CN1216292C - 在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法 - Google Patents
在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1216292C CN1216292C CN 02160334 CN02160334A CN1216292C CN 1216292 C CN1216292 C CN 1216292C CN 02160334 CN02160334 CN 02160334 CN 02160334 A CN02160334 A CN 02160334A CN 1216292 C CN1216292 C CN 1216292C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- inorganic silicon
- biomacromolecules
- silicon material
- patterning
- immobilizing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 239000002210 silicon-based material Substances 0.000 title claims abstract description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 238000000059 patterning Methods 0.000 title claims description 15
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 title claims description 11
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 claims abstract description 19
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 claims abstract description 19
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 claims abstract description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 10
- -1 polydimethylsiloxane Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 24
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 24
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 22
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 20
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 15
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims description 8
- 238000005576 amination reaction Methods 0.000 claims description 8
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims description 8
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims description 8
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims description 8
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims description 8
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 6
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- 238000000813 microcontact printing Methods 0.000 claims description 5
- 238000000206 photolithography Methods 0.000 claims description 5
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000010703 silicon Substances 0.000 claims description 5
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 4
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 3
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 3
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 claims description 3
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 claims description 2
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 claims description 2
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 claims description 2
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 claims description 2
- 239000010453 quartz Substances 0.000 claims description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract description 5
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 2
- 238000004506 ultrasonic cleaning Methods 0.000 abstract description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 abstract description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 5
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 5
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 3
- WYTZZXDRDKSJID-UHFFFAOYSA-N (3-aminopropyl)triethoxysilane Chemical compound CCO[Si](OCC)(OCC)CCCN WYTZZXDRDKSJID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 238000001723 curing Methods 0.000 description 2
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 230000022244 formylation Effects 0.000 description 1
- 238000006170 formylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229920002120 photoresistant polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明公开了一种在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法。它包括以下步骤：1)无机硅材料表面胺基化后进行醛基化处理；2)在醛基化的无机硅材料表面用聚二甲基硅氧烷印章微接触印刷生物大分子形成微图案；3)在已图案化固定了一种生物大分子的无机硅材料表面滴加另一种生物大分子的溶液，使后者固定在前者未覆盖的区域；4)冲洗及超声波清洗，即得两种生物大分子在同一表面的共图案化固定。本发明方法操作工艺简单，可控性和重复性好，反应条件温和。所得共图案具有较高对比度和牢固度，是一种简单廉价的共图案化固定两种生物大分子的有效方法。本发明方法适用于两种生物大分子的共图案化牢固性固定。在细胞选择性粘附和定向诱导，基于细胞的生物器件制作及组织工程等领域具有良好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法，具体说是在醛基化无机硅材料表面先后固定两种对细胞粘附具有相反作用(利于和不利于粘附)的生物大分子以制备细胞选择性粘附或定向诱导的模板的方法。
背景技术
细胞的选择性粘附和定向诱导在生物传感器、组织工程以及细胞生物学基础研究等领域具有重要应用价值，图案化固定利于和不利于细胞粘附的生物大分子可以有效实现细胞定位和诱导生长。有多种技术可以实现生物大分子的图案化固定，包括光刻、微接触印刷以及机械微点样技术等。微接触印刷技术能够在金、玻璃、硅以及聚合物等表面以物理吸附的方式实现生物大分子的图案化固定，但存在易脱附和寿命短的缺点，在细胞培养中易被细胞分泌蛋白取代，使其定位效果受到影响。如何实现生物大分子的牢固性固定和细胞的精确定位，成为当前急需要解决的问题之一。
通过共价键合的方式共图案化固定两种对细胞粘附具有相反影响的生物大分子，可以实现细胞更长期、更精确的定位和诱导。连续反应性微印刷技术可以把多种生物大分子共图案化键合于同一表面，但存在要么图案对比度低，要么容易污染，且难以形成互补图案的缺点(细胞精确定位所需要的共图案)。
发明内容
本发明的目的是提供一种操作工艺简单，能够实现上述要求的在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法。
本发明的方法包括以下步骤：
1)将无机硅材料表面胺基化后进行醛基化处理产生活泼自由醛基；
2)在醛基化无机硅材料表面用具有特征表面拓扑结构的聚二甲基硅氧烷(PDMS)印章反应性微接触印刷生物大分子形成微图案，反应温度为4～50℃，所用压力为50～300g/cm2，时间0.1～5小时；
3)在已图案化固定了一种生物大分子的无机硅材料表面滴加另一种生物大分子的0.1～20mg/ml的溶液进一步反应0.1～5小时，使后者固定在前者未覆盖的区域，反应温度为4-50℃；
4)反应后的无机硅材料表面用后一种生物大分子相应pH值的缓冲液或水溶液冲洗并超声波清洗1～20分钟，即得两种生物大分子在同一表面的共图案化固定。
本发明中，所用的无机硅材料是指载玻片、石英、硅，或是表面含有或能产生硅羟基(Si-OH)的其它材料。
本发明中，所述的生物大分子是指蛋白类生物大分子及其衍生物，如白蛋白、纤连蛋白、多聚赖氨酸、明胶、胶原以及多糖类生物大分子如壳聚糖等。步骤3)所说的生物大分子溶液是指其相应pH值的缓冲液溶液或水溶液，如白蛋白的磷酸盐缓冲液(PBS)溶液、明胶的PBS溶液，胶原或壳聚糖的0.3％的乙酸溶液等。
本发明中所用的PDMS印章是先通过常规的“光刻”技术构建一个含有微米级微井(或突起柱)的底模，再在此底模表面浇注PDMS预聚物，加热交联固化后揭起制得的，其表面含有与底模表面相反的微米级突起柱(或微井)，一般光刻条件均可实现。
本发明中所说的胺基化是指将无机硅材料在H2SO4/H2O2混合液中浸泡5～60分钟，所用的混合液中浓硫酸和双氧水的体积比为1∶9～9∶1；然后用去离子水冲洗，再浸入按体积比浓度为0.1～10％的胺基烷氧基硅烷的95％乙醇溶液中，调节pH值为1～6，在0～50℃温度下反应0.5～24小时，超声波下95％乙醇清洗1～10分钟，超声波下去离子水清洗1～10分钟，80～120℃下烘0.1～2小时。醛基化是指把胺基化后的无机硅材料置于0.1～10％的戊二醛溶液中，在0～50℃温度下反应0.1～1小时，水洗若干次，即得醛基化无机硅材料表面。
本发明可采用激光共聚焦显微镜(CLSM)验证固定的生物大分子共图案的存在。为便于观察，所用两种生物大分子分别用不同的荧光染料标记，用相应波长的激发光激发即可以得到各自独立的、互补的图案。两图案复合后即得共图案照片。
本发明中，共图案的质量可以通过两种生物大分子固定的先后顺序、反应时间、温度，以及超声波清洗时间来控制。
本发明工艺简单，可控性和重复性好，反应条件温和。所得共图案均具有较高对比度和牢固度，是一种简单不贵的共图案化固定两种生物大分子的有效方法。本发明方法适用于两种生物大分子的共图案化牢固性固定。在细胞选择性粘附和定向诱导，基于细胞的生物器件制作及组织工程等领域具有良好的应用前景。
附图说明
图1是无机硅材料表面胺基化、醛基化流程图。
图2是在微接触印刷生物大分子时所用PDMS印章的原子力显微镜照片。其中(a)为表面含突起柱的正相印章，(b)为表面含有微井的反相印章。
图3是在醛基化载玻片表面先用正相PDMS印章微印壳聚糖，再滴加白蛋白溶液反应而制得的壳聚糖/白蛋白CLSM图像。其中浅色的连续相为白蛋白图案，深色的分散相为壳聚糖图案。
图4是在共图案化固定的壳聚糖/白蛋白CLSM图像中白蛋白的荧光强度分析。其中(a)为在醛基化载玻片表面的，(b)为在空白对照载玻片表面的(无活泼醛基)。
图5是在醛基载玻片表面先用反相PDMS印章微印白蛋白，再滴加壳聚糖溶液反应而制得的白蛋白/壳聚糖CLSM照片。其中浅色的连续相为白蛋白图案，深色的分散相为壳聚糖图案。
图6是在醛基化载玻片表面先用正相PDMS印章微印明胶，再滴加白蛋白溶液反应而制得的明胶/白蛋白CLSM图像。其中浅色的连续相为白蛋白图案，深色的分散相为明胶图案。
具体实施方式
以下以实例进一步说明本发明，但这些实例并不用来限制本发明。
实例1
制备表面含有微井的PDMS印章：先用常规“光刻”技术制备一原始底模，即在一块干净的3×3cm2的载玻片表面以2000转/分钟的速度旋涂BP218紫外正型光刻胶，随后置于90℃的烘箱中烘30分钟，再在1000瓦的紫外灯、光掩模下旋转曝光150秒，然后于2％的NaOH溶液显影45秒，注意显影的均匀性。因所用光掩模含有微阵列的通孔，制得的底模表面即含有相应的微阵列的微井。在此原始底模表面浇注PDMS预聚物，该预聚物已添加质量比10∶1的交联剂。60℃烘箱中交联固化12小时后即制得正相PDMS印章，其表面含有的对应尺寸的阵列突起柱可用原子力显微镜观察到(见图2a)。用刀片把PDMS印章切成1×1cm2的小块备用。
载玻片表面胺基化和醛基化：将载玻片在H2SO4/H2O2混合液(浓硫酸和双氧水的体积比为7∶3)中浸泡一小时，然后去离子水冲洗，浸入体积比浓度为1.5％胺丙基三乙氧基硅烷的95％乙醇溶液中，冰醋酸调节pH值至4，室温下处理两小时，超声波下95％乙醇清洗，超声波下去离子水清洗，115℃下烘1小时以使其完成胺基化反应。接触角测量发现，干净的载波片静态接触角为3.8°左右，而硅烷化后的载波片为59°，这正是碳三短链的典型接触角值，说明胺丙基三乙氧基硅烷已被接枝到载玻片表面。再在37℃下把氨基化的载波片置于1％的戊二醛水溶液中30分钟，水洗两次，即得到醛基化载波片。
将正相PDMS印章用0.3％乙酸溶液超声波清洗10分钟，氮气吹干，涂上一层罗丹明标记的壳聚糖的2mg/ml的0.3％的乙酸溶液，静置10分钟后氮气吹干，室温、200g/cm2压力下在醛基化的载玻片表面压印10分钟。揭起，0.3％的乙酸溶液冲洗，CLSM观察，即见清晰的分散的壳聚糖图案(图3深色部分)。在有分散的壳聚糖图案的载玻片表面滴加一滴异硫氰酸荧光素(FITC)标记的1mg/ml白蛋白的PBS溶液使之完全覆盖原图案，静置1小时后用大量PBS冲洗3次，再在PBS中超声波振动10分钟。CLSM下观察，即见壳聚糖和白蛋白的共图案(图3)。两者之间界限分明，证明在壳聚糖(深色分散图案)预先占领的部分，白蛋白(浅色连续图案)没有附着。
实例2
其它条件同实例1，但制备PDMS印章时，所用光掩模含有微阵列的盲孔，因而最终得到了表面含有微井PDMS反相印章(图2b)。先用此印章微接触印刷白蛋白，再滴加壳聚糖溶液反应而得到白蛋白/壳聚糖共图案，CLSM观察发现分散的壳聚糖图案(深色)强烈而模糊，连续的白蛋白图案(浅色)也不清晰(图5)，说明这种共图案化顺序是不恰当的。
实例3
其它条件同实例1，但醛基化载玻片换成仅用H2SO4∶H2O2(7∶3V/V)处理的空白载玻片(无胺基化和醛基化)。在超声处理以前，显微镜下也可以见到较清晰的壳聚糖分散图案及一层白蛋白，这是生物大分子在载波片表面吸附的结果。超声10分钟以后，图案变得相当暗淡，用CLSM观察发现，空白载玻片表面白蛋白图案的荧光强度(图4b)只是实例1中醛基化载波片表面白蛋白图案荧光强度(图4a)的三分之一至四分之一，证明生物大分子在醛基化后的载玻片表面是通过牢固的化学键接枝上去的。
实例4
其它条件同例1，但把壳聚糖换成明胶，相应溶剂为PBS缓冲液。得到类似的共图案化结果，其中浅色的连续相为白蛋白图案，深色的分散相为明胶图案。(图6)。
Claims (7)
1.在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法，其特征是包括以下步骤：
1)将无机硅材料表面胺基化后进行醛基化处理产生活泼自由醛基；
2)在醛基化无机硅材料表面用具有特征表面拓扑结构的聚二甲基硅氧烷印章反应性微接触印刷生物大分子形成微图案，反应温度为4～50℃，所用压力为50～300g/cm2，时间0.1～5小时；
3)在已图案化固定了一种生物大分子的无机硅材料表面滴加另一种0.1～20mg/ml的生物大分子溶液进一步反应0.1～5小时，使后者固定在前者未覆盖的区域，反应温度为4-50℃；
4)反应后的无机硅材料表面用后一种生物大分子相应pH值的磷酸盐缓冲液或水溶液冲洗并超声波清洗1～20分钟，即得两种生物大分子在同一表面的共图案化固定。
2.按权利要求1所述的在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法，其特征是所说的无机硅材料是玻璃、石英、硅。
3.按权利要求1所述的在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法，其特征是所说的生物大分子是指白蛋白、纤连蛋白、多聚赖氨酸、明胶、胶原或壳聚糖。
4.按权利要求1所述的在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法，其特征是步骤3)所说的生物大分子溶液是指其磷酸盐缓冲液或水溶液。
5.按权利要求1所述的在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法，其特征是所说的胺基化是指将无机硅材料在H2SO4/H2O2混合液中浸泡5～60分钟，所用的混合液中浓硫酸和双氧水的体积比为1∶9～9∶1；然后用去离子水冲洗，再浸入按体积比浓度为0.1～10％的胺基烷氧基硅烷的95％乙醇溶液中，调节pH值为1～6，在0～50℃温度下反应0.5～24小时，超声波下95％乙醇清洗1～10分钟，超声波下去离子水清洗1～10分钟，80～120℃下烘0.1～2小时。
6.按权利要求1所述的在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法，其特征是所说的醛基化是指把胺基化后的无机硅材料置于0.1～10％的戊二醛溶液中，在0～50℃温度下反应0.1～1小时，水洗若干次，即得醛基化无机硅材料表面。
7.按权利要求1所述的在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法，其特征是所说的聚二甲基硅氧烷印章是先通过光刻技术构建一个含有微米级微井或突起柱的底模，再在此底模表面浇注聚二甲基硅氧烷预聚物，加热交联固化后揭起，制得其表面含有与底模表面相反的微米级突起柱或微井。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 02160334 CN1216292C (zh) | 2002-12-26 | 2002-12-26 | 在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 02160334 CN1216292C (zh) | 2002-12-26 | 2002-12-26 | 在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1425920A CN1425920A (zh) | 2003-06-25 |
| CN1216292C true CN1216292C (zh) | 2005-08-24 |
Family
ID=4753428
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 02160334 Expired - Fee Related CN1216292C (zh) | 2002-12-26 | 2002-12-26 | 在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1216292C (zh) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1301198C (zh) * | 2004-09-08 | 2007-02-21 | 吉林大学 | 以胶体晶体为墨水进行微接触印刷的方法 |
| CN101424682B (zh) * | 2007-10-30 | 2013-01-02 | 江苏三联生物工程有限公司 | 一种生物芯片片基处理方法 |
| CN101461965B (zh) * | 2009-01-14 | 2012-11-21 | 西南交通大学 | 一种材料表面制备壳聚糖/蛋白质复合微图形的方法 |
| CN101955320A (zh) * | 2010-08-30 | 2011-01-26 | 南京卡博生物科技有限公司 | 一种液基细胞学诊断用玻片的修饰方法 |
| CN102213718A (zh) * | 2011-03-24 | 2011-10-12 | 中国人民解放军第四军医大学 | 热缩组合式微通道芯片、制备及应用方法 |
| CN102912343A (zh) * | 2012-09-06 | 2013-02-06 | 浙江大学 | 一种在金片表面制备生物分子图案的方法 |
| CN104027852B (zh) * | 2014-06-26 | 2015-09-23 | 淮阴工学院 | 生物材料的表面改性方法 |
| CN107601913A (zh) * | 2017-09-29 | 2018-01-19 | 重庆科技学院 | 一种材料表面微图案的制备方法 |
| CN111487179B (zh) * | 2019-01-29 | 2024-09-20 | 华中师范大学 | 一种便携式血细胞计数试剂盒 |
-
2002
- 2002-12-26 CN CN 02160334 patent/CN1216292C/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1425920A (zh) | 2003-06-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US9436088B2 (en) | Un-supported polymeric film with embedded microbeads | |
| Mujahid et al. | Bioimprinting strategies: From soft lithography to biomimetic sensors and beyond | |
| Koev et al. | Chitosan: an integrative biomaterial for lab-on-a-chip devices | |
| Zhou et al. | Surface modification for PDMS‐based microfluidic devices | |
| JP3818265B2 (ja) | 微小物体の光固定化方法、微小物体固定化担体及び微小物体の観察方法 | |
| EP1576040B1 (en) | Patterned polymeric structures, particularly microstructures, and methods for making same | |
| US8664003B2 (en) | Chip provided with film having hole pattern with the use of thermoresponsive polymer and method of producing the same | |
| KR100785389B1 (ko) | 바이오칩용 기판 패턴의 제조방법 및 이를 이용한 바이오칩 | |
| CN1216292C (zh) | 在无机硅材料表面共图案化固定生物大分子的方法 | |
| CN1958301A (zh) | 利用微接触印刷工艺在基材上图案化分子的方法 | |
| JPH10513404A (ja) | 化学的に定義されたボディを配向析出する方法 | |
| JP2003527615A (ja) | 細胞パターニング技術 | |
| CN101560061B (zh) | 图型化聚合物刷的制备方法 | |
| KR20120061083A (ko) | 표면 상에 히드로겔을 형성하는 방법 및 그에 의해 형성된 물품 | |
| Mitmoen et al. | UV-and Visible-Light Photopatterning of Molecular Gradients Using the Thiol–yne Click Reaction | |
| Hung et al. | Hierarchical Nanoparticle assemblies formed via one-step catalytic stamp pattern transfer | |
| CN104003345B (zh) | 一种具有三维微纳米结构表面的载体及其制备方法和应用 | |
| CN1212543C (zh) | 用微传递技术在聚合物表面图案化固定生物大分子的方法 | |
| CN102643446B (zh) | 一种在pet基材表面制备蛋白微图案的工艺 | |
| KR100836206B1 (ko) | 패턴형성용 폴리에틸렌글리콜 하이드로젤과 이의 제조방법 | |
| Conrad et al. | Photoactivatable silanes for the site-specific immobilization of antibodies | |
| KR20090100565A (ko) | 미소유체도관 내에서 강제된 소포체 융합을 이용한이중지질층의 형성 및 이를 이용한 미세패턴의 제조방법,및 상기 미세패턴을 포함하는 생체칩 | |
| US20050136538A1 (en) | Lithographic method for attaching biological cells to a solid substrate using a small molecule linker | |
| KR101018414B1 (ko) | 자기조립 블록 공중합체 박막상에 단백질 흡착이 향상된단백질 나노어레이의 제조방법 및 이에 따라 제조된 단백질나노어레이 | |
| WO2021000851A1 (zh) | 制备图案化聚合物的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C19 | Lapse of patent right due to non-payment of the annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |