CN1187135A - 血小板生成素组合物 - Google Patents

Abstract

公开了血小板生成素组合物,降低血小板生成素与表面吸附的方法和稳定血小板生成素组合物的方法。该组合物除血小板生成素外,还包含生理可接受的缓冲液,选自非离子表面活性剂和多元醇的表面吸附抑制剂,和等渗量的生理可接受盐。

Description

血小板生成素组合物

本发明的背景技术

血细胞生成是一个在骨髓中血细胞从多能干细胞发育和分化的过程。这一过程包括借助于靶细胞上的膜结合受体的多肽生长因子(细胞因子)之间复杂的相互作用。细胞因子的作用导致对通常为谱系特异性和/或阶段特异性的特定细胞因子产生应答的细胞增殖和分化。来自干细胞的单一细胞类型，例如血小板的发育可能需要多种细胞因子以适当顺序协调作用。

已开发多种细胞因子作为治疗剂。例如，刺激红细胞发育的红细胞生成素被用于治疗由肾脏疾病导致的贫血症。一些集落刺激因子与癌症化疗结合被用于加快病人免疫系统的恢复。白介素-2，α-干扰素和γ-干扰素被用于治疗某些癌症。

在血小板生成动物的体液中已鉴定出一种刺激巨核细胞生成和血小板生成的活性，并在文献中被称为“血小板生成素”(最近由McDonald发表，Exp.Hematol.16：201-205，1988和McDonald，Am.J.Ped.Hematol.Oncol.14：8-21，1992)。该蛋白目前使用遗传改造的培养细胞来制备。参见de Sauvage等，自然(Nature)369：533-538，1994；Lok等，自然(Nature)369：565-568，1994；Kaushansky等，自然(Nature)369：568-571，1994；和Bartley等，细胞(Cell)77：1117-1124，1994。

人血小板生成素(TPO)为具有332个氨基酸残基的70kD糖蛋白。它包含约152个残基的氨基末端生长因子区和富含糖类的羧基末端区。包含氨基末端区的平截形式的TPO在体外和体内均显示生物活性。在科技文献中也描述了非人TPO(例如Lok等，ibid；Bartley等，ibid.；Shimada等，血液(blood)84(10 Suppl.1)：326a，1994)。

血小板生成素看来经受蛋白水解并被以不均一或降解形式分离(Bartley等，ibid，；de Sauvage等，ibid.)。虽然至少一些蛋白水解产物具有生物活性，但就组合物和各种分子种类的相对活性而言，科技文献中报道的血小板生成素的制备并没有因此被很好地表征。然而，至今很少工作被报道了大规模生产血小板生成素，并且在本领域中需要适宜于药物用途的TPO组合物。这些制剂在贮存中应该是稳定的并易于使用。

本发明的概述

本发明的一个目的是提供贮存稳定的TPO药物组合物，包括含水组合物。

本发明的另一个目的是提供降低TPO与表面吸附的方法，该表面包括贮存小瓶和用于TPO药物组合物的制备和包装的滤器的表面。

本发明的另一个目的是提供使TPO药物组合物稳定的方法，包括其水溶液和冷冻干燥粉末。

一方面，本发明提供了一种组合物，它包含TPO，生理可接受缓冲液，选自非离子表面活性剂和多元醇的表面吸附抑制剂，以及等渗量的生理上可接受的盐。TPO可为人TPO或非人(例如大鼠，小鼠，狗或非人灵长类)TPO。在本发明的一些实例中，该组合物为具有pH为5.0-7.0，优选5.5-6.5的水溶液。在另一个实例中，该组合物为冷冻干燥粉末。在另一个实例中，该组合物包含足以降低血小板生成素凝集的量的组氨酸。在另一个实例中，该组合物为含水药物组合物，包括血小板生成素，10-100mM磷酸盐缓冲液，0.01-1.0％多乙氧基醚20或多乙氧基醚80，以及等渗量的氯化钠，该组合物pH为约6.0。

在另一个方面，本发明提供了一种降低血小板生成素与表面吸附的方法，包括在将溶液与表面接触之前，向血小板生成素的含水溶液加入有效量的选自非离子表面活性剂和多元醇的表面吸附抑制剂。在本发明选择的实例中，表面吸附抑制剂为聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯，例如多乙氧基醚20或多乙氧基醚80。

在第三个方面，本发明提供了一种稳定血小板生成素组合物的方法，包括向组合物中加入有效量的组氨酸。

参考下面的详细说明和附图，本发明的这些和其它方面将变得显而易见。

附图简要说明

图1表明过滤后清蛋白和血清蛋白对重组小鼠TPO回收的影响。

图2表明过滤后非离子表面活性剂，多元醇和糖对重组人TPO回收的影响。

图3表明NaCl对TPO表面吸附的降低。

图4表明各种制剂对TP0与玻璃珠的吸附的影响。

图5是37℃下在20mM磷酸盐或组氨酸缓冲液中，pH6.0，层析纯化的重组人TPO的降解分布图。

本发明的详细描述

本文采用的术语“等渗”的通常含义是等于血液，等于0.9％NaCl溶液的渗涨度。盐的“等渗量”是使溶液等渗或在重新配制冷冻干燥制剂时产生等渗溶液所需要的量。

浓度在本文特指摩尔浓度单位或液体组合物的％w/v。当组合物为冷冻干燥粉末时，各成分的浓度为在重新配制粉末时提供特定浓度的浓度。

本发明的组合物被制成制剂以降低由于表面吸附，凝集，其它物理或化学降解或这些过程的组合所造成的TPO活性的损失。发明人已发现非离子表面活性剂和多元醇可降低TPO与表面，例如滤器或小瓶之间的吸附。

根据本发明，将TPO与缓冲液，选自非离子表面活性剂和多元醇的表面吸附抑制剂；和等渗量的生理可接受的盐混合。可将组合物制成水溶液或冷冻干燥粉末。在与药学上可接受的稀释剂，例如注射用无菌水一起使用之前，重新配制后者。

用于本发明的缓冲液包括在pH为5.0-7.0范围内有效的低离子强度、生理可接受缓冲液。该缓冲液包括磷酸盐，乙酸盐，柠檬酸盐，琥珀酸盐和组氨酸缓冲液。“低离子强度”指5-500mM，优选10-100mM，最优选约20mM。优选磷酸钠和磷酸钾缓冲液和组氨酸缓冲液。组合物的pH优选为5.5-6.5，最优选为约6.0。特别优选的缓冲液为20mM磷酸钠缓冲液，pH6.0(16mM磷酸氢钠+4mM磷酸二氢钠)。

用于本发明的表面吸附抑制剂包括非离子表面活性剂和多元醇。非离子表面活性剂包括聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯，例如多乙氧基醚20(聚氧乙烯山梨糖醇酐一月桂酸酯)，多乙氧基醚80(聚氧乙烯山梨糖醇酐一油酸酯)等。用于这方面的其它非离子表面活性剂包括聚环氧乙烷；脱水山梨糖醇酯；聚氧乙烯烷基醚；和脂肪酸甘油酯，包括单油酸甘油酯和单硬脂酸甘油酯。用于本发明的多元醇包括聚乙二醇(例如PEG3350)、甘露糖醇、木糖醇、山梨糖醇、肌醇和乙二醇。通常，包括的表面吸附抑制剂的浓度为0.001％-5％，优选0.01％-1.0％，较优选为约0.05％。尤其优选的表面吸附抑制剂为浓度为约0.05％的多乙氧基醚80。也可使用表面吸附抑制剂的混合物(例如多乙氧基醚80+PEG 3350)。

已发现当包含在含有非离子表面活性剂的水溶液中时，等渗量的生理可接受的盐进一步降低TPO的表面吸附。在这方面优选的盐包括氯化物盐，例如NaCl，KCl，CaCl₂和MgCl₂。尤其优选NaCl。本领域技术人员应理解，达到等渗性所需要的盐的实际量取决于如选择的特定的盐以及组合物其它成分等因素。

通过在组合物中包括上面描述的一定成分的组合可获得有利之处。例如，向无组氨酸缓冲的组合物中加入组氨酸可进一步稳定组合物中的TPO。实验证据表明，组氨酸降低TPO的凝集，并且还可降低在pH＞5.5时的非蛋白水解性降解(例如脱酰氨基作用或氧化作用)。因此组氨酸可以例如5-500mM，优选10-100mM，较优选为约20mM的浓度包含在磷酸盐缓冲的TPO组合物中。可将聚乙二醇或其它多元醇加入到含有非离子表面活性剂的组合物中以进一步降低表明吸附。组氨酸和多元醇可被有利地包括在冷冻干燥的组合物中以降低凝集。

本发明组合物还可包括清蛋白。人血清清蛋白优选包含在用于人类应用的药物组合物中，虽然非人类清蛋白可用于试剂级的组合物或用于兽医用途的那些组合物中(包括动物中的实验用途)。在冷冻干燥的组合物中清蛋白可用作赋形剂，并且当以0.01-1.0％，优选为约0.25％包括时起稳定剂的作用。

本发明的组合物还可包括一种或多种保存剂，尤其是在包装用于多种用途的那些组合物中。可用于本发明的保存剂包括通常用于药物制剂中的那些，例如羟苯甲酸甲酯、对羟苯甲酸甲酯、苄醇、间甲苯酚、乙基汞硫代水杨酸盐、苯酚、乙基汞硫代水杨酸钠等。

本发明的组合物可包括糖类作为填充剂，稳定剂或渗涨度调节剂。尤其感兴趣的是糖类作为冷冻干燥组合物的填充剂和稳定剂。适宜糖类包括葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖、海藻糖等。

根据常规方法TPO的药物组合物被制成用于胃肠外，尤其是静脉内或皮下注射。制剂方法在本领域为熟知并公开在被本文引作参考的，例如Remington′pHarmaceutical Science，Gennaro，编，Mack PublishingCo.，Easton PA，1990。在药物组合物中，TPO的浓度通常为0.1-10mg/ml，虽然可提供较高浓度的溶液并在使用前稀释。也可制备TPO浓度在这个优选范围之外的组合物，例如用作研究试剂。除上面公开的外还可包含用于本领域已知目的的成分，例如冷冻干燥之前加入的填充剂。这些组合物可进一步包含其它细胞因子，尤其是早期作用的细胞因子，例如干细胞因子，IL-3，IL-6，IL-11或GM-CSF。

用于药物用途的组合物为无菌和无致热原的，并根据已接受的药物学方法进行生产和包装。组合物可以单剂量或多剂量进行包装。通常将组合物包装在密封的带有衬有聚四氟乙烯塞子和适宜标记的玻璃小瓶中。冷冻干燥组合物可被包装成一套，其中包含适宜量的合适的稀释剂，例如注射用水(WFI)或5％注射用葡萄糖。

在需要增加髓样谱系的细胞增殖时，可将本发明的血小板生成素组合物用于治疗用途，例如治疗如由再生障碍性贫血，myelodisplasticsyndromes，化学疗法或先天性血细胞减少症诱导的血细胞减少症。TPO尤其可用于增加例如在治疗血小板减少症中的血小板的产生。血小板减少症与可单独或一齐起作用产生这种疾病的多种疾病和临床状况相关。例如，血小板生成缺陷，异常血小板分布，由于大量输血导致的稀释损失，或血小板的异常破坏可造成降低的血小板计数。例如，用于癌症治疗的化疗药物可抑制骨髓中血小板先祖细胞的发育，并且导致的血小板减少症限制了化疗，可能必需输血。此外，一些恶性肿瘤可削弱血小板的生成和血小板的分布。用于杀伤恶性肿瘤细胞的放射疗法也杀伤血小板先祖细胞。血小板减少症也可从由药物，新生儿异源免疫或血小板输血异源免疫诱导的各种血小板自身免疫紊乱所造成。TPO可降低或减少输血的要求，从而降低血小板异源免疫的发生。血小板的异常破坏可来自：(1)血管移植或创伤组织中的增加的血小板消耗；或(2)与例如，药物诱导的血小板减少症，特发性血小板减少性紫癜(ITP)，自身免疫疾病，血液病，例如白血病或淋巴瘤或涉及骨髓的转移性癌症相关的免疫机制。其它TPO的指征包括由例如化疗或用AZT治疗HIV感染导致的再生障碍性贫血和药物诱导的骨髓抑制。

血小板减少症表现为增加的出血，例如来自鼻-口区域或胃肠道的粘膜出血，以及从伤口，溃疡或注射部位的渗出。

治疗剂量通常为0.1-100μg/kg病人体重/天，优选0.5-50μg/kg/天，较优选1-25μg/kg/天，准确的剂量由临床医生根据可接受的标准，考虑治疗疾病的特点和严重性，病人特质等来决定。剂量的确定在本领域普通技术人员的水平内。TPO给药通常在化疗或骨髓移植后或达到血小板计数＞20,000/mm³，优选＞50,000/mm³多达28天内进行。较通常地，TPO给药在一周或更少，通常在1至3天期间进行。通常治疗有效量的TPO为足以产生淋巴或骨髓祖先细胞的增殖和/或分化的临床显著增加，这种增加表现为成熟细胞的循环水平的增加(例如血小板，红细胞或噬中性白细胞)。血小板疾病的治疗将持续至血小板计数达到至少为20,000/mm³，优选50,000/mm³。TPO也可与其它细胞因子，例如IL-3，-6和-11；干细胞因子；红细胞生成素(EPO)；G-CSF和GM-CSF一起混合给药。在混合治疗的方案中，其它细胞因子的每日剂量通常为：EPO，≤150U/kg；GM-CSF，5-15μg/kg；IL-3，1-5μg/kg；和G-CSF，1-25μg/kg。与EPO的混合治疗，例如用在具有低水平的EPO的贫血病人中。

TPO还可在活体外使用，例如在自体骨髓培养物中。简而言之，在化疗之前，从病人体内取骨髓并用TPO处理，任选与一或多种其它细胞因子混合。接着在化疗后将处理的骨髓放回到病人中以加速病人的恢复。此外，TPO可用于骨髓的在活体外扩展或外周血先祖(PBPC)细胞。在化疗处理之前，可将骨髓用干细胞因子(SCF)或G-CSF刺激以使早期先祖细胞释放到外周循环中。可从外周血液中收集这些先祖细胞并浓缩，接着在培养基中用TPO处理，任选与一或多种其它细胞因子结合，包括，但不局限于SCF，G-CSF，IL-3，GM-CSF，IL-6或IL-11，以分化和增殖为高密度巨核细胞培养物，在高剂量化疗后该培养物可再放回病人体内。

TPO还可用作研究血细胞生成过程的实验室试剂。本发明的组合物和方法提供了用于该用途的贮存稳定的血小板生成素制剂。

通过下面非限制性实施例进一步说明本发明。

实施例

使用被转染的幼年仓鼠肾脏细胞(BHK 570细胞；ATCC CRL 10314)制备重组人和小鼠TPO。通过固定化MPL受体上的亲合层析或使用染料-配体亲合层析，离子交换层析组合的层析以及羟基磷灰石对蛋白质污染物的吸附，从细胞决定培养基中纯化TPO。在使用由编码人MPL受体的表达载体转染的BaF3细胞作为靶细胞的有丝分裂发生分析中分析TPO的生物活性(Vigon等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 89：5640-5644，1992)。BaF3是来自仓鼠骨髓的白介素-3依赖型的前淋巴样细胞系(Palacios和Steinmetz，细胞(Cell)41：727-734，1985；Mathey-Prevot等，分子细胞生物学6：4133-4135，1986)。在存在³H-胸苷的情况下将细胞置于实验样品中。通过与人TPO标准曲线比较定量掺入到细胞DNA的³H-胸苷的量。10U/ml定义为在有丝分裂发生分析中产生最大刺激的一半的量。

多乙氧基醚80(Tween 80)，等级NF，从Spectrum ChemicalMfg.Corp.，New Brunswick，NJ.获得。氯化钠(AR，USP)，磷酸钠，磷酸氢二钠，七元水合物(USP，TAC)，和磷酸钠，磷酸氢钠，一元水合物(USP)从Mallinkrodt Chemical Corp.，Chesterfield，MO获得。

实施例1

通过滤器回收和从与玻璃珠一起保温的溶液中的回收评价纯化的血小板生成素的表面吸附。将TPO样品稀释在适宜的缓冲液中(见表)用于试验。表1TPO^*          缓冲液                 添加剂^**小鼠，chrom.  20mM柠檬酸盐pH 4.0，6.0  -小鼠，chrom.  20mM柠檬酸盐pH 4.0，6.0  0.25％HSA小鼠，chrom.  20mM磷酸钾pH 6.0，8.0    -小鼠，chrom.  20mM磷酸钾pH 6.0，8.0    0.25％HSA小鼠，chrom.  20mM Tris pH 8.0         -小鼠，chrom.  20mM Tris pH 8.0         0.25％HSA小鼠，chrom.  -                        mito稀释液人，affin.    20mM柠檬酸盐               -

          pH 4.0，5.0，6.0，7.0，8.0人，affin.    -                          mito稀释液人，chrom.    50mM组氨酸pH5.5            -人，chrom.    50mM组氨酸pH5.0            0.01％多乙氧基醚80人，chrom.    50mM组氨酸pH5.5            0.01％多乙氧基醚80人，chrom.    50mM组氨酸pH6.0            0.01％多乙氧基醚80人，chrom.    50mM组氨酸pH5.5            0.05％多乙氧基醚80人，chrom.    50mM琥珀酸盐pH5.5          0.01％多乙氧基醚80人，chrom.    20mM磷酸钾pH6.0            -人，chrom.    20mM磷酸钾pH6.0            0.01％多乙氧基醚80人，chrom.    20mM磷酸钾pH6.0            0.01％多乙氧基醚80+

                                     5％蔗糖人，chrom.    20mM磷酸钾pH6.0            0.01％多乙氧基醚80+

                                     5％甘露糖醇人，chrom.    20mM磷酸钾pH6.0            0.01％多乙氧基醚80+

                                     1％PEG 3350人，chrom.    20mM磷酸钾pH6.0            5％蔗糖人，chrom.    20mM磷酸钾pH6.0            5％甘露糖醇人，chrom.    20mM磷酸钾pH6.0            1％PEG 3350人，chrom.    20mM磷酸钾pH6.0            0.13 M NaCl人，chrom.    20，50，100mM磷酸钾pH6.0   0.05％多乙氧基醚80+

                                     0.13M NaCl人，chrom.    20mM磷酸钾pH4.0，5.0，     0.05％多乙氧基醚80+

          6.5，7.0，8.0              0.13M NaCl人，chrom.    20mM磷酸钠pH5.0，5.5，6.0  0.05％多乙氧基醚80+

                                     0.14M NaCl人，chrom.    20mM组氨酸pH5.0，5.5，6.0  0.05％多乙氧基醚80+

                                     0.14M NaCl人，chrom.    20mM磷酸钠pH6.0            0.05％多乙氧基醚80人，chrom.    20mM磷酸钠pH6.0    0.14M NaCl人，chrom.    20mM磷酸钠pH6.0    0.14M NaCl+0.001％，

                             0.01％，0.05％

                             多乙氧基醚80人，chrom.    20mM磷酸钠pH6.0    0.14M NaCl+0.001％，

                             0.01％，0.05％

                             多乙基氧醚20^*chrom.＝色谱纯化；affin.＝亲和纯化。^**mito稀释液＝补充有10％FBS，1％L-谷氨酰胺，1％PSN抗生素混合物(青霉素，链霉素，新霉素)，0.001M丙酮酸钠，0.025M Hepes，0.00033％w/v巯基乙醇的RPMI 1640。

使用与注射器相连的0.2μm聚偏氟乙烯膜滤器(Durapore^TM滤器；Millipore，Bedford，MA)或Acrodisc^TM膜滤器(Gelman Sciences，AnnArbor，MI)测定滤器吸附。用手将TPO溶液推进通过滤器。把溶剂加入注射器之前、通过滤器之后取样。发现在含有0.25％人血清清蛋白的制剂中的重组小鼠TPO的回收高于没有清蛋白的制剂(见图1)。对于重组人TPO获得了类似的结果。未观测到测试范围(pH4-8)的pH产生的大的滤器回收差异，但回收在pH6.0时最大。当试剂中包含0.01％多乙氧基醚80时，也降低了重组人TPO的表面吸附(图2)。在存在多乙氧基醚80时发现等渗氯化钠进一步降低吸附(图3)。

使用玻璃珠在扩大的表面与体积比下进一步测试表面吸附。5℃下将0.5ml稀释的TPO溶液的样品(≈10μg/ml)放入试管振荡器中的1.0g玻璃珠(425-600μm)中。1.5，5和24小时后测定有丝分裂活性以评价作为时间函数的吸附。如图4所示，在24小时的试验期内，吸附随时间而增加。多乙氧基醚80比多乙氧基醚20对吸附降低的程度更大。随着多乙氧基醚80的浓度从0.001％增加到0.05％回收增加。多乙氧基醚80和等渗的氯化钠的混合对表面吸附的降低比仅有多乙氧基醚80时更为有效。

实施例2

在磷酸和组氨酸缓冲液中测定pH对溶液中TPO稳定性的影响。将亲合纯化和层析纯化的重组小鼠和人TPO的样品稀释在适宜的缓冲液中或用NaCl或HCl滴定以达到所需的pH(见表)。接着将样品贮存在各种温度下并通过如上所述的有丝分裂发生分析以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)，接着用蛋白质印迹法进行间歇分析。当适宜时，用作为时间的函数的剩余有丝分裂生成活性的对数-线性拟合的斜率来估测拟一级降解速率常数(K_obs)。

SDS PAGE/蛋白质印迹分析表明，亲合纯化的重组人TPO以依赖于pH和时间的方式经受蛋白质水解为低分子量变异体。在pH为6-8范围内，蛋白水解导致酶解成两个低分子量变异体(凝胶电泳测得为35和18kD)，作为温度的函数，水解随pH增加而增加。在pH≤5，明显观察到表观分子量稍低于亲本蛋白(凝胶电泳测得为60kD)的降解产物，并且作为温度的函数随pH降低而增加。

层析纯化的重组人TPO显示出不同的降解图谱。SDS PAGE/蛋白质印迹分析显示出，在pH≤5时，温度依赖性地酶解为两个低分子量蛋白(凝胶电泳测得为30和20kD)，随着pH降低蛋白水解增加。在pH＞6时未观察到明显的蛋白水解，然而，在增加pH和温度时形成高分子量蛋白聚集。所有降解产物的生物活性小于亲本蛋白。代表蛋白质拟一级降解速率(K_obs)的pH速率图谱(以K_obs-pH表示)表明作为温度函数的各种途径的相对降解速率的不同。30℃和37℃时的图谱相似，并在pH≈6时显示最大的稳定性。尽管在pH＞6时发生生物活性的迅速丧失，通过SDS PAGE和蛋白质印迹分析发现总的变化不明显。这些结果表明pH＞6时的降解主要借助于脱酰氨基作用，氧化作用，或其它一些电泳不能检测的机制来进行。5℃下，pH≤6时的降解速率相对稳定，表明在该pH范围降解途径具有高活化能(陡峭的温度依赖关系)，在该温度下没有明显地导致总的TPO丧失。

当比较用磷酸钠和磷酸钾缓冲液获得的结果时，发现作为pH函数的降解速率相同。当使用不同浓度的磷酸钾缓冲液时(20mM-100mM，pH6.0)未观察到明显的不同。然而，在pH范围为5-6，采用组氨酸作为缓冲液时，观察到有不同。37℃下，pH5.0时在组氨酸缓冲液中的降解比例大于在磷酸盐缓冲液中的降解速率，但在pH为5.5或6.0时，降解速率相同或在组氨酸中较低(图5)。虽然差异没有深刻含义，但在30℃下可见相似的结果。在5℃下，pH为5-6时，在组氨酸和磷酸盐缓冲液中降解速率相同。这些结果与在存在组氨酸时借助低pH降解途径的增加的降解一致，而组氨酸借助于高pH降解途径减少降解。由于随着温度降低，低pH降解途径被抑制，在5℃下，在存在组氨酸时的提高的降解不明显。

从上可见，应该理解虽然为了说明的目的本文描述了本发明特定的实例，但在不偏离本发明实质和范围的情况下可进行各种修改。因此，除所附权利要求外，本发明不受任何限定。

Claims (25)

1.一种组合物，包含血小板生成素；生理可接受缓冲液；一种选自非离子表面活性剂和多元醇的表面吸附抑制剂；和等渗量的生理可接受盐。

2.根据权利要求1的组合物，其为pH为5.0-7.0的水溶液。

3.根据权利要求2的组合物，pH为5.5-6.5。

4.根据权利要求1的组合物，其为冷冻干燥粉末。

5.根据权利要求1的组合物，其中所述血小板生成素为人血小板生成素。

6.根据权利要求1的组合物，其中所述缓冲液选自磷酸盐，乙酸盐，柠檬酸盐和组氨酸缓冲液。

7.根据权利要求6的组合物，其中所述缓冲液为磷酸缓冲液，所述组合物进一步包含足以降低血小板凝集的量的组氨酸。

8.根据权利要求1的组合物，其中所述表面吸附抑制剂为非离子表面活性剂。

9.根据权利要求8的组合物，其中所述表面吸附抑制剂为聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯。

10.根据权利要求9的组合物，其中所述聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯为多乙氧基醚20或多乙氧基醚80。

11.根据权利要求10的组合物，其中所述多乙氧基醚20或多乙氧基醚80以0.01％-1％(w/v)的浓度存在。

12.根据权利要求1的组合物，其中盐为NaCl，KCl，CaCl₂或MgCl₂。

13.根据权利要求1的组合物，进一步包含清蛋白。

14.根据权利要求1的组合物，进一步包含保存剂。

15.根据权利要求1的适宜于胃肠外使用的组合物。

16.一种降低血小板生成素与表面吸附的方法，包括在所述溶液与所述表面接触之前，向血小板生成素水溶液中加入有效量的选自非离子表面活性剂和多元醇的表面吸附抑制剂。

17.根据权利要求16的方法，其中所述表面吸附抑制剂为非离子表面活性剂。

18.根据权利要求17的方法，其中所述表面吸附抑制剂为聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯。

19.根据权利要求18的方法，其中所述聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯为多乙氧基醚20或多乙氧基醚80。

20.根据权利要求19的方法，其中所述多乙氧基醚20或多乙氧基醚80以0.01％-1.0％(w/v)的浓度加入到溶液中。

21.一种稳定血小板生成素组合物的方法，包括向所述组合物中加入有效量的组氨酸。

22.根据权利要求21的方法，其中所述有效量组氨酸为10-100mM。

23.根据权利要求21的方法，其中所述组合物为冷冻干燥粉末形式。

24.一种药物组合物，包含：

   血小板生成素；

   10-100mM磷酸盐缓冲液；

   0.01-1.0％多乙氧基醚20或多乙氧基醚80；和

   等渗量的氯化钠，所述组合物pH为约6.0。

25.根据权利要求24的组合物，进一步包含10-100mM组氨酸。

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