CN118141842A - 益生菌组合物在制备用于治疗肠道感染症状的药物中的用途 - Google Patents

益生菌组合物在制备用于治疗肠道感染症状的药物中的用途 Download PDF

Info

Publication number
CN118141842A
CN118141842A CN202211563157.6A CN202211563157A CN118141842A CN 118141842 A CN118141842 A CN 118141842A CN 202211563157 A CN202211563157 A CN 202211563157A CN 118141842 A CN118141842 A CN 118141842A
Authority
CN
China
Prior art keywords
lactobacillus
cfu
medicament
bifidobacterium
use according
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202211563157.6A
Other languages
English (en)
Inventor
尚云龙
黄岭
闫天文
任倩蕾
张颖
胡义成
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hangzhou Grand Biologic Pharmaceutical Inc
Original Assignee
Hangzhou Grand Biologic Pharmaceutical Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hangzhou Grand Biologic Pharmaceutical Inc filed Critical Hangzhou Grand Biologic Pharmaceutical Inc
Priority to CN202211563157.6A priority Critical patent/CN118141842A/zh
Publication of CN118141842A publication Critical patent/CN118141842A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/742—Spore-forming bacteria, e.g. Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, clostridium or Lactobacillus sporogenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/745—Bifidobacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明提供益生菌组合物在制备用于治疗肠道感染症状的药物中的用途，其中，所述益生菌组合物包含双歧杆菌、乳杆菌、球菌和芽孢杆菌。该益生菌组合物对于治疗由大肠杆菌引起的肠道感染症状具有针对性治疗作用，同时剂量低、疗效好，降低了治疗成本。

Description

益生菌组合物在制备用于治疗肠道感染症状的药物中的用途
技术领域
本发明属于生物医药领域。具体地，本发明涉及一种益生菌组合物在制备用于治疗由大肠杆菌引起的肠道感染症状的药物中的用途。
背景技术
肠道感染是婴幼儿常见的肠道疾病，儿童作为该疾病的高发人群，具有起病急、传播快的发病特点。我国5岁以下儿童的年发病率达到了每人2.1次，因此寻找更加合理有效的治疗方法是亟待解决的医疗问题。
引起小儿肠道感染的病原复杂多样，但其主要是由病毒和细菌感染所致，其中细菌性肠道感染，是我国急性传染病中发病数最多，流行面最广，影响群众生活最普遍的疾病。
目前治疗儿童肠道感染的常用方法有抗生素或使用益生菌辅助治疗等，但在治疗过程中这些方法都存在一定的限制。抗生素在传统的临床治疗中受到广泛应用，在治疗大肠埃希菌以及志贺氏菌时，常用的抗菌药物有头孢克肟、头孢曲松以及头孢噻肟等抗生素。然而，已有多项报道提示抗生素需要合理使用，尽量避免治疗过程中的滥用，这是由于一方面大肠埃希菌、志贺氏菌对许多传统抗生素有耐药性，敏感性不高；另一方面抗生素具有毒副作用，可以杀死体内有益的共生菌群，破坏微生态的平衡，削弱患儿的抗病能力，引起继发感染，使病程延长。
目前微生态制剂在儿童肠道感染治疗中被广泛使用，在微生态制剂对于肠道感染的研究中，病原多为轮状病毒，且目前的研究中所使用的益生菌剂量较高。如研究在感染大肠杆菌K99的新生犊牛饲粮中所使用的益生菌剂量为1.4×1010cfu/d。另外，很多研究结果显示益生菌治疗效果弱，起效慢，这些都限制了益生菌在肠道感染治疗中的应用。
因此，寻找一种药效强、安全且治疗成本低的儿童肠道细菌感染治疗药物是一个亟待解决公共卫生安全问题。
发明内容
针对以上问题，本发明的目的是提供一种益生菌组合物在制备用于治疗由大肠杆菌引起的肠道感染症状的药物中的用途。该益生菌组合物对于大肠杆菌所引起的肠道感染症状具有针对性预防和治疗作用，同时剂量低、疗效好，降低了治疗成本。
本发明的上述目的是通过提供以下技术方案实现的：
本发明提供了一种益生菌组合物在制备用于治疗由大肠杆菌引起的肠道感染症状的药物中的用途，其中，所述益生菌组合物包含双歧杆菌、乳杆菌、球菌和芽孢杆菌；
所述肠道感染症状选自粪便含水量增加、结直肠长度缩短、肠组织病变、细胞因子水平升高或粪便菌群紊乱中的一种或多种。
优选地，所述益生菌组合物仅包含双歧杆菌、乳杆菌、球菌和芽孢杆菌作为活性成分。
本发明的发明人出乎意料地发现，本发明提供的益生菌组合物对于治疗由大肠杆菌引起的肠道感染症状具有良好的针对性治疗作用，在较低剂量下就能够得到良好的疗效，降低了治疗成本。
优选地，所述益生菌组合物中，双歧杆菌、乳杆菌、球菌和芽孢杆菌的活菌数之比为1-100:1-100:1-100:1，优选为1-20:1-20:1-20:1。
优选地，所述药物包含的活菌总数不低于1×105cfu/g，优选为1×105至4×109cfu/g，更优选为1×106至6×106cfu/g。
优选地，所述药物包含的双歧杆菌的活菌数不低于1×105cfu/g，优选为1×106至1×109cfu/g。
优选地，所述药物包含的乳杆菌的活菌数不低于1×105cfu/g，优选为1×106至1×109cfu/g。
优选地，所述药物包含的球菌的活菌数不低于1×105cfu/g，优选为1×106至1×109cfu/g。
优选地，所述药物包含的芽孢杆菌的活菌数不低于1×104cfu/g，优选为1×105至1×108cfu/g。
优选地，所述双歧杆菌(Bifidobacterium)选自青春双歧杆菌(Bifidobacteriumadolescentis)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)或长双歧杆(Bifidobacterium longum)中的一种或多种，优选为婴儿双歧杆菌。
优选地，所述乳杆菌(lactobacillus)选自嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、卷曲乳杆菌(Lactobacilluscrispatus)、德氏乳杆菌保加利亚亚种(保加利亚乳杆菌)(Lactobacillus delbrueckiisubsp.Bulgaricus(Lactobacillus bulgaricus))、德氏乳杆菌乳亚种(Lactobacillusdelbrueckii subsp.Lactis)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)、格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)、清酒乳杆菌(Lactobacillus sakei)或弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus)中的一种或多种，优选为嗜酸乳杆菌。
优选地，所述球菌(Enterococcus)选自粪肠球菌(Enterococcus faecalis)；链球菌(Streptococcus)，如嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)；乳球菌(galactococcus)，如乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus Lactis subsp.lactis)、乳酸乳球菌乳脂亚种(Lactococcus Lactis subsp.cremoris)、乳酸乳球菌双乙酰亚种(Lactococcus Lactis subsp.diacetylactis)；明串球菌(Leuconostoc)，如肠膜明串珠菌肠膜亚种(Leuconostoc mesenteroides subsp.mesenteroides)；片球菌(Pediococcus)，如乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)；或葡萄球菌(Staphylococcus)，如小牛葡萄球菌(Staphylococcus vitulinus)、木糖葡萄球菌(Staphylococcus xylosus)、肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)中的一种或多种，优选为粪肠球菌。
优选地，所述芽孢杆菌(Bacillus)选自蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)和/或凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)，优选为蜡样芽孢杆菌。
进一步优选地，所述婴儿双歧杆菌为菌种保藏号为CGMCC No.0460.1的婴儿双歧杆菌。
进一步优选地，所述嗜酸乳杆菌为菌种保藏号为CGMCC No.0460.2的嗜酸乳杆菌。
进一步优选地，所述粪肠球菌为菌种保藏号为CGMCC No.0460.3的粪肠球菌。
进一步优选地，所述蜡样芽孢杆菌为菌种保藏号为CGMCC No.0460.4的蜡样芽孢杆菌。
优选地，所述药物还包含药学上可接受的辅料。
优选地，所述药学上可接受的辅料选自填充剂、水分调节剂、酸味调节剂、助流剂或香精中的一种或多种。
优选地，所述填充剂选自海藻糖、乳糖或甘露醇中的一种或多种。
本发明的发明人发现，如果所述药学上可接受的辅料中包括甘露醇，甘露醇水分活度高，与婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌相容性稍差，因此，所述药学上可接受的辅料中需要添加水分调节剂，以降低水分，以提高甘露醇与婴儿双歧杆菌和嗜酸乳杆菌的相容性。
优选地，所述水分调节剂为可溶性淀粉。
优选地，所述可溶性淀粉选自玉米可溶性淀粉和/或马铃薯可溶性淀粉。
本发明的发明人发现，马铃薯可溶性淀粉在不同环境下的吸湿性低于玉米可溶性淀粉或其他来源可溶性淀粉，进而采用马铃薯可溶性淀粉制备的散剂制剂的稳定性更高。
优选地，所述酸味调节剂选自枸橼酸和/或枸橼酸钠。
优选地，所述助流剂为二氧化硅。
优选地，所述药物的目标群体为全年龄段的患者，优选为婴幼儿患者。
优选地，所述药物为片剂、散剂或胶囊剂，优选为散剂。
优选地，所述肠道感染为感染性腹泻。
本发明至少具有如下有益效果：
本发明提供的益生菌组合物对于治疗由大肠杆菌引起的肠道感染症状具有针对性治疗作用，同时剂量低，疗效好，降低了治疗成本。
本发明提供的益生菌组合物对于治疗由大肠杆菌引起的肠道感染症状避免了抗生素治疗导致的大肠杆菌对抗生素的耐药性增加、敏感性降低；同时还避免了抗生素的毒副作用，如杀死体内有益的共生菌群，破坏微生态的平衡，削弱患儿的抗病能力，引起二重感染，使病程延长等。
本发明提供的益生菌组合物对于由大肠杆菌引起的粪便含水量增加、结直肠长度缩短、肠组织病变、细胞因子水平升高或粪便菌群紊乱具有显著的治疗作用，其能够降低粪便含水量，降低细胞因子的表达，改善感染所引起的结直肠缩短以及肠组织病理变化，并且可以起到调节肠道微生物多样性，以低剂量即可达到治疗效果，有利于降低治疗成本，并且可以避免抗生素等药物治疗所引起的不良反应。
附图说明
以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：
图1为大肠杆菌致幼鼠肠道感染模型中动物结肠组织病理变化(40x)，其中，(a)为正常对照组；(b)为模型组；(c)为益生菌组；(d)头孢克肟组。
图2为大肠杆菌致幼鼠肠道感染模型中动物结肠组织病理变化(200x)，其中，(a)为正常对照组；(b)为模型组；(c)为益生菌组；(d)头孢克肟组。
图3为大肠杆菌致幼鼠肠道感染模型中动物结肠组织病理评分(mean±SD，n＝10)，*p＜0.05，与模型组比较。
图4为大肠杆菌致幼鼠肠道感染模型中肠道微生物群的Alpha多样性分析，其中，C为正常对照组；M为模型组；S为益生菌组；P为头孢克肟组。
图5为大肠杆菌致幼鼠肠道感染模型中肠道微生物群的PCoA分析，其中，C为正常对照组；M为模型组；S为益生菌组；P为头孢克肟组。
图6为大肠杆菌致幼鼠肠道感染模型中属水平物种相对丰度堆积柱状图，其中，C为正常对照组；M为模型组；S为益生菌组；P为头孢克肟组。
图7为大肠杆菌致幼鼠肠道感染模型中属水平LDA得分图，其中，C为正常对照组；M为模型组；S为益生菌组；P为头孢克肟组。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
实施例1益生菌组合物的制备
1.1益生菌的冻干：将婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌进行二次活化之后，将益生菌粉制成冻干菌粉。
其中，婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)的菌种保藏号为CGMCCNo.0460.1(保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2000年06月20日)；
嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)的菌种保藏号为CGMCC No.0460.2(保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2000年06月20日)；
粪肠球菌(Enterococcus faecalis，又名粪链球菌(Streptococcus faecalis))的菌种保藏号为CGMCC No.0460.3(保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2000年06月20日)；
蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)的菌种保藏号为CGMCC No.0460.4(保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2000年06月20日)。
1.2益生菌组合物菌液的制备：将婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌、蜡样芽孢杆菌菌粉按计算量在ddH2O中混合，获得益生菌组合物菌液。
其中，益生菌组合物菌液包含的活菌总数为3.1×106cfu/g，婴儿双歧杆菌的活菌数为1×106cfu/g，嗜酸乳杆菌的活菌数为1×106cfu/g，粪肠球菌的活菌数为1×106cfu/g，蜡样芽孢杆菌的活菌数为1×105cfu/g；婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪肠球菌和蜡样芽孢杆菌的活菌数之比为10:10:10:1。
实施例2益生菌组合物-大肠杆菌的动物实验
2.1实验动物
选用C57BL/6N幼鼠，SPF级，雄性，8-10g/只。动物饲养条件设定为室温20-22℃，湿度40-70％，光照/黑暗12h明暗交替。垫料每周至少更换2次，同时更换饲养盒，遇有异常情况随时更换饲养盒。每天更换消毒饮水瓶和瓶塞，每两周消毒1次笼架。所有换洗的笼具清洗过后均采用高压灭菌。
2.2实验方法
2.2.1分组与剂量
幼鼠分组：幼鼠按体重随机分组，分为正常对照组(不感染大肠杆菌)和感染大肠杆菌组；感染大肠杆菌的幼鼠又分为：模型组(不给药)、益生菌组(给予实施例1制得的益生菌组合物菌液)和头孢克肟组(给予头孢克肟钠)。
幼鼠预处理：除正常对照组外，其余幼鼠在大肠杆菌感染前4天，连续给予四联抗生素饮用水(庆大霉素、万古霉素、甲硝唑和多粘菌素)，以破坏驻留微生物群，然后再换为正常饮用水，以清除抗生素。
幼鼠接种大肠杆菌：除正常对照组外，其余幼鼠接种大肠杆菌(标准菌株，编号CICC10413)。每只幼鼠经口灌胃100μL(4×1010cfu/mL)，共接种1次，接种时间记为Day0。
幼鼠给药：益生菌组和头孢克肟组感染后Day1天开始给药，每天给药1次，连续给药5天。益生菌组每次给药量为：婴儿双歧杆菌6.8×105cfu/kg，嗜酸乳杆菌6.8×105cfu/kg，粪肠球菌6.8×105cfu/kg，蜡样芽孢杆菌6.8×104cfu/kg；头孢克肟组每次给药量为33.3mg/kg。
2.2.2试验指标
粪便评分：治疗期间每天对幼鼠粪便情况进行观察评分(粪便分为6级，1级为正常便，2级为黄色成形软便，3级为黄色糊状便，4级为黄色水样黏液便，5级为黄色蛋汤样便，6级为完全黄色水样便。3级(黄色糊状便)及以上为肠道感染，4-5级为轻度感染，6级为重度感染。症状的判断由同一人完成)。数据表示为平均数±标准差(Mean±SD)。
结直肠长度：末次给药后，处死幼鼠，量取幼鼠结直肠长度。
肠组织病理分析：取盲肠端结肠进行肠组织病理分析。
细胞因子检测：取空肠和回肠，使用Mouse IL-1βKit进行IL-1β细胞因子的检测。
粪便菌群分析：取盲肠处粪便进行粪便菌群分析。
统计学分析：根据显著性检验方法得到p值，其中，p<0.05为有统计学差异，p<0.01为有显著统计学差异。
2.3实验结果
2.3.1粪便评分
治疗第4天，益生菌组及头孢克肟组幼鼠肠道感染症状显著缓解，粪便评分与模型组比较显著下降；治疗第5天益生菌组和头孢克肟组幼鼠粪便评分与模型组比较均显著下降，具体数据如表1所示。
表1.大肠杆菌致幼鼠肠道感染模型粪便评分(Mean±SD，n＝11-15)
##p＜0.01，与正常对照组比较；**p<0.01，与模型组比较；
#p＜0.05，与正常对照组比较；*p<0.05，与模型组比较。
2.3.2结直肠长度
与正常对照组相比，模型组幼鼠的结直肠长度显著下降(6.2±0.6cm，p＜0.01)；与模型组比较，益生菌组及头孢克肟组幼鼠结直肠长度均显著恢复，具体数据如表2所示。
表2.大肠杆菌致幼鼠肠道感染模型结直肠长度(Mean±SD，n＝11-15)
##p＜0.01，与正常对照组比较；**p<0.01，与模型组比较；
#p＜0.05，与正常对照组比较；*p<0.05，与模型组比较。
2.3.3肠组织病理分析
如图1至图3所示，与正常对照组比较，大肠杆菌感染后，模型组幼鼠的结肠组织学损伤的特征是上皮完整性丧失、黏膜下层中度水肿和炎症细胞浸润到固有层和黏膜下层，组织病理评分显著升高(p＜0.01)。与模型组相比，益生菌组幼鼠的结肠组织学损伤明显减少，黏膜下层水肿大大减轻，组织细胞有序性显著增强，炎症细胞浸润显著减少，组织病理评分显著下降(p＜0.05)。
2.3.4细胞因子检测
与正常对照组比较，模型组幼鼠的结肠肠组织中IL-1β的水平显著增加(p＜0.01)；与模型组比较，益生菌组和头孢克肟组幼鼠的肠组织中IL-1β的水平显著下降(p＜0.01)；并且益生菌组的治疗效果优于头孢克肟组。
2.3.5粪便菌群分析
2.3.5.1Alpha多样性分析
利用Chao1指数、Observed species指数、Shannon指数和Simpson指数判断肠道微生物的Alpha多样性。如图4所示，大肠杆菌感染后，模型组幼鼠的肠道微生物Alpha多样性与正常对照组相比发生明显变化。采用益生菌治疗后，益生菌组幼鼠的肠道微生物多样性开始恢复，与正常对照组接近。而头孢克肟组幼鼠的Alpha多样性略差于模型组，说明抗生素类药物的使用可能会影响肠道微生物的Alpha多样性。
2.3.5.2Beta多样性分析
如图5所示，正常对照组与各个实验组分布在PCoA分析图的不同部分，证明各个实验组幼鼠的肠道菌群的结构发生了明显改变。其中，益生菌组基本分布于正常对照组附近，说明二者的肠道菌群较为接近；而头孢克肟组的分布基本均远离正常对照组，说明二者肠道菌群组成相差较大。
2.3.5.3属水平各实验组物种相对丰度
如图6所示，模型组的拟杆菌属(Bacteroides)、大肠杆菌-志贺氏菌属(Escherichia-Shigella)和副拟杆菌属(Parabacteroides)的相对丰度有明显上调，采用益生菌治疗后，有一定程度的下降；同时，益生菌Muribaculaceae的相对丰度有所提高，而头孢克肟组Muribaculaceae的相对丰度出现下降的现象。
结合图7分析，益生菌治疗组中Muribaculum和Prevotellaceae_UCG_001相较于模型组均呈现出丰度上调。Muribaculum和Prevotellaceae_UCG_001能够产生SCFAs的益生菌，Muribaculum产生丙酸盐作为主要发酵产物，具有复杂的碳水化合物降解潜力，而随着给药丰度下调的菌群微生物则有Bacteroides、Clade_Ia和Clostridium_innocuum。
2.3.5.3差异物种LEfSe图
利用LefSe分析(Linear discriminant analysis effect size，线性判别分析)，可以进行组间的比较，从而找到组间在相对丰度上有显著差异的特征物种。图7为LDA得分图，设置LDA得分需大于2，图中展示LDA分数大于2的具有统计学显著性差异的前25个生物标志物。其中菌属Alloprevotella可以产生短链脂肪酸，数据显示模型组Alloprevotella的相对丰度相比正常对照组明显降低，经过治疗，益生菌组Alloprevotella相对丰度明显恢复，头孢克肟组丰度下降。
Alistipes能够生产短链脂肪酸，主要为丙酸盐和乙酸盐，在肠道炎症中具有保护作用，肠道菌群丰度数据显示：相比于正常对照组，模型组的Alistipes相对丰度显著降低；益生菌组相比模型组相对丰度显著提升，且提高的幅度优于头孢克肟组。
以上所述仅是本发明的几个示例性实施例，并非对本发明做任何形式的限制。虽然本发明以较佳的实施例揭示如上，然而其并非用以限制本发明。任何熟悉本专业的技术人员在不脱离本发明技术方案的范围内，利用上述揭示的技术内容做出些许的变动或修饰获得等同或等效实施例均属于本发明的范围。

Claims (10)

1.一种益生菌组合物在制备用于治疗由大肠杆菌引起的肠道感染症状的药物中的用途，其中，所述益生菌组合物包含双歧杆菌、乳杆菌、球菌和芽孢杆菌；
所述肠道感染症状选自粪便含水量增加、结直肠长度缩短、肠组织病变、细胞因子水平升高或粪便菌群紊乱中的一种或多种。
2.根据权利要求1所述的用途，其中，所述益生菌组合物仅包含双歧杆菌、乳杆菌、球菌和芽孢杆菌作为活性成分。
3.根据权利要求1或2所述的用途，其中，所述益生菌组合物中，双歧杆菌、乳杆菌、球菌和芽孢杆菌的活菌数之比为1-100∶1-100∶1-100∶1，优选为1-20∶1-20∶1-20∶1。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的用途，其中，所述药物包含的活菌总数不低于1×105cfu/g，优选为1×105至4×109cfu/g。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的用途，其中，所述药物包含的双歧杆菌的活菌数不低于1×105cfu/g，优选为1×106至1×109cfu/g；
优选地，所述药物包含的乳杆菌的活菌数不低于1×105cfu/g，优选为1×106至1×109cfu/g；
优选地，所述药物包含的球菌的活菌数不低于1×105cfu/g，优选为1×106至1×109cfu/g；
优选地，所述药物包含的芽孢杆菌的活菌数不低于1×104cfu/g，优选为1×105至1×108cfu/g。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的用途，其中，所述双歧杆菌选自青春双歧杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌或长双歧杆中的一种或多种，优选为婴儿双歧杆菌；
优选地，所述乳杆菌选自嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、卷曲乳杆菌、保加利亚乳杆菌、德氏乳杆菌乳亚种、发酵乳杆菌、格氏乳杆菌、瑞士乳杆菌、约氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、唾液乳杆菌、清酒乳杆菌或弯曲乳杆菌中的一种或多种，优选为嗜酸乳杆菌；
优选地，所述球菌选自粪肠球菌、链球菌、乳球菌、明串球菌、片球菌或葡萄球菌中的一种或多种，优选为粪肠球菌；
优选地，所述芽胞杆菌选自蜡样芽孢杆菌和/或凝结芽孢杆菌，优选为蜡样芽孢杆菌。
7.根据权利要求6所述的用途，其中，所述婴儿双歧杆菌为菌种保藏号为CGMCCNo.0460.1的婴儿双歧杆菌；
优选地，所述嗜酸乳杆菌为菌种保藏号为CGMCC No.0460.2的嗜酸乳杆菌；
优选地，所述粪肠球菌为菌种保藏号为CGMCC No.0460.3的粪肠球菌；
优选地，所述蜡样芽孢杆菌为菌种保藏号为CGMCC No.0460.4的蜡样芽孢杆菌。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的用途，其中，所述药物还包含药学上可接受的辅料；
优选地，所述药学上可接受的辅料选自填充剂、水分调节剂、酸味调节剂、助流剂或香精中的一种或多种；
优选地，所述填充剂选自海藻糖、乳糖或甘露醇中的一种或多种；
优选地，所述水分调节剂为可溶性淀粉；更优选地，所述可溶性淀粉选自玉米可溶性淀粉和/或马铃薯可溶性淀粉；
优选地，所述酸味调节剂选自枸橼酸和/或枸橼酸钠；
优选地，所述助流剂为二氧化硅。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的用途，其中，所述药物的目标群体为全年龄段的患者，优选为婴幼儿患者；
优选地，所述药物为片剂、散剂或胶囊剂，优选为散剂。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的用途，其中，所述肠道感染为感染性腹泻。
CN202211563157.6A 2022-12-06 2022-12-06 益生菌组合物在制备用于治疗肠道感染症状的药物中的用途 Pending CN118141842A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211563157.6A CN118141842A (zh) 2022-12-06 2022-12-06 益生菌组合物在制备用于治疗肠道感染症状的药物中的用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211563157.6A CN118141842A (zh) 2022-12-06 2022-12-06 益生菌组合物在制备用于治疗肠道感染症状的药物中的用途

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN118141842A true CN118141842A (zh) 2024-06-07

Family

ID=91290930

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202211563157.6A Pending CN118141842A (zh) 2022-12-06 2022-12-06 益生菌组合物在制备用于治疗肠道感染症状的药物中的用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN118141842A (zh)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Bustamante et al. Probiotics and prebiotics potential for the care of skin, female urogenital tract, and respiratory tract
US5837238A (en) Treatment of diarrhea
US8481025B2 (en) Composition for maintaining healthy kidney function
CN107815432B (zh) 一种人用灭活乳酸菌制剂及其用途
BRPI0314060B1 (pt) composição compreendendo variante ou componente de variante de lactobacillus fermentum e usos da variante ou componente de variante de lactobacillus fermentum e da composição
KR101228035B1 (ko) 신규한 유산균 및 이를 포함하는 당뇨병 예방 및 치료용 조성물
CN1357038A (zh) 乳酸细菌的组合及其用于预防和/或治疗感染和炎症的用途
EP1162987A1 (en) Pharmaceutical composition for medical and veterinary use for regenerating intestinal flora in diarrhoea or dyspeptic syndrome
CA3123125A1 (en) Strains, composition and method of use
ES2331650T3 (es) Utilizacion de bacterias probioticas en el tratamiento de una infeccion.
KR101940001B1 (ko) 신장 기능을 강화시키는 조성물 및 방법
JP5681533B2 (ja) 消化管痛の予防又は軽減剤
CN1708316A (zh) 抑制酵母生长的方法
US20220000948A1 (en) Method for reducing the transfer of pathogenic microorganisms
US11179426B2 (en) Composition and method for maintaining healthy kidney function
CN118141842A (zh) 益生菌组合物在制备用于治疗肠道感染症状的药物中的用途
CN112546074B (zh) 一株能够抑制IL-23、Th17轴相关炎症因子释放的短双歧杆菌及其应用
CN118680957A (zh) 益生菌组合物在制备用于治疗肠道感染症状的药物中的用途
CN113041266A (zh) 一株改善银屑病样小鼠病理特征的干酪乳杆菌及其应用
US12128077B2 (en) Strains, composition and method of use
TWI802009B (zh) 使用熱致死的乳酸菌菌株來治療和/或預防微粒物質-誘發的肺損傷
Lunder Reviewing clinical studies of probiotics as dietary supplements: probiotics for atopic and allergic disorders, urinary tract and respiratory infections
US20240050493A1 (en) Strains, compositions and methods of use
CN116407569A (zh) 抗过敏益生菌组合物及其用途
Saxelin et al. Developing a multispecies probiotic combination.

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication