CN1256116C

CN1256116C - 索骨丹有效活性成分的提取方法

Info

Publication number: CN1256116C
Application number: CNB021019924A
Authority: CN
Inventors: 郑尚珍
Original assignee: Northwest Normal University
Current assignee: Northwest Normal University
Priority date: 2002-01-24
Filing date: 2002-01-24
Publication date: 2006-05-17
Anticipated expiration: 2022-01-24
Also published as: CN1433788A

Abstract

本发明涉及一种索骨丹有效活性成分的提取方法。提取方法包括：a.以索骨丹的块根为原料，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎；b.用浓度为45-95%有机溶液萃取，然后分极性部位用有机溶液萃取，进行活性试验，配合药理筛选，弃去残渣；萃取方式可以为冷浸或热回流。c.减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；d.分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用聚酰胺或用硅胶作填充剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。将索骨丹的有效活性成分制成药剂，对治疗由柯萨基病毒、单纯疱疹病毒和乙型脑炎病毒所引起的疑难病症，如病毒性心肌炎、腮腺炎、咽峡炎、疱疹性口腔炎等有良好疗效。

Description

索骨丹有效活性成分的提取方法

(一)技术领域：

本发明涉及一种索骨丹有效活性成分的提取方法。

(二)背景技术：

目前，国内外曾有一些西药和中成药为抗病毒药，前者对患者服用后有一定副作用，后者对患者疗效不明显。

根据世界卫生组织全球病毒监测研究报告显示，柯萨奇病毒在人群中感染最为常见。在新生儿、儿童突发死亡病例中，20％为病毒性心肌炎所致。由于病毒感染后可在心肌中持续存在，目前尚缺乏有效抗病毒手段^[1]。

[1]《健康报》2001，03，20，蒋明。

现已研究查明，咽峡疱疹(亦称疱疹性咽峡炎)，多为感染柯萨基病毒所致。起病初有头痛，小儿啼哭，身痛，发烧等类似感冒症状，继而发现腹痛，拒食，呕吐等胃肠症状，儿童因此病高烧不退，体质下降，甚至出现惊厥，并发腮腺炎及腮腺炎性脑膜炎，对生命构成威胁^[2]。

[2]《福建卫生报》2000，09，24金若米。

(三)发明内容：

本发明的目的在于提供一种索骨丹有效活性成分的提取方法。

本发明索骨丹有效活性成分的提取方法，该方法包括以下步骤：

a.以索骨丹的块根为原料，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎至20目、10目或3-5mm的粒度；

b.用浓度为45-95％有机溶液总萃取，其中有机溶液可以是浓度为45～60％、70～75％、90～95％的医用乙醇的任何一种；然后分极性部位用有机溶液萃取，接着进行活性试验，有机溶液可以是氯仿(丙酮)、乙酸乙酯、正丁醇；配合药理筛选，弃去残渣；其中有机溶液用量为原料量的4-8倍，萃取方式可以为冷浸或热回流。冷浸方式的冷浸时间为每次5-9天，萃取次数为3-5次，萃取温度为12-30℃。热回流方式的回流时间为每次1-4小时，优选2-4小时；回流次数为2-5次，优选2-3次；

c.减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；

d.分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用聚酰胺或用硅胶作填充剂，以氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝5∶4∶0.1或正丁醇∶氯仿∶甲酸＝8∶3∶1为洗脱剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。

索骨丹有效活性成分，包括1)鬼灯檠甲素；2)鬼灯檠乙素；3)槲皮素；4)熊果甙；5)紫丁香酸；6)没食子酸；7)3-O-没食子酰基-(-)-表儿茶素；8)(3-O-没食子酰基)-表儿茶素-(4β-8)-(3-O-没食子酰基)-表儿茶素；9)1，2，4，6-四-O-3-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖；10)没食子酸甲酯；11)芳樟醇；12)2，6-二羟基苯乙酸甲酯等。

纯中药索骨丹的有效活性成分对柯萨基病毒、疱疹病毒等引起的疑难病症有明显疗效，适宜治疗病毒性心肌炎、咽峡炎、腮腺炎、疱疹性口腔炎和恶性痢疾、乙型肝炎、流行性感冒等，该药疗效显著，服用安全，无毒副作用，增强免疫，克服了现有西药、中成药的缺点。本发明索骨丹的有效活性成分可单独使用，也可将索骨丹中提取的活性成分的流浸膏单独与辅料(如，医用淀粉、乙基纤维素、明胶等)混合均匀、干燥、粉碎、过筛、熟化和灭菌后制成所需的剂型，可治疗由柯萨基病毒、单纯疱疹病毒和乙型脑炎病毒所引起的疑难病症，如病毒性心肌炎、腮腺炎、咽峡炎、疱疹性口腔炎等。还可将其与助剂、辅料科学配伍后，干燥粉碎成100-120目的细粉，在100-110℃温度下进行熟化、灭菌处理10-30分钟，意即可制成胶囊、含片也可制成膏剂，既根据不同的助剂，制出相应的药剂。例如，加一种或数种助剂制成抗病毒、抑菌灭菌制剂，或治乙型肝炎、哮喘、流行性感冒等药剂。所制成的药物具有服用安全，疗效明显，无毒副作用，抗病毒、抑菌灭菌范围广，制备方法简便易行，无环境污染等优点。

索骨丹的有效活性成分药剂中含有丰富的营养成分。在索骨丹中，其总氨基酸的含量为2.01％。已鉴定出18种人体所需的氨基酸，其中有8种为人体所需而又不能自身合成的氨基酸。

索骨丹有效活性成分，还对金黄色葡萄球菌、李斯德杆菌、耶尔森氏菌、变形杆菌、绿浓杆菌、炭疽杆菌、伤寒杆菌、弗氏痢疾杆菌等10余种病菌有强的杀灭作用。此药不仅能杀灭和抑制DNA(HGV单纯疱疹)病毒，而且还能抑灭RNA(柯萨基)病毒，说明此药为广谱性抗病毒药物。此药安全量为192-96mg/Kg，而在含17-34mg/Kg时即能抑灭病毒，同时杀灭病毒后的细胞管的细胞仍能继续分裂传代，说明此药安全有效，毒性小。

用瑞士种小白鼠进行经口灌胃染毒试验，以蒸馏水对照，实验结果表明，索骨丹的有效活性成分经口等量灌胃(0.01ml/g)，其急性经口的半数致死大于12500mg/Kg。按口服毒性分极标准，属于微毒(实际无毒)。此外，试验还表明，对乙肝病毒和流感病毒有100％抑制作用。将索骨丹的有效活性成分制成药剂，对治疗由柯萨基病毒、单纯疱疹病毒和乙型脑炎病毒所引起的疑难病症，如病毒性心肌炎、腮腺炎、咽峡炎、疱疹性口腔炎等，有效率93.7％，优良率86％。

(五)具体实施方式：

下面的实施例可以使本专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1：

取索骨丹的块根200g，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎至10目的粒度；用1000g的浓度为45～60％的医用乙醇总萃取，萃取方式为冷浸方式，冷浸时间为每次7天，萃取次数为4次，萃取温度为25℃。然后分极性部位用有机溶液萃取，有机溶液可以是氯仿、乙酸乙酯、正丁醇；接着进行活性试验，配合药理筛选，弃去残渣；减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用硅胶作填充剂，以氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝12∶5∶0.1为洗脱剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。

实施例2：

取索骨丹的块根150g，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎至3-5mm的粒度；用750g量的浓度为70～75％的医用乙醇总萃取，萃取方式为热回流方式，回流时间为每次3小时；回流次数为3次。然后分极性部位用有机溶液萃取，有机溶液可以是氯仿、乙酸乙酯、正丁醇；接着进行活性试验，配合药理筛选，弃去残渣；减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用聚酰胺作填充剂，以正丁醇∶氯仿∶甲酸＝8∶3∶1为洗脱剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。

Claims

1.一种索骨丹有效活性成分的提取方法，该方法包括以下步骤：

b.用浓度为45-95％有机溶液总萃取，然后分极性部位用有机溶液萃取，接着进行活性试验，配合药理筛选，弃去残渣；其中有机溶液用量为原料量的4-8倍，萃取方式为冷浸或热回流；

c.减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；

2.根据权利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步骤中总萃取用的有机溶液是浓度为45～60％、70～75％、90～95％的医用乙醇的任何一种；分极性部位萃取用的有机溶液是氯仿、丙酮、乙酸乙酯、正丁醇。

3.根据权利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步骤中的萃取方式为冷浸，冷浸时间为每次5-9天，萃取次数为3-5次，萃取温度为12-30℃。

4.根据权利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步骤中的萃取方式为热回流，回流时间为每次1-4小时，回流次数为2-5次。

5.根据权利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步骤中的萃取方式为热回流，回流时间为每次2-4小时，回流次数为2-3次。