CN1197641A - 含有鞣料云实素的药物 - Google Patents
含有鞣料云实素的药物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1197641A CN1197641A CN 97104154 CN97104154A CN1197641A CN 1197641 A CN1197641 A CN 1197641A CN 97104154 CN97104154 CN 97104154 CN 97104154 A CN97104154 A CN 97104154A CN 1197641 A CN1197641 A CN 1197641A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- corilagin
- medicine
- plant
- water
- day
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了含有鞣料云实素的药物制剂以及鞣料云实素的提取新工艺;本发明还公开了鞣料云实素的药物新用途,具体说是鞣料云实素在制备抗乙肝病毒药物中的应用。
Description
本发明涉及含有鞣料云实素的药物制剂以及鞣料云实素的提取新工艺；本发明还涉及鞣料云实素的药物新用途，具体说是鞣料云实素在制备抗乙肝病毒药物中的应用，属于药物领域。
鞣料云实素，又称鞣云实精，柯里拉京(Corilagin)，其化学名称为：1-没实子酰-3，6-六羟基二苯甲酰-D-葡萄糖，是一种已知的化合物。但是，将该化合物用于制备药物，尚未见报道。对于该化合物的来源，虽有记载，但是到目前为止，还未见有关从中草药中以高收率提取该化合物的工艺的报道。也未发现有关鞣料云实素抗乙肝病毒的记载。
本发明目的是提供含有鞣料云实素的药物制剂。
本发明的另一个目的是提供一种从中草药中提取鞣料云实素的工艺。
本发明的另一个目的是提供鞣料云实素在制备抗乙肝病毒药物中的应用。
我们曾对鞣料云实素进行了抗乙肝病毒的药理研究，发现它能抑制乙肝病毒DNA聚合酶，对乙肝病毒感染具有治疗作用。进而对其进行了提取和分离工艺的研究，从而完成了本发明。
本发明药物制剂含有治疗有效量的鞣料云实素。
本发明药物优选含有0.1-99.9％重量份的鞣料云实素。
本发明药物更优选含有10-90％重量份的鞣料云实素。
本发明药物进一步优选含有15-80％重量份的鞣料云实素。
本发明药物最佳含有20-70％重量份的鞣料云实素。
本发明所说的鞣料云实素是以下述方法提取的：
首先，选取原料药材。
本发明所说的鞣料云实素可以从以下三种植物中提取：
叶下珠属植物(Phyllanthus)，如叶下珠(Phyllanthus urinariaL.)、蜜柑草(Phyllanthus matsumurae Hayata)；
邙牛儿苗属植物，如，邙牛儿苗(Erodium stephanianumwild.)；
老鹳草属植物，如，老鹳草(Geranium wilfordii maxim)。
然后，进行提取，提取工艺如下：
取上述植物中的任何一种1公斤，干燥粉碎后，以14-16倍量水于90-100℃提取2-3次，每次1-1.5小时。合并提取液，常压水浴浓缩，得浓缩液4000毫升。离心后，通过700gH103型大孔吸附树脂柱，水洗至无糖的反应，乙醇洗，乙醇洗脱液减压浓缩，温度40-60℃，浓缩物60克，经硅胶干柱层析，氯仿-甲醇-水以70∶30∶6的比例洗脱，取含有鞣料云实素的部位进一步以sephadex LH-20柱分离纯化，丙酮-水以1∶1比例进行洗脱，再以甲醇-水(1∶1)重结晶，即得鞣料云实素7-8克。
经过上述工艺得到的鞣料云实素，收率比一般方法的收率高2-4倍，所得产品纯度高，可直接用于制药。以下是上述工艺所制备的鞣料云实素的物理常数和光谱数据：
熔点：208℃(分解)；旋光[α]15 D-255.79(C＝0.95，EtOH)。
FAB-质谱(FAB-MS)：M+633(M-1)，分子式：C27H22O18MW＝634。
红外光谱：νKBr maxcm-1 3410(-OH)，1730，1714，1691(C＝O)。
紫外光谱：λEtOH max 224，270。
核磁共振氢谱：(1HNMR)：(MeCO-d6，500MH2)
δ6.36(1H，d，J＝2，glu-H1)；4.05(1H，dd，J＝2，2，3.7，glu-H2)；4.82(1H，m，glu-H3)；4.45(1H，m，glu-H4)；4.51(1H，m，glu-H5)；4.95(1H，t，J＝11，glu-H6)；4.09(1H，dd，J＝3，11，glu-H6)；6.68(1H，s，HHDP，C3-H)；6.82(1H，s，HHDP，C3-H)；7.11(2H，s，galloyl H)。
核磁共振碳谱：(13C NMR)：(Me2CO-d6)
δ168.69，167.25(HHDPCO)，165.20(galloylC)
145.91(galloylC3，C5)
139.33，137.36，136.63(galloyl 和HHDP C4)
129.98，125.85，125.69(galloyl 和HHDP C1)
110.91(galloyl C2 C6)108.28，110.16(HHDP C2)
116.15，116.62(HHDPC6)
145.43，144.96(HHDP C3 C5)
94.34，68.93，70.49，62.26，75.72，64.41
(glu C1 C2 C3 C4 C5 C6)。
上述制备的鞣料云实素，按照常规的药物制剂工艺，可以将其作为有效成分，加入常规的赋性剂，制备成任何一种适合于临床上使用的药物制剂。例如，丸剂、片剂、胶囊剂、口服液体制剂、注射剂、散剂、膏剂、气雾剂等。制备这些药物制剂是本领域普通技术人员的常规性技术活动。
本发明药物具有抗乙肝病毒的作用，可用于治疗乙肝病毒感染性疾患。以下实验例进一步说明了本发明药物的医疗作用，实验中的PuT代表鞣料云实素。实验例1 PuT(鞣料云实素)对HBV DNA聚合酶的抑制作用1、材料1.1 药物：由中日友好临床医学研究所提供。1.2 HBV DNA聚合酶：1996年2月从武汉病毒所购进。1.3 试剂：dNTP(dATP，dCTP，dGTP)为Boehringer MannheimGmbH公司产品；b-巯基乙醇NP-40为BDH公司产品；滤纸片为Whatman No.3；3H-dTTP为杜邦公司产品；其它均为国产分析试剂。1.4 方法：1.4.1 10ml酶样品20ml药液与30ml酶反应底物缓冲液混合。1.4.2 37℃反应2小时。1.4.3 点样于滤纸片，冷5％三氯乙酸洗3次。1.4.4 95％乙醇脱水。1.4.5 80℃烤干，将滤纸片置于闪烁液中，测放射性强度CPM。1.4.6 计算方法：按Reed-Meuench方法计算IC50。2、结果，见表1表1 药物对HBV DNA聚合酶的抑制作用(两批综合)药物 第一批(1996，7，25)第二批(1996，7，26) 两批平均
IC50(μg/ml) IC50(μg/ml) IC50±SD(μg/ml)PFA 21.75 22.68 22.22±0.66PuT 67.04 69.53 68.29±3.34实验例2 PuT(鞣料云实素)在2215细胞培养内对乙型肝炎病
毒表面抗原和e抗原的抑制作用材料和方法：一、药物：PuT由中日友好临床医学研究所提供为白色结晶，实验时用培养液配制，0.45nm滤膜除菌过滤。二、2215细胞：乙型肝炎病毒(HBV)DNA克隆转染人肝癌(Hep G2)的2215细胞系，美国Mount Sinai医学中心构建，我室引进后自行传代培养。三、试剂：Eagles MEM干粉，美国GIBCO公司产品；胎牛血清，美国Hyclone Lab公司产品；G-418(Geneticin)，MEM配制，美国Gibco公司产品；L-谷氨酰胺，京科化学试剂公司进口分装；HBsAg，HBeAg固相放射免疫测定盒，购自中国同位素公司北方免疫试剂研究所产品；青霉素 链霉素(华北制药厂)。
实验用品及仪器：培养瓶，丹麦Tunclon TM；培养板，96孔板，24孔板，美国Corning公司产品；二氧化碳孵箱，美国Shel-Lab产品；2215细胞培养液及试剂配制：MEM培养液100ml：含胎牛血清10％。3％谷氨酰胺1％，G418 380mg/ml，青链霉素各100mg/ml，加1ml。用5％NaHCO3调pH至pH7。细胞消化液：0.25％胰酶，用Hanks液配制。四、实验方法：(一)2215细胞培养
在长满2215细胞的培养瓶内加0.25％胰酶，37℃消化3分钟，加培养液吹打，1∶3传代，10天长满，加入细胞计数板计数，配制成每毫升10万个细胞接种细胞培养板，96孔板每孔0.2ml，24孔板每孔1ml，37℃5％CO2培养24小时，细胞长成单层后进行实验。(二)药物对细胞毒性试验
药物PuT用培养液配制成1000mg/ml溶液，稀释成不同浓度后加入96孔细胞培养板，每浓度3孔，每4天换同浓度药液，设无药物细胞对照组。8天显微镜下观察细胞病变，完全破坏为4，75％为3，50％为2，25％为1，无病变为0。计算每浓度药液平均细胞病变程度和抑制％。按Reed Meuench法计算TC50，TC0。(三)药物对HBeAg、HBsAg抑制试验
每毫升10万个2215细胞接种24孔细胞培养板，每孔1ml，37℃5％CO2培养24小时，加无毒浓度以下2倍稀释试验药液，共5个稀释度，每浓度3孔，37℃5％CO2培养，每4天换原浓度药液培养，第8天时收获培养液，-20℃冰冻保存。二批实验同时测定HBeAg和HBsAg。实验设HBeAg、HBsAg阳性和阴性对照和细胞对照。
1、HBeAg和HBsAg测定：用中国同位素公司北方免疫试剂研究所产品，固相放射免疫测定盒测定，方法见说明书，用γ-计数仪测定每孔cpm值。
2、药物效果计算：计算细胞对照及每浓度cpm均值及标准差。
②以t检验法计算各稀释度HBsAg、HBeAg和对照组间cpm的差别。结果：一、在2215细胞培养中的细胞毒性
为观察PuT对乙型肝炎病毒基因转染的人肝癌2215细胞的毒性，在接种2215细胞后24小时，加2倍稀释药液。实验自1000μg/ml开始，稀释度分别为1000；500；250；125；62.5；0.3125μg/ml及200；100；50；25；12.5μg/ml每浓度3孔。4天换一次药液，维持8天，用显微镜观察细胞病变，按公式计算半数有毒浓度(TC50)和最大无毒浓度(TC0)，见表2。结果显微镜检CPE，TC50二批实验分别为125μg/ml和125.9 g/ml，平均半数中毒浓度为125.5±0.64μg/ml，无毒剂量TC0为56.3±8.8μg/ml。二、在2215细胞培养中对HBeAg和HBsAg表达的作用
PuT100μg/ml；50μg/ml；25μg/ml加入2215细胞培养，第8天对HBeAg和HBsAg效果如下。
1、对的HBeAg抑制率：两批实验PuT各浓度组对2215细胞培养第8天上清液对HBeAg的平均抑制率分别为：PuT100μg/ml抑制33.5％；50μg/ml抑制27.5％；25μg/ml抑制14.4％。
2、对HBsAg的抑制率：两批实验PuT各浓度组对2215细胞培养第8天上清液对HBsAg的平均抑制率分别为：100μg/ml抑制25.9％、50mg/ml抑制18.1％、25mg/ml抑制12.8％。
表2 PuT在2215细胞培养内的毒性实验 药物 不同药物浓度μg/ml细胞病变 TC50 TC0批次 名称 1000 500 250 125 62.5 0(μg/ml)(μg/ml)I PuT 4 4 4 2 0 0
4 4 4 2 0 0 125 62.5
4 4 4 2 0 0
破坏％100 100 100 50 0 0实验 药物 不同药物浓度μg/ml细胞病变 TC50 TC0批次 名称 200 100 50 25 12.5 0 (μg/ml)(μg/ml)II PuT 4 1 0 0 0 0
4 1 0 0 0 0 125.9 50
4 1 0 0 0 0
破坏％100 25 0 0 0 0二批 125.5±0.64 56.3±8.8平均
表3、PuT在2215细胞第8天对HBeAg的抑制作用(二批实验)实验批次 药物名称 药物浓度 HBeAg
(μg/ml) cpm(X±SD) 抑制率(％)
100 66840±723.7 31.3I PuT 50 7328.7±1220.0 24.6
25 8701.0±286.7 10.3
100 6267.7±819.1 35.6II PuT 50 6775.7±366.0 30.3
25 7911.0±516.2 18.5
100 33.5平均抑制率 50 27.5
25 14.42215细胞对照 9693±1193.3阳性对照 37544.0±5749.0阴性对照 509.0±108.3空白对照 73.6±8.4表4、PuT在2215细胞第8天对HBsAg的抑制作用(二批实验)实验批次 药物名称 药物浓度 HBsAg
(μg/ml) cpm(X±SD) 抑制率(％)
100 12073.7±178.5 24.6I PuT 50 13251.0±442.4 17.2
25 14074.3±780.2 12.1
100 11665.0±373.0 27.2II PuT 50 12964.4±939.7 1.90
25 14181.3±378.6 11.4
100 25.9平均抑制率 PuT 50 18.1
25 12.82215细胞对照 15994.7±1032.4阳性对照 32539.0±45.2阴性对照 1033.0±45.2空白对照 73.6±8.4实验例3 PuT(鞣料云实素)在鸭体内对鸭乙型肝炎病毒感染的治疗效果
为验证PuT体内抗肝炎病毒作用，本实验采用鸭乙型肝炎病毒感染雏鸭口服和腹腔注射PuT进行治疗，观察其对鸭血清鸭乙型肝炎病毒DNA水平的影响。材料和方法：(一)药物
PuT为中草药叶下珠(Phyllanthus urinaria L.)中提纯的天然化合物，为白色结晶，水溶，稳定。(二)病毒
鸭乙型肝炎病毒，鸭乙型肝炎病毒DNA(DHBV-DNA)强阳性血清，采自上海麻鸭，-70℃保存。(三)动物
1日龄北京鸭，购自北京禽蛋养鸭场。(四)试剂
α-32P-dCTP购自北京福瑞生物技术工程公司。缺口翻译药盒购自普洛麦格公司(Promega Co.)；sephadex G-50，Ficoll PVP购自瑞典Pharmacia公司；SDS西德Merck公司产品；鱼精DNA、牛血清白蛋白为中国科学院生物物理所产品；硝酸纤维素膜0.45mmAmersham公司产品。(五)实验方法
1、鸭乙型肝炎病毒感染：
1日龄北京鸭，经腿胫静脉注射上海麻鸭DHBV-DNA阳性鸭血清，每只0.2ml，在感染后7天取血，分离血清，-70℃保存待检。
2、药物治疗试验：
DHBV感染雏鸭7天后随机分组进行药物治疗试验，每组5-6只不等；给药组分口服或腹腔注射，口服剂量为50、100、200mg/kg，腹腔注射为15、30和60mg/kg，1天2次10天。设病毒对照组(DHBV)，以生理盐水代替药物。设无环鸟苷100mg/kg1天2次10天阳性药物对照组。在感染后第7天即用药前(T0)，用药第5天(T5)，用药第10天(T10)和停药后第3天(P3)，自鸭腿胫静脉取血，分离血清，-70℃保存待检。
3、检测方法：
取上述待检鸭血清，每批同时点膜，测定鸭血清中DHBV-DNA水平的动态。按缺口翻译试剂盒说明书方法，用32P标记DHBV DNA探针，并作鸭血清斑点杂交，放射自显影膜片斑点，在酶标检测仪测定OD值(滤光片为490cm)，计算血清DHBV-DNA密度，以杂交斑点OD值作为标本DHBV-DNA水平值。(六)药效计算：
1、计算每组鸭不同时间血清DNA OD值的平均值(X±SD)，并将每组鸭用药后不同时间(T5、T10)和停药后第3天(P3)血清DHBV-DNA水平与同组给药前(T0)OD值比较，采用配对t检验，计算t1、P1值。分析差异的显著性，判断药物对病毒感染的抑制效果。
2、计算每组鸭用药后不同时间(T5、T10)和停药第3天(P3)血清DHBV-DNA的抑制％，并作图，比较各组鸭血清DHBV-DNA抑制率的动态。
3、将给药治疗组不同时间DHBV-DNA抑制率分别与对照组相同时间DHBVDNA抑制率比较，采用成组t检验，作统计学处理，计算t2、P2值分析差异的显著性，判断药效。结果：[一]1日龄北京鸭感染DHBV后，血清DHBV-DNA动态
DHBV-DNA结果见表6。实验DHBV感染鸭共47只，感染后7天，血清DHBV-DNA斑点杂交全部阳性。病毒对照组6只雏鸭感染后第7天血清DHBV-DNA全部阳性，全程不同20天时间血清DHBV-DNA有波动，但无显著差异。[二]PuT在鸭体内的毒性实验
腹腔注射给药15/30/60mg/kg，一天二次，10天，60mg/kg组在给药后出现死亡，实验第1天死亡2只，第2天死亡1只后停药，说明60mg/kg腹腔注射给药有毒，腹腔注射最大无毒剂量为30mg/kg。
表5PuT腹腔注射对北京鸭的毒性实验剂量 给药次数 死 亡 数mg/kg 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10/天60 Bid×10，ip 2 1 停药 3/53015[三]PuT在DHBV感染鸭体内对鸭血清DHBV-DNA的影响
结果表明：
1、腹腔注射剂量组为15、30mg/kg、60mg/kg组，在给药前(T0)与给药后第5(T5)、10(T10)及停药后3天(P3)，取血，分离血清，检测DHBV-DNA OD值，给药前及自身比较，并与生理盐水组对比，有一定抑制作用，30mg/kg组在给药第5天与DHBV对照组作统计学比较，有显著意义，P＜0.05。口服给药选用50、100、200mg/kg，1天2次10天，200mg/kg组与生理盐水对照组作统计学比较，给药第10天鸭血清DHBV-DNA OD值，与给药前(T0)比较，有显著的抑制作用，统计学P＜0.01。50、100mg/kg组效果不佳。[四]阳性药无环鸟苷(ACV)对DHBV感染鸭鸭血清DHBV-DNA的影响
实验设阳性药对照，DHBV感染鸭口服ACV100mg/kg，1天2次10天，结果见表6，给药第5天及停药后3天，与给药前T0的OD值比较，统计学有非常显著性，P＜0.01，说明ACV100mg/kg，对DHBV感染鸭有治疗效果，也说明本实验模型成立。总结：
PuT对鸭乙型肝炎病毒感染鸭血清DHBV DNA抑制作用的研究，实验结果表明：口服给药50、100、200mg/kg，1天2次10天，50、100mg/kg组效果不佳，200mg/kg组在给药第5天抑制率为25.08％，第10天抑制率为67.42％，停药后3天抑制率为43.51％，与生理盐水对照组作统计学比较，给药第10天P＜0.01有非常显著性意义。腹腔注射给药15、30、60mg/kg，1天2次10天，60mg/kg在给药后有毒，2天死亡3/5，30mg/kg组在给药第5天抑制率为46.13％，第10天抑制率为45.97％，停药后3天抑制率为41.84％，与生理盐水对照组作统计学比较，给药第5天P＜0.05，有显著性意义。15mg/kg组无效。
表6、PuT在鸭体内对DHBV DNA的抑制作用组别 鸭数 指标 血清DHBV-DNA OD值(X±SD)及抑制率(1％)
(只) T0 T5 T10 P3生理盐水 6 OD值 0.35±0.09 0.32±0.08 0.30±0.07 0.33±0.10
1％ 9.43 13.72 4.51PuT po，2×1050mg/kg 6 OD值 0.23±0.04 0.24±0.02 0.19±0.04 0.18±0.02
1％ -6.94 14.30 19.24100mg/kg 5 OD值 0.17±0.03 0.14±0.05 0.19±0.04 0.11±0.07
1％ 11.60 26.08 33.73200mg/kg 6 OD值 0.20±0.09 0.14±0.06 0.05±0.03* 0.10±0.06*
1％ 25.08 67.42** 43.51PuT ip，2×1015mg/kg 6 OD值 0.16±0.07 0.16±0.06 0.12±0.04 0.11±0.04
1％ -5.51 21.94 20.9530mg/kg 6 OD值 0.20±0.03 0.11±0.08* 0.11±0.07* 0.11±0.05*
1％ 46.13* 45.97 41.84ACVpo，2×10100mg/kg 6 OD值 0.63±0.20 0.24±0.03** 0.12±0.14* 0.20±0.03**
1％ 58.05** 72.52** 65.31**
给药治疗组不同时间DHBV-DNA抑制率分别与病毒对照组相同时间DHBV-DNA抑制率比较(成组t检)，*P＜0.05，**P＜0.01。综上所述，PuT(鞣料云实素)在体内外均具有抗乙肝病毒(HBV)的作用，实验结果表明，PuT在体外可抑制乙肝病毒DNA聚合酶，其半数抑制浓度IC50为68.29μg/ml。PuT在HBV基因组转染的HepG2细胞即2215细胞中具有抑制HBeAg和HBsAg表达的作用，当PuT浓度为100μg/ml时其抑制率分别为33.5％和25.9％。PuT在鸭体内对鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染具有治疗作用。口服给药一天二次，剂量200mg/kg时给药第10天对DHBV-DNA有显著抑制作用，p＜0.01。腹腔注射给药一天二次，30mg/ml时给药10天，在给药第5天时显著抑制鸭血清乙型肝炎病毒DNA水平，p＜0.05。
实施例1 从中草药叶下珠提取鞣料云实素
取1000克干燥粉碎的叶下珠以14-16倍量水于90-100℃提取2-3次，每次1-1.5小时。合并提取液，常压水浴浓缩，得浓缩液4000毫升。离心后，通过700gH103型大孔吸附树脂柱，水洗至无糖的反应，乙醇洗，乙醇洗脱液减压浓缩，温度40-60℃，浓缩物60克，经硅胶干柱层析，氯仿-甲醇-水以70∶30∶6的比例洗脱，取含有鞣料云实素的部位进一步以sephadex LH-20柱分离纯化，丙酮-水以1∶1比例进行洗脱，再以甲醇-水(1∶1)重结晶，即得鞣料云实素7-8克。
实施例2从中草药老鹳草提取鞣料云实素
取1000克干燥粉碎的老鹳草以14-16倍量水于90-100℃提取2-3次，每次1-1.5小时。合并提取液，常压水浴浓缩，得浓缩液4000毫升。离心后，通过700gH103型大孔吸附树脂柱，水洗至无糖的反应，乙醇洗，乙醇洗脱液减压浓缩，温度40-60℃，浓缩物60克，经硅胶干柱层析，氯仿-甲醇-水以70∶30∶6的比例洗脱，取含有鞣料云实素的部位进一步以sephadex LH-20柱分离纯化，丙酮-水以1∶1比例进行洗脱，再以甲醇-水(1∶1)重结晶，即得鞣料云实素7-8克。
实施例3从中草药邙牛儿苗提取鞣料云实素
取1000克干燥粉碎的邙牛儿苗以14-16倍量水于90-100℃提取2-3次，每次1-1.5小时。合并提取液，常压水浴浓缩，得浓缩液4000毫升。离心后，通过700gH103型大孔吸附树脂柱，水洗至无糖的反应，乙醇洗，乙醇洗脱液减压浓缩，温度40-60℃，浓缩物60克，经硅胶干柱层析，氯仿-甲醇-水以70∶30∶6的比例洗脱，取含有鞣料云实素的部位进一步以sephadex LH-20柱分离纯化，丙酮-水以1∶1比例进行洗脱，再以甲醇-水(1∶1)重结晶，即得鞣料云实素7-8克。
实施例4用鞣料云实素制备胶囊剂
取上述制备鞣料云实素100克，加入药用淀粉500克，混合均匀，装胶囊，每粒胶囊0.4克。
实施例5用鞣料云实素制备片剂
取上述制备鞣料云实素200克，加入药用淀粉1000克，甲基纤维素钠150克，混合均匀，造粒，整粒，入压片机压片，包糖衣，制得片剂。
Claims (10)
1、一种含鞣料云实素的药物，其特征在于它含有0.1-99.9％重量份的鞣料云实素。
2、根据权利要求1的药物，其特征在于它含有10-90％重量份的鞣料云实素。
3、根据权利要求2的药物，其特征在于它含有15-80％重量份的鞣料云实素。
4、根据权利要求3的药物，其特征在于它含有20-70％重量份的鞣料云实素。
5、根据权利要求1-4中的任何一种药物，其特征在于该药物还含有赋性剂。
6、一种从植物中提取鞣料云实素的方法，其特征在于鞣料云实素是从选自于下述任何一种植物中提取的：
叶下珠属植物；
邙牛儿苗属植物；
老鹳草属植物。
7、根据权利要求6所说的方法，其特征在于所说的叶下珠属植物是叶下珠或蜜柑草。
8、根据权利要求6所说的方法，其特征在于所说的提取工艺如下：
取所述植物中的任何一种，干燥粉碎后，以14-16倍量水于90-100℃提取2-3次，每次1-1.5小时，合并提取液，常压水浴浓缩，得浓缩液，离心后，通过700gH103型大孔吸附树脂柱，水洗至无糖的反应，乙醇洗，乙醇洗脱液减压浓缩，温度40-60℃，浓缩物经硅胶干柱层析，氯仿-甲醇-水以70∶30∶6的比例洗脱，取含有鞣料云实素的部位进一步以sephadex LH-20柱分离纯化，丙酮-水以1∶1比例进行洗脱，再以甲醇-水(1∶1)重结晶，即得鞣料云实素。
9、鞣料云实素在制备抗乙肝病毒药物中的应用。
10、鞣料云实素在制备抑制乙肝病毒DNA聚合酶的药物中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 97104154 CN1118471C (zh) | 1997-04-25 | 1997-04-25 | 鞣料云实素的制备工艺 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 97104154 CN1118471C (zh) | 1997-04-25 | 1997-04-25 | 鞣料云实素的制备工艺 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1197641A true CN1197641A (zh) | 1998-11-04 |
| CN1118471C CN1118471C (zh) | 2003-08-20 |
Family
ID=5167181
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 97104154 Expired - Fee Related CN1118471C (zh) | 1997-04-25 | 1997-04-25 | 鞣料云实素的制备工艺 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1118471C (zh) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1318438C (zh) * | 2005-06-23 | 2007-05-30 | 中国科学院昆明植物研究所 | 鞣料云实素的制备方法 |
| CN101461816B (zh) * | 2007-12-21 | 2010-12-01 | 江苏正大天晴药业股份有限公司 | 柯里拉京的新用途 |
| CN102329344A (zh) * | 2011-07-26 | 2012-01-25 | 苏州宝泽堂医药科技有限公司 | 一种从密柑草中制备柯里拉京的方法 |
| CN103749490A (zh) * | 2014-01-08 | 2014-04-30 | 杨凌农科大无公害农药研究服务中心 | 一种抗植物病毒剂及其制备方法 |
| CN104447896A (zh) * | 2014-11-12 | 2015-03-25 | 广东食品药品职业学院 | 柯里拉京的提取分离方法及其应用 |
| CN105061522A (zh) * | 2015-08-14 | 2015-11-18 | 厦门华侨亚热带植物引种园 | 一种柯里拉京的制备方法 |
| CN108484694A (zh) * | 2018-04-04 | 2018-09-04 | 新疆维吾尔自治区药物研究所 | 天然产物isostrictiniin及其制备方法和应用 |
| CN109674804A (zh) * | 2019-02-02 | 2019-04-26 | 武汉大学 | 柯里拉京在制备抗心肌纤维化药物中的用途 |
-
1997
- 1997-04-25 CN CN 97104154 patent/CN1118471C/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1318438C (zh) * | 2005-06-23 | 2007-05-30 | 中国科学院昆明植物研究所 | 鞣料云实素的制备方法 |
| CN101461816B (zh) * | 2007-12-21 | 2010-12-01 | 江苏正大天晴药业股份有限公司 | 柯里拉京的新用途 |
| CN102329344A (zh) * | 2011-07-26 | 2012-01-25 | 苏州宝泽堂医药科技有限公司 | 一种从密柑草中制备柯里拉京的方法 |
| CN103749490A (zh) * | 2014-01-08 | 2014-04-30 | 杨凌农科大无公害农药研究服务中心 | 一种抗植物病毒剂及其制备方法 |
| CN104447896A (zh) * | 2014-11-12 | 2015-03-25 | 广东食品药品职业学院 | 柯里拉京的提取分离方法及其应用 |
| CN104447896B (zh) * | 2014-11-12 | 2017-04-19 | 广东食品药品职业学院 | 柯里拉京的提取分离方法及其应用 |
| CN105061522A (zh) * | 2015-08-14 | 2015-11-18 | 厦门华侨亚热带植物引种园 | 一种柯里拉京的制备方法 |
| CN108484694A (zh) * | 2018-04-04 | 2018-09-04 | 新疆维吾尔自治区药物研究所 | 天然产物isostrictiniin及其制备方法和应用 |
| CN109674804A (zh) * | 2019-02-02 | 2019-04-26 | 武汉大学 | 柯里拉京在制备抗心肌纤维化药物中的用途 |
| CN109674804B (zh) * | 2019-02-02 | 2021-04-16 | 武汉大学 | 柯里拉京在制备抗心肌纤维化药物中的用途 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN1118471C (zh) | 2003-08-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104510747B (zh) | 一种环烯醚萜苷的药物新用途 | |
| CN1857367A (zh) | 波棱瓜子提取物、其滴丸剂及制备方法和应用 | |
| CN1118471C (zh) | 鞣料云实素的制备工艺 | |
| CN1144803C (zh) | 板栗花黄酮化合物及其提取方法 | |
| CN1723955A (zh) | 射干提取物及其制备方法和用途 | |
| CN1249072C (zh) | 一种金丝桃苷的制备方法及药物新用途 | |
| CN1313109C (zh) | 三子汤新制剂及其制备 | |
| CN1775217A (zh) | 治疗乙型肝炎的药物组合物 | |
| CN1141101C (zh) | 治疗乙肝的药物及其制备方法 | |
| CN1175818C (zh) | 一种含有桑叶总碱浸膏的制剂及其制备方法 | |
| CN1566136A (zh) | 白头翁总皂苷及提取方法，以及医药用途和药物制剂 | |
| CN1582952A (zh) | 积雪草总苷在制备防治心、脑血管疾病药物中的用途 | |
| CN1519002A (zh) | 一种中药提取物及制备方法和应用 | |
| CN100339353C (zh) | 一枝蒿酮酸的制备方法及用途 | |
| CN1193766C (zh) | 治疗肝炎的栀子总甙组合物及其制备方法 | |
| CN1107680C (zh) | 澳洲茄胺盐酸盐及其生产方法和在医药上的应用 | |
| CN1506092A (zh) | 一种治疗腹泻的香薷提取物胶囊制剂及其制备方法 | |
| CN102050780B (zh) | 喹啉衍生物,其药物组合物及其用途 | |
| CN1730023A (zh) | 一种抗肝炎病毒的中药制剂及其制备方法 | |
| CN1197560C (zh) | 一种预防或治疗艾滋病的药物及其制备方法和应用 | |
| CN1506093A (zh) | 一种香薷提取物的制剂、质量控制方法以及其新用途 | |
| CN1176677C (zh) | 一种治疗冠心病的中药组合物及其制剂和制备方法 | |
| CN1772089A (zh) | 一种含有白花蛇舌草冻干粉针剂及其制备方法 | |
| CN1504232A (zh) | 抗流感病毒的药物有效部位及活性成分的分离制备方法 | |
| CN1194675C (zh) | 反式3,4',5－三羟基二苯乙烯在制备治疗乙型肝炎病毒感染药物中的用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C17 | Cessation of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20030820 Termination date: 20110425 |