CN1267330A - 灭活病毒的方法 - Google Patents

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Abstract

灭活用于例如疫苗的病毒的方法,和利用它治疗的方法。

Description

灭活病毒的方法
发明背景
本发明涉及制备用于疫苗的病毒的方法。
灭活病毒可以改变病毒抗原，减少疫苗的安全性或效力。理想地，灭活病毒的条件和试剂将选择性地和不可逆转地影响病毒的基因组。
乙烯亚胺单体(EI)或二元乙烯亚胺(BEI)是用于优选地在嘌呤的N-7，N-3和N-1并且在较小程度上在嘧啶的N-3修饰核酸的试剂。烷基化试剂加大了N-7烷基化嘌呤(例如胍)的咪唑环的打开，从而终止了复制。EI烷基化鸟苷形成N-7(氨乙基)鸟苷，N-7(氨乙基)鸟苷具有比N-7(烷基鸟苷)更高的咪唑环打开速度。EI也修饰病毒粒子或非病毒生物分子的非基因组成分。
这一非特异反应的一个不需要的副作用是病毒颗粒的裂解，减少了免疫原性。甚至单个氨基酸的化学修饰明显改变了蛋白质对蛋白酶的抗性并且在储藏期间由于修饰的病毒蛋白质的蛋白质水解可以减少疫苗的稳定性。优选的蛋白质表位的灭活可以对随后的感染过程中不平衡的免疫应答和疾病的增强起作用。衣壳成分的修饰可以抑制T细胞上的表位的递呈所必需的病毒蛋白质的细胞内加工。第三，病毒蛋白质的氨基酸残基的修饰减少了病毒的抗原性。最后，存在于最初含有病毒的物质的蛋白质的化学修饰可以改变它们的抗原特异性。这是在灭活的狂犬病疫苗加强剂量后人中的变应性反应的主要原因。尽管它们具有内在的低选择性，乙烯亚胺单体(EI或BEI)已经用作生产杀死的抗病毒疫苗的试剂。
                      发明概要
本发明的特征是灭活病毒的方法，该方法包括利用灭活量的乙烯亚胺的组合物在pH小于7.0(例如，pH在5.5和7.0之间，或pH小于6.8)处理病毒。
优选地，比较在pH大于或等于pH7.0(例如，7.5，8.0或优选地7.0)处理的同样病毒的免疫原性，处理病毒的免疫原性增强了。通过本领域的已知方法，包括但不限于本文叙述的方法可以测量免疫原性和灭活。乙烯亚胺选自乙烯亚胺的单体或多聚体形式。通过重量/体积(w/v)(例如，在0.01％和1.0％w/v之间，或在0.01％和0.5％w/v之间)确定乙烯亚胺的浓度。可以利用单体和低聚物乙烯亚胺的混合物，或低聚物乙烯亚胺的混合物。低聚物包括2和8个单体之间，例如二聚体，三聚体，支链或直链四聚体和其它。病毒的例子包括，脊髓灰质品，狂犬病，黄热，日本脑炎，森林脑炎，麻疹，流行性腮腺炎，RossRiver病毒，轮状病毒和风疹。
本发明的另一特征是灭活病毒的方法，该方法包括利用包括pH小于7.0的单体乙烯亚胺的组合物接触病毒。通过下面方法确定pH：
(a)利用灭活量的含有多个不同pH值的单体乙烯亚胺的组合物处理多个病毒样品；(b)测量每个测量病毒样品选自病毒灭活和免疫原性的特征；和(c)选择相对于步骤(a)的其它pH值，提供更高病毒灭活或更高免疫原性或其结合的pH。
本发明其它特征和优点可以从下面的说明和权利要求得到了解。
优选的实施方案的说明
本发明的特征是在pH小于7.0时通过亲电子灭活试剂例如乙烯亚胺(EI)的作用灭活病毒。当与pH7.0或更高时处理相比，在酸性pH时用亲电子试剂处理灭活病毒核酸，对于病毒蛋白质的不利反应惊人得少。病毒蛋白质的不利反应可以导致对蛋白酶的抗性下降，病毒颗粒的解体，病毒抗原的改变，和病毒蛋白质细胞内加工的抑制。所以，利用公开的方法处理病毒似乎是在储藏过程中更加稳定，并且似乎具有更好的免疫原性和抗原特异性。
在pH 6.5-8.5范围内，核酸碱基仍然未带电。因而，亲核性和利用亲电子试剂修饰的速度仍然基本相同。但是，pH的改变影响具有可质子化杂合原子的氨基酸残基的亲核性。例如，在组氨酸和色氨酸中的咪唑环或酪氨酸的羟基基团的质子化差不多完全阻止了亲电子试剂的氨基酸反应。
其它因子使预测降低的pH对蛋白质与EI的非特异反应性的影响变得困难。在病毒蛋白质之间和病毒蛋白质和培养基的其它成分之间存在分子内相互作用可以明显地改变这些氨基酸的可接近性和pKa。灭活条件的改变可以导致病毒成分(蛋白质和核酸)的更高结构的改变和因而影响成分与EI的反应的速度。
灭活的最佳化(例如，处理最小时间间隔，EI的浓度，离子强度，温度和pH)将减低影响杀死的疫苗的免疫原潜力和特异性的副反应程度。为了制备杀死的病毒疫苗的灭活病毒的最佳条件包括如下：(1)作为6.5和8.0之间(或5.5和7.0，或5.0和7.0之间)的pH的函数确定病毒感染灭活速度常数；(2)确定在不同pH值时病毒感染灭活的选择性(病毒粒子蛋白质和非病毒蛋白质的修饰的程度)；和(3)确定不同pH值时灭活的疫苗的潜力。
其它实施方案
从上面的描述，本领域一个技术人员可以容易地确定本发明的基本特征，而不脱离其精神和范围，可以进行各种变化和修饰本发明以便使它适用于各种用途和形势。所以，其它实施方案也在权利要求内。
不需要进一步的详尽叙述，确信本领域的技术人员基于本文的叙述可以最大程度利用本发明。所以，下面的特定实施例应解释为说明性的，并且不以任何方式限制本公开内容的其余部分。本文提到的出版物引入本文作为参考。
                    实施例1
作为pH6.5和8.0之间的函数确定病毒感染灭活速度常数
利用病毒灭活速度常数确定生产安全疫苗需要的大致的灭活条件和需要的灭活程度，该常数作为活病毒的起始效价的函数。灭活通常应该进行一段经计算以便给出适当的低效价的存活病毒的时间，以便排除有意义的活病毒感染的发生。对于许多病毒，12到20对数的灭活造就这样的疫苗，该疫苗被预测为在每一百万个疫苗受体中只有小于一个的存活病毒粒子。虽然不能直接进行确定病毒的感染性，但用于确定其它灭活试剂的病毒灭活程度的间接的方法如PCR是错误的。
如下进行确定灭活速度常数：将新鲜蒸馏的乙烯亚胺(EI)溶解于0.1摩尔/升NaCl和0.1摩尔/升MOPS缓冲液或0.1摩尔/升Tris-HCl直到最后EI浓度为0.5％(0.125摩尔/升)，0.1％(0.025摩尔/升)和0.02％(0.005摩尔/升)。最后pH应该分别为6.5，7.0，7.5或8.0。将试剂溶液在20℃或37℃温育，并且加入在同样缓冲液，同样pH，和同样温度预温育的病毒悬浮液(起始效价～105-108PFU./毫升)。移取温育0，1.0，2.0，4.0，8.0和16小时的反应混合物后的等分试样，加入0.1体积的1.0摩尔/升的硫代硫酸盐(或酯)(中和到同样pH)立即淬灭过量的试剂，在同样温度温育0.5-1.0小时，然后冷却到0℃，在进一步利用培养基稀释和涂板之前保持这一温度。对照-没有EI的同样反应混合物。在灭活之后，以标准方式滴定病毒以便确定剩余的复制感受态病毒粒子的浓度。如下 k = 2.3 A · t log ( S o / S t ) 计算灭活的速度常数(k，h-1，mM-1)，其中：A3是反应混合物中的试剂的最后浓度(mM)；t3试剂温育时间(t3)；S0和S13在t小时的灭活之前和之后的病毒的效价。
pH在灭活之前和过程中必须准确地测量(±0.05)和保持恒定。反应混合物的温度必须是常数(±1.0℃)。在给定温度预温育病毒直到观察到预期的灭活指数(半对数)动力学。试剂溶液和病毒悬浮液都不必须含有可测定量(＞1毫摩尔/升)的磷酸，柠檬酸和其它低聚阴离子的来源。病毒悬浮液都不必须含有天然或人工低聚阳离子(精氨酸，亚精胺等等)或其它能够改变病毒基因组或核蛋白的更高结构的化合物。基因组损伤修复，在高感染复数的基因组重组，或含有片断基因组的病毒基因组的重配可以导致非指数的灭活动力学。这在病毒基因组的知识的基础上可以提出质疑。这可以在实验中观察到，并且考虑进一步研究。
                    实施例2
关于病毒粒子蛋白质和非病毒蛋白质确定在不同pH时病毒感染性灭活的选择性
选择性是病毒基因组修饰的比例对反应混合物的其它成分(病毒或其它蛋白质，糖蛋白，多糖，等等)的修饰速度的比例。在病毒基因组中的单个的核苷酸残基的修饰阻止了它的完全复制，并且所以，阻止了病毒的再生。平均每个基因组中出现2.3个修饰的残基(阻止完全基因组的复制)导致病毒感染性下降了一个对数。
通过降解病毒粒子或通过修饰基因组生物多聚体：蛋白质，糖蛋白和多糖可以引起大多数重要的不利反应。病毒粒子的降解导致免疫原性的明显下降(几个级别的数量级)，这一下降使引发适当免疫应答所需的疫苗量成比例地增加。通过修饰反应混合物的其它成分(除了基因组)，主要是病毒和许多情况下是存在于反应混合物的其它蛋白质和大分子的修饰确定其它和更严重的结果。
幸运的是，每个基因组比任何其它分子含有更多的暴露的活性残基(核酸中的嘌呤是亲电子试剂的主要靶物)。另外，作为规律，只有基因组在每个病毒粒子中为单一的拷贝。所有其它分子存在许多拷贝(每个病毒粒子的每个大分子的拷贝过量)，所以只有当在感染灭活过程中以同样的方式修饰许多拷贝时，它们的修饰变得可见。另外，在pH范围6-8中核碱基的反应性仍然基本相同，而在这一pH间隔中蛋白质中氨基酸残基的反应性变化巨大。并且当质子化时低得多。所以，通过最低的可能pH，在EI的情况中可能是在pH6.5可以获得基因组修饰的最大特异性。在EI(pKa～8.1)的情况中，这可能导致灭活速度的小的增加，但可能明显降低了活性(非质子化)氨基酸残基的量，并且所以降低了它们与灭活相关的修饰的速度。
几个方法可以用于确定蛋白质修饰的程度，包括等电点聚焦和免疫测量。在各种情况中，在pH6.5，7.0，7.5和8.0，在适当温度和时间将病毒的标准制剂分装并灭活以便获得在每个pH需要的的灭活程度。在各种情况中，除了省略EI之外，以相同的步骤处理病毒的对照制剂。在如上面指出灭活和利用硫代硫酸淬灭后，将灭活部分和对照病毒制剂部分利用标准技术进行等电点聚焦。因为利用EI修饰氨基酸残基导致蛋白质的pKa的增加，对于检测蛋白质修饰，等电点聚焦是敏感的方法。通过任何标准技术如考马斯蓝染色，银染，或如果利用了标记病毒的放射自显影在IEF凝胶中检测蛋白质带。该结果将揭示在不同灭活条件之间带图谱的变化程度中的可变性，并且将允许选择导致蛋白质最小修饰的条件。如果，在灭活过程中，病毒悬浮于含有蛋白质的培养基中，在从灭活混合物中通过高速离心除去病毒后通过IEF也可以确定培养基蛋白质的修饰。
作为灭活选择性的另外测试，可以将灭活病毒和对照制剂通过设计为利用标准免疫学试剂如一组单克隆抗体确定病毒粒子蛋白质的反应性的ELISA或同样的标准测试进行免疫学评估。为了进行这一评估，在确定的条件下将在不同pH下，制备的灭活和对照病毒制剂进行ELISA。在一些灭活条件下通常将发现抗原性的降低。在大多数条件下，这些条件与IEF确定的那些相似(优选地为相同)，以便导致蛋白质修饰的增强。在一些情况下，仅仅在各种导致病毒感染性的灭活(理论值)超过50logs的条件下可以发现蛋白质的可检测的修饰。虽然病毒基因组的修饰与每个聚核苷酸分子的几百个核苷酸残基一样高，但在这种情况中，仍然可以检测主要的单个标的与蛋白质(单修饰蛋白质)的反应。
                     实施例3
在不同pH确定灭活疫苗的效力
在确定蛋白质修饰的程度后，测试灭活病毒制剂的疫苗效力。为了完成此任务，在试图提供有效的免疫应答的条件下，例如在适当间隔，有或没有免疫佐药的3到4次给药，对适当的动物给药在各种pH下灭活的病毒制剂。一般，在各种剂量水平给予每个疫苗制剂以便确定剂量应答关系，测量效力。在基准和每次给药疫苗一星期后，测试血液或其它液体的抗病毒成分的抗体。在最后疫苗给药后，通过给药野生型病毒和观察病毒感染的结果测试动物的保护效力。在这一方式中，可以评估在各个条件下生产的疫苗的效力。对于一些病毒，可以每个免疫应答或保护性效力的评估对于人用的疫苗效果的预测可以是更有价值的参数。
权利要求书
按照条约第19条的修改
1.灭活选自包括脊髓灰质炎病毒，狂犬病病毒，黄热病毒，日本脑炎病毒，森林脑炎病毒，麻疹病毒，腮腺炎病毒，Ross River病毒，轮状病毒和风疹病毒的组的病毒的方法，该方法包括在pH小于7.0时利用灭活量的乙烯亚胺的组合物处理所述的病毒。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述的pH在5.5和7.0之间。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述的pH小于6.8。
4.根据权利要求1所述的方法，其中在所述的组合物中所述的乙烯亚胺的浓度在0.01％和0.5％w/v之间。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述的乙烯亚胺是单体。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述的乙烯亚胺是低聚物。
7.根据权利要求1所述的方法，其中相比在pH7.0处理的同样病毒，处理病毒的免疫原性增强。
8.含有通过权利要求1或2的方法获得的灭活病毒的疫苗。
9.阻止或处理脊椎动物中病毒感染的方法，该方法包括对所述的脊椎动物给药选自包括脊髓灰质炎病毒，狂犬病病毒，黄热病毒，日本脑炎病毒，森林脑炎病毒，麻疹病毒，腮腺炎病毒，Ross River病毒，轮状病毒和风疹病毒的基本灭活的病毒，在pH小于7.0时利用乙烯亚胺处理所述的病毒。
10.灭活选自包括脊髓灰质炎病毒，狂犬病病毒，黄热病毒，日本脑炎病毒，森林脑炎病毒，麻疹病毒，腮腺炎病毒，Ross River肝炎病毒，轮状病毒，和风疹病毒的组的病毒的方法，所述的方法包括在pH小于7.0时，利用单体乙烯亚胺接触所述的病毒，该方法包括
(a)利用在多个不同pH值的灭活量的单体乙烯亚胺处理所述多个病毒的样品；
(b)测量每个处理病毒样品中选自病毒灭活和免疫原性的特征；和
(c)选择相对于步骤(a)的其它pH值，提供更高的病毒灭活或更高的免疫原性，或它们的联合的pH。

Claims (11)

1.灭活病毒的方法，所述方法包括在pH小于7.0时，利用含有灭活量的乙烯亚胺的组合物处理所述的病毒。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述的pH在5.5和7.0之间。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述的pH小于6.8。
4.根据权利要求1所述的方法，其中在所述的组合物中所述的乙烯亚胺的浓度在0.01％和0.5％w/v之间。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述的乙烯亚胺是单体。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述的乙烯亚胺是低聚物。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述病毒选自，脊髓灰质炎，狂犬病，黄热病，日本脑炎，森林脑炎，麻疹，流行性腮腺炎，RossRiver病毒，轮状病毒和风疹。
8.根据权利要求1所述的方法，其中与在pH7.0处理的同样病毒的免疫原性相比，处理病毒的免疫原性增强了。
9.含有权利要求1或2所述的方法获得的灭活病毒的疫苗。
10.在脊椎动物中预防和治疗病毒感染的方法，该方法包括对所述的脊椎动物给药利用pH小于7.0时，用乙烯亚胺处理的基本灭活病毒。
11.灭活病毒的方法，所述的方法包括在pH小于7.0时将所述病毒与单体乙烯亚胺接触，它包括下面步骤：
(a)利用在多种不同pH值的灭活量的单体乙烯亚胺处理所述多种病毒的样品；
(b)在每个处理的病毒样品中测量选自病毒灭活和免疫原性的特征；和
(c)选择相对于步骤(a)的其它pH值，提供更高病毒灭活或更高免疫原性，或它们的联合的pH。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100457896C (zh) * 2005-10-26 2009-02-04 李法卿 灭活生物制品中病毒和去除细菌内毒素的方法

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5691132A (en) * 1994-11-14 1997-11-25 Cerus Corporation Method for inactivating pathogens in red cell compositions using quinacrine mustard
US20040048235A1 (en) * 1995-08-29 2004-03-11 V.I. Technologies, Inc. Methods and compositions for the selective modification of nucleic acids
US20040053208A1 (en) * 1995-08-29 2004-03-18 V. I. TECHNOLOGIES, Inc. Methods to selectively inactivate parasites in biological compositions
US5891705A (en) * 1997-04-08 1999-04-06 Pentose Pharmaceuticals, Inc. Method for inactivating a virus
US6093564A (en) 1997-10-03 2000-07-25 V.I. Technologies, Inc. Methods and compositions for the selective modification of nucleic acids
US6352695B1 (en) * 1997-10-03 2002-03-05 V.I. Technologies, Inc. Methods and compositions for the selective modification of nucleic acids
US6369048B1 (en) 1998-01-12 2002-04-09 V.I. Technologies, Inc. Methods and compositions for inactivating viruses
KR20060080249A (ko) * 1998-06-12 2006-07-07 마운트 시나이 스쿨 오브 메디신 오브 뉴욕 유니버시티 변형된 인터페론 길항물질을 보유하고, 백신 및 약제로사용되는 약독화된 네거티브 가닥 바이러스
US6403359B1 (en) 1998-09-25 2002-06-11 V. I. TECHNOLOGIES, Inc. Solid phase quenching systems
US6617100B2 (en) 1998-09-25 2003-09-09 V.I. Technologies, Inc. Solid phase quenching systems
JP4371343B2 (ja) 1998-10-05 2009-11-25 財団法人阪大微生物病研究会 日本脳炎ウイルス群感染症に対する不活化ワクチンのための増強免疫原およびその製造方法
US6150109A (en) 1999-01-25 2000-11-21 V. I. TECHNOLOGIES, Inc. Lipophilic quenching of viral inactivating agents
US6268120B1 (en) 1999-10-19 2001-07-31 Gambro, Inc. Isoalloxazine derivatives to neutralize biological contaminants
US6843961B2 (en) * 2000-06-15 2005-01-18 Gambro, Inc. Reduction of contaminants in blood and blood products using photosensitizers and peak wavelengths of light
US9044523B2 (en) 2000-06-15 2015-06-02 Terumo Bct, Inc. Reduction of contaminants in blood and blood products using photosensitizers and peak wavelengths of light
US20020131958A1 (en) * 2001-01-22 2002-09-19 John Chapman Method for purifying a biological composition
US6803041B2 (en) * 2001-03-20 2004-10-12 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Equine herpesvirus vaccine
US7195905B2 (en) 2001-12-10 2007-03-27 Baxter Healthcare S.A. Enveloped virus vaccine and method for production
TWI347364B (en) * 2003-02-19 2011-08-21 Novartis Ag Inactivated nodavirus vaccine
US7632078B2 (en) * 2003-10-30 2009-12-15 Deka Products Limited Partnership Pump cassette bank
ES2552774T3 (es) 2004-06-01 2015-12-02 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Virus de la gripe porcina modificado por ingeniería genética y usos de los mismos
WO2006088481A2 (en) * 2005-02-15 2006-08-24 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Genetically engineered equine influenza virus and uses thereof
PT2529747T (pt) 2005-12-02 2018-05-09 Icahn School Med Mount Sinai Vírus da doença de newcastle quiméricos que apresentam proteínas de superfície não nativas e suas utilizações
WO2009060440A1 (en) * 2007-11-05 2009-05-14 Mor Research Applications Ltd. Anti-measles cancer immunotherapy
CA2710611C (en) * 2007-12-26 2016-12-20 The Kitasato Institute Method of producing japanese encephalitis vaccine stably storable over long time and use of the vaccine
WO2010117786A1 (en) 2009-03-30 2010-10-14 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Influenza virus vaccines and uses thereof
WO2011014504A1 (en) 2009-07-27 2011-02-03 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Recombinant influenza virus vectors and uses thereof
US8828406B2 (en) 2009-07-30 2014-09-09 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Influenza viruses and uses thereof
AU2011235220B2 (en) 2010-03-30 2016-03-10 Mount Sinai School Of Medicine Influenza virus vaccines and uses thereof
US20130189303A1 (en) 2011-08-02 2013-07-25 Yan Zhou Recombinant swine influenza virus and uses thereof
US10131695B2 (en) 2011-09-20 2018-11-20 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Influenza virus vaccines and uses thereof
JP2016508133A (ja) 2012-12-18 2016-03-17 アイカーン スクール オブ メディシン アット マウント サイナイ インフルエンザウイルスワクチン及びその使用
WO2014159960A1 (en) 2013-03-14 2014-10-02 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Antibodies against influenza virus hemagglutinin and uses thereof
JP2018504412A (ja) 2015-01-23 2018-02-15 アイカーン スクール オブ メディシン アット マウント サイナイ インフルエンザウイルスワクチン接種レジメン
US10029005B2 (en) 2015-02-26 2018-07-24 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Bivalent swine influenza virus vaccine
CA3023143A1 (en) 2016-06-15 2017-12-21 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Influenza virus hemagglutinin proteins and uses thereof
WO2018187706A2 (en) 2017-04-07 2018-10-11 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Anti-influenza b virus neuraminidase antibodies and uses thereof
EP4041889A1 (en) 2019-10-08 2022-08-17 Luxembourg Institute Of Health (LIH) Inhibitor of dj-1 for use in treating immunoaging
CA3158539A1 (en) 2019-12-16 2021-06-24 Johanna Jacoba Elisabeth Bijlsma Inactivated piscine orthoreovirus vaccine
US20230015910A1 (en) 2019-12-18 2023-01-19 Intervet Inc. Cryptosporidiosis vaccine

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3492289A (en) * 1966-06-13 1970-01-27 Dow Chemical Co Polymers of alkylenimines
US4841023A (en) * 1986-06-25 1989-06-20 New York Blood Center, Inc. Inactivation of viruses in labile protein-containing compositions using fatty acids
US5374424A (en) * 1986-10-03 1994-12-20 Miles Inc. Multivalent felv-infected feline vaccine
JPH01314729A (ja) * 1988-02-04 1989-12-19 Sumitomo Chem Co Ltd 複合繊維およびその不織成形体
US5055485A (en) * 1988-12-02 1991-10-08 New York Blood Center, Inc. Inactivation of viruses in cell- and protein-containing compositions using aryl diol epoxides
US5120649A (en) * 1990-05-15 1992-06-09 New York Blood Center, Inc. Photodynamic inactivation of viruses in blood cell-containing compositions
US5232844A (en) * 1990-05-15 1993-08-03 New York Blood Center Photodynamic inactivation of viruses in cell-containing compositions
US5565205A (en) * 1990-08-16 1996-10-15 Solvay Animal Health, Inc. Inactivated Mycoplasma hypopneumoniae bacterin and method of use thereof
GB9108682D0 (en) * 1991-04-23 1991-06-12 Wellcome Found Production of vaccines
EP0612532A3 (en) * 1993-02-26 1998-02-04 Solvay Animal Health, Inc. Canine coronavirus vaccine from feline enteric coronavirus
AU722811B2 (en) * 1995-06-07 2000-08-10 Cerus Corporation Treating red blood cell solutions with anti-viral agents
US6114108A (en) * 1995-08-29 2000-09-05 V.I. Technologies, Inc. Methods and compositions for the selective modification of viral nucleic acids
US5891705A (en) * 1997-04-08 1999-04-06 Pentose Pharmaceuticals, Inc. Method for inactivating a virus

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100457896C (zh) * 2005-10-26 2009-02-04 李法卿 灭活生物制品中病毒和去除细菌内毒素的方法

Also Published As

Publication number Publication date
JP2002512514A (ja) 2002-04-23
EP0977832A1 (en) 2000-02-09
IL132134A0 (en) 2001-03-19
CA2286690A1 (en) 1998-10-15
AU741679B2 (en) 2001-12-06
WO1998045415A1 (en) 1998-10-15
EP0977832A4 (en) 2001-09-05
US5891705A (en) 1999-04-06
AU7107398A (en) 1998-10-30

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