CN1184935A - 检测抗原抗体用预包被载体及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种检测抗原抗体用预包被载体及其制备方法,预包被载体预包被有至少两种不同的抗原或不同的抗体或非相应的抗原抗体,本发明只需一次标本即可检测出几种不同的抗体、抗原或非相应的抗体抗原。
Description
本发明涉及一种检测抗原抗体用预包被载体及其制备方法。
随着免疫学技术的不断发展，免疫学诊断在临床许多疾病的诊断中越来越明显地显示出了其重要性，如各型病毒性肝炎的诊断，许多肿瘤的诊断，艾滋病的诊断等等，都可通过检测其相应的抗原或抗体而作出诊断结论。酶联免疫吸附测定(ELISA)法，以其灵敏度高和操作简便等优点，已成为临床免疫诊断中的常规方法。吸附有抗原或抗体的预包被载体是酶联免疫吸附测定中的主要材料之一。要测定某一抗原或某一抗体，就要用包被有相应抗体或抗原的预包被载体。在临床上要测的抗原或抗体种类很多，因此相应的预包被载体种类也很多。但目前普遍采用的预包被载体所存在缺点是：一种预包被载体只能进行一种抗原或一种抗体的检测，而在实际工作中，有许多情况是需要对同一份标本进行几种抗原或几种抗体或抗原和抗体的检测。如对乙型肝炎患者为了解其病情及制订下一步治疗方案，往往要进行五种不同的抗原或抗体的检测；又如对献血员的筛选，目前国家已规定对献血员在献血前必须进行乙肝、丙肝及艾滋病病毒感染指标的检测。在这些情况下，目前逐项检测的办法是相当繁琐的。如对乙肝病人要用五种预包被载体及其配套试剂进行五次检测，同一份标本要取五次，类似的操作如加样、温育、洗板、显色等都要重复五次才能得到结果；同样对献血员的筛选，也要进行三次检测，类似的操作重复三次，这样不仅在人力、物力及时间上是一极大浪费，而且给受检者增加了痛苦。
本发明的目的是提供一种能够克服上述技术不足部分的检测抗原抗体用预包被载体及其制备方法。
本发明的目的是这样实现的：检测抗原抗体用预包被载体及其制备方法，预包被载体预包被有至少两种不同的抗原或不同的抗体或非相应的抗原抗体。预包被载体为微量反应板(条)及薄膜(片)。预包被载体为微量反应板(条)，时，其制备方法是将至少两种不同的抗原或不同的抗体或非相应的抗原抗体溶于PH＝9.6的碳酸盐缓冲液中制成预包被液，在微量反应板(条)上每孔加入100μl，置37℃、1-4小时后洗4遍，封闭、干燥后装入有干燥剂的袋内密封，并置于4℃保存待用。预包被载体为薄膜(片)时，其制备方法是将至少两种不同的抗原或不同的抗体或非相应的抗原抗体溶于PH＝9.6的碳酸盐缓冲液中制成预包被液，并将其点在薄膜(片)上，每点为10μl，室温干燥30分钟，封闭、干燥后装入有干燥剂的袋内密封，置室温干燥处贮存待用。使用时，根据受检者所检项目的不同，选用相应的预包被载体，只需用一次标本即可检测出所检的几种不同的抗体或不同的抗原或非相应的抗体和抗原。
本发明的优点：一、操作简便、它只需用一次标本即可检测出几种不同的抗体、抗原或非相应的抗体和抗原，减轻了受检人员的痛苦；二、制作方法简单、便于广泛应用。
实施例1：
包被有抗-HBs和抗-HBe的微量反应板(条)的制备方法。
取抗-HBs和抗-HBe溶于PH9.6的碳酸盐缓冲溶液中，浓度为8-12μg/ml，于微量反应板(条)凹孔中，每孔加100μl，然后置37℃、1-4小时后洗4遍，然后进行封闭、干燥，并将其装有干燥剂的密封袋中密封，置温度为4℃的环境下保存备用。
实施例2：
包被有HCV抗原，HIV-1/2抗原和HBV表面抗体的薄膜(片)的制备方法。
取HCV抗原、HIV-1/2抗原和HBV表面抗体溶于PH9.6的碳酸盐缓冲液中，其浓度分别为0.06-0.14μg/ml、0.1-0.4μg/ml和8-12μg/ml，此预包被液于薄膜(片)上，每点加10μl，点距为1.5-3cm，室温30分钟后封闭、干燥、密封，于室温干燥处贮存备用。
实施例3：
用包被有抗-HBs和抗-HBe的微量反应板(条)检测血清标本中的HBsAg和HBeAg。
1、取所需用量的预包被微量反应板(条)在记录纸上注明阴、阳性对照、空白及各样本的位置。设阴、阳性对照各2孔，空白对照1孔；
2、分别加50μl待测样本和阴、阳性对照于相应孔内；
3、每孔加酶标记物溶液50μl(空白对照孔不加)，轻拍混匀后封板；
4、置37℃，30分钟；
5、扣去孔内液体，洗涤4次，每次洗后均需扣干；
6、每孔加底物A50μl，底物B50μl，轻拍混匀后，于室温避光静置15分钟；
7、每孔加入终止液A50μl，轻拍混匀，用空白孔校零，于酶标仪450nm处，读取各孔吸光度值，以样本OD值≥2.1×阴性平均值者判为HBsAg，阳性，否则为HBsAg阴性；
8、重复步骤5；
9、每孔加底物C100μl，置37℃、15分钟；
10、每孔加终止液B50μl，轻拍混匀，以空白孔校零，于酶标仪405nm处，读取各孔吸光度值，以样本OD值≥2.1×阴性对照平均OD值者，判为HBeAg阳性，否则为HBeAg阴性。
实施例4：
用包被有HCV抗原，HIV-1/2抗原和HBV表面抗体的薄膜(片)检测待测标本中的抗-HCV抗体，抗-HIV-1/2抗体和HBsAg，用于对献血员的筛选。
1、取所需用量大小的预包被薄膜(片)，并在记录纸上注明薄膜(片)上的阴、阳性对照、空白及各样本的位置，设定阴、阳性对照各2点，空白对照1点；
2、分别加10μl待测样品和阴阳性对照于相应点处，室温静置10分钟；
3、用洗涤液将薄膜(片)连续洗涤3次，每次3分钟，用吸水纸吸干；
4、取与薄膜(片)同样大小的滤纸，将其用酶标记物充分浸透，然后将其与薄膜(片)相贴，室温静置10分钟；
5、重复步骤3；
6、取与薄膜(片)同样大小的滤纸，将其用显色剂充分浸透，然后将其与薄膜(片)相贴，室温静置5分钟，立即冲诜吸干，即可阅读结果；
7、结果判断
加样点显色与阴性对照相似或浅于阴性对照者判为阴性；
加样点显蓝色与阳性对照相似或深于阳性对照者判为阳性。
阳性标本应作进一步确证试验。
Claims (4)
1、一种检测抗原抗体用预包被载体及其制备方法，其特征在于：所说的预包被载体预包被有至少两种不同的抗原或不同的抗体或非相应的抗原抗体。
2、根据权利要求1所述的检测抗原抗体用预包被载体及其制备方法，其特征在于：所说的预包被载体为微量反应板(条)及薄膜(片)。
3、根据权利要求1或2所述的检测抗原抗体用预包被载体及其制备方法，其特征在于：所说的预包被载体为微量反应板(条)时，其制备方法是将至少两种不同的抗原或不同的抗体或非相应的抗原抗体溶于PH＝9.6的碳酸盐缓冲液中制成预包被液，在微量反应板(条)上每孔加入100μl，置37℃、1-4小时后洗4遍，封闭、干燥后装入有干燥剂的袋内密封，并置于4℃保存待用。
4、根据权利要求1或2所述的检测抗原抗体用预包被载体及其制备方法，其特征在于：所说的预包被载体为薄膜(片)时，其制备方法是将至少两种不同的抗原或不同的抗体或非相应的抗原抗体溶于PH＝9.6的碳酸盐缓冲液中制成预包被液，并将其点在薄膜(片)上，每点为10μl，室温干燥30分钟，封闭、干燥后装入有干燥剂的袋内密封，置室温干燥处贮存待用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN96115734A CN1184935A (zh) | 1996-04-09 | 1996-04-09 | 检测抗原抗体用预包被载体及其制备方法 |
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| CN96115734A CN1184935A (zh) | 1996-04-09 | 1996-04-09 | 检测抗原抗体用预包被载体及其制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1184935A true CN1184935A (zh) | 1998-06-17 |
Family
ID=5122959
Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
| CN96115734A Pending CN1184935A (zh) | 1996-04-09 | 1996-04-09 | 检测抗原抗体用预包被载体及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1184935A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003104808A1 (fr) * | 2002-06-06 | 2003-12-18 | Chengdu Kuachang Science & Technology Co., Ltd. | Nouvelle plaque de sondes pour reaction antigene-anticorps, trousse de reactif et procede utilisant cette plaque |
-
1996
- 1996-04-09 CN CN96115734A patent/CN1184935A/zh active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003104808A1 (fr) * | 2002-06-06 | 2003-12-18 | Chengdu Kuachang Science & Technology Co., Ltd. | Nouvelle plaque de sondes pour reaction antigene-anticorps, trousse de reactif et procede utilisant cette plaque |
| CN1333254C (zh) * | 2002-06-06 | 2007-08-22 | 成都夸常科技有限公司 | 一种基于抗原－抗体反应的新型探针板以及使用该探针板的试剂盒及方法 |
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |