CN1229387C - 具有抑癌功能的新的人蛋白及其编码序列 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一类新的具有抑癌功能的人蛋白，编码此多肽的多核苷酸和经重组技术产生该多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病如癌症等的方法。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这类新的具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸的用途。

Description

具有抑癌功能的新的人蛋白及其编码序列

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及新的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸和此多核苷酸编码的多肽。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的用途和制备。

背景技术

人基因组学研究目前是国际上的热点，除人染色体DNA大规模测序，表达序列测序(EST)的方法外，还缺少从功能开始的筛选具有功能基因的高通量的方法。

癌症是危害人类健康的主要疾病之一。为了有效地治疗和预防肿瘤，目前人们已越来越关注肿瘤的基因治疗。因此，本领域迫切需要开发研究具有抑癌功能的人蛋白及其激动剂/抑制剂。

发明内容

本发明的目的是提供一类新的具有抑癌功能的人蛋白多肽以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一目的是提供编码这些多肽的多核苷酸。

本发明的另一目的是提供生产这些多肽的方法以及该多肽和编码序列的用途。

在本发明的第一方面，提供新颖的分离出的具有抑癌功能的蛋白多肽，它包含具有选自下组的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO：3、6、9、12、15；或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。较佳地，该多肽是具有选自下组的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO：3、6、9、12、15。

在本发明的第二方面，提供了一种分离的多核苷酸，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少85％相同性：(a)编码上述的具有抑癌功能的蛋白多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：3、6、9、12、15。更佳地，该多核苷酸的序列选自下组：SEQ ID NO：2、5、8、11、14的编码区序列或全长序列。

在本发明的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。

在本发明的第四方面，提供了制备具有抑癌功能的蛋白活性的多肽的制备方法，该方法包含：(a)在适合表达具有抑癌功能的蛋白的条件下，培养上述被转化或转导的宿主细胞；(b)从培养物中分离出具有抑癌功能的蛋白活性的多肽。

在本发明的第五方面，提供了与上述的具有抑癌功能的蛋白多肽特异性结合的抗体。还提供了可用于检测的核酸分子，它含有上述的多核苷酸中连续10个核苷酸至全长核苷酸，较佳地它含有连续的约15-1000个核苷酸。

在本发明的第六方面，提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的本发明的具有抑癌功能的蛋白多肽以及药学上可接受的载体。这些药物组合物可治疗癌症以及细胞异常增殖等病症。

本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。

具体实施方式

本发明采用大规模cDNA克隆转染癌细胞，在获得具有抑癌作用的基础上，经测序证明为新的基因，进一步得到全长cDNA克隆。DNA转染试验证明，本发明的具有抑癌功能的蛋白对肝癌细胞7721具有抑制克隆形成的作用，其抑制率≥50％。

如本文所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。

如本文所用，“分离的具有抑癌功能的蛋白或多肽”是指具有抑癌功能的蛋白多肽基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化具有抑癌功能的蛋白。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。

本发明的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本发明的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本发明的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本发明的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。

本发明还包括具有抑癌功能的人蛋白的片段、衍生物和类似物。如本文所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然具有抑癌功能的人蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本发明的多肽片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的多肽，而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的，或(ii)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的多肽，或(iii)成熟多肽与另一个化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的多肽，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)。根据本文的教导，这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。

本发明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。以FP17425蛋白(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO：2所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用，“简并的变异体”对于FP17425而言是指编码具有SEQ ID NO：3的蛋白质，但与SEQ ID NO：2所示的编码区序列有差别的核酸序列。再以FP17469蛋白为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO：5所示的编码区序列相同或者是简并的变异体；“简并的变异体”对于FP17469而言是指编码具有SEQ ID NO：6的蛋白质，但与SEQ ID NO：5所示的编码区序列有差别的核酸序列。对于本发明的其他具有抑癌功能的蛋白，可依此类推。

编码成熟多肽的多核苷酸包括：只编码成熟多肽的编码序列；成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列；成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。

术语“编码多肽的多核苷酸”可以是包括编码此多肽的多核苷酸，也可以是还包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。

本发明还涉及上述多核苷酸的变异体，其编码与本发明有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片段、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是天然发生的等位变异体或非天然发生的变异体。这些核苷酸变异体包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。如本领域所知的，等位变异体是一个多核苷酸的替换形式，它可能是一个或多个核苷酸的取代、缺失或插入，但不会从实质上改变其编码的多肽的功能。

本发明还涉及与上述的序列杂交且两个序列之间具有至少50％，较佳地至少70％，更佳地至少80％相同性的多核苷酸。本发明特别涉及在严格条件下与本发明所述多核苷酸可杂交的多核苷酸。在本发明中，“严格条件”是指：(1)在较低离子强度和较高温度下的杂交和洗脱，如0.2×SSC，0.1％SDS，60℃；或(2)杂交时加有变性剂，如50％(v/v)甲酰胺，0.1％小牛血清/0.1％Ficoll，42℃等；或(3)仅在两条序列之间的相同性至少在95％以上，更好是97％以上时才发生杂交。并且，可杂交的多核苷酸编码的多肽与SEQ IDNO：3所示的成熟多肽具有相同的生物学功能(以FP17425蛋白为例)和活性。

本发明还涉及与上述的序列杂交的核酸片段。如本文所用，“核酸片段”的长度至少含15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸以上。核酸片段可用于核酸的扩增技术(如PCR)以确定和/或分离编码具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸。

本发明中的多肽和多核苷酸优选以分离的形式提供，更佳地被纯化至均质。

本发明的DNA序列能用几种方法获得。例如，用本领域熟知的杂交技术分离DNA。这些技术包括但不局限于：1)用探针与基因组或cDNA文库杂交以检出同源性核苷酸序列，和2)表达文库的抗体筛选以检出具有共同结构特征的克隆的DNA片段。

编码具有抑癌功能的蛋白的特异DNA片段序列产生也能用下列方法获得：1)从基因组DNA分离双链DNA序列；2)化学合成DNA序列以获得所需多肽的双链DNA。

当需要的多肽产物的整个氨基酸序列已知时，DNA序列的直接化学合成是经常选用的方法。如果所需的氨基酸的整个序列不清楚时，DNA序列的直接化学合成是不可能的，选用的方法是cDNA序列的分离。分离感兴趣的cDNA的标准方法是从高表达该基因的供体细胞分离mRNA并进行逆转录，形成质粒或噬菌体cDNA文库。提取mRNA的方法已有多种成熟的技术，试剂盒也可从商业途径获得(Qiagene)。而构建cDNA文库也是通常的方法(Sambrook，et al.，Molecular Cloning，A Laboratory Manual，Cold SpringHarbor Laboratory.New York，1989)。还可得到商业供应的cDNA文库，如Clontech公司的不同cDNA文库。当结合使用聚合酶反应技术时，即使极少的表达产物也能克隆。

可用常规方法从这些cDNA文库中筛选本发明的基因。这些方法包括(但不限于)：(1)DNA-DNA或DNA-RNA杂交；(2)标志基因的功能出现或丧失；(3)测定具有抑癌功能的蛋白的转录本的水平；(4)通过免疫学技术或测定生物学活性，来检测基因表达的蛋白产物。上述方法可单用，也可多种方法联合应用。

在第(1)种方法中，杂交所用的探针是与本发明的多核苷酸的任何一部分同源，其长度至少15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸。此外，探针的长度通常在2kb之内，较佳地为1kb之内。此处所用的探针通常是在本发明的基因DNA序列信息的基础上化学合成的DNA序列。本发明的基因本身或者片段当然可以用作探针。DNA探针的标记可用放射性同位素，荧光素或酶(如碱性磷酸酶)等。

在第(4)种方法中，检测具有抑癌功能的蛋白基因表达的蛋白产物可用免疫学技术如Western印迹法，放射免疫沉淀法，酶联免疫吸附法(ELISA)等。

应用PCR技术扩增DNA/RNA的方法(Saiki，et al.Science 1985；230：1350-1354)被优选用于获得本发明的基因。特别是很难从文库中得到全长的cDNA时，可优选使用RACE法(RACE-cDNA末端快速扩增法)，用于PCR的引物可根据本文所公开的本发明的序列信息适当地选择，并可用常规方法合成。可用常规方法如通过凝胶电泳分离和纯化扩增的DNA/RNA片段。

如上所述得到的本发明的基因，或者各种DNA片段等的核苷酸序列的测定可用常规方法如双脱氧链终止法(Sanger et al.PNAS，1977，74：5463-5467)。这类核苷酸序列测定也可用商业测序试剂盒等。为了获得全长的cDNA序列，测序需反复进行。有时需要测定多个克隆的cDNA序列，才能拼接成全长的cDNA序列。

本发明也涉及包含本发明多核苷酸的载体，以及用本发明载体或具有抑癌功能的蛋白编码序列经基因工程产生的宿主细胞，以及经重组技术产生本发明所述多肽的方法。

通过常规的重组DNA技术，可利用本发明的多聚核苷酸序列可用来表达或生产重组的具有抑癌功能的蛋白多肽。一般来说有以下步骤：

(1).用本发明的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸(或变异体)，或用含有该多核苷酸的重组表达载体转化或转导合适的宿主细胞；

(2).在合适的培养基中培养的宿主细胞；

(3).从培养基或细胞中分离、纯化蛋白质。

本发明中，具有抑癌功能的人蛋白多核苷酸序列可插入到重组表达载体中。术语“重组表达载体”指本领域熟知的细菌质粒、噬菌体、酵母质粒、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒如腺病毒、逆转录病毒或其他载体。在本发明中适用的载体包括但不限于：在细菌中表达的基于T7的表达载体；在哺乳动物细胞中表达的pMSXND表达载体和在昆虫细胞中表达的来源于杆状病毒的载体。总之，只要能在宿主体内复制和稳定，任何质粒和载体都可以用。表达载体的一个重要特征是通常含有复制起点、启动子、标记基因和翻译控制元件。

本领域的技术人员熟知的方法能用于构建含具有抑癌功能的人蛋白编码DNA序列和合适的转录/翻译控制信号的表达载体。这些方法包括体外重组DNA技术、DNA合成技术、体内重组技术等。所述的DNA序列可有效连接到表达载体中的适当启动子上，以指导mRNA合成。这些启动子的代表性例子有：大肠杆菌的lac或trp启动子；λ噬菌体PL启动子；真核启动子包括CMV立即早期启动子、早期和晚期SV40启动子、反转录病毒的LTRs和其他一些已知的可控制基因在原核或真核细胞或其病毒中表达的启动子。表达载体还包括翻译起始用的核糖体结合位点和转录终止子。

此外，表达载体优选地包含一个或多个选择性标记基因，以提供用于选择转化的宿主细胞的表型性状，如真核细胞培养用的二氢叶酸还原酶、新霉素抗性以及绿色荧光蛋白(GFP)，或用于大肠杆菌的四环素或氨苄青霉素抗性。

包含上述的适当DNA序列以及适当启动子或者控制序列的载体，可以用于转化适当的宿主细胞，以使其能够表达蛋白质。

宿主细胞可以是原核细胞，如细菌细胞；或是低等真核细胞，如酵母细胞；或是高等真核细胞，如哺乳动物细胞。代表性例子有：大肠杆菌，链霉菌属；鼠伤寒沙门氏菌的细菌细胞；真菌细胞如酵母；植物细胞；果蝇S2或Sf9的昆虫细胞；CHO、COS或Bowes黑素瘤细胞的动物细胞等。

本发明的多核苷酸在高等真核细胞中表达时，如果在载体中插入增强子序列时将会使转录得到增强。增强子是DNA的顺式作用因子，通常大约有10到300个碱基对，作用于启动子以增强基因的转录。可举的例子包括在复制起始点晚期一侧的100到270个碱基对的SV40增强子、在复制起始点晚期一侧的多瘤增强子以及腺病毒增强子等。

本领域一般技术人员都清楚如何选择适当的载体、启动子、增强子和宿主细胞。

用重组DNA转化宿主细胞可用本领域技术人员熟知的常规技术进行。当宿主为原核生物如大肠杆菌时，能吸收DNA的感受态细胞可在指数生长期后收获，用CaCl₂法处理，所用的步骤在本领域众所周知。可供选择的是用MgCl₂。如果需要，转化也可用电穿孔的方法进行。当宿主是真核生物，可选用如下的DNA转染方法：磷酸钙共沉淀法，常规机械方法如显微注射、电穿孔、脂质体包装等。

获得的转化子可以用常规方法培养，表达本发明的基因所编码的多肽。根据所用的宿主细胞，培养中所用的培养基可选自各种常规培养基。在适于宿主细胞生长的条件下进行培养。当宿主细胞生长到适当的细胞密度后，用合适的方法(如温度转换或化学诱导)诱导选择的启动子，将细胞再培养一段时间。

在上面的方法中的重组多肽可包被于细胞内、细胞外或在细胞膜上表达或分泌到细胞外。如果需要，可利用其物理的、化学的和其它特性通过各种分离方法分离和纯化重组的蛋白。这些方法是本领域技术人员所熟知的。这些方法的例子包括但并不限于：常规的复性处理、用蛋白沉淀剂处理(盐析方法)、离心、渗透破菌、超处理、超离心、分子筛层析(凝胶过滤)、吸附层析、离子交换层析、高效液相层析(HPLC)和其它各种液相层析技术及这些方法的结合。

重组的具有抑癌功能的人蛋白或多肽有多方面的用途。这些用途包括(但不限于)：直接做为药物治疗具有抑癌功能的蛋白功能低下或丧失所致的疾病，和用于筛选促进或对抗具有抑癌功能的蛋白功能的抗体、多肽或其它配体。例如，抗体可用于激活或抑制具有抑癌功能的人蛋白的功能。用表达的重组具有抑癌功能的人蛋白筛选多肽库可用于寻找有治疗价值的能抑制或刺激具有抑癌功能的人蛋白功能的多肽分子。

