CN118201943A

CN118201943A - 一种抗炎症的化合物及其用途

Info

Publication number: CN118201943A
Application number: CN202280057987.3A
Authority: CN
Inventors: 张禹; 李冰; 李曦; 花海清; 李键; 朱忠远
Original assignee: Yinen Biopharmaceutical Suzhou Co ltd
Current assignee: Yinen Biopharmaceutical Suzhou Co ltd
Priority date: 2021-09-14
Filing date: 2022-09-13
Publication date: 2024-06-14
Also published as: WO2023040793A1; TW202327620A

Abstract

提供了一种抗炎症的化合物及其用途，具体涉及该化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式、或其可药用的盐，还提供了涉及该化合物的制备方法及其应用。

Description

一种抗炎症的化合物及其用途

技术领域

本申请涉及生物医药领域，具体的涉及一种抗炎症的化合物及其用途。

背景技术

炎症是多种伤害刺激和状态触发的适应性反应，其成为许多人类免疫系统相关疾病的基础。甾体化合物是一类抗炎症药物，可以具有影响免疫系统功能、治疗或预防与糖皮质激素受体信号转导相关的疾病和/或症状的潜力，然而现有的一些甾体化合物抗炎症效果不强，另一些甾体化合物可能具有许多不希望的副作用。因此目前急需进一步开发多种甾体形成的抗体偶联药物以及甾体类化合物，以作为可以发挥更好的疗效或可以具有更好的安全性的药物。

发明内容

本申请提供了一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其可以具有选自以下组的一种或多种效果：(1)具有影响免疫细胞活性的能力；(2)其偶联物具有靶向作用；(3)具有血浆稳定性；(4)具有生物安全性；(5)具有影响免疫细胞的细胞因子释放的能力；(6)具有影响IFN信号途径应答基因转录的能力；(7)具有影响皮肤纤维化程度的能力；(8)具有影响树突状细胞数量和/或比例的能力；(9)具有影响皮肤胶原含量的能力；(10)具有影响GRE表达水平的能力；(11)具有影响单核细胞细胞因子释放的能力；(12)具有影响接触性超敏反应的能力；(13)具有影响皮肤肿胀的能力；和(14)具有影响关节炎症状的能力。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃各自独立地为任意基团；

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；

W不存在或者W为任意基团；

A为任意基团，其中A还被一个或多个Y取代，每一个Y各自独立地选自以下组：氢、氕、氘、氚、任选取代的-OH、任选取代的-CH ₂-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂和任选取代的-NH ₂。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1)或式(II-a2)所示的结构，

其中，R ₁、R ₂、R ₃和Y各自独立地为任意基团；

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W不存在或者W为任意基团；yn为0-4的整数。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中，所述化合物包含选自本申请的结构。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中，所述化合物包含选自以下组的结构：

。

一方面，本申请提供一种偶联物，包含本申请的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-A)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃各自独立地为任意基团；

W不存在或者W为任意基团；

A为任意基团，其中A还被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；Tr不存在或者为任意基团。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-A)、式(II-a2-A)、式(II-a3-A)或式(II-a4-A)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂、R ₃、Ry ₁、Ry ₂和Y各自独立地为任意基团；

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W不存在或者W为任意基团；yn为0-4的整数；Tr不存在或者为任意基团。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-B)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃各自独立地为任意基团；

W不存在或者W为任意基团；

A为任意基团，其中A还被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；L不存在或者为任意基团。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-B)、式(II-a2-B)、式(II-a3-B)或式(II-a4-B)所示的结构：

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W不存在或者W为任意基团；yn为0-4的整数；L不存在或者为任意基团。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-C)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃各自独立地为任意基团；

W不存在或者W为任意基团；

A为任意基团，其中A还被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；L不存在或者为任意基团，Ab为配体，N ^a-I为至少为0的数。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)或式(II-a4-C)所示的结构：

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W不存在或者W为任意基团；yn为0-4的整数；L不存在或者为任意基团，Ab为配体，N ^a-I为至少为0的数。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-D)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃各自独立地为任意基团；

W不存在或者W为任意基团；

A为任意基团，其中A还被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；Lx为任意基团。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-D)、式(II-a2-D)、式(II-a3-D)或式(II-a4-D)所示的结构：

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W不存在或者W为任意基团；yn为0-4的整数；Lx为任意基团。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中，所述化合物包含本申请的结构。

一方面，本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-C-1)、(II-a1-C-2)、(II-a1-C-3)、(II-a2-C-1)、式(II-a2-C-2)和式(II-a2-C-3)，

其中，

R ₁和R ₂各自独立地选自：氢、氕、氘、氚、卤素和C ₁-C ₆烷基；

R ₃选自：-CH ₂Cl、-CH ₂SH、-CH ₂OH、 -OCH ₃、-OCH ₂F、-OCH ₂Cl、-OCH ₂CN、 -OCH ₂CH ₃、-SH、-SCH ₂F、-SCH ₂Cl、-SCH ₂CF ₃和-SCH ₂CN；

Y各自独立地选自：氢、卤素、羟基、巯基、氨基、C ₁-C ₆烷基、-OC ₁-C ₆烷基和-C ₁-C ₆烷基羟基；

W选自 CH(CH ₃)-和

N ^a-I为约0至约20的数；

Ab选自抗体或其抗原结合片段；

yn选自0、1或2。

另一方面，本申请提供了一种药物组合物，其包含本申请所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐和/或本申请所述的偶联物，以及任选地药学上可接受的载体。

另一方面，本申请提供了一种影响免疫系统功能的方法，包括向受试者施用本申请所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐、本申请所述的偶联物和/或本申请所述的药物组合物。

另一方面，本申请提供了本申请所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐、本申请所述的偶联物和/或本申请所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防和/或治疗疾病和/或症状。

另一方面，本申请提供了本申请所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐、本申请所述的偶联物和/或本申请所述的药物组合物，其用于预防和/或治疗疾病和/或症状。

另一方面，本申请提供了一种预防和/或治疗疾病和/或症状的方法，包含向有需要的受试者施用本申请所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐、本申请所述的偶联物和/或本申请所述的药物组合物。

本领域技术人员能够从下文的详细描述中容易地洞察到本申请的其它方面和优势。下文的详细描述中仅显示和描述了本申请的示例性实施方式。如本领域技术人员将认识到的，本申请的内容使得本领域技术人员能够对所公开的具体实施方式进行改动而不脱离本申请所涉及发明的精神和范围。相应地，本申请的说明书中的描述仅仅是示例性的，而非为限制性的。

附图说明

本申请所涉及的发明的具体特征如所附权利要求书所显示。通过参考下文中详细描述的示例性实施方式和附图能够更好地理解本申请所涉及发明的特点和优势。对附图简要说明如下：

图1a-1b显示的是本申请化合物对R848诱导的人外周血单核细胞IFNα和TNFα抑制作用。

图2显示的是本申请化合物对异硫氰酸荧光素(FITC)诱导的迟发型IV型超敏反应小鼠模型中的生物活性影响结果。

图3a-3c显示的是本申请化合物对II型牛胶原混合佐剂诱导的DBA/1小鼠关节炎模型的生物活性影响结果。

具体实施方式

以下由特定的具体实施例说明本申请发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所公开的内容容易地了解本申请发明的其他优点及效果。

术语定义

在本申请中，术语“卤素”通常是指氟、氯、溴、碘，例如可以是氟、氯。

在本申请中，术语“烷基”通常是指烷除去氢原子所衍生的残基。烷基可以是取代的或非取代的，替代或者非替代的。术语“烷基”通常指饱和的直链或支链脂肪族烃基，其具有从母体烷的相同碳原子或两个不同的碳原子上除去氢原子所衍生的残基，其可以为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，例如含有1至12个碳原子，例如含有1至6个碳原子的链烷基。烷基的非限制性实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、丙基、丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，替代或者非替代的，例如当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基可以独立地任选选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基和氧代基中的一个或多个取代基所取代，例如可以是氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、-OH、-SH、-NH ₂、-C(O)H、-CO ₂H、-C(O)C(O)H、-C(O)CH ₂C(O)H、-S(O)H、-S(O) ₂H、-C(O)NH ₂、-SO ₂NH ₂、-OC(O)H、-N(H)SO ₂H或C _1-6脂肪族基团。

在本申请中，术语“亚烷基”通常指饱和的直链或支链脂肪族烃基，其具有2个从母体烷的相同碳原子或两个不同的碳原子上除去两个氢原子所衍生的残基，其可以为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，例如，术语“亚甲基”可以是指1个碳原子的基团除去两个氢原子所衍生的残基。亚甲基可以是取代的或非取代的，替代或者非替代的；例如含有1至12个碳原子，例如含有1至6个碳原子的亚烷基。亚烷基的非限制性实例包括但不限于亚甲基(-CH ₂-)、1,1-亚乙基(-CH(CH ₃)-)、1,2-亚乙基(-CH ₂CH ₂)-、1,1-亚丙基(-CH(CH ₂CH ₃)-)、1,2-亚丙基(-CH ₂CH(CH ₃)-)、1,3-亚丙基(-CH ₂CH ₂CH ₂-)、1,4-亚丁基(-CH ₂CH ₂CH ₂CH ₂-)和1,5-亚丁基(-CH ₂CH ₂CH ₂CH ₂CH ₂-)等。亚烷基可以是取代的或非取代的，替代或者非替代的，例如当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基可以独立地任选选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基和氧代基中的一个或多个取代基所取代，例如可以是氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、-OH、-SH、-NH ₂、-C(O)H、-CO ₂H、-C(O)C(O)H、-C(O)CH ₂C(O)H、-S(O)H、-S(O) ₂H、-C(O)NH ₂、-SO ₂NH ₂、-OC(O)H、-N(H)SO ₂H或C _1-6脂肪族基团。亚甲基或亚烷基可以是取代的或非取代的。

在本申请中，术语“烯基”通常是指含有一个或多个双键的直链或支链烃基。烯基的示例性实例包括烯丙基、高烯丙基、乙烯基、巴豆基、丁烯基、戊烯基和己烯基等。具有一个以上双键的C2-6链烯基的示例性实例包括丁二烯基、戊二烯基、己二烯基和己三烯基以及它们的支化形式。不饱和键(双键)的位置可以是在碳链的任何一个位置。烯基可以是取代的或非取代的。

在本申请中，术语“亚烯基”通常是指具有从烯烃的碳原子上除去两个氢原子所衍生的残基。例如，可以是亚烯丙基、亚乙烯基、亚丁烯基、亚戊烯基和亚己烯基等。亚烯基可以是取代的或非取代的。

在本申请中，术语“炔基”通常是指不饱和直链或支链炔基，例如乙炔基、1-丙炔基、炔丙基、丁炔基等。炔基可以是取代的或非取代的。

在本申请中，术语“亚炔基”通常是指具有从炔烃的碳原子上除去两个氢原子所衍生的残基。例如，可以是亚乙炔基、亚丙炔基、亚炔丙基、亚丁炔基等。亚炔基可以是取代的或非取代的。

在本申请中，术语“芳基”通常是指具有芳环上除去一个氢原子所衍生的残基。术语“芳环”可以指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)，可以为6至10元，例如苯和萘。所述芳环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环。芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以为一个或多个以下基团，其独立地选自以下组：烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、和杂环烷硫基。芳基可以是取代的或非取代的。

在本申请中，术语“亚芳基”通常是指具有从芳环的碳原子上除去两个氢原子所衍生的残基。例如，可以是亚苯基和亚萘基。亚芳基可以是取代的或非取代的。

在本申请中，术语“杂芳基”通常是指具有从杂芳环的碳原子上除去一个氢原子所衍生的残基。术语“杂芳环”指包含1至4个杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子可以选自以下组：氧、硫和氮。杂芳基可以为5至10元，可以为5元或6元，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环。杂芳基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以为一个或多个以下基团，其独立地选自以下组：烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、和杂环烷硫基。杂芳基可以是取代的或非取代的。

在本申请中，术语“亚杂芳基”通常是指具有从杂芳环的碳原子上除去两个氢原子所衍生的残基。例如，可以是亚呋喃基、亚噻吩基、亚吡啶基、亚吡咯基、亚嘧啶基、亚吡嗪基、亚咪唑基、亚四唑基等。亚杂芳基可以是取代的或非取代的。

在本申请中，术语“脂环基”通常是指具有从脂肪环的相同碳原子或多个不同的碳原子上除去氢原子所衍生的残基。术语“环烷”通常指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃，碳环包含3至20个碳原子，可以包含3至12个碳原子，可以包含3至10个碳原子，可以包含3至8个碳原子。脂环基的非限制性实例包括环丙烷基、环丁烷基、环戊烷基、环戊烯基、环己烷基、环己烯基、环己二烯基、环庚烷基、环庚三烯基、环辛烷基等；多环碳环可以包括螺环、稠环和桥环的碳环。脂环基可以是取代的或非取代的。在本申请中，术语“碳环基”通常是指具有碳环的碳原子上除去一个氢原子所衍生的残基。术语“碳环”通常指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃，碳环包含3至20个碳原子，可以包含3至12个碳原子，可以包含3至10个碳原子，可以包含3至8个碳原子。单环碳环的非限制性实例包括环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烯、环己烷、环己烯、环己二烯、环庚烷、环庚三烯、环辛烷等；多环碳环可以包括螺环、稠环和桥环的碳环。碳环基可以是取代的或非取代的。在某些情形下，脂环和碳环可以相互替代使用。

在本申请中，术语“部分不饱和的”通常是指环状结构中环分子间至少含一个双键或三键。术语“部分不饱和”涵盖带有多处不饱和的环状结构，但并非意在包括本申请所定义的芳环或杂芳环。术语"不饱和的"表示部分具有一个或多个不饱和度。

在本申请中，术语“亚脂环基”通常是指具有从脂环的碳原子上除去两个氢原子所衍生的残基。例如，可以是亚环丙烷基、亚环丁烷基、亚环戊烷基、亚环戊烯基、亚环己烷基、亚环己烯基、亚环己二烯基、亚环庚烷基、亚环庚三烯基、亚环辛烷基等；多环碳环可以包括螺环、稠环和桥环的碳环。亚脂环基可以是取代的或非取代的。

在本申请中，术语“脂杂环基”通常是指稳定的不具有芳香性的3元-7元单环碳环结构，融合的7元-10元双环杂环结构或桥联的6元-10元双环杂环结构，这些环状结构即可以是饱和的，也可以是部分饱和的，除碳原子外，这些环状结构中还含有一个或多个杂原子，其中杂原子可以选自以下组：氧、硫和氮。例如是含有1-4个上述定义的杂原子。当用来表示脂杂环环状结构上的原子时，术语“氮”可以包括发生过取代反应的氮。例如，脂杂环基可以包含“杂环烷基”，杂环烷基可以指稳定的不具有芳香性的3元-7元单环烷结构，融合的7元-10元双环杂环结构或桥联的6元-10元双环杂环结构，除碳原子外，这些环状结构中还含有一个或多个杂原子，其中杂原子可以选自以下组：氧、硫和氮。例如是含有1-4个上述定义的杂原子。杂环烷基可以是取代的或非取代的。脂杂环基可以是取代的或非取代的。

在本申请中，术语“亚脂杂环基”通常是指具有从脂杂环的碳原子上除去两个氢原子所衍生的残基。亚脂杂环基可以是取代的或非取代的。

在本申请中，术语“成环原子”通常是指环状结构上包含的原子。例如，成环原子可以是苯环上的碳原子，可以是吡啶环上的氮原子。当成环原子上连接氢原子时，成环原子可以是取代的或非取代的。

在本申请中，术语“各自独立地”通常是指变量适用于任何一种情况，而不考虑在相同化合物中具有相同或不同定义的变量存在与否。例如其中的变量可以是指化合物的取代基种类、数量或化合物中原子的种类等。例如，在化合物中出现2次R并且R被定义为“独立地碳或氮”时，两个R可以均为碳，两个R可以均为氮，或一个R可以为碳而另一个R为氮。

在本申请中，术语“任选”或“任选地”通常意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但不必须存在，该说明可以包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。

在本申请中，术语“取代的”通常指基团中的一个或多个氢原子，例如为最多5个，例如为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。

在本申请中，术语0个或多个(例如，0个或1个以上、0个或1个、0个)亚甲基单元被“替代”通常指当所述结构包含1个或多个亚甲基单元时，所述一个或多个亚甲基单元可以不被替代，或被一个或多个不是亚甲基的基团(例如-NHC(O)-、-C(O)NH-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-NH-、-O-、-S-、-SO-、-SO ₂-、-PH-、-P(＝O)H-、-NHSO ₂-、-SO ₂NH-、-C(＝S)-、-C(＝NH)-、-N＝N-、-C＝N-、-N＝C-或-C(＝N ₂)-)所替代。

在本申请中，术语“能够与氨基偶联的基团”通常是指所述化合物A具有氨基，所述化合物B具有能够与氨基偶联的基团，化合物B通过能够与氨基偶联的基团与化合物A的氨基反应，可以以此实现化合物A与化合物B的连接。

在本申请中，术语“能够与巯基偶联的基团”通常是指所述化合物A具有巯基，所述化合物B具有能够与巯基偶联的基团，化合物B通过能够与巯基偶联的基团与化合物A的巯基反应，可以以此实现化合物A与化合物B的连接。

在本申请中，术语“点击化学基团”通常是指能够快速高效偶联的反应基团。例如，点击化学反应可以包含以下组反应：环加成反应、亲核开环反应、非醇醛的羰基化学和碳碳多键的加成反应。例如，点击化学基团可以选自以下组：

在本申请中，基团X与基团Y的“连接”通常可以处于任一定向，任一定向通常是指在基团X用于连接体Y和基团Z时，所述基团X的两个或更多个连接位点可以任意地与基团Y或基团Z连接。例如，SP ²的-C(O)O-与(SP ¹) _n1的-NH-CH ₂-连接，可以是SP ²的C原子与(SP ¹) _n1的N原子连接，可以是SP ²的O原子与(SP ¹) _n1的N原子连接，可以是SP ²的C原子与(SP ¹) _n1的C原子连接，或可以是SP ²的O原子与(SP ¹) _n1的C原子连接。

在本申请中，术语“取代的”通常指基团中的一个或多个氢原子。例如可以为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。

在本申请中，术语“化合物”通常指具有两种或两种以上不同元素的物质。例如，本申请的化合物可以是有机化合物，例如本申请的化合物可以是分子量500以下的化合物，可以是分子量1000以下的化合物，也可以是分子量1000以上的化合物，也可以是10000以上、100000以上的化合物。在本申请中，化合物还可以是指通过化学键相连的化合物，例如可以是一个或多个分子量1000以下的分子通过化学键与生物大分子相连的化合物，所述生物大分子可以是高聚糖、蛋白、核酸、多肽等。例如本申请的化合物可以包括蛋白质与一个或多个分子量1000以下的分子相连的化合物，可以是包括蛋白质与一个或多个分子量10000以下的分子相连的化合物，可以是包括蛋白质与一个或多个分子量100000以下的分子相连的化合物。

在本申请中，如本领域技术人员可知的，“烷基”、“烯基”、“环烷基”等之类的术语可以在名称前加一个标识表示在特定情况下基团中存在的原子数，例如，C ₁-C ₄烷基，C ₃-C ₇环烷氧基，C ₁-C ₄烷基羰基氨基等，“C”后所跟下标数字表示在基团中存在的碳原子数。例如，C ₃烷基是指具有三个碳原子的烷基(例如，正丙基，异丙基)；C _1-10中，基团的成员可具有落入1-10范围内的任何数目的碳原子。

基团中的一个或多个氢原子，例如为最多5个，例如为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。

在本申请中，术语“亲水氨基酸”通常是指以甘氨酸的亲水性为标准，亲水能力高于甘氨酸的氨基酸可以作为亲水氨基酸。例如，亲水氨基酸可以包含选自以下组的氨基酸：丝氨酸(S)，谷氨酰胺(Q)，精氨酸(R)，赖氨酸(K)，天冬酰胺(N)，谷氨酸(E)，脯氨酸(P)，和天冬氨酸(D)。在本申请中，术语“疏水氨基酸”通常是指以甘氨酸的亲水性为标准，亲水能力低于甘氨酸的氨基酸可以作为疏水氨基酸。例如，疏水氨基酸可以包含选自以下组的氨基酸：苯丙氨酸(F)，异亮氨酸(I)，亮氨酸(L)，色氨酸(W)，缬氨酸(V)，甲硫氨酸(M)，酪氨酸(Y)，瓜氨酸(C)，丙氨酸(A)，苏氨酸(T)，和组氨酸(H)。例如，甘氨酸作为特殊氨基酸，既不是亲水氨基酸，也不是疏水氨基酸。

药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述那些适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制该混悬液。无菌注射制剂也可以是在无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中制备的无菌注射溶液或混悬液，例如1,3-丁二醇中制备的溶液。此外，可方便地用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。例如，可使用包括合成甘油单或二酯在内的任何调和固定油。此外，脂肪酸例如油酸也可以制备注射剂。

术语“载药量”通常是指每个配体上加载的药物平均数量，也可以表示为药物和抗体量的比值，药物载量的范围可以是每个配体(Ab)连接0-12个，例如1-10个药物。在本申请的实施方式中，载药量表示为N ^a-I，示例性的可以为1，2，3，4，5，6，7，8，9，10的均值。可用常规方法如UV/可见光光谱法，质谱，ELISA试验和HPLC特征鉴定偶联反应后每个ADC分子的载药量。例如，本申请连接配体的化学键数可以不限于1条，当本申请使用一条横线表示配体与药物连接或者配体与连接体连接时，该条横线可以表示配体与与药物或者连接体的连接是通过一条化学键，如共价键连接的，也可以表示配体与与药物或者连接体的连接是通过两条及以上条化学键，如共价键连接的。

在本申请中，术语“包含”通常是指包括明确指定的特征，但不排除其他要素。术语“以上”、“以下”通常是指包含本数的情况。

在本申请中，术语“约”通常是指在指定数值以上或以下0.5％-10％的范围内变动，例如在指定数值以上或以下0.5％、1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、8.5％、9％、9.5％、或10％的范围内变动。

在本申请中，本申请的化合物包含化合物的其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、和/或非对映异构体。在本申请中，术语“非对映异构体”通常是指具有两个或更多个手性中心并且其分子不是彼此的镜像的立体异构体。非对映异构体可以具有不同的物理性质，例如、熔点、沸点、波谱性质和反应性。在本申请中，术语“互变异构体”或“互变异构形式”可互换使用，通常是指可通过低能垒(low energy barrier)互相转化的不同能量的结构异构体。例如，质子互变异构体(protontautomer)(也称为质子移变互变异构体(prototropic tautomer))包括通过质子迁移进行的互相转化，诸如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体(valence tautomer)包括通过一些成键电子的重组进行的互相转化。在本申请中，术语“内消旋体”通常是指分子内含有不对称性的原子，但具有对称因素而使分子内总旋光度为零。术语"外消旋体"或"外消旋混合物"是指由等摩尔量的两种对映异构体物质构成的组合物。

在本申请中，本申请的化合物的某些原子可能以一种以上的同位素形式出现。例如，氢可能以氕( ¹H)、氘( ²H)和氚( ³H)的形式存在，碳可能以三种不同的同位素( ¹²C、 ¹³C和 ¹⁴C)自然存在。可并入本申请化合物中的同位素示例还包括但不限于 ¹⁵N、 ¹⁸O、 ¹⁷O、 ¹⁸F、 ³²P、 ³³P、 ¹²⁹I、 ¹³¹I、 ¹²³I、 ¹²⁴I、 ¹²⁵I，或者类似的同位素。因此，相对于这些同位素的自然丰度，本申请的化合物可富集在一种或多种这些同位素中。如本领域技术人员所知，此类同位素富集化合物可用于多种用途。例如，用重同位素如氘( ²H)替代可能会提供某些治疗优势，这可以是由于更高的代谢稳定性。例如，氘( ²H)的自然丰度约为0.015％。因此，自然界中大约每6500个氢原子，就有一个氘原子。因此，本申请的含氘化合物在一个或多个位置(视情况而定)的氘丰度大于0.015％。除非另有指明，否则本申请所述的结构还可以包括仅在是否存在一个或多个同位素富集原子方面存在差别的化合物。举例而言，除了氢原子被氘或氚所取代，或碳原子被碳13或碳14所取代之外，其余部分均与本申请结构一致的化合物均在本申请的范围之内。

在本申请中，术语“药物组合物”通常是指含有一种或多种本申请所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物可以是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。常规的药物组合物的制备可以见中国药典。

在本申请中，术语“药学上可接受的盐”或“可药用的盐”通常是指本申请化合物或配体-药物偶联物的盐，或本申请中所述的化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时可以具有安全性和/或有效性，且可以具有应有的生物活性，本申请抗体-抗体药物偶联化合物可以与酸形成盐，药学上可接受的盐的非限制性实例包括：盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、柠檬酸盐、乙酸盐、琥珀酸盐、抗坏血酸盐、草酸盐、硝酸盐、梨酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐、水杨酸盐、柠檬酸氢盐、酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐。

在本申请中，术语“偶联物”通常是指本申请的化合物通过一个或多个化学反应而制备的化合物，或者通过诸如桥接(bridge)，间隔物(spacer)，或连接部分等的一个或多个连接结构彼此连接。

在本申请中，术语“药学上可接受的载体”通常是指给予治疗剂，例如抗体或多肽、基因和其它治疗剂的载体。该术语指本身不诱导对接受组合物的个体有害的抗体产生并且可以给予而不产生过度毒性的任何药物载体。合适的载体可以是大的、代谢缓慢的大分子，例如蛋白质、多糖、聚乳酸、聚乙醇酸、多聚氨基酸、氨基酸共聚物、脂质聚集物和灭活的病毒颗粒。本领域技术人员熟知这些载体。治疗组合物中药学上可接受的载体可包括液体，例如水、盐水、甘油和乙醇。这些载体中也可存在辅助物质，例如润湿剂或乳化剂、pH缓冲物质等。

在本申请中，术语“抗体”通常是指对指定蛋白质或肽或其片段有反应性的免疫球蛋白。抗体可以是来自任何类的抗体，包括但不限于IgG、IgA、IgM、IgD和IgE，及来自任何亚类(例如IgG1、IgG2、IgG3、和IgG4)的抗体。抗体可具有选自例如IgG1、IgG2、IgG3、或IgG4的重链恒定区。抗体还可具有选自例如kappa(κ)或lambda(λ)的轻链。本申请的抗体可衍生自任何物种。术语“抗体”可包括完整的多克隆抗体、完整的单克隆抗体、嵌合抗体、人源化抗体、人抗体、包含抗体的融合蛋白和任何其他经修饰的免疫球蛋白分子，只要这些抗体展示出所需的生物活性即可。

在本申请中，术语“抗原结合片段”通常是指抗体分子的一部分，其包含负责抗体与抗原之间的特异性结合的氨基酸。抗原中由抗体特异性地识别和结合的部分是称作如上文所述的“表位”。如上文所述，抗原结合结构域可典型地包含抗体轻链可变区(VL)和抗体重链可变区(VH)；然而，其并非必须包含两者。Fd片段例如具有两个VH区并且通常保留完整抗原结合结构域的一些抗原结合功能。抗体的抗原结合片段的实例包括(1)Fab片段，具有VL、VH、恒定轻链(CL)和CH1结构域的单价片段；(2)F(ab′)2片段，具有由铰链区的二硫桥连接的两个Fab片段的二价片段；(3)具有两个VH和CH1结构域的Fd片段；(4)具有抗体单臂的VL和VH结构域的Fv片段，(5)dAb片段，其具有VH结构域；(6)分离的互补决定区(CDR)；(7)单链Fv(scFv)，例如源于scFV-文库。尽管Fv片段的两个结构域VL和VH是由独立基因编码，但其可通过合成连接子使用重组方法接合，合成连接子使得其被制备为其中VL和VH区配对以形成单价分子的单一蛋白链(称为单链Fv(scFv))；(8)“VHH”涉及来自骆驼科(骆驼、单峰骆驼、美洲驼、羊驼等)重链抗体的可变抗原结合结构域。VHH也可称为纳米抗体(Nanobody)(Nb)。

在本申请中，术语“可变区”或“可变结构域”通常是指参与抗体与抗原的结合的抗体重链或轻链的结构域。在本申请中，术语“可变”通常是指，抗体的可变结构域的序列的某些部分变化强烈，形成各种特定抗体对其特定抗原的结合和特异性。变异性并非均匀地分布在抗体的整个可变区中。它集中在轻链可变区和重链可变区中的三个区段，被称为互补决定区(CDR) 或高变区(HVR)，分别为LCDR1、LCDR2、LCDR3、HCDR1、HCDR2和HCDR3。可变域中更高度保守的部分被称为框架区(FR)。天然重链和轻链的可变结构域各自包含四个FR区(H-FR1，H-FR2，H-FR3，H-FR4，L-FR1，L-FR2，L-FR3，L-FR4)，大部分采用β-折叠构型，通过三个CDR结构环区连接。每条链中的CDR通过FR区紧密靠近在一起，并与来自另一条链的CDR一起形成抗体的抗原结合位点。在本领域中，可以通过多种方法来编码抗体的可变区或划分抗体的CDR，例如基于序列可变性的Kabat编号方案和定义规则，基于结构环区域位置的Chothia编号方案和定义规则，efranc等人的基于种系V基因的氨基酸序列比对的IMGT编号方案和定义规则，还有Honneger’s编号方案(AHo’s)，Martin编号方案，Gelfand编号方案等。

在本申请中，术语“百分比(％)序列同一性”通常是指两个或更多个经比对的氨基酸序列与组成这些氨基酸序列的总长度的氨基酸残基数相比而言一致的氨基酸的匹配(“命中”)数。换言之，使用比对，对于两个或更多个序列，当将这些序列针对最大对应(如使用本领域已知的序列比较算法测量的)进行比较和比对时，或者当手动比对和视觉检查时，可以确定相同的氨基酸残基的百分比(例如70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性)。因此，进行比较以确定序列一致性的序列可以通过一个或多个氨基酸取代、添加或缺失来区分。用于比对蛋白序列的适合程序是本领域技术人员已知的。蛋白序列的百分比序列一致性可以例如用程序如CLUSTALW、Clustal Omega、FASTA或BLAST来确定，例如使用NCBI BLAST算法。

在本申请中，术语“抗体类似物”通常以最广意义使用并且特别地涵盖以单特异性特异地结合靶分子并且结构上与天然抗体不同的分子。例如，术语“抗体类似物”是指包含与氨基酸序列的部分具有大体上的同一性的区段并且具有至少一个下列性质的抗体：(1)在适当的结合条件下特异性结合相同抗原，(2)抑制抗原的至少一个生物活性的能力。通常，抗体类似物包含相对于天然序列的保守氨基酸置换(或插入或缺失)。类似物通常为至少20或25个氨基酸长，至少50、60、70、80、90、100、150或200个氨基酸长或更长，并且通常可与抗体的全长重链或轻链一样长。一些例子包括与种系氨基酸序列相比具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16或17个置换的抗体类似物。

在本申请中，术语“BDCA2”通常是指一种Ⅱ型C型凝集素。本申请的BDCA2通常可以包含血液树突细胞抗原2(Blood Dendritic Cells Antigen 2)、其变体以及其功能活性片段。以BDCA-2为靶分子可以靶向树突细胞的炎症环境。例如，BDCA2在UniProt中的登录号可以是Q8WTT0。

在本申请中，术语“TNFα”通常是指一种细胞因子，例如肿瘤坏死因子-α。本申请的TNFα通常可以包含肿瘤坏死因子-α、其变体以及其功能活性片段。以TNFα为靶分子可以靶向炎症环境。例如，TNFα在UniProt中的登录号可以是P01375。

在本申请中，术语“CD40”通常是指肿瘤坏死因子(TNF)受体家族的50-55kDa跨膜糖蛋白。本申请的CD40通常可以包含CD40、其变体以及其功能活性片段。以CD40为靶分子可以靶向B细胞的炎症环境。例如，CD40在UniProt中的登录号可以是A0A0S2Z3C7。

在本申请中，术语“IFNAR”通常是指干扰素受体。本申请的IFNAR通常可以包含干扰素受体、其变体以及其功能活性片段。以IFNAR为靶分子可以靶向免疫细胞的炎症环境。例如，IFNAR在UniProt中的登录号可以是P17181。

在本申请中，术语“有效量”或“治疗有效量”通常是指足以实现下文说明的预期应用的本申请所述的化合物或药物组合物的量，所述预期应用包括但不限于疾病治疗。治疗有效量可根据以下变化：预期应用(体内或体外)；或所治疗的对象及疾病状况，例如，对象的体重和年龄、疾病状况的严重程度；给药方式等，其可以由本领域普通技术人员容易地确定。术语还适用于将在靶细胞中诱导特定应答的剂量。具体剂量将根据例如以下变化：选择的具体化合物、遵循的给药方案、是否与其他药剂组合施用、施用时间、施用的组织，和运送其的实体递送系统。

在本申请中，术语“体内”通常是指发生在对象体内的事件。在本申请中，术语“体外”通常是指在对象体外发生的事件。例如，体外分析包括任何在对象外部进行的分析。体外分析包括基于细胞的分析，其中采用活细胞或死细胞。体外分析还包括无细胞分析，其中不采用完整的细胞。

在本申请中，术语“治疗(treatment)”和“治疗(treating)”通常是指获得有益或希望的结果的方法，所述有益或希望的结果包括但不限于治疗益处。治疗益处包括但不限于根除、抑制、减少或改善所治疗的潜在障碍。另外，治疗益处是通过根除抑制、减少或改善与潜在的障碍相关的一种或多种生理症状实现的，从而在患者中观察到改善，但是患者仍然可能患有潜在障碍。

在本申请中，术语“预防(prevention)”和“预防(preventing)”通常是指获得有益或希望的结果的方法，所述有益或希望的结果包括但不限于预防益处。为了预防益处，可以向处于患上特定疾病的风险的患者或向报告具有疾病的一种或多种生理症状的患者施用药物组合物，即使尚未诊断出该疾病。

在本申请中，术语“受试者”或“患者”通常是指人类(即，任何年龄组的男性或女性，例如，小儿对象(例如，婴儿、儿童、青少年)或成人对象(例如，年轻人、中年人或老年人))和/或其他灵长类动物(例如，食蟹猴、恒河猴)；哺乳动物，包括商业上相关的哺乳动物，如牛、猪、马、绵羊、山羊、猫和/或犬；和/或鸟类，包括商业上相关的鸟类，如鸡、鸭、鹅、鹌鹑和/或火鸡。

在本申请中，术语“约”或“大约”通常是指本领域普通技术人员测定的具体值的可接受的误差，其部分取决于测量或测定值的方式。在某些实施方式中，术语“约”或“大约”通常是指1、2、3或4个标准偏差。在某些实施方式中，术语“约”或“大约”通常是指在给定值或范围50％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％或0.05％内。

在本申请中，术语“包含”和其变形形式，包括“含有”、“包括”等其它形式，通常是指包含其它组分、元素、数值、步骤等。

发明详述

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(I)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂、R ₃、R _p1、R _p2和R _p3可以各自独立地为任意基团；

X可以选自以下组：N和任选取代的CH；

W可以不存在或者W可以为任意基团；

A可以为任意基团，其中A还可以被一个或多个Y取代，每一个Y各自独立地可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、任选取代的-OH、任选取代的-CH ₂-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂和任选取代的-NH ₂；当X可以为CH且W可以为-S-时，A可以不为苯基。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(I-a1)或式(I-a2)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂、R ₃和Y可以各自独立地为任意基团，yn可以为至少为0的数，

W可以不存在或者W可以为任意基团，其中W可以不为-S-。

例如，包含式(I)、式(I-a1)或式(I-a2)所示结构的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，R ₁、R ₂和R ₃可以各自独立地选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R ₁、R ₂和R ₃包含亚甲基单元时，所述R ₁、R ₂和R ₃的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R ₁、R ₂和R ₃的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R ₁可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、和任选取代的C ₁-C ₆烷基。

所述R ₁可以选自以下组：氢、F、Cl、Br、和任选取代的甲基。例如，R ₁可以为H或氟。

所述R ₂可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、和任选取代的C ₁-C ₆烷基。

所述R ₂可以选自以下组：氢、F、Cl、Br、和任选取代的甲基。例如，R ₂可以为H或氟。

所述R ₃可以选自以下组：氢、任选取代的-OH、任选取代的-SH、和任选取代的C ₁-C ₆烷基。

当所述R ₃可以为任选取代的甲基时，所述R ₃可以被R ₃₁取代，所述R ₃₁可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R ₃₁包含亚甲基单元时，所述R ₃₁的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R ₃₁的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R ₃₁可以选自以下组：氢、卤素、任选取代的-OH、和任选取代的-SH。

当所述R ₃₁可以为任选取代的-OH时，所述R ₃₁可以被R ₃₁₁取代，所述R ₃₁₁可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R ₃₁₁包含亚甲基单元时，所述R ₃₁₁的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R ₃₁₁的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R ₃₁₁可以选自以下组：氢、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的C ₁-C ₆烷基、和任选取代的C ₂-C ₉亚脂杂环基。

所述R ₃₁₁可以选自以下组：氢、任选取代的任选取代的和任选取代的

当所述R ₃可以为任选取代的-OH时，所述R ₃可以被R ₃₂取代，所述R ₃₂可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R ₃₂包含亚甲基单元时，所述R ₃₂的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R ₃₂的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R ₃₂可以选自以下组：氢、和任选取代的C ₁-C ₆烷基。

当所述R ₃₂可以为任选取代的甲基或任选取代的乙基时，所述R ₃₂可以被R ₃₂₁取代，所述 R ₃₂₁可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R ₃₂₁包含亚甲基单元时，所述R ₃₂₁的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R ₃₂₁的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R ₃₂₁可以选自以下组：氢、卤素、-CN、和任选取代的C ₁-C ₆烷基。

所述R ₃₂₁可以选自以下组：氢、F、Cl、-CN、和任选取代的甲基。

当所述R ₃可以为任选取代的-SH时，所述R ₃可以被R ₃₃取代，所述R ₃₃可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R ₃₃包含亚甲基单元时，所述R ₃₃的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R ₃₃的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R ₃₃可以选自以下组：氢、和任选取代的C ₁-C ₆烷基。

当所述R ₃₃可以为任选取代的甲基或任选取代的乙基时，所述R ₃₃可以被R ₃₃₁取代，所述R ₃₃₁可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R ₃₃₁包含亚甲基单元时，所述R ₃₃₁的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R ₃₃₁的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R ₃₃₁可以选自以下组：氢、卤素和-CN。

所述R ₃可以选自以下组：任选取代的-CH ₂Cl、任选取代的-CH ₂SH、任选取代的-CH ₂OH、任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的羟基、任选取代的-OCH ₃、任选取代的-OCH ₂F、任选取代的-OCH ₂Cl、任选取代的-OCH ₂CN、任选取代的-OCH ₂CH ₃、任选取代的巯基、任选取代的-SCH ₂F、任选取代的-SCH ₂Cl、任选取代的-SCH ₂CF ₃、和任选取代的-SCH ₂CN。

所述R ₃可以选自以下组：任选取代的-CH ₂Cl、任选取代的-CH ₂SH、任选取代的-CH ₂OH、任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的-OH、任选取代的-OCH ₃、任选取代的-OCH ₂F、任选取代的-OCH ₂Cl、任选取代的-OCH ₂CN、任选取代的-OCH ₂CH ₃、任选取代的巯基、任选取代的-SCH ₂F、任选取代的-SCH ₂Cl、任选取代的-SCH ₂CF ₃、和任选取代的-SCH ₂CN。

所述R ₃可以选自-CH ₂OH、-SCH ₂F、

R _p1、R _p2和R _p3可以各自独立地选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基。

当所述X可以为任选取代的CH时，所述X可以被R ₄取代，所述R ₄可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R ₄包含亚甲基单元时，所述R ₄的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R ₄的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R ₄可以选自以下组：氢和任选取代的-OH。

当所述R ₄可以为任选取代的-OH时，所述R ₄可以被R ₄₁取代，所述R ₄₁可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R ₄₁包含亚甲基单元时，所述R ₄₁的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R ₄₁的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R ₄₁可以选自以下组：H和任选取代的C ₁-C ₆烷基。

所述R ₄₁可以为任选取代的甲基。

所述X可以为N。

所述X可以选自以下组：CH、C(-O-CH ₃)、和N。

W可以不存在、或W可以选自以下组：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基；其中，当W包含亚甲基单元时，所述W的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述W的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述W可以不存在。

所述W可以选自以下组：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、和任选取代的亚炔基，其中，当W包含亚甲基单元时，所述W的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述W的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

当所述W可以为任选取代的C ₁-C ₆亚烷基时，所述W可以被R ₅取代，所述R ₅可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R ₅包含亚甲基单元时，所述R ₅的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R ₅的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R ₅可以选自以下组：氢、＝O、任选取代的C ₁-C ₆烷基和任选取代的脂环基。

所述R ₅可以为任选取代的甲基。

当所述R ₅可以为任选取代的甲基时，所述R ₅可以被R ₆取代，所述R ₆可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基。

所述R ₆可以选自以下组：卤素和任选取代的脂环基。

所述R ₆可以为F。

所述R ₆可以为任选取代的环丙基。

所述R ₅可以为任选取代的脂环基。

所述R ₅可以为任选取代的环丙基。

当所述W可以为任选取代的C ₁-C ₆亚烷基，所述W包含亚甲基单元时，所述W的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述W的亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述W的亚甲基单元可以被选自以下组替代：-O-、-S-、任选取代的-NH-和任选取代的亚脂环基。

所述W可以为亚甲基，所述W的所述亚甲基单元可以被任选取代的亚脂环基替代。

所述W可以为亚甲基，所述W的所述亚甲基单元可以被任选取代的环丙基替代。

所述W可以为亚甲基，所述W的所述亚甲基单元可以被任选取代的环丁基替代。

所述W可以为任选取代的-NH-时，所述W可以被R ₅取代，所述R ₅可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R ₅包含亚甲基单元时，所述R ₅的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R ₅的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R ₅可以为任选取代的甲基。

