CN118546950A - AtYUCCA1基因及其表达蛋白和增强马铃薯分枝的应用 - Google Patents

AtYUCCA1基因及其表达蛋白和增强马铃薯分枝的应用 Download PDF

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CN118546950A CN202410802460.XA CN202410802460A CN118546950A CN 118546950 A CN118546950 A CN 118546950A CN 202410802460 A CN202410802460 A CN 202410802460A CN 118546950 A CN118546950 A CN 118546950A
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贾婷
胡学运
白宏宝
辛龙炜
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Abstract

本发明公开了一种AtYUCCA1基因及其表达蛋白和增强马铃薯分枝的应用,本发明鉴定了一个新的增强马铃薯分枝及块茎数目的基因AtYUCCA1,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明将AtYUCCA1构建到过表达载体pPZP222中,构建获得重组载体,将重组载体转化到农杆菌中,再将马铃薯茎段浸泡在农杆菌重悬液中进行马铃薯的遗传转化,并在马铃薯体内高效表达。本发明通过在马铃薯植株中过量表达AtYUCCA1,显著促进了马铃薯的生长发育。本发明还发现,AtYUCCA1的过表达显著促进了马铃薯的分枝,匍匐茎产生以及地下匍匐茎分枝,并提高马铃薯地下块茎的数目。

Description

AtYUCCA1基因及其表达蛋白和增强马铃薯分枝的应用
技术领域
本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及AtYUCCA1基因及其表达蛋白和增强马铃薯分枝的应用。
背景技术
马铃薯(Solanum tuberosum L.)是世界上重要的食用作物之一,在农业生产中占据着重要地位,其块茎富含淀粉,是人们日常饮食的主要来源之一。中国是全球最大的马铃薯生产国,拥有广阔的马铃薯耕作区,但亩产仍低于世界平均水平。因此,培育优质高产马铃薯新种质,提高马铃薯的产量具有巨大的生产潜力。随着马铃薯需求量快速增长,在耕地面积有限的情况下,迫切需要通过现代生物技术手段,培育优质高产的马铃薯新品种,储备优质种质资源库。
分枝是植物空间组织的核心,首先,分枝增加了叶片数量,从而增强了光合作用的能力,为提高植物的生物量积累建立基础。其次,分枝能够使植物更有效地分配养分和水分,有助于平衡地上和地下部分的生长。另外,分枝的出现还可以延长植物的生长期,为植物生长提供更长时间的光合作用和营养积累。在农业生产中,最佳分枝与增加光合能力、提高资源利用效率和提高产量潜力有关。控制植物分枝,建立“理想株型”成为提高作物产量的有效手段之一。对马铃薯而言,分枝既影响地上的营养结构,也影响地下块茎的形成。合理的分枝有助于养分的均衡分配,减少单个块茎的负担,对于提升块茎的品质和商品价值具有重要意义。马铃薯的块茎是其匍匐茎末端膨大而来。因此,匍匐茎的数目及其分枝对于其块茎数目及最终产量具有决定性影响。匍匐茎分枝增多的可以促进更多的匍匐茎的产生,从而增加块茎产生的基数,进而提高产量。因此,通过增加分枝培育高产马铃薯不仅具有充分的理论基础,而且对于培育优质马铃薯种质,提高马铃薯产量,以及维护粮食安全具有重要意义。同时现有技术通常关注提高植物耐逆等提升作物的产量,而对从发育角度设计提升生产效率缺少足够重视。
发明内容
发明目的:针对现有技术中存在的不足,本发明提供一种增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1,有效提高马铃薯的分枝能力,通过增加分枝培育高产马铃薯,培育优质马铃薯种质,提高马铃薯产量。
本发明还提供所述增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1表达的蛋白和应用。。
技术方案:为了实现上述目的,本发明所述一种增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1,所述基因AtYUCCA1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
其中,用于扩增所述基因基因AtYUCCA1的引物对为SEQ ID NO.2:GCTCGGTACCCGGGGATCCATGGAGTCTCATCCTCACAAC;SEQ ID NO.3:TCTTCTCCTTTACTCATGGGTCGACGCGAGGATTTAGAGGT。
本发明所述的增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1表达的蛋白,所述蛋白其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
本发明所述的增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1的表达载体。
其中,所述表达载体以载体pPZP222为基础质粒,将pPZP222载体质粒进行线性化,将基因AtYUCCA1插入线性化的pPZP222中构建得到AtYUCCA1过表达载体。
作为优选,以原核表达载体以载体pPZP222为基础质粒,将pPZP222载体质粒进行双酶切线性化,酶切位点是BamHI和PstI,将基因AtYUCCA1和mGFP插入pPZP222中构建得到AtYUCCA1表达载体pPZP222-AtYUCCA1-mGFP,其中mGFP作为荧光基因。
其中,所述基因AtYUCCA1的5’端组装了组成型强启动子CaMV35S,在基因AtYUCCA1的3’端组装了E9-terminator。其中,强启动子CaMV35S它能使AtYUCCA1基因在马铃薯体内高效表达,E9-terminator可有效终止AtYUCCA1基因在马铃薯中的转录。
其中,所述表达载体组装有LB(T-Border left)和RB(T-Border right)序列,促使组装于其间的基因AtYUCCA1表达框架和筛选标记基因GmR可以整合至马铃薯受体细胞的染色体中。
本发明所述增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1的宿主细胞,所述宿主细胞优选是以农杆菌为出发菌株。
本发明所述的增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1或者所述的蛋白或者所述载体或者所述宿主细胞过表达在增强马铃薯分枝数量、促进匍匐茎产生、促进地下匍匐茎分枝、提高马铃薯地下块茎的数目以及促进产量中的应用。
本发明所述的增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1或者所述的蛋白或者所述载体或者所述宿主细胞在培育高分枝性能以及高产量的马铃薯种质中的应用。
本发明所述培育增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1植株的过程为:以拟南芥叶片为材料,克隆基因AtYUCCA1,以本实验保存公开报道序列的载体为模板,克隆出mGFP,然后将AtYUCCA1和mGFP同时构建到过表达载体pPZP222中,构建获得重组载体,将重组载体转化到农杆菌中,再将马铃薯茎段浸泡在农杆菌重悬液中进行马铃薯的遗传转化,在启动子CaMV35S的驱动下AtYUCCA1可在马铃薯体内高效表达。本发明通过在马铃薯植株中过量表达AtYUCCA1,显著增强了马铃薯的分枝能力,并促进匍匐茎产生及地下匍匐茎的分枝;此外,本发明还发现,AtYUCCA1的过表达显著提高马铃薯地下块茎的数目。因此,本发明除了为提高植物的产量提供参考,在保护粮食安全方面,具有广阔的应用前景。
有益效果:与现有技术相比,本发明具有以下优点:
本发明鉴定了一个新的增强马铃薯分枝能力以及促进作物产量的AtYUCCA1基因,为马铃薯分枝分子遗传改良提供新的基因资源。本发明通过茎段转化及组织培养实验,首次将基因AtYUCCA1导入到马铃薯中,成功创制了马铃薯的AtYUCCA1过表达株系,结果显示,与野生型相比,马铃薯过表达株系的分枝能力显著提升,匍匐茎数量增多,出现分枝且结薯数量明显增加。因此,通过基因AtYUCCA1的过量表达,提高植物分枝能力及作物产量具有潜在的应用价值。因此,本发明中的基因AtYUCCA1,在使马铃薯分枝增加的同时,提高了马铃薯的产量,可以用于培育性状更优的马铃薯种质资源具有较好的应用前景。
附图说明
图1为目的基因的克隆;
图2为表达载体pPZP222-AtYUCCA1-mGFP结构示意图;
图3为AtYUCCA1基因的马铃薯遗传转化过程;
图4为AtYUCCA1马铃薯遗传转化株系的PCR鉴定;
图5为AtYUCCA1过表达株系的地上部分表型分析;
图6为AtYUCCA1过表达株系的地下匍匐茎分析;
图7为AtYUCCA1过表达株系得到块茎分析;
图8为AtYUCCA1过表达株系块茎的皮色和肉色对比。
具体实施方式
以下结合附图和实施例对本发明作进一步说明。
本发明中的原料或者试剂均市售可得,其中载体pPZP222等为公知载体,Trimmingof N-glycans by the Golgi-localizedα-1,2-mannosidases,MNS1 and MNS2,iscrucial for maintaining RSW2 protein abundance during salt stress inArabidopsis."Molecularplant 11.5(2018):678-690.