本发明也提供了筛选药物以鉴定提高(激动剂)或阻遏(拮抗剂)具有抑癌功能的人蛋白的药剂的方法。激动剂提高具有抑癌功能的人蛋白刺激细胞增殖等生物功能，而拮抗剂阻止和治疗与细胞过度增殖有关的紊乱如各种癌症。例如，能在药物的存在下，将哺乳动物细胞或表达具有抑癌功能的人蛋白的膜制剂与标记的具有抑癌功能的人蛋白一起培养。然后测定药物提高或阻遏此相互作用的能力。

具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂包括筛选出的抗体、化合物、受体缺失物和类似物等。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可以与具有抑癌功能的人蛋白结合并消除其功能，或是抑制具有抑癌功能的人蛋白的产生，或是与多肽的活性位点结合使多肽不能发挥生物学功能。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可用于治疗用途。

在筛选作为拮抗剂的化合物时，可以将本发明蛋白加入生物分析测定中，通过测定化合物影响具有抑癌功能的蛋白和其受体之间的相互作用来确定化合物是否是拮抗剂。用上述筛选化合物的同样方法，可以筛选出起拮抗剂作用的受体缺失物和类似物。

本发明的多肽可直接用于疾病治疗，例如，各种恶性肿瘤、和细胞异常增殖等。

本发明的多肽，及其片段、衍生物、类似物或它们的细胞可以用来作为抗原以生产抗体。这些抗体可以是多克隆或单克隆抗体。多克隆抗体可以通过将此多肽直接注射动物的方法得到。制备单克隆抗体的技术包括杂交瘤技术，三瘤技术，人B-细胞杂交瘤技术，EBV-杂交瘤技术等。

可以将本发明的多肽和拮抗剂与合适的药物载体组合后使用。这些载体可以是水、葡萄糖、乙醇、盐类、缓冲液、甘油以及它们的组合。组合物包含安全有效量的多肽或拮抗剂以及不影响药物效果的载体和赋形剂。这些组合物可以作为药物用于疾病治疗。

本发明还提供含有一种或多种容器的药盒或试剂盒，容器中装有一种或多种本发明的药用组合物成分。与这些容器一起，可以有由制造、使用或销售药品或生物制品的政府管理机构所给出的指示性提示，该提示反映出生产、使用或销售的政府管理机构许可其在人体上施用。此外，本发明的多肽可以与其它的治疗化合物结合使用。

药物组合物可以以方便的方式给药，如通过局部、静脉内、腹膜内、肌内、皮下、鼻内或皮内的给药途径。具有抑癌功能的蛋白以有效地治疗和/或预防具体的适应症的量来给药。施用于患者的具有抑癌功能的蛋白的量和剂量范围将取决于许多因素，如给药方式、待治疗者的健康条件和诊断医生的判断。

具有抑癌功能的人蛋白的多聚核苷酸也可用于多种治疗目的。基因治疗技术可用于治疗由于具有抑癌功能的蛋白的无表达或异常/无活性的具有抑癌功能的蛋白的表达所致的细胞增殖、发育或代谢异常。重组的基因治疗载体可用于治疗具有抑癌功能的蛋白表达或活性异常所致的疾病。来源于病毒的表达载体如逆转录病毒、腺病毒、腺病毒相关病毒、单纯疱疹病毒、细小病毒等可用于将具有抑癌功能的蛋白基因转移至细胞内。构建携带具有抑癌功能的蛋白基因的重组病毒载体的方法可见于已有文献(Sambrook，etal.)。另外重组具有抑癌功能的人蛋白基因可包装到脂质体中转移至细胞内。

抑制具有抑癌功能的人蛋白mRNA的寡聚核苷酸(包括反义RNA和DNA)以及核酶也在本发明的范围之内。核酶是一种能特异性分解特定RNA的酶样RNA分子，其作用机制是核酶分子与互补的靶RNA特异性杂交后进行核酸内切作用。反义的RNA和DNA及核酶可用已有的任何RNA或DNA合成技术获得，如固相磷酸酰胺化学合成法合成寡核苷酸的技术已广泛应用。反义RNA分子可通过编码该RNA的DNA序列在体外或体内转录获得。这种DNA序列已整合到载体的RNA聚合酶启动子的下游。为了增加核酸分子的稳定性，可用多种方法对其进行修饰，如增加两侧的序列长度，核糖核苷之间的连接应用磷酸硫酯键或肽键而非磷酸二酯键。

多聚核苷酸导入组织或细胞内的方法包括：将多聚核苷酸直接注入到体内组织中；或在体外通过载体(如病毒、噬菌体或质粒等)先将多聚核苷酸导入细胞中，再将细胞移植到体内等。

本发明的多肽还可用作肽谱分析，例如，多肽可用物理的、化学或酶进行特异性切割，并进行一维或二维或三维的凝胶电泳分析。

本发明还提供了针对具有抑癌功能的人蛋白抗原决定簇的抗体。这些抗体包括(但不限于)：多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段和Fab表达文库产生的片段。这些抗体可用常规方法制备。抗具有抑癌功能的人蛋白的抗体可用于免疫组织化学技术中，检测活检标本中的具有抑癌功能的人蛋白。

与具有抑癌功能的人蛋白结合的单克隆抗体也可用放射性同位素标记，注入体内可跟踪其位置和分布。本发明中的抗体可用于治疗或预防与具有抑癌功能的人蛋白相关的疾病。给予适当剂量的抗体可以刺激或阻断具有抑癌功能的人蛋白的产生或活性。

抗体也可用于设计针对体内某一特殊部位的免疫毒素。如具有抑癌功能的人蛋白高亲和性的单克隆抗体可与细菌或植物毒素(如白喉毒素，蓖麻蛋白，红豆碱等)共价结合。

多克隆抗体的生产可用具有抑癌功能的人蛋白或多肽免疫动物，如家兔，小鼠，大鼠等。多种佐剂可用于增强免疫反应，包括但不限于弗氏佐剂等。

具有抑癌功能的人蛋白单克隆抗体可用杂交瘤技术生产(Kohler and Milstein.Nature，1975，256：495-497)。将人恒定区和非人源的可变区结合的嵌合抗体可用已有的技术生产(Morrison et al，PNAS，1985，81：6851)。而已有的生产单链抗体的技术(U.S.PatNo.4946778)也可用于生产抗具有抑癌功能的人蛋白的单链抗体。

能与本发明蛋白结合的多肽分子可通过筛选由各种可能组合的氨基酸结合于固相物组成的随机多肽库而获得。筛选时，必须对具有抑癌功能的人蛋白分子进行标记。

本发明还涉及定量和定位检测具有抑癌功能的人蛋白水平的诊断试验方法。这些试验是本领域所熟知的，且包括FISH测定和放射免疫测定。试验中所检测的具有抑癌功能的人蛋白水平，可以用作解释具有抑癌功能的人蛋白在各种疾病中的重要性和用于诊断具有抑癌功能的蛋白起作用的疾病。

具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于具有抑癌功能的蛋白相关疾病的诊断和治疗。在诊断方面，具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于检测具有抑癌功能的蛋白的表达与否或在疾病状态下具有抑癌功能的蛋白的异常表达。如具有抑癌功能的蛋白DNA序列可用于对活检标本的杂交以判断具有抑癌功能的蛋白的表达异常。杂交技术包括Southern印迹法，Northern印迹法、原位杂交等。这些技术方法都是公开的成熟技术，相关的试剂盒都可从商业途径得到。本发明的多核苷酸的一部分或全部可作为探针固定在微阵列(Microarray)或DNA芯片(又称为“基因芯片”)上，用于分析组织中基因的差异表达分析和基因诊断。用具有抑癌功能的蛋白特异的引物进行RNA-聚合酶链反应(RT-PCR)体外扩增也可检测具有抑癌功能的蛋白的转录产物。

检测具有抑癌功能的蛋白基因的突变也可用于诊断具有抑癌功能的蛋白相关的疾病。具有抑癌功能的蛋白突变的形式包括与正常野生型具有抑癌功能的蛋白DNA序列相比的点突变、易位、缺失、重组和其它任何异常等。可用已有的技术如Southern印迹法、DNA序列分析、PCR和原位杂交检测突变。另外，突变有可能影响蛋白的表达，因此用Northern印迹法、Western印迹法可间接判断基因有无突变。

本发明的序列对染色体鉴定也是有价值的。这些序列会特异性地针对某条人染色体具体位置且并可以与其杂交。目前，需要鉴定染色体上的各基因的具体位点。然而现在只有很少的基于实际序列数据(重复多态性)的染色体标记物可用于标记染色体位置。为了将这些序列与疾病相关基因相关联。第一步就是将本发明DNA序列定位子染色体上。

简而言之，根据cDNA制备PCR引物(优选15-35bp)，可以将序列定位于染色体上。然后，将这些引物用于PCR筛选含各条人染色体的体细胞杂合细胞。只有那些含有相应于引物的人基因的杂合细胞会产生扩增的片段。

体细胞杂合细胞的PCR定位法，是将DNA定位到具体染色体的快捷方法。使用本发明的的寡核苷酸引物，通过类似方法，可利用一组来自特定染色体的片段或大量基因组克隆而实现亚定位。可用于染色体定位的其它类似策略包括原位杂交、用标记的流式分选的染色体预筛选和杂交预选，从而构建染色体特异的cDNA库。

将cDNA克隆与中期染色体进行荧光原位杂交(FISH)，可以在一个步骤中精确地进行染色体定位。此技术的综述，参见Verma等，Human Chromosomes：a Manual of BasicTechniques，Pergamon Press，New York(1988)。

一旦序列被定位到准确的染色体位置，此序列在染色体上的物理位置就可以与基因图数据相关联。这些数据可见于例如，V.Mckusick，Mendelian Inheritance in Man(可通过与Johns Hopkins University Welch Medical Library联机获得)。然后可通过连锁分析，确定基因与业已定位到染色体区域上的疾病之间的关系。

接着，需要测定患病和来患病个体间的cDNA或基因组序列差异。如果在一些或所有的患病个体中观察到某突变，而该突变在任何正常个体中未观察到，则该突变可能是疾病的病因。比较患病和未患病个体，通常涉及首先寻找染色体中结构的变化，如从染色体水平可见的或用基于cDNA序列的PCR可检测的缺失或易位。

本发明的具有抑癌功能的蛋白核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法，可根据本发明所公开的有关核苷酸序列，尤其是开放阅读框序列来设计引物，并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板，扩增而得有关序列。当序列较长时，常常需要进行两次或多次PCR扩增，然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。

一旦获得了有关的序列，就可以用重组法来大批量地获得有关序列。这通常是将其克隆入载体，再转入细胞，然后通过常规方法从增殖后的宿主细胞中分离得到有关序列。

此外，还可用人工合成的方法来合成有关序列，尤其是片段长度较短时。通常，通过先合成多个小片段，然后再进行连接可获得序列很长的片段。

目前，已经可以完全通过化学合成来编码本发明蛋白(或其片段，或其衍生物)的DNA序列。然后可将该DNA序列引入本领域中的各种DNA分子(如载体)和细胞中。此外，还可通过化学合成将突变引入本发明蛋白序列中。

此外，由于本发明的具有抑癌功能的蛋白具有源自人的天然氨基酸序列，因此，与来源于其他物种的同族蛋白相比，预计在施用于人时将具有更高的活性和/或更低的副作用(例如在人体内的免疫原性更低或没有)。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York：Cold Spring Harbor LaboratoryPress，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。注意，在核苷酸和氨基酸组合序列中，(1)给出起始和终止编码子第一个核苷酸的位置，(2)分子量单位是道尔顿。

实施例

实施例1：cDNA基因的获得及对癌细胞克隆形成的抑制作用

FP17425、FP17469、FP18279和FP18798来自于用常规方法构建的的人胎儿cDNA文库；LP3587来自于用常规方法构建的正常肝cDNA文库。取胎儿组织(FP克隆)或正常肝组织(LP克隆)，用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用pCMV-script TMXR cDNA文库构建试剂盒(Stratagene公司)构建上述mRNA的cDNA文库。其中反转录酶改用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL)，反转录反应在42℃进行。转化XL 10-Gold感受细胞，获得了1×10⁶cfu/μg cDNA滴度的cDNA文库。第一轮随机挑取cDNA克隆，其后以高丰度cDNA克隆和已证明有抑癌细胞生长功能的cDNA克隆为探针，杂交筛选cDNA文库，挑取弱阳性及阴性克隆。用Qiagen 96孔板质粒抽提试剂盒，按厂家说明书进行质粒DNA的提取。质粒DNA和空载体同时转染肝癌细胞系7721。100ng DNA酒精沉淀干燥后，加6μl H2O溶解，待转染。每份DNA样品中加0.74μl脂质体及9.3μl无血清培液，混匀后，室温放置10分钟。每管中加150μl无血清培液，均分加入3孔生长于96孔板的7721细胞中，37℃放置2小时，每孔再加50μl无血清培液，37℃24小时。每孔换100μl全培液，37℃24小时，换含G418的全培液100μl，37℃24-48小时，边观察，边换G418浓度不等的培液。约2-3次后，直到镜检细胞有克隆形成，计数。发现上述克隆有抑制细胞克隆形成作用，结果如下表所示。

         cDNA克隆转染细胞(7721)克隆形成情况

cDNA克隆名称	cDNA克隆数(三个重复)			空载体克隆数(三个重复)
							FP17425	8	8	7	23	27	25
FP17469	11	9	7	23	27	25
							FP18279	9	12	11	32	35	40
FP18798	0	1	0	30	24	27
							LP3587	0	1	0	48	4l	50

对cDNA克隆采用双脱氧终止法，在ABl377 DNA自动测序仪上测定其一端近500bp的核苷酸序列。分析后，确定为新基因克隆，进行另一端测序，仍未获得全长cDNA序列，设计引物，再次进行测序，直到获得全长序列(SEQ ID N0：l、4、7、10、13)。

实施例2：从胎盘或胎儿cDNA中PCR获得全长基因：

取胎儿组织(FP克隆)或正常肝组织(LP克隆)，用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用MMLV-RT-Superscript II(GIBCO BRL)，反转录酶在42℃进行反转录反应，获得胎盘cDNA。利用各个基因的特异引物(如下表所示)，按97℃ 3’1个循环。94℃ 30″60℃ 30″72℃ 1’35个循环，72℃ 10’1个循环进行PCR扩增，获得含有完整开放阅读框序列的各蛋白基因的扩增产物。扩增产物经测序验证，与实施例1测得的序列相符，随后用常规技术将扩增产物转入宿主细胞，获得重组蛋白(SEQ ID NO：3、6、9、12、15)。

                                     基因特异引物

克隆名称	特异引物1(5’→3’)	SEQ IDNO：	特异引物2(3’→5’)	SEQ IDNO：
					FP17425	(81)AGGTGACGACAGAGGCAAAA	16	CAGGAAATGGGAGGGTCGG(3812)	17
FP17469	(103)ACCTGTGCCTCCCTGACG	18	TCGTTGGTTAGGTTGTCGC(2626)	19

FP18279	(33)ACGGAGCCGATGGAACCT	20	ATGAACCGTCCGACTCCGT(2017)	21
					FP18798	(186)ATATCCTGTTTGCCCCAACTC	22	TCCACTCAGACCCCTAACCT(3450)	23
LP3587	(86)TGACGACGGAGACCTTTGTG	24	CGTTATTCTCGCTTTGAGGTAG(1239)	25

实施例3：cDNA克隆序列分析

1.FP17425

A：核苷酸序列(SEQ ID NO：1)长度：3903个碱基

B：氨基酸序列(SEQ ID NO：3)长度：508个氨基酸

C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：2)克隆号和蛋白名称：FP17425

起始编码子：101 ATG终止编码子：1625 TGA蛋白质分子量：58264.64

2.FP17469

A：核苷酸序列(SEQ ID NO：4)长度：2675个碱基

B：氨基酸序列(SEQ ID NO：6)长度：140个氨基酸

C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：5)克隆号和蛋白名称：FP17469

起始编码子：706 ATG终止编码子：1126 TAG蛋白质分子量：15090.60

3.FP18279

A：核苷酸序列(SEQ ID NO：7)长度：2164个碱基

B：氨基酸序列(SEQ ID NO：9)长度：338个氨基酸

C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：8)克隆号和蛋白名称：FP18279

起始编码子：116 ATG终止编码子：1130 TAA蛋白质分子量：38391.04

4.FP18798

A：核苷酸序列(SEQ ID NO：10)长度：3577个碱基

B：氨基酸序列(SEQ ID NO：12)长度：325个氨基酸

C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：11)克隆号和蛋白名称：FP18798

起始编码子：2279 ATG终止编码子：3254 TGA蛋白质分子量：34966.09

5.LP3587

A：核苷酸序列(SEQ ID NO：13)长度：1388个碱基

B：氨基酸序列(SEQ ID NO：15)长度：100个氨基酸

C.核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：14)克隆号和蛋白名称：LP3587

起始编码子：381 ATG终止编码子：681 TAG蛋白质分子量：10434.71

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

                        序列表

<110>上海新世界基因技术开发有限公司

<120>具有抑癌功能的新的人蛋白及其编码序列

<130>024919

<160>25

<170>PatentIn version 3.1

<210>1

<211>3903

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>1

gaggctacag cagcacatac aggagctaga ggcccacctt gaggctgagg agggtgcgcg     60

gcagaagctg cagctggaga aggtgacgac agaggcaaaa atgaagaaat ttgaagagga    120

cctgctgctc ctggaagacc agaattccaa gctgagcaag gagcggaagc tgctggaaga    180

tcgtctggcc gagttctcat cccaggcagc tgaggaggag gagaaggtca agagcctcaa    240

taagctacgg ctcaaatatg aggccacaat cgcagacatg gaggaccgcc tacggaagga    300

ggagaagggt cgccaggagc tggagaagct gaagcggagg ctggatgggg agagctcaga    360

gctgcaggag cagatggtgg agcagcaaca gcgggcagag gagctgcggg cccagctggg    420

ccggaaggag gaggagctgc aggctgccct ggccagggca gaagacgagg gtggggcccg    480

ggcccagctg ctgaaatccc tgcgggaggc tcaagcagcc ctggccgagg cccaggagga    540

cctggagtct gagcgtgtgg ccaggaccaa ggcggagaag cagcgccggg acctgggcga    600

ggagctggag gcgctgcggg gcgagctgga ggacacgctg gactccacca acgcacagca    660

ggagctccgg tccaagaggg aacaggaggt gacggagctg aagaagactc tggaggagga    720

gactcgcatc cacgaggcgg cagtgcagga gctgaggcag cgccacggcc aggccctggg    780

ggagctggcg gagcagctgg agcaggcccg gaggggcaaa ggtgcatggg agaagacccg    840

gctggccctg gaggccgagg tgtccgagct gcgggcagaa ctgagcagcc tgcagactgc    900

acgtcaggag ggtgagcagc ggaggcgccg cctggagtta cagctgcagg aggtgcaggg    960

ccgggctggt gatggggaga gggcacgagc ggaggctgct gagaagctgc agcgagccca   1020

ggctgaactg gagaatgtgt ctggggcgct gaacgaggct gagtccaaaa ccatccgtct   1080

tagcaaggag ctgagcagca cagaagccca gctgcacgat gcccaggagc tgctgcagga   1140

ggagaccagg gcgaaattgg ccttggggtc ccgggtgcga gccatggagg ctgaggcagc   1200

cgggctgcgt gagcagctgg aggaggaggc agctgccagg gaacgggcgg gccgtgaact   1260

gcagactgcc caggcccagc tttccgagtg gcggcggcgc caggaggagg aggcaggggc   1320

actggaggca ggggaggagg cacggcgccg ggcagcccgg gaggccgagg ccctgaccca   1380

gcgcctggca gaaaagacag agaccgtgga tcggctggag cggggccgcc gccggctgca   1440

gcaggagctg gacgacgcca ccatggacct ggagcagcag cggcagcttg tgagcaccct   1500

ggagaagaag cagcgcaagt ttgaccagct tctggcagag gagaaggcag ctgtacttcg   1560

ggcagtggag gaacgtgagc ggccgaggca gagggccggg agcgtgaggc tcgggccctg   1620

tcactgacac gggcactgga ggaggagcag gaggcacgtg aggagctgga gcggcagaac   1680

cgggccctgc gggctgagct ggaggcactg ctgagcagca aggatgacgt cggcaagagc   1740

gtgcatgagc tggaacgagc ctgccgggta gcagaacagg cagccaatga tctgcgagca   1800

caggtgacag aactggagga tgagctgaca gcggccgagg atgccaagct gcgtctggag   1860

gtgactgtgc aggctctcaa gactcagcat gagcgtgacc tgcagggccg tgatgaggct   1920

ggtgaagaga ggcggaggca gctggccaag cagctgagag atgcagaggt ggagcgggat   1980

gaggagcgga agcagcgcac tctggccgtg gctgcccgca agaagctgga gggagagctg   2040

gaggagctga aggctcagat ggcctctgcc ggccagggca aggaggaggc ggtgaagcag   2100

cttcgcaaga tgcaggccca gatgaaggag ctatggcggg aggtggagga gacacgcacc  2160

tcccgggagg agatcttctc ccagaatcgg gaaagtgaaa agcgcctcaa gggcctggag  2220

gctgaggtgc tgcggctgca ggaggaactg gccgcctcgg accgtgctcg gcggcaggcc  2280

cagcaggacc gggatgagat ggcagatgag gtggccaatg gtaaccttag caaggcagcc  2340

attctggagg agaagcgtca gctggagggg cgcctggggg cagttggagg aagagctgga  2400

ggaggagcag agcaactcag agctgctcaa tgaccgctac cgcaagctgc tcctgcaggt  2460

agagtcactg accacagagc tgtcagctga gcgcagtttc tcagccaagg cagagagcgg  2520

gcggcagcag ctggaacggc agatccagga gctacgggga cgcctgggtg aggaggatgc  2580

tggggcccgt gcccgccaca agatgaccat tgctgccctt gagtctaagt tggcccaggc  2640

tgaggagcag ctagagcaag agaccagaga gcgcatcctc tctggaaagc tggtgcgcag  2700

agctgagaag cggcttaaag aggtggtgct ccaggtggag gaggagcgga gggtggctga  2760

ccagctccgg gaccagctgg agaagggaaa ccttcgagtc aagcagctga agcggcagct  2820

ggaggaggcc gaggaggagg catcccgggc tcaggccggc cgccggaggc tgcagcgtga  2880

gctggaagat gtcacagagt cggccgagtc catgaaccgt gaagtgacca cactgaggaa  2940

ccggcttcga cgcggccccc tcaccttcac cacccgcacg gtgcgccagg tcttccgact  3000

agaggagggc gtggcatccg acgaggaggc agaggaagca cagcctgggt ctgggccatc  3060

cccggagcct gaggggtccc caccagccca cccccagtga ccctaccctg tccccagatg  3120

cactaacaga tggggcccag cccccttcct ccctggaccc cacgggcccc tgtcccagga  3180

accccgccct ctgacttctt gccctttgga aatggtgcag cactctggca tttatcaccc  3240

ccacctgggt cccctgcaac ctcccatcaa aggatgaccc ctaaacacag aggagcgggg  3300

caggcaggga ggcaatgact ggagctacct tgcttgttgg gggactgggt acagttggca  3360

agctgtgttt ccatcagctc cctgtcctcc tttcttccct cgttattgat ctatagacat  3420

taggaaggga gtgagacggc tcctccacca tcctcagcca gtgcaaccca ttccctctgc  3480

ttctctctct ctctctctct ctccctccct ctccttccct accctctcac catctttctt  3540

ggcctctctg agggtctctc tgtgcatctt tttaggaatc tcgctctcac tctctacgta  3600

gccactctcc ttcccccatt tctgcgtcca cccctgaact cctgagcgac agaagcccca  3660

ggcctccacc agccttgaac ccttgcaaag gggcaggaca aggggacccc tctcactcct  3720

gctgctgccc atgctctgcc ctcccttctg gttgctctga gggttcggag cttccctctg  3780

ggactaaagg agtgtccttt accctcccag cctccaggct ctggcagaaa taaactccaa  3840

cccgactgga aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa  3900

aaa                                                                3903

<210>2

<211>3903

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>CDS

<222>(101)..(1624)

<223>

<400>2

gaggctacag cagcacatac aggagctaga ggcccacctt gaggctgagg agggtgcgcg    60

gcagaagctg cagctggaga aggtgacgac agaggcaaaa atg aag aaa ttt gaa     115

                                            Met Lys Lys Phe Glu

                                            1               5

gag gac ctg ctg ctc ctg gaa gac cag aat tcc aag ctg agc aag gag     163

Glu Asp Leu Leu Leu Leu Glu Asp Gln Asn Ser Lys Leu Ser Lys Glu

                10                  15                  20

cgg aag ctg ctg gaa gat cgt ctg gcc gag ttc tca tcc cag gca gct     211

Arg Lys Leu Leu Glu Asp Arg Leu Ala Glu Phe Ser Ser Gln Ala Ala

            25                  30                  35

gag gag gag gag aag gtc aag agc ctc aat aag cta cgg ctc aaa tat     259

Glu Glu Glu Glu Lys Val Lys Ser Leu Asn Lys Leu Arg Leu Lys Tyr

        40                  45                  50

gag gcc aca atc gca gac atg gag gac cgc cta cgg aag gag gag aag     307

Glu Ala Thr Ile Ala Asp Met Glu Asp Arg Leu Arg Lys Glu Glu Lys

    55                  60                  65

ggt cgc cag gag ctg gag aag ctg aag cgg agg ctg gat ggg gag agc     355

Gly Arg Gln Glu Leu Glu Lys Leu Lys Arg Arg Leu Asp Gly Glu Ser

70                  75                  80                  85

tca gag ctg cag gag cag atg gtg gag cag caa cag cgg gca gag gag     403

Ser Glu Leu Gln Glu Gln Met Val Glu Gln Gln Gln Arg Ala Glu Glu

                90                  95                  100

ctg cgg gcc cag ctg ggc cgg aag gag gag gag ctg cag gct gcc ctg     451

Leu Arg Ala Gln Leu Gly Arg Lys Glu Glu Glu Leu Gln Ala Ala Leu

            105                 110                 115

gcc agg gca gaa gac gag ggt ggg gcc cgg gcc cag ctg ctg aaa tcc     499

Ala Arg Ala Glu Asp Glu Gly Gly Ala Arg Ala Gln Leu Leu Lys Ser

        120                 125                 130

ctg cgg gag gct caa gca gcc ctg gcc gag gcc cag gag gac ctg gag     547

Leu Arg Glu Ala Gln Ala Ala Leu Ala Glu Ala Gln Glu Asp Leu Glu

    135                 140                 145

tct gag cgt gtg gcc agg acc aag gcg gag aag cag cgc cgg gac ctg     595

Ser Glu Arg Val Ala Arg Thr Lys Ala Glu Lys Gln Arg Arg Asp Leu

150                 155                 160                 165

ggc gag gag ctg gag gcg ctg cgg ggc gag ctg gag gac acg ctg gac     643

Gly Glu Glu Leu Glu Ala Leu Arg Gly Glu Leu Glu Asp Thr Leu Asp

                170                 175                 180

tcc acc aac gca cag cag gag ctc cgg tcc aag agg gaa cag gag gtg     691

Ser Thr Asn Ala Gln Gln Glu Leu Arg Ser Lys Arg Glu Gln Glu Val

            185                 190                 195

acg gag ctg aag aag act ctg gag gag gag act cgc atc cac gag gcg     739

Thr Glu Leu Lys Lys Thr Leu Glu Glu Glu Thr Arg Ile His Glu Ala

        200                 205                 210

gca gtg cag gag ctg agg cag cgc cac ggc cag gcc ctg ggg gag ctg     787

Ala Val Gln Glu Leu Arg Gln Arg His Gly Gln Ala Leu Gly Glu Leu

    215                 220                 225

gcg gag cag ctg gag cag gcc cgg agg ggc aaa ggt gca tgg gag aag     835

Ala Glu Gln Leu Glu Gln Ala Arg Arg Gly Lys Gly Ala Trp Glu Lys

230                 235                 240                 245

acc cgg ctg gcc ctg gag gcc gag gtg tcc gag ctg cgg gca gaa ctg     883

Thr Arg Leu Ala Leu Glu Ala Glu Val Ser Glu Leu Arg Ala Glu Leu

                250                 255                 260

agc agc ctg cag act gca cgt cag gag ggt gag cag cgg agg cgc cgc     931

Ser Ser Leu Gln Thr Ala Arg Gln Glu Gly Glu Gln Arg Arg Arg Arg

            265                 270                 275

ctg gag tta cag ctg cag gag gtg cag ggc cgg gct ggt gat ggg gag     979

Leu Glu Leu Gln Leu Gln Glu Val Gln Gly Arg Ala Gly Asp Gly Glu

        280                 285                 290

agg gca cga gcg gag gct gct gag aag ctg cag cga gcc cag gct gaa    1027

Arg Ala Arg Ala Glu Ala Ala Glu Lys Leu Gln Arg Ala Gln Ala Glu

    295                 300                 305

ctg gag aat gtg tct ggg gcg ctg aac gag gct gag tcc aaa acc atc    1075

Leu Glu Asn Val Ser Gly Ala Leu Asn Glu Ala Glu Ser Lys Thr Ile

310                 315                 320                 325

cgt ctt agc aag gag ctg agc agc aca gaa gcc cag ctg cac gat gcc    1123

Arg Leu Ser Lys Glu Leu Ser Ser Thr Glu Ala Gln Leu His Asp Ala

                330                 335                 340

cag gag ctg ctg cag gag gag acc agg gcg aaa ttg gcc ttg ggg tcc    1171

Gln Glu Leu Leu Gln Glu Glu Thr Arg Ala Lys Leu Ala Leu Gly Ser

            345                 350                 355

cgg gtg cga gcc atg gag gct gag gca gcc ggg ctg cgt gag cag ctg    1219

Arg Val Arg Ala Met Glu Ala Glu Ala Ala Gly Leu Arg Glu Gln Leu

        360                 365                 370

gag gag gag gca gct gcc agg gaa cgg gcg ggc cgt gaa ctg cag act    1267

Glu Glu Glu Ala Ala Ala Arg Glu Arg Ala Gly Arg Glu Leu Gln Thr

    375                 380                 385

gcc cag gcc cag ctt tcc gag tgg cgg cgg cgc cag gag gag gag gca    1315

Ala Gln Ala Gln Leu Ser Glu Trp Arg Arg Arg Gln Glu Glu Glu Ala

390                 395                 400                 405

ggg gca ctg gag gca ggg gag gag gca cgg cgc cgg gca gcc cgg gag    1363

Gly Ala Leu Glu Ala Gly Glu Glu Ala Arg Arg Arg Ala Ala Arg Glu

                410                 415                 420

gcc gag gcc ctg acc cag cgc ctg gca gaa aag aca gag acc gtg gat    1411

Ala Glu Ala Leu Thr Gln Arg Leu Ala Glu Lys Thr Glu Thr Val Asp

            425                 430                 435

cgg ctg gag cgg ggc cgc cgc cgg ctg cag cag gag ctg gac gac gcc    1459

Arg Leu Glu Arg Gly Arg Arg Arg Leu Gln Gln Glu Leu Asp Asp Ala

        440                 445                 450

acc atg gac ctg gag cag cag cgg cag ctt gtg agc acc ctg gag aag    1507

Thr Met Asp Leu Glu Gln Gln Arg Gln Leu Val Ser Thr Leu Glu Lys

    455                 460                 465

aag cag cgc aag ttt gac cag ctt ctg gca gag gag aag gca gct gta    1555

Lys Gln Arg Lys Phe Asp Gln Leu Leu Ala Glu Glu Lys Ala Ala Val

470                 475                 480                 485

ctt cgg gca gtg gag gaa cgt gag cgg ccg agg cag agg gcc ggg agc    1603

Leu Arg Ala Val Glu Glu Arg Glu Arg Pro Arg Gln Arg Ala Gly Ser

                490                 495                 500

gtg agg ctc ggg ccc tgt cac tgacacgggc actggaggag gagcaggagg       1654

Val Arg Leu Gly Pro Cys His

            505

cacgtgagga gctggagcgg cagaaccggg ccctgcgggc tgagctggag gcactgctga  1714

gcagcaagga tgacgtcggc aagagcgtgc atgagctgga acgagcctgc cgggtagcag  1774

aacaggcagc caatgatctg cgagcacagg tgacagaact ggaggatgag ctgacagcgg  1834

ccgaggatgc caagctgcgt ctggaggtga ctgtgcaggc tctcaagact cagcatgagc  1894

gtgacctgca gggccgtgat gaggctggtg aagagaggcg gaggcagctg gccaagcagc  1954

tgagagatgc agaggtggag cgggatgagg agcggaagca gcgcactctg gccgtggctg  2014

cccgcaagaa gctggaggga gagctggagg agctgaaggc tcagatggcc tctgccggcc  2074

agggcaagga ggaggcggtg aagcagcttc gcaagatgca ggcccagatg aaggagctat  2134

ggcgggaggt ggaggagaca cgcacctccc gggaggagat cttctcccag aatcgggaaa  2194

gtgaaaagcg cctcaagggc ctggaggctg aggtgctgcg gctgcaggag gaactggccg  2254

cctcggaccg tgctcggcgg caggcccagc aggaccggga tgagatggca gatgaggtgg  2314

ccaatggtaa ccttagcaag gcagccattc tggaggagaa gcgtcagctg gaggggcgcc  2374

tgggggcagt tggaggaaga gctggaggag gagcagagca actcagagct gctcaatgac  2434

cgctaccgca agctgctcct gcaggtagag tcactgacca cagagctgtc agctgagcgc  2494

agtttctcag ccaaggcaga gagcgggcgg cagcagctgg aacggcagat ccaggagcta  2554

cggggacgcc tgggtgagga ggatgctggg gcccgtgccc gccacaagat gaccattgct  2614

gcccttgagt ctaagttggc ccaggctgag gagcagctag agcaagagac cagagagcgc  2674

atcctctctg gaaagctggt gcgcagagct gagaagcggc ttaaagaggt ggtgctccag  2734

gtggaggagg agcggagggt ggctgaccag ctccgggacc agctggagaa gggaaacctt  2794

cgagtcaagc agctgaagcg gcagctggag gaggccgagg aggaggcatc ccgggctcag  2854

gccggccgcc ggaggctgca gcgtgagctg gaagatgtca cagagtcggc cgagtccatg  2914

aaccgtgaag tgaccacact gaggaaccgg cttcgacgcg gccccctcac cttcaccacc  2974

cgcacggtgc gccaggtctt ccgactagag gagggcgtgg catccgacga ggaggcagag  3034

gaagcacagc ctgggtctgg gccatccccg gagcctgagg ggtccccacc agcccacccc  3094

cagtgaccct accctgtccc cagatgcact aacagatggg gcccagcccc cttcctccct  3154

ggaccccacg ggcccctgtc ccaggaaccc cgccctctga cttcttgccc tttggaaatg  3214

gtgcagcact ctggcattta tcacccccac ctgggtcccc tgcaacctcc catcaaagga  3274

tgacccctaa acacagagga gcggggcagg cagggaggca atgactggag ctaccttgct  3334

tgttggggga ctgggtacag ttggcaagct gtgtttccat cagctccctg tcctcctttc  3394

ttccctcgtt attgatctat agacattagg aagggagtga gacggctcct ccaccatcct  3454

cagccagtgc aacccattcc ctctgcttct ctctctctct ctctctctcc ctccctctcc  3514

ttccctaccc tctcaccatc tttcttggcc tctctgaggg tctctctgtg catcttttta  3574

ggaatctcgc tctcactctc tacgtagcca ctctccttcc cccatttctg cgtccacccc  3634

tgaactcctg agcgacagaa gccccaggcc tccaccagcc ttgaaccctt gcaaaggggc  3694

aggacaaggg gacccctctc actcctgctg ctgcccatgc tctgccctcc cttctggttg  3754

ctctgagggt tcggagcttc cctctgggac taaaggagtg tcctttaccc tcccagcctc  3814

caggctctgg cagaaataaa ctccaacccg actggaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa  3874

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaa                                    3903

