CN118126051A - 突变体braf降解剂的多晶型物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了有利的(3R)‑3‑[6‑[2‑氰基‑3‑[[乙基(甲基)氨磺酰基]氨基]‑6‑氟代苯氧基]‑4‑氧代喹唑啉‑3‑基]‑8‑[2‑[1‑[3‑(2,4‑二氧代‑1,3‑二嗪烷‑1‑基)‑5‑氟‑1‑甲基吲唑‑6‑基]‑4‑羟基哌啶‑4‑基]乙酰基]‑1‑氧杂‑8‑氮杂螺[4.5]癸烷(化合物1)的分离的多晶型B和F(其为突变体BRAF降解剂)，和制备用于治疗应用的化合物1多晶型的方法。本发明还提供了合成化合物1的改进方法，以及用于施用化合物1多晶型的新型药物组合物。

Description

突变体BRAF降解剂的多晶型物及其制备方法
技术领域
本发明提供了有利的作为突变体BRAF降解剂的(3R)-3-[6-[2-氰基-3-[[乙基(甲基)氨磺酰基]氨基]-6-氟代苯氧基]-4-氧代喹唑啉-3-基]-8-[2-[1-[3-(2,4-二氧代-1,3-二嗪烷-1-基)-5-氟-1-甲基吲唑-6-基]-4-羟基哌啶-4-基]乙酰基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(化合物1)的分离的多晶型物，和制备化合物1多晶型物以用于本文进一步描述的治疗应用的方法。本发明还提供了合成化合物1及其同位素(例如氘)衍生物的改进方法，以及包含化合物1或化合物1多晶型物的新药物组合物。
背景技术
BRAF是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，其是信号转导蛋白激酶的成员。BRAF在丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号传导通路中起着关键作用，且在约8％的所有人类癌症中发生突变，包括黑色素瘤(约60％)、甲状腺癌(约60％)和肺腺癌(约10％)。在甲状腺癌、结肠直肠癌、肺癌和其他癌症中也鉴定了BRAF突变。在BRAF中最常见的突变是V600E(I类)，其发生在一半的恶性黑色素瘤中。该突变使ERK过度激活，并作为RAF抑制剂敏感单体发挥作用。其他常见的激活突变包括II类突变如G469A和III类突变如G466V。II类和III类突变通过促进RAF同二聚化或异二聚化激活ERK。
BRAF蛋白提供了一种信号传播的机制，其需要蛋白同二聚化(BRAF-BRAF)或与其他RAF蛋白的异二聚化(BRAF-RAF1或BRAF-ARAF)。当BRAF发生突变时，如在具有BRAFV600E/K置换的肿瘤学适应症中观察到的，BRAF信号传导变得不依赖于同二聚体和/或异二聚体。激酶活性作为单体蛋白变得变得过度激活，并驱动细胞增殖信号。
已经描述了几种可抑制单体BRAF而非二聚体BRAF的BRAF抑制剂，包括维莫非尼、达拉菲尼和encorafenib。然而，耐药性通常在一年内出现，包括RAS突变、BRAFV600E扩增和BRAFV600E基因内缺失或剪接变体。这些抑制剂对通过促进RAF均二聚化或异二聚化激活ERK的非V600 BRAF突变体(II类和III类)也无效。
尽管可用的BRAF抑制剂具有治疗益处，但对这些药物的抗肿瘤反应的持续时间可能因出现耐药性而受到限制。
WO2021/116055和WO2021/116050中描述了BRAF抑制剂的实例。
BRAF降解化合物的非限制性实例包括WO2018/119448、WO2019/199816、WO2020/051564和WO2022/047145中所描述的那些化合物。
尽管具有这些努力，但仍需要新的治疗药物和途径来治疗BRAF介导的癌症，尤其是治疗突变体BRAF介导的癌症的药物。
发明内容
发现了化合物1的两种稳定的结晶多晶型，晶型B和钠盐晶型F。
由于其高稳定性、可扩展性和可再现性，多晶型B优于化合物1的其他多晶型物。例如，当化合物1晶型B在开口容器中在25℃/92％相对湿度下、在开口容器中在40℃/75％ RH下和在密闭容器中在60℃下在一周内测试稳定性时，化合物1晶型B表现出优异的化学和物理稳定性，而没有纯度、晶体形式和结晶度的任何变化(参见实施例15，体积稳定性)。当化合物1晶型B在25℃下的水吸附和解吸附实验中测试时(参见实施例16)，化合物1晶型B表现出优异的稳定性且无结晶度变化，仅具有轻微的吸湿性(在95％ RH下水吸收1.6％)。化合物1晶型B在压缩(2MPa和10MPa，实施例17)、干磨和湿法制粒条件下(实施例18-19)下也显示出优异的多晶型稳定性。水或乙醇存在下的湿法制粒实验也表明结晶度没有变化(实施例19)。化合物1晶型B的这些有利且有益的稳定性特征是使化合物1晶型B及其药物组合物的保质期延长的有用性质，并且允许在生产规模制备时提高纯度和可重复性。化合物1晶型B在高湿度条件下的高稳定性对于药物组合物的开发和制造是有用和有益的。这些性质也可用于调节化合物1的递送速率用于提高治疗效果。
钠盐晶型F也显示出良好的物理化学特性，包括良好的结晶度、化学计量、高脱水温度和良好的反离子安全性。当化合物1晶型F在开口容器中于25℃/92％相对湿度下、在开口容器中于40℃/75％ RH下和在密闭容器中于60℃下一周内测试稳定性时，化合物1晶型F表现出优异的多晶型稳定性(无晶型变化)(参见实施例25)。在25℃/92％ RH下的一周应激后，晶型F仅显示化学纯度略有下降(1.2％)，和在密闭容器中60℃下的一周应激后，结晶度略有下降。在25℃下的水吸附和解吸附实验(实施例27)中，化合物1的钠盐晶型F表现出优异的稳定性且无结晶度变化。化合物1晶型F的这些有利且有益的稳定性特征是增加化合物1晶型F及其药物组合物的保质期的有用性质，并且允许在生产规模制备时提高纯度和可重复性。这些性质也可用于制备含有化合物1晶型F的药物组合物，并调节化合物1的递送速率用于提高治疗效果。
化合物1是小分子的突变体BRAF降解剂，其通过泛素蛋白酶体途径降解突变体BRAF，例如I类、II类和/或III类突变体BRAF。化合物1与普遍表达的E3连接酶蛋白cereblon(CRBN)结合，并改变CRBN·E3泛素连接酶复合物的底物特异性，从而导致突变体BRAF(例如，BRAF V600E)的募集和泛素化。化合物1有效地降解I类突变体BRAF如V600E、II类突变体BRAF如G469A、III类突变体BRAF如G466V突变以及剪接变体如p61-BRAFV600E。例如，在A375细胞中，化合物1有力地降解BRAFV600E(Emax＝26％(即，74％的BRAF蛋白降解)；24小时DC50＝14nM)，并抑制ERK磷酸化(24小时IC50＝11nM)和细胞生长(96小时GI50＝94nM)。
在其他方面，提供了一种适合施用于人的新的有利的药物组合物，其包含根据本发明的化合物1或化合物1多晶型物。该有利的药物组合物包含化合物1或其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的赋形剂，其中该药物组合物是包含颗粒内和颗粒外颗粒的片剂，并且其中颗粒内颗粒包含化合物1。在某些实施方案中，化合物1或其药学上可接受的盐和一种或多种药学上可接受的赋形剂被喷雾干燥以形成喷雾干燥的分散体，然后被加工成颗粒内颗粒。在某些实施方案中，在喷雾干燥步骤前添加的颗粒内赋形剂包括溶解度增强剂，如乙酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯；和渗透增强剂，如d-α生育酚聚乙二醇琥珀酸酯。在某些实施方案中，向喷雾干燥的分散体中加入一种或多种另外的颗粒内赋形剂。在某些实施方案中，添加到喷雾干燥分散体的颗粒内赋形剂包括但不限于填充剂，如甘露醇；粘膜粘着剂/崩解剂，如交联羧甲基纤维素钠；流动助剂，如胶体二氧化硅；和粘合剂/助流剂，如微晶纤维素。在某些实施方案中，喷雾干燥的分散体和在喷雾干燥步骤后加入的颗粒内赋形剂共混、研磨，并任选地一起辊压成条带(ribbon)，和任选地加入润滑剂，如硬脂酸镁，其作为进一步的颗粒内赋形剂添加。在某些实施方案中，材料或条带随后研磨并与颗粒外赋形剂共混。
颗粒外赋形剂的非限制性实例包括但不限于粘合剂/助流剂，如微晶纤维素；粘膜粘着剂/崩解剂，如交联羧甲基纤维素钠；和润滑剂，如硬脂酸镁。在某些实施方案中，加入崩解剂作为颗粒外赋形剂将有助于片剂有效地崩解成小碎片。在某些实施方案中，崩解剂作为颗粒外和颗粒内赋形剂的存在确保片剂更有效的崩解。
包含颗粒内和颗粒外赋形剂的这种药物制剂具有改善的药物性质，例如改善的片剂崩解、药物释放、溶出特性和/或机械强度。
在某些实施方案中，包含化合物1的药物组合物由本文所述的多晶型物制备，例如化合物1晶型B。在某些实施方案中，化合物1晶型B可被溶解，和然后被喷雾干燥以与一种或多种药学上可接受的赋形剂形成固体喷雾干燥分散体。在一些方面，药物组合物包含化合物1、溶解度增强剂、渗透增强剂、填充剂、一种或多种粘合剂和/或助流剂以及一种或多种流动助剂。药学上可接受的赋形剂的非限制性实例包括羟丙甲纤维素(例如乙酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯)、维生素E(例如d-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯)、甘露醇、纤维素(例如微晶纤维素)、交联羧甲基纤维素钠、二氧化硅(例如未处理的热解胶体二氧化硅)和硬脂酸镁。在某些实施方案中，根据本发明的药物组合物被配制成单位剂量形式，例如口服单位剂量形式。在某些实施方案中，根据本发明的药物组合物被配制成片剂剂型。
在某些非限制性实施方案中，包含化合物1的药物组合物包含以下赋形剂。
还提供了一种制备包含根据本发明的化合物1或其药学上可接受的盐或者化合物1多晶型物的药物组合物的方法。在某些非限制性方面，制备包含化合物1的药物组合物的方法包括：(i)喷雾干燥步骤，以提供包含化合物1和药学上可接受的赋形剂的喷雾干燥中间体(SDI)；(ii)制粒步骤，以提供含有化合物1和一种或多种药学上可接受的赋形剂的颗粒，其具有约0.4至0.6g/mL(例如约0.48至0.54g/mL)的所需堆积密度；和(iii)压片步骤，以提供包含化合物1和药学上可接受的赋形剂的口服单位剂量形式的药物组合物。
包含本发明的化合物1或化合物1多晶型物的药物组合物可用于治疗突变体BRAF介导的癌症，例如但不限于黑色素瘤、肺癌(包括例如非小细胞肺癌)、结肠直肠癌(包括例如微卫星稳定的结肠直肠癌)、甲状腺癌(包括例如间变性甲状腺癌)或卵巢癌。在某些非限制性实施方案中，包含本发明的化合物1或化合物1多晶型物的药物组合物用于治疗由V600X突变体BRAF介导的实体肿瘤。可治疗的障碍的其他非限制性实例包括具有突变体BRAF驱动因子的实体瘤恶性肿瘤。
在某些实施方案中，可施用包含本发明的化合物1或其药学上可接受的盐或者化合物1多晶型物的药物组合物以治疗已对BRAF抑制剂产生抗性的癌症。
本发明还提供了以生产规模生产化合物1或其药学上可接受的盐或者其同位素衍生物如氘代衍生物的改进方法。
在某些方面，化合物1或其药学上可接受的盐的生产规模生产包括根据以下反应方案1的化合物A与化合物B的反应，导致形成酰胺键。在非限制性实施方案中，氘被置于代谢位点的α、β或γ位的原子上。
方案1：
在某些实施方案中，为了促进化合物A和化合物B之间的酰胺键形成，化合物B中的羧酸基团通过将羧酸羟基转化为更高反应性的基团而被激活。在某些实施方案中，化合物B中羧酸基团的激活通过使化合物B与激活羧酸的偶联剂反应进行。在某些实施方案中，偶联剂为TSTU(2-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸盐)。TSTU通过快速激活羧酸以形成N-琥珀酰亚胺基活性酯而用作有效的偶联剂，该酯与伯胺反应以形成羧酰胺。该反应适应于放大，且在水存在下是有效的和在醇基团存在下对胺是选择性的。
在某些实施方案中，化合物A和化合物B之间产生化合物1的反应可以使用单独的激活试剂进行，从而导致形成酰胺键。在某些实施方案中，化合物A和B之间的反应使用N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和EDCl(1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐)的组合或NHS和DCC(二环己基碳二亚胺)的组合进行。
在某些实施方案中，化合物A和/或化合物B具有至少一个所需的原子同位素取代，其量高于同位素的天然丰度，即被富集。在某些实施方案中，化合物A和/或化合物B的同位素衍生物用于方案1中所述的合成。在某些非限制性实施方案中，化合物A和/或化合物B包括氘原子或多个氘原子。在某些实施方案中，化合物A具有式A-d3，和化合物B具有式B-d4：
在某些实施方案中，化合物A或其同位素衍生物(例如氘衍生物)由下式的化合物C制备：
其中RX是氢或胺保护基。在某些实施方案中，胺保护基RX的非限制性实例包括但不限于苄氧羰基(Cbz)、对-甲氧基苯甲基羰基(Moz或MeOZ)、叔丁氧基羰基(BOC)、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)、苯甲酰基(bz)、苄基(Bn)、氨基甲酸酯、对-甲氧基苄基(PMB)、3,4-二甲氧基苄基(DMPM)、对-甲氧基苯基(PMP)和甲苯磺酰基(Ts)。在某些实施方案中，胺保护基RX是叔丁氧基羰基(BOC)。
本文所述的改进的合成方法包括制备手性纯化合物C的方法。化合物C作为(R)-和(S)-立体异构体的混合物或作为单个(R)-立体异构体用于合成化合物A：
化合物C的(R)-异构体。
在某些实施方案中，化合物C的(R)-立体异构体使用相应酮前体的转氨酶催化的还原胺化反应制备：
在该不对称合成反应中，例如，异丙基胺可以用作牺牲性胺供体源。
在其他实施方案中，化合物C的(R)-立体异构体通过外消旋化合物C和手性拆分酸之间形成的盐的非对映体再结晶，随后用碱释放所需的对映体而从外消旋化合物C制备。在某些实施方案中，手性拆分酸是焦谷氨酸。在某些实施方案中，手性拆分酸是D-扁桃酸，且用于从化合物C与D-扁桃酸的非对映体盐回收分离的化合物C的单个(R)-和(S)-对映体的碱是合适的无机碱，例如氢氧化钠，如方案2所示的。在其他方面，用于回收分离的对映体的碱是有机碱。
方案2：
在某些方面，化合物(R)-C用于制备化合物A或其同位素衍生物，如方案3所示。
这两种方法允许制备手性纯物质，而无需使用昂贵的手性色谱。该改进的方法还避免了损失大量高级合成材料(其具有不希望的手性)。因此，合成序列的生产量和可扩展性得到了显著提高。
在某些实施方案中，方案3中的步骤1包括使5-羟基邻氨基苯甲酸(2-氨基-5-羟基苯甲酸)或其同位素衍生物(例如氘代衍生物)与化合物(R)-C和原甲酸三烷基酯CH(OAlk)3(例如原甲酸三乙酯CH(OEt)3)反应，以生成包含喹唑啉-4-酮环体系的化合物D或其同位素衍生物。在某些实施方案中，2-氨基-5-羟基苯甲酸的同位素衍生物是2-氨基-3,4-6-三氘代-5-羟基苯甲酸。在某些实施方案中，方案3中的步骤2包括在碱(例如有机或无机碱，例如碳酸钾)的存在下，2,3,6-三氟苯甲腈和化合物D中的喹唑啉酮片段的羟基之间的亲核芳族置换反应(SNAr)，以得到作为单一对映体的化合物E或其同位素衍生物。在某些实施方案中，在方案3的步骤3中，化合物E或其同位素衍生物与[乙基(甲基)氨磺酰基]胺在碱(例如有机或无机碱，例如碳酸铯)存在下，在亲核芳族置换(SNAr)条件下反应，以得到化合物A或其同位素衍生物，而不损失其对映体纯度(例如>99％e.e.)。在某些实施方案中，在任选的步骤中，当化合物A或其同位素衍生物(例如氘代衍生物)中的氮原子被氮保护基RX保护时，该保护基例如苄氧羰基(Cbz)、对-甲氧基苄基羰基(Moz或MeOZ)、叔丁氧基羰基(BOC)、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)、苯甲酰基(bz)、苄基(Bn)、氨基甲酸酯、对-甲氧基苄基(PMB)、3,4-二甲氧基苄基(DMPM)、对-甲氧基苯基(PMP)或甲苯磺酰基(Ts)可被除去以释放化合物A中的游离氨基。在某些实施方案中，当氨基保护基RX为BOC时，脱保护反应在酸性条件下进行，例如但不限于水性介质和/或有机溶剂中的盐酸，例如丙酮或乙酸乙酯中的盐酸。
该合成序列可在生产规模下进行，以产生手性纯的异构体(例如，大于90％、95％或99％对映体纯度)。
在某些实施方案中，根据方案4中描述的反应序列制备化合物B或其同位素富集的衍生物，例如氘代衍生物。
方案4：
在某些实施方案中，方案4所示的根据本发明的化合物B或其同位素衍生物或盐的合成路线包括四个步骤。在某些实施方案中，第一步包括在亲核芳族置换反应(SNAr)条件下，具有任选被保护基RY保护的羧基的化合物F或其同位素衍生物与2,4,5-三氟苯甲腈的反应，以得到化合物G。在某些实施方案中，化合物F的同位素衍生物是2-(3,3,5,5-四氘代-4-羟基-4-哌啶基)乙酸叔丁酯。羧酸保护基RY的实例包括但不限于叔丁基(tBu)、三苯甲基(Trt)、2,4-二甲氧基苄基(Dmb)、9-芴基甲基(Fm)和苄基(Bn)。在某些实施方案中，羧酸保护基RY是叔丁基(tBu)。在某些实施方案中，步骤1的亲核芳族置换反应在碱存在下进行。在某些实施方案中，碱为有机或无机碱，且包括但不限于碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯或N,N-二异丙基乙基胺(DIEA，Hünig’s碱)。
通过在合适的溶剂(例如有机或无机溶剂，包括水和NMP(N-甲基-2-吡咯烷酮))中与甲基肼加热，将所得中间体化合物G转化为含有氨基吲唑环体系的化合物H。在某些实施方案中，在方案4的步骤3中，化合物K在Michael加成条件下化合物H与丙烯酸(或其衍生物，例如酯，例如甲酯或乙酯)的反应中由化合物H制备。在某些实施方案中，Michael加成条件包括碱性或酸性条件。在某些实施方案中，Michael加成条件包括使用稀释的盐酸水溶液作为用于Michael加成反应的介质。在某些实施方案中，化合物K在与氰酸盐的缩合反应中通过脲化合物L的中间体形成转化为化合物B，任选地随后除去(脱保护)保护基RY以得到根据本发明的化合物B(方案4中的步骤4a-b)。在某些实施方案中，方案4的步骤4a中使用的氰酸盐是在乙酸存在下使用的氰酸钠或氰酸钾。在某些实施方案中，方案4中的环化和脱保护步骤4b在酸性条件下进行，其包括但不限于使用稀盐酸。
参考方案1-4说明和描述的根据本发明的合成方法具有几个有利和有益的方面。根据本发明产生化合物1和/或其同位素如氘衍生物的改进方法的有利特征包括化合物1的高收率和/或高纯度。还提供了同位素如氘衍生物及其合成中间体，包括化学和手性纯度。根据本发明产生化合物1的改进方法的有利特征还包括高可靠性、可再现性、可扩展性和/或原子效率。
根据本发明的改进的合成方法的另一个有利和有益的方面在于，其是合成中间体和化合物1和/或其同位素(如氘)衍生物的无钯合成。在合成用于制备本发明提供的化合物1或其同位素(例如氘)衍生物的中间化合物和前体时使用无钯的条件允许避免最终药物物质被痕量的有毒和不希望的钯污染(该钯可能由于钯与中间体化合物和前体的络合而难以去除，其被带至合成的下游和/或最终步骤)，且因此可以消除另外的纯化步骤。钯是已知毒性的重金属，其可能损害骨髓、肾脏或肝脏，且在可能的情况下，在药物组合物和药物物质中避免。通过避免使用钯催化剂，避免了昂贵且耗时的钯清除的需求。
因此，根据本发明的化合物1及其同位素(例如氘)衍生物的无钯合成有利于化合物1、其多晶型物和衍生物作为药物物质和在药物组合物中的后续使用。
通过以下详细描述，本申请的其他特征和优点将变得明显。
因此，本发明包括至少以下特征：
(a)如本文所述的化合物1的多晶型物；
(b)化合物1晶型B；
(c)化合物1钠盐晶型F；
(d)药物组合物，其包含实施方案(a)-(c)中任一项的化合物1多晶型物和一种或多种药学上可接受的赋形剂；
(e)由实施方案(a)-(c)中任一项的化合物1多晶型物(例如多晶型B)制备的药物组合物；
(f)(e)的药物组合物，其中所述药物组合物由化合物1和一种或多种药学上可接受的赋形剂的喷雾干燥分散体制备；
(g)药物组合物，其包含化合物1或其药学上可接受的盐、溶解度增强剂、渗透增强剂、填充剂、粘合剂/助流剂和/或粘膜粘着剂/崩解剂。
(h)治疗由BRAF介导的障碍的方法，包括施用有效量的实施方案(a)-(g)中任一项的化合物1多晶型物或药物组合物；
(i)实施方案(a)-(g)中任一项的化合物1多晶型物或药物组合物用于治疗由BRAF介导的障碍的用途；
(j)实施方案(a)-(g)中任一项的化合物或药物组合物在制备用于治疗由BRAF介导的障碍的药物中的用途；
(k)治疗癌症的方法，包括施用有效量的实施方案(a)-(g)中任一项的化合物1多晶型物或药物组合物；