实施例1
AtYUCCA1和mGFP的克隆
(1)以拟南芥的cDNA为模板,设计扩增引物,其中正向引物(YUCA1F)为:5’-GCTCGGTACCCGGGGATCCATGGAGTCTCATCCTCACAAC-3’,反向引物(YUCA1R)为:5’-TCTTCTCCTTTACTCATGGGTCGACGCGAGGATTTAGAGGT-3’。
(2)PCR扩增。
PCR反应体系如下:
PCR反应程序:
跑胶:取出PCR仪中的基因扩增产物,利用电泳仪将适量产物点在1%的琼脂糖凝胶上进行检测,25min左右后拿出应用成像系统进行观察,获得目的片段,如图1所示,经PCR产物测序,测得AtYUCCA1基因的序列如SEQ ID NO.1所示,其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
(3)mGFP序列的克隆,参照NCBI数据库中序列(GenBank:U87973.1)合成mGFP序列为模板,以合成的mGFP序列为模板,设计扩增引物,其中正向引物(mGFPF)为:5’-CCCATGAGTAAAGGAGAAGAACT-3’,反向引物(mGFPR)为:5’-GATACGAACGAAAGCTCTGCAGTTATTTGTATAGTTCATCCAT-3’。
(4)PCR扩增。
PCR反应体系如下:
PCR反应程序:
跑胶:取出PCR仪中的基因扩增产物,利用电泳仪将适量产物点在1.5%的琼脂糖凝胶上进行检测,25min左右后拿出应用成像系统进行观察,获得目的片段,如图1所示,对其PCR产物测序,测得mGFP基因的序列为SEQ ID NO.5所示。
实施例2
(1)本实验采用以pPZP222为基础质粒,将pPZP222载体质粒(该载体上带有启动子CAMV35S,终止子E9-ter、GmR基因表达盒、LB和RB序列)进行双酶切线性化,酶切位点是BamHI和PstI,将基因AtYUCCA1和mGFP插入pPZP222中构建得到AtYUCCA1表达载体pPZP222-AtYUCCA1-mGFP。
酶切反应体系、酶切反应程序、重组反应体系以及重组反应程序分别如下所示,酶切反应,琼脂糖凝胶电泳观察酶切条带,根据线性化载体和插入片段的浓度大小调整两者的加入体积,载体与插入片段摩尔比为1:2,利用重组酶(南京诺唯赞生物科技有限公司,型号C112-02-AA)进行重组后,将重组产物置于-20℃保存,用于后续大肠杆菌感受态的转化。
酶切反应体系:
酶切反应程序:
重组反应体系如下:
重组反应程序
将重组后产物转化到大肠杆菌感受态中进行培养。
(2)大肠杆菌转化
参照Trans1-T1 Phage Resistant Chemically Competent Cell产品说明书(全式金,中国),将已连接的产物与感受态细胞混合,经过冰浴、热激、复苏后,取适量涂布于LB平板上,倒置平板,37℃过夜培养。
(3)阳性克隆筛选及测序分析
从筛选培养板上挑选单菌落接种于LB液体培养基中,37℃、230rmp摇菌过夜;直接以培养过夜的菌液为模板进行重组转化子的PCR检测。
反应体系:
反应程序:
菌液PCR检测为阳性的克隆送生工生物工程股份有限公司(上海)测序鉴定。
将重组后产物转化到大肠杆菌感受态中进行培养,通过PCR检测阳性克隆菌株,提取质粒,确认AtYUCCA1的过量表达载体构建成功,命名为pPZP222-AtYUCCA1-mGFP,如图2所示,所构建的表达载体在AtYUCCA1的5’端组装了组成型强表达启动子CaMV35S,3’端组装了终止子E9-terminator,表达载体上装GmR基因表达盒,作为转基因马铃薯的筛选标记,同时表达载体上组装LB和RB序列,促使组装于其间的基因表达框架和筛选标记基因GmR整合至马铃薯受体细胞染色体中。
实施例3
AtYUCCA1基因的遗传转化
1、农杆菌转化
(1)取3μL测序无误的质粒pPZP222-AtYUCCA1-mGFP,加入至冰上融解后的50μL农杆菌GV3101感受态中,用枪头缓慢地混匀;
(2)将含有感受态混合液的1.5mL离心管置于冰上,孵育30min后,放入液氮中,冷却3min;
(3)将离心管转移至37℃金属浴中,融化5min,然后置于冰上,孵育2min;
(4)向离心管中加入1mL常温LB液体培养基,随后将离心管置于28℃摇床中,培养2~3h;
(5)6000rpm离心2min,收集菌体,弃800μL的上清,将剩余200μL的液体和菌体沉淀重悬;
(6)用枪头吸取100μL的混悬液,均匀涂布至含有相应抗性的LB固体培养基上,静置20min后,将培养基倒置于28℃恒温培养箱中,培养48h至获得含pPZP222-AtYUCCA1-mGFP的单菌落。
2、培育无菌苗
所有的无菌马铃薯苗都置于18-22℃,16小时光照(光照强度为80-110μmol/m2/s),8小时黑暗环境下培养。
(1)用发芽的块茎培育试管苗
a、将块茎上的芽切下,并用自来水冲洗。
b、先将切下的芽置于加有2滴吐温20的70%乙醇中浸泡1min,然后用10%的Domestos浸泡15min,再用无菌水清洗5遍,最后放在BM培养基中培养。
c、用装有BM培养基的90mm培养皿或者组培瓶对茎段和芽尖进行继代培养。
(2)用温室中正在生长的植株培育试管苗
a、选择生长旺盛,且未受到病虫害侵袭的植株,将其茎段和芽尖剪下,并立即用自来水冲洗。
b、先将茎段和芽尖剪成5至10mm的小段,然后用加有2滴吐温20的70%乙醇漂洗1min,接着用10%的Domestos浸泡15min,再用无菌水清洗5遍,最后放在BM培养基中培养。
c、用装有BM培养基的90mm培养皿或者组培瓶对茎段和芽尖进行继代培养。
3、接种、转化和再生
(1)从生长3-4周的马铃薯植株上截取叶片或长约10mm,切面直径不低于2.5mm的茎段节间部分(不含腋芽)。
(2)将外植体(数量不低于30个)放在预培养培养基平板中,预培养2天。(预培养2天可提高转化和再生效率)。
(3)在90mm平板培养皿中加入1mLMS20重悬的菌液,然后将外植体放入培养皿中,用封口膜密封,置于细菌恒温摇床中,22℃,50rpm转化侵染10-45min。(农杆菌菌液浓度以OD600=0.5~0.8,侵染时间以5~10min遗传转化效率较高。菌液浓度过高时,外植体伤口处易变黑,且在后期诱导愈伤组织的过程中很难抑制农杆菌的生长,易造成外植体污染,从而降低遗传转化率。在菌液浓度OD600=0.5~0.8范围内,菌液浓度升高,侵染时间相应缩短。故选择较低浓度OD600=0.5和较长时间10min侵染为最佳。)
(4)将农杆菌悬浮液倒入容器中,并使农杆菌失活。
(5)用无菌滤纸将外植体表面的水分吸干,然后置于CM培养基上(每个平板上放30个外植体)。将平板密封后,在18-22℃,弱光处(光照强度为20μmol/m2/s)转化48小时。
(6)然后将转化好的外植体置于CMC培养基上进行共培养,每个平板上的外植体应低于10个。将平板密封后,在18-22℃,充足光照处(光照强度为80-110μmol/m2/s)培养。
(7)12天后,将CMC培养基中的外植体转移到CMCK培养基中进行培养。
(8)每14天更换一次新的CMCK培养基。
(9)愈伤组织和丛生芽在4周后出现,然后继续培养。当大约第三次换CMCK培养基时,小心剪下5-10mm左右的丛生芽,然后置于SM培养基中。
(10)继续每14天转移一次外植体,同时剪下后长出丛生芽,确保每个芽发育成单独的植株。
4、选择和进一步生长转基因的丛生芽
(1)在SM培养基中培养14天后,移出存活的苗(即那些仅从芽的伤口处长出根的苗)。剪取10-15mm的芽尖,然后放在新的SM培养基中进行2次筛选。
(2)当根系发育良好的试管苗长到4-5个茎节时,洗掉多余的琼脂,就可以移栽到装有混合肥的3L花盆中,并放到温室中,控制温度在15-20℃(光照强度为150μmol/m2/s,光周期为16小时),并保持土壤湿润,时间为2天。
(3)若仔细遵循上述步骤,移植成功率通常能达到100%。生长旺盛的植株在开花期应每周施加液体肥料(1:1:1N:P:K)。最后每个植株通常都能结7-10个薯块。