<210>3

<211>508

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<400>3

Met Lys Lys Phe Glu Glu Asp Leu Leu Leu Leu Glu Asp Gln Asn Ser

1               5                   10                  15

Lys Leu Ser Lys Glu Arg Lys Leu Leu Glu Asp Arg Leu Ala Glu Phe

            20                  25                  30

Ser Ser Gln Ala Ala Glu Glu Glu Glu Lys Val Lys Ser Leu Asn Lys

        35                  40                  45

Leu Arg Leu Lys Tyr Glu Ala Thr Ile Ala Asp Met Glu Asp Arg Leu

    50                  55                  60

Arg Lys Glu Glu Lys Gly Arg Gln Glu Leu Glu Lys Leu Lys Arg Arg

65                  70                  75                  80

Leu Asp Gly Glu Ser Ser Glu Leu Gln Glu Gln Met Val Glu Gln Gln

                85                  90                  95

Gln Arg AIa Glu Glu Leu Arg Ala Gln Leu Gly Arg Lys Glu Glu Glu

            100                 105                 110

Leu Gln Ala Ala Leu Ala Arg Ala Glu Asp Glu Gly Gly Ala Arg Ala

        115                 120                 125

Gln Leu Leu Lys Ser Leu Arg Glu Ala Gln Ala Ala Leu Ala Glu Ala

    130                 135                 140

Gln Glu Asp Leu Glu Ser Glu Arg Val Ala Arg Thr Lys Ala Glu Lys

145                 150                 155                 160

Gln Arg Arg Asp Leu Gly Glu Glu Leu Glu Ala Leu Arg Gly Glu Leu

                165                 170                 175

Glu Asp Thr Leu Asp Ser Thr Asn Ala Gln Gln Glu Leu Arg Ser Lys

            180                 185                 190

Arg Glu Gln Glu Val Thr Glu Leu Lys Lys Thr Leu Glu Glu Glu Thr

        195                 200                 205

Arg Ile His Glu Ala Ala Val Gln Glu Leu Arg Gln Arg His Gly Gln

    210                 215                 220

Ala Leu Gly Glu Leu Ala Glu Gln Leu Glu Gln Ala Arg Arg Gly Lys

225                 230                 235                 240

Gly Ala Trp Glu Lys Thr Arg Leu Ala Leu Glu Ala Glu Val Ser Glu

                245                 250                 255

Leu Arg Ala Glu Leu Ser Ser Leu Gln Thr Ala Arg Gln Glu Gly Glu

            260                 265                 270

Gln Arg Arg Arg Arg Leu Glu Leu Gln Leu Gln Glu Val Gln Gly Arg

        275                 280                 285

Ala Gly Asp Gly Glu Arg Ala Arg Ala Glu Ala Ala Glu Lys Leu Gln

    290                 295                 300

Arg Ala Gln Ala Glu Leu Glu Asn Val Ser Gly Ala Leu Asn Glu Ala

305                 310                 315                 320

Glu Ser Lys Thr Ile Arg Leu Ser Lys Glu Leu Ser Ser Thr Glu Ala

                325                 330                 335

Gln Leu His Asp Ala Gln Glu Leu Leu Gln Glu Glu Thr Arg Ala Lys

            340                 345                 350

Leu Ala Leu Gly Ser Arg Val Arg Ala Met Glu Ala Glu Ala Ala Gly

        355                 360                 365

Leu Arg Glu Gln Leu Glu Glu Glu Ala Ala Ala Arg Glu Arg Ala Gly

    370                 375                 380

Arg Glu Leu Gln Thr Ala Gln Ala Gln Leu Ser Glu Trp Arg Arg Arg

385                 390                 395                 400

Gln Glu Glu Glu Ala Gly Ala Leu Glu Ala Gly Glu Glu Ala Arg Arg

                405                 410                 415

Arg Ala Ala Arg Glu Ala Glu Ala Leu Thr Gln Arg Leu Ala Glu Lys

            420                 425                 430

Thr Glu Thr Val Asp Arg Leu Glu Arg Gly Arg Arg Arg Leu Gln Gln

        435                 440                 445

Glu Leu Asp Asp Ala Thr Met Asp Leu Glu Gln Gln Arg Gln Leu Val

    450                 455                 460

Ser Thr Leu Glu Lys Lys Gln Arg Lys Phe Asp Gln Leu Leu Ala Glu

465                 470                 475                 480

Glu Lys Ala Ala Val Leu Arg Ala Val Glu Glu Arg Glu Arg Pro Arg

                485                 490                 495

Gln Arg Ala Gly Ser Val Arg Leu Gly Pro Cys His

            500                 505

<210>4

<211>2675

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>4

gtttttaatt tttttttgtt ttttgttttt tgtttttttc gagacggagt cttgctctgt    60

cacccaggct ggagtgcagt ggcgcaatct cagctcactg caacctgtgc ctccctgacg   120

caagcgattc tcatgcctca gcctcccaag tagctgggac tacaggcgcc tgccaccacg   180

cctggctaat tttagaattt tagtagagat gaggttttga catgttggcc aggctggtct   240

cgaactcctg acctcaggtg atccgcctac tttggcctcc ctaagtgctg gcattacagg   300

cctgagccac cacgcctggc ctacatgatg tgtttctgtc ctgcctgacc tacatggtgt   360

gtttctgccc tgcgtattac acacacacac acacacatgt gcgtgcacac acacttctaa   420

ggacgtggcc ccatctggct ttgtctctcc agttgtcctt gccctgcccc cctccccaga   480

ggtgctgccc agtgctggtg tggccacaca tggctacatc attgtgcagg cagagctccc   540

tgcctgccca gcctcagggc tctgcacgct cacacctaga tcctcatctt cctccatgtc   600

tctgcccagc atagccccga gcccctggaa gctggtaccc ctcagtgtgc tcacacgtgg   660

caaggccgag gtggccccag gcaggggcca taccaggcac aaaccatgca cgctggcatg   720

ggtgcgggga tcacacgaat gcctcctgga aggaaagggc tacttgtagg aatgttactg   780

atgaggcaag atgccaagga cttccctgca gggatcaaag atcaggacac gaccccttcc   840

tcacacaccc acctcagacc tgggagagga ctgtgtgtcc cccactgccc catcggatgc   900

tctgggctct gcctcaggga actcgggttt ggggaaatgt ctatttcaga agtactggag   960

tggccagtgt ggcagtggcc actcagggtg ggctgggtcc tgagacccat ccccgacacc  1020

tctcctgctg aaccctcagg ctgctcccca caccagggtg tgactgaggg gtacacaggc  1080

ctggatttct ggtgtgagga aggggctagc acctcccctg ttgtgtagcc agcacaggca  1140

caatttgtgg gtttggtgca ggtaagtggt gcgtgggaaa aggacagtgt tagaggtccc  1200

cactccgtgg tctaggatca tgaaaggtga acacacaagt acacaaatgt gccatgccct  1260

ggcatggggc ttatgtgtgc acaggcaagg cactcggtgt gtgtgtgcgg accccagggt  1320

cccaggtcat gtgaagcgta cgtgtgtgtg cattgtatgt gtgtgtacat tgtgtgtgca  1380

ttgtgtgtgc atgtggccaa acagatgtga cctcccagaa cacagtaccc ctccacctct  1440

acccgagctc agacagccga gctctccctt gtcctgtgtg tgtgtcagtg tggccacgtg  1500

cgtaacccca ggtgggctgt cctgagctgg gggcctgcct gtcccttccc agaacgcccc  1560

tctgcaggac aggaagtctg ccccaagtct ggccacggcc ctcctgctcc catctcgggc  1620

tgcttgggag acatcagagc aggccccagc ccccagtccc ctcttccggc cgcctggaca  1680

ggacccccat tcagcccagg tgtttccgga agtcccacgg ccttggggcc acaggagaag  1740

ggttgaagcg tggctggggc accactcccc ccacctggag tggcattggg cccacagctg  1800

cccatctctg ggcctcaggt ggaccagggg atctctaagg gtctgctgtg ccctttctat  1860

gcgtcctcca catcctatga tgtgcctgct tgttggctgc tgtctgtgtg cgtcctggca  1920

tgttgtctgg aggctggtgt cttttgcatg ttcttggaca aatgtgtgct acctgcccag  1980

gcgcctgcaa ccattgagcc cacatgtgcc ccacgtgtgc cctgcgggtg gtcccgggcc  2040

tggccagggc tcagtgctcc tcttccccct cctccctgtt cccacccctc atgaagcaca  2100

ctgcgtgtcc atcccatgta cccgtgggtc gacgcacgct cttgccacgc cctgagcgtg  2160

tacacatgat gtgttctatg cattcaccct gccccccagc ccgccctgca gaggacaaga  2220

tgggtggccc cggctccctt tcccctaacc gcccctgccc gctgtgcagc cgtgtgcgtt  2280

ggcgtgtgtt tctgtgtcac tggcgtgtca cgtgatgtag ccgtgtttgc tgacatgagc  2340

ccctgccccc ttctctgttt ctccgttggt ttctagagct ctctccctcc ccttctcaga  2400

ggggacagga ctcctggggt ctggctgggg cccagagcca ggccgccctc tcctgttagc  2460

cctcagagtc ccatttctat tggtgaccaa cttgcaaatg gataaaacac aggaaaatcc  2520

tgcccccccc ttcctccctg catgtcctgt ccccagagcc ccccacccca ccctgggcca  2580

ggtcaggccc tgtgggacgg gagaaatagc aaccaatcca acagcgggaa aaaaaaaaaa  2640

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaa                             2675

<210>5

<211>2675

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>CDS

<222>(706)..(1125)

<223>

<400>5

gtttttaatt tttttttgtt ttttgttttt tgtttttttc gagacggagt cttgctctgt    60

cacccaggct ggagtgcagt ggcgcaatct cagctcactg caacctgtgc ctccctgacg   120

caagcgattc tcatgcctca gcctcccaag tagctgggac tacaggcgcc tgccaccacg   180

cctggctaat tttagaattt tagtagagat gaggttttga catgttggcc aggctggtct   240

cgaactcctg acctcaggtg atccgcctac tttggcctcc ctaagtgctg gcattacagg   300

cctgagccac cacgcctggc ctacatgatg tgtttctgtc ctgcctgacc tacatggtgt   360

gtttctgccc tgcgtattac acacacacac acacacatgt gcgtgcacac acacttctaa   420

ggacgtggcc ccatctggct ttgtctctcc agttgtcctt gccctgcccc cctccccaga   480

ggtgctgccc agtgctggtg tggccacaca tggctacatc attgtgcagg cagagctccc   540

tgcctgccca gcctcagggc tctgcacgct cacacctaga tcctcatctt cctccatgtc   600

tctgcccagc atagccccga gcccctggaa gctggtaccc ctcagtgtgc tcacacgtgg   660

caaggccgag gtggccccag gcaggggcca taccaggcac aaacc atg cac gct ggc   717

                                                  Met His Ala Gly

                                                  1

atg ggt gcg ggg atc aca cga atg cct cct gga agg aaa ggg cta ctt     765

Met Gly Ala Gly Ile Thr Arg Met Pro Pro Gly Arg Lys Gly Leu Leu

5                   10                  15                  20

gta gga atg tta ctg atg agg caa gat gcc aag gac ttc cct gca ggg     813

Val Gly Met Leu Leu Met Arg Gln Asp Ala Lys Asp Phe Pro Ala Gly

                25                  30                  35

atc aaa gat cag gac acg acc cct tcc tca cac acc cac ctc aga cct     861

Ile Lys Asp Gln Asp Thr Thr Pro Ser Ser His Thr His Leu Arg Pro

            40                  45                  50

ggg aga gga ctg tgt gtc ccc cac tgc ccc atc gga tgc tct ggg ctc     909

Gly Arg Gly Leu Cys Val Pro His Cys Pro Ile Gly Cys Ser Gly Leu

        55                  60                  65

tgc ctc agg gaa ctc ggg ttt ggg gaa atg tct att tca gaa gta ctg     957

Cys Leu Arg Glu Leu Gly Phe Gly Glu Met Ser Ile Ser Glu Val Leu

    70                  75                  80

gag tgg cca gtg tgg cag tgg cca ctc agg gtg ggc tgg gtc ctg aga    1005

Glu Trp Pro Val Trp Gln Trp Pro Leu Arg Val Gly Trp yal Leu Arg

85                  90                  95                  100

ccc atc ccc gac acc tct cct gct gaa ccc tca ggc tgc tcc cca cac    1053

Pro Ile Pro Asp Thr Ser Pro Ala Glu Pro Ser Gly Cys Ser Pro His

                105                 110                 115

cag ggt gtg act gag ggg tac aca ggc ctg gat ttc tgg tgt gag gaa    1101

Gln Gly Val Thr Glu Gly Tyr Thr Gly Leu Asp Phe Trp Cys Glu Glu

            120                 125                 130

ggg gct agc acc tcc cct gtt gtg tagccagcac aggcacaatt tgtgggtttg   1155

Gly Ala Ser Thr Ser Pro Val Val

        135                 140

gtgcaggtaa gtggtgcgtg ggaaaaggac agtgttagag gtccccactc cgtggtctag  1215

gatcatgaaa ggtgaacaca caagtacaca aatgtgccat gccctggcat ggggcttatg  1275

tgtgcacagg caaggcactc ggtgtgtgtg tgcggacccc agggtcccag gtcatgtgaa  1335

gcgtacgtgt gtgtgcattg tatgtgtgtg tacattgtgt gtgcattgtg tgtgcatgtg  1395

gccaaacaga tgtgacctcc cagaacacag tacccctcca cctctacccg agctcagaca  1455

gccgagctct cccttgtcct gtgtgtgtgt cagtgtggcc acgtgcgtaa ccccaggtgg  1515

gctgtcctga gctgggggcc tgcctgtccc ttcccagaac gcccctctgc aggacaggaa  1575

gtctgcccca agtctggcca cggccctcct gctcccatct cgggctgctt gggagacatc  1635

agagcaggcc ccagccccca gtcccctctt ccggccgcct ggacaggacc cccattcagc  1695

ccaggtgttt ccggaagtcc cacggccttg gggccacagg agaagggttg aagcgtggct  1755

ggggcaccac tccccccacc tggagtggca ttgggcccac agctgcccat ctctgggcct  1815

caggtggacc aggggatctc taagggtctg ctgtgccctt tctatgcgtc ctccacatcc  1875

tatgatgtgc ctgcttgttg gctgctgtct gtgtgcgtcc tggcatgttg tctggaggct  1935

ggtgtctttt gcatgttctt ggacaaatgt gtgctacctg cccaggcgcc tgcaaccatt  1995

gagcccacat gtgccccacg tgtgccctgc gggtggtccc gggcctggcc agggctcagt  2055

gctcctcttc cccctcctcc ctgttcccac ccctcatgaa gcacactgcg tgtccatccc  2115

atgtacccgt gggtcgacgc acgctcttgc cacgccctga gcgtgtacac atgatgtgtt  2175

ctatgcattc accctgcccc ccagcccgcc ctgcagagga caagatgggt ggccccggct  2235

ccctttcccc taaccgcccc tgcccgctgt gcagccgtgt gcgttggcgt gtgtttctgt  2295

gtcactggcg tgtcacgtga tgtagccgtg tttgctgaca tgagcccctg cccccttctc  2355

tgtttctccg ttggtttcta gagctctctc cctccccttc tcagagggga caggactcct  2415

ggggtctggc tggggcccag agccaggccg ccctctcctg ttagccctca gagtcccatt  2475

tctattggtg accaacttgc aaatggataa aacacaggaa aatcctgccc cccccttcct  2535

ccctgcatgt cctgtcccca gagcccccca ccccaccctg ggccaggtca ggccctgtgg  2595

gacgggagaa atagcaacca atccaacagc gggaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa  2655

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa                                              2675

<210>6

<211>140

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<400>6

Met His Ala Gly Met Gly Ala Gly Ile Thr Arg Met Pro Pro Gly Arg

1               5                   10                  15

Lys Gly Leu Leu Val Gly Met Leu Leu Met Arg Gln Asp Ala Lys Asp

            20                  25                  30

Phe Pro Ala Gly Ile Lys Asp Gln Asp Thr Thr Pro Ser Ser His Thr

        35                  40                  45

His Leu Arg Pro Gly Arg Gly Leu Cys Val Pro His Cys Pro Ile Gly

    50                  55                  60

Cys Ser Gly Leu Cys Leu Arg Glu Leu Gly Phe Gly Glu Met Ser Ile

65                  70                  75                  80

Ser Glu Val Leu Glu Trp Pro Val Trp Gln Trp Pro Leu Arg Val Gly

                85                  90                  95

Trp Val Leu Arg Pro Ile Pro Asp Thr Ser Pro Ala Glu Pro Ser Gly

            100                 105                 110

Cys Ser Pro His Gln Gly Val Thr Glu Gly Tyr Thr Gly Leu Asp Phe

        115                 120                 125

Trp Cys Glu Glu Gly Ala Ser Thr Ser Pro Val Val

    130                 135                 140

<210>7

<211>2164

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>7

gcgggcccga gcccacagag tccatggaac ccacggagcc gatggaacct acggagccca    60

tggaacctac ggagcccatg ggaacctacg gagcccatgg gaacctacgg agcccatgga   120

accggcgcgg agcgcgcacc gtgggggcga ggcgctgctg cgggagctgg aggtgctggt   180

gcaggacgtg gtgaggacga gctcctggtg ggagcgccac ggcgtggact gcgccatcct   240

cgcgctcagc ctcttcgcct tgccggcagg cttcctgtgc ctgcgctggg agaatgccct   300

ggtctttgca tccggcatca ccatcttggg tgtgtgccac tacacactca ctgtcaaggg   360

cagccacctg gccactcatg gggccctcac cgagtccaaa cgctggagca agatctggct   420

gcttttcttt gtggaggtgt gcacagcctt cactgcagag cacgccacgc atgggcacgt   480

caagatgcac catgcctaca ccaacgtggt gggcctgggg gactccagca cgtggaggct   540

gccttgcctc aaccgctatg tctacatgtt ccttgctcct ttcctcctcc ccatcgccac   600

tccactggtg gctgtcgagc ggctgaggaa ggtggagctc gggacagccc tgcggacgct   660

ggccctgatt tctctgggcc tttattctca ctactggctg ctcctgaacg tgtcaggctt   720

caagaacccc agctcagccc tgggctgcat gttcctcacc agatccctgt tggcccaccc   780

ctacctccac gtcaacatct tccagcacat cggactgccc atgttctccc gggacaacaa   840

gccccgtcgg attcacatga tgagcctggg ggtgcttaac ctggcccggc tgcccgtgct   900

ggactgggcg ttcggccact cgatcatcag ctgccatgtg gaacaccatc tattccccag   960

gctctctgat aacatgtgcc tgaaggtgaa gcccgtggtg tcccagttcc tacgtgagaa  1020

gcagctaccg tacaacgagg actcatacct ggctcgcttc cagctgtttc tccgtcgcta  1080

tgaggaattc atggtgcagg ccccacccat cactgagctt gtggggctgt aatgaggccg  1140

ggccggtgca gccaccctgc ccctccctgg cctggccctg gccctcctgc tgctgctggt  1200

ccagggggtg tggctcagtg gctggtggtg gacctggaga gtggaggcac cggccaggca  1260

ggggggcagg ggagctcagg cctggggtct gggggccacc tgccttgcgt gcttttctgg  1320

gttttgaggg gtgtctgggg gaagcggtaa tggtggctgt gcattctggt cagtctggac  1380

ctcagcaact tcatctcagg actaaagagc tgggtccttc cccctgctcc atctgagcct  1440

tggtagggtt aaagggaggt gacagggtga agagggatcc tgtgcagggg ccacctggga  1500

gatagcaggg ggcacagaga gagcagggtc agctccctcg gctgggacct ccctggcatt  1560

gggagagccc cacacggcct tggctattgc ttccttcagg ctctgccacc aaggtgccct  1620

ctccccgggg accttagggt gagcttgctt ttggcaggcc ttcctcgatc ctcagccaaa  1680

ggaacctgtg caagacactg gctcagcagt tccccaggcc acagtatcag caagataaaa  1740

gtgagtgtgt tttgtcggga gggaactcca ggggaagtga ggggagaagg ttccccaggg  1800

acagagttag ggaaagagta taaatagcca gccaggggcg gtggctcatg cctgtaatcc  1860

cggcactttg ggaggccaag gcgggtggat cgcgagatca ggagctcgag accaccctgg  1920

ccaacatggt gaaaccccgt ctctactaaa aatacaaaaa attggctgga tgtggtggca  1980

tacacttgta gtcccagcta cttggcaggc tgaggcagaa gaatcacctg aacccgggag  2040

gtggaggttg cagtgagcca agattgcacc attgcattcc agcctgggtg acagagcgag  2100

actccatctc aaaaaaataa aaaaataaaa aataagactc ccgttcaaaa aaaaaaaaaa  2160

aaaa                                                               2164

<210>8

<211>2164

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>CDS

<222>(116)..(1129)

