CN118633609A - 一种复配型生物农药杀菌防腐剂的配方及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种复配型生物农药杀菌防腐剂配方,主要是由20mg/L噻菌灵与10mg/L 14‑羟基芸苔素甾醇组成,噻菌灵与14‑羟基芸苔素甾醇的质量比为2:8、4:6、5:5、6:4、8:2中的一种。本发明选择以抑菌效果强且价格便宜,便于推广使用的14‑羟基芸苔素甾醇及化学农药噻菌灵进行一定比例的复配,通过复配组合得到能够对果蔬及农产品起到防腐作用的最适合配比,混合制出高效低毒绿色的生物防腐剂。
Description
技术领域
本发明涉及生物农药领域,涉及14-羟基芸苔素甾醇和化学农药噻菌灵复配形成的高效、低毒、绿色生物防腐剂。本技术发明的复配生物防腐剂药效比较强、价格较低、且能够降低对环境的污染以及减少对人体的危害,具有广阔的产业化前景及应用前景较好。
背景技术
14-羟基芸苔素甾醇(brassinolide,简称BR)是世界公认的第六大类植物生长调节剂,其功能全面,包括了促进生长、增加光合作用效率、促进种子萌发,增强抗逆和解除药害等多项功能。其中14-羟基芸苔素甾醇是五种国家行业标准成分中唯一的天然芸苔素,也是活性最高的芸苔素。同时研究也表明,芸苔素可以抑制多种真菌的生长,包括稻瘟病菌、小麦赤霉素、番茄灰霉病菌等。但是,芸苔素的抑菌作用相对较弱,通常需要与其他抗菌物质联合使用才能达到较好的效果。
噻菌灵(TBZ)俗称特克多、涕必灵、硫苯唑、噻苯咪唑、噻苯哒唑,具有内吸向顶传导性能,但不能向基传导。噻菌灵(TBZ) 属苯并咪唑类杀菌剂,是高效、低毒和广谱的内吸性杀菌剂,对子囊菌、担子菌和半知菌有抑制活性,用于防治多种作物真菌病害及果蔬防腐保鲜。在农业生产中也广泛使用。因此,TBZ 常在农产品及果蔬产品中残留,严重影响生态环境和人类健康。随着对外贸易的增加,各国对我国农产品的技术壁垒越来越苛刻。国内外对噻菌灵等苯并咪唑类杀菌剂的残留量十分重视,并制定了其残留限量标准,最低残留限量达0.05 mg/kg (即2.485μmol/L)。噻菌灵属于低毒杀菌剂,其对鱼类具有一定的毒性,污染环境和水源。噻菌灵的大量使用,对自然界的生态环境会有一定的破坏作用,在果蔬以及农产品中的残留,也影响到了人类的健康,其防治成本较高。
生物农药的研究与开发对于满足我国无公害农产品、绿色食品和有机食品生产中病虫害防治的需要,缓解农药残留带来的环境污染具有重要的意义,已成为我国科技界、产业界研究的热点之一。其在保障农业丰产增收,维护生态和谐,满足食品安全需求等方面均具有重要的作用与意义。生物农药是具有农药特性的用来防治病、虫、草等有害生物的生物活体及其产生的生理活性物质和转基因产物。与传统的化学农药相比生物农药具有对人畜和非靶标生物安全,环境兼容性好,不易产生抗性,易于保护生物多样性,来源广泛等优点。因此,高效生物农药的开发应用对人类健康、环境保护和农业的可持续发展都有极其重要的意义。我国在生物农药的研发方面市场需求较广阔。
发明内容
发明的目的:噻菌灵是一款市场销量很好的化学杀菌防腐剂,每年销量很大,但化学保鲜剂噻菌灵污染池塘和水源,影响环境和破坏生态,同时它在水果及蔬菜上的残留会危害人体健康。针对这个问题,我们采用当下流行的复配技术,通过使用无毒且抑菌效果强的植物活性成分和噻菌灵复配,减少防腐剂中噻菌灵的含量,同时增加杀菌性,降低毒性,还可以起增加产品作用,达到“1+1>2”的效果。本发明选择以抑菌效果强且价格便宜,便于推广使用的14-羟基芸苔素甾醇及化学农药噻菌灵进行一定比例的复配,通过复配组合得到能够对果蔬及农产品起到防腐作用的最适合配比,混合制出高效低毒绿色的生物防腐剂。
本发明的第一个方面提供了一种14-羟基芸苔素甾醇的配方及其制备方法,本发明采用的有效成分含量为0.0075%的14-羟基芸苔素甾醇,即100mL水中14-羟基芸苔素甾醇的含量为0.0075g,即使用的芸苔素的初始浓度是75mg/L。
本发明还提供了一种可溶性高且低毒的化学农药噻菌灵的配方及其制备方法,称取0.102g噻菌灵溶于50ml的甲醇溶液,待噻菌灵完全溶解后,用针管吸取已经溶解的噻菌灵甲醇混合液加入针式过滤器进行过滤除菌,过滤好的液体直接流入已经灭菌了的离心管中,再加蒸馏水200ml配置成400mg/L的噻菌灵母液。然后取750μl的噻菌灵母液加于15ml的PDA培养基中,稀释到20 mg/L的噻菌灵溶液。
本发明第二个方面提供了一种复配防腐剂14-羟基芸苔素甾醇与噻菌灵复配的配方,噻菌灵最适抑菌浓度20mg/L与14-羟基芸苔素甾醇的最适抑菌浓度为10 mg/L进行复配,复配最适比例为2:8。噻菌灵价格便宜,是市场上流行的具有广谱性抑菌效果的保鲜剂,防腐保鲜效果优越,但对环境危害较大。14-羟基芸苔素甾醇是植物活性成分,具有抗真菌和抑菌作用,能够有效地抑制霉菌和酵母菌的生长,可以作为天然的抗菌剂使用。14-羟基芸苔素甾醇市场价格为6.7元每100ml,价格便宜,与市场上流行使用的噻菌灵复配成本不高,便于推广。
相比于现有技术,本发明的有益效果为:
本发明是以14-羟基芸苔素甾醇以及化学农药噻菌灵为主的能够对果蔬以及农产品起到有效防腐作用的复配高效低毒绿色生物防腐剂,可以替代市场流通的噻菌灵化学农药对果蔬以及农产品的防腐作用,相比较单独用噻菌灵来对果蔬以及农产品进行防腐,能够起到更高效的作用,可以延长果蔬以及农产品等的储存时间,并且可以促进绿色生物农药的发展,同时由于噻菌灵成本高于14-羟基芸苔素甾醇,因此使用两者的复配,可在降低噻菌灵危害的同时降低噻菌灵的使用成本。
本发明将14-羟基芸苔素甾醇与噻菌灵进行一定的配比制出高效低毒绿色的生物防腐剂,减少噻菌灵的使用,从而减少噻菌灵对生态环境以及人类造成的危害。
附图说明
图1为噻菌灵对黑曲霉菌的抑菌率柱状图。图中Y轴为抑菌率,X轴为不同浓度噻菌灵。柱状图的颜色反映了不同浓度下的抑菌效果。图中可以看出,随着噻菌灵浓度的增加,抑菌率逐渐升高,但在特定浓度后,抑菌率并没有显著提高。由图可知,噻菌灵在10mg/L、20mg/L、40 mg/L的浓度下,对黑曲霉菌具有良好的抑菌效果。噻菌灵最适抑菌浓度为20mg/L。
图2为不同浓度14-羟基芸苔素甾醇对黑曲霉的抑菌率柱状图。图中Y轴为抑菌率,X轴为不同浓度14-羟基芸苔素甾醇。柱状图的颜色反映了不同浓度下的抑菌效果。图中可以看出,随着14-羟基芸苔素甾醇浓度的增加,抑菌率逐渐升高,但在特定浓度后,抑菌率并没有显著提高。由图可知,14-羟基芸苔素甾醇在10mg/L、20mg/L的浓度下,具有良好的杀菌效果。14-羟基芸苔素甾醇的最适抑菌浓度为10 mg/L。
图3为噻菌灵和14-羟基芸苔素甾醇复配对黑曲霉菌的抑菌率柱状图。图中Y轴为抑菌率,X轴为不同复配比例的噻菌灵和14-羟基芸苔素甾醇。柱状图的颜色反映了不同复配比例下的抑菌效果。图中可以看出,随着噻菌灵和14-羟基芸苔素甾醇复配比例的增加,抑菌率逐渐升高,但在特定复配比例后,抑菌率并没有显著提高。由图可知,噻菌灵和14-羟基芸苔素甾醇在复配比例2:8的浓度下,对黑曲霉菌具有良好的抑菌效果。最佳的复配比例为噻菌灵:14-羟基芸苔素甾醇为2:8。
图4为噻菌灵和14-羟基芸苔素甾醇复配对柑橘青霉菌的抑菌率柱状图。这张图和图3类似。由图可知,噻菌灵和14-羟基芸苔素甾醇在复配比例2:8的浓度下,对黑霉具有良好的抑菌效果。最佳的复配比例为噻菌灵:14-羟基芸苔素甾醇为2:8。
图5为噻菌灵和14-羟基芸苔素甾醇复配对甘薯长喙壳菌的抑菌率柱状图。这张图也和图3类似。由图可知,噻菌灵和14-羟基芸苔素甾醇在复配比例2:8的浓度下,对甘薯长喙壳菌具有良好的抑菌效果。最佳的复配比例为噻菌灵:14-羟基芸苔素甾醇为2:8。
图6为噻菌灵和14-羟基芸苔素甾醇复配对茶树叶枯病菌的抑菌率柱状图。这张图也和图3类似。由图可知,噻菌灵和14-羟基芸苔素甾醇在复配比例2:8的浓度下,对茶树叶枯病菌具有良好的抑菌效果。最佳的复配比例为噻菌灵:14-羟基芸苔素甾醇为2:8。
图7为不同配比下4种菌抑菌率柱状图,由图可知在2:8、4:6、5:5、6:4、8:2复配比例中,2:8复配比下有抑菌效果最好,均达到了90%以上的抑菌率。
图8为空白组豇豆,出现了腐烂以及发黄等现象。
图9为空白组提子,有腐烂现象,提子枝条上也有霉菌生长,枝条腐烂。
图10为复配组豇豆,豇豆有些发黄外总体效果良好腐烂没有空白组严重。
图11为复配组提子,提子除枝条端部有霉菌生长外无腐烂现象。
图12为20mg/L的噻菌灵组的豇豆,豇豆有些发黄外总体效果良好腐烂没有空白组严重,效果与复配组相差不大。
图13为20mg/L的噻菌灵组的提子,提子除枝条端部有霉菌生长外无腐烂现象,效果与复配组相差不大。
具体实施方式
实验方法:
本实验以植物生长调节剂14-羟基芸苔素甾醇及化学农药噻菌灵进行一定比例的复配,通过复配组合得到能够对果蔬及农产品起到防腐作用的最适合配比,混合制出高效低毒绿色的生物防腐剂。
完成对植物活性成分的提取、分析14-羟基芸苔素甾醇的理化性质,进行大量的抑菌实验来研究14-羟基芸苔素甾醇对致病真菌的抑制作用并计算其抑菌率。
随后进行农作物、果蔬防腐的温室实验,比较复配农药和噻菌灵的抑菌效果。
实验室条件:本研究所有实验均在江苏省药用植物生物技术重点实验室。该实验部门拥有工程技术中心,有一大批先进的实验仪器和检测设备,为科研提供了较好的硬件基础,具备展开室内抑菌实验的条件。
一、实验材料
1. 器材:分析天平、电子天平、称量纸、量筒、烧杯、玻璃棒、培养皿、灭菌竹签、酒精灯、恒温培养箱、高压灭菌锅、超净工作台、通风橱、橡胶手套、移液枪、灭菌打孔器;
2. 药品、试剂:
一种噻菌灵(由江苏诺恩作物科学股份有限公司提供)
一种14-羟基芸苔素甾醇(网上购买,由上海沪联生物药业股份有限公司生产)
一种马铃薯提子糖琼脂(PDA)培养基(由江苏省药用植物生物技术重点实验室提供)
3. 实验菌种
一种柑橘青霉菌(Penicillium digitatum)由本课题组从患病柑橘上分离得到。分离方法参考已发表文献 毛佳莉. 柑橘青霉菌高抗株靶标酶CYP51B基因启动子鉴定和功能解析[D].华中师范大学,2021.DOI:10.27159/d.cnki.ghzsu.2018.000350.
一种甘薯长喙壳菌(Cordyceps militaris)(样本编号:CF1.01127)由江苏省徐州市农业科学院提供,菌种来源参考已发表文献 李腾杰,梁孙妍,郭健衡,等.特基拉芽孢杆菌XK29挥发物2-甲基丁酸对甘薯长喙壳菌的抑制作用研究[J].微生物学报,2022,62(12):5018-5028.DOI:10.13343/j.cnki.wsxb.20220238.)
一种黑曲霉(Aspergilus niger ATCC 1015)由中粮生物科技股份有限公司提供。菌种来源参考已发表文献:刘梦涵.一种用于黑曲霉扩大培养的培养基及培养方法[J].当代化工,2024,53(01):167-170+175.
一种茶树叶枯病菌由本课题组从新鲜患病茶树叶上分离得到。分离方法参考已发表文献:戚丽. 游离态香气和糖苷类香气前体对茶树叶部致病真菌的抑制作用[D].安徽农业大学,2009.
目前四种菌在江苏省徐州市铜山区上海路101号江苏师范大学药食植物生物技术重点实验室404有备份(Email:1290835974@qq.com)
二、实验步骤
1、配置PDA培养基
(1)PDA配方:马铃薯200g、提子糖20g、琼脂20g、蛋白胨5g、磷酸二氢钾 3g、硫酸镁1.5g、蒸馏水1000ml
(2)PDA培养基的制作步骤
a.材料煮汁
1000ml水置于锅中,待烧开后加入200g去皮、切片的马铃薯煮20-30min,至薯片软而不烂,用八层纱布过滤,取滤液;
b.琼脂溶解和补水
将马铃薯滤液重新加入锅中,补水至1000ml,继续加热沸腾。加入琼脂,继续文火煮沸至琼脂完全溶解,再次补水至1000ml;
c.药品溶解
在琼脂溶解后加入提子糖20g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5g,蛋白胨5g;
d.分装后灭菌
将配制好的培养基倒入清洗干净的广口瓶,体积不要超过三角瓶的1/2,瓶盖不要拧紧(否则加热时压强升高易把瓶盖冲开),分装好后即可放入手提式高压灭菌锅中,扭紧锅盖,排净锅内冷空气,待温度升至122—124℃之间开始计时30min,灭菌结束;
e.倒平板,冷却
等三角瓶培养基降到50℃左右时,倒平板(温度太高易产生冷凝水,导致细菌污染,温度太低,培养基凝固)。
注 :平板培养皿事先在传递窗中进行紫外线灭菌30min,然后放入无菌超净工作台上,备用。
2、配置含单独药剂及复配药剂的PDA
(1)植物生长调节剂14-羟基芸苔素甾醇的配方及其制备:本实验采用有效成分含量为0.0075%的14-羟基芸苔素甾醇,即100 ml中14-羟基芸苔素的含量为0.0075 g,即使用的芸苔素的初始浓度是75 mg/L。
(2)化学农药噻菌灵的配方及其制备:称取0.102g噻菌灵溶于50ml的甲醇溶液,待噻菌灵完全溶解后,用针管吸取已经溶解的噻菌灵甲醇混合液加入针式过滤器进行过滤除菌,过滤好的液体直接流入已经灭菌了的离心管中,再加蒸馏水200ml配置成400mg/L的噻菌灵母液。然后取750μl的噻菌灵母液加于15ml的PDA培养基中,稀释到20 mg/L的噻菌灵溶液。
(3) 配制各个浓度梯度下含噻菌灵的平板,取五份已经灭好菌的PDA40 ml,加入噻菌灵母液,分别用移液枪吸取母液200 μl、400 μl、800 μl、1600 μl和3200 μl于40mlPDA中,每个梯度倒3个平板,每个平板大约12 ml,一共15个平板。
(4) 配制各个浓度下的含14-羟基芸苔素甾醇的平板,在超净台内用1000 μl移液器分别吸取14-羟基芸苔素(水剂)667 μl、1333 μl、2667 μl、5333 μl、10666 μl加入5份已经灭好的40 ml的PDA中,将40 ml的PDA分别倒入3个平板中,每个平板大约12 ml。
(5) 14-羟基芸苔素甾醇与噻菌灵复配的配方及制备:在找到噻菌灵与14-羟基芸苔素甾醇的最适抑菌浓度后,在此浓度下,按照噻菌灵与14-羟基芸苔素甾醇的质量比为2:8、4:6、5:5、6:4、8:2进行复配,适当降低噻菌灵的浓度,使用含量变少的噻菌灵与14-羟基芸苔素甾醇复配也能达到噻菌灵单独培养时的抑菌效果。
3、接菌
灭菌消毒:把准备好的培养基、病原菌、打孔器放入超净工作台,紫外照射30min、吹风15min;
4、打孔
用6mm打孔器分别在黑曲霉、柑橘青霉菌、甘薯长喙壳菌、茶树叶枯病菌菌株上打菌饼;
5、接菌
将已灭过菌的竹签尖部在酒精灯外焰下来回灼烧,等待几秒冷却后挑起打好的菌饼放置在PDA培养基上,含不同药剂的PDA培养基分别接种黑曲霉、柑橘青霉菌、甘薯长喙壳菌、茶树叶枯病菌每种菌接三个平板;
6、培养
用竹签轻轻按压,菌丝面向下,封口,放入恒温培养箱,培养12-24h后倒置培养,培养7天。
三、抑菌试验
1 试验目的
研究噻菌灵、14-羟基芸苔素甾醇和复配试剂对致病真菌的抑制作用并计算其抑菌率。
2 试验方法
(1)用2.5 mg/L、5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L噻菌灵对黑曲霉进行三组抑菌实验,测量第一天、第三天、第五天黑曲霉菌落直径,计算三组实验的抑菌率并求平均值,制作抑菌率柱状图。得出抑菌率最好的噻菌灵最低浓度为20mg/L。见图1。
(2)用1.25 mg/L、2.5 mg/L、5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L14-羟基芸苔素甾醇对黑曲霉分别进行三组抑菌实验,测量第一天、第三天、第五天黑曲霉菌落直径,计算三组实验的抑菌率并求平均值,得出抑菌率最好的14-羟基芸苔素甾醇最低浓度为10mg/L。制作抑菌率柱状图。见图2。
(3)在找到噻菌灵与14-羟基芸苔素甾醇的最适抑菌浓度后,在此浓度下,按照噻菌灵与14-羟基芸苔素甾醇的质量比为2:8、4:6、5:5、6:4、8:2进行复配,对黑曲霉、柑橘青霉菌、甘薯长喙壳菌、茶树叶枯病菌分别进行三组抑菌实验。测量第一天、第三天、第五天黑曲霉、柑橘青霉菌、甘薯长喙壳菌、茶树叶枯病菌菌落直径,计算三组实验的抑菌率并求平均值,制作抑菌率柱状图。见图3-7。
3 试验结果
实验结果显示,在做完大量复配实验并且进行抑菌率的分析之后,我们得出了对黑曲霉、柑橘青霉菌、甘薯长喙壳菌、茶树叶枯病菌等真菌有较好抑制效果的复配浓度比例为: 噻菌灵:14-羟基芸苔素甾醇为2:8时抑菌效果最好。并根据这个浓度比配置出了我们的产品CAB (噻菌灵-14-羟基芸苔素甾醇)。最后用配置出的产品对水果进行温室实验。
四、温室实验检测
1 试验目的
用新型高效低毒生物农药减少水果、蔬菜等在保存过程中产生危害的真菌所产生的影响,从而达到杀菌防腐的功效,减少对人体的不利影响,并且延长其保鲜时间。
2 试验条件
2.1 试验对象的选择
试验对象:豇豆、提子
2.2 环境条件
实验选在江苏省药用植物生物技术重点实验室。该实验部门拥有工程技术中心,有一大批先进的实验仪器和检测设备,为科研提供了较好的硬件基础;拥有大批温室,具备展开温室实验的条件。
3 试验设计和安排
(1)打开超净工作台紫外光照射半小时;
(2)将买来的新鲜提子、豇豆洗净擦干水分;
(3)在超净台上配置药剂;
将噻菌灵与14-羟基芸苔素甾醇按最佳比例复配配置成复配试剂,将复配试剂分装于小喷瓶中。
(4)将买来的提子、豇豆洗净擦干水分,分成对照组、复配组、噻菌灵组; 将复配试剂和抑菌率浓度最好的噻菌灵溶液分别喷相同剂量在对应水果蔬菜上,另一份喷等量的去离子水,三者之间形成相互对照。将水果蔬菜放入温室中培养,对照组、复配组、噻菌灵组,每组做三次重复实验,等待一个星期后观察结果并计算好果率和失重率并取平均值。
4 实验结果
4.1实验结果见图8-图13。
图8、图9为空白组豇豆、提子有腐烂现象,提子枝条上也有霉菌生长,枝条腐烂。图10、图11为复配组,图12、图13为10mg/L的噻菌灵组,两组的提子除枝条端部有霉菌生长外无腐烂现象;豇豆有些发黄外总体效果良好腐烂没有空白组严重。
4.2指标测定方法
(1)失重率的计算
失重率是指水果在贮藏中,由于水分蒸发或其他原因导致的重量损失。
失重率(%)=(贮藏前果实的质量-贮藏后果实的质量)/贮藏前果实的质量
以下是对照组、复配组、噻菌灵组三组重复实验失重率及平均失重率:
对照组1失重率=(495.23-336.16)/495.23=32.12%
对照组2失重率=(501.37-328.50)/501.37=34.48%
对照组3失重率=(498.88-315.39)/498.99=36.78%
对照组平均失重率=34.36%
复配组1失重率=(550.83-452.07)/550.83=17.93%
复配组2失重率=(598.78-485.73)/598.78=18.88%
复配组3失重率=(437.67-367.95)/437.67=15.93%
复配组平均失重率=17.58%
噻菌灵组1失重率=(539.74-454.30)/539.74=15.83%
噻菌灵组2失重率=(601.33-490.81)/601.33=18.38%
噻菌灵组3失重率=(489.71-406.56)/498.71=16.98%
噻菌灵组平均失重率=17.06%
质量单位:g
失重率(%) | 对照组 | 复配组 | 噻菌灵组 |
组1 | 32.12% | 17.93% | 15.83% |
组2 | 34.48% | 18.88% | 18.38% |
组3 | 36.78% | 15.93% | 16.98% |
平均失重率 | 34.36% | 17.58% | 17.06% |
复配组失重率明显小于对照组,说明保鲜效果显著,且复配效果与单独使用噻菌灵相当。
(2)好果率的计算
好果率=好果数(个)/样品数量(个)
以下是对照组、复配组、噻菌灵组三组重复实验好果率及平均好果率:
对照组1好果率=11/17=64.71%
对照组2好果率=9/19=47.37%
对照组3好果率=13/18=72.22%
对照组好果率平均值=61.43%
复配组1好果率=18/20=90.00%
复配组2好果率=21/24=87.50%
复配组3好果率=13/16=81.25%
复配组好果率平均值=86.35%
噻菌灵组1好果率=15/18=83.33%
噻菌灵组2好果率=24/27=88.89%
噻菌灵组3好果率=12/14=85.71%
噻菌灵好果率平均值=85.98%
好果率(%) | 对照组 | 复配组 | 噻菌灵组 |
组1 | 64.71% | 90.00% | 83.33% |
组2 | 47.37% | 87.50% | 88.89% |
组3 | 72.22% | 81.25% | 85.71% |
平均好果率(%) | 61.43% | 86.35% | 85.98% |
复配组好果率明显高于对照组,说明保鲜效果显著。
4.2安全性
供试果蔬保鲜剂对豇豆、提子无药害症状,施药人员施药后无不适感觉。
Claims (5)
1.一种复配型生物农药杀菌防腐剂配方,其特征在于, 由20mg/L噻菌灵与10mg/L 14-羟基芸苔素甾醇组成,噻菌灵与14-羟基芸苔素甾醇的质量比为2:8、4:6、5:5、6:4、8:2中的一种。
2.一种复配型生物农药杀菌防腐剂的制备方法, 其特征在于,筛选噻菌灵与14-羟基芸苔素甾醇的最适抑菌浓度,在最适抑菌浓度下,噻菌灵与14-羟基芸苔素甾醇的质量比为2:8、4:6、5:5、6:4、8:2进行复配。
3.根据权利要求1所述的复配型生物农药杀菌防腐剂的制备方法,其特征在于,噻菌灵与14-羟基芸苔素甾醇的质量比为8:2进行复配。
4.根据权利要求2所述的复配型生物农药杀菌防腐剂的制备方法,其特征在于,10mg/L的14-羟基芸苔素甾醇采用的有效成分含量为0.0075%的14-羟基芸苔素甾醇加水稀释而成。
5.根据权利要求2所述的复配型生物农药杀菌防腐剂的制备方法,其特征在于,20mg/L噻菌灵的制备方法为:称取0.102g噻菌灵溶于50ml的甲醇溶液,待噻菌灵完全溶解后,用针管吸取已经溶解的噻菌灵甲醇混合液加入针式过滤器进行过滤除菌,过滤好的液体直接流入已经灭菌了的离心管中,再加蒸馏水200ml配置成400mg/L的噻菌灵母液。然后取750μl的噻菌灵母液加于15ml的PDA培养基中,稀释到20 mg/L的噻菌灵溶液。
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CN202410698394.6A CN118633609A (zh) | 2024-08-13 | 2024-08-13 | 一种复配型生物农药杀菌防腐剂的配方及制备方法 |
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