(4)可以在低温条件下(暗处,4℃),将转基因植株上获得的薯块来保存转基因株系。
本实施例中采用的培养基如下所示,根据实验需要准备合适体积的培养基,分装至Durandbottles(蓝口瓶)中,并在121℃下高压蒸汽灭菌20min,同时对抗生素进行过滤消毒。然后在超净工作台中,先将生长调节剂母液加入培养基中,再分装至10个9cm的培养皿或组培瓶中。
植物生长必需培养基(BM):1×MS含维生素的基本培养基4.4g/L(Duchefaproduct no.MO 22),20g/L蔗糖,用蒸馏水定容至1L,并调节pH至5.8。加入8.0g/L的琼脂粉,经高压蒸汽灭菌后,于4℃保存。
MS20培养基:即液体BM培养基,成分和上面相同,但是不加琼脂粉。
MS20培养基:加有20g蔗糖的MS培养基;预培养R3B培养基配方:MS30+2.0mg·L-1NAA+1.0mg·L-16-BA;
共培养基(CM):在BM培养基中加入0.2mg/L的NAA,0.02mg/L的GA3,2.5mg/L的玉米素核苷(ZR),8g/L的琼脂粉。
第一阶段再生培养基(CMC):在CM培养基中加入500mg/L的头孢霉素(已用过滤方式灭菌,可根据是否有效抑制农杆菌适当调整头孢霉素的工作浓度,最低可为300mg/L;头孢霉素浓度降低有利于外植体分化发育,过高会导致外植体褐化。)。
第二阶段再生培养基(CMCK):在BM培养基中加入0.02mg/L的NAA,,0.02mg/L的GA3,2mg/L的脱叶灵(Thidiazuion,TDZ),500mg/L的头孢霉素(已用过滤方式灭菌),筛选抗性根据所转化农杆菌对应抗性确定为Gentamicin。
选择培养基(SM):在BM培养基中加入500mg/L的头孢霉素(已用过滤方式灭菌),50mg/L的筛选抗性Gentamicin。
LB培养基:10g/L的胰蛋白胨;10g/L的酵母提取物;10g/L的NaCl,pH=7.5;18g/L的琼脂粉。
马铃薯的遗传转化流程图如图3所示。
实施例4
选取以上实施例3获得可在SM培养基中正常生长的马铃薯苗,提取叶片的DNA,检测:外源基因AtYUCCA1在转化株系中的表达情况。设计鉴定引物,其中,正向引物为SEQ IDNO.6:5’-CCCTGAATATTACCCAAAATACCCT-3’,反向引物为SEQ ID NO.7:5’-CGTGCCGCTTCATATGATCT-3’。以构建的载体为阳性对照,野生型马铃薯植株及不添加模板的反应体系为阴性对照。
鉴定PCR反应体系:
PCR反应程序:
由图4可知,获得可稳定遗传的阳性转基因植株,即为AtYUCCA1过表达马铃薯株系。
实施例5
AtYUCCA1过表达株系的地上部分表型分析
选取长势一致的AtYUCCA1过表达株系OE-2和OE-4及野生型马铃薯植株,移栽至营养钵中,每钵一棵,置于22℃的光照培养箱中,16h/8h(昼/夜),相对湿度70%的培养箱中正常培养。如图5所示,培养2周时可知,过表达株系OE-2和OE-4均产生明显分枝。继续生长4周时,可在过表达株系观察到地上匍匐茎的产生。而同期野生型植株既无分枝现象,又无地上匍匐茎产生。此外,统计分析的结果显示,与野生型相比,过表达株系的株高,鲜重以及茎秆横切直径均显著高于同期野生型植株。这些结果显示,与野生型相比,AtYUCCA1过表达株系的分枝增加,生长速率显著增加。这说明AtYUCCA1的过表达可显著增加马铃薯的分枝,促进匍匐茎的产生及植株生长发育。
实施例6
AtYUCCA1过表达株系的匍匐茎分枝表型分析
匍匐茎的数量及分枝对于马铃薯块茎数目具有决定性影响。选取8周龄的野生型马铃薯及AtYUCCA1过表达株系OE-2和OE-4的地下匍匐茎对比可知,过表达株系的匍匐茎出现多个分枝,显著高于野生型植株,如图6的结果所示。这些结果显示AtYUCCA1过表达株系的地下匍匐茎分枝数目增加。说明AtYUCCA1促进了地下匍匐茎的分枝,对于提高马铃薯块茎数目及产量具有潜在价值。
实施例7
AtYUCCA1过表达株系的结薯产量分析
马铃薯是一种重要的粮食作物,块茎是其收获器官。为了进一步分析,AtYUCCA1过表达株系的结薯量是否提高,对8周龄的AtYUCCA1过表达株系OE-2和OE-4及野生型马铃薯的匍匐茎及块茎数量进行了统计分析。如图7的结果所示,与野生型马铃薯相比,过表达株系的地下匍匐茎数量显著增加,同时,AtYUCCA1过表达株系块茎数量也显著高于野生型。这些结果说明,AtYUCCA1过表达促进了马铃薯的地下匍匐茎及块茎的发生,同时也促进了块茎的生长。这些优良农艺性状对于提高马铃薯的产量具有重要意义。
实施例8
AtYUCCA1过表达株系块茎的皮色和肉色对比
马铃薯块茎皮色和肉色具有重要意义,不仅有助于满足市场对多样化产品的需求,还在育种、农业生产、产品质量控制和市场营销等方面发挥着关键作用。不同的皮色(如白色、红色、紫色)可以满足市场对多样化产品的需求。如图8所示,对8周龄的AtYUCCA1过表达株系的块茎和野生型块茎进行观察可知,两者的皮色一致均为粉红色。说明AtYUCCA1的表达不影响块茎的表皮颜色。类似的,进一步观察其肉色可知,AtYUCCA1过表达株系的块茎和野生型块茎的肉色仍保持一致,均为黄色。这种一致性说明,尽管AtYUCCA1基因的过表达促进了马铃薯的分枝、匍匐茎及块茎的产生,但其块茎的皮色和内部肉色仍保持不变。

Claims (10)

1.一种增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1,其特征在于,所述基因AtYUCCA1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1,其特征在于,用于扩增所述基因基因AtYUCCA1的引物对为SEQ ID NO.2:GCTCGGTACCCGGGGATCCATGGAGTCTCATCCTCACAAC;SEQ ID NO.3:TCTTCTCCTTTACTCATGGGTCGACGCGAGGATTTAGAGGT。
3.一种权利要求1所述的增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1表达的蛋白,其特征在于,所述蛋白其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
4.一种含有权利要求1所述的增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1的表达载体。
5.根据权利要求4所述的表达载体,其特征在于,所述表达载体优选以载体pPZP222为基础质粒,将pPZP222载体质粒进行线性化,将基因AtYUCCA1插入线性化pPZP222中构建得到AtYUCCA1过表达载体。
6.根据权利要求4或者5所述的表达载体,其特征在于,所述基因AtYUCCA1的5’端组装了组成型强启动子CaMV35S,在基因AtYUCCA1的3’端组装了E9-terminator。
7.根据权利要求4或者5所述的表达载体,其特征在于,所述表达载体装有LB和RB序列,促使组装于其间的基因AtYUCCA1表达框架和筛选标记GmR基因可以整合至马铃薯受体细胞的染色体中。
8.一种含有权利要求1所述增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞优选是以农杆菌为出发菌株。
9.一种权利要求1所述的增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1或者权利要求3所述的蛋白或者权利要求4所述载体或者权利要求8所述宿主细胞过表达在增强马铃薯分枝数量、促进匍匐茎产生、促进地下匍匐茎分枝、提高马铃薯地下块茎的数目以及促进产量中的应用。
10.一种权利要求1所述的增强马铃薯分枝的基因AtYUCCA1或者权利要求3所述的蛋白或者权利要求4所述载体或者权利要求8所述宿主细胞在培育高分枝性能以及高产量的马铃薯种质中的应用。
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