(l)用于治疗癌症的实施方案(a)-(g)中任一项的化合物1多晶型物或药物组合物；
(m)实施方案(a)-(g)中任一项的化合物1多晶型物或药物组合物用于治疗癌症的用途；
(n)实施方案(a)-(g)中任一项的化合物1多晶型物或药物组合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途；
(o)制备如本文所述化合物1晶型B的方法；和
(p)制备如本文所述的化合物1晶型F的方法。
附图说明
图1描述了化合物1晶型B的XRPD图谱。
图2描述了化合物1晶型B的DSC热谱图。
图3描述了化合物1晶型B的TGA热谱图。
图4描述了化合物1晶型B在25℃下的DVS等温线图。
图5描述了化合物1晶型B在25℃下的DVS质量变化曲线图。
图6描述了化合物1晶型B在DVS测试前后的XRPD覆盖图。
图7描述了化合物1晶型A的XRPD图谱。
图8描述了化合物1晶型A的DSC热谱图。
图9描述了化合物1晶型A的TGA热谱图。
图10描述了化合物1晶型C的XRPD图谱。
图11描述了化合物1晶型C的DSC热谱图。
图12描述了化合物1晶型C的TGA热谱图。
图13描述了化合物1晶型B样品在压缩前、在2MPa下压缩后和在10MPa下压缩后的XRPD图谱的覆盖图。
图14描述了在干磨前及干磨1、2和5分钟后化合物1晶型B样品的XRPD图谱的覆盖图。
图15描述了在水或乙醇存在下湿法制粒前和湿法制粒后化合物1晶型B样品的XRPD图谱的覆盖图。
图16描述了化合物1晶型C的XRPD图谱、化合物1晶型C在2-甲基四氢呋喃中经历约8个平衡循环后获得的XRPD图谱和化合物1晶型B的XRPD图谱的比较。作为平衡的结果，晶型C转化为更稳定的晶型B。
图17描述了化合物1晶型F的XRPD图谱。
图18描述了化合物1晶型F的DSC热谱图。
图19描述了化合物1晶型F的TGA热谱图。
图20描述了化合物1晶型F在25℃下的DVS等温线图。
图21描述了化合物1晶型F在25℃下DVS质量变化的曲线图。
图22描述了化合物1晶型F在DVS测试前后的XRPD覆盖图。
图23描述了化合物1钠盐晶型D的XRPD图谱。
图24描述了化合物1钠盐晶型D的DSC热谱图。
图25描述了化合物1钠盐晶型D的TGA热谱图。
图26描述了化合物1钠盐晶型E的XRPD图谱。
图27描述了化合物1钠盐晶型E的DSC热谱图。
图28描述了化合物1钠盐晶型E的TGA热谱图。
图29描述了化合物1钾盐晶型G的XRPD图谱。
图30描述了化合物1钾盐晶型G的DSC热谱图。
图31描述了化合物1钾盐晶型G的TGA热谱图。
图32描述了化合物1钾盐晶型H的XRPD图谱。
图33描述了化合物1钾盐晶型H的DSC热谱图。
图34描述了化合物1钾盐晶型H的TGA热谱图。
图35描述了在化合物1晶型A与甲醇中的1当量氢氧化钠的浆平衡中获得的化合物1钠盐晶型D的XRPD图谱、化合物1晶型A与在丙酮或乙腈中的1当量氢氧化钠的浆平衡中获得的非晶XRPD图谱及化合物1晶型A的XRPD图谱的比较。
图36描述了在化合物1晶型A与1当量碳酸氢钠NaHCO3的浆平衡中获得的化合物1钠盐晶型E(在甲醇中制备)和晶型F(在丙酮或乙腈中制备)的XRPD图谱与晶型A和晶型B的XRPD图谱的比较。
图37描述了通过晶型A在甲醇和乙腈中的1当量氨存在下的浆平衡获得的化合物1晶型I的XRPD图谱与晶型A的XRPD图谱的比较。
图38描述了(R)-8-(叔丁氧基羰基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-3-胺(R)-2-羟基-2-苯乙酸盐的单晶结构。
具体实施方式
定义
除非另有定义，本文中使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。在说明书中，单数形式也包括复数形式，除非上下文另有明确规定。尽管在本申请的实践和测试中可以使用与本申请中描述的方法和材料类似或等同的方法和材料，但下文描述了合适的方法和材料。本文中提及的所有公开出版物、专利申请、专利和其他参考文献均通过引用并入本文。在此引用的参考文献不被认为是要求保护的本申请的现有技术。在冲突的情况下，以本说明书(包括定义)为准。另外，材料、方法和实施例仅是说明性的，而非限制性的。
化合物使用标准命名法进行描述。除非另有定义，本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员通常理解的含义相同的含义。
术语―一‖和―一个‖不表示数量限制，而是表示存在至少一个所提及的项目。术语―或‖指―和/或‖。除非本文中另有说明，数值范围的列举仅旨在用作单独提及落入该范围内的每一单独数值的简写方法，且每一单独数值被并入本说明书，如同其在本文中被单独列举一样。所有范围的端点包含在该范围内且可独立组合。除非本文中另有说明或上下文另外明显矛盾，本文中所述的所有方法可按适当顺序进行。除非另有声明，使用示例或示例性语言(例如，―如‖)仅旨在更好地说明本发明，而不对本发明的范围构成限制。
术语―烷基‖单独或组合表示具有1-8个碳原子的直链、支链或环状烷基，特别是具有1-6个碳原子的直链、支链或环状烷基，更特别是具有1-4个碳原子的直链或支链烷基。直链、支链或环状C1-C6烷基的实例是甲基、乙基、丙基、环丙基、异丙基、丁基、环丁基、异丁基、叔丁基、戊基、环戊基、异戊基、己基、异己基和环己基。在某些实施方案中，―烷基‖是甲基。在某些实施方案中，―烷基‖是乙基。
本发明包括本文所述的化合物，其具有至少一个所需的原子同位素置换，其量高于同位素的天然丰度，即富集的。同位素是具有相同原子序数但不同质量数的原子，即相同数量的质子但不同数量的中子。如果使用同位素置换，通常的替代是至少一个氘替代氢。
更一般地，可掺入到本发明化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧和氟的同位素，例如分别为2H、3H、11C、13C、14C、15N、17O、18O、18F和35S。在一个非限制性实施方案中，同位素标记的化合物可用于代谢研究(例如，用14C)、反应动力学研究(例如，用2H或3H)、检测或成像技术(例如正电子发射断层扫描(PET)或单光子发射计算机断层扫描(SPECT)，包括药物或底物组织分布分析)或患者的放射性治疗。此外，本发明化合物中存在的任何氢原子可被18F原子置换，对于PET或SPECT研究可能特别希望的置换。本发明的同位素标记的化合物及其前药通常可以通过用易得的同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂来实施下述方案或实施例和制备中公开的程序制备。
作为一般示例而非限制，氢的同位素，例如，氘(2H)和氚(3H)，可用于所述结构中实现期望结果的任何地方。可选地或另外地，可以使用碳的同位素，例如，13C和14C。
同位素置换，例如氘置换，可以是部分的或完全的。部分氘置换指至少一个氢被氘置换。在某些实施方案中，在任何感兴趣的位置，同位素为90％、95％或99％或更高同位素富集的。在一个非限制性实施方案中，氘在所需位置处90％、95％或99％富集。
在一个非限制性实施方案中，氢原子置换为氘原子可以在本文所述的任何化合物中提供。例如，当任何一个基团是甲基、乙基或甲氧基，或者通过取代包含甲基、乙基或甲氧基时，烷基残基可被氘化(在非限制性实施方案中，CDH2、CD2H、CD3、CH2CD3、CD2CD3、CHDCH2D、CH2CD3、CHDCHD2、OCDH2、OCD2H或OCD3等)。在某些其他实施方案中，当两个取代基结合以形成环时，未取代的碳可以被氘化。这种置换可改善化合物1的性质，例如，在代谢位点处的氘置换可降低代谢速率(例如，动力学同位素效应)。类似地，代谢位点附近的氘置换也可以降低代谢速率。在某些实施方案中，氘在代谢位点处或在α、β或γ位处置换。
本发明的化合物可与溶剂(包括水)形成溶剂合物。因此，在一个非限制性实施方案中，本发明包括本文所述化合物的溶剂化形式。术语―溶剂合物‖指本发明化合物(包括其盐)与一个或多个溶剂分子的分子复合物。溶剂的非限制性实例是水、乙醇、异丙醇、二甲基亚砜、丙酮和其他常见的有机溶剂。术语―水合物‖指包含本发明化合物和水的分子复合物。根据本发明的药学上可接受的溶剂合物包括其中溶剂可被同位素置换的那些溶剂合物，例如，D2O、丙酮-d6、DMSO-d6。溶剂合物可以是液体或固体形式。
―剂型‖指活性剂的施用单位。剂型的实例包括片剂、胶囊、注射剂、混悬剂、液体、乳剂、颗粒、球、霜剂、软膏剂、栓剂、可吸入形式、透皮形式、口腔、舌下、局部、凝胶、粘膜剂等。―剂型‖还可包括植入物，例如插入肿瘤或异常细胞增殖中的植入物。
化合物的―肠胃外‖施用包括，例如，皮下(s.c.)、静脉内(i.v.)、肌内(i.m.)或胸骨内注射或输注技术。
术语―药学上可接受的盐‖指适合用于与人和动物的组织接触的盐。本发明化合物的盐可通过常规化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，这类盐可通过使这些化合物的游离酸形式与化学计量量的适当碱(例如Na、Ca、Mg或K氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等)反应，或通过使化合物的游离碱形式与化学计量量的适当酸反应来制备。这类反应通常在水中、有机溶剂中或两者的混合物中进行。一般地，在可行的情况下，非水性介质如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈是典型的。本发明化合物的盐还可任选地包括化合物或其盐的溶剂合物。
药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性残基的无机或有机酸盐。例如，常规的非毒性碱盐包括源自无机碱如氢氧化钠、碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钾、碳酸氢钾和碳酸钾的那些。其他合适的盐的列表可参见例如Remington's Pharmaceutical Sciences,17thed.,Mack Publishing Company,Easton,Pa.,p.1418(1985)。
术语―载体‖指在其中使用或递送活性剂的稀释剂、赋形剂或媒剂。
术语―药学上可接受的赋型剂‖指用于制备剂型的成分，并且适当地是无毒的，例如用于配制药物产品的崩解剂、粘合剂、填充剂、溶剂、缓冲剂、张度剂、稳定剂、抗氧化剂、表面活性剂或润滑剂。
―患者‖或―宿主‖或―受试者‖是指需要治疗本文具体描述的障碍(例如通过BRAF，特别是突变体BRAF调节的)的人或非人动物。通常，宿主是人。―宿主‖可以替代地指例如哺乳动物、灵长动物(例如人)、马、狗、猫、奶牛、绵羊、山羊、鸟等。
―治疗有效量‖指当施用于有需要的宿主时足以治疗疾病状态的化合物的量。―治疗有效量‖将根据所治疗的疾病状态、所治疗疾病的严重程度、宿主的年龄和相对健康状况、施用途径和形式、主治医生或兽医的判断以及其他因素而变化。
在整个本公开中，本发明的各个方面可以以范围形式呈现。应当理解，范围形式的描述仅为方便起见，而不应被解释为对本发明范围的限制。范围的描述应被视为已明确公开了该范围内所有可能的子范围以及单个数值。例如，对范围(例如从1到6)的描述应被视为对每个子范围(例如从1到3、从1到4、从1到5、从2到4、从2到6、从3到6等)以及该范围内的单个数字(例如1、2、2.7、3、4、5、5.3和6)的具体公开。无论范围的宽度，这一点均适用。
术语―抑制剂‖指与特定配体竞争、减少或阻止与特定受体的结合，或者减少或阻止特定蛋白质功能的化合物。
如果本发明的起始材料或化合物之一包含一个或多个在一个或多个反应步骤的反应条件下不稳定或反应性的官能团，则合适的保护基(例如―Protective Groups inOrganic Chemistry‖，P.G.M.Wuts,5thEd.,2007,Wiley,New York中所述)可以在关键步骤之前应用文献中熟知的方法引入。这类保护基可在合成的后期使用文献中描述的标准方法去除。保护基的实例有叔丁基(tBu)、叔丁氧基羰基(Boc)、9-芴基甲基氨基甲酸酯(Fmoc)、2-三甲基甲硅烷基乙基氨基甲酸酯(Teoc)、苄氧羰基(Cbz)和对-甲氧基苄基氧羰基(Moz)。
如果上下文中未另行描述，本发明的化合物可以包含不对称中心，并且可以以光学纯对映体、对映体的混合物(例如外消旋物)、非对映体的混合物、非对映体外消旋物或非对映体外消旋物的混合物的形式存在。
术语―不对称碳原子‖指具有四个不同取代基的碳原子。根据Cahn-Ingold-Prelog规则，不对称碳原子可以是―R‖或―S‖构型。
在化学结构中存在手性碳的任何情况中，除非上下文或附图中另有说明，否则该结构旨在包含与该手性碳相关的作为纯立体异构体及其混合物的所有立体异构体。
在其中提供手性纯异构体(或光学纯对映体)的实施方案中，手性纯指化合物包含大于90％的所需异构体(按摩尔计)，特别是大于95％的所需异构体(按摩尔计)，大于98％的所需异构体(按摩尔计)，大于99％的所需异构体(按摩尔计)，所述摩尔百分比基于化合物的异构体的总摩尔数。可以通过手性选择性合成或通过对映体的分离制备手性纯的或手性富集的化合物。
化合物1多晶型物
对化合物1本身(游离形式)和化合物1的盐(盐形式)进行了化合物1的多晶型物的研究。总共有三种结晶化合物1游离形式被鉴定为多晶型物，包括晶型A(其为水合物)和两种无水物(被鉴定为晶型B和晶型C)。从盐研究中鉴定出五种盐及其多晶型物，包括化合物1钠盐晶型D、化合物1钠盐晶型E、化合物1钠盐晶型F、化合物1钾盐晶型G和化合物1钾盐晶型H。
游离化合物1的多晶型物
在各种结晶条件下研究了化合物1的多晶型物的形成。测试的条件包括平衡、缓慢冷却、缓慢蒸发、通过添加反溶剂的沉淀和蒸汽扩散。
对化合物1鉴定了三种晶型：晶型A，起始原料型，及两种无水物，晶型B和晶型C。
化合物1晶型A
晶型A是低结晶形式。通过25℃下平衡从IPA、MTBE、EtOH、IPAc和甲苯获得，通过温度循环从IPA、IPAc、甲苯、DMSO/水(v:v＝23:77)和DMSO/水(v:v＝57:43)获得，和通过反溶剂添加实验从丙酮获得。平衡2周后未观察到结晶度的改善。根据KF结果，其含有约1.9重量％的水。DCS显示从约13℃开始的宽吸热峰。其在167.9℃的Tonset下以18J/g的焓熔化。TGA显示在约160℃下重量损失约2.7％。1H NMR显示没有可检测的残留溶剂。
在某些实施方案中，晶型A特征在于具有一个或多个在峰列表#1中列出的峰的+/-0.4、0.3或0.2°2θ内的峰的XRPD图谱(对于XRPD方法的描述，参见实施例28)。
峰列表#1
1.在某些实施方案中，化合物1晶型A特征在于具有至少三个选自15.3、18.4、24.9和25.3+/-0.4°2θ的峰的XRPD图谱。在其他实5施方案中，化合物1晶型A特征在于具有至少三个选自15.3、18.4、24.9和25.3+/-0.3°2θ的峰的XRPD图谱。或在其他实施方案中，化合物1晶型A特征在于具有至少三个选自15.3、18.4、24.9和25.3+/-0.2°2θ的峰的XRPD图谱。
在某些实施方案中，晶型A特征在于在DSC热谱图上约167.9℃±10℃的熔化起始温度和/或约18J/g±10J/g的熔化焓。在某些实施方案中，晶型A特征在于如通过TGA测量的在约160.0℃±10℃下约2.7％的重量损失。
在某些实施方案中，如实施例7所述，当在约25℃±5℃下溶解时，晶型A特征在于在DMSO中至少约250mg/mL的溶解度。
图7描述了化合物1晶型A的XRPD图谱。图8描述了化合物1晶型A的DSC热谱图。图9描述了化合物1晶型A的TGA热谱图。
化合物1晶型B
晶型B为无水物。其通过平衡从测试的溶剂系统获得。晶型B具有中等结晶度。DSC显示194.4℃的Tonset的熔化峰。晶型B在熔化0时分解。TGA显示在约170℃下约1.1％的重量损失。1H NMR显示没有可检测的残留溶剂。由于晶型B也可以从有机溶剂，例如甲醇或乙腈，及水活度高于约0.9的水混合物分离，这种无水物在水性介质中也应该是稳定的。
由于其高稳定性、可扩展性和可重复性，多晶型B优于化合物1的其他多晶型物。例如，当化合物1晶型B在开口容器中25℃/92％相对湿度下、在开口容器中40℃/75％ RH下以及密闭容器中60℃下进行一周的稳定性测试时，化合物1晶型B表现出优异的化学和物理稳定性，而纯度、晶体形式和/或结晶度没有任何变化。当化合物1晶型B在25℃下以40-0-95-0-40％ RH循环在水吸附和解吸附实验中测试时，化合物1晶型B表现出优异的稳定性，而无结晶度变化，仅有轻微的吸湿性(在95％ RH下1.6％的水吸收)。化合物1晶型B在压缩(2MPa和10MPa)、干磨和湿法制粒条件下也显示出优异的多晶型稳定性。水或乙醇存在下的湿法制粒实验也表明结晶度没有变化。化合物1晶型B在跨越1.2-7.0的宽pH范围内，在水性介质中也表现出多晶型稳定性。
在某些实施方案中，晶型B特征在于具有一个或多个峰列表#2中所列峰的+/-0.4、0.3或0.2°2θ内的峰的XRPD图谱(对于XRPD方法的描述，参见实施例28)。
峰列表#2
1.在某些实施方案中，化合物1晶型B特征在于具有至少三个选自7.5、8.8、10.0、10.5、12.6、14.7、15.4、16.4、16.7、18.6、22.7和25.3+/-0.4°2θ的峰的XRPD图谱。
其他实施方案包括但不限于以下：
2.实施方案1的多晶型物，其中化合物1晶型B特征在于具有至少三个选自7.5、8.8、10.0、10.5、12.6、14.7、15.4、16.4、16.7、18.6、22.7和25.3+/-0.3°2θ的峰的XRPD图谱。
3.实施方案1的多晶型物，其中化合物1晶型B特征在于具有至少三个选自7.5、8.8、10.0、10.5、12.6、14.7、15.4、16.4、16.7、18.6、22.7和25.3+/-0.2°2θ的峰的XRPD图谱。
4.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少四个所列的峰。
5.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少五个所列的峰。
6.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少六个所列的峰。
7.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少七个所列的峰。
8.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少八个所列的峰。
9.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少九个所列的峰。
10.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少十个所列的峰。
11.实施方案1-10中任一项的多晶型物，其中XRPD包括16.4+/-0.2°2θ处的峰。
12.实施方案1-11中任一项的多晶型物，其中XRPD包括10.0+/-0.2°2θ处的峰。
13.实施方案1-12中任一项的多晶型物，其中XRPD包括15.4+/-0.2°2θ处的峰。
14.实施方案1-13中任一项的多晶型物，其中XRPD包括16.7+/-0.2°2θ处的峰。
15.实施方案1-14中任一项的多晶型物，其中XRPD包括8.8+/-0.2°2θ处的峰。
16.实施方案1-15中任一项的多晶型物，其中XRPD包括12.6+/-0.2°2θ处的峰。
17.实施方案1-16中任一项的多晶型物，其中XRPD包括14.7+/-0.2°2θ处的峰。
18.实施方案1-17中任一项的多晶型物，其中XRPD包括10.5+/-0.2°2θ处的峰。
19.实施方案1-18中任一项的多晶型物，其中XRPD包括25.3+/-0.2°2θ处的峰。
20.实施方案1-19中任一项的多晶型物，其中XRPD包括22.7+/-0.2°2θ处的峰。
在某些实施方案中，化合物1晶型B特征在于在DSC温谱图上约194.4℃±10℃的熔化起始温度和/或约71.3J/g±10J/g的熔化焓。在某些实施方案中，晶型B特征在于通过TGA测量的在约170.0℃±10℃下约1.1％的重量损失。
在某些实施方案中，如实施例7所述，当在约25℃±5℃下溶解时，化合物1晶型B特征在于在DMSO中的溶解度为至少约250mg/mL。
图1描述了化合物1晶型B的XRPD图谱。图2描述了化合物1晶型B的DSC热谱图。图3描述了化合物1晶型B的TGA热谱图。
化合物1晶型C
晶型C为无水物。其通过在25℃下平衡从乙酸乙酯和2-甲基四氢呋喃(2-MeTHF)，和通过温度循环从2-MeTHF获得。晶型C具有中等结晶度。DSC显示从25.9℃开始的宽吸热峰，和在185.3℃的Tonset处的熔化峰。其在熔化时分解。TGA显示在约180℃下约2.2％的重量损失。1H NMR显示约2.7重量％的乙酸乙酯残留(0.2当量摩尔比)。晶型C是亚稳无水物。例如，在大约8个温度循环后，其转化为无水晶型B。
在某些实施方案中，晶型C特征在于具有一个或多个在峰列表#3中所列的峰的+/-0.4、0.3或0.2°2θ内的峰的XRPD图谱(对于XRPD方法的描述，参见实施例28)。
峰列表#3
1.在某些实施方案中，化合物1晶型C特征在于具有至少三个选自7.2、13.4、14.5、14.9、15.8、16.5、17.9、18.4、19.7、20.6、22.2和29.4+/-0.4°2θ的峰的XRPD图谱。
2.实施方案1的多晶型物，其中化合物1晶型C特征在于具有至少三个选自7.2、13.4、14.5、14.9、15.8、16.5、17.9、18.4、19.7、20.6、22.2和29.4+/-0.3°2θ的峰的XRPD图谱。
3.实施方案1的多晶型物，其中化合物1晶型C特征在于具有至少三个选自7.2、13.4、14.5、14.9、15.8、16.5、17.9、18.4、19.7、20.6、22.2和29.4+/-0.2°2θ的峰的XRPD图谱。
其他实施方案包括但不限于以下：
4.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少四个所列的峰。
5.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少五个所列的峰。
6.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少六个所列的峰。
7.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少七个所列的峰。
8.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少八个所列的峰。
9.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少九个所列的峰。
10.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少十个所列的峰。
11.实施方案1-10中任一项的多晶型物，其中XRPD包括20.6+/-0.2°2θ处的峰。
12.实施方案1-11中任一项的多晶型物，其中XRPD包括18.4+/-0.2°2θ处的峰。
13.实施方案1-12中任一项的多晶型物，其中XRPD包括15.8+/-0.2°2θ处的峰。
14.实施方案1-13中任一项的多晶型物，其中XRPD包括19.7+/-0.2°2θ处的峰。
15.实施方案1-14中任一项的多晶型物，其中XRPD包括17.9+/-0.2°2θ处的峰。
16.实施方案1-15中任一项的多晶型物，其中XRPD包括14.9+/-0.2°2θ处的峰。
17.实施方案1-16中任一项的多晶型物，其中XRPD包括14.5+/-0.2°2θ处的峰。
18.实施方案1-17中任一项的多晶型物，其中XRPD包括16.5+/-0.2°2θ处的峰。
19.实施方案1-18中任一项的多晶型物，其中XRPD包括22.2+/-0.2°2θ处的峰。
20.实施方案1-19中任一项的多晶型物，其中XRPD包括13.4+/-0.2°2θ处的峰。
在某些实施方案中，晶型C特征在于在DSC热谱图上约185.3℃±10℃的熔化起始温度和/或约33.9J/g±10J/g的熔化焓。在某些实施方案中，晶型C特征在于通过TGA测量的在约180.0℃±10℃下约2.2％的重量损失。
图10描述了化合物1晶型C的XRPD图谱。图11描述了化合物1晶型C的DSC热谱图。图12描述了化合物1晶型C的TGA热谱图。
化合物1盐多晶型物
在各种结晶条件下研究了化合物1盐多晶型的形成。测试的条件包括浆平衡、通过加入反溶剂的沉淀以及重新浆化。
在化合物1的盐多晶型中鉴定出五种晶型：钠盐晶型D、钠盐晶型E、钠盐晶型F、钾盐晶型G和钾盐晶型H。在这些盐晶型D-H中，钠盐晶型F显示出良好的物理化学特性，包括良好的结晶度、合理的化学计量、高脱水起始和良好的反离子安全性。
化合物1晶型F
化合物1晶型F为化合物1钠盐晶型F。钠盐晶型F为水合物。钠盐晶型F具有中等结晶度。DSC显示从13.7℃、64.7℃、116.5℃的脱水峰和在194.7℃的Tonset的熔点。TGA显示在约180℃下约4.8％的重量损失。HPLC显示98.9％的化学纯度。IC和HPLC显示形式和钠盐的化学计量比为1:1.2。1H NMR显示没有可检测的残留溶剂。KF(Karl Fischer分析)显示，其含有约4.6重量％的水，相当于2.5个水分子。该水合物形式在约30℃的真空干燥下是稳定的。
钠盐晶型F在光稳定性评估后显示化学纯度下降约1％。钠盐晶型F在25℃/92％RH的应激下化学纯度略有下降(约1.2％)。钠盐晶型F在封闭容器中60℃下应激1周后也显示结晶度略有下降，这可能是由于部分脱水。
钠盐晶型F的吸湿性通过25℃下的动态蒸汽吸附(DVS)测试进行评估。钠盐晶型F在低于80％ RH下具有轻微的吸湿性。然后，其变得具有吸湿性，并在25℃下显示出从80％RH至95％ RH的12.6％的水吸收。在DVS测试后，钠盐晶型F未显示出晶型变化，且无结晶度降低。
在某些实施方案中，晶型F特征在于具有一个或多个在峰列表#4中所列的峰的+/-0.4、0.3或0.2°2θ内的峰的XRPD图谱(对于XRPD方法的描述，参见实施例28)。
峰列表#4
1.在某些实施方案中，化合物1晶型F特征在于具有至少三个选自13.6、15.0、15.5、16.0、17.5、18.3、19.7、20.3、21.7、24.0、24.5、30.3、30.4和34.5+/-0.4°2θ的峰的XRPD图谱。
2.实施方案1的多晶型物，其中化合物1晶型F特征在于具有至少三个选自13.6、15.0、15.5、16.0、17.5、18.3、19.7、20.3、21.7、24.0、24.5、30.3、30.4和34.5+/-0.3°2θ的峰的XRPD图谱。
3.实施方案1的多晶型物，其中化合物1晶型F特征在于具有至少三个选自13.6、15.0、15.5、16.0、17.5、18.3、19.7、20.3、21.7、24.0、24.5、30.3、30.4和34.5+/-0.2°2θ的峰的XRPD图谱。
其他实施方案包括但不限于以下：
4.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少四个所列的峰。
5.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少五个所列的峰。
6.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少六个所列的峰。
7.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少七个所列的峰。
8.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少八个所列的峰。
9.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少九个所列的峰。
10.实施方案1-3中任一项的多晶型物，其呈现至少十个所列的峰。
11.实施方案1-10中任一项的多晶型物，其中XRPD包括在19.7+/-0.2°2θ处的峰。
12.实施方案1-11中任一项的多晶型物，其中XRPD包括20.3+/-0.2°2θ处的峰。
13.实施方案1-12中任一项的多晶型物，其中XRPD包括在15.0+/-0.2°2θ处的峰。
14.实施方案1-13中任一项的多晶型物，其中XRPD包括21.7+/-0.2°2θ处的峰。
15.实施方案1-14中任一项的多晶型物，其中XRPD包括30.4+/-0.2°2θ处的峰。
16.实施方案1-15中任一项的多晶型物，其中XRPD包括在13.6+/-0.2°2θ处的峰。
17.实施方案1-16中任一项的多晶型物，其中XRPD包括24.0+/-0.2°2θ处的峰。
18.实施方案1-17中任一项的多晶型物，其中XRPD包括18.3+/-0.2°2θ处的峰。
19.实施方案1-18中任一项的多晶型物，其中XRPD包括24.5+/-0.2°2θ处的峰。
20.实施方案1-19中任一项的多晶型物，其中XRPD包括34.5+/-0.2°2θ处的峰。
在某些实施方案中，晶型F特征在于以下峰中的任何一个：59.8℃±10℃，132.5℃±10℃和197.7℃±10℃，和/或约26.4J/g±10J/g和41.8J/g±10J/g的熔化焓(如通过DSC测量的)。在某些实施方案中，晶型F特征在于如通过TGA测量的在约100.0℃±10℃下约2.7％的重量损失，和在约100.0℃至170.0℃±10℃的温度范围内约3.2％的重量损失。
图17描述了化合物1晶型F的XRPD图谱。图18描述了化合物1晶型F的DSC热谱图。图19描述了化合物1晶型F的TGA热谱图。
化合物1晶型D
化合物1晶型D为化合物1钠盐晶型D。钠盐晶型D为具有中等结晶度的水合物。DSC显示从4.5℃的脱水峰、67.5℃的峰、从117.9℃的吸热峰和229.5℃的Tonset的熔点。TGA显示约150℃下约6.9％的重量损失。HPLC显示97.4％的化学纯度。IC和HPLC显示，化合物与Na+盐的化学计量比率为1:1。1H NMR显示没有可检测的残留溶剂。
在某些实施方案中，晶型D特征在于具有一个或多个在峰列表#5中所列的峰的+/-0.4、0.3或0.2°2θ内的峰的XRPD图谱(对于XRPD方法的描述，参见实施例28)。
峰列表#5
1.在某些实施方案中，化合物1晶型D特征在于具有至少三个选自6.2、7.7、11.7、12.5、13.6、15.3、15.7、17.5、20.8和27.5+/-0.4°2θ的峰的XRPD图谱。
2.实施方案1的多晶型物，其中化合物1晶型D特征在于具有至少三个选自6.2、7.7、11.7、12.5、13.6、15.3、15.7、17.5、20.8和27.5+/-0.3°2θ的峰的XRPD图谱。
3.实施方案1的多晶型物，其中化合物1晶型D特征在于具有至少三个选自6.2、7.7、11.7、12.5、13.6、15.3、15.7、17.5、20.8和27.5+/-0.2°2θ的峰的XRPD图谱。
图23描述了化合物1钠盐晶型D的XRPD图谱。图24描述了化合物1钠盐晶型D的DSC热谱图。图25描述了化合物1钠盐晶型D的TGA热谱图。
化合物1晶型E
化合物1晶型E为化合物1钠盐晶型E。钠盐晶型E为水合物。钠盐晶型E具有中等结晶度。DSC显示从5.6℃的脱水峰、61.1℃的峰和228.7℃的Tonset的熔点。TGA显示在约180℃下约10.8％的重量损失。HPLC显示约98％的化学纯度。IC和HPLC显示，化合物与Na+盐的化学计量比率为1:1。1H NMR显示没有可检测的残留溶剂。根据KF分析，水含量为10.2重量％。
在某些实施方案中，晶型E特征在于具有一个或多个在峰列表#6中所列的峰的+/-0.4、0.3或0.2°2θ内的峰的XRPD图谱(对于XRPD方法的描述，参见实施例28)。
峰列表#6
1.在某些实施方案中，化合物1晶型E特征在于具有至少三个选自5.8、6.3、7.8、12.5、13.9、15.7、17.8、20.2和25.3+/-0.4°2的峰的XRPD图谱。
2.实施方案1的多晶型物，其中化合物1晶型E特征在于具有至少三个选自5.8、6.3、7.8、12.5、13.9、15.7、17.8、20.2和25.3+/-0.3°2θ的峰的XRPD图谱。
3.实施方案1的多晶型物，其中化合物1晶型E特征在于具有至少三个选自5.8、6.3、7.8、12.5、13.9、15.7、17.8、20.2和25.3+/-0.2°2θ的峰的XRPD图谱。
图26描述了化合物1钠盐晶型E的XRPD图谱。图27描述了化合物1钠盐晶型E的DSC热谱图。图28描述了化合物1钠盐晶型E的TGA热谱图。
化合物1晶型G
化合物1晶型G是化合物1钾盐晶型G。钾盐晶型G是溶剂合物。钾盐晶型G具有低结晶度。DSC显示了多个热事件(图30)。TGA显示在约170℃下约4.5％的重量损失，在约170℃至230℃的温度范围内约4.8％的重量损失。HPLC显示约99％的化学纯度。IC和HPLC显示，化合物与K+盐的化学计量比率为1:1。1H NMR显示2.5重量％的丙酮残留溶剂(0.42当量摩尔比)。
图29描述了化合物1钾盐晶型G的XRPD图谱。图30描述了化合物1钾盐晶型G的DSC热谱图。图31描述了化合物1钾盐晶型G的TGA热谱图。
化合物1晶型H
化合物1晶型H是化合物1钾盐晶型H。钾盐晶型H是水合物。钾盐晶型H具有中等结晶度。DSC显示从4.2℃的脱水峰、87.2℃的峰、从123.0℃的吸热峰和221.7℃的Tonset的熔点。TGA显示约170℃下约6.6％的重量损失。HPLC显示约99％的化学纯度。IC和HPLC显示，化合物与K+盐的化学计量比率为1:1.2。1H NMR显示没有可检测的残留溶剂。
图32描述了化合物1钾盐晶型H的XRPD图谱。图33描述了化合物1钾盐晶型H的DSC热谱图。图34描述了化合物1钾盐晶型H的TGA热谱图。
由BRAF介导的障碍的治疗
化合物1是通过泛素蛋白酶体途径降解突变体BRAF(例如I类、II类和/或III类突变体BRAF)的小分子。化合物1与普遍表达的E3连接酶蛋白cereblon(CRBN)结合，并改变CRBN·E3泛素连接酶复合物的底物特异性，从而导致突变体BRAF(例如，BRAF V600E)的募集和泛素化。化合物1有效降解I类突变体BRAF如V600E、II类突变体BRAF如G469A、III类突变体BRAF如G466V突变。
因此，包含有效量的本发明化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物可用于治疗突变体BRAF介导的癌症，例如黑色素瘤、包括例如非小细胞肺癌的肺癌、包括例如微卫星稳定结肠直肠癌的结肠直肠癌、包括例如间变性甲状腺癌的甲状腺癌或卵巢癌。在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗由V600X突变体BRAF介导的实体肿瘤。可用包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物治疗的障碍的非限制性实例包括黑色素瘤、非小细胞肺癌、甲状腺癌、结肠直肠癌和具有突变体BRAF驱动因子的其他实体瘤恶性肿瘤。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物可治疗已对BRAF抑制剂产生抗性的癌症。例如，化合物1有效治疗G466V突变体BRAF肺肿瘤细胞系。在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物可口服生物利用。
在某些方面，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗BRAF介导的癌症，其中BRAF从野生型突变。在某些非限制性实施方案中，突变为I类突变、II类突变或III类突变，或其任何组合。I类突变的非限制性实例包括V600突变，例如V600E、V600K、V600R、V600D和V600N。II类突变的非限制性实例包括G469A、G469V、G469L、G469R、L597Q和K601E。III类突变的非限制性实例包括G466A、G466E、G466R、G466V、S467L、G469E、N581I、D594E、D594G和D594N。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物治疗BRAF突变体介导的障碍，其中该突变不是I类、II类或III类突变。突变的非限制性实例包括G464I、G464R、N581T、L584F、E586K、G593D、G596C、L597R、L597S、S605I、S607F、N684T、E26A、V130M、L745L和D284E。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物治疗BRAF突变体介导的障碍，其中该突变为剪接变体，例如p61-BRAFV600E。
化合物1或其药物组合物、包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物、或化合物1的药学上可接受的盐或其药物组合物，可用于治疗患有由突变体BRAF介导的任何障碍的患者。
BRAF是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，其是信号转导蛋白激酶的成员。BRAF V600X突变，特别是BRAF V600E/K突变，通常在多种人类肿瘤中观察到，包括黑色素瘤、甲状腺癌、结肠直肠癌、肺癌等。V600X突变的非限制性实例包括V600E、V600K、V600R、V600D和V600N。尽管临床上可得的BRAF抑制剂在许多这类适应症中发挥了治疗作用，但对这些药物的抗肿瘤反应的持续时间受限于耐药性的产生。
BRAF蛋白呈现了一种信号传播机制，其要求蛋白同二聚化(BRAF-BRAF)或与其他RAF蛋白的异二聚化(BRAF-RAF1或BRAF-ARAF)。当BRAF突变时，如在具有BRAF V600X置换的肿瘤学适应症中观察到的，BRAF信号传导变成不依赖于同二聚体和/或异二聚体的产生。在这种情况下，激酶作为单体蛋白被过度激活，并驱动细胞增殖信号。
由于目前可获得的抑制剂仅阻断单体形式的BRAF活性，而对BRAF同二聚体或异二聚体无效，因此许多BRAF抗性诱导机制通过恢复RAF同二聚化和异二聚化介导的信号传导发挥作用并不令人惊讶。
靶向的蛋白降解通过募集E3连接酶诱导靶标泛素化，从而促进蛋白酶体介导的对所结合靶标的破坏。通过靶向降解对BRAF的降解提供了优于常规抑制的优势，因为其消除了BRAF V600E/K的支架活性，且特别地诱导了BRAF蛋白消除。这种活性阻止了二聚化介导的抗性机制。
BRAF蛋白的消除可以代表延迟耐药性发生及靶向获得对可用抑制剂的耐药性的肿瘤的策略。这为治疗BRAF V600X突变肿瘤(如黑色素瘤、结肠直肠癌和肺癌)提供了新的治疗机会。
本发明的另一方面提供了如本文所述的化合物1多晶型物或化合物1的同位素衍生物、其药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物或其药物组合物，用于制备治疗或预防有需要的患者的癌症的药物；其中需要BRAF抑制来治疗或预防癌症。
在某些方面，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物用于治疗BRAF介导的癌症，其中BRAF从野生型突变。存在BRAF突变的多种可能性。在某些非限制性实施方案中，突变为I类突变、II类突变或III类突变或其任何组合。I类突变的非限制性实例包括V600突变，例如V600E、V600K、V600R、V600D和V600N。II类突变的非限制性实例包括G469A、G469V、G469L、G469R、L597Q和K601E。III类突变的非限制性实例包括G466A、G466E、G466R、G466V、S467L、G469E、N581I、D594E、D594G和D594N。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物治疗BRAF突变体介导的障碍，其中该突变不是I类、II类或III类突变。突变的非限制性实例包括G464I、G464R、N581T、L584F、E586K、G593D、G596C、L597R、L597S、S605I、S607F、N684T、E26A、V130M、L745L和D284E。
