CN118304233B - 一种改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物及其应用，属于化妆品技术领域；本发明提供的组合物包括以下重量份的组分：金花茶花提取物0.5‑10份、蛇床子提取物0.1‑8份、4‑叔丁基环己醇0.01‑2份、金属硫蛋白0.005‑1份、地黄提取物0.03‑3份。本发明提供的组合物能有效的抑制TRPV1受体，降低皮质醇对敏感皮肤的损伤，从而舒缓敏感皮肤的敏感状态，减少瘙痒、刺痛、灼热等不适感受，改善干燥、红斑、刺痛等皮肤反应，且可明显提升敏感皮肤人群的积极、愉悦情绪，从皮肤感知、皮肤状态、敏感皮肤人群情绪三个方面综合提升敏感皮肤舒适度，可达到优异的缓解敏感的效果。并且，本发明提供的改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物及其应用的组分来源天然，制备方法简单，适用于实际生产。
Description
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，尤其涉及一种改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物及其应用。
背景技术
敏感性皮肤特指皮肤在生理或病理条件下发生的一种高反应状态，主要发生于面部，临床表现为受到外界因素刺激时皮肤易出现灼热、瘙痒及疼痛等主观症状。研究已知，敏感性皮肤的症状与神经向靶点密切相关，瞬时受体电位通道(Transient receptorpotential,TRP)是一类位于多种细胞质膜上的离子通道群，其中TRPV1通道的激活，是皮肤不适感的关键触发器。
然而，随着科技和经济的发展，敏感肌面对的外界诱因愈发复杂，这会导致皮肤敏感度增加、敏感持续时间长，皮肤耐受性急剧降低，这使得敏感皮肤人群在解决皮肤问题时挑战性更大。由此，敏感皮肤人群在日常生活中会产生很多焦虑，且这种负面的情绪会增加皮肤的敏感度，与皮肤不适反应联合影响皮肤健康。皮质醇是一种压力激素，在皮肤细胞表面上就有大量的糖皮质激素受体，当外界因素的压力或心理性的压力(焦虑)都会促进皮质醇的分泌，会引起皮肤敏感反应，如干燥、红斑。影响敏感皮肤人群的身心健康和生活质量，特别是中、重度敏感皮肤人群。因此，敏感性皮肤不仅仅是一种皮肤问题，敏感皮肤人群在日常生活中的焦虑也无处不在，其无法达到皮肤和精神两个层面在外界刺激下的舒缓和安适的积极状态，即无法达到皮肤舒适感的状态。
然而，一方面，虽然现有技术中提供了多种能够降低皮肤不适感的TRPV1受体通道抑制剂，但是TRPV1受体通道抑制剂多数对敏感皮肤人群不友好，缺乏临床试验，且高度特异性的抑制剂在商业上是不可用的，实用性不强；另一方面，现有技术中忽略情绪对皮肤的影响以及皮肤感知和精神两者协调的重要性，敏感皮肤长期处于屏障受损状态，时刻受到不同外界因素对皮肤的健康的威胁，因此迫切需要研发出能够降低敏感皮肤不适感，并帮助敏感皮肤人群在复杂环境中获得良好的皮肤舒适感的安全、温和的成分或产品，满足敏感皮肤消费者的需求。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种能够有效的改善敏感皮肤的不适反应，缓解灼烧、刺痛、瘙痒、泛红等症状，提升使用者愉悦感受的一种改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物及其应用。
为实现上述目的，在本发明的第一方面，本发明提供了一种改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物，所述组合物包括以下重量份的组分：
金花茶花提取物0.5-10份、蛇床子提取物0.1-8份、4-叔丁基环己醇0.01-2份、金属硫蛋白0.005-1份、地黄提取物0.03-3份。
本发明提供的改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物通过选择合适重量份的金花茶花提取物、蛇床子提取物、4-叔丁基环己醇、地黄提取物和金属硫蛋白，5种组分能够相互协同，有效的抑制TRPV1受体，抑制“压力因子”皮质醇分泌过多引起的皮肤损伤，从而舒缓敏感皮肤的敏感状态，减少干燥、红斑、瘙痒、刺痛等，进而能够提升敏感皮肤舒适度，达到优异的缓解敏感的效果。
具体地，金花茶花是一种山茶科山茶属植物的花朵，可用来食用、入药，非常珍贵，用金花茶花冲泡出来的茶，不但茶汤金黄，而且营养丰富，有益于养生，具有清热止渴、润肺止咳、调节血脂等功效。蛇床子最早收录于《神农本草经》，具有数千年的医疗实践应用，别名野茴香、野胡荽，为伞形科植物蛇床的干燥成熟果实，具有浓郁的芳香气息，其性味辛、苦、温，具有温肾壮阳、杀虫止痒的功效。4-叔丁基环已醇是一种TRPV1拮抗剂，能够对TRPV1激活诱导的刺激反应有良好的缓解作用。地黄属于玄参科植物，可以起到清热凉血，养阴生津的作用，主要成分包含苷类、低聚糖类、氨基酸等，具有降血糖、抗衰老、抗肿瘤的作用。金属硫蛋白是一种低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白，参与维持铜、锌金属的稳态，介导清除自由基对抗氧化应激的重金属解毒的功能。本发明将上述5种组合物复配使用，能够协同取得缓解敏感皮肤人群的多种不适感知和负面情绪，达到高效舒缓皮肤的效果，为敏感皮肤提供一种高质量的舒适感。
作为本发明所述组合物的优选实施方式，所述组合物包括以下重量份的组分：金花茶花提取物0.8-5份、蛇床子提取物1-5份、4-叔丁基环己醇0.1-1.5份、金属硫蛋白0.008-0.1份、地黄提取物0.05-0.5份。
作为本发明所述组合物的优选实施方式，所述组合物包括以下重量份的组分：金花茶花提取物1份、蛇床子提取物3份、4-叔丁基环己醇1份、金属硫蛋白0.01份、地黄提取物0.1份。
本发明研究发现，改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物中组分的重量份会对产品的性能带来影响，当进一步选择组分的质量份在上述范围内时，得到的产品对TRPV1通道的抑制作用更强，且能更有效的降低压力物质皮质醇对皮肤的损害，进而具有更优异的缓解敏感皮肤表观症状、提升皮肤舒适度的作用。
作为本发明所述组合物的优选实施方式，所述地黄提取物、4-叔丁基环己醇和金花茶花提取物的质量比为1：(3-12)：(6-20)。
本发明研究发现，组合物中的地黄提取物、4-叔丁基环己醇和金花茶花提取物的质量比在一定程度上也会影响到产品的综合性能，当进一步选择地黄提取物、4-叔丁基环己醇和金花茶花提取物的质量比为1：(3-12)：(6-20)时，产品对TRPV1受体的抑制能力更强，且能更大幅度改善敏感皮肤中的皮质醇升高对皮肤的损伤，进而取得更为优异的缓解敏感症状的作用。
作为本发明所述组合物的优选实施方式，所述金花茶花提取物的制备方法包括以下步骤：取金花茶花粉末与乙醇水溶液混合提取，随后浓缩提取液并干燥，得金花茶花提取物。
本发明研究发现，当采用将金花茶花粉末与乙醇水溶液混合提取的方法时，得到金花茶花提取物能够很好的与其他组分配合，实现优异的舒缓敏感、提升敏感皮肤舒适度的作用。具体地，混合提取的方法可以为浸渍、超声提取、回流提取中的至少一种。
作为本发明所述组合物的优选实施方式，所述金花茶花提取物的制备方法包括以下步骤：取金花茶花粉末与乙醇水溶液混合，随后在55-65℃下浸提25-35min，接着于55-65℃下超声提取55-65min，随后浓缩提取液并干燥，得金花茶花提取物。
所述乙醇水溶液中，乙醇的体积百分数为60-80％；所述金花茶花粉末与乙醇水溶液的重量比为1：(5-10)。
优选地，所述超声功率为280-300W。
优选地，所述金花茶花粉末的制备方法为：采集金花茶花朵洗净后放入60-70℃恒温烘箱中干燥至恒重，随后研磨粉碎并过100-150目筛网，收集筛下物，得金花茶花粉末。
优选地，所述浓缩提取液的温度为45-55℃。
作为本发明所述组合物的优选实施方式，所述蛇床子提取物的制备方法包括以下步骤：取蛇床子粉末与乙醇水溶液混合提取，随后浓缩、脱色、干燥，得蛇床子提取物。
本发明研究发现，当采用将蛇床子粉末与乙醇水溶液混合提取的方法时，得到蛇床子提取物能够很好的与其他组分配合，从而更好的抑制TRPV1受体以及增强敏感皮肤中对压力因子皮质醇的抵抗作用，进而取得更为优异的缓解敏感症状的作用。具体地，混合提取的方法可以为超声提取、回流提取中的至少一种方式。
作为本发明所述组合物的优选实施方式，所述蛇床子提取物的制备方法包括以下步骤：取蛇床子粉末与添加有表面活性剂的乙醇水溶液混合回流超声提取，随后浓缩、脱色、干燥，得蛇床子提取物。
本发明研究发现，当进一步在提取过程中加入表面活性剂时，能更有效的提取得到相关活性物，进而将采用该制备方法制得的蛇床子提取物应用于本发明中的组合物时，组分之间的协同作用更强，得到的产品的综合性能更优。
作为本发明所述组合物的优选实施方式，如下(a)-(e)中的至少一种：
(a)所述乙醇水溶液中，乙醇的体积百分数为70-95％；
(b)所述蛇床子粉末与乙醇水溶液的重量比为1：(1-5)；
(c)以蛇床子粉末的质量计，表面活性剂的添加量为0.01-0.4％；
(d)所述表面活性剂包括Tween 20、Tween 60、Tween 80、十二烷基硫酸钠中的至少一种；
(e)所述超声的功率为250-280W。
优选地，所述脱色为加入活性炭进行脱色；所述活性炭的加入量为浓缩后液质量的1-5％。
优选地，所述蛇床子粉末的目数为100-150目。
作为本发明所述组合物的优选实施方式，所述地黄提取物的制备方法包括以下步骤：取地黄粉末进行二氧化碳超临界萃取，随后过滤萃取液并浓缩，得地黄提取物。
本发明研究发现，采用超临界二氧化碳进行萃取，得到的有效成分的萃取率更高，从而能够实现组合物更优异的综合效果。
优选地，所述二氧化碳超临界萃取中，萃取温度为45-55℃，萃取压力为35-45MPa，夹带剂(80-90％乙醇)流量为1-2mL/min，萃取时间110-130min。
优选地，所述过滤为采用脱脂棉过滤。
在本发明的第二方面，本发明提供了所述改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)将金花茶花提取物、蛇床子提取物、4-叔丁基环己醇和地黄提取物混合均匀，得组合物1；
(2)将金属硫蛋白溶于去离子水形成质量百分数为1％金属硫蛋白水溶液，得组合物2；
(3)将组合物1和组合物2混合均匀，得改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物。
在本发明的第三方面，本发明提供了一种所述组合物在制备化妆品中的应用。
本发明研究发现，本发明提供的组合物能够作为一个功效成分添加进不同的化妆品中，进而实现化妆品有效改善敏感皮肤的不适反应，缓解灼烧、刺痛、瘙痒、泛红等症状，提升使用者愉悦感受的效果。
在本发明的第四方面，本发明提供了一种化妆品，所述化妆品包括本发明所述组合物。
作为本发明所述化妆品的优选实施方式，所述化妆品包括以下质量百分数的组分：本发明所述组合物1-5％、化妆品基质4-40％，水余量。
作为本发明所述化妆品的优选实施方式，所述化妆品基质包括增稠剂、保湿剂、乳化剂、防腐剂、pH调节剂中的至少一种。
作为本发明所述化妆品的优选实施方式，所述化妆品包括以下质量百分数的组分：本发明所述组合物1-5％、增稠剂0.05-0.5％、保湿剂3-20％、乳化剂0.5-10％、防腐剂0.2-5％、pH调节剂0.05-0.1％，余量为水。
示例性地，所述增稠剂包括黄原胶、卡波940、AVC、高分子纤维素中的至少一种；所述保湿剂包括甘油、丁二醇、低分子透明质酸钠中的至少一种；所述乳化剂包括椰油醇-辛酸酯/癸酸酯、聚二甲基硅氧烷、氢化棕榈仁油、鲸蜡硬脂醇、聚甘油-6二硬脂酸酯、聚甲基倍半硅氧烷中的至少一种；所述防腐剂包括1,3-丙二醇、1,2-己二醇、对羟基苯乙酮中的至少一种；所述pH调节剂包括精氨酸、EDTA-2Na中的至少一种。
作为本发明所述化妆品的优选实施方式，所述化妆品包括化妆水、乳液、膏、霜、面膜、精华液、喷雾、啫喱中的任意一种。
在本发明的第五方面，本发明提供了一种化妆品的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)将保湿剂、增稠剂和部分pH调节剂与水混合搅拌，加热至80-90℃后，于1000-1400rpm的转速下均质3-5min，均质结束后保温备用，得预制A组分；
(2)将乳化剂混合，加热至70-80℃后，于1000-1400rpm的转速下均质3-5min，均质结束后保温备用，得预制B组分；
(3)将防腐剂混合，加热至55-65℃融化，得预制C组分；
(4)将预制A组分升温至75-85℃，于200-500rpm的转速下加入预制B组分，搅拌混合，接着降温至55-65℃后，于200-500rpm的转速下加入预制C组分搅拌混合，随后降温至45℃以下加入本发明所述组合物继续搅拌5-10min，最后加入剩余pH调节剂调节pH至5.0-6.5，即可停止搅拌，出料，得化妆品。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)本发明提供了一种改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物，该组合物通过选择合适重量份的金花茶花提取物、蛇床子提取物、4-叔丁基环己醇、地黄提取物和金属硫蛋白，5种组分能够相互协同，有效的抑制TRPV1受体，降低敏感皮肤中的皮质醇含量；且能综合关注敏感皮肤患者的皮肤与心理两个层面的问题，可以有效缓解因外界刺激从而产生灼热、瘙痒以及疼痛等多种皮肤不适感，正向调控皮肤反应；且本发明效果不仅仅停留于表面，也帮助改善敏感皮肤患者内在的焦虑情绪，可有效抵抗外界压力源，促进使用者舒缓、愉悦以及安全感受，调动积极情绪，正向调节心理，内外兼顾有益于促进敏感皮肤舒适感的提升；
(2)本发明提供的组合物不仅仅通过改善敏感皮肤患者的不适皮肤感知和焦虑情绪，同时对皮肤状态也有显著的改善效果，使敏感皮肤屏障得到改善，肤质细腻、光滑以及水润，进而产生良性循环作用，达到长期维稳的护肤功效；
(3)本发明提供的组合物结合细胞模型、3D皮肤模型、人体试验，多维度验证功效表明可达到快速舒缓、预防敏感、长期维稳的效果，可信度高，效果明显，操作简单，且没有适用人群限制，可广泛应用于敏感皮肤反应的预防和管理以及敏感皮肤人群积极情绪的促进方法。
附图说明
图1为效果例1中TRPV1免疫荧光结果图；
图2为效果例2中斑马鱼尾鳍皮肤恢复结果图；
图3为效果例3中应用例1使用前后的面部红区变化结果图。
具体实施方式
为更好的说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明。
本发明所采用的试剂、方法和设备，如无特殊说明，均为本领域常规试剂、方法和设备；且无特别说明，平行实验使用的原料为同一批原料。
金花茶花提取物1：自制，制备方法为：采集金花茶花朵，洗净后放入65℃恒温烘箱干燥至恒重，研磨粉碎后过100目筛，收集筛下物，得金花茶花粉末；往金花茶花粉末中加入8倍量的体积分数为70％的乙醇水溶液，在60℃下浸提30min；随后在超声功率为290W、温度60℃下提取1h；提取结束后过滤，收集提取液，将提取液在50℃旋转蒸发浓缩，浓缩结束后置于超低温冷冻干燥机中干燥冷冻，得金花茶花提取物1；
金花茶花提取物2：自制，制备方法为：采集金花茶花朵，洗净后放入65℃恒温烘箱干燥至恒重，研磨粉碎后过150目筛，收集筛下物，得金花茶花粉末；往金花茶花粉末中加入20倍量的体积分数为55％的乙醇水溶液，在超声功率为300W、温度35℃下提取1h；提取结束后过滤，收集提取液，将提取液在50℃旋转蒸发浓缩，浓缩结束后置于超低温冷冻干燥机中干燥冷冻，得金花茶花提取物2；
金花茶花提取物3：自制，制备方法为：采集金花茶花朵，洗净后放入50℃恒温烘箱干燥至恒重，研磨粉碎后过100目筛，收集筛下物，得金花茶花粉末；往金花茶花粉末中加入15倍量的体积分数为70％的乙醇水溶液，随后于80℃下回流提取1.5h；提取结束后过滤，收集提取液，将提取液在50℃旋转蒸发浓缩，浓缩结束后置于超低温冷冻干燥机中干燥冷冻，得金花茶花提取物3；
蛇床子提取物1：自制，制备方法为：将蛇床子粉碎后加入3倍的体积分数为95％的乙醇水溶液，随后加入表面活性剂Tween 80(每50g蛇床子加入38mg表面活性剂)，接着于260W的超声功率下回流提取2h，残渣重复提取2次；合并提取液，减压浓缩后往浓缩后液中加入质量百分数为1.25％的活性炭脱色，脱色结束后抽滤，收集滤液于70℃真空干燥至恒重，得蛇床子提取物1；
蛇床子提取物2：自制，制备方法为：将蛇床子粉碎后加入3倍的体积分数为75％的乙醇水溶液，随后加入表面活性剂Tween 80(每50g蛇床子加入38mg表面活性剂)，接着于360W的超声功率下回流提取1h，残渣重复提取2次；合并提取液，减压浓缩后于70℃真空干燥至恒重，得蛇床子提取物2；
蛇床子提取物3：自制，制备方法为：将蛇床子粉碎后加入6倍的体积分数为75％的乙醇水溶液，于100℃下回流提取1.5h，残渣重复提取2次；合并提取液，减压浓缩后晾干，得蛇床子提取物3；
地黄提取物1：将地黄粉末投入超临界萃取釜中，夹带剂为体积分数85％酒精，夹带剂流量为2mL/min，打开水浴开关，通入CO2，设置温度为50℃，当萃取装置达到设定温度时，打开CO2泵调节到设定压力为40MPa，待2h萃取完毕，收集萃取液，重复萃取3次，将收集到的萃取液用脱脂棉过滤，滤液减压浓缩去除水分和乙醇，得地黄提取物1，放置于室温冰箱保存；
地黄提取物2：地黄粉碎后过60目，加入10倍蒸馏水，煎煮2次，每次煎煮时间为1h，合并滤液，过滤，超声提取2次，每次1.5h，获得地黄提取物2；
金属硫蛋白：市售。
实施例1-11和对比例1-5
本发明实施例1-11和对比例1-5提供一种改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物，所述组合物的组分(质量份)如表1所示；
表1
实施例1提供的改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物的制备方法为：
(1)将金花茶花提取物、蛇床子提取物、4-叔丁基环己醇和地黄提取物混合均匀，得组合物1；
(2)将金属硫蛋白溶于去离子水形成质量百分数为1％金属硫蛋白水溶液，得组合物2；
(3)将组合物1和组合物2混合均匀，得改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物。
对比例6
本发明对比例提供一种改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物，所述组合物与实施例1的唯一差别是用金银花提取物替代金花茶花提取物1。
对比例7
本发明对比例提供一种改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物，所述组合物与实施例1的唯一差别是用苦参提取物替代蛇床子提取物。
对比例8
本发明对比例提供一种改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物，所述组合物与实施例1的唯一差别是用甘草提取物替代地黄提取物。
对比例9
本发明对比例提供一种改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物，所述组合物与实施例1的唯一差别是用植物螯合素替代金属硫蛋白。
应用例1-12、对比应用例1-10和空白应用例
本发明应用例1-12、对比应用例1-10和空白应用例提供一种乳液，所述乳液的组分(质量百分数)如表2所示；其中应用例1-11中改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物分别使用的为实施例1-11中制备得到的改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物，对比应用例1-9中改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物分别使用的为对比例1-9中制备得到的改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物；比如应用例6中使用的改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物为实施例6中制备得到的改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物，其他类推即可；应用例12中使用的改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物是实施例1中制备得到的改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物；
表2
应用例1中提供的乳液的制备方法为：
(1)将A组分与水混合搅拌，加热至80℃后，于1200rpm的转速下均质5min，均质结束后保温备用，得预制A组分；
(2)将B组分混合，加热至80℃后，于1200rpm的转速下均质5min，均质结束后保温备用，得预制B组分；
(3)将C组分混合，加热至60℃融化，得预制C组分；
(4)将预制A组分升温至80℃，于300rpm的转速下加入预制B组分，搅拌混合，接着降温至60℃后，于300rpm的转速下加入预制C组分搅拌混合，随后降温至45℃以下加入改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物继续搅拌5min，最后加入精氨酸调节pH至5.0-6.5，即可停止搅拌，出料，得乳液。
应用例2-12、对比应用例1-10和空白应用例提供的乳液的制备方法和应用例1保持一致，没有相关组分则不加即可。
效果例1
本发明效果例验证实施例1-11和对比例1-9中制备得到的改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物对TRPV1表达的抑制效果，具体包括以下内容：
(1)分组信息：分为样品组(实施例1-11和对比例1-9中的组合物)、阳性对照组(PC，诺香草胺)、阴性对照组(NC)、空白对照组(BC)；
(2)过程：表皮皮肤模型转移到孔板中，提前添加EpiGrowth培养液，在孔板上标注测试组编号，每组三个平行，BC组不做任何处理，NC组、PC组和样品组添加15μM辣椒素CAP的EpiGrowth培养液，PC组、样品组添加相应浓度的样品工作液(其中PC组浓度为15.6μg/mL，样品工作液组样品的体积浓度为培养液的0.015％)，将样品均匀分布于模型表面，置于CO2培养箱(37℃，5％CO2)中孵育24h；孵育结束后，用无菌PBS溶液清洗模型表面残留的受试物，用无菌棉签擦拭模型内、外残留液体；
(3)TRPV1检测：用4％的多聚甲醛进行固定处理，固定30min，进行辣椒素受体TRPV1的免疫荧光检测，显微镜下拍照观察，采集图片分析并记录光密度值(IOD)；
(4)结果统计分析：结果表示为Mean±SD；各组间比较采用t-test统计分析；P＜0.05认为具有显著差异，P＜0.01认为具有极显著差异；
得到的结果如表3所示，其中抑制率的计算方法为：抑制率＝(阴性对照组相对IOD平均值-样品组相对IOD平均值)/阴性对照组相对IOD平均值×100％；
其中，相对IOD是指每次测量时每个反应孔中累积的光密度，这是一个没有单位的相对数值；相对IOD平均值是指三个平行反应孔每个测量获得的相对IOD数值的平均值。
表3
备注：用t-test方法进行统计分析时，与BC组相比，显著性以#表示，P-value＜0.05表示为#，P-value＜0.01表示为##；与NC组相比，显著性以*表示，P-value＜0.05表示为*，P-value＜0.01表示为**，P-value＞0.05表示为ns；
从表3中可以看出，基于3D表皮皮肤模型采用免疫荧光测试TRPV1蛋白的表达量，与空白组相比，阴性对照组的TRPV1蛋白含量显著上升，说明本次的刺激条件有效。与阴性对照组相比，阳性对照组的TRPV1蛋白含量显著下降，说明本次测试阳性对照有效。与阴性对照组相比，当采用本发明的技术方案时，得到的实施例1-11在0.015％浓度下，使TRPV1蛋白含量显著下降，抑制率在73.90-42.64％范围内，其中实施例1的抑制效果最佳，具有极显著效果，此外，实验利用已知具有舒缓功效的活性物马齿苋提取物进行实验，发现实施例1相比马齿苋提取物液的作用效果高4.47倍。因此说明采用本发明的技术方案能够通过抑制TRPV1蛋白表达，达到改善皮肤神经感觉的不适感；
当对比例1-5中无论是缺少组合物中任何一种成分时，几乎体现不出抑制作用，起不到舒缓效果；当对比例6-9中采用其他类似组分替代本发明中的组分时，也无法取得对TRPV1的抑制作用；
另外，将检测过程中荧光拍照的结果记录如图1所示，从图1中也可以直观的看出，相较于阴性对照组和马齿苋提取液，本发明实施例1中的组合物能够有效的降低TRPV1蛋白含量，结果甚至优于阳性对照组，即本发明提供的组合物具有优异的抑制TRPV1通道的作用。
效果例2
本发明效果例对实施例1-11和对比例1-9中制备得到的改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物进行压力激素诱导皮肤损伤的改善评估，具体包括以下内容：
长期压力对皮肤产生多种伤害，如免疫力下降、引发炎症、能量减少以及排毒变慢等，降低对外界压力源的抵御能力，使得皮肤伤口恢复缓慢，增大皮肤敏感度。斑马鱼在皮肤受到伤害时，一旦过了胚胎阶段，伤口愈合变得缓慢，需要经过凝血、炎症、皮肤再生、血管重生和肉芽组织的形成等步骤。斑马鱼在伤口修复过程中，除了不会凝血外，其余步骤和人类相同，可作为人体皮肤修护功效的检测模型。本效果例利用压力源皮质醇延缓斑马鱼皮肤愈合过程，建立皮质醇皮肤损伤模型，评估样品对抵抗皮质醇皮肤损伤的效果。实验步骤为：
(1)斑马鱼养殖：应用来源可靠(如中国国家斑马鱼资源中心)的野生型AB品系斑马鱼(Danio rerio)测试。养殖水温宜控制在26-28℃，室内温度建议控制在20-25℃；
(2)受试物准备：选用二甲基亚砜按1：1与受试物混合，超声处理10min，然后加入鱼胚胎培养液配制成所需浓度，震荡30s后于6500×g离心10min。取上清液进行测试。受试物测试溶液浓度需保证对斑马鱼的死亡率≤10％(没有心跳特征的胚胎界定为死亡)；
(3)其他溶液准备：皮质醇溶液为称取皮质醇粉末溶于水中配制5mg/L储存液，工作液用鱼胚胎培养液将存储液稀释100倍；三卡因溶液为称取200mg三卡因溶于48.95mL水，冷藏；鱼胚胎培养液(称取2940mg无水氯化钙，1233mg七水硫酸镁，630mg碳酸氢钠，55mg氯化钾溶于10L水配置而成，pH为6.5-8.5；
(4)切除鱼鳍步骤：使用三卡因溶液麻醉斑马鱼胚胎，于显微镜下用实验解剖刀切除斑马鱼胚胎尾鳍；
(5)测试分组：测试需设定空白对照组(鱼胚胎培养液)、模型对照组(皮质醇溶液)和受试物组(受试物+皮质醇溶液)。空白对照组设置为随机挑选24尾鱼胚胎，切除鱼鳍后转移至96-孔板中，每孔含一粒鱼胚胎和0.2mL鱼胚胎培养液；模型对照组设置为随机挑选24尾鱼胚胎，切除鱼鳍后转移至96-孔板中，每孔含一粒鱼胚胎和0.2mL皮质醇溶液；受试物组处理为随机挑选24尾鱼胚胎，切除鱼鳍后转移至96-孔板中，每孔一粒鱼胚胎和0.2mL受试物溶液(5mg/L)+皮质醇溶液；放置于28±1℃恒温中培养3±0.5h；
(6)样本显微分析：用三卡因将斑马鱼麻醉，然后放到体式显微镜下对鱼胚胎尾部进行侧面拍照，pixels像素去分析长度变化；
(7)数据和结果计算：计数每尾鱼胚胎尾鳍在第7天的长度(pixels)。计算尾鳍修护促进率：促进率＝(B-A)/(C-A)×100％，
其中，A：空白对照组鱼胚胎尾鳍长度的平均值；
B：模型对照组鱼胚胎尾鳍长度的平均值；
C：样品组鱼胚胎尾鳍长度的平均值
对受试物处理鱼胚胎尾鳍长度和模型对照组尾鳍长度进行双尾T检验，取得P值；
测试得到的结果如表4所示；
表4
| 组别 | 促进率/％ | 组别 | 促进率/％ |
| 实施例1 | 115.23*** | 对比例1 | -7.13ns |
| 实施例2 | 88.24** | 对比例2 | -3.58ns |
| 实施例3 | 78.23** | 对比例3 | -4.14ns |
| 实施例4 | 70.25** | 对比例4 | -2.15ns |
| 实施例5 | 75.37** | 对比例5 | -6.98ns |
| 实施例6 | 65.78** | 对比例6 | 8.17ns |
| 实施例7 | 60.46** | 对比例7 | 9.26ns |
| 实施例8 | 58.24** | 对比例8 | 11.14ns |
| 实施例9 | 55.11** | 对比例9 | 5.45ns |
| 实施例10 | 54.70** | ||
| 实施例11 | 78.35** |
备注：用t-test方法进行统计分析时，与模型组相比，显著性以*表示，P-value＜0.05表示为*,P-value＜0.01表示为**，P-value＜0.001表示为***，P-value＞0.05表示为ns；
从表4中可以看出，采用本发明的实施方案可以有效改善皮质醇造成的皮肤损伤，促进皮肤的修复和愈合，增加对皮质醇刺激的抵抗能力，其中实施例1的方案效果最佳，皮肤修护的促进率为115.23％，与模型组相比具有显著性的作用，从图2中可知，斑马鱼尾鳍切割后，模型对照组中斑马鱼几乎无法正常恢复，而应用实施例1的方案时能显著抵抗皮质醇的损伤，恢复皮肤修复能力，促进尾鳍的生长(双向箭头区域为斑马鱼新生尾鳍)；此外，实验中还发现，应用实施例1组合物的尾鳍的长度平均值(203.10pixels)比空白对照组尾鳍的长度平均值(197.81pixels)高2.67％，从该数据中也可以看出实施例1制备得到的组合物可抵消皮质醇的损伤，对皮肤的修复起到显著的促进作用。然而，当对比例1-9中改变活性物组合方案时，得到的对应作用效果均显著下降，对皮肤无修护效果，甚至对比例1-5增加了皮质醇对皮肤的损害，促进率均＜0％，起不到对受损皮肤的预防、维护以及防御积极作用。
效果例3
本发明效果例验证应用例1-12、对比应用例1-10和空白应用例应用于人体的功效，具体包括以下方法：
按《化妆品安全技术规范》(2015)试验挑选176名18-60岁敏感皮肤受试者(乳酸刺痛评分＞3)，在正常情况下，受试者进行随机、半脸试验，每组8人，持续使用28天，在第3、7、14、28天进行皮肤指标的仪器检测和临床评估。
1、仪器测量具体步骤如下：
受试者每日早晚于洁面补水后，取1ml产品乳液涂抹于一边脸，按摩吸收即可，另一边脸使用空白应用例乳液(不含组合物)，早晚使用各1次。受试者到访当天用清水洗脸后不涂抹任何产品，于温度为21±1℃、湿度为50±10％的空调房中静坐20min。采用仪器对皮肤情况进行量化和拍照，包括Tewameter TM Hex测定TEWL，Corneometer CM825测定皮肤角质层水分MMV值，利用面部图像分析系统VISIA-CR和图像分析软件Image-Pro Plus7.0 IPP对皮肤红色区面积占比、图片对比等指标等进行分析；记录数据并计算指标改善率，指标改善率＝(使用前数值-使用后数值)/使用前数值×100％，表5中数据代表着提升率＝(样品例使用后指标改善率-空白例使用后指标改善率)/空白例使用后指标改善率×100％；得到的结果如表5所示；
表5
备注：与空白应用例比较其改善率具有显著性，P-value＜0.05表示为*，P-value＞0.05表示为ns。
从表5中可以看出，当采用本发明提供的技术方案时，得到的乳液具有增加皮肤水分、减少经皮水分流失、减少红区面积占比的优异效果，具体地，在D3时，MMV、TEML和红区面积占比指标提升率分别在62.18％以上、50.00％以上、62.50％以上，在D14时，MMV、TEML和红区面积占比指标改善率分别在51.63％％以上、54.62％以上、53.03％以上，在D28时，MMV、TEML和红区面积占比指标改善率分别在60.63％以上、50.52％以上、62.96％以上。均与空白应用例相比具有显著性差异，且与添加公知具有良好的减缓敏感的效果的马齿苋提取物的对比应用例10相比，本发明也得到了显著的提升；
当对比应用例1-5中的组合物缺少本发明组合物中的任意一种时，或者是对比应用例6-9用其他类似组分替代组合物中的组分时，都无法取得明显的减少经皮水分流失、提升皮肤水分含量以及减少红区面积占比的效果；
另外提供应用例1使用前后的面部红区图片如图3所示，从图3中可以明显看出，本发明提供的乳液能够显著的减少面部红区面积占比。
2、临床评估包括以下步骤：
专业皮肤科医生在测试时间(第0、3、7、14、28天)根据受试者皮肤状态对以下客观症状(干燥、脱皮、泛红)进行等级评分。评分分数越低表示越轻、分数越高表示越严重，0分表示无、1-3分为轻度、4-6分为中度、7-9分为重度。
临床评估改善率＝(使用前数值-使用后数值)/使用前数值×100％；表6中数据代表着提升率＝(样品例使用后临床评估改善率-空白例使用后临床评估改善率)/空白例使用后临床评估改善率×100％，得到的结果如表6所示；
表6
备注：与空白应用例比较其改善率具有显著性，P-value＜0.05表示为*，P-value＞0.05表示为ns。
从表6中可以看出，当采用本发明提供的技术方案时，得到的乳液在临床上也体现出优异的缓解干燥、脱皮和泛红作用，具体地，在D3时，干燥、脱皮和泛红临床评估提升率分别在90.00％以上、115.09％以上、56.97％以上，在D14时，干燥、脱皮和泛红临床评估提升率分别在120.08％以上、101.89％以上、64.42％以上，在D28时，干燥、脱皮和泛红临床评估提升率分别在244.93％以上、111.32％以上、100.00％以上；与添加公知具有良好的减缓敏感的效果的马齿苋提取物的对比应用例10相比，本发明也得到了显著的提升；
当对比应用例1-5中的组合物缺少本发明组合物中的任意一种时，或者是对比应用例6-9用其他类似组分替代组合物中的组分时，都无法取得明显的缓解干燥、脱皮以及泛红的效果。
3、使用效果打分
由于人体试验显示应用例1的乳液的效果最佳，收集100名受试者对应用例1乳液的使用感受，具体为受试者对使用后皮肤情况进行满意度评估，产品满意度百分比＝选择“满意”人数/测试总人数×100％，得到的结果如表7所示；
表7
从表7中可以看出，在人体测试中显示，本发明应用例1提供的产品不仅客观上改善敏感症状效果优异，且主观上打分较高，志愿者满意度的得分高。
效果例4
本发明效果例对应用例1-12、对比应用例1-10和空白应用例制备得到的乳液进行Evalwise AI情绪评估，即通过微表情分析不同样品组对人体情绪的影响，实验进行14天，在第0、7、14天进行测定，测试方法包括以下步骤：
招募敏感皮肤受试者(乳酸刺痛评分＞3)9名，分成3组，每组对应一台已安装Evalwise AI软件的影像设备进行测试，每组每人对应用例1-12、对比应用例1-10和空白应用例一共23组样品依次进行测试，获得原始数据进行分析。开始测试前，受试者在安静环境中静坐5分钟达到情绪稳定，打开测试软件，受试者面对镜头无遮挡，先嗅闻空白应用例5s，后均匀涂抹于面部，由此作为情绪基准，继而嗅闻样品组乳液3次，每次3-5s，并将其均匀涂抹于面部，停留1-3分钟后，AI在30s内将捕捉志愿者面部微表情，每次实验重复测定两次取平均值，获取愉悦情绪、沉浸情绪、好奇情绪、负面情绪四种情绪信息，并转换为对应的情绪强度(情绪基准设定为1)；结果分析如下：
(1)数据识别与基准化处理：通过视频面部表情识别系统，识别出被访者在锚定阶段(本项目为校准阶段)的情绪并作为基准情绪，与此同时识别出评测过程中的情绪曲线，并基于与锚定阶段的情绪基准值的对比，获取消除个体差异且具有可对比性的数据；
(2)确定情绪效应区域：根据时间序列数据趋势以及与基准值的偏离度分析，确定情绪效应阈值(减弱区间、无显著变化区间、增强区间)，并计算对每一帧的情绪值分布落在所对应的情绪效应区域；
(3)情绪增强效应：在评测阶段中某种情绪对比锚定阶段后，落在情绪增强区间即说明在该评测过程有某种情绪的情绪增强效应出现，包括情绪增强占比、情绪增强强度指数、情绪增强持续时长3个指标(情绪增强占比：某情绪增强的人数占比；情绪增强强度指数：某情绪在增强效应区间的情绪强度与该情绪与锚定阶段对比的指数化结果；情绪增强持续时长：某情绪在增强效应区间的所持续的时长，设定每段评测的总时长均为1)；
在实际实验中发现，第0、7、14天具有相似的趋势，故展现第14天的测定数据；得到的结果分别如表8-11所示；
表8
表9
表10
表11
从表8-10中可以看出，不同应用例产品对受试者的情绪的影响具有差异，采用本发明的技术方案的应用例1-12对人体的愉悦情绪、沉浸情绪、好奇情绪具有明显增强作用，其中综合最佳的为应用例1，应用效果优于应用例2-12，且与对比应用例的作用效果产生明显的差异，应用例1能够有效且稳定的提升人体的愉悦程度、延长愉悦时间，减少负面情绪，并产生积极的主观反应。此外，从表11结果可知，应用例1位于愉悦情绪较高的ABC人次占比最高，说明该产品喜好度相对较高。
最后应当说明的是，以上实施例以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (14)
1.一种改善皮肤敏感、提升愉悦情绪的组合物，其特征在于，所述组合物包括以下重量份的组分：
金花茶花提取物0.5-10份、蛇床子提取物0.1-8份、4-叔丁基环己醇0.01-2份、金属硫蛋白0.005-1份、地黄提取物0.03-3份。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物包括以下重量份的组分：
金花茶花提取物0.8-5份、蛇床子提取物1-5份、4-叔丁基环己醇0.1-1.5份、金属硫蛋白0.008-0.1份、地黄提取物0.05-0.5份。
3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述组合物包括以下重量份的组分：
金花茶花提取物1份、蛇床子提取物3份、4-叔丁基环己醇1份、金属硫蛋白0.01份、地黄提取物0.1份。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述地黄提取物、4-叔丁基环己醇和金花茶花提取物的质量比为1：(3-12)：(6-20)。
5.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述金花茶花提取物的制备方法包括以下步骤：取金花茶花粉末与乙醇水溶液混合提取，随后浓缩提取液并干燥，得金花茶花提取物。
6.根据权利要求5所述的组合物，其特征在于，所述金花茶花提取物的制备方法包括以下步骤：取金花茶花粉末与乙醇水溶液混合，随后在55-65℃下浸提25-35min，接着于55-65℃下超声提取55-65min，随后浓缩提取液并干燥，得金花茶花提取物；
所述乙醇水溶液中，乙醇的体积百分数为60-80％；所述金花茶花粉末与乙醇水溶液的重量比为1：(5-10)。
7.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述蛇床子提取物的制备方法包括以下步骤：取蛇床子粉末与乙醇水溶液混合提取，随后浓缩、脱色、干燥，得蛇床子提取物。
8.根据权利要求7所述的组合物，其特征在于，所述蛇床子提取物的制备方法包括以下步骤：取蛇床子粉末与添加有表面活性剂的乙醇水溶液混合回流超声提取，随后浓缩、脱色、干燥，得蛇床子提取物。
9.根据权利要求8所述的组合物，其特征在于，含有如下(a)-(e)中的至少一种：
(a)所述乙醇水溶液中，乙醇的体积百分数为80-95％；
(b)所述蛇床子粉末与乙醇水溶液的重量比为1：(1-5)；
(c)以蛇床子粉末的质量计，表面活性剂的添加量为0.01-0.4％；
(d)所述表面活性剂包括Tween 20、Tween 60、Tween 80、十二烷基硫酸钠中的至少一种；
(e)所述超声的功率为250-280W。
10.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述地黄提取物的制备方法包括以下步骤：取地黄粉末进行二氧化碳超临界萃取，随后过滤萃取液并浓缩，得地黄提取物。
11.如权利要求1-10任一项所述的组合物在制备化妆品中的应用。
12.一种化妆品，其特征在于，所述化妆品包括如权利要求1-10任一项所述的组合物。
13.根据权利要求12所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品包括以下质量百分数的组分：如权利要求1-10任一项所述的组合物1-5％、化妆品基质4-40％，水余量。
14.根据权利要求13所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品基质包括增稠剂、保湿剂、乳化剂、防腐剂、pH调节剂中的至少一种。
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