<223>

<400>8

gcgggcccga gcccacagag tccatggaac ccacggagcc gatggaacct acggagccca    60

tggaacctac ggagcccatg ggaacctacg gagcccatgg gaacctacgg agccc atg    118

                                                             Met

                                                             1

gaa ccg gcg cgg agc gcg cac cgt ggg ggc gag gcg ctg ctg cgg gag     166

Glu Pro Ala Arg Ser Ala His Arg Gly Gly Glu Ala Leu Leu Arg Glu

            5                   10                  15

ctg gag gtg ctg gtg cag gac gtg gtg agg acg agc tcc tgg tgg gag     214

Leu Glu Val Leu Val Gln Asp Val Val Arg Thr Ser Ser Trp Trp Glu

        20                  25                  30

cgc cac ggc gtg gac tgc gcc atc ctc gcg ctc agc ctc ttc gcc ttg     262

Arg His Gly Val Asp Cys Ala Ile Leu Ala Leu Ser Leu Phe Ala Leu

    35                  40                  45

ccg gca ggc ttc ctg tgc ctg cgc tgg gag aat gcc ctg gtc ttt gca     310

Pro Ala Gly Phe Leu Cys Leu Arg Trp Glu Asn Ala Leu Val Phe Ala

50                  55                  60                  65

tcc ggc atc acc atc ttg ggt gtg tgc cac tac aca ctc act gtc aag     358

Ser Gly Ile Thr Ile Leu Gly Val Cys His Tyr Thr Leu Thr Val Lys

                70                  75                  80

ggc agc cac ctg gcc act cat ggg gcc ctc acc gag tcc aaa cgc tgg     406

Gly Ser His Leu Ala Thr His Gly Ala Leu Thr Glu Ser Lys Arg Trp

            85                  90                  95

agc aag atc tgg ctg ctt ttc ttt gtg gag gtg tgc aca gcc ttc act     454

Ser Lys Ile Trp Leu Leu Phe Phe Val Glu Val Cys Thr Ala Phe Thr

        100                 105                 110

gca gag cac gcc acg cat ggg cac gtc aag atg cac cat gcc tac acc     502

Ala Glu His Ala Thr His Gly His Val Lys Met His His Ala Tyr Thr

    115                 120                 125

aac gtg gtg ggc ctg ggg gac tcc agc acg tgg agg ctg cct tgc ctc     550

Asn Val Val Gly Leu Gly Asp Ser Ser Thr Trp Arg Leu Pro Cys Leu

130                 135                 140                 145

aac cgc tat gtc tac atg ttc ctt gct cct ttc ctc ctc ccc atc gcc     598

Asn Arg Tyr Val Tyr Met Phe Leu Ala Pro Phe Leu Leu Pro Ile Ala

                150                 155                 160

act cca ctg gtg gct gtc gag cgg ctg agg aag gtg gag ctc ggg aca     646

Thr Pro Leu Val Ala Val Glu Arg Leu Arg Lys Val Glu Leu Gly Thr

            165                 170                 175

gcc ctg cgg acg ctg gcc ctg att tct ctg ggc ctt tat tct cac tac     694

Ala Leu Arg Thr Leu Ala Leu Ile Ser Leu Gly Leu Tyr Ser His Tyr

        180                 185                 190

tgg ctg ctc ctg aac gtg tca ggc ttc aag aac ccc agc tca gcc ctg     742

Trp Leu Leu Leu Asn Val Ser Gly Phe Lys Asn Pro Ser Ser Ala Leu

    195                 200                 205

ggc tgc atg ttc ctc acc aga tcc ctg ttg gcc cac ccc tac ctc cac     790

Gly Cys Met Phe Leu Thr Arg Ser Leu Leu Ala His Pro Tyr Leu His

210                 215                 220                 225

gtc aac atc ttc cag cac atc gga ctg ccc atg ttc tcc cgg gac aac     838

Val Asn Ile Phe Gln His Ile Gly Leu Pro Met Phe Ser Arg Asp Asn

                230                 235                 240

aag ccc cgt cgg att cac atg atg agc ctg ggg gtg ctt aac ctg gcc     886

Lys Pro Arg Arg Ile His Met Met Ser Leu Gly Val Leu Asn Leu Ala

            245                 250                 255

cgg ctg ccc gtg ctg gac tgg gcg ttc ggc cac tcg atc atc agc tgc     934

Arg Leu Pro Val Leu Asp Trp Ala Phe Gly His Ser Ile Ile Ser Cys

        260                 265                 270

cat gtg gaa cac cat cta ttc ccc agg ctc tct gat aac atg tgc ctg     982

His Val Glu His His Leu Phe Pro Arg Leu Ser Asp Asn Met Cys Leu

    275                 280                 285

aag gtg aag ccc gtg gtg tcc cag ttc cta cgt gag aag cag cta ccg    1030

Lys Val Lys Pro Val Val Ser Gln Phe Leu Arg Glu Lys Gln Leu Pro

290                 295                 300                 305

tac aac gag gac tca tac ctg gct cgc ttc cag ctg ttt ctc cgt cgc    1078

Tyr Asn Glu Asp Ser Tyr Leu Ala Arg Phe Gln Leu Phe Leu Arg Arg

                310                 315                 320

tat gag gaa ttc atg gtg cag gcc cca ccc atc act gag ctt gtg ggg    1126

Tyr Glu Glu Phe Met Val Gln Ala Pro Pro Ile Thr Glu Leu Val Gly

            325                 330                 335

ctg taatgaggcc gggccggtgc agccaccctg cccctccctg gcctggccct         1179

Leu

ggccctcctg ctgctgctgg tccagggggt gtggctcagt ggctggtggt ggacctggag  1239

agtggaggca ccggccaggc aggggggcag gggagctcag gcctggggtc tgggggccac  1299

ctgccttgcg tgcttttctg ggttttgagg ggtgtctggg ggaagcggta atggtggctg  1359

tgcattctgg tcagtctgga cctcagcaac ttcatctcag gactaaagag ctgggtcctt  1419

ccccctgctc catctgagcc ttggtagggt taaagggagg tgacagggtg aagagggatc  1479

ctgtgcaggg gccacctggg agatagcagg gggcacagag agagcagggt cagctccctc  1539

ggctgggacc tccctggcat tgggagagcc ccacacggcc ttggctattg cttccttcag  1599

gctctgccac caaggtgccc tctccccggg gaccttaggg tgagcttgct tttggcaggc  1659

cttcctcgat cctcagccaa aggaacctgt gcaagacact ggctcagcag ttccccaggc  1719

cacagtatca gcaagataaa agtgagtgtg ttttgtcggg agggaactcc aggggaagtg  1779

aggggagaag gttccccagg gacagagtta gggaaagagt ataaatagcc agccaggggc  1839

ggtggctcat gcctgtaatc ccggcacttt gggaggccaa ggcgggtgga tcgcgagatc  1899

aggagctcga gaccaccctg gccaacatgg tgaaaccccg tctctactaa aaatacaaaa  1959

aattggctgg atgtggtggc atacacttgt agtcccagct acttggcagg ctgaggcaga  2019

agaatcacct gaacccggga ggtggaggtt gcagtgagcc aagattgcac cattgcattc  2079

cagcctgggt gacagagcga gactccatct caaaaaaata aaaaaataaa aaataagact  2139

cccgttcaaa aaaaaaaaaa aaaaa                                        2164

<210>9

<211>338

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<400>9

Met Glu Pro Ala Arg Ser Ala His Arg Gly Gly Glu Ala Leu Leu Arg

1               5                   10                  15

Glu Leu Glu Val Leu Val Gln Asp Val Val Arg Thr Ser Ser Trp Trp

            20                  25                  30

Glu Arg His Gly Val Asp Cys Ala Ile Leu Ala Leu Ser Leu Phe Ala

        35                  40                  45

Leu Pro Ala Gly Phe Leu Cys Leu Arg Trp Glu Asn Ala Leu Val Phe

    50                  55                  60

Ala Ser Gly Ile Thr Ile Leu Gly Val Cys His Tyr Thr Leu Thr Val

65                  70                  75                  80

Lys Gly Ser His Leu Ala Thr His Gly Ala Leu Thr Glu Ser Lys Arg

                85                  90                  95

Trp Ser Lys Ile Trp Leu Leu Phe Phe Val Glu Val Cys Thr Ala Phe

            100                 105                 110

Thr Ala Glu His Ala Thr His Gly His Val Lys Met His His Ala Tyr

        115                 120                 125

Thr Asn Val Val Gly Leu Gly Asp Ser Ser Thr Trp Arg Leu Pro Cys

    130                 135                 140

Leu Asn Arg Tyr Val Tyr Met Phe Leu Ala Pro Phe Leu Leu Pro Ile

145                 150                 155                 160

Ala Thr Pro Leu Val Ala Val Glu Arg Leu Arg Lys Val Glu Leu Gly

                165                 170                 175

Thr Ala Leu Arg Thr Leu Ala Leu Ile Ser Leu Gly Leu Tyr Ser His

            180                 185                 190

Tyr Trp Leu Leu Leu Asn Val Ser Gly Phe Lys Asn Pro Ser Ser Ala

        195                 200                 205

Leu Gly Cys Met Phe Leu Thr Arg Ser Leu Leu Ala His Pro Tyr Leu

    210                 215                 220

His Val Asn Ile Phe Gln His Ile Gly Leu Pro Met Phe Ser Arg Asp

225                 230                 235                 240

Asn Lys Pro Arg Arg Ile His Met Met Ser Leu Gly Val Leu Asn Leu

                245                 250                 255

Ala Arg Leu Pro Val Leu Asp Trp Ala Phe Gly His Ser Ile Ile Ser

            260                 265                 270

Cys His Val Glu His His Leu Phe Pro Arg Leu Ser Asp Asn Met Cys

        275                 280                 285

Leu Lys Val Lys Pro Val Val Ser Gln Phe Leu Arg Glu Lys Gln Leu

    290                 295                 300

Pro Tyr Asn Glu Asp Ser Tyr Leu Ala Arg Phe Gln Leu Phe Leu Arg

305                 310                 315                 320

Arg Tyr Glu Glu Phe Met Val Gln Ala Pro Pro Ile Thr Glu Leu Val

                325                 330                 335

Gly Leu

<210>10

<211>3577

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>10

gagatggctg gagatggtgc taaggccagg ctgatggggg tggggtgggg cagacacatg    60

gggaggggtt tccaagtttg tttcccatgg tggccacggc agcagctgcc tgatgccatc   120

ccagaggttt ctgcagaggt ggtgctcggg aggtgggaca tcagtcacac acatccagaa   180

gtaagatatc ctgtttgccc caactctcac taaccttgac cgtgctgcct ccctctctgg   240

ggctctggga ggaagaatgt tctgcagagg tttgtacatc tctgagagtc ctgcctaagc   300

ctgccagccc ttactacacc accattttcc tccagcccct acccactggg gaacagaaac   360

agagccagag aggaattgag agatggagag agaatgaggt agagacaggc ttggtgagtg   420

tttagctagg gggagtgagg gagagtgagg tgagacatgg catgacaggg agcacagaga   480

gagggagtag ccagccttag atgtaagaga gggcccctcc caatgccaga tctggcttgc   540

aggctccccc agcttttata gagcggccca aggaagaata tttccaagaa gtagggcggg   600

catggctcat cccctgctcc gcccaaggga ccctcctcct gttgtctctt ggaccaaggt   660

aaggctcctg agccgctctg cctgtaccca cgcccactac acccctgcct ctcgtgcccc   720

agccattttg tgggagggag ggtgtgggaa ggagaaggct gtcagaggca gggtggggag   780

gaactggagc tgcctggaga gatgaggggc gcctttggtg aggggtggct gcgtgtgtcc   840

tcagggctca ccagtggttc tgtaggtggg ccgggggctg caaggccagg cccaggtgga   900

cagcaacagc agcctcatcc tgcgaccatt gaccaaggag gcccacgggc actgggaatg   960

cagtgccagc aatgctgtgg cccgagtggc cacctccacg aacgtctacg tgctgggcac  1020

tagccctcat gttgtcacca atgtgtccgt ggtggctttg cccaagggtg ccaatgtctc  1080

ctgggagcct ggctttgatg gtggttatct gcagagattc agtgtctggt acaccccact  1140

ggccaagcgt cctgaccgaa tgcaccatga ctgggtgtcc ttggcagtgc ctgtgggggc  1200

tgctcacctc ctagtgccag ggctgcagcc ccacacccag taccagttca gcgtgctagc  1260

tcagaacaag ctggggagtg gtcccttcag cgaaatcgtc ttgtctgctc cggaagggct  1320

tcctaccacg ccagctgcac ccgggcttcc cccaacagag ataccgcctc ccctgtcccc  1380

tccgcggggt ctggtggcag tgaggacacc ccggggggta ctcctgcatt gggatccccc  1440

agagctggtc cctaagagac tggatggcta cgtcttggaa ggccggcaag gctcccaggg  1500

ctgggaggtg ctggacccgg ctgtggcagg cacagaaaca gagctgctgg tgccaggcct  1560

catcaaggta tgtgcgaaag gcgatacaga gagaggcctc ctaggggctc tcctgcgtcc  1620

ttctccattc cccaaactct atcttctcat cttgatttga gctcttcacc tctgcgtcct  1680

acctcaccct tccgtcccac gtgcacggtc tttccgcgcc ccgctgggtt gggcggtgct  1740

gggccctgac ctccctcctg gtaccccatc cccatcgcag gatgttctct acgagttccg  1800

cctcgtggcc ttcgcgggca gcttcgtcag cgaccccagc aacacggcca acgtctccac  1860

ttccggtctg gaggtctacc cttcgcgcac gcagctgccg ggcctcctgc ctcagcccgt  1920

gctggccggc gtggtgggcg gagtctgctt tctgggagtg gccgtccttg tgagcatcct  1980

ggccggctgc ctcctgaacc ggcgcagggc tgcccgccgc cgccgcaagc gcctccgcca  2040

agatccacct cttatcttct ctccgaccgg gaagtcagct gcaccctctg ctctgggctc  2100

aggcagtcct gacagcgtgg cgaagctgaa gctccaggga tccccagtcc ccagcctgcg  2160

ccagagtctg ctctgggggg atcctgccgg aactcccagc ccccacccgg atcctccatc  2220

tagccgggga cccttacctc tggagcccat ttgccggggc ccagacgggc gctttgtgat  2280

ggggcccact gtggcggccc cccaggaaag gtcaggccgg gagcaggcag aacctcggac  2340

tccagcccag cgtctggccc ggtcctttga ctgtagcagc agcagcccca gtggggcacc  2400

ccagcccctc tgcattgaag acatcagccc tgtggcaccc cctccagcag ccccacccag  2460

tcccttgcca ggtcctggac ccctgctcca gtacctgagc ctgcccttct tccgagagat  2520

gaatgtggat ggggactggc ccccgcttga ggagcccagc cctgctgcac ccccagatta  2580

catggatacc cggcgctgtc ccacctcatc tttccttcgt tctccagaaa cccctcctgt  2640

atcccccagg gaatcacttc ctggggctgt ggtaggggct ggggccactg cagagccccc  2700

ttacacagcc ctggctgact ggacactgag ggagcggctg ctgccaggcc ttctccctgc  2760

tgcccctcga ggcagcctca ccagccagag cagtgggcga ggcagcgctt cgttcctgcg  2820

gcccccctcc acagccccct ctgcaggagg cagctacctc agccctgctc caggagacac  2880

cagcagctgg gccagtggcc ctgagagatg gccccgaagg gagcatgtgg tgacagtcag  2940

caagaggagg aacacatctg tggacgagaa ctatgagtgg gactcagaat tccctgggga  3000

catggaattg ctggagactt tgcacctggg cttggccagc tcccggctca gacctgaagc  3060

tgagccagag ctaggtgtga agactccaga ggagggctgc ctcctgaaca ctgcccatgt  3120

tactggccct gaggcccgct gtgctgccct tcgggaggaa ttcctggcct tccgccgccg  3180

ccgagatgct actagggctc ggctaccagc ctatcgacag ccagtccccc accccgaaca  3240

ggccactctg ctgtgaacat ccctgatgtg aggctgtgaa aaggcatatg gacctgcaaa  3300

ggaggccccc aaccagacag acctagtttc aaacgagggc actgcccctg cctgcccctt  3360

tggtgcccag gcacagaccc tgatagtggg tttgggtcac cttggtatgg aatgtatgtg  3420

ctgaccccct aggtgagtct ggggattgga acagggatct taggtctgcc tctctctctc  3480

tctctctctc tctctctctc tctgtgtgtg tgtgtgtgtg tgtgaagttt tttacaggtg  3540

aataaacaaa gtttgaaaga aaaaaaaaaa aaaaaaa                           3577

<210>11

<211>3577

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>CDS

<222>(2279)..(3253)

<223>

<400>11

gagatggctg gagatggtgc taaggccagg ctgatggggg tggggtgggg cagacacatg    60

gggaggggtt tccaagtttg tttcccatgg tggccacggc agcagctgcc tgatgccatc   120

ccagaggttt ctgcagaggt ggtgctcggg aggtgggaca tcagtcacac acatccagaa   180

gtaagatatc ctgtttgccc caactctcac taaccttgac cgtgctgcct ccctctctgg   240

ggctctggga ggaagaatgt tctgcagagg tttgtacatc tctgagagtc ctgcctaagc   300

ctgccagccc ttactacacc accattttcc tccagcccct acccactggg gaacagaaac   360

agagccagag aggaattgag agatggagag agaatgaggt agagacaggc ttggtgagtg   420

tttagctagg gggagtgagg gagagtgagg tgagacatgg catgacaggg agcacagaga   480

gagggagtag ccagccttag atgtaagaga gggcccctcc caatgccaga tctggcttgc   540

aggctccccc agcttttata gagcggccca aggaagaata tttccaagaa gtagggcggg   600

catggctcat cccctgctcc gcccaaggga ccctcctcct gttgtctctt ggaccaaggt   660

aaggctcctg agccgctctg cctgtaccca cgcccactac acccctgcct ctcgtgcccc   720

agccattttg tgggagggag ggtgtgggaa ggagaaggct gtcagaggca gggtggggag   780

gaactggagc tgcctggaga gatgaggggc gcctttggtg aggggtggct gcgtgtgtcc   840

tcagggctca ccagtggttc tgtaggtggg ccgggggctg caaggccagg cccaggtgga   900

cagcaacagc agcctcatcc tgcgaccatt gaccaaggag gcccacgggc actgggaatg   960

cagtgccagc aatgctgtgg cccgagtggc cacctccacg aacgtctacg tgctgggcac  1020

tagccctcat gttgtcacca atgtgtccgt ggtggctttg cccaagggtg ccaatgtctc  1080

ctgggagcct ggctttgatg gtggttatct gcagagattc agtgtctggt acaccccact  1140

ggccaagcgt cctgaccgaa tgcaccatga ctgggtgtcc ttggcagtgc ctgtgggggc  1200

tgctcacctc ctagtgccag ggctgcagcc ccacacccag taccagttca gcgtgctagc  1260

tcagaacaag ctggggagtg gtcccttcag cgaaatcgtc ttgtctgctc cggaagggct  1320

tcctaccacg ccagctgcac ccgggcttcc cccaacagag ataccgcctc ccctgtcccc  1380

tccgcggggt ctggtggcag tgaggacacc ccggggggta ctcctgcatt gggatccccc  1440

agagctggtc cctaagagac tggatggcta cgtcttggaa ggccggcaag gctcccaggg  1500

ctgggaggtg ctggacccgg ctgtggcagg cacagaaaca gagctgctgg tgccaggcct  1560

catcaaggta tgtgcgaaag gcgatacaga gagaggcctc ctaggggctc tcctgcgtcc  1620

ttctccattc cccaaactct atcttctcat cttgatttga gctcttcacc tctgcgtcct  1680

acctcaccct tccgtcccac gtgcacggtc tttccgcgcc ccgctgggtt gggcggtgct  1740

gggccctgac ctccctcctg gtaccccatc cccatcgcag gatgttctct acgagttccg  1800

cctcgtggcc ttcgcgggca gcttcgtcag cgaccccagc aacacggcca acgtctccac  1860

ttccggtctg gaggtctacc cttcgcgcac gcagctgccg ggcctcctgc ctcagcccgt  1920

gctggccggc gtggtgggcg gagtctgctt tctgggagtg gccgtccttg tgagcatcct  1980

ggccggctgc ctcctgaacc ggcgcagggc tgcccgccgc cgccgcaagc gcctccgcca  2040

agatccacct cttatcttct ctccgaccgg gaagtcagct gcaccctctg ctctgggctc  2100

aggcagtcct gacagcgtgg cgaagctgaa gctccaggga tccccagtcc ccagcctgcg  2160

ccagagtctg ctctgggggg atcctgccgg aactcccagc ccccacccgg atcctccatc  2220

tagccgggga cccttacctc tggagcccat ttgccggggc ccagacgggc gctttgtg    2278

atg ggg ccc act gtg gcg gcc ccc cag gaa agg tca ggc cgg gag cag    2326

Met Gly Pro Thr Val Ala Ala Pro Gln Glu Arg Ser Gly Arg Glu Gln

1               5                   10                  15

gca gaa cct cgg act cca gcc cag cgt ctg gcc cgg tcc ttt gac tgt    2374

Ala Glu Pro Arg Thr Pro Ala Gln Arg Leu Ala Arg Ser Phe Asp Cys

            20                  25                  30

agc agc agc agc ccc agt ggg gca ccc cag ccc ctc tgc att gaa gac    2422

Ser Ser Ser Ser Pro Ser Gly Ala Pro Gln Pro Leu Cys Ile Glu Asp

        35                  40                  45

atc agc cct gtg gca ccc cct cca gca gcc cca ccc agt ccc ttg cca    2470

Ile Ser Pro Val Ala Pro Pro Pro Ala Ala Pro Pro Ser Pro Leu Pro

    50                  55                  60

ggt cct gga ccc ctg ctc cag tac ctg agc ctg ccc ttc ttc cga gag    2518

Gly Pro Gly Pro Leu Leu Gln Tyr Leu Ser Leu Pro Phe Phe Arg Glu

65                  70                  75                  80

atg aat gtg gat ggg gac tgg ccc ccg ctt gag gag ccc agc cct gct    2566

Met Asn Val Asp Gly Asp Trp Pro Pro Leu Glu Glu Pro Ser Pro Ala

                85                  90                  95

gca ccc cca gat tac atg gat acc cgg cgc tgt ccc acc tca tct ttc    2614

Ala Pro Pro Asp Tyr Met Asp Thr Arg Arg Cys Pro Thr Ser Ser Phe

            100                 105                 110

ctt cgt tct cca gaa acc cct cct gta tcc ccc agg gaa tca ctt cct    2662

Leu Arg Ser Pro Glu Thr Pro Pro Val Ser Pro Arg Glu Ser Leu Pro

        115                 120                 125

ggg gct gtg gta ggg gct ggg gcc act gca gag ccc cct tac aca gcc    2710

Gly Ala Val Val Gly Ala Gly Ala Thr Ala Glu Pro Pro Tyr Thr Ala

    130                 135                 140

ctg gct gac tgg aca ctg agg gag cgg ctg ctg cca ggc ctt ctc cct    2758

Leu Ala Asp Trp Thr Leu Arg Glu Arg Leu Leu Pro Gly Leu Leu Pro

145                 150                 155                 160

gct gcc cct cga ggc agc ctc acc agc cag agc agt ggg cga ggc agc    2806

Ala Ala Pro Arg Gly Ser Leu Thr Ser Gln Ser Ser Gly Arg Gly Ser

                165                 170                 175

gct tcg ttc ctg cgg ccc ccc tcc aca gcc ccc tct gca gga ggc agc    2854

Ala Ser Phe Leu Arg Pro Pro Ser Thr Ala Pro Ser Ala Gly Gly Ser

            180                 185                 190

tac ctc agc cct gct cca gga gac acc agc agc tgg gcc agt ggc cct    2902

Tyr Leu Ser Pro Ala Pro Gly Asp Thr Ser Ser Trp Ala Ser Gly Pro

        195                 200                 205

gag aga tgg ccc cga agg gag cat gtg gtg aca gtc agc aag agg agg    2950

Glu Arg Trp Pro Arg Arg Glu His Val Val Thr Val Ser Lys Arg Arg

    210                 215                 220

aac aca tct gtg gac gag aac tat gag tgg gac tca gaa ttc cct ggg    2998

Asn Thr Ser Val Asp Glu Asn Tyr Glu Trp Asp Ser Glu Phe Pro Gly

225                 230                 235                 240

gac atg gaa ttg ctg gag act ttg cac ctg ggc ttg gcc agc tcc cgg    3046

Asp Met Glu Leu Leu Glu Thr Leu His Leu Gly Leu Ala Ser Ser Arg

                245                 250                 255

ctc aga cct gaa gct gag cca gag cta ggt gtg aag act cca gag gag    3094

Leu Arg Pro Glu Ala Glu Pro Glu Leu Gly Val Lys Thr Pro Glu Glu

            260                 265                 270

ggc tgc ctc ctg aac act gcc cat gtt act ggc cct gag gcc cgc tgt    3142

Gly Cys Leu Leu Asn Thr Ala His Val Thr Gly Pro Glu Ala Arg Cys

        275                 280                 285

gct gcc ctt cgg gag gaa ttc ctg gcc ttc cgc cgc cgc cga gat gct    3190

Ala Ala Leu Arg Glu Glu Phe Leu Ala Phe Arg Arg Arg Arg Asp Ala

    290                 295                 300

act agg gct cgg cta cca gcc tat cga cag cca gtc ccc cac ccc gaa    3238

Thr Arg Ala Arg Leu Pro Ala Tyr Arg Gln Pro Val Pro His Pro Glu

305                 310                 315                 320

cag gcc act ctg ctg tgaacatccc tgatgtgagg ctgtgaaaag gcatatggac    3293

Gln Ala Thr Leu Leu

                325

ctgcaaagga ggcccccaac cagacagacc tagtttcaaa cgagggcact gcccctgcct  3353

gcccctttgg tgcccaggca cagaccctga tagtgggttt gggtcacctt ggtatggaat  3413

gtatgtgctg accccctagg tgagtctggg gattggaaca gggatcttag gtctgcctct  3473

ctctctctct ctctctctct ctctctctct gtgtgtgtgt gtgtgtgtgt gaagtttttt  3533

acaggtgaat aaacaaagtt tgaaagaaaa aaaaaaaaaa aaaa                   3577

<210>12

<211>325

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<400>12

Met Gly Pro Thr Val Ala Ala Pro Gln Glu Arg Ser Gly Arg Glu Gln

1               5                   10                  15

Ala Glu Pro Arg Thr Pro Ala Gln Arg Leu Ala Arg Ser Phe Asp Cys

            20                  25                  30

Ser Ser Ser Ser Pro Ser Gly Ala Pro Gln Pro Leu Cys Ile Glu Asp

        35                  40                  45

Ile Ser Pro Val Ala Pro Pro Pro Ala Ala Pro Pro Ser Pro Leu Pro

    50                  55                  60

Gly Pro Gly Pro Leu Leu Gln Tyr Leu Ser Leu Pro Phe Phe Arg Glu

65                  70                  75                  80

Met Asn Val Asp Gly Asp Trp Pro Pro Leu Glu Glu Pro Ser Pro Ala

                85                  90                  95

Ala Pro Pro Asp Tyr Met Asp Thr Arg Arg Cys Pro Thr Ser Ser Phe

            100                 105                 110

Leu Arg Ser Pro Glu Thr Pro Pro Val Ser Pro Arg Glu Ser Leu Pro

        115                 120                 125

Gly Ala Val Val Gly Ala Gly Ala Thr Ala Glu Pro Pro Tyr Thr Ala

    130                 135                 140

Leu Ala Asp Trp Thr Leu Arg Glu Arg Leu Leu Pro Gly Leu Leu Pro

145                 150                 155                 160

Ala Ala Pro Arg Gly Ser Leu Thr Ser Gln Ser Ser Gly Arg Gly Ser

                165                 170                 175

Ala Ser Phe Leu Arg Pro Pro Ser Thr Ala Pro Ser Ala Gly Gly Ser

            180                 185                 190

Tyr Leu Ser Pro Ala Pro Gly Asp Thr Ser Ser Trp Ala Ser Gly Pro

        195                 200                 205

Glu Arg Trp Pro Arg Arg Glu His Val Val Thr Val Ser Lys Arg Arg

    210                 215                 220

Asn Thr Ser Val Asp Glu Asn Tyr Glu Trp Asp Ser Glu Phe Pro Gly

225                 230                 235                 240

Asp Met Glu Leu Leu Glu Thr Leu His Leu Gly Leu Ala Ser Ser Arg

                245                 250                 255

Leu Arg Pro Glu Ala Glu Pro Glu Leu Gly Val Lys Thr Pro Glu Glu

            260                 265                 270

Gly Cys Leu Leu Asn Thr Ala His Val Thr Gly Pro Glu Ala Arg Cys

        275                 280                 285

Ala Ala Leu Arg Glu Glu Phe Leu Ala Phe Arg Arg Arg Arg Asp Ala

    290                 295                 300

Thr Arg Ala Arg Leu Pro Ala Tyr Arg Gln Pro Val Pro His Pro Glu

305                 310                 315                 320

Gln Ala Thr Leu Leu

                325

<210>13

<211>1388

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<400>13

gagcctgtgg ctccccctgc gggctgctca gcggcgtgca cagtcctgcc ggctggcttg    60

gtggggtgcc gaggctcagg cagcatgacg acggagacct ttgtgaagga tatcaagcct   120

ggctcaagaa tctgaacctt atcttcattg tgctggagac aggccgagtg accaagacaa   180

aggacgggca tgaggttcgg acctgcaaag tggcggacaa aacaggcagc atcaatatct   240

ctgtctggga cgatgttggc aatctgatcc agcctgggga cattatccgg ctcaccaaag   300

ggtacgcttc agttttcaaa ggttgtctga cactatatac tggccgtggg ggtgatctgc   360

agaagattgg agaattctgt atggtttatt ctgaggttcc taacttcagt gagccaaacc   420

cagagtacag cacccagcag gcacccaaca aggcggtgca gaacgacagc aacccttcag   480

cttcccagcc taccactgga ccctctgctg cctctccagc ctctgagaac cagaatggga   540

atggactgag tgccccacca ggtcccggtg gtggcccaca tcccccctca tactccctcc   600

cacccaccca gcacccgaat cactcgaagc cagcccaacc acacacctgc aggcccgcct   660

ggcccttcca gcaaccctgt tagtaacggc aaagaaaccc ggaggagcag caagagatag   720

catgacattc tttcttcctg ccaccaacca catcccaagt gtcccctgga gagcaagata   780

gccttccact gattggctgg tgtagcagta ttttagccac tgaacttcag tggagggtgg   840

tgagcagtgt ccttatccac cctaatctca tactccctca ttgtccagct gaactacctg   900

tcccctggga gtcaggaccc tctgcctgct ctctttcctc tttagaaatg gcagttactg   960

gctgggcgca gtggctcacg cttgtaatcc cagcactttg ggaagccgag gtgggcggat  1020

cacctgaggt cgggagttca agaccagcct gaccaacatg gagaaacccc gtgtctacta  1080

aaaatacaga attagccagg catggtggcg tatgcctgta atcccagcta cttaggaggc  1140

tgaggcagga gaatctcttg aaaccgggag gcggaggttg aggtgagccg aaattgcacc  1200

attgcactcc agcctgggca ataagagcga aactccatct caaaaaaaaa gaaagaaaga  1260

aagaaagaaa gaaagaaatg gcagttacca tctgtttctt ctgtgtgaga catgggagtc  1320

taactgaagt ctctccttcc taataaatgt taccactctt aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa  1380

aaaaaaaa                                                           1388

<210>14

<211>1388

<212>DNA

<213>智人(Homo sapiens)

<220>

<221>CDS

<222>(381)..(680)

<223>

<400>14

gagcctgtgg ctccccctgc gggctgctca gcggcgtgca cagtcctgcc ggctggcttg    60

gtggggtgcc gaggctcagg cagcatgacg acggagacct ttgtgaagga tatcaagcct   120

ggctcaagaa tctgaacctt atcttcattg tgctggagac aggccgagtg accaagacaa   180

aggacgggca tgaggttcgg acctgcaaag tggcggacaa aacaggcagc atcaatatct   240

ctgtctggga cgatgttggc aatctgatcc agcctgggga cattatccgg ctcaccaaag   300

ggtacgcttc agttttcaaa ggttgtctga cactatatac tggccgtggg ggtgatctgc   360

agaagattgg agaattctgt atg gtt tat tct gag gtt cct aac ttc agt gag   413

                      Met Val Tyr Ser Glu Val Pro Asn Phe Ser Glu

                      1               5                   10

cca aac cca gag tac agc acc cag cag gca ccc aac aag gcg gtg cag     461

Pro Asn Pro Glu Tyr Ser Thr Gln Gln Ala Pro Asn Lys Ala Val Gln

            15                  20                  25

aac gac agc aac cct tca gct tcc cag cct acc act gga ccc tct gct     509

Asn Asp Ser Asn Pro Ser Ala Ser Gln Pro Thr Thr Gly Pro Ser Ala

        30                  35                  40

gcc tct cca gcc tct gag aac cag aat ggg aat gga ctg agt gcc cca     557

Ala Ser Pro Ala Ser Glu Asn Gln Asn Gly Asn Gly Leu Ser Ala Pro

    45                  50                  55

cca ggt ccc ggt ggt ggc cca cat ccc ccc tca tac tcc ctc cca ccc     605

Pro Gly Pro Gly Gly Gly Pro His Pro Pro Ser Tyr Ser Leu Pro Pro

60                  65                  70                  75

acc cag cac ccg aat cac tcg aag cca gcc caa cca cac acc tgc agg     653

Thr Gln His Pro Asn His Ser Lys Pro Ala Gln Pro His Thr Cys Arg

                80                  85                  90

ccc gcc tgg ccc ttc cag caa ccc tgt tagtaacggc aaagaaaccc           700

Pro Ala Trp Pro Phe Gln Gln Pro Cys

            95                  100

ggaggagcag caagagatag catgacattc tttcttcctg ccaccaacca catcccaagt   760

gtcccctgga gagcaagata gccttccact gattggctgg tgtagcagta ttttagccac   820

tgaacttcag tggagggtgg tgagcagtgt ccttatccac cctaatctca tactccctca   880

ttgtccagct gaactacctg tcccctggga gtcaggaccc tctgcctgct ctctttcctc   940

tttagaaatg gcagttactg gctgggcgca gtggctcacg cttgtaatcc cagcactttg  1000

ggaagccgag gtgggcggat cacctgaggt cgggagttca agaccagcct gaccaacatg  1060

gagaaacccc gtgtctacta aaaatacaga attagccagg catggtggcg tatgcctgta  1120

atcccagcta cttaggaggc tgaggcagga gaatctcttg aaaccgggag gcggaggttg  1180

aggtgagccg aaattgcacc attgcactcc agcctgggca ataagagcga aactccatct  1240

caaaaaaaaa gaaagaaaga aagaaagaaa gaaagaaatg gcagttacca tctgtttctt  1300

ctgtgtgaga catgggagtc taactgaagt ctctccttcc taataaatgt taccactctt  1360

aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaa                                     1388

<210>15

<211>100

<212>PRT

<213>智人(Homo sapiens)

<400>15

Met Val Tyr Ser Glu Val Pro Asn Phe Ser Glu Pro Asn Pro Glu Tyr

1               5                   10                  15

Ser Thr Gln Gln Ala Pro Asn Lys Ala Val Gln Asn Asp Ser Asn Pro

            20                  25                  30

Ser Ala Ser Gln Pro Thr Thr Gly Pro Ser Ala Ala Ser Pro Ala Ser

        35                  40                  45

Glu Asn Gln Asn Gly Asn Gly Leu Ser Ala Pro Pro Gly Pro Gly Gly

    50                  55                  60

Gly Pro His Pro Pro Ser Tyr Ser Leu Pro Pro Thr Gln His Pro Asn

65                  70                  75                  80

His Ser Lys Pro Ala Gln Pro His Thr Cys Arg Pro Ala Trp Pro Phe

                85                  90                  95

Gln Gln Pro Cys

            100

<210>16

<211>20

<212>DNA

<213>引物

<400>16

aggtgacgac agaggcaaaa                                                20

<210>17

<211>19

<212>DNA

<213>引物

<400>17

caggaaatgg gagggtcgg                                                 19

<210>18

<211>18

<212>DNA

<213>引物

<400>18

acctgtgcct ccctgacg                                                  18

<210>19

<211>19

<212>DNA

<213>引物

<400>19

tcgttggtta ggttgtcgc                                                 19

<210>20

<211>18

<212>DNA

<213>引物

<400>20

acggagccga tggaacct                                                18

<210>21

<211>19

<212>DNA

<213>引物

<400>21

atgaaccgtc cgactccgt                                               19

<210>22

<211>21

<212>DNA

<213>引物

<400>22

atatcctgtt tgccccaact c                                            21

<210>23

<211>20

<212>DNA

<213>引物

<400>23

tccactcaga cccctaacct                                              20

<210>24

<211>20

<212>DNA

<213>引物

<400>24

tgacgacgga gacctttgtg                                              20

<210>25

<211>22

<212>DNA

<213>引物

<400>25

cgttattctc gctttgaggt ag                                           22

Claims (10)

1.一种分离的具有抑癌功能的人蛋白，其特征在于，它具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：3、6、9、12、15。

2.如权利要求1所述的多肽，其特征在于，该多肽具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：12、15。

3.一种分离的多核苷酸，其特征在于，它选自下组：

(a)编码如权利要求1所述多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。

4.如权利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：3、6、9、12、15。

5.如权利要求3所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸的序列选自下组：

SEQ ID NO：2、5、8、11、14的编码区序列或全长序列。

6.一种载体，其特征在于，它含有权利要求3所述的多核苷酸。

7.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它是选自下组的一种宿主细胞：

(a)用权利要求6所述的载体转化或转导的宿主细胞；

(b)用权利要求3所述的多核苷酸转化或转导的宿主细胞。

8.一种具有抑癌功能的人蛋白活性的多肽的制备方法，其特征在于，该方法包含：

(a)在适合表达具有抑癌功能的人蛋白的条件下，培养权利要求7所述的宿主细胞；

(b)从培养物中分离出具有抑癌功能的人蛋白活性的多肽。

9.一种能与权利要求1所述的具有抑癌功能的人蛋白特异性结合的抗体。

10.一种药物组合物，其特征在于，它含有安全有效量的权利要求1所述的多肽以及药学上可接受的载体。