CN118236359A - 硫酸特布他林在防治肠缺血再灌注损伤中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物技术领域,具体涉及硫酸特布他林在防治肠缺血再灌注损伤中的应用。所述硫酸特布他林为硫酸特布他林口服溶液;所述硫酸特布他林通过降低小肠病理损伤,提高肠道干细胞的自我更新和修复能力来防治肠缺血再灌注损伤。本发明利用硫酸特布他林防治肠缺血再灌注损伤,效果显著,术前口服可有效改善肠缺血再灌注损伤指标;副作用小,对心脏的兴奋作用很小,无中枢性作用;使用便捷,为临床常用药物,可围术期雾化吸入,起效快;疗效多样,其为常见的哮喘治疗药物,可改善患者通气,提升预后。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及硫酸特布他林在防治肠缺血再灌注损伤中的应用。
背景技术
肠缺血再灌注损伤是一种常见的急症和危重情况。它不仅会破坏肠道屏障,还会导致肠外多器官损伤,具有非常高的并发症和死亡率。因此,防治肠缺血再灌注损伤对改善患者预后具有重要意义。其中患者因素、麻醉因素和手术相关因素均可引起不同程度的肠缺血再灌注损伤。
近年来,人们对防治肠缺血再灌注损伤的药物和策略进行了广泛的研究。目前几种策略和策略已被证实可减轻小动物的肠缺血再灌注损伤。治疗肠缺血再灌注损伤的可能策略包括以下几种方式:缺血预适应,抗氧化剂,补充一氧化氮,抗补体治疗,抗白细胞治疗,全氟碳化合物,肠内喂养,谷氨酰胺补充,和甘氨酸补充等等。然而,肠缺血再灌注损伤的潜在机制尚未完全阐明,有效的防治策略和药物有待进一步探索;当前临床上亦缺乏肠缺血再灌注损伤的有效生物标志物。
其中,缺血预适应被发现是对抗再灌注损伤的最有前途的策略,似乎增加了肠对再灌注损伤的耐受性。缺血预适应指将组织短暂暴露在缺血状态下,可以保护它们免受长期肠缺血再灌注损伤的有害影响。然而,包括短缺血时间和循环次数在内的理想的缺血预适应方案仍未建立。一些研究报告说,需要一个以上的缺血和再灌流周期才能达到这种有益的效果。同时,尽管缺血预适应已被证明对人体心脏和肝脏有益,但在人类中涉及肠道缺血预适应的前瞻性对照研究还很缺乏。因此,缺血预适应等策略应用于临床依然存在诸多限制和不确定性。
由此可见,肠缺血再灌注损伤的防治仍然缺乏有效的药物和策略。。
发明内容
本发明的目的在于提供一种硫酸特布他林在防治肠缺血再灌注损伤中的应用,有效改善肠缺血再灌注损伤指标,提升预后。
本发明的目的是通过如下技术方案实现的:
本发明提供了一种硫酸特布他林在防治肠缺血再灌注损伤中的应用。
进一步的,所述硫酸特布他林为硫酸特布他林口服溶液。
进一步的,所述硫酸特布他林通过降低小肠病理损伤,提高肠道干细胞的自我更新和修复能力来防治肠缺血再灌注损伤。
本发明还提供了一种硫酸特布他林在制备防治肠缺血再灌注损伤的药物中的应用。
进一步的,所述硫酸特布他林为硫酸特布他林口服溶液。
本发明的有益效果是:经前期动物实验和临床样本验证,硫酸特布他林口服溶液可以有效改善小鼠和患者肠缺血再灌注损伤预后,相较于现有疗法,其优势在于:
1.效果显著,术前口服可有效改善肠缺血再灌注损伤指标;
2.副作用小,对心脏的兴奋作用很小,无中枢性作用;
3.使用便捷,为临床常用药物,可围术期雾化吸入,起效快;
4.疗效多样,其为常见的哮喘治疗药物,可改善患者通气,提升预后。
附图说明
图1为实施例1中体外实验验证硫酸特布他林口服溶液防治肠缺血再灌注损伤的实验结果图,其中图A为不同模型小鼠中小肠损伤的HE病理评分;图B为不同模型小鼠的生存率;图C为不同模型小鼠的Lgr5的mRNA水平.
具体实施方式
本发明中所采用的硫酸特布他林口服溶液的具体产品信息如下:
产品名称:硫酸特布他林口服溶液
分子式:(C12H19NO3)2·H2SO4
分子量:548.66
药代动力学:口服生物利用度为15±6%,约30分钟出现平喘作用。有效血药浓度为3μg/ml,血浆蛋白结合率为25%。2~4小时作用达高峰,持续4~7小时。Vd为1.4±0.4L/kg。
不良反应:偶见震颤、强直性痉挛和心悸,不良反应的程度取决于剂量和给药途径。从小剂量逐渐加至治疗量能减少不良反应。不良反应若出现,大多数在开始用药1-2周内自然消失。
注意事项:①少数病例有手指震颤、头痛、心悸及胃肠障碍。口服5mg时,手指震颤发生率可达20%~33%。②甲状腺机能亢进、冠心病、高血压、糖尿病患者慎用。③大剂量应用可使有癫痫病史的患者发生酮症酸中毒。④长期应用可形成耐药,疗效降低。
本品硫酸特布他林口服溶液,购买自阿斯利康制药有限公司,具体生产流程由公司负责。在发生肠缺血再灌注损伤的高危因素前,一天内分三次口服此溶液,成人每次10ml,儿童每次每公斤体重0.065毫克(0.20毫升)。在取得患者知情同意后,入组CPB患者,在CPB术前1小时及术后一天内各收取患者1ml的血液,在离心机10000rpm,4℃,10min离心后,吸取上层血浆,根据瓜氨酸试剂盒及IFABP试剂盒的说明书检测患者血清中的瓜氨酸及IFABP水平。
实施例1在体验证硫酸特布他林口服溶液减轻肠缺血再灌注损伤
在动物水平上,给予不同浓度硫酸特布他林口服溶液预处理,利用C57BL/6J小鼠建立肠缺血再灌注损伤(I/R)模型,检测小鼠生存率;肠组织的HE病理损伤、肠屏障通透性、血清内毒素(LPS)水平,证实硫酸特布他林口服溶液可以减轻肠缺血再灌注损伤(I/R)。
1.肠缺血再灌注损伤(I/R)模型的建立:肠I/R前禁食12h,自由饮水,通过将C57BL/6J小鼠吸入4%异氟烷诱导全身麻醉,然后在整个手术过程中异氟烷麻药计量维持在1.5%,将小鼠仰卧位固定于手术台上,腹部手术区剃毛备皮,用75%乙醇消毒后,经腹部正中线开腹,切口约1-3cm,逐层剪开腹壁各层进入腹腔,分离肠系膜上动脉后用无创微动脉夹夹闭,阻断血流。肠缺血持续1h后,再次打开腹腔,松开动脉夹恢复供血,肠系膜上动脉再灌注,经检查腹腔内无出血后,用无菌丝线逐层缝合腹膜、肌肉和皮肤。阻断后和再灌注时经皮下注射37℃左右的温生理盐水0.5ml进行液体复苏。再灌注时间2h后,取下腔静脉血、空肠、回肠、盲肠、结肠组织进行待检。假手术组(sham)除了不进行动脉夹闭等I/R操作,其余操作同I/R组。
2.实验分组:
将6-8周16只C57BL/6J小鼠随机均分为假手术组(Sham)、肠缺血再灌注损伤模型组(I/R)、硫酸特布他林口服溶液+肠缺血再灌注损伤模型组(TSOS+I/R)、硫酸特布他林口服溶液+假手术组(TSOS+Sham)。
(1)Sham组:除了不进行肠系膜夹闭阻断血供和取出动脉夹再灌注操作,其余小鼠所有的操作步骤均同I/R保持一致;
(2)I/R组:对小鼠建立肠I/R模型;
(3)硫酸特布他林口服溶液+肠缺血再灌注损伤模型组(TSOS+I/R):连续4天每天预先给小鼠灌胃0.05mg/kg的硫酸特布他林口服溶液后,后建立肠I/R模型;
(4)硫酸特布他林口服溶液+假手术组(TSOS+Sham):连续4天每天预先给小鼠灌胃0.05mg/kg的硫酸特布他林口服溶液后,除了不进行肠系膜夹闭阻断血供和取出动脉夹再灌注操作,其余小鼠所有的操作步骤均同I/R保持一致。
3.检测指标与技术方法:
(1)观察并记录小鼠7天生存情况。
(2)肠组织损伤评估:a.苏木精和伊红(H&E)染色小肠段,光镜下观察小肠组织形态学变化并拍照,由对实验分组不知情的病理学专家根据肠损伤评分标准对组织损伤进行评估。b.肠屏障通透性检测:1)异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-dextran)检测肠道通透性:以0.6mg/kg剂量于检测前4小时灌胃处理小鼠,用酶标仪(485nm、530nm)检测外周血中FITC的含量;2)检测血浆中的内毒素(LPS)水平:根据ELISA试剂盒说明书提供的步骤检测。c.RT-PCR检测肠组织中炎症因子的mRNA表达水平。
4、实验结果:
如下图A所示,小鼠建立肠IR模型显著加重了小肠损伤的HE病理评分,而特布他林处理后明显降低了小肠病理损伤评分;此外,特布他林处理后肠I/R小鼠的生存率明显提升(图B),肠道干细胞的自我更新和修复能力标志物Lgr5的mRNA水平明显增加(图C)。这些结果表明,特布他林可以明显减轻肠I/R损伤,是防治肠I/R损伤的潜在药物。
最后说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围,其均应涵盖在本发明的权利要求范围。
Claims (5)
1.硫酸特布他林在防治肠缺血再灌注损伤中的应用。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述硫酸特布他林为硫酸特布他林口服溶液。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述硫酸特布他林通过降低小肠病理损伤,提高肠道干细胞的自我更新和修复能力来防治肠缺血再灌注损伤。
4.硫酸特布他林在制备防治肠缺血再灌注损伤的药物中的应用。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于,所述硫酸特布他林为硫酸特布他林口服溶液。
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