所述W可以为任选取代的C ₂-C ₆亚烯基。

所述W可以为任选取代的C ₂-C ₆亚炔基。

所述W可以不存在或所述W可以为任选取代的-NCH ₃-、任选取代的-CH ₂CH ₂-、任选取代的-CH＝CH-、-C≡C-、任选取代的-CO-NH-、任选取代的-OCH ₂-、任选取代的-CH ₂O-、任选取代的-SCH ₂-、任选取代的-CH ₂S-、或任选取代的-NH-CO-。

所述W可以不存在或W可以选自任选取代的以下组结构：

所述W可以不存在、或所述W可以选自以下组：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、任选取代的-NH-、任选取代的C ₁-C ₆亚烷基、和任选取代的C ₂-C ₆亚烯基、和任选取代的C ₂-C ₆亚炔基，其中，当W包含亚甲基单元时，所述W的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述W的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-O-、-S-、和任选取代的-NH-。

所述W可以不存在、或所述W可以选自以下组：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、任选取代的-NH-、任选取代的-CH＝CH-、-C≡C-、任选取代的C ₁-C ₆亚烷基、任选取代的-OCH ₂-、任选取代的-CH ₂O-、任选取代的-SCH ₂-、任选取代的-CH ₂S-、任选取代的-NHC(＝O)-、任选取代的-COCH ₂-、任选取代的-CH ₂NH-、任选取代的-NHCH(CH ₃)-、任选取代的-NHCH ₂-、任选取代的-CH(CH ₃)-、任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的

A可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当A包含亚甲基单元时，所述A的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述A的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基；A还可以被一个或多个Y取代，每一个Y各自独立地可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、任选取代的-OH、任选取代的-CH ₂-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂和任选取代的-NH ₂。例如，每一个Y可以各自独立地为任选取代的-CH ₂-OH，所述Y可以被一个或多个H或卤素或任选取代的C ₁-C ₃烷基取代。

所述A可以选自以下组：任选取代的C ₁-C ₆烷基、任选取代的C ₃-C ₁₀脂环基、任选取代的C ₂-C ₉脂杂环基、任选取代的C ₆-C ₁₀芳基和任选取代的C ₁-C ₉杂芳基。

当所述A可以为任选取代的甲基或任选取代的乙基时，所述A可以被R _a1取代，所述R _a1可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R _a1包含亚甲基单元时，所述R _a1的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R _a1的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R _a1可以为任选取代的C ₁-C ₆烷基。

当所述R _a1可以为任选取代的甲基时，所述R _a1可以被R _a11取代，所述R _a11可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R _a11包含亚甲基单元时，所述R _a11的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R _a11的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R _a11可以为任选取代的C ₃-C ₁₀脂环基。

所述R _a11可以为任选取代的环丙基。

当所述A可以为任选取代的C ₃-C ₁₀脂环基时，所述A可以被R _a2取代，所述R _a2可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R _a2包含亚甲基单元时，所述R _a2的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R _a2的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述A可以选自以下组：任选取代的环丙烷、任选取代的环丁烷和任选取代的环己烷。

当所述A可以为任选取代的C ₂-C ₉脂杂环基时，所述A可以被R _a3取代，所述R _a3可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R _a3包含亚甲基单元时，所述R _a3的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R _a3的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述A可以包含一个氮杂原子。

所述A可以选自以下组：任选取代的氮杂环丁烷和任选取代的氮杂环己烷。

当所述A可以为任选取代的苯基时，所述A可以被R _a4取代，所述R _a4可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R _a4包含亚甲基单元时，所述R _a4的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R _a4的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R _a4可以选自以下组：氢、卤素和任选取代的-OH。

所述R _a4可以选自以下组：氢、Cl和任选取代的-OH。

当所述R _a4可以为任选取代的-OH时，所述R _a4可以被R _a41取代，所述R _a41可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R _a41包含亚甲基单元时，所述R _a41的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R _a41的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R _a41可以为任选取代的C ₁-C ₆烷基。

所述R _a41可以为任选取代的甲基。

当所述A可以为任选取代的C ₁-C ₉杂芳基时，所述A可以被R _a5取代，所述R _a5可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R _a5包含亚甲基单元时，所述R _a5的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R _a5的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述A可以包含一个氮杂原子。

所述A可以为任选取代的吡啶基。

所述A可以选自以下组：任选取代的C ₁-C ₆烷基、任选取代的苯基、和任选取代的C ₃-C ₆脂环基；其中，当A包含亚甲基单元时，所述A的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述A的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基；其中，A可以被一个或多个Y取代。

所述A可以选自以下组：任选取代的-CH ₂-Y、任选取代的-(CH ₂) ₂-Y、任选取代的-(CH ₂) ₃-Y、任选取代的-CH ₂-CH(-CH ₃)-Y、任选取代的-CH ₂(-CH ₂-环丙基)-Y、任选取代的环丙基-Y、任选取代的环丁基-Y、任选取代的环己基-Y、任选取代的氮杂环丁基-Y、任选取代的氮杂环己基-Y、任选取代的-苯基-Y、任选取代的-苯基(-O-CH ₃)-Y、任选取代的-苯基(-Cl)-Y、和任选取代的-吡啶基-Y。

所述A可以选自以下组：任选取代的-CH ₂-Y、任选取代的-CO-CH ₂-Y、任选取代的-(CH ₂) ₂-Y、任选取代的-(CH ₂) ₃-Y、任选取代的-CH ₂-CH(-CH ₃)-Y、任选取代的-CH ₂(-CH ₂-环丙基)-Y、任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的

所述A可以选自以下组：任选取代的和任选取代的所述yn可以为至少为0的数。

每一个Y可以各自独立地选自以下组：氢、任选取代的-OH、任选取代的-CH ₂-OH、任选取代的-SH和任选取代的-NH ₂。

每一个Y可以各自独立地选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、任选取代的羟基、任选取代的的烷基羟基、任选取代的巯基、任选取代的氨基、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环烷基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基。

每一个Y可以各自独立地选自以下组：任选取代的羟基、任选取代的烷基羟基、任选取代的巯基、任选取代的氨基和任选取代的C ₁-C ₆烷基。例如，所述Y可以为任选取代的-(CH ₂)ym-OH，所述ym可以为至少为0的数，所述Y的亚甲基单元可以各自独立地被任意基团替代。例如，所述Y可以为任选取代的C ₁-C ₆烷基羟基，所述Y可以被H、卤素、任选取代的C ₁-C ₆烷基或任选取代的C ₁-C ₆卤代烷基取代。例如，所述Y可以为任选取代的C ₁-C ₃烷基羟基，所述Y可以被H、卤素、任选取代的C ₁-C ₃烷基或任选取代的C ₁-C ₃卤代烷基取代。

当所述Y可以为氢时，所述A包含任选取代的亚脂杂环基，且所述A的亚脂杂环基包含成环原子X _a，所述X _a可以为任选取代的NH。

当所述Y可以为氢时，所述A可以选自以下组：任选取代的氮杂环丁基-Y、和任选取代的氮杂环己基-Y。

当所述Y可以为氢时，所述A可以选自以下组：任选取代的和任选取代的

其中，所述R ₁可以选自以下组：氢、卤素、和任选取代的甲基，所述R ₂可以选自以下组：氢、卤素、和任选取代的甲基，所述R ₃可以选自以下组：任选取代的-CH ₂Cl、任选取代的-CH ₂SH、任选取代的-CH ₂OH、任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的-OH、任选取代的-OCH ₃、任选取代的-OCH ₂F、任选取代的-OCH ₂Cl、任选取代的-OCH ₂CN、任选取代的-OCH ₂CH ₃、任选取代的巯基、任选取代的-SCH ₂F、任选取代的-SCH ₂Cl、任选取代的-SCH ₂CF ₃、和任选取代的-SCH ₂CN，

所述W可以不存在或所述W可以为任选取代的-NCH ₃-、任选取代的-CH ₂CH ₂-、任选取代的-CH＝CH-、-C≡C-、任选取代的-CO-NH-、任选取代的-OCH ₂-、任选取代的-CH ₂O-、任选取代的-SCH ₂-、任选取代的-CH ₂S-、或任选取代的-NH-CO-，

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数。

其中，所述R ₁可以选自以下组：氢、和卤素，所述R ₂可以选自以下组：氢、和卤素，所述R ₃可以选自以下组：-CH ₂OH、-SCH ₂F、

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，所述化合物包含可以选自以下组的结构：

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃可以各自独立地为任意基团；

B可以选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的亚杂芳基；例如，B可以选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；

W可以不存在或者W可以为任意基团；

A可以为任意基团，其中A还可以被一个或多个Y取代，每一个Y各自独立地可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、任选取代的-OH、任选取代的-CH ₂-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂和任选取代的-NH ₂。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1)或式(II-a2)所示的结构，

其中，R ₁、R ₂、R ₃和Y可以各自独立地为任意基团；

B可以选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的亚杂芳基；例如，B可以选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W可以不存在或者W可以为任意基团；yn可以为至少为0的数。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-b1)或式(II-b2)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂、R ₃和Y可以各自独立地为任意基团；

B可以选自以下组：任选取代的和任选取代的亚杂芳基；例如，B可以选自以下组：任选取代的和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W可以不存在或者W可以为任意基团，其中，当B可以为任选取代的时，W可以不为-S-；yn可以为至少为0的数。

例如，包含式(II)、式(II-a1)、式(II-a2)、式(II-b1)或式(II-b2)所示结构的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

R ₁、R ₂和R ₃可以各自独立地选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R ₁、R ₂和R ₃包含亚甲基单元时，所述R ₁、R ₂和R ₃的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R ₁、R ₂和R ₃的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

当所述R ₃₂可以为任选取代的甲基或任选取代的乙基时，所述R ₃₂可以被R ₃₂₁取代，所述R ₃₂₁可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R ₃₂₁包含亚甲基单元时，所述R ₃₂₁的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R ₃₂₁的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R ₃₃₁可以选自以下组：氢、卤素和-CN。

所述R ₃可以选自-CH ₂OH、-SCH ₂F、

所述B可以选自以下组：任选取代的C ₃-C ₁₀亚脂环基、任选取代的C ₂-C ₉亚脂杂环基和任选取代的亚杂芳基。例如，B可以选自以下组：任选取代的C ₃-C ₁₀亚脂环基、任选取代的C ₂-C ₉亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基。

所述B可以包含一个氮杂原子、一个硫杂原子和/或一个氧杂原子。例如，B可以包含一个氮杂原子、和/或一个硫杂原子。

所述B可以选自以下组：任选取代的吡啶基、任选取代的吡咯基和任选取代的呋喃基。例如，所述B可以选自以下组：任选取代的吡咯基和任选取代的噻吩基。

所述B可以为任选取代的甲基吡咯基。例如，所述B可以为呋喃基。

所述B可以选自以下组：任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的

所述B可以选自以下组：任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的

所述B可以选自以下组：任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的

所述B选自以下组：任选取代的和任选取代的

所述B可以选自以下组：任选取代的亚环丁基、和任选取代的亚环己基。

所述B可以选自以下组：任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的

所述B可以选自以下组：任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基。

所述B可以选自以下组：任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的

所述B可以选自以下组：任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的

所述B可以被R _B取代，所述R _B可以为任意基团。例如，所述R _B可以选自以下组：氢、卤素、任选取代的羟基、任选取代的C ₁-C ₆烷基和任选取代的C ₁-C ₆酯基。例如，所述R _B可以选自以下组：氢、卤素、任选取代的羟基、任选取代的C ₁-C ₃烷基和任选取代的C ₁-C ₃酯基。例如，所述R _B可以为氢、氟、氯、任选取代的C ₁-C ₃烷基、任选取代的羟基、任选取代的羟基-C ₁-C ₃烷基、或任选取代的

W可以不存在、或W可以选自以下组：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基；其中，当W包含亚甲基单元时，所述W的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述W的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、 -O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述W可以不存在。

所述W可以选自以下组：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、和任选取代的亚炔基，其中，当W包含亚甲基单元时，所述W的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述W的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述R ₅可以为任选取代的甲基。

所述R ₆可以选自以下组：卤素和任选取代的脂环基。

所述R ₆可以为F。

所述R ₆可以为任选取代的环丙基。

所述R ₅可以为任选取代的脂环基。

所述R ₅可以为任选取代的环丙基。

所述W的亚甲基单元可以被选自以下组替代：-O-、-S-、和任选取代的-NH-。

所述W可以不存在、或所述W可以选自以下组：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、任选取代的-NH-、任选取代的C ₁-C ₆亚烷基、和任选取代的C ₂-C ₆亚烯基、和任选取代的C ₂-C ₆亚炔基，其中，当W包含亚甲基单元时，所述W的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述W的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-O-、-S-、任选取代的-NH-和任选取代的亚脂环基。

所述W可以不存在、或所述W可以选自以下组：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-NH-、任选取代的-CH＝CH-、-C≡C-、任选取代的C ₁-C ₆亚烷基、任选取代的-OCH ₂-、任选取代的-CH ₂O-、任选取代的-SCH ₂-、任选取代的-CH ₂S-、-CO-、任选取代的-NHC(＝O)-、任选取代的-COCH ₂-、任选取代的-CH ₂NH-、任选取代的-NHCH(CH ₃)-、任选取代的-NHCH ₂-、任选取代的-CH(CH ₃)-、任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的

所述R ₅可以为任选取代的甲基。

所述W可以为任选取代的C ₂-C ₆亚烯基。

所述W可以为任选取代的C ₂-C ₆亚炔基。

所述W可以不存在或W可以选自任选取代的以下组结构：

所述W可以选自任选取代的以下组结构：任选取代的-CH ₂-、任选取代的-CH(CH ₃)-、和任选取代的

A可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当A包含亚甲基单元时，所述A的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述A的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基，A还可以被一个或多个Y取代，每一个Y各自独立地可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、任选取代的-OH、任选取代的-CH ₂-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂和任选取代的-NH ₂。例如，每一个Y可以各自独立地为任选取代的-CH ₂-OH，所述Y可以被一个或多个H或卤素或任选取代的C ₁-C ₃烷基取代。

所述A可以选自可以选自以下组：任选取代的C ₁-C ₆烷基、任选取代的C ₃-C ₁₀脂环基、任选取代的C ₂-C ₉脂杂环基、任选取代的C ₆-C ₁₀芳基和任选取代的C ₁-C ₉杂芳基。

所述R _a1可以为任选取代的C ₁-C ₆烷基。

所述R _a11可以为任选取代的C ₃-C ₁₀脂环基。

所述R _a11可以为任选取代的环丙基。

当所述A可以为任选取代的C ₃-C ₆脂环基时，所述A可以被R _a2取代，所述R _a2可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R _a2包含亚甲基单元时，所述R _a2的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R _a2的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

当所述A可以为任选取代的C ₃-C ₅脂杂环基时，所述A可以被R _a3取代，所述R _a3可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R _a3包含亚甲基单元时，所述R _a3的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R _a3的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述A可以包含一个氮杂原子。

所述R _a4可以选自以下组：氢、卤素和任选取代的-OH。

所述R _a4可以选自以下组：氢、Cl和任选取代的-OH。

所述R _a41可以为任选取代的C ₁-C ₆烷基。

所述R _a41可以为任选取代的甲基。

当所述A可以为任选取代的C ₅杂芳基时，所述A可以被R _a5取代，所述R _a5可以选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R _a5包含亚甲基单元时，所述R _a5的所述亚甲基单元可以各自独立地不被替代、或所述R _a5的所述亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。

所述A可以包含一个氮杂原子。

所述A可以为任选取代的吡啶基。

所述A可以选自以下组：任选取代的-CH ₂-Y、任选取代的-(CH ₂) ₂-Y、任选取代的-(CH ₂) ₃-Y、任选取代的-CH ₂-CH(-CH ₃)-Y、任选取代的-CH ₂(-CH ₂-环丙基)-Y、任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的

每一个Y可以各自独立地以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、任选取代的羟基、任选取代的烷基羟基、任选取代的巯基、任选取代的氨基、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环烷基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基。

每一个Y可以各自独立地以下组：任选取代的羟基、任选取代的烷基羟基、任选取代的巯基、任选取代的氨基和任选取代的C ₁-C ₆烷基。例如，所述Y可以为任选取代的-(CH ₂)ym-OH，所述ym可以为至少为0的数，所述Y的亚甲基单元可以各自独立地被任意基团替代。例如，所述Y可以为任选取代的C ₁-C ₆烷基羟基，所述Y可以被H、卤素、任选取代的C ₁-C ₆烷基或任选取代的C ₁-C ₆卤代烷基取代。例如，所述Y可以为任选取代的C ₁-C ₃烷基羟基，所述Y可以被H、卤素、任选取代的C ₁-C ₃烷基或任选取代的C ₁-C ₃卤代烷基取代。

例如，包含式(II)、式(II-a1)、式(II-a2)、式(II-b1)或式(II-b2)所示结构的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-1)、(II-a1-2)、(II-a1-3)、(II-a2-1)、(II-a2-2)、(II-a2-3)所示的结构，

其中，

R ₃选自：-CH ₂Cl、-CH ₂SH、-CH ₂OH、 -OCH ₃、-OCH ₂F、-OCH ₂Cl、-OCH ₂CN、-OCH ₂CH ₃、-SH、-SCH ₂F、-SCH ₂Cl、-SCH ₂CF ₃和-SCH ₂CN；

通式(II-a1-1)和(II-a2-1)中，Y各自独立地选自：氢、卤素、羟基、巯基、氨基、C ₁-C ₆烷基和-OC ₁-C ₆烷基；通式(II-a1-2)、(II-a1-3)、(II-a2-2)和(II-a2-3)中，Y各自独立地选自：氢、卤素、羟基、巯基、氨基、C ₁-C ₆烷基、-OC ₁-C ₆烷基和-C ₁-C ₆烷基羟基；

yn选自0、1或2；

W选自 -CH(CH ₃)-和

例如，包含式(II)、式(II-a1)、式(II-a2)、式(II-b1)或式(II-b2)所示结构的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-1x)、(II-a1-2x)、(II-a1-3x)、(II-a2-1x)、(II-a2-2x)、(II-a2-3x)所示的结构，

其中，

通式(II-a1-1x)和(II-a2-1x)中，Y各自独立地选自：氢、卤素、羟基、巯基、氨基、C ₁-C ₆烷基和-OC ₁-C ₆烷基；通式(II-a1-2x)、(II-a1-3x)、(II-a2-2x)和(II-a2-3x)中，Y各自独立地选自：氢、卤素、羟基、巯基、氨基、C ₁-C ₆烷基、-OC ₁-C ₆烷基和-C ₁-C ₆烷基羟基；

W选自 -CH(CH ₃)-和

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1)或式(II-a2)所示的结构：

所述W可以不存在或所述W可以选自任选取代的以下组结构：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数。

其中，所述R ₁可以选自以下组：氢、和卤素，所述R ₂可以选自以下组：氢、和卤素，所述R ₃可以选自以下组：-CH ₂OH、-SCH ₂-卤素、

所述W可以不存在或所述W可以选自任选取代的以下组结构：任选取代的-CH ₂-、任选取代的-CH(CH ₃)-、和任选取代的

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数。

B可以选自以下组：任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的

W可以不存在或者W可以选自任选取代的以下组结构：

其中，当B可以为任选取代的时，W可以不为-S-；

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数。

其中，所述化合物包含可以选自以下组的结构：

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中，所述化合物包含选自以下组的结构：

例如，本申请提供了一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中，所述化合物包含选自以下组的结构：

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-C-1)、(II-a1-C-2)、(II-a1-C-3)、(II-a2-C-1)、式(II-a2-C-2)和式(II-a2-C-3)，

其中，

W选自 CH(CH ₃)-和

式(II-a1-C-1)和(II-a2-C-1)中，Y各自独立地选自：氢、卤素、羟基、巯基、氨基、C ₁-C ₆烷基和-OC ₁-C ₆烷基；式(II-a1-C-2)、(II-a1-C-3)、(II-a2-C-2)和(II-a2-C-2)中，Y各自独立地选自：氢、卤素、羟基、巯基、氨基、C ₁-C ₆烷基、-OC ₁-C ₆烷基和-C ₁-C ₆烷基羟基；

yn选自0、1或2；

Ab选自抗体或其抗原结合片段；

L包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ³可以不存在或者选自以下组：谷氨酸-甘氨酸(EG)、丙氨酸-丙氨酸(AA)、丙氨酸-谷氨酸(AE)、甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GEG)、甘氨酸-丙氨酸-谷氨酸(GAE)、甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GFGG)、和瓜氨酸-缬氨酸(CV)，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：

优选地，L为

N ^a-I为约0至约20的数。

例如，其中所述化合物选自：

其中，N ^a-I为约0至约20的数，Ab选自抗体或其抗原结合片段。

例如，其中所述化合物选自：

N ^a-I为约0至约20的数。

本申请提供一种偶联物，包含本申请所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐。

例如，本申请的偶联物包含抗体-药物偶联物。

例如，本申请的偶联物，所述偶联物的活性代谢物包含本申请的化合物。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(I-A)所示的结构：

X可以选自以下组：N和任选取代的CH；

W可以不存在或者W可以为任意基团；

A可以为任意基团，其中A还可以被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x可以选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的- NH-；当X可以为CH且W可以为-S-时，A可以不为苯基；Tr可以不存在或者可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(I-a1-A)、式(I-a2-A)、式(I-a3-A)或式(I-a4-A)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂、R ₃、Ry ₁、Ry ₂和Y可以各自独立地为任意基团，yn可以为至少为0的数，

W可以不存在或者W可以为任意基团；Tr可以不存在或者可以为任意基团，其中W可以不为-S-。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-A)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃可以各自独立地为任意基团；

W可以不存在或者W可以为任意基团；

A可以为任意基团，其中A还可以被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x可以选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；Tr可以不存在或者可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-A)、式(II-a2-A)、式(II-a3-A)或式(II-a4-A)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂、R ₃、Ry ₁、Ry ₂和Y可以各自独立地为任意基团；

B可以选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的亚杂芳基；例如，B可以选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W可以不存在或者W可以为任意基团；yn可以为至少为0的数；Tr可以不存在或者可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-b1-A)、式(II-b2-A)、式(II-b3-A)或式(II-b4-A)所示的结构：

B可以选自以下组：任选取代的和任选取代的亚杂芳基；例如，B可以选自以下组：任选取代的和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W可以不存在或者W可以为任意基团，其中，当B可以为任选取代的时，W可以不为-S-；yn可以为至少为0的数；Tr可以不存在或者可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(I-B)所示的结构：

X可以选自以下组：N和任选取代的CH；

W可以不存在或者W可以为任意基团；

A可以为任意基团，其中A还可以被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x可以选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；当X可以为CH且W可以为-S-时，A可以不为苯基；

L可以不存在或者可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(I-a1-B)、式(I-a2-B)、式(I-a3-B)或式(I-a4-B)所示的结构：

W可以不存在或者W可以为任意基团，其中W可以不为-S-；L可以不存在或者可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-B)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃可以各自独立地为任意基团；

W可以不存在或者W可以为任意基团；

A可以为任意基团，其中A还可以被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x可以选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；L可以不存在或者可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-B)、式(II-a2-B)、式(II-a3-B)或式(II-a4-B)所示的结构：

B可以选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的亚杂芳基；例如，B可以选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W可以不存在或者W可以为任意基团；yn可以为至少为0的数；L可以不存在或者可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-b1-B)、式(II-b2-B)、式(II-b3-B)或式(II-b4-B)所示的结构：

B可以选自以下组：任选取代的和任选取代的亚杂芳基；例如，B可以选自以下组：任选取代的和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W可以不存在或者W可以为任意基团，其中，当B可以为任选取代的时，W可以不为-S-；yn可以为至少为0的数；L可以不存在或者可以为任意基团。

例如，包含式(II-B)、式(II-a1-B)、式(II-a2-B)、式(II-b1-B)、式(II-b2-B)、式(II-b3-B)或式(II-b4-B)所示结构的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述L可以包含Tr。

本申请提供一种式(II-C)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中：

X可以选自以下组：N和任选取代的CH；

W可以不存在或者W可以为任意基团；

L可以不存在或者可以为任意基团，Ab可以为配体，N ^a-I可以为至少为0的数。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)或式(I-a4-C)所示的结构：

W可以不存在或者W可以为任意基团，其中W可以不为-S-；L可以不存在或者可以为任意基团，Ab可以为配体，N ^a-I可以为至少为0的数。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-C)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃可以各自独立地为任意基团；

W可以不存在或者W可以为任意基团；

A可以为任意基团，其中A还可以被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x可以选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；L可以不存在或者可以为任意基团，Ab可以为配体，N ^a-I可以为至少为0的数。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)或式(II-a4-C)所示的结构：

B可以选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的亚杂芳基；例如，B可以选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W可以不存在或者W可以为任意基团；yn可以为至少为0的数；L可以不存在或者可以为任意基团，Ab可以为配体，N ^a-I可以为至少为0的数。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)或式(II-b4-C)所示的结构：

B可以选自以下组：任选取代的和任选取代的亚杂芳基；例如，B可以选自以下组：任选取代的和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W可以不存在或者W可以为任意基团，其中，当B可以为任选取代的时，W可以不为-S-；yn可以为至少为0的数；L可以不存在或者可以为任意基团，Ab可以为配体，N ^a-I可以为至少为0的数。

例如，包含式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)或式(II-b4-C)所示结构的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述L可以包含Tr。

本申请提供一种式(II-D)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中：

X可以选自以下组：N和任选取代的CH；

W可以不存在或者W可以为任意基团；

A可以为任意基团，其中A还可以被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x可以选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；当X可以为CH且W可以为-S-时，A可以不为苯基；Lx可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(I-a1-D)、式(I-a2-D)、式(I-a3-D)或式(I-a4-D)所示的结构：

W可以不存在或者W可以为任意基团，其中W可以不为-S-；Lx可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-D)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃可以各自独立地为任意基团；

W可以不存在或者W可以为任意基团；

A可以为任意基团，其中A还可以被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x可以选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；Lx可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-D)、式(II-a2-D)、式(II-a3-D)或式(II-a4-D)所示的结构：

B可以选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的亚杂芳基；例如，B可以选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W可以不存在或者W可以为任意基团；yn可以为至少为0的数；Lx可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-b1-D)、式(II-b2-D)、式(II-b3-D)或式(II-b4-D)所示的结构：

B可以选自以下组：任选取代的和任选取代的亚杂芳基；例如，B可以选自以下组：任选取代的和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W可以不存在或者W可以为任意基团，其中，当B可以为任选取代的时，W可以不为-S-；yn可以为至少为0的数；Lx可以为任意基团。

例如，包含式(II-D)、式(II-a1-D)、式(II-a2-D)、式(II-b1-D)、式(II-b2-D)、式(II-b3-D)或式(II-b4-D)所示结构的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述Lx包含Tr。

本申请提供一种式(II-E)所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中：

X可以选自以下组：N和任选取代的CH；

W可以不存在或者W可以为任意基团；

Tr可以不存在或者可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(I-a1-E)、式(I-a2-E)、式(I-a3-E)或式(I-a4-E)所示的结构：

W可以不存在或者W可以为任意基团，其中W可以不为-S-；Tr可以不存在或者可以为任意基团。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-E)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃可以各自独立地为任意基团；

W可以不存在或者W可以为任意基团；

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-E)、式(II-a2-E)、式(II-a3-E)或式(II-a4-E)所示的结构：

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-b1-E)、式(II-b2-E)、式(II-b3-E)或式(II-b4-E)所示的结构：

例如，Ry ₁可以为氢、卤素、或任选取代的烷基。例如，Ry ₁可以为氢、卤素、或任选取代的C ₁-C ₆烷基。例如，Ry ₁可以为氢、卤素、或任选取代的C ₁-C ₃烷基。例如，Ry ₁可以为氢或任选取代的甲基。例如，Ry ₂可以为氢、卤素、或任选取代的烷基。例如，Ry ₂可以为氢、卤素、或任选取代的C ₁-C ₆烷基。例如，Ry ₂可以为氢、卤素、或任选取代的C ₁-C ₃烷基。例如，Ry ₂可以为氢或任选取代的甲基。

例如，所述Tr包含-(SP ¹) _n1-，

每一个SP ¹可以各自独立地为任选取代的-CH ₂-NH-，

其中，n1可以为至少为0的数。

例如，本申请化合物中，n1可以为1。

例如，本申请化合物中，所述SP ¹可以被R ¹取代，每一个R ¹可以各自独立地选自以下组：氢、和任选取代的烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹可以各自独立地选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹可以各自独立地选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹可以各自独立地被R ²取代，每一个R ²可以选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，所述R ¹可以被R ²取代，每一个R ²可以选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，本申请化合物中，每一个SP ¹可以各自独立地选自以下组：-CH ₂-NH-、-CH(CH ₃)-NH-、-C(CH ₃) ₂-NH-、-CH ₂-N(CH ₃)-、-CH(CH ₃)-N(CH ₃)-和-C(CH ₃) ₂-N(CH ₃)-。

例如，本申请化合物中，每一个SP ¹可以各自独立地选自以下组：-CH ₂-NH-、-CH(CH ₃)-NH-、-CH ₂-N(CH ₃)-、和-C(CH ₃)-N(CH ₃)-。

例如，本申请化合物中，Tr包含-SP ²-，

SP ²可以为任选取代的-(CH ₂) _n2-，

其中，SP ²的每一个亚甲基单元可以不被替代；或SP ²的至少1个亚甲基单元可以各自独立地被任意基团替代；其中，n2至少可以为0。

例如，本申请化合物中，n2可以选自以下组：0、1、2和3。

例如，本申请化合物中，所述SP ²可以被R ³取代，每一个R ³可以各自独立地选自以下组：氢、＝O、任选取代的-OH、任选取代的-C(＝O)H、和任选取代的烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ³可以各自独立地选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ³可以各自独立地选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，本申请化合物中，所述R ³可以被R ⁴取代，每一个R ⁴可以各自独立地选自以下组：氢、＝O、任选取代的-OH、任选取代的-C(＝O)H、和任选取代的烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ⁴可以各自独立地选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ⁴可以各自独立地选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，本申请化合物中，SP ²的至少1个亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组的基团替代：任选取代的-NHC(＝O)-、任选取代的-C(＝O)NH-、-C(＝O)-、-OC(＝O)-、-C(＝O)O-、任选取代的-NH-和-O-。

例如，本申请化合物中，SP ²的至少1个、至少2个或至少3个亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组的基团替代：-C(＝O)-、和任选取代的-NH-。

例如，本申请化合物中，SP ²可以选自以下组：任选取代的-(CH ₂) ₂-、任选取代的-(CH ₂) ₃-、任选取代的-C(＝O)-CH ₂-NH-、任选取代的-C(＝O)-CH ₂-N(CH ₃)-、任选取代的-(CH ₂) ₂-NH-、任选取代的-(CH ₂) ₃-NH-、任选取代的-(CH ₂) ₂-N(CH ₃)-和任选取代的-(CH ₂) ₃-N(CH ₃)-。

例如，本申请化合物中，SP ²可以为氨基酸的残基。

例如，本申请化合物中，SP ²可以为可以选自以下组氨基酸的残基：苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、色氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸、丙氨酸、苏氨酸、组氨酸、丝氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、赖氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、脯氨酸、瓜氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、缬氨酸、丙氨酸和苯丙氨酸。

例如，本申请化合物中，SP ²可以为可以选自以下组氨基酸的残基：谷氨酸、赖氨酸、瓜氨酸、甘氨酸和丙氨酸。

例如，本申请化合物中，SP ²可以为

R ^p可以选自以下组：H，-CH ₃、-CH-(CH ₃) ₂、-CH ₂-CH(CH ₃) ₂、-CH(CH ₃)-CH ₂-CH ₃、-CH ₂- C ₆H ₅、-C ₈NH ₆、-CH ₂-C ₆H ₄-OH、-CH ₂-COOH、-CH ₂-CONH ₂、-(CH ₂) ₂-COOH、-(CH ₂) ₄-NH ₂、-(CH ₂) ₂-CONH ₂、-(CH ₂) ₂-S-CH ₃、-CH ₂-OH、-CH(CH ₃)-OH、-CH ₂-SH、-C ₃H ₆、-CH ₂-C ₃H ₃N、-(CH ₂) ₃-NHC(NH)NH ₂和-(CH ₂) ₃-NHCONH ₂。

例如，本申请化合物中，SP ²可以为

R ^p可以选自以下组：H，-CH ₃、-(CH ₂) ₂-COOH、-(CH ₂) ₄-NH ₂和-(CH ₂) ₃-NHCONH ₂。

例如，本申请化合物中，Tr包含-(SP ³) _n3-，

每一个SP ³可以各自独立地选自以下组：-O-、-S-、-C(＝O)-、任选取代的-NH-、-O-C(＝O)-、-C(＝O)-O-、任选取代的-NH-C(＝O)-、任选取代的-NH-CH ₂-、和任选取代的-NH-CH ₂-S-，

其中，n3可以为至少为0的数。

例如，本申请化合物中，n3可以为1。

例如，本申请化合物中，所述SP ³可以被R ⁵取代，每一个R ⁵可以各自独立地选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ⁵可以各自独立地选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，本申请化合物中，SP ³可以选自以下组：-O-、-S-、-C(＝O)-、任选取代的-NH-、任选取代的-N(CH ₃)-、-C(＝O)-O-、任选取代的-C(＝O)-NH-、任选取代的-CH ₂-NH-、任选取代的-CH(CH ₃)-NH-、任选取代的-C(CH ₃) ₂-NH-、任选取代的-CH ₂-N(CH ₃)-、任选取代的-CH(CH ₃)-N(CH ₃)-、任选取代的-C(CH ₃) ₂-N(CH ₃)-、任选取代的-S-CH ₂-NH-、任选取代的-S-CH ₂-N(CH ₃)-、任选取代的-S-CH(CH ₃)-NH-和任选取代的-S-CH(CH ₃)-N(CH ₃)-。

例如，本申请化合物中，SP ³可以选自以下组：-O-、-S-、-C(＝O)-、任选取代的-NH-、-C(＝O)-O-、-O-C(＝O)-、任选取代的-C(＝O)-NH-、任选取代的-CH ₂-NH-、和任选取代的-S-CH ₂-NH-。

例如，本申请化合物中，SP ³可以为-C(＝O)-O-。

例如，本申请化合物中，Tr还包含-SP ⁴-，

SP ⁴可以为

其中，每一个R ⁶，R ⁷和R ⁸可以各自独立地不存在，或每一个R ⁶，R ⁷和R ⁸可以各自独立地选自任意基团；

其中，n4和n5可以各自独立地为至少可以为0的数。

例如，本申请化合物中，每一个R ⁶，R ⁷和R ⁸可以各自独立地选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ⁶，R ⁷和R ⁸可以各自独立地选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，本申请化合物中，SP ⁴可以为任选取代的

例如，本申请化合物中，Tr可以不存在。

例如，本申请化合物中，Tr包含-(SP ¹) _n1-SP ²-。

例如，本申请化合物中，Tr包含-(SP ¹) _n1-SP ²-(SP ³) _n3-。

例如，本申请化合物中，Tr包含-(SP ¹) _n1-SP ²-(SP ³) _n3-SP ⁴-。

例如，本申请化合物中，Tr可以选自以下组：

其中，每一个R ^1a，R ^1b，R ^1c和R ^3c可以各自独立地选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基，

R ^p可以选自以下组：H，-CH ₃、-CH-(CH ₃) ₂、-CH ₂-CH(CH ₃) ₂、-CH(CH ₃)-CH ₂-CH ₃、-CH ₂-C ₆H ₅、-C ₈NH ₆、-CH ₂-C ₆H ₄-OH、-CH ₂-COOH、-CH ₂-CONH ₂、-(CH ₂) ₂-COOH、-(CH ₂) ₄-NH ₂、-(CH ₂) ₂-CONH ₂、-(CH ₂) ₂-S-CH ₃、-CH ₂-OH、-CH(CH ₃)-OH、-CH ₂-SH、-C ₃H ₆、-CH ₂-C ₃H ₃N、-(CH ₂) ₃-NHC(NH)NH ₂和-(CH ₂) ₃-NHCONH ₂。

例如，本申请化合物中，Tr可以选自以下组：

其中，R ^p可以选自以下组：H，-CH ₃、-CH-(CH ₃) ₂、-CH ₂-CH(CH ₃) ₂、-CH(CH ₃)-CH ₂-CH ₃、-CH ₂-C ₆H ₅、-C ₈NH ₆、-CH ₂-C ₆H ₄-OH、-CH ₂-COOH、-CH ₂-CONH ₂、-(CH ₂) ₂-COOH、-(CH ₂) ₄-NH ₂、-(CH ₂) ₂-CONH ₂、-(CH ₂) ₂-S-CH ₃、-CH ₂-OH、-CH(CH ₃)-OH、-CH ₂-SH、-C ₃H ₆、-CH ₂-C ₃H ₃N、-(CH ₂) ₃-NHC(NH)NH ₂和-(CH ₂) ₃-NHCONH ₂。

例如，本申请化合物中，Tr可以选自以下组：

例如，所述Lx包含L ^1x，L ^1x可以为可以选自以下组：能够与氨基偶联的基团、能够与巯基偶联的基团和点击化学基团。

例如，本申请化合物中，L ^1x可以选自以下组：

其中每一个R ^L1a，R ^L1b和R ^L1c可以各自独立地选自任意基团。

例如，本申请化合物中，L ^1x可以选自以下组：

例如，本申请化合物中，所述L可以包含L ¹，L ¹可以为任意基团。

例如，本申请化合物中，L ¹可以选自以下组：氨基参与偶联形成的二价残基或三价残基、巯基参与偶联形成的二价残基或三价残基、和点击化学偶联形成的二价残基或三价残基。

例如，其中L ¹可以选自以下组：

R ⁹可以选自任意基团。

例如，本申请化合物中，R ⁹可以选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，R ⁹可以选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，其中L ¹可以选自以下组：

例如，本申请化合物中，L或Lx包含L ²，L ²可以为任意基团。

例如，本申请化合物中，L ²包含-X-，X可以为任选取代的-(CH ₂) _p1-，

其中，X的每一个亚甲基单元可以不被替代；或X的至少1个亚甲基单元可以各自独立地被选自任意基团替代，p1可以为至少为0的数。

例如，本申请化合物中，p1可以选自以下组：0、1、2、3、4和5。

例如，本申请化合物中，所述X可以被R ¹⁰取代，每一个R ¹⁰可以各自独立地选自以下组：氢、＝O、任选取代的-OH、任选取代的-C(O)H、和任选取代的烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹⁰可以各自独立地选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹⁰可以各自独立地选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，本申请化合物中，所述R ¹⁰可以被R ¹¹取代，每一个R ¹¹可以各自独立地选自以下组：氢、＝O、任选取代的-OH、任选取代的-C(O)H、和任选取代的烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹¹可以各自独立地选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹¹可以各自独立地选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，本申请化合物中，X的至少1个亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组的基团替代：任选取代的-NHC(O)-、任选取代的-C(O)NH-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、任选取代的-NH-、-S-和-O-。

例如，本申请化合物中，X的1或2个亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组的基团替代：任选取代的-C(O)NH-、-S-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、和任选取代的-NH-。

例如，本申请化合物中，X可以选自以下组：-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-NR ^x-和-S-C(R ^xa)(R ^xb)-CH ₂-NH-C(O)-，每一个R ^x、R ^xa和R ^xb可以各自独立地选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，X可以选自以下组：-C(O)-和-S-C(R ^xa)(R ^xb)-CH ₂-NH-C(O)-。

例如，本申请化合物中，L ²还包含-LB-，

LB可以为

其中，L ^p可以为三价残基，PEG可以包含聚乙二醇单元，p2可以为至少为0的数。

例如，本申请化合物中，p2可以选自以下组：0、1、2、3、4和5。

例如，其中L ^p可以选自以下组：氨基酸、氨基醇、氨基醛和多胺。

例如，其中L ^p可以选自以下组：天冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、赖氨酸，精氨酸，丝氨酸，半胱氨酸，苏氨酸，和酪氨酸。

例如，其中L ^p可以选自以下组：天冬氨酸，谷氨酸和赖氨酸。

例如，其中L ^p可以为：

其中，每一个R ^12a和R ^12b可以各自独立地不存在，或每一个R ^12a和R ^12b可以各自独立地选自任意基团；

B ^p可以选自以下组：-NH-、-N(CH ₃)-、-C(O)-、和-O-；

其中，pp可以为至少为0的数。

例如，本申请化合物中，pp可以选自以下组：0、1、2、3和4。

例如，本申请化合物中，每一个R ^12a和R ^12b可以各自独立地选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ^12a和R ^12b可以各自独立地选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，其中L ^p可以选自以下组：

例如，本申请化合物中，PEG可以包含-(PX-(CH ₂CH ₂O) _p-3) _p-4-，其中，p-3和p-4可以各自独立地至少可以为1，

其中，PX可以包含任选取代的-(CH ₂) _p-5-，

其中，PX的每一个亚甲基单元可以不被替代，或PX的至少1个亚甲基单元可以各自独立地被任意基团替代，

其中，p-5至少可以为0。

例如，本申请化合物中，p-5可以选自以下组：0、1、2、3、4和5。

例如，其中所述PX可以被R ¹³取代，每一个R ¹³可以各自独立地选自以下组：氢、＝O、任选取代的-OH、任选取代的-C(O)H、和任选取代的烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹³可以各自独立地选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹³可以各自独立地选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，其中所述R ¹³可以被R ¹⁴取代，每一个R ¹⁴可以各自独立地选自以下组：氢、＝O、任选取代的-OH、任选取代的-C(O)H、和任选取代的烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹⁴可以各自独立地选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹⁴可以各自独立地选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，本申请化合物中，PX的至少1个亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组的基团替代：任选取代的-NHC(O)-、任选取代的-C(O)NH-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、任选取代的-NH-、和-O-。

例如，本申请化合物中，PX的1或2个亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组的基团替代：-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、和任选取代的-NH-。

例如，本申请化合物中，PX可以选自以下组：-C(O)-和任选取代的-NH-。

例如，本申请化合物中，PX可以选自以下组：-C(O)-和-NH-。

例如，本申请化合物中，p-3可以选自以下组：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、和24。

例如，本申请化合物中，p-3可以选自以下组：4、6、8、10、12和24。

例如，本申请化合物中，p-3可以选自以下组：8、9、10、12和24。

例如，本申请化合物中，p-4可以选自以下组：1、2、3、4和5。

例如，本申请化合物中，PEG还包含-PZ，PZ可以不存在，或PZ可以选自任意基团。

例如，本申请化合物中，PZ可以选自以下组：氢、和任选取代的烷基。

例如，本申请化合物中，PZ可以选自以下组：氢和任选取代的C ₁-C ₆烷基。

例如，本申请化合物中，PZ可以被R ¹⁵取代，R ¹⁵可以选自以下组：-OH、-C(O)H、-NH ₂、和-C(＝O)OH。

例如，本申请化合物中，PZ可以选自以下组：氢、-CH ₂-CH ₂-C(O)OH和甲基。

例如，本申请化合物中，PEG可以选自以下组：

例如，本申请化合物中，LB可以选自以下组：

例如，本申请化合物中，L ²还包含-LY-，

LY可以为-O _p-7-(CH ₂CH ₂O) _p-6-，p-6和p-7可以各自独立地至少可以为0。

例如，本申请化合物中，p-7可以选自以下组：0和1。

例如，本申请化合物中，p-6可以选自以下组：0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12。

例如，本申请化合物中，p-6可以选自以下组：3、4、5、6、8、10和12。

例如，本申请化合物中，p-6可以选自以下组：3、4、5、6、7和8。

例如，本申请化合物中，p-6可以选自以下组：3、5和7。

例如，本申请化合物中，LY可以选自以下组：-(CH ₂CH ₂O) ₃-、-(CH ₂CH ₂O) ₄-、-(CH ₂CH ₂O) ₅-、-(CH ₂CH ₂O) ₆-、-(CH ₂CH ₂O) ₇-和-(CH ₂CH ₂O) ₈-。

例如，本申请化合物中，LY可以选自以下组：-(CH ₂CH ₂O) ₃-、-(CH ₂CH ₂O) ₅-和-(CH ₂CH ₂O) ₇-。

例如，本申请化合物中，L ²还包含-Z-，

Z可以为任选取代的-(CH ₂) _p-8-，

其中，Z的每一个亚甲基单元可以不被替代；或Z的至少1个亚甲基单元可以各自独立地被选自任意基团替代，其中，p-8至少可以为0。

例如，本申请化合物中，p-8可以选自以下组：0、1、2、3、4、5、6和7。

例如，本申请化合物中，Z可以被R ¹⁶取代，每一个R ¹⁶可以各自独立地选自以下组：氢、＝O、任选取代的-OH、任选取代的-C(O)H、和任选取代的烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹⁶可以各自独立地选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹⁶可以各自独立地选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，本申请化合物中，R ¹⁶可以被R ¹⁷取代，每一个R ¹⁷可以各自独立地选自以下组：氢和烷基。

例如，本申请化合物中，每一个R ¹⁷可以各自独立地选自以下组：氢和C ₁-C ₆烷基。

例如，本申请化合物中，Z的至少1个亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组的基团替代：任选取代的-NHC(O)-、任选取代的-C(O)NH-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、任选取代的-NH-、和-O-。

例如，本申请化合物中，Z的1或2个亚甲基单元可以各自独立地被选自以下组的基团替代：任选取代的-C(O)NH-、任选取代的-NHC(O)-、-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、和任选取代的-NH-。

例如，本申请化合物中，Z可以选自以下组：任选取代的-NH-、任选取代的-(CH ₂) ₂-、任选取代的-(CH ₂) ₅-、任选取代的-C(O)-(CH ₂) ₂-、任选取代的-C(O)-(CH ₂) ₄-、任选取代的-C(O)- (CH ₂) ₅-、任选取代的-(CH ₂) ₂-NH-C(O)-(CH ₂) ₂-、任选取代的-(CH ₂) ₂-NH-C(O)-(CH ₂) ₂-C(O)-、任选取代的-(CH ₂) ₂-NH-和任选取代的-(CH ₂) ₂-NH-C(O)-O-CH ₂-。

例如，本申请化合物中，L ²可以不存在。

例如，本申请化合物中，L ²包含-X-Z-、-Z-或-X-。

例如，本申请化合物中，L ²包含-X-Z-。

例如，本申请化合物中，L ²可以选自以下组：

例如，本申请化合物中，L ²包含-X-LY-Z-、-LY-Z-、-X-LY-或-LY-。

例如，本申请化合物中，L ²包含-X-LY-Z-。

例如，本申请化合物中，L ²可以选自以下组：

例如，本申请化合物中，L ²包含-X-LB-Z-、-LB-Z-、-X-LB-或-LB-。

例如，本申请化合物中，L ²包含-LB-Z-或-LB-。

例如，本申请化合物中，L ²可以选自以下组：

例如，本申请化合物中，L或Lx包含L ³，L ³可以为多肽残基。

例如，其中L ³包含至少1个氨基酸残基。

例如，其中L ³包含可以选自以下组的疏水氨基酸的残基：苯丙氨酸(F)，异亮氨酸(I)，亮氨酸(L)，色氨酸(W)，缬氨酸(V)，甲硫氨酸(M)，酪氨酸(Y)，丙氨酸(A)，苏氨酸(T)，和组氨酸(H)。

例如，其中L ³包含可以选自以下组的亲水氨基酸的残基：丝氨酸(S)，谷氨酰胺(Q)，精氨酸(R)，赖氨酸(K)，天冬酰胺(N)，谷氨酸(E)，脯氨酸(P)，瓜氨酸(C)和天冬氨酸(D)。

例如，其中L ³包含甘氨酸(G)。

例如，其中L ³不包含亲水氨基酸的残基。

例如，其中L ³包含可以选自以下组的氨基酸的残基：甘氨酸(G)、缬氨酸(V)、丙氨酸(A)和苯丙氨酸(F)。

例如，其中L ³可以选自以下组：甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸(GGFG)、甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GFGG)、甘氨酸-甘氨酸-丙氨酸-甘氨酸(GGAG)、甘氨酸-丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GAGG)、丙氨酸-丙氨酸-丙氨酸-甘氨酸(AAAG)、甘氨酸-丙氨酸-丙氨酸-丙氨酸(GAAA)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GGGG)、甘氨酸-甘氨酸-丙氨酸(GGA)、丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸(AGG)、甘氨酸-丙氨酸-甘氨酸(GAG)、甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸(GFG)、缬氨酸-丙氨酸-甘氨酸(VAG)、甘氨酸-丙氨酸-缬氨酸(GAV)、丙氨酸-丙氨酸-甘氨酸(AAG)、甘氨酸-丙氨酸-丙氨酸(GAA)、丙氨酸-丙氨酸-丙氨酸(AAA)、缬氨酸-丙氨酸(VA)、丙氨酸-缬氨酸(AV)、丙氨酸-丙氨酸(AA)、甘氨酸-丙氨酸(GA)、和丙氨酸-甘氨酸(AG)。

例如，其中L ³可以选自以下组：甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GFGG)、和丙氨酸-丙氨酸(AA)。

例如，其中L ³包含至少1个亲水氨基酸的残基。

例如，其中L ³包含可以选自以下组的氨基酸的残基：甘氨酸(G)、缬氨酸(V)、丙氨酸(A)、瓜氨酸(C)、赖氨酸(K)、谷氨酸(E)和天冬氨酸(D)。

例如，其中L ³可以选自以下组：谷氨酸-丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸(EAGG)、甘氨酸-甘氨酸-丙氨酸-谷氨酸(GGAE)、甘氨酸-谷氨酸-丙氨酸-甘氨酸(GEAG)、甘氨酸-丙氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GAEG)、甘氨酸-天冬氨酸-丙氨酸-甘氨酸(GDAG)、甘氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-甘氨酸(GDAG)、甘氨酸-天冬氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GDGG)、甘氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-甘氨酸(GGDG)、甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GEGG)、甘氨酸-甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GGEG)、谷氨酸-甘氨酸-甘氨酸(EGG)、甘氨酸-甘氨酸-谷氨酸(GGE)、谷氨酸-丙氨酸-甘氨酸(EAG)、甘氨酸-丙氨酸-谷氨酸(GAE)、天冬氨酸-丙氨酸-甘氨酸(DAG)、甘氨酸-丙氨酸-天冬氨酸(GAD)、天冬氨酸-甘氨酸-甘氨酸(DGG)、甘氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(GGD)、缬氨酸-赖氨酸-甘氨酸(VKG)、甘氨酸-赖氨酸-缬氨酸(GKV)、甘氨酸-天冬氨酸-甘氨酸(GDG)、甘氨酸-天冬氨酸-丙氨酸(GDA)、丙氨酸-天冬氨酸-甘氨酸(ADG)、甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GEG)、缬氨酸-瓜氨酸-甘氨酸(VCG)、甘氨酸-瓜氨酸-缬氨酸(GCV)、甘氨酸-谷氨酸-丙氨酸(GEA)、丙氨酸-谷氨酸-甘氨酸(AEG)、谷氨酸-丙氨酸(EA)、丙氨酸-谷氨酸(AE)、谷氨酸-甘氨酸(EG)、甘氨酸-谷氨酸(GE)、缬氨酸-瓜氨酸(VC)、瓜氨酸-缬氨酸(CV)、天冬氨酸-丙氨酸(DA)、丙氨酸-天冬氨酸(AD)、天冬氨酸-甘氨酸(DG)、甘氨酸-天冬氨酸(GD)、赖氨酸-缬氨酸(KV)和缬氨酸-赖氨酸(VK)。

例如，其中L ³可以选自以下组：甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GEG)、甘氨酸-丙氨酸-谷氨酸(GAE)、丙氨酸-谷氨酸(AE)、谷氨酸-甘氨酸(EG)和甘氨酸-谷氨酸(GE)。

例如，其中L ³不包含疏水氨基酸的残基。

例如，其中L ³包含可以选自以下组的氨基酸的残基：甘氨酸(G)、谷氨酸(E)和天冬氨酸(D)。

例如，其中L ³可以选自以下组：甘氨酸-谷氨酸(GE)、谷氨酸-甘氨酸(EG)、甘氨酸-甘氨酸(GG)、天冬氨酸-甘氨酸(DG)、甘氨酸-天冬氨酸(GD)、甘氨酸-天冬氨酸-甘氨酸(GDG)、天冬氨酸-甘氨酸-甘氨酸(DGG)、甘氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(GGD)、甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GEG)、甘氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-甘氨酸(GGDG)和甘氨酸-天冬氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GDGG)。

例如，其中L ³可以选自以下组：谷氨酸-甘氨酸(EG)、甘氨酸-谷氨酸(GE)、谷氨酸-丙氨酸(EA)、丙氨酸-谷氨酸(AE)、缬氨酸-瓜氨酸(VC)、瓜氨酸-缬氨酸(CV)、缬氨酸-丙氨酸(VA)、丙氨酸-缬氨酸(AV)、丙氨酸-丙氨酸(AA)、谷氨酸-丙氨酸-甘氨酸(EAG)、甘氨酸-丙氨酸-谷氨酸(GAE)、谷氨酸-甘氨酸-甘氨酸(EGG)、甘氨酸-甘氨酸-谷氨酸(GGE)、甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GEG)、丙氨酸-丙氨酸-甘氨酸(AAG)、甘氨酸-丙氨酸-丙氨酸(GAA)、丙氨酸-丙氨酸-丙氨酸(AAA)、缬氨酸-丙氨酸-甘氨酸(VAG)、甘氨酸-丙氨酸-缬氨酸(GAV)、缬氨酸-瓜氨酸-甘氨酸(VCG)、甘氨酸-瓜氨酸-缬氨酸(GCV)、缬氨酸-赖氨酸-甘氨酸(VKG)、甘氨酸-赖氨酸-缬氨酸(GKV)、甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸(GGFG)、甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GFGG)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GGGG)、甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GEGG)、甘氨酸-甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GGEG)、甘氨酸-丙氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GAEG)和甘氨酸-谷氨酸-丙氨酸-甘氨酸(GEAG)。

例如，L ³可以选自以下组：丙氨酸-丙氨酸(AA)、甘氨酸-丙氨酸-谷氨酸(GAE)、甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GEG)、丙氨酸-谷氨酸(AE)、谷氨酸-甘氨酸(EG)和甘氨酸-谷氨酸(GE)。

例如，所述L可以包含-L ³-L ²-L ¹-、或-L ³-L ¹-；

优选地L选自

例如，所述Lx可以包含-L ³-L ²-L ^1x、或-L ³-L ^1x；

优选地Lx选自

例如，本申请化合物中，Ab包含抗体或其抗原结合片段。

例如，本申请化合物中，所述抗体可以选自以下组：鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体。

例如，本申请化合物中，所述抗原结合片段可以选自以下组：Fab，Fab′，Fv片段，F(ab') ₂，F(ab) ₂，scFv，di-scFv，VHH和dAb。

例如，本申请化合物中，N ^a-I可以为约0至约20的数。

例如，本申请化合物中，Ab靶向可以选自以下组的靶点：

AXL,BAFFR,BCMA,BCR–列表组分(BCR–list components),BDCA2,BDCA4,BTLA,BTNL2BTNL3,BTNL8,BTNL9,C10orf54,CCR1,CCR3,CCR4,CCR5,CCR6,CCR7,CCR9,CCR10,CD11c,CD137,CD138,CD14,CD163,CD168,CD 177,CD19,CD20,CD209,CD209L,CD22,CD226,CD248,CD25,CD27,CD274,CD276,CD28,CD30,CD300A,CD33,CD37,CD38,CD4,CD40,CD44,CD45,CD46,CD47,CD48,CD5,CD52,CD55,CD56,CD59,CD62E,CD68,CD69,CD70,CD74,CD79a,CD79b,CD8,CD80,CD86,CD90.2,CD96,CLEC12A,CLEC12B,CLEC7A,CLEC9A,CR1,CR3,CRTAM,CSF1R,CTLA4,CXCR1/2,CXCR4,CXCR5,DDR1,DDR2,DEC-205,DLL4,DR6,FAP,FCamR,FCMR,FcR’s,Fire,GITR,HHLA2,II型HLA(HLA class II),HVEM,ICOSLG,IFNAR,IFNLR1,IL10R1,IL10R2,IL12R,IL13RA1,IL13RA2,IL15R,IL17RA,IL17RB,IL17RC,IL17RE,IL20R1,IL20R2,IL21R,IL22R1,IL22RA,IL23R,IL27R,IL29R,IL2Rg,IL31R,IL36R,IL3RA,IL4R,IL6R,IL5R,IL7R,IL9R,整合素(Integrins),LAG3,LIFR,MAG/Siglec-4(唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-4),MMR,MSR1,NCR3LG1,NKG2D,NKp30,NKp46,OX40(CD134)，PDCD1,PROKR1,PVR,PVRIG,PVRL2,PVRL3,RELT, SIGIRR,Siglec-1(唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-1),Siglec-10,Siglec-5,Siglec-6,Siglec-7,Siglec-8,Siglec-9,SIRPA,SLAMF7,TACI,TCR–列表组分/assoc(TCR-listcomponents/assoc),PTCRA,TCRb,CD3z,CD3,TEK,TGFBR1,TGFBR2,TGFBR3,TIGIT,TLR2,TLR4,TNFα,TROY,TSLPR,TYRO,VLDLR,VSIG4,IL2R-y和VTCN1。

例如，其中所述Ab可以选自以下组：抗TNFα抗体或其抗原结合片段，抗CD40抗体或其抗原结合片段，抗BDCA2抗体或其抗原结合片段和抗IFNAR1抗体或其抗原结合片段。

其中，Ry ₁可以选自以下组：氢和任选取代的甲基，Ry ₂可以选自以下组：氢和任选取代的甲基，所述R ₁可以选自以下组：氢、卤素、和任选取代的甲基，所述R ₂可以选自以下组：氢、卤素、和任选取代的甲基，所述R ₃可以选自以下组：任选取代的-CH ₂Cl、任选取代的-CH ₂SH、任选取代的-CH ₂OH、任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的-OH、任选取代的-OCH ₃、任选取代的-OCH ₂F、任选取代的-OCH ₂Cl、任选取代的-OCH ₂CN、任选取代的-OCH ₂CH ₃、任选取代的巯基、任选取代的-SCH ₂F、任选取代的-SCH ₂Cl、任选取代的-SCH ₂CF ₃、和任选取代的-SCH ₂CN，

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr可以不存在或者可以选自以下组：

其中，Ry ₁可以选自以下组：氢和任选取代的甲基，Ry ₂可以选自以下组：氢和任选取代的甲基，所述R ₁可以选自以下组：氢、和卤素，所述R ₂可以选自以下组：氢、和卤素，所述R ₃可以选自以下组：-CH ₂OH、-SCH ₂F、

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr可以不存在。

所述W可以不存在或所述W可以选自任选取代的以下组结构：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr可以不存在或者可以选自以下组：

其中，Ry ₁可以选自以下组：氢和任选取代的甲基，Ry ₂可以选自以下组：氢和任选取代的甲基，所述R ₁可以选自以下组：氢、和卤素，所述R ₂可以选自以下组：氢、和卤素，所述R ₃可以选自以下组：-CH ₂OH、-SCH ₂-卤素、

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr可以不存在。

W可以不存在或者W可以选自任选取代的以下组结构：

其中，当B可以为任选取代的时，W可以不为-S-；

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr可以不存在或者可以选自以下组：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr可以不存在。

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述L可以包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ³可以不存在或者可以选自以下组：谷氨酸-甘氨酸(EG)、丙氨酸-丙氨酸(AA)、丙氨酸-谷氨酸(AE)、甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GEG)、甘氨酸-丙氨酸-谷氨酸(GAE)、甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GFGG)、和瓜氨酸-缬氨酸(CV)，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述L可以包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：

所述W可以不存在或所述W可以选自任选取代的以下组结构：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述L可以包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述L可以包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：

W可以不存在或者W可以选自任选取代的以下组结构：

其中，当B可以为任选取代的时，W可以不为-S-；

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述L可以包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述L可以包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述L可以包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：

其中所述Ab可以选自以下组：抗TNFα抗体或其抗原结合片段，抗CD40抗体或其抗原结合片段和抗IFNAR1抗体或其抗原结合片段；所述N ^a-I可以为约0至约20的数。

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述L可以包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：

所述W可以不存在或所述W可以选自任选取代的以下组结构：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述L可以包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：

其中，Ry ₁可以选自以下组：氢和任选取代的甲基，Ry ₂可以选自以下组：氢和任选取代的甲基，所述R ₁可以选自以下组：氢、和卤素，所述R ₂可以选自以下组：氢、和卤素，所述 R ₃可以选自以下组：-CH ₂OH、-SCH ₂-卤素、

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述L可以包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：

W可以不存在或者W可以选自任选取代的以下组结构：

其中，当B可以为任选取代的时，W可以不为-S-；

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述L可以包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述L可以包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Lx可以包含-L ³-L ²-L ^1x，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ^1x可以选自以下组：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Lx可以包含-L ³-L ²-L ^1x，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ^1x可以选自以下组：

所述W可以不存在或所述W可以选自任选取代的以下组结构：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Lx可以包含-L ³-L ²-L ^1x，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ^1x可以选自以下组：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Lx可以包含-L ³-L ²-L ^1x，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ^1x可以选自以下组：

W可以不存在或者W可以选自任选取代的以下组结构：

其中，当B可以为任选取代的时，W可以不为-S-；

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Lx可以包含-L ³-L ²-L ^1x，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ^1x可以选自以下组：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Lx可以包含-L ³-L ²-L ^1x，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ^1x可以选自以下组：

其中，Ry ₁可以选自以下组：氢和任选取代的甲基，Ry ₂可以选自以下组：氢和任选取代的甲基，所述R ₁可以选自以下组：氢、卤素、和任选取代的甲基，所述R ₂可以选自以下组：氢、卤素、和任选取代的甲基，所述R ₃可以选自以下组：任选取代的-CH ₂Cl、任选取代的- CH ₂SH、任选取代的-CH ₂OH、任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的-OH、任选取代的-OCH ₃、任选取代的-OCH ₂F、任选取代的-OCH ₂Cl、任选取代的-OCH ₂CN、任选取代的-OCH ₂CH ₃、任选取代的巯基、任选取代的-SCH ₂F、任选取代的-SCH ₂Cl、任选取代的-SCH ₂CF ₃、和任选取代的-SCH ₂CN，

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr可以不存在或者可以选自以下组：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr可以不存在。

所述W可以不存在或所述W可以选自任选取代的以下组结构：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr可以不存在或者可以选自以下组：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr可以不存在。

W可以不存在或者W可以选自任选取代的以下组结构：

其中，当B可以为任选取代的时，W可以不为-S-；

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr可以不存在或者可以选自以下组：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr可以不存在。

本申请提供一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中，所述化合物包含可以选自以下组的结构：

。

另一方面，本申请提供一种偶联物，可以包含前述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐。

例如，其可以包含配体-药物偶联物。

例如，其中所述配体可以包括抗体或其抗原结合片段。

例如，其中所述抗体可以选自：人抗体、人源化抗体、嵌合抗体、多特异性抗体、单克隆抗体和多克隆抗体。

例如，其中所述抗原结合片段可以选自：Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv、scFv、双抗体、Fd、dAb、VHH、大抗体和互补决定区(CDR)片段。

例如，其中所述配体特异性结合可以选自下组的抗原：AXL，BAFFR，BCMA，BCR–列表组分(BCR–list components)，BDCA2，BDCA4，BTLA，BTNL2BTNL3，BTNL8，BTNL9，C10orf54，CCR1，CCR3，CCR4，CCR5，CCR6，CCR7，CCR9，CCR10，CD11c，CD137，CD138，CD14，CD163，CD168，CD 177，CD19，CD20，CD209，CD209L，CD22，CD226， CD248，CD25，CD27，CD274，CD276，CD28，CD30，CD300A，CD33，CD37，CD38，CD4，分化抗原簇40(CD40)，CD44，CD45，CD46，CD47，CD48，CD5，CD52，CD55，CD56，CD59，CD62E，CD68，CD69,CD70，CD74，CD79a，CD79b，CD8，CD80，CD86，CD90.2，CD96，CLEC12A，CLEC12B，CLEC7A，CLEC9A，CR1，CR3，CRTAM，CSF1R，CTLA4，CXCR1/2，CXCR4，CXCR5，DDR1，DDR2，DEC-205，DLL4，DR6，FAP，FCamR，FCMR，FcR’s，Fire，GITR，HHLA2，II型HLA(HLA class II)，HVEM，ICOSLG，IFNAR，I型干扰素受体亚基(IFNAR1)，IFNLR1，IL10R1，IL10R2，IL12R，IL13RA1，IL13RA2，IL15R，IL17RA，IL17RB，IL17RC，IL17RE，IL20R1，IL20R2，IL21R，IL22R1，IL22RA，IL23R，IL27R，IL29R，IL2Rg，IL31R，IL36R，IL3RA，IL4R，IL6R，IL5R，IL7R，IL9R，整合素(Integrins)，LAG3，LIFR，MAG/Siglec-4(唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-4)，MMR，MSR1，NCR3LG1，NKG2D，NKp30，NKp46，OX40(CD134)，PDCD1，PROKR1，PVR，PVRIG，PVRL2，PVRL3，RELT，SIGIRR，Siglec-1(唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-1)，Siglec-10，Siglec-5，Siglec-6，Siglec-7，Siglec-8，Siglec-9，SIRPA，SLAMF7，TACI，TCR–列表组分/assoc(TCR-listcomponents/assoc)，PTCRA，TCRb，CD3z，CD3，TEK，TGFBR1，TGFBR2，TGFBR3，TIGIT，TLR2，TLR4，肿瘤坏死因子α(TNFα)，TROY，TSLPR，TYRO，VLDLR，VSIG4，IL2R-y和VTCN1。

例如，其中所述配体可以选自：抗TNFα抗体或其抗原结合片段，抗CD40抗体或其抗原结合片段和抗IFNAR1抗体或其抗原结合片段。

例如，抗TNF-α抗体或其抗原结合片段可以竞争性抑制阿达木单抗与TNF-α的结合。在某些实施例中，抗TNF-α抗体或其抗原结合片段与阿达木单抗可以结合相同的TNF-α表位。在某些实施例中，抗TNF-α抗体或其抗原结合片段可以是阿达木单抗或其抗原结合片段。在某些实施例中，抗TNF-α抗体或其抗原结合片段可以是阿达木单抗。

在本申请中，所述配体包含抗体轻链可变区VL中的至少一个CDR。本申请所述CDR可以是根据Kabat定义的；也可以是根据Chothia定义的，各种方式定义的CDR序列均包含在本申请的保护范围之内。

例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链可变区(VH)，其中所述重链可变区可以包含HCDR1，HCDR2，HCDR3，它们各自可以分别与以下分子的HCDR1，HCDR2，HCDR3具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：阿达木单抗(Adalimumab)、英利昔单抗(Infliximab)、阿非莫单抗(Afelimomab)或戈利木单抗(golimumab)。例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链可变区(VH)，其中所述重链可变区可以包含HCDR1，HCDR2，HCDR3，它们各自可以分别与以下分子的重链可变区的HCDR1，HCDR2，HCDR3具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：阿达木单抗(Adalimumab)、英利昔单抗(Infliximab)、阿非莫单抗(Afelimomab)或戈利木单抗(golimumab)。

例如，阿达木单抗(Adalimumab，Humira)的HCDR1可以包含SEQ ID NO:4所述的氨基酸序列。阿达木单抗(Adalimumab，Humira)的HCDR2可以包含SEQ ID NO:5所述的氨基酸序列。阿达木单抗(Adalimumab，Humira)的HCDR3可以包含SEQ ID NO:6所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链可变区，其中所述重链可变区可以分别与以下分子的重链可变区具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：阿达木单抗(Adalimumab)、英利昔单抗(Infliximab)、阿非莫单抗(Afelimomab)或戈利木单抗(golimumab)。例如，阿达木单抗(Adalimumab，Humira)的重链可变区可以包含SEQ ID NO:8所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链，其中所述重链可以分别与以下分子的重链具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：阿达木单抗(Adalimumab)、英利昔单抗(Infliximab)、阿非莫单抗(Afelimomab)或戈利木单抗(golimumab)。例如，阿达木单抗(Adalimumab，Humira)的重链可以包含SEQ ID NO:10所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链可变区(VL)，其中所述轻链可变区可以包含LCDR1，LCDR2，LCDR3，它们可以各自分别与以下分子的LCDR1，LCDR2，LCDR3具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：阿达木单抗(Adalimumab)、英利昔单抗(Infliximab)、阿非莫单抗(Afelimomab)或戈利木单抗(golimumab)。例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链可变区(VL)，其中所述轻链可变区可以包含LCDR1，LCDR2，LCDR3，它们可以各自分别与以下分子的轻链可变区的LCDR1，LCDR2，LCDR3具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：阿达木单抗(Adalimumab)、英利昔单抗(Infliximab)、阿非莫单抗(Afelimomab)或戈利木单抗(golimumab)。

例如，阿达木单抗(Adalimumab，Humira)的LCDR1可以包含SEQ ID NO:1所述的氨基酸序列。阿达木单抗(Adalimumab，Humira)的LCDR2可以包含SEQ ID NO:2所述的氨基酸序列。阿达木单抗(Adalimumab，Humira)的LCDR3可以包含SEQ ID NO:3所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链可变区，其中所述轻链可变区可以分别与以下分子的轻链可变区具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：阿达木单抗(Adalimumab)、英利昔单抗(Infliximab)、阿非莫单抗(Afelimomab)或戈利木单抗(golimumab)。例如，阿达木单抗(Adalimumab，Humira)的轻链可变区可以包含SEQ ID NO:7所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链，其中所述轻链可以分别与以下分子的轻链具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：阿达木单抗(Adalimumab)、英利昔单抗(Infliximab)、阿非莫单抗(Afelimomab)或戈利木单抗(golimumab)。例如，阿达木单抗(Adalimumab，Humira)的轻链可以包含SEQ ID NO:9所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链可变区(VH)，其中所述重链可变区可以包含HCDR1，HCDR2，HCDR3，它们可以各自分别与抗鼠TNFα mIgG2a 8C11的HCDR1，HCDR2，HCDR3具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性。

例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链可变区，其中所述重链可变区可以分别与抗鼠TNFα mIgG2a 8C11的重链可变区具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性。例如抗鼠TNFα mIgG2a 8C11的重链可以包含SEQ ID NO:32所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链，其中所述重链可以分别与抗鼠TNFα mIgG2a 8C11的重链具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性。

例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链可变区(VL)，其中所述轻链可变区可以包含LCDR1，LCDR2，LCDR3，它们可以各自分别与抗鼠TNFα mIgG2a 8C11的LCDR1，LCDR2，LCDR3具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性。例如抗鼠TNFα mIgG2a 8C11的轻链可以包含SEQ ID NO:31所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链可变区，其中所述轻链可变区可以分别与抗鼠TNFα mIgG2a 8C11的轻链可变区具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性。

例如，其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链，其中所述轻链可以分别与抗鼠TNFα mIgG2a 8C11的轻链具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性。

在一个实施例中，抗体或其抗原结合部分是拮抗剂抗体或其抗原结合部分，其引起与在不存在所述抗体或其抗原结合部分的情况下的CD40活性或功能相比，CD40活性或功能降低。在具体实施例中，抗体或其抗原结合部分基本上不含激动剂活性，即，抗体或其抗原结合部分不会引起与在不存在所述抗体或其抗原结合部分的情况下的CD40活性或功能相比，CD40活性或功能的量值增加。在某些实施例中，抗CD40抗体是多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、人类化抗体、人类抗体或其抗原结合部分。

例如，其中所述抗CD40抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链可变区(VH)，其中所述重链可变区可以包含HCDR1，HCDR2，HCDR3，它们可以各自分别与以下分子的HCDR1，HCDR2，HCDR3具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Iscalimab(CFZ533)。例如，Iscalimab的HCDR1可以包含SEQ ID NO:14所述的氨基酸序列。Iscalimab的HCDR2可以包含SEQ ID NO:15所述的氨基酸序列。Iscalimab的HCDR3可以包含SEQ ID NO:16所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗CD40抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链可变区，其中所述重链可变区可以分别与以下分子的重链可变区具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Iscalimab(CFZ533)。例如，Iscalimab的重链可变区可以包含SEQ ID NO:18所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗CD40抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链，其中所述重链可以分别与以下分子的重链具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性Iscalimab(CFZ533)。例如，Iscalimab的重链可以包含SEQ ID NO:20所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗CD40抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链可变区(VL)，其中所述轻链可变区可以包含LCDR1，LCDR2，LCDR3，它们可以各自分别与以下分子的LCDR1， LCDR2，LCDR3具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Iscalimab(CFZ533)。例如，Iscalimab的LCDR1可以包含SEQ ID NO:11所述的氨基酸序列。Iscalimab的LCDR2可以包含SEQ ID NO:12所述的氨基酸序列。Iscalimab的LCDR3可以包含SEQ ID NO:13所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗CD40抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链可变区，其中所述轻链可变区可以分别与以下分子的轻链可变区具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Iscalimab(CFZ533)。例如，Iscalimab的轻链可变区可以包含SEQ ID NO:17所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗CD40抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链，其中所述轻链可以分别与以下分子的轻链具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Iscalimab(CFZ533)。例如，Iscalimab的轻链可以包含SEQ ID NO:19所述的氨基酸序列。

例如，本申请的抗体对IFNAR1(interferon-α/β receptor 1)具有特异性(即特异性结合)。此类抗体在本文中也可以称为“本申请的抗IFNAR1抗体”。在另一个实施方案中，本申请的抗体可以对人IFNAR1具有特异性。在另一个实施方案中，本申请的抗IFNAR1抗体可以与人以外的物种或与人IFNAR1在结构上相关的其他蛋白质(例如,人IFNAR1同源物)的IFNAR1交叉反应。在其他实施方案中,本申请的抗IFNAR1抗体可以仅对人IFNAR1具有特异性，并且不表现出物种或其他类型的交叉反应性。

例如，其中所述抗IFNAR1抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链可变区(VH)，其中所述重链可变区可以包含HCDR1，HCDR2，HCDR3，它们可以各自分别与以下分子的HCDR1，HCDR2，HCDR3具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Anifrolumab(MEDI-546)。例如，Anifrolumab的HCDR1可以包含SEQ ID NO:24所述的氨基酸序列。Anifrolumab的HCDR2可以包含SEQ ID NO:25所述的氨基酸序列。Anifrolumab的HCDR3可以包含SEQ ID NO:26所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗IFNAR1抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链可变区，其中所述重链可变区可以分别与以下分子的重链可变区具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Anifrolumab(MEDI-546)。例如，Anifrolumab的重链可变区可以包含SEQ ID NO:28所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗IFNAR1抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链，其中所述重链可以分别与以下分子的重链具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性Anifrolumab(MEDI-546)。例如，Anifrolumab的重链可以包含SEQ ID NO:30所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗IFNAR1抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链可变区(VL)，其中所述轻链可变区可以包含LCDR1，LCDR2，LCDR3，它们可以各自分别与以下分子的LCDR1，LCDR2，LCDR3具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Anifrolumab(MEDI-546)。例如，Anifrolumab的LCDR1可以包含SEQ ID NO:21所述的氨基酸序列。Anifrolumab的LCDR2可以包含SEQ ID NO:22所述的氨基酸序列。Anifrolumab的LCDR3可以包含SEQ ID NO:23所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗IFNAR1抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链可变区，其中所述轻链可变区可以分别与以下分子的轻链可变区具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Anifrolumab(MEDI-546)。例如，Anifrolumab的轻链可变区可以包含SEQ ID NO:27所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗IFNAR1抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链，其中所述轻链可以分别与以下分子的轻链具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Anifrolumab(MEDI-546)。例如，Anifrolumab的轻链可以包含SEQ ID NO:29所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗BDCA2抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链可变区(VH)，其中所述重链可变区可以包含HCDR1，HCDR2，HCDR3，它们可以各自分别与以下分子的HCDR1，HCDR2，HCDR3具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Litifilimab(BIIB059)。例如，Litifilimab(BIIB059)的HCDR1可以包含SEQ ID NO:35所述的氨基酸序列。Litifilimab(BIIB059)的HCDR2可以包含SEQ ID NO:34所述的氨基酸序列。Litifilimab(BIIB059)的HCDR3可以包含SEQ ID NO:33所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗BDCA2抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链可变区，其中所述重链可变区可以分别与以下分子的重链可变区具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Litifilimab(BIIB059)。例如，Litifilimab(BIIB059)的重链可变区可以包含SEQ ID NO:36所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗BDCA2抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的重链，其中所述重链可以分别与以下分子的重链具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性Litifilimab(BIIB059)。例如，Litifilimab(BIIB059)的重链可以包含SEQ ID NO:37所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗BDCA2抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链可变区(VL)，其中所述轻链可变区可以包含LCDR1，LCDR2，LCDR3，它们可以各自分别与以下分子的LCDR1，LCDR2，LCDR3具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Litifilimab(BIIB059)。例如，Litifilimab(BIIB059)的LCDR1可以包含SEQ ID NO:40所述的氨基酸序列。Litifilimab(BIIB059)的LCDR2可以包含SEQ ID NO:39所述的氨基酸序列。Litifilimab(BIIB059)的LCDR3可以包含SEQ ID NO:38所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗BDCA2抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链可变区，其中所述轻链可变区可以分别与以下分子的轻链可变区具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Litifilimab(BIIB059)。例如，Litifilimab(BIIB059)的轻链可变区可以包含SEQ ID NO:41所述的氨基酸序列。

例如，其中所述抗BDCA2抗体或其抗原结合片段可以包含抗体的轻链，其中所述轻链可以分别与以下分子的轻链具有至少约80％、约85％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、或约99％的序列同一性：Litifilimab(BIIB059)。例如，Litifilimab(BIIB059)的轻链可以包含SEQ ID NO:42所述的氨基酸序列。

例如，其中所述配体可以选自：阿达木单抗(Adalimumab)、Iscalimab(CFZ533)、Anifrolumab(MEDI-546)、英利昔单抗(Infliximab)、阿非莫单抗(Afelimomab)、戈利木单抗(golimumab)、抗鼠TNFα mIgG2a 8C11、Litifilimab(BIIB059)、其衍生物、其生物类似物。本申请还涵盖与本文中阐述的抗TNF-α抗体、抗CD40抗体或抗IFNAR1抗体基本上同源的变体和等效物。这些变体和等效物可以含有例如保守性取代突变，即，一个或多个氨基酸被类似氨基酸取代。举例来说，保守性取代可以是指氨基酸被相同一般类别内的另一种氨基酸取代，例如一种酸性氨基酸被另一种酸性氨基酸取代、一种碱性氨基酸被另一种碱性氨基酸取代或一种中性氨基酸被另一种中性氨基酸取代。保守性氨基酸取代的目的是所属领域中众所周知的。抗体可以是抗体的重组多肽、天然多肽或合成多肽。所属领域中将了解，可以改变本申请的一些氨基酸序列而不显著影响蛋白质的结构或功能。因此，本申请进一步可以包括多肽的变化形式，其展示显著活性或其包括抗体的区域。这类突变体包括缺失、插入、倒位、重复和类型取代。

预防和/或治疗疾病

本申请所述的化合物可以影响免疫细胞的活性。所述活性的影响可以是本申请的化合物加入免疫细胞的培养基中，相比于加入阴性对照或者对照药物，所述免疫细胞的活性下降1％以上、2％以上、4％以上、5％以上、8％以上、10％以上、15％以上、18％以上、20％以上、25％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、或95％以上。例如，所述活性的影响可以是对于免疫细胞的IC ₅₀值(nM)为10000以下、5000以下、4000以下、3000以下、2000以下、1000以下、500以下、400以下、300以下、200以下、150以下、120以下、110以下、100以下、99以下、98以下、97以下、95以下、90以下、80以下、75以下、70以下、65以下、62以下、60以下、50以下、40以下、30以下、25以下、23以下、22以下、20以下、19以下、18以下、18.5以下、17以下、15以下、12以下、10以下、9以下、8.5以下、7以下、6.7以下、6以下、5.9以下、5.5以下、5.0以下、4.8以下、4.5以下、4.4以下、4以下、3.5以下、3以下、2.5以下、2以下、1.5以下、1.0以下、0.5以下、0.3以下、0.29以下、0.25以下、0.21以下、0.20以下、0.18以下、0.17以下、0.15以下、0.12以下、0.10以下、0.09以下、0.08以下、0.07以下、0.06以下、0.05以下、0.04以下、0.03以下、0.02以下或0.01以下。例如，所述免疫细胞可以包括但不限于颗粒白细胞和/或无颗粒白细胞，例如所述免疫细胞包括但不限于B细胞、T细胞、自然杀伤细胞、单核细胞、巨噬细胞、肥大细胞和/或树突状细胞。

本申请所述的化合物可以具有靶向作用。所述靶向作用可以是本申请的化合物加入免疫细胞的培养基中，相比于加入阴性对照或者对照药物，所述靶向的免疫细胞的活性下降1％以上、2％以上、4％以上、5％以上、8％以上、10％以上、15％以上、18％以上、20％以上、25％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、或95％以上。例如，所述活性的影响可以是对于免疫细胞的IC ₅₀值(nM)为10000以下、5000以下、4000以下、3000以下、2000以下、1000以下、500以下、400以下、300以下、200以下、150以下、120以下、110以下、100以下、99以下、98以下、97以下、95以下、90以下、80以下、75以下、70以下、65以下、62以下、60以下、50以下、40以下、30以下、25以下、23以下、22以下、20以下、19以下、18以下、18.5以下、17以下、15以下、12以下、10以下、9以下、8.5以下、7以下、6.7以下、6以下、5.9以下、5.5以下、5.0以下、4.8以下、4.5以下、4.4以下、4以下、3.5以下、3以下、2.5以下、2以下、1.5以下、1.0以下、0.5以下、0.3以下、0.29以下、0.25以下、0.21以下、0.20以下、0.18以下、0.17以下、0.15以下、0.12以下、0.10以下、0.09以下、0.08以下、0.07以下、0.06以下、0.05以下、0.04以下、0.03以下、0.02以下或0.01以下。例如，所述免疫细胞可以包括但不限于颗粒白细胞和/或无颗粒白细胞，例如所述免疫细胞包括但不限于B细胞、T细胞、自然杀伤细胞、单核细胞、巨噬细胞、肥大细胞和/或树突状细胞。

本申请所述的化合物可以具有血浆稳定性。所述血浆稳定性可以是本申请的化合物加入血浆中，所述化合物释放的药物在1天、3天、5天、7天、14天、20天或30天的释放率不超过50％、不超过40％、不超过30％、不超过20％、不超过10％、不超过7％、不超过5％、不超过4％、不超过3％、不超过2％、不超过1.9％、不超过1.8％、不超过1.7％、不超过1.6％、不超过1.5％、不超过1.4％、不超过1.3％、不超过1.2％、不超过1.1％、不超过1.0％、不超过0.9％、不超过0.8％、不超过0.7％、不超过0.6％、不超过0.5％、不超过0.4％、不超过0.3％、不超过0.2％或不超过0.1％。

本申请所述的化合物可以具有良好的体内安全性。所述体内安全性可以是本申请的化合物在施用于动物后，所述动物的体内游离药物释放率不超过50％、不超过40％、不超过30％、不超过20％、不超过10％、不超过7％、不超过5％、不超过4％、不超过3％、不超过2％、不超过1.9％、不超过1.8％、不超过1.7％、不超过1.6％、不超过1.5％、不超过1.4％、不超过1.3％、不超过1.2％、不超过1.1％、不超过1.0％、不超过0.9％、不超过0.8％、不超过0.7％、不超过0.6％、不超过0.5％、不超过0.4％、不超过0.3％、不超过0.2％或不超过0.1％。例如，所述体内安全性可以是在动物不产生毒性表现的情况下本申请所述化合物的施用浓度可以是0.5mg/kg以上、1mg/kg以上、2mg/kg以上、3mg/kg以上、4mg/kg以上、5mg/kg以上、10mg/kg以上、20mg/kg以上、30mg/kg以上、50mg/kg以上、70mg/kg以上、100mg/kg以上、200mg/kg以上、500mg/kg以上、或1000mg/kg以上。例如所述动物可以包括但不限于猫、狗、马、猪、奶牛、羊、兔、小鼠、大鼠、猴或人。所述施用可以包括但不限于口服、静脉注射、静脉滴注、腹腔注射、或局部给药。

本申请所述的化合物可以影响免疫细胞的细胞因子释放的能力。所述活性的影响可以是本申请的化合物加入免疫细胞的培养基中或施用于受试者时，相比于加入阴性对照或者对照药物，所述免疫细胞的细胞因子释放的能力下降1％以上、2％以上、4％以上、5％以上、8％以上、10％以上、15％以上、18％以上、20％以上、25％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、或95％以上。例如，所述免疫细胞可以包括但不限于颗粒白细胞和/或无颗粒白细胞，例如所述免疫细胞包括但不限于B细胞、T细胞、自然杀伤细胞、单核细胞、巨噬细胞、肥大细胞和/或树突状细胞。

本申请所述的化合物可以具有影响IFN信号途径应答基因转录的能力。所述影响IFN信号途径应答基因转录的能力可以是本申请的化合物加入免疫细胞的培养基中或施用于受试者时，相比于加入阴性对照或者对照药物，所述IFN信号途径应答基因转录下降1％以上、2％以上、4％以上、5％以上、8％以上、10％以上、15％以上、18％以上、20％以上、25％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、或95％以上。

本申请所述的化合物可以具有影响皮肤纤维化程度的能力。所述影响皮肤纤维化程度的能力可以是本申请的化合物施用于受试者时，相比于加入阴性对照或者对照药物，所述皮肤纤维化程度的下降减少1％以上、2％以上、4％以上、5％以上、8％以上、10％以上、15％以上、18％以上、20％以上、25％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、或95％以上。

本申请所述的化合物可以影响免疫细胞的增殖能力。所述增殖能力的影响可以是本申请的化合物加入免疫细胞的培养基中或施用于受试者时，相比于加入阴性对照或者对照药物，所述免疫细胞的比例增加1％以上、2％以上、4％以上、5％以上、8％以上、10％以上、15％以上、18％以上、20％以上、25％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、或95％以上。例如，所述免疫细胞可以包括但不限于颗粒白细胞和/或无颗粒白细胞，例如所述免疫细胞包括但不限于B细胞、T细胞、自然杀伤细胞、单核细胞、巨噬细胞、肥大细胞和/或树突状细胞。

本申请所述的化合物可以具有影响皮肤胶原含量的能力。所述影响皮肤胶原含量的能力可以是本申请的化合物施用于受试者时，相比于加入阴性对照或者对照药物，所述皮肤胶原含量的下降减少1％以上、2％以上、4％以上、5％以上、8％以上、10％以上、15％以上、18％以上、20％以上、25％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、或95％以上。

本申请所述的化合物可以具有影响GRE表达水平的能力。所述影响GRE表达水平的能力可以是本申请的化合物加入免疫细胞的培养基中或施用于受试者时，相比于加入阴性对照或者对照药物，所述GRE表达水平下降1％以上、2％以上、4％以上、5％以上、8％以上、10％以上、15％以上、18％以上、20％以上、25％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、或95％以上。

本申请所述的化合物可以具有影响接触性超敏反应的能力。所述影响接触性超敏反应的能力可以是本申请的化合物施用于受试者时，相比于加入阴性对照或者对照药物，所述接触性超敏反应下降1％以上、2％以上、4％以上、5％以上、8％以上、10％以上、15％以上、18％以上、20％以上、25％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、或95％以上。

本申请所述的化合物可以具有影响皮肤肿胀的能力。所述影响皮肤肿胀的能力可以是本申请的化合物施用于受试者时，相比于加入阴性对照或者对照药物，所述皮肤肿胀减少1％以上、2％以上、4％以上、5％以上、8％以上、10％以上、15％以上、18％以上、20％以上、25％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、或95％以上。

本申请所述的化合物可以具有影响关节炎症状的能力。所述影响关节炎症状的能力可以是本申请的化合物施用于受试者时，相比于加入阴性对照或者对照药物，所述关节炎症状的肿胀情况减少1％以上、2％以上、4％以上、5％以上、8％以上、10％以上、15％以上、18％以上、20％以上、25％以上、40％以上、50％以上、60％以上、70％以上、80％以上、90％以上、或95％以上。

药物组合物

本申请所述的药物组合物除活性化合物外，可以含有一种或多种辅料，所述辅料可以选自以下组的成分：填充剂(稀释剂)、粘合剂、润湿剂、崩解剂和赋形剂等。根据给药方法的不同，组合物可以含有0.1至99重量％的活性化合物。

含活性成分的药物组合物可以是适用于口服的形式，例如片剂、糖锭剂、锭剂、水或油混悬液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊，或糖浆剂。可以按照本领域任何已知制备药用组合物的方法制备口服组合物，所述组合物可以含有粘合剂、填充剂、润滑剂、崩解剂或药学上可接受的润湿剂等，所述组合物还可以含有一种或多种选自以下组的成分：甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂。

水悬浮液可以含有活性物质和用于混合的适宜制备的水悬浮液的赋形剂。水混悬液也可以含有一种或多种防腐剂，例如一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂。油混悬液可以通过使活性成分悬浮于植物油中配制而成。油悬浮液可以含有增稠剂。还可以加入上述的甜味剂和矫味剂。

药物组合物还可以是用于制备水混悬液的可分散粉末和颗粒提供活性成分，通过加入水混合分散剂、湿润剂、悬浮剂或防腐剂中的一种或多种。也可加入其他赋形剂例如甜味剂、矫味剂和着色剂。通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸保存这些组合物。本申请的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。

药物组合物可以是无菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶剂有水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶于油相的无菌注射水包油微乳。例如将活性成分溶于大豆油和卵磷脂的混合物中。然后可以将油溶液加入水和甘油的混合物中处理形成微乳。可通过局部大量注射，将注射液或微乳注入患者的血流中。或者，可以按可保持本申请化合物恒定循环浓度的方式给予溶液和微乳。为保持这种恒定浓度，可使用连续静脉内递药装置。例如，所述装置可以是Deltec CADD-PLUS.TM.5400型静脉注射泵。

药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述本申请所述适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制该混悬液。无菌注射制剂也可以是在肠胃外可接受的无毒稀释剂或溶剂中制备的无菌注射溶液或混悬液。或者，可方便地用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。

可按用于直肠给药的栓剂形式给予本申请化合物。可通过将药物与在普通温度下为固体但在直肠中为液体，因而在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激性赋形剂混合来制备这些药物组合物。此类物质包括可可脂、甘油明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。

如本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定于以下因素：所用具体化合物的活性、患者的年龄、患者的体重、患者的健康状况、患者的行为、患者的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、本申请所述化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，和/或化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。

预防和/或治疗方法

本申请提供一种本申请的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐和/或本申请的药物组合物在制备药物中的应用，本申请的药物可以用于预防和/或治疗疾病和/或症状。例如，本申请的疾病和/或症状包含与糖皮质激素受体信号转导相关的疾病和/或症状。例如，本申请的疾病和/或症状选自以下组：增生性疾病和/或症状、代谢性疾病和/或症状、炎症疾病和/或症状和神经退行性疾病和/ 或症状。例如，本申请的疾病和/或症状可以选自以下组：例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组：系统性自身免疫疾病和/或症状、血液系统相关疾病和/或症状、神经肌肉系统相关疾病和/或症状、消化系统相关疾病和/或症状、泌尿系统相关疾病和/或症状、内分泌腺系统相关疾病和/或症状、皮肤肌肉系统相关疾病和/或症状、和呼吸系统系统相关疾病和/或症状。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的系统性自身免疫疾病和/或症状：类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、硬皮病、干燥综合症、强直性脊柱炎、韦格纳肉芽肿病和系统性硬化。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的血液系统相关疾病和/或症状：自身免疫性溶血性贫血、恶性贫血、特发性血小板减少性紫癜、特发性血小板减少症和血管炎。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的神经肌肉系统相关疾病和/或症状：多发性硬化、重症肌无力和古兰巴雷综症。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的消化系统相关疾病和/或症状：溃疡性结肠炎、克隆恩病、自身免疫性肝病和萎缩性胃炎。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的泌尿系统相关疾病和/或症状：IgA肾病、原发性肾病综合征、自身免疫性肾小球肾炎、肺肾出血综合征和狼疮肾炎。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的内分泌腺系统相关疾病和/或症状：I型糖尿病、Grave's病、桥本甲状腺炎、原发性肾上腺皮质萎缩和慢性甲状腺炎。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的皮肤肌肉系统相关疾病和/或症状：银屑病、寻常型天孢疹、皮肤红斑狼疮、皮肌炎和风湿性多肌痛。例如，所述疾病和/或症状可以为呼吸系统系统相关疾病和/或症状，例如呼吸系统系统相关疾病和/或症状可以为哮喘。例如，本申请的疾病和/或症状可以选自以下组：哮喘、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、中轴性脊椎关节炎、系统性红斑狼疮、狼疮肾炎、皮肤红斑狼疮、银屑病、银屑病关节炎(psoriatic arthritis,PsA)、幼年性特发性关节炎(JIA)、皮肌炎、硬皮病、多发性硬化症、特异性皮炎(AD)、重症肌无力、原发性肾上腺皮质萎缩、慢性甲状腺炎、青少年型糖尿病、炎症性肠病(Inflammatory bowel disease)、溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis)、克罗恩病、自身免疫性肾小球肾炎、肺肾出血综合征、自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜、特发性血小板减少症、干燥综合症(Sjogren’s syndrome)、系统性硬化(SSc)、风湿性多肌痛(PMR)、血管炎、化脓性汗腺炎、桥本甲状腺炎、原发性黏液水肿、Grave's病、自身免疫性萎缩性胃炎、胰岛素依赖性糖尿病、Wegener's肉芽肿病、盘状红斑狼疮、IgA肾炎、贝塞特氏病(Behcet's disease)和非酒精性脂肪肝(NASH)。

本申请提供一种本申请的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐和/或本申请的药物组合物，其用于预防和 /或治疗疾病和/或症状。例如，本申请的疾病和/或症状包含与糖皮质激素受体信号转导相关的疾病和/或症状。例如，本申请的疾病和/或症状选自以下组：增生性疾病和/或症状、代谢性疾病和/或症状、炎症疾病和/或症状和神经退行性疾病和/或症状。例如，本申请的疾病和/或症状可以选自以下组：例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组：系统性自身免疫疾病和/或症状、血液系统相关疾病和/或症状、神经肌肉系统相关疾病和/或症状、消化系统相关疾病和/或症状、泌尿系统相关疾病和/或症状、内分泌腺系统相关疾病和/或症状、皮肤肌肉系统相关疾病和/或症状、和呼吸系统系统相关疾病和/或症状。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的系统性自身免疫疾病和/或症状：类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、硬皮病、干燥综合症、强直性脊柱炎、韦格纳肉芽肿病和系统性硬化。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的血液系统相关疾病和/或症状：自身免疫性溶血性贫血、恶性贫血、特发性血小板减少性紫癜、特发性血小板减少症和血管炎。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的神经肌肉系统相关疾病和/或症状：多发性硬化、重症肌无力和古兰巴雷综症。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的消化系统相关疾病和/或症状：溃疡性结肠炎、克隆恩病、自身免疫性肝病和萎缩性胃炎。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的泌尿系统相关疾病和/或症状：IgA肾病、原发性肾病综合征、自身免疫性肾小球肾炎、肺肾出血综合征和狼疮肾炎。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的内分泌腺系统相关疾病和/或症状：I型糖尿病、Grave's病、桥本甲状腺炎、原发性肾上腺皮质萎缩和慢性甲状腺炎。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的皮肤肌肉系统相关疾病和/或症状：银屑病、寻常型天孢疹、皮肤红斑狼疮、皮肌炎和风湿性多肌痛。例如，所述疾病和/或症状可以为呼吸系统系统相关疾病和/或症状，例如呼吸系统系统相关疾病和/或症状可以为哮喘。例如，本申请的疾病和/或症状可以选自以下组：哮喘、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、中轴性脊椎关节炎、系统性红斑狼疮、狼疮肾炎、皮肤红斑狼疮、银屑病、银屑病关节炎(psoriatic arthritis,PsA)、幼年性特发性关节炎(JIA)、皮肌炎、硬皮病、多发性硬化症、特异性皮炎(AD)、重症肌无力、原发性肾上腺皮质萎缩、慢性甲状腺炎、青少年型糖尿病、炎症性肠病(Inflammatory bowel disease)、溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis)、克罗恩病、自身免疫性肾小球肾炎、肺肾出血综合征、自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜、特发性血小板减少症、干燥综合症(Sjogren’s syndrome)、系统性硬化(SSc)、风湿性多肌痛(PMR)、血管炎、化脓性汗腺炎、桥本甲状腺炎、原发性黏液水肿、Grave's病、自身免疫性萎缩性胃炎、胰岛素依赖性糖尿病、Wegener's肉芽肿病、盘状红斑狼疮、IgA肾炎、贝塞特氏病(Behcet's disease)和非酒精性脂肪肝(NASH)。

本申请提供一种预防和/或治疗疾病和/或症状的方法，可以包括向受试者施用本申请的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐和/或本申请的药物组合物。例如，本申请的疾病和/或症状包含与糖皮质激素受体信号转导相关的疾病和/或症状。例如，本申请的疾病和/或症状选自以下组：增生性疾病和/或症状、代谢性疾病和/或症状、炎症疾病和/或症状和神经退行性疾病和/或症状。例如，本申请的疾病和/或症状可以选自以下组：例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组：系统性自身免疫疾病和/或症状、血液系统相关疾病和/或症状、神经肌肉系统相关疾病和/或症状、消化系统相关疾病和/或症状、泌尿系统相关疾病和/或症状、内分泌腺系统相关疾病和/或症状、皮肤肌肉系统相关疾病和/或症状、和呼吸系统系统相关疾病和/或症状。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的系统性自身免疫疾病和/或症状：类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、硬皮病、干燥综合症、强直性脊柱炎、韦格纳肉芽肿病和系统性硬化。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的血液系统相关疾病和/或症状：自身免疫性溶血性贫血、恶性贫血、特发性血小板减少性紫癜、特发性血小板减少症和血管炎。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的神经肌肉系统相关疾病和/或症状：多发性硬化、重症肌无力和古兰巴雷综症。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的消化系统相关疾病和/或症状：溃疡性结肠炎、克隆恩病、自身免疫性肝病和萎缩性胃炎。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的泌尿系统相关疾病和/或症状：IgA肾病、原发性肾病综合征、自身免疫性肾小球肾炎、肺肾出血综合征和狼疮肾炎。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的内分泌腺系统相关疾病和/或症状：I型糖尿病、Grave's病、桥本甲状腺炎、原发性肾上腺皮质萎缩和慢性甲状腺炎。例如，所述疾病和/或症状可以选自以下组的皮肤肌肉系统相关疾病和/或症状：银屑病、寻常型天孢疹、皮肤红斑狼疮、皮肌炎和风湿性多肌痛。例如，所述疾病和/或症状可以为呼吸系统系统相关疾病和/或症状，例如呼吸系统系统相关疾病和/或症状可以为哮喘。例如，本申请的疾病和/或症状可以选自以下组：哮喘、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、中轴性脊椎关节炎、系统性红斑狼疮、狼疮肾炎、皮肤红斑狼疮、银屑病、银屑病关节炎(psoriatic arthritis,PsA)、幼年性特发性关节炎(JIA)、皮肌炎、硬皮病、多发性硬化症、特异性皮炎(AD)、重症肌无力、原发性肾上腺皮质萎缩、慢性甲状腺炎、青少年型糖尿病、炎症性肠病(Inflammatory bowel disease)、溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis)、克罗恩病、自身免疫性肾小球肾炎、肺肾出血综合征、自身免疫性溶血性贫血、特发性血小板减少性紫癜、特发性血小板减少症、干燥综合症(Sjogren’s syndrome)、系统性硬化(SSc)、风湿性多肌痛(PMR)、血管炎、化脓性汗腺炎、桥本甲状腺炎、原发性黏液水肿、Grave's病、自身免疫性萎缩性胃炎、胰岛素依赖性糖尿病、Wegener's肉芽肿病、盘状红斑狼疮、IgA肾炎、贝塞特氏病(Behcet's disease)和非酒精性脂肪肝(NASH)。

合成技术方案

为了完成本申请的合成目的，本申请采用了如下的合成技术方案：

技术方案1

第一步：通式(Y1)化合物在任选碱性条件下反应，得到通式(Y2)；

第二步：通式(P1)化合物和通式(Y2)化合物在任选碱性条件下反应，得到通式(P2)；

第三步：通式(P2)化合物在还原条件下，得到通式(P3)；

第四步：通式(P3)化合物在任选氢化条件下得到通式(P4)化合物；

第五步：通式(P4)化合物任选在碱性条件下上叔丁基氨基甲酸酯保护基，得到通式(P5)化合物；

第六步：通式(P5)化合物在任选氧化条件下，得到通式(P6)化合物；

第七步：通式(P6)化合物与通式(Y3)化合物在任选酸性或碱性条件下反应，得到通式(P7A)化合物和通式(P7B)化合物；

第八步：非对映异构体经制备HPLC分离得到R构型异构体(P7A)；

第九步：通式(P7A)在任意酸性条件下脱除保护基得到通式化合物(P8)。

其中：

PG可以为常见羟基、氨基、巯基或羧基的保护基；

R ₁、R ₂和R ₃可以分别如本申请任一式(I)、式(I-a1)、式(I-a2)、式(II)、式(II-a1)、式(II-a2)、式(II-b1)、或式(II-b2)所示R ₁、R ₂和R ₃所定义；

B可以如本申请任一式(I)、式(I-a1)、式(I-a2)、式(II)、式(II-a1)、式(II-a2)、式(II-b1)、或式(II-b2)所示B所定义，或者B可以为脂肪环或脂肪杂环；

提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱，所述的有机碱包括但不限于三乙胺，二乙胺，N-甲基吗啉，吡啶，六氢吡啶，NN-二异丙基乙胺，正丁基锂，二异丙基氨基锂，醋酸钾，叔丁醇钠，叔丁醇钾等；所述无机碱包括但不限于氢化钠，碳酸钾，碳酸钠，碳酸铯，氢氧化钠，氢氧化锂等；

提供酸性条件的试剂包括质子酸和路易斯酸，所述质子酸包括但不限于盐酸，硫酸，硝酸，亚硝酸，亚硫酸，磷酸，亚磷酸，甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、柠檬酸、苯甲酸，对甲基苯磺酸，对硝基苯甲酸，甲磺酸，三氟甲磺酸，三氟乙酸；所述路易斯酸包括但不限于三氟化硼，氯化锌，氯化镁，氯化铝，氯化锡，氯化铁；

提供还原条件的试剂包括但不限于硼氢化钠，腈基硼氢化钠，氢化铝锂，氢化钠；

氢化条件包括但不限于：Pb/C/氢气，Pt/C/氢气，氯化钯/氢气，兰尼镍/氢气，氢氧化钯碳/氢气，氢氧化钯/氢气；

提供氧化条件的试剂包括但不限于戴斯马丁氧化剂、双氧水、亚氯酸钠、次氯酸钠、高氯酸钾。

技术方案2

B环为脂肪环或脂肪杂环

第一步：通式(Y1)化合物与化合物(P1)通过光延反应(Mitsunobu反应)，得到通式(P2)；

第二步：通式(P2)化合物在任选还原条件下反应，得到通式(P3)；

第三步：通式(P3)化合物在任选氧化条件下，得到通式(P4)；

第四步：通式(P4)化合物与通式(Y2)化合物在任选酸性或碱性条件下反应，得到通式化合物(P5A和P5B)

第五步：通式(P5A和P5B)化合物任选在还原条件下反应，并经制备HPLC分离，得到通式(P6)化合物。

其中：

技术方案3

第一步：通式(P1)化合物上的活性基团Y(-H)在任选碱性条件下进行保护基取代，得到通式(P2)化合物；

第二步：通式(P2)化合物在任选还原条件下反应，得到通式(P3)化合物；

第三步：通式(P3)化合物在任选氧化条件下反应，得到通式(P4)化合物；

第四部：通式(P4)化合物与通式(Y1)化合物发生还原胺化反应，得到通式(P5)化合物；

第五步：通式(P5)化合物在任选还原条件下反应，得到通式(P6)化合物；

第六步：通式(P6)化合物在任选氧化条件下反应，得到通式(P7)化合物；

第七步：通式(P7)化合物在任选酸性或碱性条件下，与通式(Y2)化合物反应，得到通式(P8)化合物；

第八步：通式(P8)化合物在任选酸性或碱性条件下，脱除保护基PG2，并经制备HPLC分离，得到通式(P9)化合物。

其中：

PG ₁和PG ₂可以为常见羟基、氨基、巯基或羧基的保护基；

R ₁、R ₂和R ₃可以分别如本申请任一式(II)所示R ₁、R ₂和R ₃所定义；

A和Y可以本申请任一式(II)所示A和Y所定义，或者A可以为任选取代的烷基，任选取代的杂烷基，任选取代的脂肪环或任选取代的脂肪杂环；

技术方案4

第一步：通式(P1)化合物上与通式(Y1)化合物在任选缩合条件下反应，得到通式(P2)化合物；

第四部：通式(P4)化合物与通式(Y2)在任选酸性或碱性条件下反应，得到通式(P5)化合物；

第五步：通式(P5)化合物在任选还原条件下反应，得到通式(P6)化合物。

其中：

PG可以为常见羟基、氨基、巯基或羧基的保护基；

B、A和Y可以本申请任一式(II)所示B、A和Y所定义，或者A可以为任选取代的烷基，任选取代的杂烷基，任选取代的脂肪环或任选取代的脂肪杂环；

缩合剂可以选自4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基氯化吗啉盐、1-羟基苯并三唑和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N'-二环己基碳化二亚胺、N,N'-二异丙基碳二酰亚胺、0-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、0-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鑰六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷，优选4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基氯化吗啉盐或1-羟基苯并三唑和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；

提供还原条件的试剂包括但不限于氢化钠，氢化钙，氢化锂，氢化铝锂，硼氢化钠，硼氢化锂，三乙基硼氢化钠，三乙酰氧基硼氢化钠，氰基硼氢化钠；

技术方案5

第一步：通式(P1)化合物上与通式(Y1)化合物在任选钯试剂催化条件下反应，得到通式(P2)化合物；

第二步：通式(P2)化合物与通式(Y2)在任选酸性或碱性条件下反应，得到通式(P3)化合物；

第三步：通式(P3)化合物在任选酸性条件下脱除叔丁氧羰基保护基，并经制备HPLC分离，得到通式(P4)化合物。

其中：

R ₁、R ₂和R ₃可以分别如本申请任一式(I)所示R ₁、R ₂和R ₃所定义；

钯催化剂包括但不限于四三苯基膦钯，醋酸钯，氯化钯，双(三苯基膦)二氯化钯，三(二亚苄基丙酮)二钯，双(二亚苄基丙酮)二钯，双(乙腈)二氯化钯，[1,1’-双{二苯基膦基}二茂铁]二氯化钯，[1,1’-双{二苯基膦基}二茂铁]二氯化钯二氯甲烷复合物，二苯腈二氯化钯，1,4-双(二苯基膦)丁烷-氯化钯，烯丙基氯化钯二聚物，烯丙基环戊二烯基钯；

提供酸性条件的试剂包括质子酸和路易斯酸，所述质子酸包括但不限于盐酸，硫酸，硝酸，亚硝酸，亚硫酸，磷酸，亚磷酸，甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、柠檬酸、苯甲酸，对甲基苯磺酸，对硝基苯甲酸，甲磺酸，三氟甲磺酸，三氟乙酸；所述路易斯酸包括但不限于三氟化硼，氯化锌，氯化镁，氯化铝，氯化锡，氯化铁。

技术方案6

第一步：通式(P1)化合物与通式(Y1)化合物在金属镁催化下，通过格氏反应，得到通式(P2)化合物；

第二步：通式(P2)化合物经过巴顿(Barton)脱氧反应，得到通式(P3)化合物；

第三步：通式(P3)化合物在任选酸性或碱性条件下脱除保护基PG ₁，得到通式(P4)化合物；

第四步：通式(P4)化合物在任选氧化条件下反应，得到通式(P5)化合物；

第五步：通式(P5)化合物在任选酸性或碱性条件下，与通式(Y2)化合物反应，得到通式(P6)化合物；

第六步：通式(P6)化合物在任选酸性或碱性条件下，脱除保护基PG ₂，并经制备HPLC分离，得到通式化合物(P7)。

其中：

PG ₁和PG ₂可以为常见羟基、氨基、巯基或羧基的保护基；

A和Y可以本申请任一式(I)所示A和Y所定义，或者A可以为任选取代的烷基，任选取代的杂烷基，任选取代的脂肪环或任选取代的脂肪杂环；

技术方案7

第一步：通式(P1)化合物与通式(Y1)化合物在任选金属铜盐及任选配体催化下，在任选碱性条件下反应，得到通式(P2)化合物；

第二步：通式(P2)化合物与通式(Y2)化合物在任选酸性或碱性条件下反应，得到通式(P3)化合物；

第三步：通式(P3)化合物在任选酸性或碱性条件下脱除保护基PG，得到通式(P4)化合物。

其中：

PG ₁和PG ₂可以为常见羟基、氨基、巯基或羧基的保护基；

W、A和Y可以本申请任一式(I)所示W、A和Y所定义；

或者A可以为任选取代的烷基、任选取代的脂肪环、任选取代的脂肪杂环、任选取代的芳环或任选取代的芳杂环；

或者W可以为-NR ₁-、-O-、-S-、-O-(CR ₁R ₂) _n1-或-S-(CR ₁R ₂) _n2-，其中R、R ₁和R ₂可以各自独立地为氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、-OH、-SH、-NH ₂、-C(O)H、-CO ₂H、-C(O)C(O)H、-C(O)CH ₂C(O)H、-S(O)H、-S(O) ₂H、-C(O)NH ₂、-SO ₂NH ₂、-OC(O)H、-N(H)SO ₂H或C _1-6脂肪族基团，n1和n2可以各自独立地选自至少为0的数；

或者Y可以为-O-、-NR-或-S-，其中R可以各自独立地为氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、-OH、-SH、-NH ₂、-C(O)H、-CO ₂H、-C(O)C(O)H、-C(O)CH ₂C(O)H、-S(O)H、-S(O) ₂H、-C(O)NH ₂、-SO ₂NH ₂、-OC(O)H、-N(H)SO ₂H或C _1-6脂肪族基团；

金属铜盐包括但不限于硫酸铜，五水硫酸铜，硫酸亚铜，氯化铜，氯化亚铜，碳酸铜，磷酸铜，乙酸铜及其水合物，草酸铜，氟硼酸铜及其水合物，二甲醇铜，酒石酸铜，甲酸铜，碘化亚铜，三氟乙酸铜，三氟甲磺酸铜，碱式碳酸铜，溴化铜，溴化亚铜，氧化亚铜；

配体可选自任意Ullmann反应常用的配体，包括但不限于L-脯氨酸，酪氨酸，苯基丙氨酸，1,10-菲洛啉，N,N’-二甲基乙二胺，乙二醇，1,1’-联萘-2,2’二酚，2-羰基环己基羧酸乙酯，水杨醛腙等；

提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱，所述的有机碱包括但不限于三乙胺，二乙胺，N-甲基吗啉，吡啶，六氢吡啶，NN-二异丙基乙胺，正丁基锂，二异丙基氨基锂，醋酸钾，叔丁醇钠，叔丁醇钾等；所述无机碱包括但不限于氢化钠，碳酸钾，碳酸钠，碳酸铯，氢氧化钠，氢氧化锂，磷酸钠，磷酸钾等；

技术方案8

第四步：通式(P4)化合物在任选酸性或碱性条件下与通式(Y2)化合物反应，得到通式(P5)化合物；

第五步：通式(P5)化合物在任选酸性条件下脱除叔丁氧羰基保护基，并经制备HPLC分离，得到通式(P6)化合物。

其中：R ₁、R ₂和R ₃可以分别如本申请任一式(II)、式(II-a1)、式(II-a2)、式(II-b1)、或式(II-b2)所示R ₁、R ₂和R ₃所定义；

提供氧化条件的试剂包括但不限于戴斯马丁氧化剂、双氧水、亚氯酸钠、次氯酸钠、高氯酸钾；

提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱，所述的有机碱包括但不限于三乙胺，二乙胺，N-甲基吗啉，吡啶，六氢吡啶，NN-二异丙基乙胺，正丁基锂，二异丙基氨基锂，醋酸钾，叔丁醇钠，叔丁醇钾等；所述无机碱包括但不限于氢化钠，碳酸钾，碳酸钠，碳酸铯，氢氧化钠，氢氧化锂等。

技术方案9

第五步：通式(P5)化合物在任选酸性或碱性条件下脱除保护基PG，并经制备HPLC分离，得到通式(P6)化合物。

其中：

PG可以为常见羟基、氨基、巯基或羧基的保护基；

W、A和Y可以本申请任一式(II)所示W、A和Y所定义；

或者A可以为任选取代的烷基、任选取代的杂烷基、任选取代的脂肪环、任选取代的脂肪杂环、任选取代的芳环、任选取代的芳杂环或任选取代的直链或支链状结构；

提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱，所述的有机碱包括但不限于三乙胺，二乙胺， N-甲基吗啉，吡啶，六氢吡啶，NN-二异丙基乙胺，正丁基锂，二异丙基氨基锂，醋酸钾，叔丁醇钠，叔丁醇钾等；所述无机碱包括但不限于氢化钠，碳酸钾，碳酸钠，碳酸铯，氢氧化钠，氢氧化锂等。

技术方案10

第一步：通式(P1)化合物与通式(Y1)化合物在任选金属铜盐、碱性条件及任选配体催化下，或在任选碱性条件下反应，得到通式(P2)化合物；

其中：

PG可以为常见羟基、氨基、巯基或羧基的保护基；

B、W、A和Y可以本申请任一式(II)所示B、W、A和Y所定义；

或者B可以为任选取代的间位苯环、任选取代的吡啶环、任选取代的脂肪环或任选取代的脂肪杂环；

或者W可以为-NR-、-O-、-S-、-O-(CR ₁R ₂) _n1-、-NR(CR ₁R ₂) _n2-、-S-(CR ₁R ₂) _n3-、-(CR ₁R ₂) _n1-O-、-(CR ₁R ₂) _n2NR-或-(CR ₁R ₂) _n3-S-，其中R、R ₁和R ₂可以各自独立地为氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、-OH、-SH、-NH ₂、-C(O)H、-CO ₂H、-C(O)C(O)H、-C(O)CH ₂C(O)H、-S(O)H、-S(O) ₂H、-C(O)NH ₂、-SO ₂NH ₂、-OC(O)H、-N(H)SO ₂H或C _1-6脂肪族基团，n1、n2和n3可以各自独立地选自至少为0的数；

LG可以为常见离去基团，包括但不限于氟，氯，溴，碘，三氟甲磺酰氧基，甲磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基；

技术方案11

第一步：通式(P1)化合物在任选碱性条件下与通式(Y1)化合物反应，得到通式(P2)化合物；

第三步：通式(P3)化合物在任选氧化条件下，得到通式(P4)；

第四步：通式(P4)化合物与通式(Y2)化合物在任选酸性或碱性条件下反应，得到通式化合物(P5)；

第五步：通式(P5)化合物任选在酸性条件下脱除叔丁氧羰基保护基，并经制备HPLC分离，得到通式(P6)化合物。

其中：

R ₁、R ₂和R ₃可以分别如本申请任一式(II)、式(II-a1)、式(II-a2)、式(II-b1)、或式(II-b2)所示R ₁、R ₂和R ₃所定义；

提供碱性条件的试剂包括有机碱和无机碱，所述的有机碱包括但不限于三乙胺，二乙胺， N-甲基吗啉，吡啶，六氢吡啶，NN-二异丙基乙胺，正丁基锂，二异丙基氨基锂，醋酸钾，叔丁醇钠，叔丁醇钾等；所述无机碱包括但不限于氢化钠，碳酸钾，碳酸钠，碳酸铯，氢氧化钠，氢氧化锂等；

技术方案12

第一步：通式(P1)化合物与通式(Y1)化合物在任选酸性或碱性条件下反应，得到通式(P2)化合物；

其中：

PG可以为常见羟基、氨基、巯基或羧基的保护基；

A和Y可以本申请任一式(II)所示A和Y所定义；

技术方案13

第一步：通式(P1)化合物上与通式(Y1)化合物在任选缩合条件下反应，并经制备HPLC分离，得到通式(P2)化合物。

其中：

B环为或杂芳基；

W不存在或W为任意基团；

Y为氢、卤素、C ₁-C ₆烷基、C ₁-C ₆卤代烷基、氰基、羟基、硫醇基、氨基、烷硫基和烷氧基；

R ₁、R ₂和R ₃可以分别如本申请任一式(I-D)、式(I-a1-D)、式(I-a2-D)、式(I-a3-D)、式(I-a4-D)、式(II-D)、式(II-a1-D)、式(II-a2-D)、式(II-a3-D)、式(II-a4-D)、式(II-b1-D)、式(II-b2-D)、式(II-b3-D)、或式(II-b4-D)所示R ₁、R ₂和R ₃所定义；

LG ₁可以为常见活化酯或羧基的羟基；

Tr不存在或Tr为任意基团；

L3选自本申请多肽片段L ³；

L2不存在或选自本申请连接片段L ²；

L1x选自本申请偶联单元L ^1x；

缩合剂可以选自4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基氯化吗啉盐、1-羟基苯并三唑和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N'-二环己基碳化二亚胺、N,N'-二异丙基碳二酰亚胺、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑))-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鑰六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷，优选4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基氯化吗啉盐或1-羟基苯并三唑和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐。

技术方案14

第二步：通式(P2)化合物在任选酸性或碱性条件下，脱除保护基PG ₁，得到通式(P3)化合物；

第三步：通式(P3)化合物上与通式(Y2)化合物在任选缩合条件下反应，得到通式(P4)化合物；

第四步：通式(P4)化合物在任选酸性或碱性条件下，脱除保护基PG ₁，得到通式(P5)化合物；

第五步：通式(P5)化合物上与通式(Y3)化合物在任选缩合条件下反应，并经制备HPLC分离，得到通式(P6)化合物。

其中：

B环为或杂芳基；

W不存在或W为任意基团；

LG ₁、LG ₂和LG ₃可以为常见活化酯或羧基的羟基；

PG ₁、PG ₂和PG ₃可以为常见氨基的保护基；

Tr不存在或Tr为任意基团；

L3选自本申请多肽片段L ³；

L2不存在或选自本申请连接片段L ²；

L1x选自本申请偶联单元L ^1x；

缩合剂可以选自4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基氯化吗啉盐、1-羟基苯并三唑和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N'-二环己基碳化二亚胺、N,N'-二异丙基碳二酰亚胺、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑))-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鑰六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷，优选4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基氯化吗啉盐或1-羟基苯并三唑和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；

技术方案15

第三步：通式(P3)化合物上与通式(Y3)化合物在任选缩合条件下反应，并经制备HPLC分离，得到通式(P4)化合物。

其中：

B环为或杂芳基；

W不存在或W为任意基团；

LG ₁和LG ₂可以为常见活化酯或羧基的羟基；

PG ₁可以为常见氨基的保护基；

Tr不存在或Tr为任意基团；

L3选自本申请多肽片段L ³；

L2不存在或选自本申请连接片段L ²；

L1x选自本申请偶联单元L ^1x；

技术方案16

第二步：通式(P2)化合物在任选酸性或碱性条件下，上带保护基的磷酸酯，得到通式(P3)化合物；

第三步：通式(P3)化合物在任选酸性或碱性条件下，脱除保护基PG ₃，得到通式(P4)化合物；

第四步：通式(P4)化合物上与通式(Y2)化合物在任选缩合条件下反应，得到通式(P5)化合物；

第五步：通式(P5)化合物在任选酸性或碱性条件下，脱除保护基PG ₅，得到通式(P6)化合物；

第六步：通式(P6)化合物上与通式(Y3)化合物在任选缩合条件下反应，得到通式(P7)化合物。

第七步：通式(P7)化合物在任选酸性或碱性条件下，脱除保护基PG ₁，并经制备HPLC 分离，得到通式(P8)化合物。

其中：

B环为或杂芳基；

W不存在或W为任意基团；

R ₄和R ₅为常见氨基酸残基；

LG ₁、LG ₂和LG ₃可以为常见的活化酯或氢；

PG ₁和PG ₂可以不存在或为常见氨基的保护基或羟基的保护基或羧基的保护基；

PG ₃和PG ₅可以为常见氨基的保护基；

PG ₄可以为常见的羟基保护基；

Tr不存在或Tr为任意基团；

L3选自本申请多肽片段L ³；

L2不存在或选自本申请连接片段L ²；

L1x选自本申请偶联单元L ^1x；

提供上磷酸酯的条件包括但不限于二苯基N,N'-二异丙基亚磷酰胺/双氧水，N,N-二异丙基亚磷酰胺二叔丁酯/双氧水，二[2-(三甲基硅烷基)乙基]二异丙基氨基磷酸酯/双氧水，二苄基二乙基膦氨/双氧水，二苄基N,N-二甲基亚磷酰胺，三氯化磷/苄醇/双氧水，焦磷酸氯/苄醇，焦磷酸氯/叔丁醇；

技术方案17

第一步：通式(P1)化合物在任选酸性或碱性条件下，引入磷酸，得到通式(P2)化合物；

第二步：通式(P2)化合物在任选酸性或碱性条件下，同时或先后脱除保护基PG ₁、PG ₂和PG ₃，得到通式(P3)化合物；

第三步：通式(P3)化合物上与通式(Y1)化合物在任选缩合条件下反应，并经制备HPLC分离，得到通式(P4)化合物。

其中：

B环为或杂芳基；

W不存在或W为任意基团；

R ₄和R ₅为常见氨基酸残基；

PG ₃可以为常见氨基的保护基；

LG ₂可以为常见的活化酯或溴；

提供上磷酸的条件包括但不限于焦磷酸氯，三氯氧磷，三氯化磷/双氧水；

不欲被任何理论所限，下文中的实施例仅仅是为了阐释本申请的化合物、制备方法和用途等，而不用于限制本申请发明的范围。

技术方案18

第二步：通式(P2)化合物在任选酸性或碱性条件下，脱除保护基PG ₁，得到通式(P3)化合物。

第四步：通式(P4)化合物在任选酸性或碱性条件下，脱除保护基PG ₂，得到通式(P5)化合物；

第五步：通式(P5)化合物上与通式(Y3)化合物在任选缩合条件下反应，得到通式(P6)化合物；

第六步：通式(P6)化合物在任选酸性或碱性条件下，脱除保护基PG ₃，得到通式(P7)化合物；

第七步：通式(P7)化合物上与通式(Y3)化合物在任选缩合条件下反应，并经制备HPLC分离，得到通式(P8)化合物。

其中：

B环为任选取代的芳基或杂芳基；

W不存在或W为任意基团；

Y ₁为氢、羟基、氟、氯、甲基、羟基或甲氧基；

R _y1、R _y2、n、R ₁、R ₂和R ₃可以分别如本申请任一式(I-D)、式(I-a1-D)、式(I-a2-D)、式(I-a3-D)、式(I-a4-D)、式(II-D)、式(II-a1-D)、式(II-a2-D)、式(II-a3-D)、式(II-a4-D)、式(II-b1-D)、式(II-b2-D)、式(II-b3-D)、或式(II-b4-D)所示R _y1、R _y2、n、R ₁、R ₂和R ₃所定义；

LG ₁、LG ₂、LG ₃和LG ₄可以为常见活化酯或羧基的羟基；

PG ₁、PG ₂和PG ₃可以为常见氨基的保护基；

Tr不存在或Tr为任意基团；

L3选自本申请多肽片段L ³；

L2不存在或选自本申请连接片段L ²；

L1x选自本申请偶联单元L ^1x；缩合剂可以选自4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基氯化吗啉盐、1-羟基苯并三唑和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N,N'-二环己基碳化二亚胺、N,N'-二异丙基碳二酰亚胺、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯、1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲脲六氟磷酸酯、2-(7-偶氮苯并三氮唑))-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鑰六氟磷酸盐或六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷，优选4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基氯化吗啉盐或1-羟基苯并三唑和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；

实施例

化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或质谱(MS)来确定的。NMR的测定是用Quan tum-I核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-D)、氘代氯仿(CDC13)、氘代甲醇(CD3OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)，化学位移是以10_6(ppm)作为单位给出。

MS的测定用Angilent 6230 ESI-TOF质谱仪(生产商:安捷伦,c型号:6230)。

UPLC的测定用Waters AcquityUPLCSQD液质联用仪(Poroshell 120 EC-C18，2.1mm x 50mm，1.9微米色谱柱)。

HPLC的测定使用安捷伦1260高压液相色谱仪(TOSOH G3000 SW SEC色谱柱)。

UV的测定使用Thermonanodrop2000紫外分光光度计。

酶联免疫测定用EnVision酶标仪(PerkinElmer公司)。

薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm0.2mm,薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm0.5mm娃胶板。

柱层析一般使用烟台黄海200～300目硅胶为载体。

本申请的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自ABCRGmbH&Co.KG，AcrosOrgannics，AldrichChemicalCompany,韶远化学科技(AccelaChemBioInc)、达瑞化学品等公司。

实施例中如无特殊说明，反应均在氩气氛或氮气氛下进行。

氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氩气或氮气气球。

氢气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气气球。

实施例中如无特殊说明，反应中的溶液是指水溶液。

实施例中如无特殊说明，反应的温度为室温。室温为最适宜的反应温度，温度范围是20℃～30℃。

纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂的体系包括：A:二氯甲烷和异丙醇体系，B:二氯甲烷和甲醇体系，C:石油醚和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和酸性或碱性试剂等进行调节。

本公开部分化合物是通过TOF-LC/MS来表征的。TOF-LC/MS使用安捷伦6230飞行时间质谱仪和安捷伦1290-Infinity超高效液相色谱仪。

实施例1

化合物1

步骤1将化合物1A(200mg，1.16mmol，1.0eq)，1B(112mg，1.18mmol，1.0eq)，K ₂CO ₃(330mg，2.39mmol，2.0eq)加入50mL单口瓶中，加入DMF(10mL)，氮气保护，100℃反应24小时。将乙酸乙酯(100mL)加入反应液，饱和食盐水(100mL×5)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，过柱(PE/EA＝100/1到100/50)得160mg淡黄色固体1C，收率：60％。MS-ESI:m/z 231.1[M+H] ⁺。

步骤2将化合物1C(220mg，0.96mmol，1.0eq)，1D(362mg，0.96mmol，1.0eq)，MgSO ₄(360mg，2.99mmol，3.0eq)加入50mL三口瓶中，加入无水乙腈(10mL)，氮气保护，0℃下加入甲烷磺酸(280mg，2.91mmol，3.0eq)反应2小时。将反应液过滤，旋干，过柱(DCM/MeOH＝100/1-100/5)得100mg淡黄色固体1E，收率18％。MS-ESI:m/z 589.3[M+H] ⁺。

步骤3氮气保护下，将化合物1E(100mg，0.17mmol，1.0eq)和铁粉(93mg，1.67mmol，9.8eq)投料于乙醇(3mL)中，氯化铵(89mg，1.66mmol，9.8eq)溶于水(1mL)中后，滴加至体系中，升温至60℃，搅拌3小时。LCMS检测，原料反应完毕，有产物生成。将反应液通过硅藻土过滤，减压旋干，送制备纯化，得到35mg白色粉末状固体产物1，收率：37％。

MS-ESI:m/z 559.3[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ7.23(d,J＝10.1Hz,1H),7.08(t,J＝7.8Hz,1H),6.76–6.72(m,1H),6.65(t,J＝2.5Hz,1H),6.58(dd,J＝8.0,2.2Hz,1H),6.52(d,J＝7.6Hz,1H),6.39(brs,1H),6.29(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.24–6.19(m,1H),6.07–6.02(m,1H),5.46(s,1H),5.00(d,J＝5.4Hz,1H),4.91(s,2H),4.62(d,J＝20.2Hz,1H),4.49(brs,1H),4.28(d,J＝20.2Hz,1H),3.66(brs,1H),3.03(brs,1H),2.58(td,J＝13.6,5.5Hz,1H),2.40–2.31(m,1H),2.26–2.06(m,3H),2.01(s,1H),1.91(dd,J＝12.6,5.5Hz,1H),1.87–1.77(m,1H),1.69(dd,J＝12.8,5.5Hz,2H),1.65–1.58(m,3H),1.45(s,3H),1.30(s,1H),1.25(s,1H),1.19–1.13(m,1H),1.11(dd,J＝11.2,3.5Hz,1H),0.95(s,3H).

化合物2

步骤1将化合物2A(900mg，5.2mmol，1.0eq)，化合物1B(500mg，5.2mmol，1.0eq)，K ₂CO ₃(1.4g，10.4mmol，2eq)加入50mL单口瓶中，加入DMF(10mL)，N ₂保护，100℃反应2小时。将EA(100mL)加入反应液，饱和食盐水(100mL×5)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，过柱(PE/EA＝100/1-100/50)得900mg淡黄色固体2B，收率：74％。MS-ESI:m/z 231.2[M+H] ⁺。

步骤2将化合物2B(900mg，3.9mmol，1.0eq)，化合物1D(1.47g，3.9mmol，1.0eq)，MgSO ₄(1.41g，11.7mmol，3.0eq)加入50mL三口瓶中，加入无水乙腈(10mL)，N ₂保护，0℃下加入甲烷磺酸(1.12g，11.7mmol，3.0eq)反应2小时。将反应液过滤，旋干，过柱(DCM/MeOH＝100/1-100/5)得430mg淡黄色固体2C，收率19％。MS-ESI:m/z 589.3[M+H] ⁺。

步骤3将化合物2C(430mg，0.73mmol，1.0eq)和铁粉(409mg，7.3mmol，10eq)投料于乙醇(10mL)中，氯化铵(391mg，7.3mmol，10eq)溶于水(2mL)中后，滴加至体系中，氮气保护，升温至60℃，搅拌1小时。LCMS检测，原料反应完毕，有产物生成，将反应液通过硅藻土过滤，减压旋干，送制备纯化，得到65mg白色粉末状固体产物2，收率16％。

MS-ESI:m/z 559.4[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.32(d,J＝10.1Hz,1H),6.94–6.88(m,2H),6.87(t,J＝1.9Hz,1H),6.68(t,J＝2.5Hz,1H),6.51–6.43(m,2H),6.17(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.02(dd,J＝2.7,1.7Hz,1H),5.98–5.91(m,1H),5.34(s,1H),5.09–4.99(m,3H),4.83–4.74(m,4H),4.43(dd,J＝19.5,6.3Hz,1H),4.32–4.25(m,1H),4.13(dd,J＝19.4,5.8Hz,1H),2.59–2.53(m,1H),2.36–2.28(m,1H),2.13–1.98(m,2H),1.81–1.61(m,4H),1.57(dd,J＝14.3,5.4Hz,1H),1.39(s,3H),1.06–0.92(m,2H),0.83(s,3H).

化合物3

步骤1将化合物3A(800mg，4.02mmol，1.0eq)，化合物3B(950mg，4.01mmol，1.0eq)，K ₂CO ₃(1.66g，12.03mmol，3.0eq)加入三口瓶(100mL)中，加入四氢呋喃(40mL)溶解，加入Pd(dppf)Cl ₂(588mg，0.80mmol，0.2eq)，氮气保护置换三次并将温度加热至80℃搅拌反应20小时。LCMS显示反应结束。将反应液过滤后，母液用二氯甲烷(100mL)，水(100mL)分液萃取，有机相干燥，旋干拌样过柱(PE/EA＝9/1)得800mg白色固体3C，收率：64％。MS-ESI:m/z 334.2[M+Na] ⁺。

步骤2将化合物3C(227mg，0.73mmol，1.0eq)，化合物1D(274mg，0.73mmol，1.0eq)，MgSO ₄(175mg，1.45mmol，2.0eq)加入50mL三口瓶中，加入乙腈(10mL)，氮气保护，0℃下加入三氟甲磺酸(328mg，2.19mmol，3.0eq)反应2小时后LCMS显示反应结束。将反应液过滤，母液加水(50mL)，二氯甲烷(50mL)萃取分液，饱和食盐水洗涤，有机相无水硫酸钠干燥旋干后送制备，经冻干后得72mg白色固体粉末3，100mg白色固体粉末3S，收率分别为17％和24％。

化合物3：

MS-ESI:m/z 570.6[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.36–7.25(m,5H),7.12(t,J＝8.1Hz,1H),6.92(d,J＝7.6Hz,1H),6.85–6.79(m,2H),6.20(dd,J＝10.2,1.8Hz,1H),5.99(s,1H),5.39(s,1H),4.91(d,J＝3.9Hz,1H),4.81(brs,1H),4.49(d,J＝19.5Hz,1H),4.32–4.25(m,1H),4.17(d,J＝19.5Hz,1H),3.90(s,2H),3.69(brs,1H),2.61–2.53(m,1H),2.38–2.30(m,1H),2.18–1.94(m,2H),1.80–1.55(m,5H),1.40(s,3H),1.05–0.90(m,2H),0.85(s,3H).

化合物3S：

MS-ESI:m/z 570.6[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.35–7.27(m,2H),7.27–7.20(m,2H),7.14(s,1H),7.10(d,J＝7.4Hz,1H),6.96(d,J＝7.8Hz,1H),6.92–6.85(m,1H),6.83(s,1H),6.17(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.06(s,1H),5.94(s,1H),5.28(d,J＝6.9Hz,1H),4.80(brs,1H),4.35–4.28(m,1H),4.25(d,J＝19.2Hz,1H),4.02(d,J＝19.2Hz,1H),3.90(s,2H),2.60–2.54(m,1H),2.36–2.27(m,1H),2.11–1.96(m,2H),1.89–1.67(m,5H),1.39(s,3H),1.26–1.11(m,1H),1.04(dd,J＝11.2,3.4Hz,1H),0.88(s,3H).

化合物4

步骤1将化合物3A(2.5g，12.56mmol，1.0eq)，化合物4A(2.98g，12.57mmol，1.0eq)，K ₂CO ₃(5.2g，37.63mmol，3.0eq)加入三口瓶(100mL)中，加入四氢呋喃(25mL)溶解，加入Pd(dppf)Cl ₂(1.8g，2.46mmol，0.2eq)，氮气保护置换三次并将温度加热至80℃搅拌反应20小时。TLC(PE/EA＝5/1)显示反应结束。将反应液过滤后，母液用二氯甲烷(100mL)，水(100mL)分液萃取，有机相干燥，旋干拌样过柱(PE/EA＝9/1)得2.5g白色固体4B，收率：64％。MS-ESI:m/z 334.1[M+Na] ⁺。

步骤2将化合物4B(227mg，0.73mmol，1.0eq)，化合物1D(274mg，0.73mmol，1.0eq)，MgSO ₄(175mg，1.45mmol，2.0eq)加入50mL三口瓶中，加入乙腈(10mL)，氮气保护，0℃下加入三氟甲磺酸(328mg，2.19mmol，3.0eq)反应2小时后TLC(PE/EA＝1/1)显示反应结束。将反应液过滤，母液加水(50mL)，二氯甲烷(50mL)萃取分液，饱和食盐水洗涤，有机相无水硫酸钠干燥，旋干后送制备，经冻干后得320mg白色固体粉末4，收率：77％。

MS-ESI:m/z 570.3[M+Na] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.34(d,J＝10.0Hz,1H),7.31–7.22(m,4H),7.13(d,J＝8.1Hz,2H),6.93(d,J＝7.9Hz,2H),6.20(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),5.98(s,1H),5.40(s,1H),4.91(d,J＝4.5Hz,1H),4.82(brs,1H),4.49(d,J＝19.5Hz,1H),4.31(brs,1H),4.17(d,J＝19.5Hz,1H),3.86(s,2H),2.61–2.53(m,1H),2.39–2.31(m,1H),2.19–2.08(m,1H),2.08–2.00(m,1H),1.81–1.57(m,5H),1.40(s,3H),1.09–0.93(m,2H),0.86(s,3H).

化合物5

步骤1将化合物4B(2g，6.42mmol)、化合物5A(2.5g，6.34mmol)，MgSO ₄(2.4g，19.9mmol)溶于MeCN(30mL)中，氮气保护并降温至0℃，滴加三氟甲磺酸(1.93g，12.86mmol)的MeCN(2mL)溶液，加完后室温反应17小时。LCMS监测，原料反应完全。反应液过滤后，旋干硅胶拌样，过柱(二氯甲烷/MeOH＝10/1)得1.2g白色固体5，收率：32％。

MS-ESI:m/z 588.3[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.36–7.19(m,5H),7.15(d,J＝8.3Hz,2H),6.97(d,J＝8.1Hz,2H),6.26(dd,J＝10.3,1.9Hz,1H),6.10(s,1H),5.52–5.41(m,2H),4.91(s,1H),4.50(d,J＝19.5Hz,1H),4.27–4.12(m,2H),3.89–3.79(m,2H),2.73–2.56(m,2H),2.43–2.35(m,1H),2.25–2.03(m,2H),1.90–1.81(m,1H),1.74–1.55(m,3H),1.51(s,3H),1.45–1.31(m,1H),0.88(s,3H).

化合物6

步骤1将化合物4B(100mg，0.24mmol，1.0eq)，化合物6A(75mg，0.24mmol，1.0eq)，MgSO ₄(58mg，0.48mmol，2.0eq)加入25mL的三口瓶中，加乙腈5mL溶解，氮气保护，80℃下搅拌10分钟后加入三氟甲磺酸(109mg，0.73mmol，3.0eq)，2小时后TLC(EA)显示反应结束。将反应液过滤，母液旋干后送制备纯化得62mg类白色固体6，收率：42％。

MS-ESI:m/z 606.1[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.36–7.21(m,5H),7.14(d,J＝8.0Hz,2H),6.95(d,J＝7.9Hz,2H),6.32(dd,J＝10.1,1.8Hz,1H),6.18(s,1H),5.77–5.53(m,2H),5.46(s,1H),4.96–4.91(m,1H),4.50(d,J＝19.5Hz,1H),4.26–4.15(m,2H),3.90–3.76(m,3H),2.76–2.57(m,1H),2.37–2.20(m,2H),2.10–2.02(m,1H),1.74–1.63(m,3H),1.57–1.43(m,4H),0.87(s,3H).

化合物7

步骤1将化合物1C(2g，8.69mmol，1.0eq)，化合物5A(3.4g，8.69mmol，1.0eq)加到ACN(50mL)，再加入MgSO ₄(5.2g，43.4mmol，5.0eq)，0℃下加入甲磺酸(2.5g，26.1mmol，3.0eq，溶于2mL ACN加入)，反应20分钟后LCMS显示产物生产。向反应液中加入3g NaHCO ₃固体，再加入30mL水，搅拌10分钟，过滤，滤饼用DCM/MeOH(10/1，100mL)洗涤，分液除去水相，有机相干燥后拌样过柱(PE/EA＝1/3)得到650mg黄色固体7A，收率：12％。MS-ESI:m/z 607.3[M+H] ⁺。

步骤2将化合物7A(640mg，1.06mmol，1.0eq)加入到EtOH/H ₂O(8mL/2mL)中，再加入NH ₄Cl(562mg，10.6mmol，10.0eq)和铁粉(594mg，10.6mmol，10.0eq)，在N ₂保护下升温至60℃反应1小时。TLC(PE/EA＝1/2)显示反应完成。反应液降至室温然后加入5g Na ₂SO ₄，过滤，滤饼用DCM/MeOH(10/1，100mL)洗涤，滤液旋干拌样过柱(DCM/MeOH＝10/1)得到385mg黄色固体7，收率：63％。

MS-ESI:m/z 577.3[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.29(d,J＝10.1Hz,1H),6.98–6.89(m,1H),6.89–6.82(m,1H),6.75–6.67(m,1H),6.47–6.40(m,1H),6.38–6.19(m,3H),6.07–5.97(m,2H),5.45–5.36(m,2H),5.11–4.98(m,3H),4.91–4.77(m,3H),4.45(dd,J＝19.4,6.2Hz,1H),4.24–4.09(m,2H),2.71–2.58(m,1H),2.58–2.52(m,1H),2.49–2.41(m,1H),2.40–2.29(m,1H),2.23–2.11(m,1H),2.11–2.01(m,1H),1.89–1.79(m,1H),1.69–1.55(m,3H),1.50(s,3H),1.44–1.31 (m,1H),0.84(s,3H).

化合物8

步骤1将化合物2B(4g，17.37mmol)、化合物5A(6.85g，17.37mmol)溶于MeCN(40mL)中，加入MgSO ₄(6.26g，52.11mmol)，氮气保护在0℃下加入甲烷磺酸(5g，52.17mmol)反应0.5小时后，LCMS监测产物生成。加入NaHCO ₃固体加水(10mL)调pH至7-8后，用DCM(50mL)，水(30mL)萃取分液旋干，拌样，过柱(DCM:MeOH＝10:1)得到1.37g绿色固体8A，收率：13％。MS-ESI:m/z 607.3[M+H] ⁺。

步骤2将化合物8A(1.3g，2.14mmol)、铁粉(1.2g，21.4mmol)溶于EtOH(13mL)中，加入NH ₄Cl(1.14g，21.4mmol)的H ₂O(4.5mL)溶液，氮气保护在60℃下反应2小时后，LCMS监测原料基本反应完。将反应液过滤，用水(10mL)和EA(15mL)萃取分液，有机相旋干，得到800mg黄色固体8，收率：65％。

MS-ESI:m/z 577.7[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.29(d,J＝10.1Hz,1H),6.93–6.86(m,2H),6.83(t,J＝2.0Hz,1H),6.69(t,J＝2.5Hz,1H),6.51–6.43(m,2H),6.24(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.05(s,1H),5.97(dd,J＝2.7,1.7Hz,1H),5.43–5.36(m,2H),5.09–4.98(m,3H),4.84–4.76(m,3H),4.44(dd,J＝19.4,6.0Hz,1H),4.23–4.09(m,2H),2.70–2.58(m,1H),2.57–2.51(m,1H),2.48–2.30(m,2H),2.22–2.10(m,1H),2.10–2.00(m,1H),1.91–1.77(m,1H),1.67–1.54(m,3H),1.49(s,3H),1.45–1.29(m,1H),0.83(s,3H).

化合物9

步骤1将化合物9A(384mg，2.76mmol)加入250mL三口瓶中，加入DMF(5mL)，加入K ₂CO ₃(762mg，5.52mmol)，氮气保护，冰水浴滴加化合物3A(500mg，2.5mmol)，1mL DMF溶液，加完升至室温反应2小时，TLC(PE:EA＝5:1)显示反应完毕。将反应液倒入50mL水中，EA(100mL)萃取，水洗有机相(50mL×3)，用饱和NaCl洗涤一次，无水Na ₂SO ₄干燥，旋干得630mg白色固体9B，收率：97％。MS-ESI:m/z 280.2[M+Na] ⁺。

步骤2将化合物9B(100mg，0.39mmol)、化合物1D(146mg，0.39mmol)、乙腈(3mL)、MgSO ₄(186mg，1.55mmol)，氮气保护，降温至-20℃，0.5mL乙腈溶解三氟甲磺酸(175mg，1.16mmol)，冷却至室温后滴加入反应，加完-20℃搅拌1.5小时，TLC(PE:EA＝1:1)显示反应完毕。将反应液倒入20mL饱和碳酸氢钠水溶液中，EA(20mL×2)萃取产物，水洗有机相(20mL×3)，有机相无水硫酸钠干燥，旋干得黄色发泡固体290mg，LCMS含量80％，粗品超量不计收率。MS-ESI:m/z 616.3[M+H] ⁺。

步骤3将化合物9C(140mg，0.227mmol)、铁粉(127mg，2.27mmol)、NH ₄Cl(121mg，2.27mmol)，加入反应瓶，加入乙醇(1.5mL)，水(0.4mL)，氮气保护，加热至60℃，反应1小时。LCMS显示反应完毕。将反应液冷却至室温，过滤，加水(20mL)，加EA(50mL)萃取产品，水洗有机相(20mL×2)，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩得100mg油状物，取一半反相制备，冻干得11.7mg化合物9和7.8mg化合物9S，收率分别为18％和12％。

化合物9：

MS-ESI:m/z 586.3[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ8.87(brs,1H),7.52(s,1H),7.49–7.37(m,3H),7.33(d,J＝10.0Hz,1H),7.08(d,J＝8.0Hz,2H),6.95(d,J＝8.6Hz,2H),6.18(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),5.94(s,1H),5.48(s,1H),5.09(s,2H),4.95(d,J＝4.5Hz,1H),4.81(d,J＝3.4Hz,1H),4.53(d,J＝19.5Hz,1H),4.30(s,1H),4.19(d,J＝19.4Hz,1H),2.62–2.55(m,1H),2.30(s,1H),2.20–2.08(m, 1H),2.08–1.98(m,1H),1.82–1.59(m,5H),1.40(s,3H),1.08–0.92(m,2H),0.87(s,3H).

化合物9S：

MS-ESI:m/z 586.3[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ9.05(brs,1H),7.47–7.35(m,3H),7.32(d,J＝10.1Hz,1H),7.27–7.20(m,1H),7.16–7.07(m,2H),7.07–6.94(m,2H),6.17(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.13(s,1H),5.95(s,1H),5.31(d,J＝6.8Hz,1H),5.08(s,2H),4.97(brs,1H),4.79(d,J＝3.4Hz,1H),4.34–4.22(m,2H),4.03(d,J＝19.1Hz,1H),2.60–2.54(m,2H),2.37–2.28(m,1H),2.13–1.95(m,2H),1.91–1.69(m,5H),1.40(s,3H),1.22–1.13(m,1H),1.06(dd,J＝11.1,3.3Hz,1H),0.90(s,3H).

化合物10(参照化合物P1)、化合物10S

步骤1化合物10A(10g，46.3mmol)、化合物10B(6.5g，46.3mmol)、K ₂CO ₃(19.2g，138.8mmol)，加入THF(100mL)和水(5mL)，加入Pd(dppf)Cl ₂(3.4g，4.63mmol)，氮气保护，外温80℃加热至回流反应16小时，TLC(PE:EA＝5:1)显示反应完毕。将反应液冷却至室温，过滤，加水(300mL)，加EA(300mL)萃取产物，水洗有机相(100mL×3)，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩，旋干硅胶拌样，柱层析(PE:EA＝10:1)得3.1g白色发泡固体10C，收率：29％。MS-ESI:m/z 232.1[M+H] ⁺。

步骤2将化合物10C(100mg，0.43mmol)、化合物1D(163mg，0.43mmol)、乙腈(3mL)、MgSO ₄(208mg，1.73mmol)加入反应瓶，氮气保护，降温至0℃，0.5mL乙腈溶解甲磺酸(125mg，1.3mmol)，滴加入反应，加完0℃-10℃搅拌1小时，LCMS显示约一半产物。将反应液倒入20mL饱和碳酸氢钠水溶液中，EA(20mL×2)萃取产物，水洗有机相 (20×3)，有机相无水硫酸钠干燥，旋干后制备板分离(PE:EA＝1:1)，得100mg白色固体10D，收率：39％。MS-ESI:m/z 590.3[M+H] ⁺。

步骤3将化合物10D(100mg，0.17mmol)、铁粉(95mg，1.7mmol)、NH ₄Cl(91mg，1.7mmol)，加入反应瓶，加入乙醇(1mL)，水(0.25mL)，氮气保护，加热至60℃，反应1小时。LCMS显示反应完毕。将反应液冷却至室温，过滤，加水(20mL)，加EA(50mL)萃取产品，水洗有机相，20mL×2，有机相无水硫酸钠干燥，旋干刮大板，PE:EA＝1:2，得40mg白色固体，反相制备，将纯品冻干得5mg化合物10和8.8mg化合物10S，收率分别为5％和9％。

化合物10：

MS-ESI:m/z 560.2[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.34(d,J＝10.1Hz,1H),7.02–6.94(m,1H),6.66(brs,3H),6.50(d,J＝3.2Hz,1H),6.21(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.12(d,J＝3.2Hz,1H),5.97(s,1H),5.54(s,1H),4.89(d,J＝5.3Hz,1H),4.78(brs,1H),4.44(d,J＝19.4Hz,1H),4.28(s,1H),4.14(d,J＝19.5Hz,1H),3.83(s,2H),2.61–2.53(m,1H),2.36–2.29(m,1H),2.16–1.95(m,3H),1.81–1.54(m,5H),1.40(s,3H),1.03–0.91(m,2H),0.84(s,3H).

化合物10S：

MS-ESI:m/z 560.2[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.30(d,J＝10.1Hz,1H),7.18–7.10(m,1H),6.80–6.62(m,3H),6.33(d,J＝3.3Hz,1H),6.16(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.09(s,1H),6.06(d,J＝3.2Hz,1H),5.93(s,1H),5.16(d,J＝6.1Hz,1H),4.78(s,1H),4.28(s,1H),4.15(d,J＝19.3Hz,1H),4.00(d,J＝19.3Hz,1H),3.83(s,2H),2.58–2.53(m,1H),2.32–2.26(m,1H),2.11–1.94(m,3H),1.85–1.78(m,1H),1.78–1.55(m,4H),1.38(s,3H),1.16–1.08(m,1H),1.00(dd,J＝11.0,3.5Hz,1H),0.87(s,3H).

化合物11、化合物11S

步骤1化合物10A(8g，37mmol)、化合物11A(5.8g，37mmol)、K ₂CO ₃(15.3g，111mmol)加入THF(80mL)，加入水(4mL)，加入Pd(dppf)Cl ₂(2.7g，3.7mmol)，氮气保护，外温80℃加热至回流反应16小时，TLC(PE:EA＝5:1)显示反应完毕。将反应液冷却至室温，过滤，加水(300mL)，加EA(300mL)萃取产物，水洗有机相(100mL×3)，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩，旋干硅胶拌样，柱层析(PE:EA＝10:1)得2.86g白色发泡固体11B，收率：31％。MS-ESI:m/z 248.1[M+H] ⁺。

步骤2将化合物11B(200mg，0.81mmol)、化合物1D(304mg，0.81mmol)、乙腈(6mL)、MgSO ₄(388mg，3.24mmol)加入反应瓶，氮气保护，降温至0℃，1mL乙腈溶解甲磺酸(233mg，2.43mmol)，滴加入反应，加完0℃-10℃搅拌6小时，LCMS显示产物含量70％。将反应液倒入40mL饱和碳酸氢钠水溶液中，EA(40mL×2)萃取产物，水洗有机相(40mL×3)，有机相无水硫酸钠干燥，旋干得480mg黄色固体11C，粗品不计收率。MS-ESI:m/z 606.2[M+H] ⁺。

步骤3将化合物11C(240mg，0.40mmol)、铁粉(222mg，4.00mmol)、NH ₄Cl(212mg，4.00mmol)，加入反应瓶，加入乙醇(3mL)，水(0.75mL)，氮气保护，加热至60℃，反应1小时。LCMS显示反应完毕。将反应液冷却至室温，过滤，加水(40mL)，加EA(100mL)萃取产品，水洗有机相(40mL×2)，有机相无水硫酸钠干燥，旋干刮大板(PE:EA＝1:2)，得40mg白色固体，反相制备，冻干得15mg化合物11和4.4mg化合物11S，收率分别为6％和2％。

化合物11：

MS-ESI:m/z 576.2[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.31(d,J＝10.1Hz,1H),7.12–7.06(m,1H),7.02(t,J＝ 8.0Hz,1H),6.73(d,J＝3.5Hz,1H),6.69–6.53(m,3H),6.18(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),5.97(s,1H),5.73(s,1H),4.88(d,J＝4.3Hz,1H),4.80(s,1H),4.48(d,J＝19.4Hz,1H),4.29(d,J＝4.2Hz,1H),4.15(d,J＝19.5Hz,1H),3.98(s,2H),2.60–2.54(m,1H),2.37–2.28(m,1H),2.18–1.94(m,2H),1.79–1.54(m,5H),1.39(s,3H),1.02–0.91(m,1H),0.88(dd,J＝11.2,3.5Hz,1H),0.84(s,3H).

化合物11S：

MS-ESI:m/z 576.3[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.31(d,J＝10.1Hz,1H),7.15–7.08(m,1H),7.00(d,J＝3.5Hz,1H),6.75(d,J＝3.5Hz,1H),6.74–6.59(m,3H),6.29(s,1H),6.17(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),5.94(s,1H),5.20(d,J＝7.0Hz,1H),4.78(s,1H),4.36(d,J＝19.2Hz,1H),4.29(s,1H),4.10–3.94(m,3H),2.59–2.53(m,1H),2.32–2.26(m,1H),2.11–1.94(m,3H),1.86–1.61(m,5H),1.38(s,3H),1.21–1.12(m,1H),1.03(dd,J＝11.2,3.4Hz,1H),0.86(s,3H).

化合物12

步骤1将化合物1(500mg，0.896mmol，1.0eq)加入到DMF(5mL)中，再加入化合物12A(417mg，0.896mmol，1.0eq)，2，6-lutidine(288mg，2.69mmol，3.0eq)和HATU(410mg，1.08mmol，1.2eq)，在室温下反应2小时。LCMS显示反应完成。将反应液滴加到水(50mL)中，有固体析出，过滤，滤饼用水(20mL)洗涤，滤饼再冻干除水，得到750mg淡黄色固体12B，收率：83％。MS-ESI:m/z 1007.3[M+H] ⁺。

步骤2将化合物12B(750mg，0.745mmol，1.0eq)加入到THF(8mL)中，再加入Pd(PPh ₃) ₄(172mg，0.149mmol，0.2eq)和N-甲基吗啉(376mg，3.73mmol，5eq)，在室温下反应2小时。LCMS显示反应完成。将反应液直接过反向柱(MeCN/H ₂O＝5％to 60％)得到650mg黄色粉末状固体12C，收率：90％。MS-ESI:m/z 967.6[M+H] ⁺。

步骤3将化合物12C(350mg，0.362mmol，1.0eq)加入到DCM(4.5mL)中，降温至0℃，再加入二乙胺(1.5mL)，然后升至室温反应2小时。LCMS显示反应完成。将反应液加入到150mL甲基叔丁基醚中，有固体析出，静置后倒去上层溶液，剩余固体用DMF溶解后过反向柱(MeCN/H ₂O＝5％to 40％)得到60mg黄色粉末状固体12D，收率：22％。

步骤4将化合物12D(60mg，0.08mmol，1.0eq)加入到THF/H ₂O(4mL/1mL)中，降温至0℃，再加入三乙胺(162mg，1.6mmol，20.0eq)和溴乙酰溴(129mg，0.64mmol，8.0eq，diluted in THF 0.1mL)，0℃反应5分钟。LCMS显示反应完成。反应液直接制备得到13mg白色粉末状固体12，收率：19％。

MS-ESI:m/z 865.3[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ9.98(s,1H),8.56–8.49(m,1H),8.25(d,J＝7.7Hz,1H),7.55–7.50(m,1H),7.50–7.44(m,1H),7.34–7.28(m,1H),7.23(t,J＝7.8Hz,1H),6.98–6.84(m,2H),6.76–6.70(m,1H),6.17(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.08(dd,J＝2.8,1.7Hz,1H),5.94(s,1H),5.36(s,1H),5.01(s,2H),4.84–4.72(m,2H),4.48–4.35(m,3H),4.32–4.26(m,1H),4.14(d,J＝19.4Hz,1H),3.93(s,2H),3.79(dd,J＝5.6,2.3Hz,2H),2.60–2.53(m,1H),2.32–2.21(m,2H),1.89–1.53(m,6H),1.38(s,3H),1.08–0.93(m,2H),0.83(s,3H).

化合物13

步骤1将化合物2(1.5g，2.68mmol)，化合物12A(963mg，2.06mmol)，2，6-二甲基吡啶(663mg，6.19mmol)，加入三口瓶(100mL)中，加入DMF(20mL)溶解，加入HATU(942mg，2.48mmol)，搅拌反应17小时；LCMS显示反应结束。反应液缓慢加入水(200mL)中，有大量黄色固体析出，过滤，滤饼用水(100mL)冲洗后冻干，得1.1g黄色固体13A，收率：53％。MS-ESI:m/z 1007.4[M+H] ⁺。

步骤2将化合物13A(1g，0.99mmol)，N-甲基吗啡啉(999mg，9.9mmol)，Pd(PPh ₃) ₄(229mg，0.20mmol)加入25mL的三口瓶中，加THF(10mL)溶解氮气置换并降温至0℃反应，2小时后LCMS显示反应结束。将反应液直接上反向柱(H ₂O/CH ₃CN＝57/43)出产品，经冻干后得350mg白色粉末13B，收率：36％。MS-ESI:m/z 967.4[M+H] ⁺。

步骤3将化合物13B(350mg，0.36mmol)溶于DCM(6mL)中，加入二乙胺(2mL)，搅拌2小时，LCMS显示反应结束。将反应液滴入PE(60mL)后，有大量黄色固体析出，静置5分钟后将上层清液倒出，固体用DMF溶清后上反向柱，经水/乙腈＝75/25出产品，经冻干后得80mg白色粉末13C，收率：30％。MS-ESI:m/z 745.4[M+H] ⁺。

步骤4将化合物13C(80mg，0.107mmol，1.0eq)溶于THF(3mL)，H ₂O(0.6mL)体系中，氮气置换并用冰乙醇浴降温至-5℃后加入三乙胺(217mg，2.15mmol，2.0eq)，加入溴乙酰溴(172mg，0.86mmol，8.0eq)，搅拌5分钟后LCMS显示反应结束。将反应液低温下送制备，经制备冻干得10mg白色粉末13，收率：11％。

MS-ESI:m/z 865.2[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ9.97(s,1H),8.52(t,J＝5.6Hz,1H),8.26(d,J＝7.9Hz,1H),7.55(d,J＝8.6Hz,2H),7.31(d,J＝10.1Hz,1H),7.15(d,J＝8.6Hz,2H),6.92(t,J＝2.0Hz,1H),6.72(t,J＝2.5Hz,1H),6.17(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.07(dd,J＝2.8,1.7Hz,1H),5.94(s,1H),5.35(s,1H),4.98(s,2H),4.84–4.70(m,2H),4.48–4.37(m,2H),4.29(s,1H),4.14(d,J＝19.4Hz,1H),3.94(s,2H),3.80(dd,J＝5.6,1.7Hz,2H),2.59–2.52(m,2H),2.36–2.21(m,3H),2.16–1.91(m,3H),1.89–1.62(m,5H),1.58(dd,J＝14.6,5.2Hz,1H),1.39(s,3H),1.10–0.93(m,2H),0.83(s,3H).

化合物14

步骤1在氮气保护下，0℃下向化合物5(200mg，0.34mmol)，化合物12A(159mg，0.34mmol)，DMF(6mL)和DIEA(110mg，0.85mmol)，再滴加HATU(155mg，0.41mmol)的DMF(0.5mL)溶液，加完后在0℃反应0.5小时。TLC(PE/EA＝1/5)显示反应结束。将反应液加入60mL水中，析出固体，用乙酸乙酯(70mL)萃取分液，过硅胶柱纯化(PE:EA＝3:7)得270mg白色固体14A，收率：76％。

步骤2氮气保护下，在0℃下，向化合物14A(200mg，0.19mmol)的THF(4mL)溶液中加N-甲基吗啡啉(195mg，1.93mmol)，Pd(PPh ₃) ₄(44.6mg，0.038mmol)并在室温反应1小时。LCMS显示反应完全。将反应液直接过反向柱(CH ₃CN:H ₂O＝39:61)，得145mg白色粉末14B，收率：75％。MS-ESI:m/z 996.4[M+H] ⁺。

步骤3在氮气保护下，向化合物14B(160mg，0.16mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入二乙胺(1mL)，并在0℃下反应1小时。LCMS显示原料反应完全。将反应液用PE(40mL)，水(30mL)萃取后，水相冻干，固体直接送制备纯化得55mg白色固体14C，收率：44％。MS-ESI:m/z 774.4[M+H] ⁺。

步骤4在氮气保护下，向化合物14C(40mg，0.052mmol)、三乙胺(52.3mg，0.52mmol)的THF(4mL)及H ₂O(0.5mL)溶液中加入溴乙酰溴(41.7mg，0.207mmol)，并在0℃下反应10分钟。LCMS显示原料反应完全。将反应液直接送制备纯化得21mg白色固体14，收率：45％。

MS-ESI:m/z 894.2[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ9.88(s,1H),8.53(t,J＝5.6Hz,1H),8.26(d,J＝7.8Hz,1H),7.48(d,J＝8.2Hz,2H),7.34–7.21(m,5H),7.12(d,J＝8.2Hz,2H),6.25(dd,J＝10.0,1.9Hz,1H),6.10(s,1H),5.45(d,J＝6.7Hz,2H),4.93–4.85(m,1H),4.50(d,J＝19.5Hz,1H),4.45–4.37(m,1H),4.28–4.14(m,2H),3.93(s,2H),3.85–3.76(m,5H),2.71–2.60(m,1H),2.59–2.53(m,1H),2.44–2.36(m,1H),2.35–2.13(m,3H),2.08(d,J＝13.5Hz,1H),2.04–1.92(m,1H), 1.89–1.76(m,2H),1.74–1.57(m,3H),1.51(s,3H),1.44–1.31(m,1H),0.87(s,3H).

化合物15

步骤1将化合物15A(5g，23.1mmol)、15B(3.6g，23.1mmol)、K ₂CO ₃(9.6g，69.3mmol)溶于THF(50mL)中，加入水(5mL)。氮气保护下，加入Pd(dppf)Cl ₂(3.38g，4.6mmol)，外温80℃加热至回流反应16小时，TLC(PE:EA＝5:1)显示反应完毕。将反应液冷却至室温，过滤，加水(300mL)，加EA(300mL)萃取产物，水洗有机相(100mL×3)，有机相无水硫酸钠干燥。硅胶拌样，浓缩后柱层析纯化(PE:EA＝15:1)得830mg黄色固体15C，收率：14％。MS-ESI:m/z 248.1[M+H] ⁺。

步骤2氮气保护下，将化合物15C(800mg，3.2mmol)、15D(1.2g，3.2mmol)、乙腈(20mL)、MgSO ₄(15.5g，12.9mmol)加入反应瓶，冷却至-20℃，将三氟甲磺酸(1.46g，9.7mmol)的乙腈(5mL)溶液冷却后滴加入反应，加完-20℃搅拌1小时，LCMS显示反应完毕。将反应液倒入100mL饱和碳酸氢钠水溶液中，EA(100mL×2)萃取产物，水洗有机相(50mL×3)，有机相用无水硫酸钠干燥。浓缩后硅胶拌样，柱层析得1g黄色固体15E，收率：51％。MS-ESI:m/z 606.3[M+H] ⁺。

步骤3将化合物15E(100mg，0.165mmol)、铁粉(93mg，1.65mmol)、NH ₄Cl(88mg，1.65mmol)，加入反应瓶，加入乙醇(0.8mL)，水(0.2mL)，氮气保护，加热至60℃，反应1小时。LCMS显示反应完毕。将反应液冷却至室温，过滤，加水(40mL)，加EA(100mL)萃取产品，水洗有机相(40mL×2)，刮大板(PE:EA＝1:3)，冻干得46 mg黄色固体15，收率：48％。

MS-ESI:m/z 576.3[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.36–7.28(m,1H),7.04(d,J＝3.5Hz,1H),6.84(d,J＝8.3Hz,2H),6.66(d,J＝3.5Hz,1H),6.45(d,J＝8.4Hz,2H),6.19(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.00(s,1H),5.73(s,1H),5.07(t,J＝5.9Hz,1H),4.93–4.85(m,3H),4.82–4.76(m,1H),4.48(dd,J＝19.5,6.3Hz,1H),4.34–4.26(m,1H),4.15(dd,J＝19.5,5.6Hz,1H),3.88(s,2H),2.60–2.52(m,1H),2.38–2.30(m,1H),2.17–1.96(m,2H),1.78–1.57(m,5H),1.39(s,3H),1.06–0.93(m,1H),0.91–0.86(m,1H),0.84(s,3H).

化合物16

步骤1将化合物16A(7.6g，35.2mmol)、16B(5.5g，35.2mmol)加入500mL单口瓶中，溶于THF(60mL)中，加入K ₂CO ₃(14.6g，105.6mmol)，H ₂O(10mL)。氮气保护下，加入Pd(dppf)Cl ₂(5.2g，7.04mmol)并在80℃下反应回流2小时后，送LCMS:监测原料基本反应完。将反应液过滤，母液用EA(100mL)，H ₂O(70mL)萃取分液，有机相干燥旋干，过柱(PE:EA＝3:1)，产物得1.2g黄色固体16C，收率：14％。MS-ESI:m/z 248.1[M+H] ⁺。

步骤2将化合物16C(1.12g，4.53mmol)、16D(1.79g，4.53mmol)溶于MeCN(10mL)中，加入MgSO ₄(1.64g，13.6mmol)，氮气保护在0℃下加入TfOH(1.36g，9.07mmol)。反应3小时后，LCMS监测产物生成。将反应液过滤后，直接旋干拌样，纯化(DCM:MeOH＝13:1)纯化得到750mg橙红色固体16E，收率：26％。MS-ESI:m/z 624.3[M+H] ⁺。

步骤3将化合物16E(700mg，1.124mmol)、Fe(629mg，11.24mmol)溶于EtOH(9mL)中，加入NH ₄Cl(596mg，11.24mmol)的H ₂O(3mL)溶液，氮气保护在60℃下反应 2小时后，送LCMS:监测原料基本反应完。将反应液过滤，用水(10mL)，EA(15mL)萃取分液，有机相旋干，得到600mg黄色固体16，收率：90％。

MS-ESI:m/z 594.3[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.29(d,J＝10.1Hz,1H),7.18(t,J＝7.8Hz,1H),7.08(d,J＝3.5Hz,1H),6.89(d,J＝7.6Hz,1H),6.86–6.80(m,2H),6.75(d,J＝3.5Hz,1H),6.24(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.05(s,1H),5.74(s,1H),5.43(s,1H),4.92–4.85(m,1H),4.49(d,J＝19.4Hz,1H),4.22–4.13(m,2H),4.06(s,2H),2.71–2.52(m,2H),2.49–2.40(m,1H),2.40–2.31(m,1H),2.20–2.07(m,1H),2.05–1.95(m,1H),1.88–1.79(m,1H),1.71–1.57(m,3H),1.50(s,3H),1.44–1.29(m,1H),0.85(s,3H).

化合物17

步骤1将化合物17A(654mg，2.29mmol)，化合物17B(500mg，2.08mmol)，Pd(PPh ₃) ₄(120mg，104μmol)溶于DME(13.3mL)，氮气置换三次，搅拌15分钟。将碳酸钠(1.52g，14.3mmol)溶于水(4.80mL)，加入到反应液，氮气置换三次，升温至90℃，搅拌16小时。LCMS显示原料完全转化。冷却至室温，将混合物倒入水中(15.0mL)，用乙酸乙酯(15.0mL，10.0mL)萃取，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液(10.0mL)洗，用无水硫酸钠干燥。过滤浓缩后得到粗品，通过反相制备纯化【水(NH ₃H ₂O+NH ₄HCO ₃)-乙腈】，得到300mg黄色固体化合物17C，收率：45.4％。MS-ESI:m/z 262.1[M+H-C ₄H ₈] ⁺。

步骤2将化合物17C(100mg，315μmol)和化合物17D(124mg，315μmol)溶于乙腈(0.600mL)，在0℃下滴加高氯酸(361mg，2.52mmol，217μL，纯度：70.0％)，逐渐升温至25℃，搅拌12小时。LCMS显示原料剩余26％，50％的产物被监测到。将反应液用饱和碳酸氢钠水溶液(6.00mL)淬灭，用乙酸乙酯(6.00mL，3.00mL，3.00mL)萃取，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液(5.00mL)洗，用无水硫酸钠干燥。过滤浓缩后得到粗品，通过反相制备纯化【水(NH ₄HCO ₃)-乙腈】，得到9.96mg白色固体化合物17，收率：5.30％。MS-ESI:m/z594.1[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.29(d,J＝10.1Hz,1H),7.03(d,J＝3.5Hz,1H),6.84(d,J ＝8.3Hz,2H),6.66(d,J＝3.5Hz,1H),6.49–6.41(m,2H),6.25(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.08(s,1H),5.73(s,1H),5.46–5.40(m,1H),5.11(t,J＝5.9Hz,1H),4.91(s,2H),4.89–4.85(m,1H),4.49(dd,J＝19.5,6.4Hz,1H),4.22–4.12(m,2H),3.88(s,2H),3.32(s,1H),2.66–2.59(m,1H),2.41–2.34(m,1H),2.21–2.09(m,1H),2.04–1.96(m,1H),1.87–1.78(m,1H),1.68–1.57(m,3H),1.49(s,3H),1.43–1.31(m,1H),0.84(s,3H).

化合物18

步骤1将化合物18A(1.01g，3.53mmol)，化合物18B(0.50g，3.21mmol)溶于THF(15.0mL)，将碳酸钠(1.36g，12.8mmol)溶于水(1.50mL)，加入到反应液中，氮气置换三次，室温搅拌15分钟。将Pd(PPh ₃) ₄(59.1mg，160μmol)加入到反应液中，氮气置换三次，升温至90℃，搅拌16小时。LCMS显示原料完全转化。冷却至室温，将混合物倒入水(15.0mL)中，用乙酸乙酯(15.0mL，10.0mL)萃取，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液(10.0mL)洗，用无水硫酸钠干燥。过滤浓缩后得到粗品，通过反相制备纯化【水(NH ₄HCO ₃)-乙腈】，得到450mg白色固体18C，收率：44.2％。MS-ESI:m/z 262.1[M+H-C ₄H ₈] ⁺。

步骤2平行架设了两个反应。将化合物18C(0.20g，630μmol)和化合物18D(237mg，630μmol)溶于乙腈(2.00mL)，加入无水硫酸镁(379mg，3.15mmol)，冷却至-10℃，滴加TfOH(540mg，2.52mmol，317μL)，缓慢升温至20℃，搅拌12小时。LCMS显示有82％的产物生成。将两个反应液合并，用饱和碳酸氢钠水溶液(8.00mL)淬灭，用乙酸乙酯(10.0mL，8.00mL，6.00mL)萃取，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液(6.00mL)洗，用无水硫酸钠干燥。过滤浓缩后得到粗品，通过反相制备纯化【水(NH ₄HCO ₃)-乙腈】，得到128mg白色固体18，收率：17.7％，和26.3mg化合物18S，收率：3.63％)。

18：

MS-ESI:m/z 576.1[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.32(d,J＝10.1Hz,1H),7.18(s,1H),7.03(d,J＝1.5Hz,1H),6.90(dd,J＝8.6,7.4Hz,1H),6.40–6.31(m,3H),6.18(dd,J＝10.0,1.9Hz,1H),5.96(s,1H),5.79(s,1H),5.06(t,J＝5.9Hz,1H),4.95(s,2H),4.89(d,J＝4.8Hz,1H),4.81(d,J＝3.4Hz,1H),4.49(dd,J＝19.4,6.3Hz,1H),4.33–4.29(m,1H),4.16(dd,J＝19.5,5.6Hz,1H),3.68(s,2H),2.62–2.54(m,1H),2.37–2.31(m,1H),2.19–2.03(m,2H),1.78–1.59(m,5H),1.40(s,3H),1.06–0.94(m,1H),0.90(dd,J＝10.7,3.4Hz,1H),0.85(s,3H).

18S：

MS-ESI:m/z 576.1[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ7.30(d,J＝10.1Hz,1H),7.19(s,1H),6.96–6.85(m,2H),6.39–6.28(m,4H),6.16(d,J＝10.2Hz,1H),5.93(s,1H),5.21(d,J＝7.2Hz,1H),5.07–5.00(m,1H),4.95(s,2H),4.81–4.73(m,1H),4.43–4.32(m,1H),4.32–4.24(m,1H),4.11–3.99(m,1H),3.67(s,2H),2.35–2.31(m,1H),2.06–1.95(m,2H),1.86–1.78(m,2H),1.76–1.64(m,4H),1.38(s,3H),1.21–1.12(m,1H),1.06–0.99(m,1H),0.86(s,3H).

化合物19(参照化合物P2)

步骤1 5-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)苯氧基)吡啶甲酸甲酯的合成

将化合物(3-羟苯基)氨基甲酸叔丁酯(2.5g，12.0mmol，1eq)，化合物5-溴吡啶甲酸甲酯(2.84g，13.2mmol，1.1eq)加入到三颈瓶中，溶于50mL干燥的DMF中，加入碘化亚铜(0.25g，1.32mmol，0.1eq)和L-脯氨酸(0.35g，1.32mmol，0.1eq)，在氮气保护下加热至100℃反应过夜，TLC检测(PE：EA＝20：1)反应完全后，加入1N盐酸淬灭反应，用二氯甲烷萃取，并用1N盐酸洗涤三次，经旋蒸浓缩，过硅胶柱(PE：EA＝15：1)得到白色固体4.13g(收率91％)。

步骤2(3-(((6-(羟甲基)吡啶-3-基)氧基)苯基)氨基甲酸叔丁酯的合成

将化合物5-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)苯氧基)吡啶甲酸甲酯(1.5g,4.36mmol)溶于THF(10ml)中，氮气置换并降温至-20℃，分批缓慢加入四氢铝锂(333mg,8.72mmol)，30min 后TLC(PE/EA＝3/1)显示反应结束。反应液缓慢加入1N盐酸(30mL)中淬灭后，乙酸乙酯(20mL)萃取，有机相饱和氯化钠溶液(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，得淡黄色油状物1.2g,收率：87％。直接投下一步。

步骤3(3-(((6-甲酰基吡啶-3-基)氧基)苯基)氨基甲酸叔丁酯的合成

将(3-(((6-(羟甲基)吡啶-3-基)氧基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(1.1g，3.48mmol)加入二氯甲烷(20ml)中，降温至0℃后加入戴斯-马丁氧化剂(1,1,1-三乙酰氧基-1,1-二氢-1,2-苯并三唑-3(1H)-酮)(3.61g，8.7mmol)，反应3h后TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)显示反应结束。将反应液用二氯甲烷(30ml)稀释后加入饱和NaCO ₃溶液(50ml)洗涤，有机相经饱和NaCl洗涤，无水Na2SO4干燥，经石油醚：乙酸乙酯＝20:1过柱得淡黄色固体553mg，收率51％。

步骤4叔丁基(3-((6-((6aR，6bS，7S，8aS，8bS，11aR，12aS，12bS)-7-羟基-8b-(2-羟基乙酰基)-6a，8a-二甲基-4-氧代-2,4,6a，6b，7,8,8a，8b，11a，12,12a，12b-十二氢-1H-萘[2'，1'：4,5]茚并[1,2-d][1,3]二氧杂-10-基)吡啶-3-基氧基)苯基)氨基甲酸酯的合成

将化合物(3-(((6-甲酰基吡啶-3-基)氧基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，0.96mmol)，(8S，9S，10R，11S，13S，14S，16R，17S)-11,16,17-三羟基-17-(2-羟基乙酰基)-10,13-二甲基-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-十二氢-3H-环戊[a]菲蒽-3-酮(361mg，0.96mmol)，MgSO ₄(600mg)加入25ml的三口瓶中，加乙腈5mL溶解搅拌10min后加入TfOH(307mg，2.04mmol)，2h后TLC(PE/EA＝1/1)显示反应结束。将反应液加入EA(40ml)中，用水(50ml*2)洗两次后，饱和NaCO3溶液(50ml)洗涤，饱和NaCl洗涤，Na ₂SO ₄干燥，得淡黄色固体402mg,收率：63％。

步骤6(6aR，6bS，7S，8aS，8bS，10R，11aR，12aS，12bS)-10-(5-(3-氨基苯氧基)吡啶-2-基)-7-羟基-8b-(2-羟基乙酰基)-6a，8a-二甲基-1,2,6a，6b，7,8,8a，8b，11a，12,12a，12b-dodecahydro-4H-萘[2'，1'：4,5]茚并[1,2-d][1,3]dioxol-4-one的合成

将化合物叔丁基(3-((6-((6aR，6bS，7S，8aS，8bS，11aR，12aS，12bS)-7-羟基-8b-(2-羟基乙酰基)-6a，8a-二甲基-4-氧代-2,4,6a，6b，7,8,8a，8b，11a，12,12a，12b-十二氢-1H-萘[2'，1'：4,5]茚并[1,2-d][1,3]二氧杂-10-基)吡啶-3-基氧基)苯基)氨基甲酸酯(210mg，0.31mmol)溶于干燥的二氯甲烷10mL，逐滴加入1ml三氟乙酸，冷却至5℃，搅拌2小时。TLC监测(PE：EA＝1：1)反应结束后，反应液用DCM稀释后经旋蒸除去溶剂，粗产品经制备HPLC得到51.4mg白色固体，收率29％。LC-MS[M+H]＝573.0。

¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.31(d,J＝2.4Hz,1H),7.64(d,J＝8.4Hz,1H),7.45–7.55(m,1H),7.33(d,J＝10Hz,1H),7.53(t,J＝8.0Hz,1H),6.40-6.50(m,1H),6.20-6.30(m,3H),5.94(s,1H),5.30-5.40(m,3H),(s,2H),4.87(d,J＝3.6Hz,1H),4.30-4.40(m,2H),4.00-4.20(m,3H),2.30-2.40(m,2H),1.90-2.30(m,7H),1.60-1.70(m,1H),1.47(s,3H),1.41(s,3H),1.20-1.30(m,1H),0.90–1.00(m,3H).

化合物20(参照化合物P3)

步骤1将化合物18A(112mg，393μmol)，化合物20A(50mg，359μmol)溶于DMF(1mL)，将碳酸钾(98.8mg，714μmol)加入到反应液，氮气置换三次，搅拌15分钟。将Pd(PPh ₃) ₄(13.2mg，35.7μmol)加入到反应液，氮气置换三次，升温至90℃，搅拌16小时。LCMS显示原料完全转化。冷却至室温，将混合物倒入水中(1mL)，用乙酸乙酯(1mL×3)萃取，合并有机相，用饱和盐水溶液(1mL)洗，用无水硫酸钠干燥。过滤浓缩后得到粗品，通过反相制备纯化【水(NH ₄HCO ₃)-乙腈】，得到45mg白色固体化合物20B，收率：41.7％。MS-ESI:m/z 246.2[M+H-C ₄H ₈] ⁺。

步骤2将化合物20B(50.0mg，165μmol)，和化合物18D(62.4mg，165μmol)，溶于乙腈(0.5mL)，加入无水硫酸镁(99.8mg，830μmol)，在-10℃下滴加TfOH(99.6mg，663μmol，58.5μL)，逐渐升温至20℃，搅拌16小时。LCMS显示35％的产物被监测到。将反应液用饱和碳酸氢钠水溶液(10.0mL)淬灭，用乙酸乙酯(10.0mL，8.00mL，6.00mL)萃取，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液(5.00mL)洗，用无水硫酸钠干燥。过滤浓缩后得到粗品，通过反相制备纯化【水(TFA)-乙腈】，得到3mg白色固体化合物20，收率：3.23％和3mg化合物20S，收率：3.23％。

20：

MS-ESI:m/z 560.1[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,Methanol-d ₄)δ7.53–7.26(m,2H),7.26–7.04(m,3H),6.53–6.43(m,1H),6.28(d,J＝10.2Hz,1H),6.13(s,1H),6.02(s,1H),5.57(s,1H),5.01(d,J＝5.3Hz,1H),4.56(d,J＝19.2Hz,1H),4.38(s,1H),4.27(d,J＝19.5Hz,1H),4.00(s,2H),2.74–2.59(m,1H),2.44–2.30(m,1H),2.30–2.18(m,1H),2.18–2.06(m,1H),1.97–1.83(m,2H),1.83–1.65(m,3H),1.49(s,3H),1.10–0.89(m,5H).

20S：

MS-ESI:m/z 560.1[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,Methanol-d ₄)δ7.48–7.40(m,2H),7.35–7.28(m,1H),7.25–7.16(m,2H),6.30(d,J＝3.2Hz,1H),6.25(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.11–6.06(m,2H),5.99(s,1H),5.24(t,J＝3.4Hz,1H),4.40(q,J＝3.2Hz,1H),4.17–4.05(m,2H),3.99(s,2H),2.65(td,J＝13.7,5.6Hz,1H),2.41–2.32(m,1H),2.28–2.07(m,2H),1.95(dd,J＝13.7,3.5Hz,1H),1.84–1.75(m,2H),1.73–1.60(m,2H),1.48(s,3H),1.17(qd,J＝13.0,4.8Hz,1H),1.07(dd,J＝11.2,3.5Hz,1H),0.97(s,3H).

化合物21

步骤1将化合物11(2g，3.48mmol)，21A(1.63g，3.48mmol)和HATU(1.59g，4.18mmol)加入100mL三口瓶中，加DMF(30mL)溶解后，将2，6-二甲基吡啶(1.12g，10.44mmol)缓慢加入，LCMS跟踪原料反应完。反应液缓慢地滴加到300mL水中，过滤得到产品，产品用油泵抽真空干燥得到3.5g白色固体21B，收率：98％。MS-ESI:m/z 1024.4[M+H] ⁺。

步骤2将化合物19B(1.0g，1.0mmol，1.0eq)，Pd(PPh ₃) ₄(392mg，0.339mmol，0.35eq)，加入50mL三口瓶中，加入DCM(30mL)溶解，氮气保护，缓慢加入NMMP (868mg，8.6mmol，8.8eq)，反应半小时，LCMS显示反应完。加入硅胶拌样，浓缩后柱层析纯化(DCM in MeOH from 0％to 15％)得到0.88g黄色固体21C。收率：92％。MS-ESI:m/z 984.4[M+H] ⁺。

步骤3将化合物21C(700mg，0.71mmol)溶解于DMF(10mL)和DEA(2mL)，室温反应15分钟，LCMS显示反应完。过反相柱(ACN in water from 20％to 50％)得到300mg黄色固体21D，收率：55％。MS-ESI:m/z 762.3[M+H] ⁺。

步骤4将化合物21D(100mg，0.13mmol)溶于THF(5mL)和水(0.5mL)中，常温下加入2，6-二甲基吡啶(139mg，1.3mmol)，将溴乙酰溴(130mg，0.65mmol)溶于1mL THF，然后缓慢加入反应液中，常温反应15分钟，LCMS显示反应完。prep-HPLC(ACN in 0.1％TFA)得19.4mg白色固体21，收率：17％。

MS-ESI:m/z 882.2[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ12.14(brs,1H),9.92(s,1H),8.52(t,J＝5.6Hz,1H),8.25(d,J＝7.8Hz,1H),7.51–7.42(m,2H),7.31(d,J＝10.1Hz,1H),7.23–7.14(m,1H),7.08(d,J＝3.5Hz,1H),6.96–6.89(m,1H),6.73(d,J＝3.5Hz,1H),6.18(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),5.97(s,1H),5.73(s,1H),4.88(d,J＝4.8Hz,1H),4.79(s,1H),4.49(d,J＝19.5Hz,1H),4.44–4.35(m,1H),4.29(s,1H),4.15(d,J＝19.5Hz,1H),4.07(s,2H),3.94(s,2H),3.86–3.75(m,2H),2.59–2.52(m,1H),2.38–2.17(m,3H),2.17–1.91(m,3H),1.89–1.78(m,1H),1.78–1.54(m,5H),1.39(s,3H),1.01–0.91(m,1H),0.88(dd,J＝11.2,3.5Hz,1H),0.84(s,3H).

化合物22

步骤1将化合物15(350mg，0.6mmol)，化合物22A(289mg，0.6mmol)加入25mL三口瓶中，加入DMF(8mL)，冰水浴，氮气保护，加入2，6-二甲基吡啶(196mg，1.8mmol)，搅拌10分钟，滴加HATU(301mg，0.79mmol)1mL DMF溶液，加完升至室温搅拌1小时，LCMS显示反应完毕。将反应液缓慢滴加到100mL水中，大量固体析出，搅拌30分钟，过滤，固体冻干得525mg白色固体22B，收率：83％。MS-ESI:m/z 1040.4[M+H] ⁺。

步骤2将化合物22B(200mg，0.192mmol)，DCM(4mL)，加入25mL单口瓶，氮气保护，搅拌溶清后，滴加DEA(0.57mL)，加完升至室温反应4小时，LCMS显示反应完毕。将反应液浓缩干，反相制备得70mg白色固体22C，收率：44％。MS-ESI:m/z 818.4[M+H] ⁺。

步骤3将化合物22C(70mg，0.086mmol)溶于THF(5mL)和0.5mL水中，在冰水浴下，加入2，6-二甲基吡啶(46mg，0.43mmol)，搅拌5分钟，加入溴乙酰溴(86mg，0.43mmol)，加完冰水浴反应10分钟，LCMS显示反应完毕。将反应液加入水中，用TFA调pH至1-2，EA(20mL)萃取产品，水洗有机相(10mL×2)，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩至小体积直接进入下一步，粗品不计收率。MS-ESI:m/z 938.3[M+H] ⁺。

步骤4氮气保护下，将上一步的有机相(3mL)，在室温下加入TFA(1.5mL)，室温搅拌4小时，LCMS显示反应完毕。将反应液直接反相制备，冻干得6.5mg白色固体22，两步收率：9％。

MS-ESI:m/z 882.2[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ12.14(brs,1H),9.91(s,1H),8.52(t,J＝5.6Hz,1H),8.27(d,J＝7.9Hz,1H),7.52(d,J＝8.6Hz,2H),7.32(d,J＝10.1Hz,1H),7.15(d,J＝8.6Hz,2H),7.07(s,1H),6.70(d,J＝3.5Hz,1H),6.19(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),5.99(s,1H),5.72(s,1H),4.88(d,J＝4.7Hz,1H),4.80(s,1H),4.49(d,J＝19.5Hz,1H),4.45–4.37(m,1H),4.30(s,1H),4.20–4.11(m,1H),4.11–3.98(m,2H),3.94(s,2H),3.81(dd,J＝5.7,1.6Hz,2H),2.60–2.53(m,1H),2.38 –2.24(m,3H),2.17–1.93(m,3H),1.89–1.77(m,1H),1.77–1.70(m,2H),1.70–1.57(m,3H),1.39(s,3H),1.05–0.92(m,1H),0.91(dd,J＝11.1,3.4Hz,1H),0.84(s,3H).

化合物23

步骤1将化合物16(540mg，0.91mmol)，化合物23A(353mg，0.76mmol)，2，6-二甲基吡啶(121mg，1.14mmol)，加入三口瓶(25mL)中，加入DMF(4mL)溶解，加入HATU(316mg，0.833mmol)，搅拌反应17小时。LCMS显示反应结束。将反应液缓慢加入水(80mL)中，有大量黄色固体析出，过滤，滤饼用水(80mL)冲洗后冻干，得700mg黄色固体23B，收率：88％。MS-ESI:m/z 1042.4[M+H] ⁺。

步骤2将化合物23B(700mg，0.67mmol)，N-甲基吗啡啉(679mg，6.7mmol)，Pd(PPh ₃) ₄(310mg，0.27mmol)加入25mL的三口瓶中，加THF(5mL)溶解，氮气置换并降温至0℃反应2小时。LCMS显示反应结束。将反应液直接拌样过正相柱(DCM/MeOH＝80/20)，得450mg黄色粉末23C，收率：66％。MS-ESI:m/z 1002.3[M+H] ⁺。

步骤3将化合物23C(450mg)溶于DCM(3mL)中，加入二乙胺(1.5mL)，室温搅拌2小时。LCMS显示反应结束。将反应液滴入PE(60mL)后，有大量黄色固体析出，静置5分钟后将反应液过滤，得200mg黄色粉末，通过反相制备纯化，得15mg白色固体23D，收率：4％。MS-ESI:m/z 780.3[M+H] ⁺。

步骤4将化合物23D(15mg，0.019mmol)溶于THF(0.8mL)和H ₂O(0.2mL)中，用冰水浴降温至5℃后，加入2，6-二甲基吡啶(20.5mg，0.19mmol)，加入溴乙酰溴(15.8mg，0.07mmol)，搅拌5分钟。LCMS显示反应结束。将反应液送反相制备纯化，得6mg白色粉末23，收率34％。MS-ESI:m/z 900.2[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ9.93(s,1H),8.55–8.48(m,1H),8.24(d,J＝7.8Hz,1H),7.49(d,J＝8.2Hz,1H),7.44(s,1H),7.29(d,J＝10.1Hz,1H),7.23–7.17(m,1H),7.09–7.06(m,1H),6.97–6.90(m,1H),6.72(d,J＝3.5Hz,1H),6.24(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.06(s,1H),5.74(s,1H),5.44–5.39(m,1H),4.91–4.87(m,1H),4.50(d,J＝19.4Hz,1H),4.42–4.36(m,1H),4.17(d,J＝19.5Hz,3H),4.07(s,2H),3.94(s,2H),3.83–3.78(m,2H),2.40–2.09(m,2H),2.05–1.75(m,3H),1.69–1.57(m,3H),1.49(s,3H),1.45–1.28(m,1H),0.84(s,3H).

化合物24

步骤1将化合物24A(4.53g，9.38mmol)溶于吡啶(36.0mL)和DMF(36.0mL)中，加入EDCI(3.60g，18.8mmol)，将化合物15(4.53g，9.38mmol)在0℃下加入到反应液，恢复至室温搅拌1小时。LCMS显示原料完全转化。将混合物倒入水中(118mL)，用乙酸乙酯(118mL)稀释，用乙酸乙酯(100mL，50.0mL)萃取，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液(30.0mL)洗，用无水硫酸钠干燥。过滤浓缩后得到6.50g黄色固体24B的粗品，粗品不计收率。MS-ESI:m/z 1040.4[M+H] ⁺。

步骤2将化合物24B(6.30g，6.06mmol)，四氮唑(4.24g，60.6mmol，5.37mL)，化合物24C(9.06g，36.3mmol)溶于DMF(44.0mL)中，于20℃下搅拌2.5小时后将内温降至0℃，将H ₂O ₂(3.78g，33.3mmol，3.20mL，30％purity)在0℃下加入到反应液，恢复至室温搅拌1小时。LCMS显示原料完全转化。将混合物倒入饱和亚硫酸钠水溶液中(44.0mL)，用水(88.0mL)稀释，用乙酸乙酯(100mL，50.0mL，30.0mL)萃取，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液(20.0mL)洗，用无水硫酸钠干燥。过滤浓缩后得到7.46g黄色固体24D的粗品，粗品不计收率。MS-ESI:m/z 1232.5[M+H] ⁺。

步骤3将化合物24D(7.16g，5.81mmol)，哌啶(4.20g，49.4mmol，4.88mL)，溶于乙腈(40.0mL)中，于20℃下搅拌1小时。LCMS显示原料完全转化。将反应液减压浓缩除去乙腈，浓缩后残渣用石油醚打浆2小时，过滤后滤饼真空干燥后得到6.37g黄色固体24E，收率：77.7％。LCMS(LCMS_ET54964-22-p1b1)确认。MS-ESI:m/z 1010.5[M+H] ⁺。

步骤4将溴乙酸(1.61g，11.6mmol，837μL)，EEDQ(2.87g，11.6mmol)溶于DMF(41.0mL)，于20℃下搅拌1小时，将化合物24E(5.87g，5.81mmol)在20℃下加入到反应液，在20℃下反应2.5小时。LCMS显示原料完全转化。将反应液用二氯甲烷(220mL)稀释，用1N氢溴酸水溶液(160mL×2)洗两遍，用饱和碳酸氢钠水溶液(110mL)洗一遍，用饱和氯化钠水溶液(50.0mL)洗一遍，用无水硫酸钠干燥。过滤浓缩后得到6.57g黄色油状液体24F的粗品，粗品不计收率。MS-ESI:m/z 1130.3[M+H] ⁺。

步骤5将化合物24F(6.57g，5.81mmol)溶于二氯甲烷(50.0mL)中，将TFA(25.0mL)在20℃下加入反应中，搅拌1小时。LCMS显示原料完全转化。将反应液减压浓缩后得到粗品，通过反相制备纯化【水(NH ₄HCO ₃)-乙腈】，得到355mg黄色固体24，收率：6.36％。MS-ESI:m/z 961.9[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ11.65(brs,1H),9.93(s,1H),8.54(t,J＝5.6Hz,1H),8.32–8.24(m,1H),7.52(d,J＝8.5Hz,2H),7.32(d,J＝10.1Hz,1H),7.15(d,J＝8.6Hz,2H),7.06(d,J＝3.6Hz,1H),6.70(d,J＝3.5Hz,1H),6.19(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),5.99(s,1H),5.81(s,1H),4.94–4.84(m,2H),4.56(dd,J＝18.2,7.9Hz,1H),4.47–4.37(m,1H),4.34–4.28(m,1H),4.09–3.97(m,2H),3.94(s,2H),3.87–3.75(m,2H),2.59–2.52(m,1H),2.39–2.18(m,3H),2.18–2.06(m,1H),2.06–1.92(m,2H),1.90–1.79(m,1H),1.75(s,2H),1.71–1.54(m,3H),1.39(s,3H),0.99–0.88(m,2H),0.86(s,3H).

化合物25

步骤1将化合物24A(6.29g，13.0mmol)溶于吡啶(50.0mL)和DMF(50.0mL)中，将EDCI(4.99g，26.0mmol)加入到反应液，将化合物16(5.00g，8.68mmol)在0℃下加入到反应液，恢复至10-20℃搅拌12小时。LCMS显示原料完全转化。将反应液倒入水(150mL)中，用乙酸乙酯(150mL，100mL，50.0mL)萃取。并有机相，用饱和氯化钠水溶液(30.0mL)洗，用无水硫酸钠干燥。过滤浓缩后得到9.03g黄色固体25A的粗品，粗品不计收率。MS-ESI:m/z 1058.4[M+H] ⁺。

步骤2将化合物25A(9.03g，8.68mmol)，四氮唑(4.40g，62.8mmol)，化合物24C(13.0g，52.1mmol)溶于DMF(66.0mL)，于20℃下搅拌2.5小时后将内温降至0℃，将H ₂O ₂(3.93g，34.7mmol，3.33mL，30％purity)在0℃下加入到反应液，恢复至10-20℃搅拌1小时。LCMS显示原料完全转化。将混合物倒入饱和亚硫酸钠水溶液中(66.0mL)，用水(132mL)稀释，用乙酸乙酯(200mL，100mL)萃取。合并有机相，用饱和氯化钠水溶液(50.0mL)洗，用无水硫酸钠干燥。过滤浓缩后得到10.7g黄色固体25B的粗品，粗品不计收率。MS-ESI:m/z 1250.5[M+H] ⁺。

步骤3将化合物25B(10.7g，8.68mmol)，哌啶(6.28g，73.8mmol，7.29mL)，溶于乙腈(60.0mL)中，于20℃下搅拌1小时。LCMS显示原料完全转化。将反应液减压浓缩除去乙腈，浓缩后残渣用石油醚(100mL)打浆2小时，过滤后滤饼真空干燥后得到8.77g黄色固体25C，收率：83.8％。MS-ESI:m/z 1028.4[M+H] ⁺。

步骤4将溴乙酸(2.48g，17.8mmol)，EEDQ(4.41g，17.8mmol)溶于DMF(63.0mL)中，于20℃下搅拌1小时。将化合物25C(9.00g，8.91mmol)在20℃下加入到反应液，在20℃下反应2.5小时。LCMS显示原料完全转化。将反应液用二氯甲烷(220mL)稀释，用1N氢溴酸(160mL×2)洗两遍，用饱和碳酸氢钠水溶液(110mL)洗一遍，用饱和氯化钠水溶液(50.0mL)洗一遍，用无水硫酸钠干燥。将有机相浓缩干后得到10.1g黄色油状液体25D的粗品，粗品不计收率。MS-ESI:m/z 1148.4[M+H] ⁺。

步骤5将化合物25D(10.1g，8.91mmol)溶于二氯甲烷(80.0mL)中，将TFA(40.0mL)在20℃下加入反应中，搅拌1小时。LCMS显示54.7％的产物被检测到。将反应液减压浓缩后得到粗品，通过反相制备纯化【水(TFA)-乙腈】，得到500mg黄色固体25，收率：8.58％，纯度：93.4％。

MS-ESI:m/z 980.0[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d ₆)δ11.66(s,2H),9.93(s,1H),8.51(t,J＝5.7Hz,1H),8.24(d,J＝7.8Hz,1H),7.50(d,J＝8.3Hz,1H),7.46–7.40(m,1H),7.30(d,J＝10.2Hz,1H),7.20(t,J＝7.8Hz,1H),7.07(d,J＝3.5Hz,1H),6.93(d,J＝7.6Hz,1H),6.73(d,J＝3.5Hz,1H),6.25(dd,J＝10.1,1.9Hz,1H),6.06(s,1H),5.83(s,1H),5.51(d,J＝4.5Hz,1H),4.96–4.84(m,2H),4.57(dd,J＝18.2,8.1Hz,1H),4.44–4.35(m,1H),4.23–4.16(m,1H),4.07(s,2H),3.94(s,2H),3.88–3.73(m,2H),2.70–2.54(m,2H),2.40–2.32(m,1H),2.32–2.22(m,2H),2.22–2.09(m,1H),2.06–1.91(m,2H),1.90–1.76(m,3H),1.71–1.57(m,3H),1.49(s,4H),1.44–1.29(m,1H),0.87(s,3H).

化合物26

步骤1将化合物(3-羟苯基)氨基甲酸叔丁酯26B(3g，14.3mmol，1eq)，化合物3-溴苯甲醛26A(2.9g，15.7mmol，1.1eq)加入到三颈瓶中，溶于50mL干燥的DMF中，加入碘化亚铜(0.27g，1.43mmol，0.1eq)和L-脯氨酸(0.38g，1.43mmol，0.1eq)，在氮气保护下加热至100℃反应过夜，TLC检测(PE：EA＝20：1)反应完全后，加入1N盐酸淬灭反应，用二氯甲烷萃取，并用1N盐酸洗涤三次，经旋蒸浓缩，过硅胶柱(PE：EA＝15：1)得到3.5g白色固体26C，收率78.4％。

步骤2将化合物26C(282mg，0.9mmol)，26D(340mg，0.9mmol)，MgSO ₄(600mg)加入25ml的三口瓶中，加乙腈5mL溶解搅拌10min后加入TfOH(407mg，2.7mmol)，2h后TLC(PE/EA＝1/1)显示反应结束。将反应液加入EA(40ml)中，用水(50ml*2)洗两次后，饱和NaCO3溶液(50ml)洗涤，饱和NaCl洗涤，Na2SO4干燥，得447mg淡黄色固体26E,收率：72％。

步骤3将化合物26E(344mg，0.5mmol)溶于干燥的二氯甲烷10mL，逐滴加入1ml三氟乙酸，冷却至5℃，搅拌2小时。TLC监测(PE：EA＝1：1)反应结束后，反应液用DCM稀释后经旋蒸除去溶剂，粗产品经制备HPLC得到212mg白色固体26，收率36％。LC-MS 572.3[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO)δ7.46–7.31(m,2H),7.21(d,J＝7.6Hz,1H),7.13–6.97(m,3H),6.48(d,J＝7.7Hz,1H),6.43–6.31(m,2H),6.23(dd,J＝10.1,1.7Hz,1H),6.03(s,1H),5.45(s,1H),4.93(d,J＝4.8Hz,1H),4.52(d,J＝19.5Hz,2H),4.31–4.16(m,4H),2.40-2.30(m,1H),2.15-1.95(m,2H),1.85–1.48(m,5H),1.41(s,3H),0.98–0.73(m,5H)..

化合物27

步骤1将27A(100mg，0.41mmol)、26D(155mg，0.41mmol)和硫酸镁(99mg，0.82mmol)投料于无水乙腈(3ml)中，降温至0℃，缓慢滴加三氟甲磺酸(185mg，1.23mmol)，滴毕，保持0℃搅拌3小时。TLC(PE/EA＝1/2)显示原料反应完全。将反应液过滤除去硫酸镁，滤液加入水(10mL)和DCM(20mL)，分液，有机相用饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤浓缩后得到110mg淡黄色蜡状固体27B，收率：44％。MS-ESI:m/z 602.3[M+H] ⁺。

步骤2将27B(100mg，0.17mmol)和铁粉(93mg，1.66mmol)投料于乙醇(3mL) 中，氯化铵(89mg，1.66mmol)溶于水(1mL)中后，滴加至体系中，氮气保护，升温至60℃，搅拌3小时。LCMS显示原料反应完全。将反应液通过硅藻土过滤，减压旋干，送制备纯化，得到20mg白色粉末27，10mg化合物27S，收率分别为21％和11％。

化合物27：

MS-ESI:m/z 572.3[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO)δ7.51(t,J＝8.0Hz,1H),7.33(d,J＝10.4Hz,1H),7.20-7.30(m,1H),7.00-7.15(m,6H),6.19(dd,J＝10,2.0Hz,1H),5.99(s,1H),5.48(s,1H),4.90-5.00(m,1H),4.80-4.90(m,1H),4.53(d,J＝19.2Hz,1H),4.31(s,1H),4.25(d,J＝19.2Hz,1H),2.30-2.40(m,1H),1.90-2.20(m,2H),1.60-1.80(m,5H),1.43(s,3H),0.85–1.05(m,5H).

化合物27S：

MS-ESI:m/z 572.3[M+H] ⁺。

¹H NMR(400MHz,DMSO)δ7.40(t,J＝7.9Hz,1H),7.33(d,J＝10.1Hz,1H),7.13(d,J＝7.3Hz,2H),7.03(dd,J＝19.8,8.0Hz,4H),6.87(s,1H),6.19(dd,J＝10.1,1.8Hz,1H),6.12(s,1H),5.96(s,1H),5.28(d,J＝6.6Hz,1H),4.90-4.75(m,1H),4.27-4.35(m,1H),4.21(d,J＝19.2Hz,1H),4.03(d,J＝19.2Hz,1H),2.62-2.55(m,1H),2.38-2.27(m,1H),2.15-1.95(m,2H),1.91–1.66(m,5H),1.41(s,3H),1.28-1.10(m,1H),1.10-1.00(m,1H),0.89(s,3H).

化合物28和28S(参照化合物P4和P4S)

参考专利WO2021216913A1合成得到。

ADC制备方案及实施例

ADC制备方案1

配体Ab和本申请任一式(I-D)、式(I-a1-D)、式(I-a2-D)、式(I-a3-D)、式(I-a4-D)、式(II-D)、式(II-a1-D)、式(II-a2-D)、式(II-a3-D)、式(II-a4-D)、式(II-b1-D)、式(II-b2-D)、式(II-b3-D)、或式(II-b4-D)所示的化合物在酸性、中性或碱性的缓冲液中反应可以得到式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物；

其中：Ab为含有至少1个自由巯基(-SH)的配体，其中自由巯基可由该配体经还原剂还原得到；还原剂包括但不限于三(2-羧乙基)膦，巯基乙醇，二硫苏糖醇，半胱氨酸，还原型谷胱甘肽等；特别地，可以还原配体链间的二硫键(-S-S-)以形成自由巯基；其中式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中的S原子与可以来源于Ab的巯基；

Y、yn、R ₁、R ₂、R ₃、B、W、Tr、L ₁、L ₂、L ₃可以分别如本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中Y、yn、R ₁、R ₂、R ₃、B、W、Tr、L ₁、L ₂、L ₃所定义；Ab、N ^a-I可以分别如本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中Ab、N ^a-I所定义；L ₁可以代表与巯基偶联的L _1x偶联后的结构。

L _1x可以包含选自以下组的基团：

缓冲液选自pH 2到12的下列缓冲液，柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，磷酸-磷酸钠缓冲液，磷酸-磷酸钾缓冲液，磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液，磷酸二氢钾-磷酸氢二钾缓冲液，琥珀酸-琥珀酸钠缓冲液，醋酸-醋酸钠缓冲液，硼酸-硼砂缓冲液，硼酸-硼酸钾缓冲液，硼砂-氢氧化钠缓冲液，组氨酸-盐酸缓冲液，甘氨酸-氢氧化钠缓冲液，精氨酸-盐酸缓冲液，碳酸氢钠-碳酸钠缓冲液，碳酸氢钾-碳酸钾缓冲液，Tris-盐酸缓冲液，氨水-氯化铵缓冲液，巴比妥钠-盐酸缓冲液，硼砂-碳酸钠缓冲液，硼酸-氯化钾缓冲液，或上述两种及两种以上缓冲液的组合。

ADC制备方案2

第一步，配体Ab和本申请式(I-D)、式(I-a1-D)、式(I-a2-D)、式(I-a3-D)、式(I-a4-D)、式(II-D)、式(II-a1-D)、式(II-a2-D)、式(II-a3-D)、式(II-a4-D)、式(II-b1-D)、式(II-b2-D)、式(II-b3-D)、或式(II-b4-D)所示的化合物在酸性、中性或碱性的缓冲液中反应可以得到式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物；

其中：Ab为含有至少1个自由巯基(-SH)的配体，其中自由巯基可由该配体经还原剂还原得到；还原剂包括但不限于三(2-羧乙基)膦，巯基乙醇，二硫苏糖醇，半胱氨酸，还原型谷胱甘肽等；特别地，可以还原配体链间的二硫键(-S-S-)以形成自由巯基；其中式式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中的S原子与可以来源于Ab的巯基；

第二步，本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物在碱性的缓冲液中，与选定的温度下，孵育一定的时间，得到另一种本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物；

Y、yn、R ₁、R ₂、R ₃、B、W、Tr、L ₂、L ₃可以分别如本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中Y、yn、R ₁、R ₂、R ₃、B、W、Tr、L ₂、L ₃所定义；Ab、N ^a-I可以分别如本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中Ab、N ^a-I所定义。

缓冲液选自pH 2到12的下列缓冲液，柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，磷酸-磷酸钠缓冲液，磷酸-磷酸钾缓冲液，磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液，磷酸二氢钾-磷酸氢二钾缓冲液，琥珀酸-琥珀酸钠缓冲液，醋酸-醋酸钠缓冲液，硼酸-硼砂缓冲液，硼酸-硼酸钾缓冲液，硼砂-氢氧化钠缓冲液，组氨酸-盐酸缓冲液，甘氨酸-氢氧化钠缓冲液，精氨酸-盐酸缓冲液，碳酸氢钠-碳酸钠缓冲液，碳酸氢钾-碳酸钾缓冲液，Tris-盐酸缓冲液，氨水-氯化铵缓冲液，巴比妥钠-盐酸缓冲液，硼砂-碳酸钠缓冲液，硼酸-氯化钾缓冲液，或上述两种及两种以上缓冲液的组合；选定的温度可以为5～60℃；孵育的时间可以为0～72小时。

ADC制备方案3

配体Ab和本申请任一式(I-D)、式(I-a1-D)、式(I-a2-D)、式(I-a3-D)、式(I-a4-D)、式(II-D)、式(II-a1-D)、式(II-a2-D)、式(II-a3-D)、式(II-a4-D)、式(II-b1-D)、式(II-b2-D)、式(II-b3-D)、或式(II-b4-D)所示的具有能够与2个巯基偶联的基团的化合物在酸性、中性或碱性的缓冲液中反应得到式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物；

其中：Ab为含有至少2个自由巯基(-SH)的配体，其中自由巯基可由该配体经还原剂还原得到；还原剂包括但不限于三(2-羧乙基)膦，巯基乙醇，二硫苏糖醇，半胱氨酸，还原型谷胱甘肽等；特别地，可以还原配体链间的二硫键(-S-S-)以形成自由巯基；其中式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中的S原子与可以来源于Ab的巯基；

Y、yn、R ₁、R ₂、R ₃、B、W、Tr、L ₁、L ₂、L ₃可以分别如本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中Y、yn、R ₁、R ₂、R ₃、B、W、Tr、L ₁、L ₂、L ₃所定义；Ab、N ^a-I可以分别如本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中Ab、N ^a-I所定义；L ₁代表与2个巯基偶联的L _1x偶联后的结构。

式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的具有能够与2个巯基偶联的基团的化合物可以包含选自以下组的L ₁基团：其中每一个R ^L1a，R ^L1b和R ^L1c 各自独立地选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、-OH、-SH、-NH ₂、-C(O)H、-CO ₂H、-C(O)C(O)H、-C(O)CH ₂C(O)H、-S(O)H、-S(O) ₂H、-C(O)NH ₂、-SO ₂NH ₂、-OC(O)H、-N(H)SO ₂H、烷基、烯基、炔基、脂环基、杂环基、芳基和杂芳基。

ADC制备方案4

Y、yn、R ₁、R ₂、R ₃、B、W、R _y1、R _y2、Tr、L ₁、L ₂、L ₃可以分别如本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中Y、yn、R ₁、R ₂、R ₃、B、W、R _y1、R _y2、Tr、L ₁、L ₂、L ₃所定义；Ab、N ^a-I可以分别如本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中Ab、N ^a-I所定义；L ₁可以代表与巯基偶联的L _1x偶联后的结构。

L _1x可以包含选自以下组的基团：

ADC制备方案5

Y、yn、R ₁、R ₂、R ₃、B、W、R _y1、R _y2、Tr、L ₂、L ₃可以分别如本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中Y、yn、R ₁、R ₂、R ₃、B、W、R _y1、R _y2、Tr、L ₂、L ₃所定义；Ab、N ^a-I可以分别如本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中Ab、N ^a-I所定义。

ADC制备方案6

Y、yn、R ₁、R ₂、R ₃、B、W、R _y1、R _y2、Tr、L ₁、L ₂、L ₃可以分别如本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2- C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中Y、yn、R ₁、R ₂、R ₃、B、W、R _y1、R _y2、Tr、L ₁、L ₂、L ₃所定义；Ab、N ^a-I可以分别如本申请任一式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的化合物中Ab、N ^a-I所定义；L ₁代表与2个巯基偶联的L _1x偶联后的结构。

式(I-C)、式(I-a1-C)、式(I-a2-C)、式(I-a3-C)、式(I-a4-C)、式(II-C)、式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)、式(II-a4-C)、式(II-b1-C)、式(II-b2-C)、式(II-b3-C)、或式(II-b4-C)所示的具有能够与2个巯基偶联的基团的化合物可以包含选自以下组的L ₁基团：其中每一个R ^L1a，R ^L1b和R ^L1c各自独立地选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、-OH、-SH、-NH ₂、-C(O)H、-CO ₂H、-C(O)C(O)H、-C(O)CH ₂C(O)H、-S(O)H、-S(O) ₂H、-C(O)NH ₂、-SO ₂NH ₂、-OC(O)H、-N(H)SO ₂H、烷基、烯基、炔基、脂环基、杂环基、芳基和杂芳基。

实施例2

在本申请中pH＝5.5的20mM Histidine的缓冲水溶液是将20mM组氨酸水溶液用HOAc调pH至5.5得到。储备液1：10mM EDTA缓冲液，pH＝4.7；储备液2：800mM Sodium citrate缓冲水溶液，pH＝8.4；储备液3：500mM Urea水溶液；储备液4：10mM三(2-羧乙基)膦的水溶液。

本申请中ADC的蛋白纯度是通过SEC方法检测，参数如下表示。

表1

本申请中ADC的DAR值可通过LC-MS方法检测的。实验操作如下：在40.0μg ADC样品溶液中加入75.0μL 8.0mol/L盐酸胍(Gdn-HCl)、5.0μL 1.0mol/L Tris-HCl和2.0μL 1mol/L DTT。将该溶液用超纯水稀释至100.0μL，充分混合，在22℃下孵育30分钟。然后使用LC-MS分析药物/抗体比(DAR)。LC参数如下表示。

表2

MS参数如下表示。

表3

仪器	Agilent Technologies 6224 TOF
电离模式	Positive
气体温度	350℃
气流	13L/min
喷雾器压力	45psig
毛细管电压	5000V
破碎电压	250V
锥孔电压	65V
八极杆上射频电压的	750V
采集模式	MS(seg)
质量范围	500-8000m/z
采集速率	1spectra/s
采集时间	1.4-7.0min

本申请中ADC的DAR值也可通过HIC方法检测，参数如下表示。

表4

鼠抗TNFα mIgG2a 8c11:轻链氨基酸序列如SEQ ID NO:31所示，且其重链氨基酸序列如SEQ ID NO:32所示，参考WO2015191783A2制备。

抗体Adalimumab(Humira)：轻链氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示，且其重链氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示，参考US6090382A制备。

抗体BIIB059：轻链氨基酸序列如SEQ ID NO:42所示，且其重链氨基酸序列如SEQ ID NO:37所示，参考CN105452295B制备。

抗体Iscalimab：轻链氨基酸序列如SEQ ID NO:19所示，且其重链氨基酸序列如SEQ ID NO:20所示，参考CN105949314B制备。

偶联物1(8c11-conjugate 1)

在37℃条件下，向抗体8c11的PBS缓冲水溶液(pH＝6.5的0.05M的PBS缓冲水溶液；7.5mL，9.96mg/mL，0.505nmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.162mL，1.616nmol)，置于水浴振荡器，于37℃振荡反应3小时，停止反应；将反应液用水浴降温至25℃，稀释至5.0mg/mL，并取出12.0mL溶液往下反应。

将化合物I-D-3(7.26mg，8.11nmol)溶解于0.10mL DMA中，加入到上述12.0mL溶液中，置于水浴振荡器，于25℃振荡反应3小时，停止反应。将反应液用Sephadex G25凝胶柱脱盐纯化(洗脱相：pH＝5.5的0.05M的组氨酸缓冲水溶液，含0.001M的EDTA)，得到偶联物1(2.313mg/mL，23.465mL)。

N ^a-I经Reverse Phase检测，为4.20。

偶联物2(8c11-conjugate 2)

在37℃条件下，向抗体8c11的PBS缓冲水溶液(pH＝6.5的0.05M的PBS缓冲水溶液；2.5mL，9.96mg/mL，0.168nmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.054mL，0.54nmol)，置于水浴振荡器，于37℃振荡反应3小时，停止反应；将反应液用水浴降温至25℃，稀释至5.0mg/mL，并取出2.0mL溶液往下反应。

将化合物II-D-1(1.67mg，2.02nmol)溶解于0.10mL DMA中，加入到上述2.0mL溶液中，置于水浴振荡器，于25℃振荡反应3小时，停止反应。将反应液用Sephadex G25凝胶柱脱盐纯化(洗脱相：pH＝5.5的0.05M的组氨酸缓冲水溶液，含0.001M的EDTA)，得到偶联物2(1.8mg/mL，4.1mL)。

N ^a-I经LC-MS检测，为2.58。

偶联物3(8c11-conjugate 3)

将化合物II-D-17(1.67mg，2.02nmol)溶解于0.10mL DMA中，加入到上述2.0mL溶液中，置于水浴振荡器，于25℃振荡反应3小时，停止反应。将反应液用Sephadex G25凝胶柱脱盐纯化(洗脱相：pH＝5.5的0.05M的组氨酸缓冲水溶液，含0.001M的EDTA)，得到偶联物6(1.5mg/mL，4.2mL)。

N ^a-I经LC-MS检测，为3.22。

偶联物I-C-4(Adalimumab-conjugate I-C-4)

在37℃条件下，向抗体Adalimumab的PBS缓冲水溶液(pH＝6.5的0.05M的PBS缓冲水溶液；2.5mL，9.96mg/mL，0.168nmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.054mL，0.54nmol)，置于水浴振荡器，于37℃振荡反应3小时，停止反应；将反应液用水浴降温至25℃，稀释至5.0mg/mL，并取出2.0mL溶液往下反应。

将化合物I-D-3(1.67mg，2.02nmol)溶解于0.10mL DMA中，加入到上述2.0mL溶液中，置于水浴振荡器，于25℃振荡反应3小时，停止反应。将反应液用Sephadex G25凝胶柱脱盐纯化(洗脱相：pH＝5.5的0.05M的组氨酸缓冲水溶液，含0.001M的EDTA)，得到偶联物I-C-4(1.6mg/mL，4.6mL)。

N ^a-I可以经LC-MS检测。

偶联物II-C-1(Adalimumab-conjugate II-C-1)

将化合物II-D-1(1.67mg，2.02nmol)溶解于0.10mL DMA中，加入到上述2.0mL溶液中，置于水浴振荡器，于25℃振荡反应3小时，停止反应。将反应液用Sephadex G25凝胶柱脱盐纯化(洗脱相：pH＝5.5的0.05M的组氨酸缓冲水溶液，含0.001M的EDTA)，得到偶联物II-C-1(1.7mg/mL，3.2mL)。N ^a-I可以经LC-MS检测。

偶联物II-C-17(Adalimumab-conjugate II-C-17)

将化合物II-D-17(1.67mg，2.02nmol)溶解于0.10mL DMA中，加入到上述2.0mL溶液中，置于水浴振荡器，于25℃振荡反应3小时，停止反应。将反应液用Sephadex G25凝胶柱脱盐纯化(洗脱相：pH＝5.5的0.05M的组氨酸缓冲水溶液，含0.001M的EDTA)，得到偶联物II-C-17(1.6mg/mL，3.1mL)。N ^a-I可以经LC-MS检测。

偶联物7(8c11-conjugate 7)

在22℃条件下，向抗体8c11的NaOAc缓冲水溶液(pH＝5.5的0.05M的NaOAc缓冲水溶液。1.14mL，10.93mg/mL，0.084μmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.042mL，0.420μmol)，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应2小时，停止反应。加入储备液1和储备液2，使缓冲体系含0.29mM EDTA和11.53mM Sodium citrate。

将化合物12(1.09mg，1.26μmol)溶解于0.11mL DMSO中，加入到上述溶液中，置于水浴振荡器，于4℃振荡反应1.3小时，停止反应。往反应液中加入1/3体积的100mM Histidine缓冲水溶液(pH＝5.5)，用Zeba脱盐离心柱(40K MWCO)脱盐纯化(洗脱相：pH为5.5的0.02M的组氨酸缓冲水溶液)，得到偶联物7(10mg，2.4mg/mL，收率：80％)。

N ^a-I经RP检测，为3.72。

偶联物8(8c11-conjugate 8)

将化合物13(1.09mg，1.26μmol)溶解于0.11mL DMSO中，加入到上述溶液中，置于水浴振荡器，于4℃振荡反应1.3小时，停止反应。往反应液中加入1/3体积的100mM Histidine缓冲水溶液(pH＝5.5)，用Zeba脱盐离心柱(40K MWCO)脱盐纯化(洗脱相：pH为5.5的0.02M的组氨酸缓冲水溶液)，得到偶联物8(10mg，2.51mg/mL，收率：80％)。

N ^a-I经RP检测，为1.84。

偶联物9(8c11-conjugate 9)

在22℃条件下，向抗体8c11的NaOAc缓冲水溶液(pH＝5.5的0.05M的NaOAc缓冲水溶液。18.24mL，3.4mg/mL，0.419μmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.149mL，1.49μmol)，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应3小时，停止反应。加入储备液1和储备液2，使缓冲体系含0.29mM EDTA和11.53mM Sodium citrate。

将化合物14(6.75mg，7.52μmol)溶解于0.68mL DMSO中，加入到上述溶液中，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应9小时，停止反应。往反应液中加入1/3体积的100mM Histidine缓冲水溶液(pH＝5.5)，用Zeba脱盐离心柱(40K MWCO)脱盐纯化(洗脱相：pH为5.5的0.02M的组氨酸缓冲水溶液)，得到偶联物9(62mg，2.31mg/mL，收率：100％)。

N ^a-I经RP检测，为4.2。

偶联物10(8c11-conjugate 10)

在22℃条件下，向抗体8c11的NaOAc缓冲水溶液(pH＝7.4的0.05M的NaOAc缓冲水溶液，含0.29mM EDTA和11.53mM Sodium citrate。2.94mL，3.4mg/mL，0.068μmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.031mL，0.31μmol)，化合物21(0.9mg，1.02μmol)的DMSO(0.09mL)溶液，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应3小时，停止反应。

在22℃条件下，向抗体8c11的NaOAc缓冲水溶液(pH＝7.4的0.05M的NaOAc缓冲水溶液，含0.29mM EDTA和11.53mM Sodium citrate。7.35mL，3.4mg/mL，0.169μmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.076mL，0.76μmol)，化合物21(2.2mg，2.54μmol)的DMSO(0.22mL)溶液，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应3小时，停止反应。

合并反应液，往反应液中加入1/3体积的100mM Histidine缓冲水溶液(pH＝5.5)，用Zeba脱盐离心柱(40K MWCO)脱盐纯化(洗脱相：pH为5.5的0.02M的组氨酸缓冲水溶液)，得到偶联物10(33.1mg，2.41mg/mL，收率：94％)。

N ^a-I经RP检测，为4.79。

偶联物11(8c11-conjugate 11)

在22℃条件下，向抗体8c11的NaOAc缓冲水溶液(pH＝7.4的0.05M的NaOAc缓冲水溶液，含0.29mM EDTA和11.53mM Sodium citrate。10.3mL，3.4mg/mL，0.236μmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.10mL，1.04μmol)，化合物22(3.1mg，3.540μmol)的DMSO(0.31mL)溶液，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应3小时，停止反应。

往反应液中加入1/3体积的100mM Histidine缓冲水溶液(pH＝5.5)，用Zeba脱盐离心柱(40K MWCO)脱盐纯化(洗脱相：pH为5.5的0.02M的组氨酸缓冲水溶液)，得到偶联物11(32.6mg，2.38mg/mL，收率：93％)。

N ^a-I经RP检测，为4.93。

偶联物12(8c11-conjugate 12)

在22℃条件下，向抗体8c11的NaOAc缓冲水溶液(pH＝7.4的0.05M的NaOAc缓冲水溶液，含0.29mM EDTA和11.53mM Sodium citrate。6.47mL，3.4mg/mL，0.149μmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.055mL，0.551μmol)，化合物23(2.01mg，2.235μmol)的DMSO(0.20mL)溶液，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应3小时，停止反应。

往反应液中加入1/3体积的100mM Histidine缓冲水溶液(pH＝5.5)，用Zeba脱盐离心柱(40K MWCO)脱盐纯化(洗脱相：pH为5.5的0.02M的组氨酸缓冲水溶液)，得到偶联物12(20mg，2.44mg/mL，收率：91％)。

N ^a-I经RP检测，为4.17。

偶联物13(8c11-conjugate 13)

在22℃条件下，向抗体8c11的NaOAc缓冲水溶液(pH＝5.5的0.05M的NaOAc缓冲水溶液，含0.51mM EDTA和20.35mM Sodium citrate。6.0mL，6mg/mL，0.243μmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.097mL，0.972μmol)，化合物24(3.51mg，3.645μmol)的DMSO(0.35mL)溶液，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应3小时，停止反应。

往反应液中加入1/3体积的800mM Sodium citrate缓冲水溶液(pH＝5.5)和10％体积的Sucrose水溶液(60％)，用Zeba脱盐离心柱(40K MWCO)脱盐纯化(洗脱相：pH为6.0的0.05M的Sodium citrate缓冲水溶液，含6％Sucrose)，得到偶联物13(29mg，4.69mg/mL，收率：80％)。

N ^a-I经RP检测，为4.31。

偶联物14(8c11-conjugate 14)

在22℃条件下，向抗体8c11的NaOAc缓冲水溶液(pH＝5.5的0.05M的NaOAc缓冲水溶液，含0.51mM EDTA和20.35mM Sodium citrate。6.0mL，6mg/mL，0.243μmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.10mL，1.008μmol)，化合物25(3.57mg，3.645μmol)的DMSO(0.36mL)溶液，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应5小时，停止反应。

往反应液中加入1/3体积的800mM Sodium citrate缓冲水溶液(pH＝5.5)和10％体积的Sucrose水溶液(60％)，用Zeba脱盐离心柱(40K MWCO)脱盐纯化(洗脱相：pH为6.0的0.05M的Sodium citrate缓冲水溶液，含6％Sucrose)，得到偶联物14(29mg，3.09mg/mL，收率：80％)。

N ^a-I经RP检测，为4.29。

偶联物15(8c11-conjugate 15,参照ADC1)

在22℃条件下，向抗体8c11的NaOAc缓冲水溶液(pH＝5.5的0.05M的NaOAc缓冲水溶液，含0.51mM EDTA和20.35mM Sodium citrate。11.0mL，6.0mg/mL，0.446μmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.174mL，1.74μmol)，化合物16(6.40mg，6.69μmol)的DMSO(0.64mL)溶液，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应4.5小时，停止反应。

往反应液中加入1/3体积的800mM Sodium citrate缓冲水溶液(pH＝5.5)和10％体积的Sucrose水溶液(60％)，用Zeba脱盐离心柱(40K MWCO)脱盐纯化(洗脱相：pH为6.0的0.05M的Sodium citrate缓冲水溶液，含6％Sucrose)，得到偶联物15(54mg，3.18mg/mL，收率：82％)

N ^a-I经RP检测，为4.69。

偶联物16(BIIB059-conjugate 16)

在22℃条件下，向抗体BIIB059的PB缓冲水溶液(pH＝7.4的0.05M的PBS缓冲水溶液。0.99mL，10.14mg/mL，0.068μmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.025mL，0.252μmol)，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应3小时，停止反应。加入储备液1和储备液2，使缓冲体系含19.7mM Sodium Succinate和0.39mM EDTA。

将化合物25(1.00mg，1.02μmol)溶解于0.10mL DMSO中，加入到上述溶液中，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应2小时，停止反应。往反应液中加入1/3体积的100mM Histidine缓冲水溶液(pH＝5.5)，用Zeba脱盐离心柱(40K MWCO)脱盐纯化(洗脱相：pH为5.5的0.02M的组氨酸缓冲水溶液)，得到偶联物16(9.68mg，3.12mg/mL)。收率：97％。

N ^a-I经LC-MS检测，为3.15。

偶联物17(BIIB059-conjugate 17)

将化合物23(0.92mg，1.02μmol)溶解于0.09mL DMSO中，加入到上述溶液中，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应2小时，停止反应。往反应液中加入1/3体积的100mM Histidine缓冲水溶液(pH＝5.5)，用Zeba脱盐离心柱(40K MWCO)脱盐纯化(洗脱相：pH为5.5的0.02M的组氨酸缓冲水溶液)，得到偶联物17(9.76mg，3.34mg/mL)。收率：98％。

N ^a-I经LC-MS检测，为3.13。

偶联物18(BIIB059-conjugate 18)

在22℃条件下，向抗体BIIB059的PB缓冲水溶液(pH＝7.4的0.05M的PBS缓冲水溶液。0.98mL，10.17mg/mL，0.068μmol)加入配置好的三(2-羧乙基)膦的水溶液(10mM，0.024mL，0.238μmol)，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应3小时，停止反应。加入储备液1和储备液2，使缓冲体系含19.7mM Sodium Succinate和0.39mM EDTA。

将化合物24(0.98mg，1.02μmol)溶解于0.10mL DMSO中，加入到上述溶液中，置于水浴振荡器，于22℃振荡反应2小时，停止反应。往反应液中加入1/3体积的100mM Histidine缓冲水溶液(pH＝5.5)，用Zeba脱盐离心柱(40K MWCO)脱盐纯化(洗脱相：pH为5.5的0.02M的组氨酸缓冲水溶液)，得到偶联物18(9.68mg，3.086mg/mL)。收率：97％。

N ^a-I经LC-MS检测，为4.16。

实施例3糖皮质激素受体报告基因GRE活性测定

1.细胞培养

HEK293细胞在DMEM+10％FBS培养基中，在37摄氏度，5％二氧化碳浓度潮湿的二氧化碳培养箱中培养。

2.质粒转染和细胞种板

用胰酶消化HEK293细胞，把HEK293细胞重悬液用培养基调整到每毫升200,000个细胞(96孔板：100μL/孔)。

根据下面表格5a和5b配制转染试剂混合液，混匀并室温静置20分钟。

表5a

实验转染材料	体积(μL)
pGL5质粒(100ng/uL)	25
pBIND-GR(100ng/uL)	25
Opti-MEM培养基	250.0
P3000	10.00
Opti-MEM培养基	250.0
Lipofectamine	7.5

表5b

把准备好的转染混合液分别加入到10mL调整好细胞密度的重悬液中上下颠倒混匀，以100μL/孔的体积分别种入96孔板中。

96孔板置入37摄氏度，5％二氧化碳浓度潮湿培养箱中培养24小时。

3.药物处理

准备210μM Dexamethasone(地塞米松，上海上药信谊药厂有限公司)的DMSO溶液，3.3×连续稀释，得到10个浓度。将5μL上述Dexamethasone各浓度DMSO溶液分别加入45μL DMEM+10％FBS，混匀，得到10个浓度的Dexamethasone稀释液。

准备2.1μM的本申请化合物或参照例化合物溶液(使用培养基稀释)，3.3×连续稀释，得到10个浓度的待测化合物稀释液。

每孔中(已有100μL细胞)加入5μL Dexamethasone稀释液或待测化合物稀释液。Min孔中加5μL 10％DMSO培养基，Max孔中加入5μL 21μM Dexamethasone(溶于培养基，10％DMSO)。

将检测板放回培养箱中孵育24小时。

4.荧光素酶检测

使用Promega的Dual-Glo Luciferase Assay System试剂盒检测待侧板，使用Enspire分别读取Firefly luciferase荧光信号以及Renilla Luciferase荧光信号。

5.数据处理

最终测量值是Firefly luciferase荧光信号除以Renilla Luciferase荧光信号后得到的标准化数值“F/R”。

将数据复制粘贴到Excel中，通过方程得到激活率。

将数据导入MS Excel并使用XLFit excel add-in version 5.4.0.8进行曲线拟合，得到EC ₅₀值。

公式:Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+(EC50/X)^HillSlope

Y是激动率，X是化合物浓度。

表6显示，本申请化合物表现出更强的糖皮质激素受体激动活性。

表6糖皮质激素受体报告基因GRE活性测定1

Compound ID	EC ₅₀(nM)
Dexamethasone	1.77
化合物10(参照化合物P1)	>1000.00
化合物19(参照化合物P2)	>1000.00
化合物20(参照化合物P3)	>1000.00

化合物28(参照化合物P4)	10.04
化合物28S(参照化合物P4S)	>1000.00
化合物1	0.19
化合物2	0.15
化合物7	0.13
化合物8	0.07
化合物11	0.37
化合物15	0.63
化合物16	0.30
化合物17	0.33
化合物18	0.28

实例例9 GR荧光素酶报告基因洗脱实验

实验目的

评估本申请化合物与GR结合后持续激活的能力。

实验方法

1.细胞培养

2.质粒转染和细胞种板

1)用胰酶消化HEK293细胞，把HEK293细胞重悬液用培养基调整到每毫升200,000个细胞(96孔板：100μL/孔)。

2)根据下面表格配制转染试剂混合液，混匀并室温静置20分钟。

表7

实验转染材料	体积(μL)
pGL5质粒(100ng/uL)	25
pBIND-GR(100ng/uL)	25
Opti-MEM培养基	250.0
P3000	10.00

Opti-MEM培养基	250.0
Lipofectamine	7.5

3)把准备好的转染混合液分别加入到10mL调整好细胞密度的重悬液中上下颠倒混匀，以100μL/孔的体积分别种入96孔板中。

4)96孔板置入37摄氏度，5％二氧化碳浓度潮湿培养箱中培养24小时。

3.药物处理

1)准备210μM Dexamethasone的DMSO溶液，3×连续稀释，得到10个浓度。将5μL上诉Dexamethasone各浓度DMSO溶液分别加入45μL DMEM+10％FBS，混匀，得到10个浓度的Dexamethasone稀释液。

2)准备210倍终浓度的待测化合物DMSO溶液，3×连续稀释，得到10个浓度的待测化合物稀释液。将5μL上诉各浓度DMSO溶液分别加入45μL DMEM+10％FBS，混匀，得到10个浓度的稀释液。

3)每孔中(已有100μL细胞)加入5μL Dexamethasone稀释液或待测化合物稀释液。Min孔中加5μL 10％DMSO培养基，Max孔中加入5μL 21μM Dexamethasone(溶于培养基，10％DMSO)。

4)将检测板放回培养箱中孵育一定时间(15分钟/30分钟/1小时/2小时/4小时)后，用移液器小心缓慢移除上清，加入100μL/孔培养基，然后再次小心缓慢移除上清，最后加入100μL/孔培养基，放入培养箱孵育24小时。

4.荧光素酶检测

5.数据处理

1)最终测量值是Firefly luciferase荧光信号除以Renilla Luciferase荧光信号后得到的标准化数值“F/R”。

2)将数据复制粘贴到Excel中，通过方程得到激活率。

3)将数据导入MS Excel并使用XLFit excel add-in version 5.4.0.8进行曲线拟合，得到EC ₅₀值

公式:Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+(EC50/X)^HillSlope

Y是激动率，X是化合物浓度。

实验结果

根据表8结果显示，本申请化合物与糖皮质激素受体结合紧密，不易被洗脱，并对糖皮质激素受体有较长时间的持续激活能力。

表8 GR荧光素酶报告基因洗脱实验结果

实施例4本发明化合物对R848诱导的人外周血单核细胞IFNα和TNFα抑制作用

试验目的

检测本申请化合物对外周血单核细胞产生的抑制作用。以不同浓度的配体药物偶联物体外处理外周血单核细胞，一定时间后对外周血单核细胞产生的IFNα和TNFα进行定量检测。评价本发明化合物的体外活性。

试验方法

复苏冻存的人PBMC细胞，用完全培养基重悬细胞后计数，并将细胞悬液用培养液调整到2.5×10^6细胞/毫升培养过夜。第二天离心收集细胞后，使用新鲜培养液重悬细胞。将受试化合物用细胞培养液稀释到4倍终浓度，将50μl化合物加入96孔细胞板中，在含有化合物的96孔板中每孔加入100μl稀释后的细胞(800,000细胞/孔)后加入50μl R848至终浓度5μM。将细胞板放入37℃,5％CO2培养24h。。收集上清，利用ELISA试剂盒检测上清液中TNF-α和IFN-α浓度水平。

TNF-α浓度检测，使用达科卫TNF-α ELISA试剂盒(货号1117202)进行检测，每孔加入100μl梯度稀释后的Cytokine standard至标准品孔，加入100μl 10倍稀释的上述上清液至样本孔，加入1×Dilutionbuffer R 100μl至空白对照孔。每孔加入Biotinylated antibody工作液50μl。混匀后盖上封板膜，室温孵育3小时。洗板3次：扣去孔内液体，每孔加入1×Washing buffer工作液300μl；停留1分钟后弃去孔内液体。重复3次。每孔加入Streptavidin-HRP工作液100μl。盖上封板膜，室温孵育20分钟。洗板3次，每孔加入TMB液体100μl，室温(18-25℃)避光孵育25分钟。迅速每孔加入100μl Stop solution终止反应。终止后10分钟内，用M2e仪器检测波长450nm读值。结果见图1a和1b。

IFN-α浓度检测，使用达科卫IFN-α ELISA试剂盒(货号1110012)进行检测，每孔加入100μl梯度稀释后的Cytokine standard至标准品孔，加入100μl 2倍稀释的上述上清液至样本孔，加入1×Dilutionbuffer R 100μl至空白对照孔。每孔加入Biotinylated antibody工作液50μl。混匀后盖上封板膜，室温孵育3小时。洗板3次：扣去孔内液体，每孔加入1×Washing buffer工作液300μl；停留1分钟后弃去孔内液体。重复3次。每孔加入Streptavidin-HRP工作液100μl。盖上封板膜，室温孵育20分钟。洗板3次，每孔加入TMB液体100μl，室温(18-25℃)避光孵育25分钟。迅速每孔加入100μl Stop solution终止反应。终止后10分钟内，用M2e仪器检测波长450nm读值。

通过OD450值计算TNF-α和IFN-α的含量(平均值±标准差)。

结果见表9-1和9-2，图1a和1b。

表9-1化合物抑制R848刺激条件下PBMC分泌IFN-α

表9-2化合物抑制R848刺激条件下PBMC分泌TNF-α

结果显示，本申请的化合物可以影响外周血单核细胞产生TNF-α和IFN-α的能力。本申请的配体药物偶联物可以具有抑制炎症的能力，可以用于炎症等疾病和/或病症的预防和/或治疗。

实施例5异硫氰酸荧光素(FITC)诱导的迟发型IV型超敏反应小鼠模型中的生物活性测定

在急性接触性超敏反应模型中评估ADC，所述模型是通过应用敏化剂(异硫氰酸荧光素，FITC)，使用迟发型超敏反应(delayed type hypersensitivity，DTH)响应(T细胞驱动)引发急性皮肤炎症。通过减少耳朵肿胀的能力来测量本申请配体药物偶联物(ADC)的药效。实验开始前选取规定数量周龄为7-9周的雌性Balb/c，根据小鼠体重进行随机分组，每组10只小鼠，保证不同组间平均体重值相近以减少组间差异。将小鼠分组当天定义为实验第0天。随机分组后，所有小鼠在5％异氟烷轻度麻醉状态下，剃掉小鼠腹部毛发，疾病诱导组中小鼠于腹部涂抹100微升浓度为2％的异硫氰酸荧光素(FITC)溶液进行第一次致敏，同时疾病对照组中小鼠于腹部涂抹100微升溶媒对照溶液(丙酮：DBP,体积比1:1)。待溶媒溶液和2％FITC溶液吸收且腹部皮肤干燥后，待小鼠苏醒后放置回笼盒中。在实验第1天，重复上述描述步骤进行第二次2％FITC致敏。

实验第5天，所有小鼠进行体重称量。根据实验设计，溶媒对照组或各治疗组中小鼠分别腹腔注射无菌PBS溶液或指定给药溶液。给药1小时后，所有小鼠在5％异氟烷轻度麻醉状态下使用Mitutoya Caliper测量左耳及右耳的厚度。耳朵厚度测量后，疾病诱导组中所有小鼠于右耳处涂抹10微升1％FTIC溶液，于左耳处涂抹10微升溶媒对照溶液(丙酮：DBP,体积比1:1)。

实验第6天，在1％FTIC激发24小时后，所有小鼠在5％异氟烷轻度麻醉状态下使用Mitutoya Caliper测量左耳及右耳的厚度，并根据如下公式计算小鼠耳朵厚度变化：(R-L)-(R0-L0)，其中R0和L0分别为1％FITC激发前小鼠右耳及左耳厚度，R和L分别为1％FITC激发24小时后小鼠右耳及左耳厚度。

结果见图2。结果显示，偶联物11、单抗8c11和偶联物15(参照ADC-1)均可抑制异硫氰酸荧光素(FITC)诱导的迟发型IV型超敏反应，降低小鼠耳厚度，其耳厚度分别为0.056mm、0.179mm和0.08mm，偶联物11抑制作用显著优于单抗8c11和偶联物15(参照ADC-1)。

本申请配体药物偶联物(ADC)具有抑制超敏反应能力，本申请配体药物偶联物(ADC)可以用于预防和/或治疗炎症的疾病和/或症状。

实施例6 II型牛胶原混合佐剂诱导的DBA/1小鼠关节炎模型的生物活性测定

牛胶原诱导的关节炎(CIA)模型中评估本申请配体药物偶联物(ADC)的药效。

雄性DBA/1J小鼠获自杰克逊实验室(Jackson Labs)。小鼠在6至8周龄时使用。将所有动物在12小时的明/暗循环下，在恒定的温度和湿度下，自由饮食饮水。监测体重和状况，并且如果呈现出>20％的体重减轻，则对动物实施安乐死。

牛胶原(Chondrex,Inc.Cat:20021)溶解于0.1M乙酸中，2-8C冰箱过夜，胶原浓度为8mg/mL,向胶原溶液中加入等体积CFA(完全弗氏佐剂，Difco，Laurence，KS)，用高速匀浆机乳化胶原制成乳剂。Day 0，将需要免疫动物用2％-5％异氟烷麻醉后，在距离身体2-3cm尾根部皮下单点注射50μL胶原/CFA乳剂进行一次免疫免疫雄性DBA/J小鼠。三周后，即第21天(Day 21)，于尾根部同法注射相同体积胶原乳剂进行二次免疫。二次免疫后，挑选120只四肢关节炎评分平均分约等于2分的动物，随机分组。分组后动物按照实验设计单次腹腔注射治疗测试试剂。对于Dexamethasone(上海上药信谊药厂有限公司)治疗组，分组后当天给药直至试验结束。自二次免疫后开始，每周两次观察每组动物四肢的关节炎发病情况，一直持续到试验结束。

根据病变的不同程度(红肿)按照0-4分的标准进行评分，每个肢体的最高评分为4分，每只动物四肢总和最高评分为16分。评分标准如下：0分，无红肿；1分，1～2个指间关节红肿；2分，3～4个指间关节红肿；3分，4个以上指间关节红肿；4分，脚趾或手指到踝关节或腕关节严重红肿。对于关节肿胀，一次免疫前，用螺旋测微器测量每只动物后足的足踝厚度。自二次免疫后，每周测量2次，并比较免疫前后足踝的厚度的变化。试验结束后，所有动物经2-5％异氟烷麻醉后，利用放血法进行安乐死处理。

评分AUC：关节炎评分的曲线下面积。结果见表10-1、10-2和图3a-3c。

表10-1关节炎评分

Mean：平均值，SEM：标准差。

表10-2关节炎评分

Mean：平均值，SEM：标准差。

结果显示，与空白试剂相比，本申请配体药物偶联物(ADC)具有降低小鼠后爪肿胀的能力，可以呈现出约28天的延长的作用持续时间，本申请配体药物偶联物(ADC)具有降低关节炎严重程度的能力和生物安全性(例如血液安全性)。

实施例7

7.1糖皮质激素受体结合测定

根据制造商的方案，使用Polarscreen T M糖皮质激素受体测定试剂盒Red(ThermoFisher A 15898)测试小分子的糖皮质激素受体(GR)结合。简而言之，将化合物在DMSO中连续稀释，然后以1：10稀释度转移到测定试剂盒缓冲液中。将化合物在测定试剂盒缓冲液中进一步1∶5稀释，并且将10μl转移到384孔低体积黑壁板(Corning 4514)中。将5μl的4X Fluormone GS Red储备溶液和5ul的4x GR全长储备溶液添加到含有测试化合物的每个孔中，并且将板在室温下避光孵育4小时。使用MD-5e多标记读板仪测量每个板的荧光偏振(mP)，并且使用四参数曲线拟合分析数据以生成EC50值。

7.2盐皮质激素受体细胞测定

根据制造商的方案，使用PathHunter ^(R)NHRPRO CHO-K1MR细胞系(DiscoveRx目录号93-0451C2)测试小分子的盐皮质激素受体(MR)激动剂活性。简而言之，将培养基中的20,000个细胞/孔在37℃下在96半孔板(Costar目录号3885)中铺板过夜。除去培养基并用测定培养基(30μl；0.3％DMSO终浓度)中的连续稀释的小分子代替。将板在37℃下孵育过夜。除去培养基，用检测试剂(DiscoveRx目录号93-0001；12μl/孔)代替，并且在室温(RT)下孵育60分钟。使用MD-5e多标记读板仪测量每个板的发光，并且使用四参数曲线拟合分析数据以生成EC50值。

7.3孕酮受体结合测定

使用LanthaScreen ^(R)TR-FRET孕酮受体共激活因子测定(Thermofisher目录号A15903)的修改方案测试小分子的孕酮受体(PR)结合，在所述修改方案中用Fluormone AL-Red(Thermofisher目录号PV4294)代替荧光素标记的共激活肽以改善测定信号。简而言之，将化合物在DMSO中连续稀释，然后以1∶10稀释度转移到测定缓冲液(Thermofisher目录号PV4301+5mM DTT)中。将10μl化合物一式两份地转移到96半面积黑色孔板(Corning目录号3694)中。将5μl的PR-LBD蛋白(测定缓冲液中的4nM原液；Thermofisher目录号P2899)添加到每个孔中。此外，还将测定缓冲液中的Fluormone AL-Red(12nM)和铽标记的抗GST单克隆抗体(mAb)(20nM；Thermofisher目录号PV3550)的5μl制备好的混合物添加到每个孔中。将板在室温(RT)下孵育2小时，并且然后使用EnVision多标记读板仪(Perkinelmer#2104-0010)测量TR-FRET发射比。使用四参数曲线拟合分析数据以生成EC50值。

7.4雄激素受体结合测定

使用LanthaScreen ^(R)TR-FRET雄激素受体共激活因子测定(Thermofisher目录号A15878)的修改方案测试小分子的雄激素受体(AR)结合，在所述修改方案中用Fluormone AL-Red(Thermofisher目录号PV4294)代替荧光素标记的共激活肽以改善测定信号。简而言之，将化合物在DMSO中连续稀释，然后以1∶10稀释度转移到测定缓冲液(Thermofisher目录号PV4295+5mM DTT)中。将10μl化合物一式两份地转移到96半面积黑色孔板(Corning目录号3694)中。将5μl的AR-LBD蛋白(测定缓冲液中的5nM原液；Thermofisher目录号3009)添加到每个孔中。此外，还将测定缓冲液中的Fluormone AL-Red(20nM)和铽标记的抗GST单克隆抗体(mAb)(30nM；Thermofisher目录号PV3550)的5μl制备好的原液添加到每个孔中。将板在室温(RT)下孵育6小时，然后使用EnVision多标记读板仪(Perkinelmer#2104-0010)测量TR-FRET发射比。使用四参数曲线拟合分析数据以生成EC50值。

7.5雌激素受体结合测定

使用LanthaScreen ^(R)TR-FRET雌激素受体α共激活因子测定(Thermofisher目录号A15885)的修改方案测试小分子的雌激素受体(ER)α结合，在所述修改方案中用Fluormone ES2 Green(Thermofisher目录号PV6045)代替荧光素标记的共激活肽以改善测定信号。简而言之，将化合物在DMSO中连续稀释，然后以1∶10稀释度转移到测定缓冲液(Thermofisher目录号PV4295+5mM DTT)中。将10μl化合物一式两份地转移到96半面积黑色孔板(Corning目录号3694)中。将5μl的ER-LBD蛋白(测定缓冲液中的5nM原液；Thermofisher目录号4542)添加到每个孔中。此外，还将测定缓冲液中的Fluormone ES2Green(12nM)和铽标记的抗GST单克隆抗体(mAb)(8nM；Thermofisher目录号PV3550)的5μl制备好的原液添加到每个孔中。将板在室温(RT)下孵育4小时，并且然后使用EnVision多标记读板仪(Perkinelmer#2104-0010)测量TR-FRET发射比。使用四参数曲线拟合分析数据以生成EC50值。

本申请化合物与糖皮质激素有较高的亲和力，并对盐皮质激素受体，孕酮受体，雄激素受体和雌激素受体有较低的亲和力。

7.6 GRE报告基因测定

将实例HEK293 GRE细胞以50,000个细胞/孔铺板在96孔组织培养物处理的白色板(Costar：3917)上的50μL测定培养基(RPMI、1％CSFBS、1％L-谷氨酰胺、1％丙酮酸钠和1％MEAA)中。将本申请化合物以100μM的起始浓度连续稀释并在100％DMSO中连续稀释4倍。通过将2μl连续稀释的化合物转移到二级稀释板(1∶125稀释度)中的248μl测定培养基中将小分子化合物在测定培养基中进一步稀释。然后将细胞用25μL最终起始浓度为266.7nM(1∶3)的1∶125稀释的GR激动剂化合物或单独的培养基处理并且在37°、5％CO2下孵育24小时。孵育24小时之后，将细胞用75μL的Dual-Glo荧光素酶测定系统(Promega-E2920)处理10分钟，并且使用TopCount或MicroBeta2(珀金埃尔默公司(PerkinElmer))分析发光。结果显示，本申请化合物能在较低浓度下有效激活GRE报告基因。

实施例8

8.1 GRE活性测定

人和小鼠跨膜TNF-αGRE报告细胞系的产生

为了产生亲本细胞系，在37℃，5％CO ₂下，在24小时内，将K562细胞以每孔500,000个细胞接种到具有2mL的完全生长培养基(RPMI，10％FBS，1％L-谷氨酰胺，1％丙酮酸钠和1％MEMNEAA(非必需氨基酸溶液))的6孔培养皿((柯仕达)Costar：3516)上。第二天，将1.5μg的pGL4.36[Luc2P/MMTV/Hygro](Promega)和3uL的PLUS试剂(Invitrogen))稀释到244μL的Opti-MEM(Gibco：31985-070)中，并在室温下孵育15分钟。pGL4.36[luc2P/MMTV/Hygro]载体含有鼠乳腺肿瘤病毒长末端重复序列，其响应于若干种核受体(例如糖皮质激素受体和雄激素受体)的激活而驱动荧光素酶报告基因luc2P的转录。在孵育后，将稀释的DNA溶液与1∶1脂转染胺(Lipofectamine)LTX溶液(13.2μL+256.8μLOpti-MEM)进行预孵育，并在室温下孵育25分钟以形成DNA-脂转染胺LTX复合物。在孵育后，将500μL的DNA-脂转染胺复合物直接添加到含有细胞的孔中。将K562细胞在37℃，5％CO ₂下转染24小时。在孵育后，将细胞用3mL的PBS洗涤，并用含有125μg/mL的潮霉素B的完全生长培养基选择两周。产生“K562pGL4.36[Luc2P/MMTV/Hygro]_pGL4.75[hRLuc/CMV]”细胞。

为了产生鼠跨膜TNF-αGRE报告细胞，在37℃，5％CO ₂下，在24小时内，将亲本细胞K562pGL4.36[Luc2P/MMTV/Hygro]_pGL4.75[hRLuc/CMV]以每孔500,000个细胞接种到含有2mL的完全生长培养基(RPMI，10％FBS，1％L-谷氨酰胺，1％丙酮酸钠和1％MEMNEAA)的6孔培养皿上。第二天，将3μg的编码未标记的小鼠TNF的mFL_TNFαDNA和3μL的PLUS试剂(英杰公司：10964-021)稀释到244μL的Opti-MEM(Gibco：31985-070)中，并在室温下孵育15分钟。在孵育后，将稀释的DNA溶液用1∶1脂转染胺LTX溶液)(13.2μL+256.8μLOpti-MEM)预孵育，并在室温下孵育25分钟，以形成DNA-脂转染胺LTX复合物。在孵育后，将500μL的DNA-脂转染胺复合物直接添加到含有细胞的孔中。将亲本K562pGL4.36\[Luc2P/MMTV/Hygro]_pGL4.75[hRLuc/CMV]细胞在37℃，5％CO ₂下转染24小时。在孵育后，将细胞用3mL的PBS洗涤，并用含有125μg/mL的潮霉素B(英杰公司：10687-010)和250μg/mLG418(Gibco：10131-027)的完全生长培养基选择两周。产生“K562小鼠FL- TNFαGRE(pGL4.36[luc2P/MMTV/Hygro])”细胞。

为了产生人跨膜TNF-αGRE报告细胞系，用质粒hTNFδ1-12C-MycpcDNA3.1(-)质粒构建体来转染亲本细胞K562pGL4.36[Luc2P/MMTV/Hygro]_pGL4.75[hRLuc/CMV]。所述质粒是pcDNA3.1(赛默飞世尔，目录号V79020)，其编码tace抗性跨膜TNF。(参见PerezC等人，《细胞(Cell)》63(2)：251-8(1990)，其讨论了tace抗性跨膜TNF。)。产生“K562人TNFδ1-12GRE(pGL4.36[luc2P/MMTV/Hygro])”细胞。然后将这些细胞系用于在随后的实例中描述的TNF-α报告测定中。

将K562亲本GRE细胞(“K562pGL4.36[Luc2P/MMTV/Hygro]_pGL4.75[hRLuc/CMV]”细胞)，和GRE-小鼠TNF-α细胞(“K562小鼠FL-TNFαGRE(pGL4.36[luc2P/MMTV/Hygro])”细胞)或GRE-人TNF-α细胞(“K562人TNFδ1-12GRE(pGL4.36[luc2P/MMTV/Hygro])”细胞)，以每孔50,000个细胞接种到96孔板上。将本申请配体药物偶联物(ADC)用培养基以3X系列稀释后加入上述96孔板中，在37℃，5％CO ₂下孵育48小时。用荧光素酶测定系统处理后分析发光。使用四参数曲线拟合分析数据以产生EC ₅₀值。将最大活化％归一化为100nM地塞米松。本申请配体药物偶联物(ADC)在小鼠跨膜TNFα GRE报告测定中测体外活性；和在本申请配体药物偶联物(ADC)在人跨膜TNFα GRE报告测定中测体外活性

结果显示，本申请配体药物偶联物(ADC)具有影响细胞GRE激活水平的能力，本申请配体药物偶联物(ADC)可以影响糖皮质激素介导的信号通路的激活水平。

8.2脂多糖(LPS)诱导细胞因子释放及下游信号检测

原代人外周血单核细胞(PBMC)在50mL PBS中洗涤，重悬于具有5％DMSO的FBS(胎牛血清)中，等分并冷冻保存在液氮中直到使用。将PBMC解冻，重悬于有2％FBS和1％青霉素链霉素的细胞培养基(如RPMI细胞培养基)中，并且接种96孔板中。然后将细胞在37℃和5％CO ₂下用不同浓度ADC孵育4小时。用一定浓度脂多糖(Lipopolysaccharides，LPS)等刺激物处理一定时间。随后将板以1000rpm旋转5分钟，并且将100μL的上清液培养基直接转移到另一个96孔板中，并分析IL-6和IL-1β等细胞因子浓度及磷酸化STAT1水平。结果显示，本申请配体药物偶联物(ADC)具有影响PBMC细胞释放细胞因子的能力，如IL-6和IL-1β等，以及磷酸化STAT1的能力。

8.3接触性超敏反应模型中的生物活性测定

在急性接触性超敏反应模型中评估ADC，所述模型是通过应用敏化剂(异硫氰酸荧光素，FITC)，使用迟发型超敏反应(delayed type hypersensitivity，DTH)响应(T细胞驱动)引发急性皮肤炎症。通过减少耳朵肿胀的能力来测量本申请配体药物偶联物(ADC)的药效。包括检测生物标记物，例如类固醇、皮质酮和前胶原1型N-末端前肽(P1NP)，以评估本申请配体药物偶联物(ADC)分别对下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴和骨转换(骨吸收和骨形成)的影响。

(1)耳朵肿胀检测

在第0天，将小鼠置于全身麻醉下并剃毛腹部。使用微量移液器，腹腔注射400μL的FITC溶液(1∶1丙酮∶DBP(邻苯二甲酸二丁酯)中的1.5％溶液)对小鼠进行致敏。6天后，用FITC进行耳注射前1小时，小鼠进行给药(对照组溶剂或治疗组本申请配体药物偶联物)。对于耳注射，将小鼠置于全身麻醉下，在右耳注射20μl的FITC进行再次致敏。再次致敏24小时后，小鼠全身麻醉下，通过游标卡尺测量耳朵厚度。计算致敏耳朵和未致敏耳朵之间的差异。

结果显示，本申请配体药物偶联物(ADC)具有影响耳部皮肤肿胀的能力，本申请配体药物偶联物(ADC)可以用于预防和/或治疗炎症的疾病和或症状。

(2)释放的游离类固醇和内源性皮质酮、血浆P1NP的定量检测

耳致敏72小时后，小鼠以1mpk(mg/kg)腹腔注射ACTH(促肾上腺皮质激素)，并在ACTH给药后30分钟终末放血。收集血浆并分析前胶原1型N-末端前肽(P1NP)、皮质酮、游离类固醇和大分子水平。

在小鼠血浆中以多种(例如8种)不同浓度水平的终浓度为0.03nM至0.1μM来制备类固醇的校准曲线。在PBS缓冲液中的70mg/mL牛血清白蛋白溶液中，制备从0.3nM至1μM最终皮质酮浓度范围的皮质酮校准曲线。将含有0.1％甲酸的160μL MeCN(乙腈)的溶液添加到40μL的待测血浆样品或校准标准品中。上清液用蒸馏水稀释，并注入30μL的最终样品溶液用于LC/MS分析。

胰蛋白酶消化后，在LCMS平台上进行血浆前胶原1型N-末端前肽(P1NP)的定量。作为一种特殊的Ⅰ型胶原蛋白沉淀指示剂，P1NP水平反映成骨细胞活性和骨形成的状态。通过添加MeCN/0.1M碳酸氢铵/DTT(二硫苏糖醇)混合物使血浆样品部分沉淀并完全还原。收集上清液，并通过添加碘乙酸烷基化。烷基化的蛋白质通过胰蛋白酶消化，并且通过LC/MS分析所得的胰蛋白酶酶解肽。结果显示，本申请配体药物偶联物(ADC)对于游离类固醇和内源性皮质酮、血浆P1NP水平几乎没有影响，本申请配体药物偶联物(ADC)具有生物安全性。

实施例9

9.1人外周血单核细胞IFNα产生的抑制试验

试验目的

检测本申请配体药物偶联物(ADC)对浆细胞样树突状细胞产生IFNα的抑制作用。以不同浓度的配体药物偶联物体外处理浆细胞样树突状细胞，一定时间后对浆细胞样树突状细胞产生的IFNα进行定量检测。根据IC50评价配体药物偶联物的体外活性。

试验方法

1、人外周血单核细胞重悬于RPMI完全培养基，以0.5-1x10 ⁶/孔接种至96孔板，向其中加入梯度稀释的本申请配体药物偶联物。随后向体系中加入固定浓度的刺激物CpG-A或R848或系统性红斑狼疮SLE免疫复合物(Sm/RNP抗原与抗RNP抗体以一定比例混合)，37℃过夜培养。收集上清，利用试剂盒检测上清中IFNα的水平。使用非线性回归将剂量响应数据拟合为S形曲线，计算IC ₅₀值。

2、从人外周血单核细胞中利用浆细胞样树突细胞分离试剂盒(Miltenyi)分离浆细胞样树突细胞，悬浮于RPMI完全培养基，以0.5-2x10 ⁵/孔接种至96孔，向其中加入梯度稀释的本申请配体药物偶联物。随后向体系中加入固定浓度的刺激物CpG-A或R848或SLE免疫复合物(Sm/RNP抗原与抗RNP抗体以一定比例混合)，37℃过夜培养。收集上清，利用试剂盒检测上清中IFNα的水平。使用非线性回归将剂量响应数据拟合为S形曲线，计算IC ₅₀值。

结果显示，本申请的配体药物偶联物可以影响浆细胞样树突状细胞产生IFNα的能力。本申请的配体药物偶联物可以具有抑制炎症的能力，可以用于炎症等疾病和/或病症的预防和/或治疗。

9.2 I型干扰素诱导的响应原件信号检测

向HEK293细胞构建转入pHTS-ISRE荧光素报告基因质粒，构建I型干扰素响应信号的报告系统。细胞培养于含有一定浓度FBS和Geneticin的DMEM培养基，向其中加入梯度稀释的配体药物偶联物和一定浓度浆细胞样树突细胞诱导产生的I型干扰素IFN或重组I型干扰素进行孵育。裂解细胞，确定荧光素强度，使用非线性回归将剂量响应数据拟合为S形曲线，计算IC ₅₀值。

结果显示，本申请的配体药物偶联物可以影响I型干扰素诱导的响应原件信号。本申请的配体药物偶联物可以具有抑制炎症的能力，可以用于炎症等疾病和/或病症的预防和/或治疗。

9.3 CpG-A等诱导细胞因子释放及下游信号分子检测

原代人外周血单核细胞(PBMC)在50mL PBS中洗涤，重悬于具有5％DMSO的FBS(胎牛血清)中，等分并冷冻保存在液氮中直到使用。将PBMC解冻，重悬于有2％FBS和1％青霉素链霉素的细胞培养基(如RPMI细胞培养基)中，并且接种96孔板中。然后将细胞在37℃和5％CO ₂下用不同浓度配体药物偶联物进行孵育。用一定浓度CpG-A或其他刺激物处理一定时间。随后将板以1000rpm旋转5分钟，并且将100μL的上清液培养基直接转移到另一个96孔板中，并分析IL-6和IL-1β等细胞因子水平。

向人外周血单核细胞中加入一定浓度的配体药物偶联物进行培养。随后向其中加入一定浓度浆细胞样树突细胞诱导产生的I型干扰素IFN或重组I型干扰素进行孵育。裂解细胞进行电泳和western blot检测，利用抗人STAT1 pTY701抗体确定STAT1磷酸化水平。

结果显示，本申请配体药物偶联物(ADC)具有影响PBMC细胞释放细胞因子的能力，以及磷酸化STAT1的能力。

9.4浆细胞样树突细胞异种移植老鼠模型中的药效评估

试验目的

将本申请配体药物偶联物(ADC)作用于人浆细胞样树突细胞异种移植老鼠模型，利用免疫组化，基因转录分析等手段评估配体药物偶联物的体内药效。

试验方法

1、咪喹莫特诱导模型

用4至8周龄的重度免疫缺陷小鼠(CB17/Icr-Prkdcscid/IcrIcoCrl,Charles River)，剃毛背部。将5％咪喹莫特乳膏涂抹于小鼠背部，12小时后进行第二次涂抹。随后小鼠腹腔注射一定浓度的本申请配体药物偶联物或对照配体药物偶联物。12小时后向小鼠尾静脉注射1～10x10 ⁵人浆细胞样树突细胞。再经12小时培养后，对小鼠实行安乐死，收集背部皮肤样品，进行检测。

2.博来霉素诱导模型

用4至8周龄的重度免疫缺陷小鼠(CB17/Icr-Prkdcscid/IcrIcoCrl,Charles River)，剃毛背部。将一定浓度的博来霉素皮下注射于小鼠背部单一位点，每两天一次持续注射三周。在第一次博来霉素注射的第0，7，14天向小鼠尾静脉注射1～10x10 ⁵人浆细胞样树突细胞。第一次博来霉素注射前24小时向小鼠腹腔注射一定浓度的本申请配体药物偶联物或对照配体药物偶联物，每5天一次注射。

3、检测方法与指标

(1)试剂盒抽提小鼠皮肤细胞RNA并反转录为cDNA，利用Real-time PCR，以对照配体药物偶联物处理小鼠样品为对照，确定配体药物偶联物对I型IFN信号途径应答基因转录的影响。

(2)小鼠皮肤样品用福尔马林固定并包埋于石蜡中，对石蜡以5μM切片，进行苏木精-伊红染色。以Masson染色法鉴定皮肤样品的纤维化程度。以pSTAT1 Tyr701抗体进行免疫组化分析。

(3)小鼠皮肤样品经处理后进行FACS分析，根据细胞表面标记物确定其中浆细胞样树突细胞所占比例。

(4)小鼠皮肤样品经处理后利用胶原分析方法进行胶原含量测定。

结果显示，本申请的配体药物偶联物可以影响(1)I型IFN信号途径应答基因转录能力、(2)影响皮肤样品纤维化的程度、(3)影响浆细胞样树突细胞增殖能力和/或(4)影响皮肤样品胶原含量。本申请的配体药物偶联物在体内可以具有抑制炎症的能力，可以用于炎症等疾病和/或病症的预防和/或治疗。

实施例10

10.1 CD40L和LPS诱导的人外周血单核细胞来源树突状细胞的细胞因子释放实验

准备新鲜人外周血单个核细胞(PBMC)。用人单核细胞(CD14+)分离试剂盒分离人单核细胞。洗涤后将细胞重悬，并加入人IL-4(80ng/mL)和人GM-CSF(100ng/mL)，置于培养箱培养5天。

收集细胞，洗涤后以105/孔加入到96孔平底板中，用0.1ng/mL LPS刺激细胞2小时，然后洗掉上清。加入一定浓度的阳性化合物，孵育2小时。加入1μg/mL MegaCD40L和0.2ng/mL LPS，37℃，5％CO2培养箱孵育20小时。离心收集细胞上清，利用试剂盒检测上清中TNFα和IL-6的水平。使用非线性回归将剂量响应数据拟合为S形曲线，计算IC50值。

结果显示，本申请的配体药物偶联物可以抑制人外周血单核细胞来源树突状细胞的细胞因子释放。本申请的配体药物偶联物具有抑制炎症的能力，可以用于炎症等疾病和/或病症的预防和/或治疗。

10.2 LPS诱导的急性炎症模型的药效评估

将8-10周龄的CD40人源化雌性小鼠进行随机分组，向小鼠腹腔注射一定浓度的本申请配体药物偶联物或对照配体药物偶联物。2-16h后，向小鼠腹腔注射一定浓度的LPS。6小时后，收集100μl血样，利用试剂盒进行TNFα,IL-6和IL-1β含量的测定。再经18h后，对小鼠实施安乐死，收集脾脏进行单细胞处理，利用抗体对细胞进行染色，确定被激活的树突状细胞的比例。

结果显示，本申请的配体药物偶联物可以抑制LPS诱导的急性炎症小鼠模型中细胞因子的释放，降低脾脏中活化的树突状细胞比例。本申请的配体药物偶联物具有抑制炎症的能力，可以用于炎症等疾病和/或病症的预防和/或治疗。

实施例11

试验目的

猴单次静脉滴注本申请配体药物偶联物(ADC)后，考察药物在猴体内的药动学性质，同时观察动物的毒性表现。

试验方法

药代动力学：猴单次静脉滴注不同剂量的本申请配体药物偶联物(ADC)后，连续多个时间点采集血液样品，通过特异性检测方法检测药物在血液中的浓度。

毒性研究：猴单次静脉滴注不同剂量的本申请配体药物偶联物(ADC)后，通过临床观察、体重和摄食量、血液学、血生化、尿液、大体解剖等多个方面考察动物的耐受性，以及药物相关的毒性表现。

结果显示：(1)猴单次静脉滴注本申请配体药物偶联物(ADC)后，游离药物浓度很低，总抗体和本申请配体药物偶联物(ADC)的药代动力学性质相似，表明本申请配体药物偶联物(ADC)在猴中缓慢释放，偶联方式稳定，可以支持临床拟定的给药频率；(2)猴单次静脉滴注本申请配体药物偶联物(ADC)后，动物耐受性良好，未表现出严重或不可耐受的药物相关毒性，表明本申请配体药物偶联物(ADC)的安全性可控，可支持其进一步的临床应用。

前述详细说明是以解释和举例的方式提供的，并非要限制所附权利要求的范围。目前本申请所列举的实施方式的多种变化对本领域普通技术人员来说是显而易见的，且保留在所附的权利要求和其等同方案的范围内。

Claims

一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃各自独立地为任意基团；

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；

W不存在或者W为任意基团；

A为任意基团，其中A还被一个或多个Y取代，每一个Y各自独立地选自以下组：氢、氕、氘、氚、任选取代的-OH、任选取代的-CH ₂-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂和任选取代的-NH ₂。
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1)或式(II-a2)所示的结构，

其中，R ₁、R ₂、R ₃和Y各自独立地为任意基团；

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W不存在或者W为任意基团；yn为0-4的整数。
根据权利要求1或2所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述R ₁选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、和任选取代的C ₁-C ₆烷基。
根据权利要求3所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述R ₁选自以下组：氢、F、Cl、Br、和任选取代的甲基。
根据权利要求1或2所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述R ₂选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、和任选取代的C ₁-C ₆烷基。
根据权利要求5所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述R ₂选自以下组：氢、F、Cl、Br、和任选取代的甲基。
根据权利要求1或2所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述R ₃选自-CH ₂OH、-SCH ₂F、
根据权利要求1-7中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述B选自以下组：任选取代的吡咯基和任选取代的噻吩基。
根据权利要求8所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述B选自以下组：任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的
根据权利要求1-9中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述B选自以下组：任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的
根据权利要求1-10中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述W不存在、或所述W选自以下组：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、任选取代的-NH-、任选取代的C ₁-C ₆亚烷基、和任选取代的C ₂-C ₆亚烯基、和任选取代的C ₂-C ₆亚炔基，其中，当W包含亚甲基单元时，所述W的所述亚甲基单元各自独立地不被替代、或所述W的所述亚甲基单元各自独立地被选自以下组替代：-O-、-S-、任选取代的-NH-和任选取代的亚脂环基。
根据权利要求1-11中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述W不存在、或所述W选自以下组：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-NH-、任选取代的-CH＝CH-、-C≡C-、任选取代的C ₁-C ₆亚烷基、任选取代的-OCH ₂-、任选取代的-CH ₂O-、任选取代的-SCH ₂-、任选取代的-CH ₂S-、-CO-、任选取代的-NHC(＝O)-、任选取代的-COCH ₂-、任选取代的-CH ₂NH-、任选取代的-NHCH(CH ₃)-、任选取代的-NHCH ₂-、任选取代的-CH(CH ₃)-、任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的
根据权利要求1-12中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述W不存在或W选自任选取代的以下组结构：
根据权利要求1-13中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述W选自任选取代的以下组结构：任选取代的-CH ₂-、任选取代的-CH(CH ₃)-、和任选取代的
根据权利要求1-14中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述A选自选自以下组：任选取代的C ₁-C ₆烷基、任选取代的C ₃-C ₁₀脂环基、任选取代的C ₂-C ₉脂杂环基、任选取代的C ₆-C ₁₀芳基和任选取代的C ₁-C ₉杂芳基。
根据权利要求1-15中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

当所述A为任选取代的苯基时，所述A被R _a4取代，所述R _a4选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R _a4包含亚甲基单元时，所述R _a4的所述亚甲基单元各自独立地不被替代、或所述R _a4的所述亚甲基单元各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。
根据权利要求1-15中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

当所述A为任选取代的C ₅杂芳基时，所述A被R _a5取代，所述R _a5选自以下组：氢、氕、氘、氚、卤素、-NO ₂、-CN、＝O、＝S、任选取代的-S(＝O)H、任选取代的-S(＝O) ₂H、任选取代的-C(＝O)H、任选取代的-OH、任选取代的-SH、任选取代的-PH ₂、任选取代的-P(＝O)H ₂、任选取代的-NH ₂、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的脂环基、任选取代的脂杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；其中，当R _a5包含亚甲基单元时，所述R _a5的所述亚甲基单元各自独立地不被替代、或所述R _a5的所述亚甲基单元各自独立地被选自以下组替代：-S(＝O)-、-S(＝O) ₂-、-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-、任选取代的-NH-、任选取代的亚烷基、任选取代的亚烯基、任选取代的亚炔基、任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基、任选取代的亚芳基和任选取代的亚杂芳基。
根据权利要求17所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述A为任选取代的吡啶基。
根据权利要求1-18中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述A选自以下组：任选取代的-CH ₂-Y、任选取代的-(CH ₂) ₂-Y、任选取代的-(CH ₂) ₃-Y、任选取代的-CH ₂-CH(-CH ₃)-Y、任选取代的-CH ₂(-CH ₂-环丙基)-Y、任选取代的环丙基-Y、任选取代的环丁基-Y、任选取代的环己基-Y、任选取代的氮杂环丁基-Y、任选取代的氮杂环己基-Y、任选取代的-苯基-Y、任选取代的-苯基(-O-CH ₃)-Y、任选取代的-苯基(-Cl)-Y、和任选取代的-吡啶基-Y。
根据权利要求1-19中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述A选自以下组：任选取代的-CH ₂-Y、任选取代的-(CH ₂) ₂-Y、任选取代的-(CH ₂) ₃-Y、任选取代的-CH ₂-CH(-CH ₃)-Y、任选取代的-CH ₂(-CH ₂-环丙基)-Y、任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的
根据权利要求1-20中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述A选自以下组：任选取代的和任选取代的所述yn为0-4的整数。
根据权利要求1-21中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

每一个Y各自独立地选自以下组：氢、任选取代的-OH、任选取代的-CH ₂-OH、任选取代的-SH和任选取代的-NH ₂。
根据权利要求1-21中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

每一个Y各自独立地选自以下组：任选取代的羟基、任选取代的烷基羟基、任选取代的巯基、任选取代的氨基和任选取代的C ₁-C ₆烷基。
根据权利要求1-23中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-1)、(II-a1-2)、(II-a1-3)、(II-a2-1)、(II-a2-2)、(II-a2-3)所示的结构，

R ₁和R ₂各自独立地选自：氢、氕、氘、氚、卤素和C ₁-C ₆烷基；

R ₃选自：-CH ₂Cl、-CH ₂SH、-CH ₂OH、 -OCH ₃、-OCH ₂F、-OCH ₂Cl、-OCH ₂CN、-OCH ₂CH ₃、-SH、-SCH ₂F、-SCH ₂Cl、-SCH ₂CF ₃和-SCH ₂CN；

通式(II-a1-1)和(II-a2-1)中，Y各自独立地选自：氢、卤素、羟基、巯基、氨基、C ₁-C ₆烷基和-OC ₁-C ₆烷基；通式(II-a1-2)、(II-a1-3)、(II-a2-2)和(II-a2-3)中，Y各自独立地选自：氢、卤素、羟基、巯基、氨基、C ₁-C ₆烷基、-OC ₁-C ₆烷基和-C ₁-C ₆烷基羟基；

yn选自0、1或2；

W选自 -CH(CH ₃)-和
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，所述化合物包含选自以下组的结构：
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中，所述化合物包含选自以下组的结构：
一种偶联物，包含权利要求1-26中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐。
根据权利要求27所述的偶联物，其包含抗体-药物偶联物。
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-A)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃各自独立地为任意基团；

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；

W不存在或者W为任意基团；

A为任意基团，其中A还被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；Tr不存在或者为任意基团。
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-A)、式(II-a2-A)、式(II-a3-A)或式(II-a4-A)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂、R ₃、Ry ₁、Ry ₂和Y各自独立地为任意基团；

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W不存在或者W为任意基团；yn为0-4的整数；Tr不存在或者为任意基团。
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-B)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃各自独立地为任意基团；

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；

W不存在或者W为任意基团；

A为任意基团，其中A还被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；L不存在或者为任意基团。
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-B)、式(II-a2-B)、式(II-a3-B)或式(II-a4-B)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂、R ₃、Ry ₁、Ry ₂和Y各自独立地为任意基团；

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W不存在或者W为任意基团；yn为0-4的整数；L不存在或者为任意基团。
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-C)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃各自独立地为任意基团；

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；

W不存在或者W为任意基团；

A为任意基团，其中A还被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；L不存在或者为任意基团，Ab为配体，N ^a-I为至少为0的数。
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-C)、式(II-a2-C)、式(II-a3-C)或式(II-a4-C)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂、R ₃、Ry ₁、Ry ₂和Y各自独立地为任意基团；

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W不存在或者W为任意基团；yn为0-4的整数；L不存在或者为任意基团，Ab为配体，N ^a-I为至少为0的数。
根据权利要求31-34中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述L包含Tr。
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-D)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂和R ₃各自独立地为任意基团；

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；

W不存在或者W为任意基团；

A为任意基团，其中A还被一个或多个Y取代，Y为任意基团，Y _x选自以下组：-O-、任选取代的-CH ₂-O-、-S-、任选取代的-PH-、任选取代的-P(＝O)H-和任选取代的-NH-；Lx为任意基团。
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-D)、式(II-a2-D)、式(II-a3-D)或式(II-a4-D)所示的结构：

其中，R ₁、R ₂、R ₃、Ry ₁、Ry ₂和Y各自独立地为任意基团；

B选自以下组：任选取代的亚脂环基、任选取代的亚脂杂环基和任选取代的C ₂-C ₄亚杂芳基；W不存在或者W为任意基团；yn为0-4的整数；Lx为任意基团。
根据权利要求36-37中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述Lx包含Tr。
根据权利要求29-30、35和38中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述Tr包含-(SP ¹) _n1-，

每一个SP ¹各自独立地为任选取代的-CH ₂-NH-，

其中，n1为至少为0的数。
根据权利要求39所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，每一个SP ¹各自独立地选自以下组：-CH ₂-NH-、-CH(CH ₃)-NH-、-C(CH ₃) ₂-NH-、-CH ₂-N(CH ₃)-、-CH(CH ₃)-N(CH ₃)-和-C(CH ₃) ₂-N(CH ₃)-。
根据权利要求29-38中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述R ₁可以选自以下组：氢、卤素、和任选取代的甲基；

所述R ₂可以选自以下组：氢、卤素、和任选取代的甲基；

所述R ₃可以选自以下组：任选取代的-CH ₂Cl、任选取代的-CH ₂SH、任选取代的-CH ₂OH、任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的-OH、任选取代的-OCH ₃、任选取代的-OCH ₂F、任选取代的-OCH ₂Cl、任选取代的-OCH ₂CN、任选取代的-OCH ₂CH ₃、任选取代的巯基、任选取代的-SCH ₂F、任选取代的-SCH ₂Cl、任选取代的-SCH ₂CF ₃、和任选取代的-SCH ₂CN；所述B可以选自以下组：任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的

所述W可以不存在或所述W可以选自任选取代的以下组结构：

所述Y可以为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr可以不存在或者可以选自以下组：

其中，R ^p可以选自以下组：H，-CH ₃、-CH-(CH ₃) ₂、-CH ₂-CH(CH ₃) ₂、-CH(CH ₃)-CH ₂-CH ₃、-CH ₂-C ₆H ₅、-C ₈NH ₆、-CH ₂-C ₆H ₄-OH、-CH ₂-COOH、-CH ₂-CONH ₂、-(CH ₂) ₂-COOH、-(CH ₂) ₄-NH ₂、-(CH ₂) ₂-CONH ₂、-(CH ₂) ₂-S-CH ₃、-CH ₂-OH、-CH(CH ₃)-OH、-CH ₂-SH、-C ₃H ₆、-CH ₂-C ₃H ₃N、-(CH ₂) ₃-NHC(NH)NH ₂和-(CH ₂) ₃-NHCONH ₂。
根据权利要求29-38中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，

所述R ₁可以选自以下组：氢、和卤素；

所述R ₂可以选自以下组：氢、和卤素；

所述R ₃可以选自以下组：-CH ₂OH、-SCH ₂-卤素、

所述B可以选自以下组：任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的任选取代的和任选取代的

所述W可不存在或所述W可以选自任选取代的以下组结构：任选取代的-CH ₂-、任选取代的-CH(CH ₃)-、和任选取代的

所述Y为H，且所述yn可以为大于0的数；

所述Tr不存在。
根据权利要求36-38中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述Lx包含L ^1x，L ^1x为选自以下组：能够与氨基偶联的基团、能够与巯基偶联的基团和点击化学基团。
根据权利要求43所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，L ^1x选自以下组：

(1) 或

(2)

其中每一个R ^L1a，R ^L1b和R ^L1c各自独立地选自任意基团；或

(3)
根据权利要求31-35中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述L包含L ¹，L ¹选自以下组：氨基参与偶联形成的二价残基或三价残基、巯基参与偶联形成的二价残基或三价残基、和点击化学偶联形成的二价残基或三价残基。
根据权利要求45所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中L ¹选自以下组：

(1) 或

(2)

R ⁹选自：氢和C ₁-C ₆烷基；或

(3)
根据权利要求31-46中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，L或Lx包含L ²，L ²为任意基团。
根据权利要求47所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

L ²包含-X-，X为任选取代的-(CH ₂) _p1-，

其中，X的每一个亚甲基单元不被替代；或X的至少1个亚甲基单元各自独立地被选自任意基团替代，p1为至少为0的数。
根据权利要求48所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，X选自以下组：-C(O)-、-OC(O)-、-C(O)O-、-NR ^x-和-S-C(R ^xa)(R ^xb)-CH ₂-NH-C(O)-，每一个R ^x、R ^xa和R ^xb各自独立地选自以下组：氢和烷基。
根据权利要求47-49中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，L ²还包含-LB-，

LB为

其中，L ^p为三价残基，PEG包含聚乙二醇单元，p2为至少为0的数。
根据权利要求50所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，p2选自以下组：0、1、2、3、4和5。
根据权利要求50-51中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中L ^p选自以下组：天冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、赖氨酸，精氨酸，丝氨酸，半胱氨酸，苏氨酸，和酪氨酸。
根据权利要求50-52中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，PEG选自以下组：
根据权利要求50-53中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，LB选自以下组：
根据权利要求47-54中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，L ²还包含-LY-，

LY为-O _p-7-(CH ₂CH ₂O) _p-6-，p-6和p-7各自独立地至少为0。
根据权利要求55中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，LY选自以下组：-(CH ₂CH ₂O) ₃-、-(CH ₂CH ₂O) ₄-、-(CH ₂CH ₂O) ₅-、-(CH ₂CH ₂O) ₆-、-(CH ₂CH ₂O) ₇-和-(CH ₂CH ₂O) ₈-。
根据权利要求47-56中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，L ²还包含-Z-，

Z为任选取代的-(CH ₂) _p-8-，

其中，Z的每一个亚甲基单元不被替代；或Z的至少1个亚甲基单元各自独立地被选自任意基团替代，其中，p-8至少为0。
根据权利要求57所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，Z选自以下组：任选取代的-NH-、任选取代的-(CH ₂) ₂-、任选取代的-(CH ₂) ₅-、任选取代的-C(O)-(CH ₂) ₂-、任选取代的-C(O)-(CH ₂) ₄-、任选取代的-C(O)-(CH ₂) ₅-、任选取代的-(CH ₂) ₂-NH-C(O)-(CH ₂) ₂-、任选取代的-(CH ₂) ₂-NH-C(O)-(CH ₂) ₂-C(O)-、任选取代的-(CH ₂) ₂-NH-和任选取代的-(CH ₂) ₂-NH-C(O)-O-CH ₂-。
根据权利要求47-58中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，L ²不存在。
根据权利要求47-58中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，L ²选自以下组：

(1) 或

(2)

或

(3)
根据权利要求31-60中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，L或Lx包含L ³，L ³为多肽残基。
根据权利要求61所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中L ³选自以下组：谷氨酸-甘氨酸(EG)、甘氨酸-谷氨酸(GE)、谷氨酸-丙氨酸(EA)、丙氨酸-谷氨酸(AE)、缬氨酸-瓜氨酸(VC)、瓜氨酸-缬氨酸(CV)、缬氨酸-丙氨酸(VA)、丙氨酸-缬氨酸(AV)、丙氨酸-丙氨酸(AA)、谷氨酸-丙氨酸-甘氨酸(EAG)、甘氨酸-丙氨酸-谷氨酸(GAE)、谷氨酸-甘氨酸-甘氨酸(EGG)、甘氨酸-甘氨酸-谷氨酸(GGE)、甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GEG)、丙氨酸-丙氨酸-甘氨酸(AAG)、甘氨酸-丙氨酸-丙氨酸(GAA)、丙氨酸-丙氨酸-丙氨酸(AAA)、缬氨酸-丙氨酸-甘氨酸(VAG)、甘氨酸-丙氨酸-缬氨酸(GAV)、缬氨酸-瓜氨酸-甘氨酸(VCG)、甘氨酸-瓜氨酸-缬氨酸(GCV)、缬氨酸-赖氨酸-甘氨酸(VKG)、甘氨酸-赖氨酸-缬氨酸(GKV)、甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸(GGFG)、甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GFGG)、甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GGGG)、甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GEGG)、甘氨酸-甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GGEG)、甘氨酸-丙氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GAEG)和甘氨酸-谷氨酸-丙氨酸-甘氨酸(GEAG)。
根据权利要求61-62中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

L ³选自以下组：丙氨酸-丙氨酸(AA)、甘氨酸-丙氨酸-谷氨酸(GAE)、甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GEG)、丙氨酸-谷氨酸(AE)、谷氨酸-甘氨酸(EG)和甘氨酸-谷氨酸(GE)。
根据权利要求31-63中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述L包含-L ³-L ²-L ¹-、或-L ³-L ¹-；

优选地L选自
根据权利要求36-63中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述Lx包含-L ³-L ²-L ^1x、或-L ³-L ^1x；

优选地Lx选自
根据权利要求33-35中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

所述其中，Ab包含抗体或其抗原结合片段。
根据权利要求66所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，所述抗体选自以下组：鼠源抗体、嵌合抗体、人源化抗体和全人源抗体。
根据权利要求66所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，所述抗原结合片段选自以下组：Fab，Fab′，Fv片段，F(ab') ₂，F(ab) ₂，scFv，di-scFv，VHH和dAb。
根据权利要求66-68中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，N ^a-I为约0至约20的数。
根据权利要求66-69中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中，Ab靶向选自以下组的靶点：

AXL,BAFFR,BCMA,BCR–列表组分(BCR–list components),BDCA2,BDCA4,BTLA,BTNL2 BTNL3,BTNL8,BTNL9,C10orf54,CCR1,CCR3,CCR4,CCR5,CCR6,CCR7,CCR9,CCR10,CD11c,CD137,CD138,CD14,CD163,CD168,CD 177,CD19,CD20,CD209,CD209L,CD22,CD226,CD248,CD25,CD27,CD274,CD276,CD28,CD30,CD300A,CD33,CD37,CD38,CD4,CD40,CD44,CD45,CD46,CD47,CD48,CD5,CD52,CD55,CD56,CD59,CD62E,CD68,CD69,CD70,CD74,CD79a,CD79b,CD8,CD80,CD86,CD90.2,CD96,CLEC12A,CLEC12B,CLEC7A,CLEC9A,CR1,CR3,CRTAM,CSF1R,CTLA4,CXCR1/2,CXCR4,CXCR5,DDR1, DDR2,DEC-205,DLL4,DR6,FAP,FCamR,FCMR,FcR’s,Fire,GITR,HHLA2,II型HLA(HLA class II),HVEM,ICOSLG,IFNAR,IFNLR1,IL10R1,IL10R2,IL12R,IL13RA1,IL13RA2,IL15R,IL17RA,IL17RB,IL17RC,IL17RE,IL20R1,IL20R2,IL21R,IL22R1,IL22RA,IL23R,IL27R,IL29R,IL2Rg,IL31R,IL36R,IL3RA,IL4R,IL6R,IL5R,IL7R,IL9R,整合素(Integrins),LAG3,LIFR,MAG/Siglec-4(唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-4),MMR,MSR1,NCR3LG1,NKG2D,NKp30,NKp46,OX40(CD134)，PDCD1,PROKR1,PVR,PVRIG,PVRL2,PVRL3,RELT,SIGIRR,Siglec-1(唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素-1),Siglec-10,Siglec-5,Siglec-6,Siglec-7,Siglec-8,Siglec-9,SIRPA,SLAMF7,TACI,TCR–列表组分/assoc(TCR-listcomponents/assoc),PTCRA,TCRb,CD3z,CD3,TEK,TGFBR1,TGFBR2,TGFBR3,TIGIT,TLR2,TLR4,TNFα,TROY,TSLPR,TYRO,VLDLR,VSIG4,IL2R-y和VTCN1。
根据权利要求66-70中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中所述Ab选自以下组：抗TNFα抗体或其抗原结合片段，抗CD40抗体或其抗原结合片段，抗BDCA2抗体或其抗原结合片段和抗IFNAR1抗体或其抗原结合片段。
根据权利要求66-71中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段包含抗体的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，其中所述重链可变区包含阿达木单抗(Adalimumab)、英利昔单抗(Infliximab)、阿非莫单抗(Afelimomab)或戈利木单抗(golimumab)的重链可变区，所述轻链可变区包含阿达木单抗(Adalimumab)、英利昔单抗(Infliximab)、阿非莫单抗(Afelimomab)或戈利木单抗(golimumab)的轻链可变区。
根据权利要求72所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中所述抗TNFα抗体或其抗原结合片段包含抗体的重链和轻链，其中所述重链包含阿达木单抗(Adalimumab)、英利昔单抗(Infliximab)、阿非莫单抗(Afelimomab)或戈利木单抗(golimumab)的重链，所述轻链包含阿达木单抗(Adalimumab)、英利昔单抗(Infliximab)、阿非莫单抗(Afelimomab)或戈利木单抗(golimumab)的轻链。
根据权利要求66-71中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中所述抗CD40抗体或其抗原结合片段包含抗体的重链和轻链，其中所述重链包含 Iscalimab(CFZ533)的重链，所述轻链包含Iscalimab(CFZ533)的轻链。
根据权利要求66-71中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中所述抗IFNAR1抗体或其抗原结合片段包含抗体的重链和轻链，其中所述重链包含Anifrolumab(MEDI-546)的重链，所述轻链包含Anifrolumab(MEDI-546)的轻链。
根据权利要求66-71中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，

其中所述抗BDCA2抗体或其抗原结合片段包含抗体的重链和轻链，其中所述重链包含Litifilimab(BIIB059)的重链，所述轻链包含Litifilimab(BIIB059)的轻链。
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中，所述化合物包含选自以下组的结构：
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中，所述化合物包含选自以下组的结构：
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中，所述化合物包含选自以下组的结构：
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中，所述化合物包含选自以下组的结构：
一种化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物包含式(II-a1-C-1)、(II-a1-C-2)、(II- a1-C-3)、(II-a2-C-1)、式(II-a2-C-2)和式(II-a2-C-3)，

其中，

R ₁和R ₂各自独立地选自：氢、氕、氘、氚、卤素和C ₁-C ₆烷基；

R ₃选自：-CH ₂Cl、-CH ₂SH、-CH ₂OH、 -OCH ₃、-OCH ₂F、-OCH ₂Cl、-OCH ₂CN、-OCH ₂CH ₃、-SH、-SCH ₂F、-SCH ₂Cl、-SCH ₂CF ₃和-SCH ₂CN；

W选自 -CH(CH ₃)-和

N ^a-I为约0至约20的数；

式(II-a1-C-1)和(II-a2-C-1)中，Y各自独立地选自：氢、卤素、羟基、巯基、氨基、C ₁-C ₆烷基和-OC ₁-C ₆烷基；式(II-a1-C-2)、(II-a1-C-3)、(II-a2-C-2)和(II-a2-C-2)中，Y各自独立地选自：氢、卤素、羟基、巯基、氨基、C ₁-C ₆烷基、-OC ₁-C ₆烷基和-C ₁-C ₆烷基羟基；

yn选自0、1或2；

Ab选自抗体或其抗原结合片段；

L包含-L ³-L ²-L ¹-，

所述L ³可以不存在或者可以选自以下组：谷氨酸-甘氨酸(EG)、丙氨酸-丙氨酸(AA)、丙氨酸-谷氨酸(AE)、甘氨酸-谷氨酸-甘氨酸(GEG)、甘氨酸-丙氨酸-谷氨酸(GAE)、甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸(GFGG)、和瓜氨酸-缬氨酸(CV)，

所述L ²可以不存在或者可以选自以下组：

所述L ¹可以选自以下组：优选地，L为
根据权利要求81所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物选自：

其中，，N ^a-I为约0至约20的数，Ab选自抗体或其抗原结合片段。
根据权利要求82所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐，其中所述化合物选自：

其中，N ^a-I为约0至约20的数。
一种药物组合物，其包含权利要求1-26和28-83中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐和/或权利要求27-28中任一项所述的偶联物，以及任选地药学上可接受的载体。
一种影响免疫系统功能的方法，包括向受试者施用权利要求1-26和29-83中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐、权利要求27-28中任一项所述的偶联物和/或权利要求84所述的药物组合物。
权利要求1-26和29-83中任一项所述的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其混合物形式，或其可药用的盐、权利要求27-28中任一项所述的偶联物和/或权利要求84所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防和/或治疗疾病和/或症状；所述疾病和/或症状包含与糖皮质激素受体信号转导相关的疾病和/或症状。
根据权利要求86所述的用途，所述疾病和/或症状选自以下组：增生性疾病和/或症状、代谢性疾病和/或症状、炎症疾病和/或症状和神经退行性疾病和/或症状、系统性自身免疫疾病和/或症状、血液系统相关疾病和/或症状、神经肌肉系统相关疾病和/或症状、消化系统相关疾病和/或症状、泌尿系统相关疾病和/或症状、内分泌腺系统相关疾病和/或症状、皮肤肌肉系统相关疾病和/或症状、和呼吸系统系统相关疾病和/或症状类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、硬皮病、干燥综合症、强直性脊柱炎、韦格纳肉芽肿病和系统性硬化自身免疫性溶血性贫血、恶性贫血、特发性血小板减少性紫癜、特发性血小板减少症和血管炎、多发性硬化、重症肌无力和古兰巴雷综症、溃疡性结肠炎、克隆恩病、自身免疫性肝病和萎缩性胃炎、IgA肾病、原发性肾病综合征、自身免疫性肾小球肾炎、肺肾出血综合征和狼疮肾炎、I型糖尿病、Grave's病、桥本甲状腺炎、原发性肾上腺皮质萎缩和慢性甲状腺炎、银屑病、寻常型天孢疹、皮肤红斑狼疮、皮肌炎和风湿性多肌痛和哮喘。