入发酵池，加水1-2份，加盖发酵40-50天，至无臭味；加水8-9份，继续发酵20-40天，至配料中的固体成分溶解；(3)取发酵液100-200目过滤，得富硒茶叶的生产调节剂母液；按100L母液加亚硒酸钠或硒酸钠10-20kg，溶解并搅拌均匀，无沉淀，反应完全后得富硒茶叶的生产调节剂；
(2)使用浓度为80-120mg Se L-1富硒茶叶生产调节剂按照用量4-10g Se亩-1喷施于茶树老叶，喷施后7-20天采摘茶叶，所采茶叶为一芽两叶到一芽三叶，将鲜叶加工成富硒商品绿茶；
(3)将富硒茶叶粉碎，过60-100目，以重量比计，茶叶∶水为1∶8-12的比例加入沸水，在沸水浴中浸提2-3h，冷却过滤，滤渣再次加入等量的沸水，同样提取2-3次，合并每次提取的滤液，经40-60℃真空浓缩后，冷冻干燥得固体粉末，即为从富硒茶叶中制备获得的抗肝癌组分产品。
2、根据权利要求1所述一种从富硒茶叶中制备抗肝癌组分的方法，其特征在于：在富硒茶叶生产过程中，一次喷施后所制作的茶叶为同一批次富硒茶叶；在茶叶采收14-28周后，再次按上述方法进行富硒茶叶的生产调节剂的喷施，7-15天以后采收所制作的富硒茶叶，为另一批次。
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