在某些实施方案中，BRAF突变是外显子11突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是外显子15突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是G464突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是G466突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是G466R突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是G466E突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是G469突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是G469E突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是D594突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是D594A突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是L597突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是L597R突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是L597S突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是L597Q突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是V600突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是V600E突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是V600K突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是V600R突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是V600D突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是K601突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是K601E突变。
在某些实施方案中，BRAF突变是K601N突变。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物治疗BRAF突变体介导的障碍，其中该突变为剪接变体，例如p61-BRAFV600E。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物用于治疗由两种或更多种突变体蛋白介导的障碍，例如由BRAFV600E/NRASQ61K双重突变体介导的癌症。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物用于治疗对至少一种BRAF抑制剂抗性的癌症，例如对选自达拉菲尼、曲美替尼、维莫非尼和encorafenib的BRAF抑制剂具有抗性或已获得抗性的癌症。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物用于治疗已发生逃逸突变的癌症，例如BRAF V600E NRASQ61K双重突变癌症。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物用于治疗黑色素瘤。
黑色素瘤的非限制性实例包括非肢端(nonacral)皮肤黑色素瘤、肢端黑色素瘤、粘膜黑色素瘤、葡萄膜黑色素瘤和软脑膜黑色素瘤，其各自可以是原发性或转移的。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物用于治疗三阴性乳腺癌，例如具有G464V BRAF突变体的三阴性乳腺癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物用于治疗肺癌，例如具有G466V BRAF突变体的肺腺癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物用于治疗具有V600 BRAF突变体的黑色素瘤。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物治疗BRAF突变体介导的障碍，其中该突变为剪接变体，例如p61-BRAFV600E。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗由两种或更多种突变蛋白介导的障碍，例如由BRAFV600E/NRASQ61K双重突变体介导的癌症。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗已发生逃逸突变的癌症，例如BRAF V600E NRASQ61K双重突变体癌症。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗对至少一种BRAF抑制剂具有抗性的癌症，例如对选自达拉菲尼、曲美替尼、维莫非尼和encorafenib的BRAF抑制剂具有抗性或已获得抗性的癌症。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗黑色素瘤。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗三阴性乳腺癌，例如具有G464V BRAF突变体的三阴性乳腺癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗肺癌，例如具有G466V BRAF突变体的肺腺癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗具有V600 BRAF突变体的黑色素瘤。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗胆管癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗erdeheim-chester病。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗朗格汉斯组织细胞增多症。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗神经节细胞胶质瘤。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗神经胶质瘤。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗GIST。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗成胶质细胞瘤。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗毛细胞白血病。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗多发性骨髓瘤。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗非小细胞肺癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗卵巢癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗毛细胞粘液样星形细胞瘤。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗间变性多形性黄色星形细胞瘤。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗星形细胞瘤。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗甲状腺癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗乳头状甲状腺癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗间变性甲状腺癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗胰腺癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗胸部透明细胞肉瘤。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗唾液腺癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗结肠直肠癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗微卫星稳定的结肠直肠癌。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或其多晶型物的药物组合物用于治疗选自以下的障碍：胆管癌、erdeheim-chester病、朗格汉斯组织细胞增多症、神经节神经胶质瘤、神经胶质瘤、GIST、成胶质细胞瘤、毛细胞白血病、多发性骨髓瘤、肺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌、毛细胞粘液样星形细胞瘤、间变性多形性黄色星形细胞瘤、星形细胞瘤、甲状腺癌、乳头状甲状腺癌、间变性甲状腺癌、胰腺癌、胸部透明细胞肉瘤、唾液腺癌、结肠直肠癌和微卫星稳定的结肠直肠癌。
本发明的另一方面提供了一种治疗或预防增殖性疾病的方法。该方法包括向有需要的患者施用有效量的药物组合物，该药物组合物包含有效量的本文所述的化合物1或化合物1的多晶型物，或化合物1的对映体、非对映体或立体异构体或同位素衍生物，或其药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物，以及任选地药学上可接受的载体。
在某些实施方案中，疾病或障碍是癌症或增殖性疾病。
在某些实施方案中，BRAF介导的障碍是异常细胞增殖，包括但不限于实体或血液癌症。
在某些实施方案中，血液癌症为急性髓细胞性白血病(AML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、成淋巴细胞性T细胞白血病、慢性髓细胞性白血病(CML)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、毛细胞白血病、慢性中性粒细胞性白血病(CNL)、急性成淋巴细胞性T细胞白血病、急性单核细胞性白血病、浆细胞瘤、免疫母细胞性大细胞白血病、套细胞白血病、多发性骨髓瘤、成巨核细胞性白血病、急性巨核细胞性白血病、早幼粒细胞性白血病、混合谱系白血病(MLL)、红白血病、恶性淋巴瘤、何杰金氏淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、成淋巴细胞性T细胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、急性成淋巴细胞性白血病、弥漫性大B细胞淋巴瘤、Myc和B细胞白血病(BCL)2和/或BCL6重排/过表达[双重和三重打击淋巴瘤]、骨髓增生异常/骨髓增生性肿瘤、套细胞淋巴瘤，包括硼替佐米抗性套细胞淋巴瘤。
对BRAF或突变体BRAF抑制或降解敏感并因此可用本文所述化合物治疗的实体肿瘤包括但不限于肺癌(包括小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC))、乳腺癌(包括炎性乳腺癌、ER阳性乳腺癌(包括他莫昔芬抗性的ER阳性乳腺癌和三阴性乳腺癌)、结肠癌、中线癌、肝癌、肾癌、前列腺癌(包括去势抗性前列腺癌(CRPC))、脑癌(包括神经胶质瘤、成胶质细胞瘤、成神经细胞瘤和髓母细胞瘤，包括MYC扩增的髓母细胞瘤)、结肠直肠癌、肾母细胞瘤、尤因氏肉瘤、横纹肌肉瘤、室管膜瘤、头颈癌、黑色素瘤、鳞状细胞癌、卵巢癌、胰腺癌(包括胰腺导管腺癌(PDAC)和胰腺神经内分泌肿瘤(PanNET))、骨肉瘤、骨巨细胞肿瘤、甲状腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌、外阴癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、间皮瘤、食道癌、唾液腺癌、胃癌、鼻咽癌、口腔癌、口部的癌症、GIST(胃肠道间质瘤)、NUT-中线癌、睾丸癌、鳞状细胞癌、肝细胞癌(HCC)、MYCN驱动的实体肿瘤和NUT中线癌(NMC)。
在进一步的实施方案中，疾病或障碍是骨、肌肉、腱、软骨、神经、脂肪或血管的肉瘤。
在进一步的实施方案中，疾病或障碍为软组织肉瘤、骨骼肉瘤或骨肉瘤。
在进一步的实施方案中，疾病或障碍为血管肉瘤、纤维肉瘤、脂肪肉瘤、平滑肌肉瘤、卡波济氏肉瘤、骨肉瘤、胃肠间质瘤、滑膜肉瘤、多形性肉瘤、软骨肉瘤、尤因氏肉瘤、网状细胞肉瘤、血管肉瘤、葡萄状肉瘤、横纹肌肉瘤或胚胎性横纹肌肉瘤。
在某些实施方案中，障碍为骨、肌肉、腱、软骨、神经、脂肪或血管肉瘤。
在其他实施方案中，疾病或障碍是对BRAF或突变体BRAF抑制或降解敏感的癌症。在进一步的实施方案中，所述癌症为肺癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌、脑癌、肾癌、卵巢癌、胃癌、皮肤癌、骨癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、神经胶质瘤、成胶质细胞瘤、肝细胞癌、乳头状肾癌、头颈鳞状细胞癌、白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、实体肿瘤、血液癌症或实体癌。
本文中使用的术语―癌症‖指可以用化合物1治疗的癌症，指由恶性肿瘤细胞的增殖引起的任何癌症，例如肿瘤、赘生物、癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤等，其中该疾病对BRAF或突变体BRAF抑制或降解敏感。例如，癌症包括但不限于间皮瘤、白血病和淋巴瘤，如皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)、非皮肤外周T细胞淋巴瘤、与人T细胞嗜淋巴病毒(HTLV)相关的淋巴瘤如成人T细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)、B细胞淋巴瘤、急性非淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、急性髓细胞性白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤、非何杰金氏淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、何杰金氏淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤、成人T细胞白血病淋巴瘤、急性髓系白血病(AML)、慢性髓系白血病(CML)或肝细胞癌。进一步的实例包括骨髓增生异常综合征、儿童期实体瘤(如脑瘤、神经母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、肾母细胞瘤、骨肿瘤和软组织肉瘤)、成人的常见实体瘤如头颈癌(如口腔、喉、鼻咽和食道癌)、泌尿生殖系统癌症(如前列腺、膀胱、肾、子宫、卵巢、睾丸)、肺癌(如小细胞和非小细胞)、乳腺癌、胰腺癌、黑色素瘤和其他皮肤癌、胃癌、脑瘤、与Gorlin’s综合征相关的肿瘤(如髓母细胞瘤或脑膜瘤)和肝癌。
本申请的一个方面提供了包含有效量的化合物1或化合物1多晶型物的药物组合物，其可用于治疗以对BRAF或突变体BRAF抑制或降解敏感的过度或异常细胞增殖为特征的疾病、障碍和病症。这类疾病包括但不限于增殖性或过度增殖性疾病。增殖性和过度增殖性疾病的实例包括但不限于癌症。术语―癌症‖包括但不限于以下癌症：乳腺；卵巢；子宫颈；前列腺；精巢、泌尿生殖道；食道；喉、成胶质细胞瘤；神经母细胞瘤；胃；皮肤、角化棘皮瘤；肺、表皮样癌、大细胞癌、小细胞癌、肺腺癌；骨；结肠；结肠直肠；腺瘤；胰腺、腺癌；甲状腺、滤泡状癌、未分化癌、乳头状癌；精原细胞瘤；黑色素瘤；肉瘤；膀胱癌；肝癌和胆道；肾癌；骨髓障碍；淋巴障碍、何杰金氏、毛细胞；口腔和咽(口)、唇、舌、口、咽；小肠；结肠、大肠、直肠、脑和中枢神经系统；慢性髓细胞性白血病(CML)和白血病。术语―癌症‖包括但不限于以下癌症：骨髓瘤、淋巴瘤或选自胃、肾或以下的癌症：头颈、口咽、非小细胞肺癌(NSCLC)、子宫内膜癌、肝癌、非何杰金氏淋巴瘤和肺部。
癌症的其他示例性形式包括但不限于骨骼或平滑肌癌症、胃癌、小肠癌、直肠癌、唾液腺癌、子宫内膜癌、肾上腺癌、肛门癌、直肠癌、甲状旁腺癌和垂体癌。
可由本发明治疗的其他癌症包括结肠癌、家族性腺瘤性息肉病癌症和遗传性非息肉病结肠直肠癌或黑色素瘤。此外，癌症包括但不限于唇癌、喉癌、下咽癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、甲状腺癌(髓质和乳头状甲状腺癌)、肾癌、肾实质癌、子宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、绒毛膜癌、精巢癌、尿道癌、黑色素瘤、脑瘤如成胶质细胞瘤、星形细胞瘤、脑膜瘤、髓母细胞瘤和外周神经外胚层肿瘤、胆囊癌、支气管癌、多发性骨髓瘤、基底细胞瘤、畸胎瘤、视网膜母细胞瘤、脉络膜黑色素瘤、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤、颅咽管瘤、骨肉瘤、软骨肉瘤、肌肉瘤、脂肪肉瘤、纤维肉瘤、尤文氏肉瘤和浆细胞瘤。在本申请的一个方面，本申请提供了一种或多种本文所述化合物在制备用于治疗癌症(包括但不限于本文所公开的各种类型的癌症)的药物中的用途。
在一些实施方案中，本文所述的药物组合物或多晶型可用于治疗对BRAF或突变体BRAF抑制或降解敏感的癌症，例如结肠直肠、甲状腺、乳腺和肺癌；以及骨髓增生性障碍，例如真性红细胞增多症、血小板增多症、伴有骨髓纤维变性的骨髓化生、慢性髓细胞性白血病、慢性髓单核细胞性白血病、嗜酸细胞增多综合征、幼年髓单核细胞性白血病和系统性肥大细胞疾病。在一些实施方案中，本文所述的化合物1多晶型物可用于治疗对BRAF或突变体BRAF抑制或降解敏感的造血系统障碍，特别是急性髓细胞性白血病(AML)、慢性髓细胞性白血病(CML)、急性早幼粒细胞性白血病和急性淋巴细胞性白血病(ALL)。
在某些实施方案中，本文所述的药物组合物或多晶型物可以有效量用于治疗患有淋巴瘤或淋巴细胞或髓细胞增殖障碍或异常的宿主，例如人。例如，本文所述的化合物1多晶型物可施用于患有何杰金氏淋巴瘤或非何杰金氏淋巴瘤的宿主。例如，宿主可能患有非何杰金氏淋巴瘤，例如但不限于：ADIS相关的淋巴瘤；间变性大细胞淋巴瘤；血管免疫母细胞性淋巴瘤；母细胞性NK细胞淋巴瘤；伯吉特淋巴瘤；Burkitt样淋巴瘤(小无裂细胞淋巴瘤)；弥漫性小裂细胞淋巴瘤(DSCCL)；慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞性淋巴瘤；皮肤T细胞淋巴瘤；弥漫性大B细胞淋巴瘤；肠病型T细胞淋巴瘤；滤泡性淋巴瘤；肝脾γ-δT细胞淋巴瘤；淋巴母细胞性淋巴瘤；套细胞淋巴瘤；边缘区淋巴瘤；鼻T细胞淋巴瘤；儿童淋巴瘤；外周T细胞淋巴瘤；原发性中枢神经系统淋巴瘤；T细胞白血病；转化淋巴瘤；治疗相关的T细胞淋巴瘤；朗格汉斯细胞组织细胞增多症；或瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症。
在其他实施方案中，本文所述的药物组合物或多晶型可以有效量用于治疗患有何杰金氏淋巴瘤的患者，例如人，例如但不限于：结节性硬化经典何杰金氏淋巴瘤(CHL)；混合细胞性CHL；淋巴细胞耗竭CHL；富淋巴细胞的CHL；淋巴细胞为主的何杰金氏淋巴瘤；或结节性淋巴细胞为主的HL。
本申请进一步包括治疗或预防细胞增殖性障碍，例如对BRAF或突变体BRAF抑制或降解敏感的增生、异型增生和癌前病变。异型增生是病理学家在活组织检查中识别的癌前病变的最早期形式。可施用本文所述的药物组合物或多晶型物用于防止所述增生、异型增生或癌前病变继续扩展或变成癌症的目的。癌前病变的实例可能发生在皮肤、食管组织、乳腺和宫颈上皮内组织。
在某些方面，包含有效量的化合物1或其多晶型的药物组合物用于治疗BRAF介导的癌症，其中BRAF从野生型突变。BRAF突变存在多种可能性。在某些非限制性实施方案中，突变为I类突变、II类突变或III类突变或其任何组合。I类突变的非限制性实例包括V600突变，例如V600E、V600K、V600R、V600D和V600N。II类突变的非限制性实例包括G469A、G469V、G469L、G469R、L597Q和K601E。III类突变的非限制性实例包括G466A、G466E、G466R、G466V、S467L、G469E、N581I、D594E、D594G和D594N。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物治疗BRAF突变体介导的障碍，其中该突变不是I类、II类或III类突变。突变的非限制性实例包括G464I、G464R、N581T、L584F、E586K、G593D、G596C、L597R、L597S、S605I、S607F、N684T、E26A、V130M、L745L和D284E。
本发明的另一方面提供了一种药物组合物，其包含有效量的化合物1或其多晶型物，用于制备治疗或预防由BRAF介导的疾病的药物。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物可用于治疗包含异常细胞增殖的障碍，例如肿瘤或癌症，其中BRAF是异常细胞增殖途径的致瘤蛋白或信号传导介质，并且其降解降低了异常细胞生长。
联合治疗
包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或本文所述的化合物1多晶型物的药物组合物可单独或组合使用或者与另一种生物活性剂或第二种治疗剂同时或顺序施用，以治疗患有突变体BRAF介导的障碍(包括但不限于本文所述的那些)的患者，例如人。
术语―生物活性剂‖或―另外的活性剂‖用于描述除了根据本发明的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物之外的药剂，其可与包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物组合或交替使用，以获得所需的治疗结果。在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1的多晶型物和生物活性剂的药物组合物以其在重叠时间段(例如，具有重叠Cmax、Tmax、AUC或另一药代动力学参数的时间段)内在体内具有活性的方式施用。在另一个实施方案中，将包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物和生物活性剂的药物组合物施用于需要其的患者，该药物组合物不具有重叠的药物动力学参数，但是一种对另一种物的治疗效果具有治疗影响。
在某些方面，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物与本文所述的第二活性剂组合用于治疗突变体BRAF介导的癌症。可与包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物组合使用的分子类别的非限制性实例包括MEK抑制剂、免疫检查点抑制剂和EGFR抗体。在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物与曲美替尼组合用于治疗突变体BRAF介导的癌症，例如黑色素瘤或非小细胞肺癌。在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物与免疫检查点抑制剂组合使用以治疗突变体BRAF介导的癌症。在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物与西妥昔单抗或帕尼单抗组合使用以治疗突变体BRAF介导的癌症，例如结肠直肠癌。在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物与纳武单抗、派姆单抗、cemiplimab、伊匹单抗、relatlimab、阿特珠单抗、阿维鲁单抗或德瓦鲁单抗组合使用以治疗突变体BRAF介导的癌症，例如结肠直肠癌、黑色素瘤或非小细胞肺癌。
在其他方面，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物与本文所述的两种或更多种另外的活性剂组合使用以治疗突变体BRAF介导的癌症。在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其多晶型物的药物组合物与MEK抑制剂和免疫检查点抑制剂组合使用以治疗黑色素瘤或非小细胞肺癌。
在一些实施方案中，化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1的多晶型物与另一种BRAF抑制剂如索拉非尼、维莫非尼达拉菲尼或encrafenib组合使用。
在某些实施方案中，生物活性剂是MEK抑制剂。MEK抑制剂是公知的，包括例如，曲美替尼/GSKl120212(N-(3-{3-环丙基-5-[(2-氟-4-碘代苯基)氨基]-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-1(2H-基)苯基)乙酰胺)、司美替尼(6-(4-溴-2-氯苯胺基)-7-氟-N-(2-羟基乙氧基)-3-甲基苯并咪唑-5-甲酰胺)、pimasertib/AS703026/MSC 1935369((S)-N-(2,3-二羟基丙基)-3-(2-氟-4-碘代苯基)氨基)异烟酰胺)、XL-518/GDC-0973(l-({3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘代苯基)氨基]苯基}羰基)-3-[(2S)-哌啶-2-基]氮杂环丁-3-醇)、refametinib/BAY869766/RDEAl 19(N-(3,4-二氟-2-(2-氟-4-碘代苯基氨基)-6-甲氧基苯基)-1-(2,3-二羟基丙基)环丙烷-1-磺酰胺)、PD-0325901(N-[(2R)-2,3-二羟基丙氧基]-3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘代苯基)氨基]-苯甲酰胺)、TAK733(I-3-(2,3-二羟基丙基)-6-氟-5-(2-氟-4-碘代苯基氨基)-8-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-4,7(3H,8H)-二酮)、MEK162/ARRY438162(5-[(4-溴-2-氟苯基)氨基]-4-氟-N-(2-羟基乙氧基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-6-甲酰胺)、R05126766(3-[[3-氟-2-(甲基磺酰胺基)-4-吡啶基]甲基]-4-甲基-7-嘧啶-2-基氧色烯-2-酮)、WX-554、R04987655/CH4987655(3,4-二氟-2-((2-氟-4-碘代苯基)氨基)-N-(2-羟基乙氧基)-5-((3-氧代-1,2-噁嗪烷-2-基)甲基)苯甲酰胺)或AZD8330(2-((2-氟-4-碘代苯基)氨基)-N-(2-羟基乙氧基)-1,5-二甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酰胺)、U0126-EtOH、PD184352(CI-1040)、GDC-0623、BI-847325、考比替尼、PD98059、BIX 02189、BIX 02188、binimetinib、SL-327、TAK-733、PD318088。
在某些实施方案中，MEK抑制剂为曲美替尼。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物与西妥昔单抗或曲美替尼组合使用以治疗结肠直肠癌。在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物与西妥昔单抗和BYL719组合使用以治疗结肠直肠癌。在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物与西妥昔单抗和伊立替康组合使用以治疗结肠直肠癌。
在某些实施方案中，生物活性剂是SHP2抑制剂。在某些实施方案中，SHP2抑制剂为SHP099。
在某些实施方案中，生物活性剂是RAF抑制剂。Raf抑制剂的非限制性实例包括，例如，维莫非尼(N-[3-[[5-(4-氯苯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基]羰基]-2,4-二氟苯基]-1-丙磺酰胺)、索拉非尼甲苯磺酸盐(4-[4-[[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]氨甲酰氨基]苯氧基]-N-甲基吡啶-2-甲酰胺；4-甲基苯磺酸盐)、AZ628(3-(2-氰基丙-2-基)-N-(4-甲基-3-(3-甲基-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-6-基氨基)苯基)苯甲酰胺)、NVP-BHG712(4-甲基-3-(1-甲基-6-(吡啶-3-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基氨基)-N-(3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺)、RAF-265(1-甲基-5-[2-[5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基]吡啶-4-基]氧基-N-[4-(三氟甲基)苯基]苯并咪唑-2-胺)、2-Bromoaldisine(2-溴-6,7-二氢-1H,5H-吡咯并[2,3-c]吖庚因-4,8-二酮)、Raf激酶抑制剂IV(2-氯-5-(2-苯基-5-(吡啶-4-基)-1H-咪唑-4-基)苯酚)、索拉非尼N-氧化物(4-[4-[[[[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]氨基]羰基]氨基]苯氧]-N-甲基-2-吡啶羧酰胺1-氧化物)、PLX-4720、达拉非尼(GSK2118436)、GDC-0879、RAF265、AZ628、SB590885、ZM336372、GW5074、TAK-632、CEP-32496、LY3009120和GX818(encorafenib)。
在某些实施方案中，RAF抑制剂为encorafenib。
在某些实施方案中，RAF抑制剂为维莫非尼。
在某些实施方案中，RAF抑制剂为达拉菲尼。
在某些实施方案中，生物活性剂为EGFR抑制剂，包括例如吉非替尼埃罗替尼拉帕替尼奥希替尼来那替尼凡德他尼达克替尼rociletinib(XEGAFRITM)、阿法替尼(GIOTRIFFTM、AFANIXTM)、lazertinib或nazartib。
EGFR抑制剂的其他实例包括rociletinib(CO-1686)、olmutinib(OLITATM)、naquotinib(ASP8273)、nazartinib(EGF816)、PF-06747775、埃克替尼(BPI-2009)、来那替尼(HKI-272；PB272)；avitinib(AC0010)、EAI045、tarloxotinib(TH-4000；PR-610)、PF-06459988(Pfizer)、tesevatinib(XL647；EXEL-7647；KD-019)、transtinib、WZ-3146、WZ8040、CNX-2006、达克替尼(PF-00299804；Pfizer)、布加替尼lorlatinib和PF-06747775(PF7775)。
在某些实施方案中，生物活性剂是第一代EGFR抑制剂，例如埃罗替尼、吉非替尼或拉帕替尼。在某些实施方案中，生物活性剂是第二代EGFR抑制剂，例如阿法替尼和/或达克替尼。在某些实施方案中，生物活性剂是第三代EGFR抑制剂，例如奥希替尼。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物与奥希替尼组合施用于需要的患者。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物与rociletinib组合施用于需要的患者。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物与avitinib组合施用于需要的患者。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物与lazertinib组合施用于需要的患者。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物与nazartinib组合施用于需要的患者。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1的多晶型物的药物组合物与EGFR抗体(例如西妥昔单抗、帕尼单抗或耐昔妥珠单抗)组合施用于需要的患者。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物与西妥昔单抗组合施用于需要的患者。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1的多晶型物的药物组合物与帕尼单抗组合施用于需要的患者。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1的多晶型物的药物组合物与耐昔妥珠单抗组合施用于需要的患者。
在某些实施方案中，生物活性剂是免疫调节剂，包括但不限于检查点抑制剂，作为非限制性实例包括PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂、PD-L2抑制剂、CTLA-4抑制剂、LAG-3抑制剂、TIM-3抑制剂、T细胞激活的V域Ig抑制物(VISTA)抑制剂、小分子、肽、核苷酸或另一抑制剂。在某些方面，免疫调节剂是抗体，例如单克隆抗体。
通过与PD-1受体结合阻断PD-1和PD-L1的相互作用，进而抑制免疫抑制的PD-1抑制剂包括例如nivolmab派姆单抗pidilizumab、AMP-224(AstraZeneca和MedImmune)、PF-06801591(Pfizer)、MEDI0680(AstraZeneca)、PDR001(Novartis)、REGN2810(Regenron)、SHR-12-1(Jiangsu Hengrui Medicine Companyand Incyte Corporation)、TSR-042(GlaxoSmithKline plc)和PD-L1/VISTA抑制剂CA-170(Curis Inc.)。通过结合PD-L1受体阻止PD-1和PD-L1相互作用并进而抑制免疫抑制的PD-L1抑制剂包括例如阿特珠单抗durvulmab(AstraZeneca和MedImmune)、KN035(Alphamab Co.Ltd.)和BMS-936559(Bristol-Myers Squibb)。与CTLA-4结合并抑制免疫抑制的CTLA-4检查点抑制剂包括但不限于伊匹单抗、曲美木单抗(AstraZeneca和MedImmune)、AGEN1884和AGEN2041(Agenus)。LAG-3检查点抑制剂包括但不限于BMS-986016(Bristol-Myers Squibb)、GSK2831781(GlaxoSmithKline plc)、IMP321(Prima BioMed)、LAG525(Novartis)及双重PD-1和LAG-3抑制剂MGD013(MacroGenics)。TIM-3抑制剂的实例是TSR-022(GlaxoSmithKline plc)。
在某些实施方案中，检查点抑制剂选自nivolmab派姆单抗和pidilizumab/CT-011、MPDL3280A/RG7446；MEDI4736；MSB0010718C；BMS 936559，PDL2/lg融合蛋白(如AMP 224)或B7-H3(例如MGA271)、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG 3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、CHK2、A2aR、B-7家族配体的抑制剂或其组合。
在再其他实施方案中，本文所述的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物可以以治疗女性生殖系统的异常组织(例如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌或子宫癌)的有效量与有效量的雌激素抑制剂(包括但不限于SERM(选择性雌激素受体调节剂)、SERD(选择性雌激素受体降解剂)、完全雌激素受体降解剂或另一形式的部分或完全雌激素拮抗剂或激动剂)组合或交替施用。部分抗雌激素如雷洛昔芬和它莫昔芬保留了一些雌激素样作用，包括子宫生长的雌激素样刺激，以及在一些情况下，在实际刺激肿瘤生长的乳腺癌进展过程中的雌激素样作用。相反，氟维司群(一种完全抗雌激素)对子宫无雌激素样作用，且对它莫昔芬抗性肿瘤有效。
属于Astra Zeneca的WO 2014/19176、属于Olema Pharmaceuticals的WO2013/090921、WO 2014/203129、WO 2014/203132和US2013/0178445以及美国专利号9,078,871、8,853,423和8,703,813以及US 2015/0005286、WO 2014/205136和WO 2014/205138中提供了抗雌激素化合物的非限制性实例。
抗雌激素化合物的其他非限制性实例包括：SERMS，如双炔失碳酯、巴多昔芬、broparestriol、氯烯雌醚、氯米芬柠檬酸盐、环芬尼、拉索昔芬、奥美昔芬、雷洛昔芬、它莫昔芬、托瑞米芬和氟维司群；芳香化酶抑制剂，如氨鲁米特、睾内酯、阿那曲唑、依西美坦、法倔唑、福美司坦和来曲唑；以及抗促性腺激素，如亮丙瑞林、西曲瑞克、烯丙雌醇、醋酸氯地孕酮、乙酸环丙孕酮、乙酸地马孕酮、去氢孕酮、乙酸甲羟孕酮、乙酸甲地孕酮、乙酸诺美孕酮、乙酸炔诺酮、黄体酮和螺内酯。
美国专利号4,418,068；5,478,847；5,393,763；和5,457,117，WO2011/156518，美国专利号8,455,534和8,299,112，美国专利号9,078,871；8,853,423；8,703,810；US 2015/0005286；和WO 2014/205138、US2016/0175289、US2015/0258080、WO 2014/191726、WO2012/084711；WO 2002/013802；WO 2002/004418；WO 2002/003992；WO 2002/003991；WO 2002/003990；WO 2002/003989；WO2002/003988；WO 2002/003986；WO 2002/003977；WO 2002/003976；WO 2002/003975；WO 2006/078834；US 6821989；US 2002/0128276；US 6777424；US2002/0016340；US 6326392；US 6756401；US2002/0013327；US 6512002；US 6632834；US2001/0056099；US6583170；US 6479535；WO 1999/024027；US 6005102；EP 0802184；US5998402；US 5780497、US 5880137、WO 2012/048058和WO2007/087684中描述了可根据本发明使用的其他雌激素配体。
在另一实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物可与有效量的雄激素(例如睾酮)抑制剂(包括但不限于选择性雄激素受体调节剂、选择性雄激素受体降解剂、完全雄激素受体降解剂或另一形式的部分或完全雄激素拮抗剂)联合或交替以有效量施用，用于治疗男性生殖系统的异常组织，例如前列腺癌或睾丸癌。在某些实施方案中，前列腺癌或睾丸癌是雄激素抗性的。
抗雄激素化合物的非限制性实例在WO 2011/156518和美国专利号8,455,534和8,299,112中提供。抗雄激素化合物的其他非限制性实例包括恩扎鲁胺、apalutamide、乙酸环丙孕酮、乙酸氯地孕酮、螺内酯、坎利酮、屈螺酮、酮康唑、topilutamide、乙酸阿比特龙和西咪替丁。
在某些实施方案中，生物活性剂是ALK抑制剂。ALK抑制剂的实例包括但不限于克唑替尼阿来替尼色瑞替尼、TAE684(NVP-TAE684)、GSK1838705A、AZD3463、ASP3026、PF-06463922、恩曲替尼(RXDX-101)和AP26113。
在某些实施方案中，生物活性剂是HER-2抑制剂。HER-2抑制剂的实例包括曲妥珠单抗、拉帕替尼、ado-曲妥珠单抗emtansine和帕妥珠单抗。
在某些实施方案中，生物活性剂是CD20抑制剂。CD20抑制剂的实例包括obinutuzumab利妥昔单抗奥法木单抗、替伊莫单抗、托西莫单抗和ocrelizumab。
在某些实施方案中，生物活性剂是JAK3抑制剂。JAK3抑制剂的实例包括tasocitinib。
在某些实施方案中，生物活性剂是BCL-2抑制剂。BCL-2抑制剂的实例包括维奈托克、ABT-199(4-[4-[[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基环己-1-烯-1-基]甲基]哌嗪-1-基]-N-[[3-硝基-4-[(四氢-2H-吡喃-4-基)甲基]氨基]苯基]磺酰基]-2-[(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)氧基]苯甲酰胺)、ABT-737(4-[4-[[2-(4-氯苯基)苯基]甲基]哌嗪-1-基]-N-[4-[[(2R)-4-(二甲基氨基)-1-苯基硫烷基丁-2-基]氨基]-3-硝基苯基]磺酰基苯甲酰胺)(navitoclax)、ABT-263(I-4-(4-(4′-氯-4,4-二甲基-3,4,5,6-四氢-[1,1′-联苯基]-2-基)甲基)哌嗪-1-基)-N-((4-((4-吗啉基-1-(苯硫基)丁-2-基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯基)磺酰基)苯甲酰胺)、GX15-070(obatoclax甲磺酸盐，(2Z)-2-[(5Z)-5-[(3,5-二甲基-1H-吡咯-2-基)亚甲基]-4-甲氧基吡咯-2-亚基)吲哚；甲磺酸)))、2-甲氧基-抗霉素A3、YC137(4-(4,9-二氧代-4,9-二氢萘并[2,3-d]噻唑-2-基氨基)-苯基酯)、pogosin、2-氨基-6-溴-4-(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代乙基)-4H-色烯-3-羧酸乙基酯、尼洛替尼-d3、TW-37(N-[4-[[2-(1,1-二甲基乙基)苯基]磺酰基]苯基]-2,3,4-三羟基-5-[[2-(1-甲基乙基)苯基]甲基]苯甲酰胺)、Apogossypolone(ApoG2)、HA14-1、AT101、sabutoclax、藤黄酸或G3139(oblimersen)。
在某些实施方案中，生物活性剂是激酶抑制剂。在某些实施方案中，激酶抑制剂选自磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂、布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂或脾酪氨酸激酶(Syk)抑制剂，或其组合。
PI3激酶抑制剂的实例包括但不限于渥曼青霉素、demethoxyviridin、哌立福辛、idelalisib、pictilisib、palomid 529、ZSTK474、PWT33597、CUDC-907和AEZS-136、duvelisib、GS-9820、BKM120、GDC-0032(Taselisib)(2-[4-(2-异丙基-5-甲基-1,2,4-三唑-3-基-5,6-二氢咪唑并[1,2-d][1,4]苯并氧氮杂-9-基]吡唑-1-基]-2-甲基丙酰胺)、MLN-1117((2R)-1-苯氧基-2-丁基(S)-甲基膦酸氢酯；或甲基(氧代){[(2R)-l-苯氧基-2-丁基]氧基}膦))、BYL-719((2S)-N1-[4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基乙基)-4-吡啶基]-2-噻唑基]-1,2-吡咯烷二甲酰胺)、GSK2126458(2,4-二氟-N-{2-(甲氧基)-5-[4-(4-哒嗪基)-6-喹啉基]-3-吡啶基苯磺酰胺)(omipalisib)、TGX-221((±)-7-甲基-2-(吗啉-4-基)-9-(l-苯基氨基乙基)-吡啶并[1,2-a]-嘧啶-4-酮)、GSK2636771(2-甲基-1-(2-甲基-3-(三氟甲基)苄基)-6-吗啉基-1H-苯并[d]咪唑-4-羧酸二盐酸盐)、KIN-193(I-2-((1-(7-甲基-2-吗啉基-4-氧代-4H-吡啶并[1,2-a]嘧啶-9-基)乙基)氨基)苯甲酸)、TGR-1202/RP5264、GS-9820((S)-1-(4-((2-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-甲基-4-单羟基丙-1-酮)、GS-1101(5-氟-3-苯基-2-([S]]-1-[9H-嘌呤-6-基氨基]-丙基)-3H-喹唑啉-4-酮)、AMG-319、GSK-2269557、SAR245409(N-(4-(N-(3-(3,5-二甲氧基苯基)氨基)喹喔啉-2-基)磺酰基)苯基)-3-甲氧基-4-甲基苯甲酰胺)、BAY80-6946(2-氨基-N-(7-甲氧基-8-(3-吗啉基丙氧基)-2,3-二氢咪唑并[1,2-c]喹唑(quinaz))、AS 252424(5-[l-[5-(4-氟-2-羟基苯基)-呋喃-2-基]-甲-(Z)-亚基]-噻唑烷-2,4-二酮)、CZ 24832(5-(2-氨基-8-氟-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-N-叔丁基吡啶-3-磺酰胺)、Buparlisib(5-[2,6-二(4-吗啉基)-4-嘧啶基]-4-(三氟甲基)-2-吡啶胺)、GDC-0941(2-(1H-吲唑-4-基)-6-[[4-(甲基磺酰基)-l-哌嗪基]甲基]-4-(4-吗啉基)噻吩并[3,2-d]嘧啶)、GDC-0980((S)-1-(4-((2-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-甲基-4-吗啉噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基)哌嗪-1-基)-2-羟丙-1-酮(也称为RG7422))、SF1126((8S,14S,17S)-14-(羧甲基)-8-(3-胍丙基)-17-(羟甲基)-3,6,9,12,15-五氧代-1-(4-(4-(4-氧代-8-苯基-4H-色烯-2-基)吗啉-4-鎓)-2-氧杂-7,10,13,16-四氮杂十八烷-18-酸)、PF-05212384(N-[4-[[4-(二甲氨基)-1-哌啶基]羰基]苯基]-N'-[4-(4,6-二-4-吗啉基-1,3,5-三嗪-2-基)苯基]脲)(gedatolisib)、LY3023414、BEZ235(2-甲基-2-{4-[3-甲基-2-氧代-8-(喹啉-3-基)-2,3-二氢-1H-咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]苯基}丙腈)(dactolisib)、XL-765(N-(3-(N-(3-(3,5-二甲氧基苯基氨基)喹喔啉-2-基)磺酰基)苯基)-3-甲氧基-4-甲基苯甲酰胺)和GSK1059615(5-[[4-(4-吡啶基)-6-喹喔啉-2-基)亚甲基]-2,4-thiazolidenedione)、PX886([(3aR,6E,9S,9aR,10R,11aS)-6-[[双(丙-2-烯基)氨基]亚甲基]-5-羟基-9-(甲氧基甲基)-9a,11a-二甲基-1,4,7-三氧代-2,3,3a,9,10,11-六氢茚并[4,5h]异色烯-10-基]乙酸酯(也称为sonolisib))、LY294002、AZD8186、PF-4989216、pilaralisib、GNE-317、PI-3065、PI-103、NU7441(KU-57788)、HS 173、VS-5584(SB2343)、CZC24832、TG100-115、A66、YM201636、CAY10505、PIK-75、PIK-93、AS-605240、BGT226(NVP-BGT226)、AZD6482、voxtalisib、alpelisib、IC-87114、TGI100713、CH5132799、PKI-402、copanlisib(BAY 80-6946)、XL 147、PIK-90、PIK-293、PIK-294、3-MA(3-甲基腺嘌呤)、AS-252424、AS-604850、apitolisib(GDC-0980；RG7422)。
BTK抑制剂的实例包括依鲁替尼(也称为PCI-32765)(1-[(3R)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基-苯基)吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]哌啶-1-基]丙-2-烯-1-酮)，基于二苯胺基嘧啶的抑制剂，例如AVL-101和AVL-291/292(N-(3-((5-氟-2-((4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)苯基)丙烯酰胺)(Avila Therapeutics)(见美国专利公开号2011/0117073，整体并入本文)，达沙替尼([N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-(6-(4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-基)-2-甲基嘧啶-4-基氨基)噻唑-5-甲酰胺]、LMF-A13(α-氰基-β-羟基-β-甲基-N-(2,5-二溴苯基)丙烯酰胺)、GDC-0834([R-N-(3-(6-(4-(1,4-二甲基-3-氧代哌嗪-2-基)苯基氨基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基)-2-甲基苯基)-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-2-甲酰胺]、CGI-560 4-(叔丁基)-N-(3-(8-(苯基氨基)咪唑并[1,2-a]吡嗪-6-基)苯基)苯甲酰胺、CGI-1746(4-(叔丁基)-N-(2-甲基-3-(4-甲基-6-(4-(吗啉-4-羰基)苯基)氨基)-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基)苯基)苯甲酰胺)、CNX-774(4-(4-((4-((3-丙烯酰胺苯基)氨基)-5-氟嘧啶-2-基)氨基)苯氧基)-N-甲基吡啶酰胺)、CTA056(7-苄基-1-(3-(哌啶-1-基)丙基)-2-(4-(吡啶-4-基)苯基)-1H-咪唑并[4,5-g]喹喔啉-6(5H)-酮)、GDC-0834(I-N-(3-(6-((4-(1,4-二甲基-3-氧代哌嗪-2-基)苯基)氨基)-4-甲基-5-氧代-4,5-二氢吡嗪-2-基)-2甲基苯基)-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-2-甲酰胺)、GDC-0837(I-N-(3-(6-((4-(1,4-二甲基-3-氧代哌嗪-2-基)苯基)-4-甲基-5-氧-4,5-二氢吡嗪-2-基)-2-甲基苯基)-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-2-甲酰胺)、HM-71224、ACP-196、ONO-4059(OnoPharmaceuticals)、PRT062607(4-(3-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯基)氨基)-2-(((1R,2S)-2-氨基环己基)氨基)嘧啶-5-甲酰胺盐酸)、QL-47(1-(1-丙烯酰基吲哚啉-6-基)-9-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)苯并[h][1,6]萘-2(1H)-酮)和RN486(6-环丙基-8-氟-2-(2-羟甲基-3-{1-甲基-5-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基}-苯基)-2H-异喹啉-1-酮)，以及其他能够抑制BTK活性的分子，例如Akinleye等,Journal ofHematology&Oncology,2013,6:59中公开的那些BTK抑制剂，其整体在此通过引用并入。
Syk抑制剂包括但不限于cerdulatinib(4-(环丙氨基)-2-((4-(4-(乙基磺酰基)哌嗪-1-基)苯基)氨基)嘧啶-5-甲酰胺)、entosplatinib(6-(1H-引唑-6-基)-N-(4-吗啉基苯基)咪唑并[1,2-a]吡嗪-8-胺)、fostamatinib([6-({5-氟-2-[(3,4,5-三甲氧基苯基)氨基]-4-嘧啶基}氨基-2,2-二甲基-3-氧代-2,3-二氢-4H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4-基]甲基磷酸二氢酯)，fostamatinib二钠盐([6-({5-氟-2-[(3,4,5-三甲氧基苯基)氨基)-4-嘧啶基)氨基)-2,2-二甲基-3-氧代-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-4(3H)-基)甲基磷酸钠)、BAY 61-3606(2-(7-(3,4-(3,4-二甲氧基苯基)咪唑并[1,2-c]嘧啶-5-基氨基)烟酰胺HCl)、RO9021(6-[(1R,2S)-2-氨基-环己基氨基]-4-(5,6-二甲基-吡啶-2-基氨基)-哒嗪-3-羧酸酰胺)、伊马替尼(4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-N-(4-甲基-3-{[4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基]氨基}苯基)苯甲酰胺)、星孢菌素、GSK143(2-((3R,4R)-3-氨基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-4-(对甲苯基氨基)嘧啶-5-甲酰胺)、PP2(1-(叔丁基)-3-(4-氯苯基)-1H-吡唑并[3-d]嘧啶-4-胺)、PRT-060318(2-(((1R,2S)-2-氨基环己基)氨基)-4-(间-甲苯基氨基)嘧啶-5-甲酰胺)、PRT-062607(4-(3-(2H-1,2,3-三唑-2-基)苯基)氨基)-2-(((1R,2S)-2-氨基环己基)氨基)嘧啶-5-甲酰胺盐酸盐)、R112(3,3'-(5-氟嘧啶-2,4-二基)双(氮烷二基)二酚)、R348(3-乙基-4-甲基吡啶)、R406(6-((5-氟-2-((3,4,5-三甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)氨基)-2,2-二甲基-2H-吡啶并[3,2-b][1,4]噁嗪-3(4H)-酮)、白皮杉醇(3-羟基白藜芦醇)、YM193306(见Singh等，Discovery and Development of SpleenTyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643)、7-氮杂吲哚、白皮杉醇、ER-27319(见Singh等，Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，在此全文并入)、化合物D(见Singh等，Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，全文并入本文)、PRT060318(参见Singh等，Discoveryand Development of Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，全文并入本文)、木犀草素(参见Singh等，Discovery and Development ofSpleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，全文并入本文)、芹菜素(参见Singh等，Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，全部并入本文)、槲皮素(参见Singh等，Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，全文纳入本文)、漆黄素(参见Singh等，Discovery andDevelopment of Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，全文并入本文)、杨梅素(参见Singh等，Discovery and Development of SpleenTyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，全文并入本文)、桑色素(参见Singh等，Discovery and Development of Spleen Tyrosine Kinase(SYK)Inhibitors,J.Med.Chem.2012,55,3614-3643，其全文并入本文)。
在某些实施方案中，生物活性剂为c-MET抑制剂，例如，克唑替尼(CRIZONIXTM)、tepotinib(XL880，EXEL-2880，GSK1363089，GSK089)或tivantinib(ARQ197)。
在某些实施方案中，生物活性剂是AKT抑制剂，包括但不限于MK-2206、GSK690693、哌立福辛、(KRX-0401)、GDC-0068、曲西立滨、AZD5363、和厚朴酚、PF-04691502和米替福新，FLT-3抑制剂，包括但不限于P406、多韦替尼、奎扎替尼(AC220)、amuvatinib(MP-440)、坦度替尼(MLN518)、ENMD-2076和KW-2449，或其组合。
在某些实施方案中，生物活性剂是mTOR抑制剂。mTOR抑制剂的实例包括但不限于雷帕霉素及其类似物、依维莫司替西罗莫司、地磷莫司、西罗莫司和deforolimus。
在某些实施方案中，生物活性剂是RAS抑制剂。RAS抑制剂的实例包括但不限于Reolysin和siG12D LODER。
在某些实施方案中，生物活性剂是HSP抑制剂。HSP抑制剂包括但不限于格尔德霉素或17-N-烯丙氨基-17-去甲氧基格尔德霉素(17AAG)和根赤壳菌素。
其他生物活性化合物包括，例如依维莫司、曲贝替定、abraxane、TLK 286、AV-299、DN-101、帕唑帕尼、GSK690693、RTA 744、ON0910.Na、AZD 6244(ARRY-142886)、AMN-107、TKI-258、GSK461364、AZD 1152、enzastaurin、凡德他尼、ARQ-197、MK-0457、MLN8054、PHA-739358、R-763、AT-9263、FLT-3抑制剂、VEGFR抑制剂、极光激酶抑制剂、PIK-1调节剂、HDAC抑制剂、c-MET抑制剂、PARP抑制剂、Cdk抑制剂、IGFR-TK抑制剂、抗HGF抗体、粘着斑激酶抑制剂、Map激酶(MEK)抑制剂、VEGF trap抗体、培美曲塞、帕尼单抗、氨柔比星、奥戈伏单抗、Lep-etu、洛拉曲克、azd2171、batabulin、奥法木单抗、zanolimumab、edotecarin、粉防己碱、鲁比替康、tesmilifene、oblimersen、ticilimumab、伊匹单抗、棉酚、Bio 111、131-I-TM-601、ALT-110、BIO 140、CC 8490、西仑吉肽、gimatecan、IL13-PE38QQR、INO 1001、IpdR1KRX-0402、甲硫恩酮、LY317615、neuradiab、vitespan、Rta 744、Sdx 102、他仑帕奈、阿曲生坦、Xr 311、罗米地辛、ADS-100380、舒尼替尼、5-氟尿嘧啶、伏立诺他、依托泊苷、吉西他滨、阿霉素、脂质体阿霉素、5'-脱氧-5-氟尿嘧啶、长春新碱、替莫唑胺、ZK-304709、seliciclib、PD0325901、AZD-6244、卡培他滨、L-谷氨酸，N-[4-[2-(2-氨基-4,7-二氢-4-氧代-1H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰基]-，二钠盐，七水合物、喜树碱、PEG标记的伊立替康、他莫昔芬、托瑞米芬柠檬酸盐、阿那曲唑、依西美坦、来曲唑、DES(己烯雌酚)、雌二醇、雌激素、结合雌激素、贝伐单抗、IMC-1C11、CHIR-258)；3-[5-(甲基磺酰基哌啶甲基)-吲哚基-喹诺酮、瓦他拉尼、AG-013736、AVE-0005、醋酸戈舍瑞林、醋酸亮丙瑞林、双羟萘酸曲普瑞林、醋酸甲羟孕酮、已酸羟孕酮、醋酸甲地孕酮、雷洛昔芬、比卡鲁胺、氟他胺、尼鲁米特、乙酸甲地孕酮、CP-724714；TAK-165、HKI-272、拉帕替尼、卡拉替尼、ABX-EGF抗体、爱必妥、EKB-569、PKI-166、GW-572016、洛那法尼、BMS-214662、替吡法尼、氨磷汀、NVP-LAQ824、辛二酰analide异羟肟酸、丙戊酸、曲古抑菌素A、FK-228、SU11248、索拉非尼、KRN951、氨鲁米特、arnsacrine、阿那格雷、L-门冬酰胺酶、卡介苗(BCG)、亚德里亚霉素、博莱霉素、布舍瑞林、白消安、卡铂、卡莫司汀、瘤可宁、顺铂、克拉屈滨、氯膦酸盐、环丙孕酮、阿糖胞苷、达卡巴嗪、放线菌素D、柔红霉素、二乙基雌酚、表阿霉素、氟达拉滨、氟氢可的松、氟甲睾酮、氟他胺、吉西他滨、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、伊马替尼、亮丙瑞林、左旋咪唑、洛莫司汀、氮芥、美法仑、6-巯基嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、丝裂霉素、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、奥曲肽、奥沙利铂、帕米膦酸、喷司他丁、普卡霉素、卟菲尔(porfimer)、丙卡巴肼、雷替曲塞、利妥昔单抗、链脲霉素、替尼泊苷、睾酮、沙利度胺、硫鸟嘌呤、噻替派、维甲酸、长春地辛、13-顺式维甲酸、苯丙氨酸氮芥、乌拉莫司汀、雌莫司汀、六甲蜜胺、氟尿苷、5-去氧尿苷、阿糖胞苷、6-巯基嘌呤、脱氧助间霉素、钙三醇、戊柔比星、光神霉素、长春花碱、长春瑞滨、拓扑替康、razoxin、马马司他、COL-3、neovastat、BMS-275291、角鲨胺、内皮抑素、SU5416、SU6668、EMD121974、白介素-12、IM862、血管抑素、vitaxin、屈洛昔芬、idoxyfene、螺内酯、非那雄胺、西咪替丁、曲妥珠单抗、地尼白介素、吉非替尼、硼替佐米、紫杉醇、无cremophor紫杉醇、多西他赛、epithilone B、BMS-247550、BMS-310705、屈洛昔芬、4-羟基他莫昔芬、pipendoxifene、ERA-923、阿佐普芬、氟维司群、acolbifene、拉索昔芬、艾多昔芬、TSE-424、HMR-3339、ZK186619、拓扑替康、PTK787/ZK 222584、VX-745、PD 184352、雷帕霉素、40-O-(2-羟乙基)-雷帕霉素、替西罗莫司、AP-23573、RAD001、ABT-578、BC-210、LY294002、LY292223、LY292696、LY293684、LY293646、渥曼青霉素、ZM336372、L-779,450、PEG-非格司亭、达贝泊汀、促红细胞生成素、粒细胞集落刺激因子、zolendronate、泼尼松、西妥昔单抗、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、组氨瑞林、聚乙二醇化干扰素α-2a、干扰素α-2a、聚乙二醇化干扰素α-2b、干扰素α-2b、阿扎胞苷、PEG-L-天冬酰胺酶、来那度胺、吉妥珠单抗、氢化可的松、白介素-11、右丙亚胺、阿仑单抗、全反式维甲酸、酮康唑、白介素-2、甲地孕酮、免疫球蛋白、氮芥、甲泼尼龙、替伊莫单抗、雄激素、地西他滨、六甲密胺、贝沙罗汀、托西莫单抗、三氧化二砷、可的松、依地膦酸、米托坦、环孢霉素、脂质体柔红霉素、Edwina-天冬酰胺酶、锶89、casopitant、奈妥吡坦、NK-1受体拮抗剂、帕洛诺司琼、阿瑞匹坦、苯海拉明、羟嗪、甲氧氯普胺、劳拉西泮、阿普唑仑、氟哌啶醇、氟哌利多、屈大麻酚、地塞米松、甲泼尼松龙、丙氯拉嗪、格拉司琼、昂丹司琼、多拉司琼、托烷司琼、培非格司亭、促红细胞生成素、阿法依泊汀、阿法达贝泊汀及其混合物。
在某些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物与异环磷酰胺组合施用。
在某些实施方案中，生物活性剂选自但不限于甲磺酸伊马替尼达沙替尼尼洛替尼博舒替尼曲妥珠单抗曲妥珠单抗-DM1、帕妥珠单抗拉帕替尼吉非替尼埃罗替尼西妥昔单抗帕尼单抗凡德他尼维莫非尼伏立诺他罗米地辛蓓萨罗丁阿利维甲酸维甲酸卡非佐米普拉曲沙贝伐单抗ziv-阿柏西普索拉非尼舒尼替尼帕唑帕尼瑞格非尼和卡博替尼
在某些方面，生物活性剂是抗炎剂、化学治疗剂、放射治疗剂、附加治疗剂或免疫抑制剂。
合适的化学治疗生物活性剂包括但不限于放射性分子、毒素(也称为细胞毒素或细胞毒性剂，其包括对细胞活力有害的任何药剂)以及含有化学治疗化合物的脂质体或其他囊泡。一般抗癌药剂包括：长春新碱或脂质体长春新碱柔红霉素(道诺霉素或)或多柔比星阿糖胞苷(胞嘧啶阿拉伯糖苷、ara-C或)、L-门冬酰胺酶或PEG-L-门冬酰胺酶(培门冬酶或)、依托泊苷(VP-16)、替尼泊苷6-巯基嘌呤(6-MP或)、甲氨蝶呤、环磷酰胺强的松、地塞米松伊马替尼达沙替尼尼罗替尼博舒替尼和帕纳替尼
另外的合适化学治疗剂的实例包括但不限于1-去氢睾酮、5-氟尿嘧啶帕纳替尼、6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、放线霉素D、阿霉素、阿地白介素、烷化剂、别嘌呤醇钠、六甲蜜胺、氨磷汀、阿那曲唑、蒽霉素(AMC)、抗有丝分裂剂、顺二氯二胺铂(II)(DDP)(顺铂)、二氨基二氯铂、蒽环霉素、抗生素、抗代谢物、门冬酰胺酶、BCG live(膀胱内)、倍他米松磷酸钠和醋酸倍他米松、比卡鲁胺、硫酸博莱霉素、白消安、亚叶酸钙(calcium leucouorin)、卡利奇霉素、卡培他滨、卡铂、洛莫司汀(CCNU)、卡莫司汀(BSNU)、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、秋水仙素、结合雌激素、环磷酰胺、cyclothosphamide、阿糖胞苷、细胞松弛素B、癌得星、氮烯唑胺、更生霉素、放线菌素D(前称放线霉素)、盐酸柔红霉素、柠檬酸柔红霉素、地尼白介素、右雷佐生、二溴甘露醇、二羟蒽二酮、多西他赛、甲磺酸多拉司琼、盐酸多柔比星、屈大麻酚、大肠杆菌L-门冬酰胺酶、吐根碱、依泊汀-α、欧文氏菌L-门冬酰胺酶、酯化雌激素、雌二醇、雌莫司汀磷酸钠、溴化乙锭、炔雌醇、依替膦酸、依托泊苷citrororum因子、依托泊苷磷酸盐、非格司亭、氟尿苷、氟康唑、磷酸氟达拉滨、氟尿嘧啶、氟他胺、亚叶酸、盐酸吉西他滨、糖皮质激素、醋酸戈舍瑞林、短杆菌肽D、盐酸格拉司琼、羟基脲、盐酸伊达比星、异环磷酰胺、干扰素α-2b、盐酸伊立替康、来曲唑、甲酰四氢叶酸钙、盐酸亮丙瑞林、盐酸左旋咪唑、利多卡因、洛莫司汀、类美坦素、盐酸氮芥、醋酸甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、盐酸美法仑、巯基嘌呤(mercaptipurine)、美司钠、甲氨蝶呤、甲基睾酮、光神霉素、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、醋酸奥曲肽、盐酸昂丹司琼、紫杉醇、帕米磷酸二钠、喷司他丁、盐酸匹鲁卡品、plimycin、含卡莫司汀的polifeprosan 20植入剂、卟吩姆钠、普鲁卡因、盐酸丙卡巴肼、普萘洛尔、利妥昔单抗、沙格司亭、链脲佐菌素、他莫昔芬、紫杉醇、替尼泊苷、tenoposide、睾内酯、丁卡因、噻替派苯丁酸氮芥、硫鸟嘌呤、噻替派、盐酸拓泊替康、柠檬酸托瑞米芬、曲妥珠单抗、维甲酸、戊柔比星、硫酸长春碱、硫酸长春新碱和酒石酸长春瑞滨。
在一些实施方案中，包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物与化学治疗剂(例如细胞毒性剂或可用于治疗癌症的其他化合物)组合施用。化学治疗剂的实例包括烷化剂、抗代谢物、叶酸类似物、嘧啶类似物、嘌呤类似物和相关抑制剂、长春花碱类、表鬼臼毒素类、抗生素类、L-门冬酰胺酶、拓扑异构酶抑制剂、干扰素、铂配位复合物、蒽二酮取代的脲、甲基肼衍生物、肾上腺皮质抑制剂、肾上腺皮质类固醇、孕酮类、雌激素类、抗雌激素、雄激素类、抗雄激素和促性腺激素释放激素类似物。还包括5-氟尿嘧啶(5-FU)、亚叶酸(LV)、binutuzum、奥沙利铂、卡培他滨、紫杉醇和多西他赛。化学治疗剂的非限制性实例包括烷化剂，例如噻替派和环磷酰胺；烷基磺酸盐，如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶类，例如benzodopa、卡波醌、meturedopa和uredopa；乙烯亚胺类和methylamelamines，包括六甲蜜胺、三亚乙基蜜胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和三羟甲基三聚氰胺；acetogenins(尤其是布拉它辛和布拉它辛酮)；喜树碱(包括合成类似物拓扑替康)；苔藓抑素；callystatin；CC-1065(包括其阿多来新、卡折来新和比折来新合成类似物)；念珠藻素(特别是念珠藻素1和念珠藻素8)；多拉司他汀；duocarmycin(包括合成类似物，KW-2189和CB1-TM1)；五加素；水鬼蕉碱；sarcodictyin；spongistatin；氮芥，例如苯丁酸氮芥、萘氮芥、cholophosphamide、雌莫司汀、异环磷酰胺、二氯甲基二乙胺、氧化氮芥盐酸盐、美法仑、新恩比辛、苯芥胆甾醇、泼尼莫司汀、曲洛磷胺、乌拉莫司汀；亚硝基脲类，例如卡莫司汀、氯脲霉素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和ranimnustine；抗生素，例如雌二炔类抗生素(例如加利车霉素，尤其是加利车霉素gammall和加利车霉素omegall(参见，例如Agnew，Chem.Inti.Ed Engl.33:183-186(1994))；dynemicin，包括dynemicinA；双膦酸盐，例如氯膦酸盐；esperamicin；以及新制癌菌素发色团和相关色蛋白雌二炔抗生素发色团)、阿克拉霉素、放线霉素、authramycin、重氮丝氨酸、博莱霉素、放线菌素、carabicin、caminomycin、carzinophilin、chromomycinis、放线菌素D、柔红霉素、地托比星、6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸、(多柔比星，包括吗啉代-多柔比星、氰基吗啉代-多柔比星、2-吡咯烷-多柔比星和脱氧多柔比星)、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素如丝裂霉素C、霉酚酸、诺加霉素、橄榄霉素、培洛霉素、potfimycin、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗多比星、链黑霉素、链脲霉素、结核菌素、乌苯美司、净司他丁、佐柔比星；抗代谢物，如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，例如二甲叶酸、甲氨蝶呤、蝶罗呤、三甲曲沙；嘌呤类似物，例如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，例如安西他滨、obinutuzumab、6-氮杂尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双脱氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷；雄激素类，如卡鲁睾酮、丙酸屈他雄酮、环硫雄醇、美雄烷、睾内酯；抗肾上腺素类，如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂，如叶酸；醋葡醛内酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶；安吖啶；bestrabucil；比生群；binutuzum；defofamine；秋水仙胺；地吖醌；elfomithine；依利醋铵；埃坡霉素；乙环氧啶；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；氯尼达明；美登木素类，如美登木素和安丝菌素；米托胍腙；米托蒽醌；mopidanmol；nitraerine；喷司他丁；phenamet；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸；2-乙基酰肼；丙卡巴嗪；多糖复合物(JHS Natural Products,Eugene,OR)；雷佐生；根霉素；sizofuran；锗螺胺；细交链孢菌酮酸；三亚胺醌；2,2’,2‖-三氯三乙基胺；单端孢霉烯类(尤其是T-2毒素、verracurin A、roridin A和anguidine)；乌拉坦；长春地辛；达卡巴嗪；甘露莫司汀；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；gacytosine；阿拉伯糖苷(―Ara-C‖)；环磷酰胺；噻替派；obinutuzumab，例如(紫杉醇；Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,NJ)、无cremophor白蛋白工程化的紫杉醇纳米颗粒制剂(American Pharmaceutical Partners,Schaumberg,IL)和多西他赛(Rhone-Poulenc Rorer,Antony,France)binutuzumab；吉西他滨；6-硫鸟嘌呤；巯基嘌呤；甲氨蝶呤；铂配位化合物，如顺铂、奥沙利铂和卡铂；长春花碱；铂；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨；能灭瘤；替尼泊苷；依达曲沙；道诺霉素；氨基蝶呤；希罗达；伊班膦酸盐；伊立替康(例如CPT-11)；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视黄醇，如视黄酸；卡培他滨；以及任何上述的药学上可接受的盐、酸或衍生物。两种或更多种化学治疗剂可用于与包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物组合施用的混合物中。本领域中已知联合化疗的合适给药方案。例如，Saltz等,Proc.Am.Soc.Clin.Oncol.18:233a(1999)Douillard等,Lancet 355(9209):1041 -1047(2000)中描述了联合给药方案。
可与包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物组合施用的另外的治疗剂可包括贝伐单抗、sutinib、索拉非尼、2-甲氧基雌二醇或2ME2、finasunate、瓦他拉尼、凡德他尼、阿柏西普、伏洛昔单抗、etaracizumab(MEDI-522)、西仑吉肽、埃罗替尼、西妥昔单抗、帕尼单抗、吉非替尼、曲妥珠单抗、多韦替尼、figitumumab、阿塞西普、利妥昔单抗、阿仑单抗、aldesleukine、atlizumab、托珠单抗、替西罗莫司、依维莫司、lucatumumab、dacetuzumab、HLL1、huN901-DM1、阿替莫德、那他珠单抗、硼替佐米、卡非佐米、marizomib、tanespimycin、甲磺酸沙奎那韦、利托那韦、甲磺酸奈非那韦、硫酸茚地那韦、贝利司他、帕比司他、lexatumumab、dulanermin、ABT-737、oblimersen、plitidepsin、talmapimod、P276-00、enzastaurin、替吡法尼、哌立福辛、伊马替尼、达沙替尼、来那度胺、沙利度胺、辛伐他汀、塞来昔布、巴多昔芬、AZD4547、rilotumumab、奥沙利铂PD0332991、瑞博西利(LEE011)、amebaciclib(LY2835219)、HDM201、氟维司群依西美坦PIM447、鲁索替尼(INC424)、BGJ398、耐昔妥珠单抗、培美曲塞和雷莫芦单抗(IMC-1121B)。
在某些实施方案中，另外的疗法是单克隆抗体(Mab)。一些单克隆抗体刺激破坏癌细胞的免疫反应。类似于由B细胞自然产生的抗体，这些单克隆抗体可能―包覆‖癌细胞表面，从而触发其被免疫系统破坏。例如，贝伐单抗靶向血管内皮生长因子(VEGF)，一种由肿瘤细胞和肿瘤微环境中的其他细胞分泌的促进肿瘤血管发育的蛋白质。当与贝伐单抗结合时，VEGF不能与其细胞受体相互作用，从而阻止导致新血管生长的信号传导。结合细胞表面生长因子受体的单克隆抗体阻止靶向的受体发出正常的生长促进信号。它们还可触发细胞凋亡并激活免疫系统以破坏肿瘤细胞。
在本发明的一个方面，生物活性剂是免疫抑制剂。免疫抑制剂可以是钙调磷酸酶抑制剂，例如环孢素或子囊霉素，例如环孢菌素AFK506(他克莫司)、匹美莫司、mTOR抑制剂，例如雷帕霉素或其衍生物，例如西罗莫司依维莫司替西罗莫司、佐他莫司、biolimus-7、biolimus-9、rapalog，例如地磷莫司、硫唑嘌呤、campath 1H、S1P受体调节剂，例如芬戈莫德或类似物、抗IL-8抗体、霉酚酸或其盐，例如钠盐，或其前药，例如霉酚酸酯(OKT3(ORTHOCLONE)、强的松、 布喹那钠、OKT4、T10B9.A-3A、33B3.1、15-脱氧精胍菌素、曲培莫司、来氟米特CTLAI-Ig、抗CD25、抗IL2R、巴利昔单抗达克珠单抗mizorbine、甲氨蝶呤、地塞米松、ISAtx-247、SDZ ASM981(pimecorimus、)、CTLA4lg(阿巴西普)、belatacept、LFA3lg、依那西普(由Immunex作为出售)、阿达木单抗英夫利昔单抗抗LFA-1抗体、纳他珠单抗恩莫单抗、gavilimomab、抗胸腺细胞免疫球蛋白、siplizumab、阿法西普、依法利珠单抗、颇得斯安、美沙拉嗪、安萨科、磷酸可待因、贝诺酯、芬布芬、萘普生、双氯芬酸、依托度酸和吲哚美辛、阿司匹林和布洛芬。
在一些实施方案中，生物活性剂是治疗剂，其是用于癌症治疗的生物制剂如细胞因子(例如，干扰素或白介素(例如，IL-2))。在一些实施方案中，生物制剂是抗血管生成剂，例如抗VEGF剂，例如贝伐单抗在一些实施方案中，生物制剂是基于免疫球蛋白的生物制剂，例如单克隆抗体(例如人源化抗体、全人抗体、Fc融合蛋白或其功能性片段)，其激动靶标以刺激抗癌反应或拮抗对癌症重要的抗原。这类药剂包括(利妥昔单抗)；(达克珠单抗)；(巴利昔单抗)；(palvizumab)；(英夫利昔单抗)；(曲妥珠单抗)；(吉妥单抗)；(阿仑单抗)；(替伊莫单抗)；(阿达木单抗)；(奥马珠单抗)；(托西莫单抗-I-131)；(依法珠单抗)；(西妥昔单抗)；(贝伐单抗)；(那他珠单抗)；(托珠单抗)；(帕尼单抗)；(兰尼单抗)；(依库珠单抗)；(赛妥珠单抗)；(戈利木单抗)；(康纳单抗)；(优特克单抗)；(奥法木单抗)；(地诺单抗)；(motavizumab)；(raxibacumab)；(贝利单抗)；(伊匹单抗)；(本妥昔单抗)；(帕妥珠单抗)；(ado-曲妥珠单抗)；和(obinutzumab)。还包括抗体-药物缀合物。
联合疗法可包括非药物治疗的治疗剂。例如，可将包含有效量的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物在放射治疗、冷冻治疗、高温治疗和/或肿瘤组织的外科切除之外施用。
药物组合物
提供了适合施用于人的新的有利的药物组合物，其包含有效量的本发明化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物。在某些实施方案中，包含化合物1或其药学上可接受的盐的药物组合物由本文所述的多晶型物制备，例如化合物1晶型B。例如，化合物1晶型B可被溶解，然后被喷雾干燥以与一种或多种药学上可接受的赋形剂形成固体喷雾干燥分散体。
适合用作载体或稀释剂的药学上可接受的赋形剂是本领域技术人员已知的，并可用于多种制剂中。例如，参见Remington’sPharmaceutical Sciences,23rd Edition,A.Adejare,Editor,Academic Press(2020)；Handbook of Pharmaceutical Excipients,6th Edition,R.C.Rowe,P.J.Sheskey,M.E.Quinn Editors,American PharmaceuticalAssociation,and Pharmaceutical Press(2009)；和Handbook of PharmaceuticalAdditives,3rd Edition,Michael和Irene Ash汇编,Synapse Information Resources(2007)。
该药物组合物可被配制成任何药学上有用的形式，例如固体剂型、液体、气雾剂、霜剂、凝胶、丸剂、注射液或输注液、胶囊、片剂、糖浆剂、透皮贴剂、皮下贴剂、干粉、吸入制剂、在医疗器械中、栓剂、口腔或舌下制剂、肠胃外制剂或眼用溶液。一些剂型，例如片剂和胶囊，被细分为适当大小的单位剂量，其包含适当量的活性组分，例如达到所需目的的有效量。
载体包括赋形剂和稀释剂，并且应当具有足够高的纯度和足够低的毒性，以使其适合于以有效量施用于被治疗的患者。载体可以是惰性的，或它可以具有其自身的药物益处。与化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1的多晶型物结合使用的载体的量足以提供每单位剂量化合物施用的实际材料量。
载体的种类包括但不限于粘合剂、缓冲剂、着色剂、稀释剂、崩解剂、乳化剂、调味剂、助流剂、润滑剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂、压片剂和湿润剂。一些载体可被列在多于一个类别中，例如，植物油可能在某些制剂中用作润滑剂，和在其他制剂中用作稀释剂。示例性的药学上可接受的载体包括糖、淀粉、纤维素、黄蓍胶粉末、麦芽、明胶；滑石和植物油。药物组合物中可包含任选的活性剂，其基本上不干扰化合物1的活性。
有效量的本文公开的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型可以以包含常规药学上可接受的载体的单位剂量制剂的形式口服、局部、全身、非肠道、通过吸入或喷雾、舌下、通过植入体(例如插入肿瘤或异常细胞增殖中的植入体)、经皮、经口腔施用、经直肠、作为眼用溶液、注射(包括静脉内、主动脉内、颅内、真皮下、腹膜内、皮下)、经鼻、舌下或直肠，或通过其他方式施用。
在某些实施方案中，由本发明的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物制备或包含该化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物以固体、凝胶或液体剂型提供用于口服递送。
在某些实施方案中，药物组合物包含化合物1或其药学上可接受的盐、溶解度增强剂、渗透增强剂、填充剂、一种或多种粘合剂和/或助流剂以及一种或多种流动助剂。药学上可接受的赋形剂的非限制性实例包括羟丙甲纤维素(例如，乙酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯)、维生素E(例如，d-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯)、甘露醇、纤维素(例如微晶纤维素)、交联羧甲基纤维素钠、二氧化硅(例如，未处理的热解胶体二氧化硅)和硬脂酸镁。在某些实施方案中，根据本发明的药物组合物被配制成单位剂量形式，例如口服单位剂量形式。在某些实施方案中，根据本发明的药物组合物被配制成片剂剂型。
在某些实施方案中，包含化合物1或其药学上可接受的盐的药物组合物包含一种或多种以下赋形剂。
在某些实施方案中，还提供了制备包含根据本发明形成的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物的药物组合物的方法。在某些实施方案中，制备包含化合物1的药物组合物的方法包括：(i)喷雾干燥步骤，以提供包含化合物1和药学上可接受的赋形剂的喷雾干燥中间体(SRI)；(ii)制粒步骤，以提供含有化合物1和药学上可接受的赋形剂的颗粒，该颗粒具有约0.4至0.6g/mL(例如约0.48至0.54g/mL)的所需堆积密度；和(iii)压片步骤，以提供包含化合物1和药学上可接受的赋形剂的口服单位剂量形式的药物组合物。
在某些实施方案中，药物组合物的剂量强度为至少约10mg、20mg、40mg、80mg、100mg、120mg、140mg、160mg、180mg、200mg、220mg、240mg、260mg、280mg、300mg、320mg、340mg、360mg、380mg、400mg、440mg、480mg、520mg、560mg、600mg、640mg、680mg、720mg、760mg或800mg，其可以(在非限制性方面)每周一次、每周两次、每周三次、每周四次、每周五次、每周六次、每天一次(QD)或每天两次(BID)，任选地在28天治疗周期的第1-7天、第1-14天、第1-21天或第1-28天进行治疗。在一些实施方案中，本发明的化合物1或其药学上可接受的盐或化合物1多晶型物被提供为用于口服施用的软壳胶囊或片剂。在某些实施方案中，固体或凝胶剂型的剂量强度为至少约10mg、20mg、40mg、80mg、140mg、240mg、360mg或480mg、500mg、550mg、600mg、650mg、700mg、800mg，其可在非限制性方面每周给药一次、每周两次、每周三次、每周四次、每周五次、每周六次、每天一次(QD)或每天两次(BID)，任选地在28天治疗周期的第1-7天、第1-14天、第1-21天或第1-28天进行治疗。
在某些方面，药物组合物根据需要每天口服施用一次或两次(BID)。
药物组合物的实施方案包括：
1.在某些实施方案中，化合物1以有效量存在于药物组合物中，该药物组合物包含溶解度增强剂、渗透增强剂、填充剂、粘合剂/助流剂和/或粘膜粘着剂/崩解剂中的至少三种、四种或全部。
2.根据实施方案1的药物组合物，其中所述药物组合物以片剂剂型提供。
3.根据实施方案1-2中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物由化合物1多晶型物制备，例如通过溶解然后喷雾干燥化合物1晶型B。
4.根据实施方案1-3中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物进一步包含流动助剂和润滑剂。
5.根据实施方案1-4中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物包含约5重量％至约20重量％的化合物1。
6.根据实施方案1-5中任一项的药物组合物，其中所述溶解度增强剂为羟丙甲纤维素或羟丙甲纤维素衍生物。
7.根据实施方案6的药物组合物，其中羟丙甲纤维素衍生物是乙酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯。
8.根据实施方案1-7中任一项的药物组合物，其中渗透增强剂为维生素E或维生素E衍生物。
9.根据实施方案8的药物组合物，其中维生素E衍生物是d-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯。
10.根据实施方案1-9中任一项的药物组合物，其中所述填充剂为甘露醇。
11.根据实施方案1-10中任一项的药物组合物，其中粘合剂/助流剂为纤维素。
12.根据实施方案11的药物组合物，其中粘合剂/助流剂为微晶纤维素。
13.根据实施方案1-12中任一项的药物组合物，其中所述粘膜粘着剂/崩解剂为交联羧甲基纤维素或交联羧甲基纤维素衍生物。
14.根据实施方案13的药物组合物，其中交联羧甲基纤维素衍生物是交联羧甲基纤维素钠。
15.根据实施方案4-14中任一项的药物组合物，其中流动助剂为胶体二氧化硅。
16.根据实施方案15的药物组合物，其中胶体二氧化硅是未处理的热解胶体二氧化硅。
17.根据实施方案4-16中任一项的药物组合物，其中润滑剂为硬脂酸镁。
18.根据实施方案1-17中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物包含约15重量％至约55重量％的溶解度增强剂。
19.根据实施方案1-18中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物包含约1重量％至约10重量％的渗透增强剂。
20.根据实施方案1-19中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物包含约20重量％至约40重量％的填充剂。
21.根据实施方案1-20中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物包含约10重量％至约30重量％的粘合剂/助流剂。
22.根据实施方案1-21中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物包含约0.5重量％至约5重量％的粘膜粘着剂/崩解剂。
23.根据实施方案1-22中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物包含约10重量％的化合物1。
24.根据实施方案1-23中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含约35重量％的溶解度增强剂。
25.根据实施方案1-24中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物包含约5重量％的渗透增强剂。
26.根据实施方案1-25中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物包含约28重量％的填充剂。
27.根据实施方案1-26中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物包含约20重量％的粘合剂/助流剂。
28.根据实施方案1-27中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物包含约2重量％的粘膜粘着剂/崩解剂。
29.根据实施方案4-28中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物包含约0.5重量％流动助剂。
30.根据实施方案4-29中任一项的药物组合物，其中所述药物组合物包含约0.6重量％的润滑剂。
包含化合物1的多晶型物的药物组合物
化合物1多晶型物可作为净化学品施用，但通常作为包含有效量的化合物1多晶型物的药物组合物施用于需要治疗本文所述任何障碍的宿主，通常人。因此，本公开提供了包含有效量的化合物1多晶型物以及至少一种本文所述的药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物。药物组合物可包含化合物1多晶型物作为唯一的活性剂，或在替代实施方案中，包含化合物1多晶型物和至少一种另外的活性剂。
在某些实施方案中，药物组合物为在单位剂型中包含约0.001mg至约1000mg、约0.01mg至约800mg、约1mg至约800mg、或约200mg至约600mg的化合物1多晶型物，并且任选地包含约0.1mg至约2000mg、约10mg至约1000mg、约100mg至约800mg或约200mg至约600mg的另外的活性剂的剂型。实例为具有至少约或不超过0.001、0.005、0.010、0.10、1、5、10、25、50、100、200、250、300、400、500、600、700或750mg化合物1多晶型物的剂型。
在某些实施方案中，药物组合物的剂型包含约50mg化合物1的多晶型物。在某些实施方案中，药物组合物的剂型包含约100mg化合物1的多晶型物。在某些实施方案中，药物组合物的剂型包含约150mg化合物1的多晶型物。在某些实施方案中，药物组合物的剂型包含约200mg化合物1的多晶型物。在某些实施方案中，药物组合物的剂型包含约250mg化合物1的多晶型物。在某些实施方案中，药物组合物的剂型包含约300mg化合物1的多晶型物。在某些实施方案中，药物组合物的剂型包含约400mg化合物1的多晶型物。在某些实施方案中，药物组合物的剂型包含约500mg化合物1的多晶型物。在某些实施方案中，药物组合物的剂型包含约600mg化合物1的多晶型物。在某些实施方案中，药物组合物的剂型包含约700mg化合物1的多晶型物。在某些实施方案中，药物组合物的剂型包含约800mg化合物1的多晶型物。
在某些实施方案中，化合物1多晶型物每天一次或两次施用于需要的患者。
在某些实施方案中，根据本发明的药物组合物包括化合物1的多晶型物和药学上可接受的赋形剂。在某些实施方案中，药学上可接受的赋形剂包括但不限于乙酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯、维生素E TPGS(d-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯)、甘露醇、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、未处理的热解胶体二氧化硅和硬脂酸镁。
药物组合物可配制用于口服施用。这些组合物可包含达到所需结果的任何量的化合物1多晶型物，例如0.1至99重量％(wt.％)，通常至少约5重量％的化合物1多晶型物。一些实施方案包含约5重量％至约30重量％，约25重量％至约50重量％或约5重量％至约75重量％化合物1多晶型物。
实施例
一般合成
本文所述的化合物可通过本领域技术人员已知的方法制备。在一个非限制性实施例中，所公开的化合物可使用以下方案制备。
为方便起见，本发明的具有立体中心的化合物可以在没有立体化学的情况下绘制。本领域技术人员将认识到，纯对映体和非对映体可以通过本领域已知的方法制备。获得旋光活性材料的方法的实例至少包括以下：
i)晶体的物理分离—人工分离单个对映体宏观晶体的技术。如果存在单独对映体的晶体，即材料为聚集物，并且晶体在视觉上是有区别的，则可以使用该技术；
ii)同时结晶—一种将单个对映体从外消旋物溶液中单独结晶的技术，仅在对映体为固态聚集物时才有可能；
iii)酶促拆分—通过对映体与酶的不同反应速率部分或完全分离外消旋体的技术；
iv)酶促不对称合成—合成中的至少一个步骤使用酶促反应获得所需对映体的对映体纯的或富集的合成前体的合成技术；
v)化学不对称合成—所需的对映体在产物中产生不对称性(即手性)的条件下从非手性前体合成的合成技术，其可以通过手性催化剂或手性助剂实现；
vi)非对映体分离—外消旋化合物与对映体纯试剂(手性助剂)反应(将单个对映体转化为非对映体)的技术。所得非对映体随后由于其现在更明显的结构差异通过色谱或结晶分离，手性助剂随后被去除以获得所需的对映体；
vii)一阶和二阶不对称转化—来自外消旋物的非对映体快速平衡以在非对映体溶液中从所需对映体产生优势的技术，其中从所需对映体的非对映体优先结晶扰乱了平衡，使得原则上最终所有材料从所需对映体转化为晶体非对映体。然后所需对映体从非对映体释放；
viii)动力学拆分—该技术指通过对映体与手性、非外消旋试剂或催化剂在动力学条件下的不同反应速率实现外消旋物的部分或完全拆分(或实现部分拆分化合物的进一步拆分)；
ix)从非外消旋前体的对映体特异性合成—从非手性起始材料获得所需对映体且其中立体化学完整性在合成的过程中未受到损害或仅受到最低程度的损害的合成技术；
x)手性液相色谱—外消旋物的对映体通过其与固定相(包括小瓶手性HPLC)的不同相互作用在液体流动相中分离的技术。固定相可以由手性材料制成，或者流动相可以包含另外的手性材料以引起该不同的相互作用；
xi)手性气相色谱—外消旋物挥发且对映体通过气相流动相与含有固定的非外消旋手性吸附相的柱的不同相互作用分离的技术；
xii)用手性溶剂提取—通过将一种对映体优先溶解于特定手性溶剂中来分离对映体的技术；
xiii)跨手性膜的转运—外消旋物与薄膜屏障接触的技术。屏障可分离两种可混溶的流体，一种包含外消旋物，驱动力(例如浓度或压力差)导致跨膜屏障的优先转运。由于膜仅允许外消旋物的一种对映体通过的非外消旋手性性质而发生分离；
xiv)在一个实施方案中使用模拟移动床色谱。可商购得到多种多样的手性固定相。
术语―亲核芳族置换‖(SNAr)指亲核试剂置换芳环上的良好离去基团，例如卤素(F、Cl、Br、I)、甲苯磺酸酯、甲磺酸酯、三氟甲磺酸酯等的取代反应。SNAr反应中亲核试剂的实例包括但不限于胺(包括芳族胺)、醇、酚和包含芳环上连接的羟基的芳族化合物。亲核芳族置换可在降低的温度(低于0℃)、室温(约25℃)或升高的温度(约30-200℃)下进行。该反应在任何合适的溶剂中进行，包括但不限于DMSO、N,N-二甲基甲酰胺、THF、N,N-二甲基乙酰胺、1,4-二氧六环和乙腈。反应在碱(例如无机或有机碱)的存在下进行，包括但不限于NaOH、KOH、Na2CO3、Na3PO4、Cs2CO3、Li2CO3、DIEA(N,N-二异丙基乙基胺或Hünig’s碱)。
根据本发明的化合物的合成可包括一些反应性基团(例如氨基和羧酸羟基)的保护和脱保护的步骤。氨基和羟基以及相应保护基的保护和脱保护方法是本领域技术人员所知的，例如Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis,5th Edition,P.G.M.Wuts,Wiley(2014)。
实施例1：(R)-3-(6-(2-氰基-3,6-二氟苯氧基)-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁基酯的合成-路线1(通过转氨作用)
步骤1可按生产规模进行以制备大量1-2用于化合物1的制备。
以下提供了该放大反应和原料投入的非限制性示例。
1H NMR(400MHz,CDCl3),δ,ppm:3.94(m,1H)3.46-3.67(m,4H)3.26-3.39(m,2H)2.06(m,1H)1.69-1.76(m,1H)1.65(m,1H)1.54-1.62(m,1H)1.48-1.52(m,2H)1.41-1.48(m,11H)。
步骤2可按生产规模进行，以制备大量1-4用于化合物1的制备。
以下提供了该放大反应和原料投入的非限制性示例。
步骤3可按生产规模进行以制备大量1-6用于化合物1的制备。
以下提供了该放大反应和原料投入的非限制性示例。
步骤4可按生产规模进行以制备大量1-7用于化合物1的制备。
以下提供了该放大反应和原料投入的非限制性示例。
实施例2：(R)-3-(6-(2-氰基-3,6-二氟苯氧基)-4-氧代喹唑啉-3(4H)-基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁基酯的合成-路线2(通过非对映体结晶)
步骤1：3-(羟基亚氨基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(2-1)的合成。向3-氧代-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁基酯(1-1，30克，117.50毫摩尔)的乙醇(450毫升)溶液中加入乙酸钠(14.46克，176.26毫摩尔)和盐酸羟胺(12.25克，176.26毫摩尔)。将混合物在70℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩以除去EtOH，用乙酸乙酯(300mL)和水(300mL)稀释。水层用乙酸乙酯(2×150mL)萃取，合并的有机相用饱和碳酸氢钠(aq.300mL)、水(300mL)、盐水(300mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩以得到3-(羟基亚氨基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(2-1，32g，粗品)，为淡黄色油。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.71-7.60(m,1H),4.52(s,1H),4.38(s,1H),3.74-3.57(m,2H),3.41-3.26(m,2H),2.58(s,1H),2.50(s,1H),1.77-1.66(m,2H),1.65-1.54(m,2H),1.46(s,9H)。
步骤2：3-氨基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(2-2)的合成。向(3E)-3-羟基亚氨基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁基酯(2-1，32克，118.38毫摩尔)的乙醇(600毫升)溶液中加入雷尼-Ni(6.00克，70.03毫摩尔)和乙酸铵(19.1克，247.79毫摩尔)。混合物在氢气气氛(15psi)下于70℃下搅拌2小时。通过硅藻土过滤反应混合物，并浓缩过滤液。残留物溶解在盐酸水溶液(1M，150mL)中，所得混合物用甲基叔丁基醚(2×150mL)洗涤，然后加入NaOH水溶液(4M)，并调节至pH＝12。水层用二氯甲烷(3×150mL)萃取，合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩以得到3-氨基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(2-2，22.2g，86.60mmol，收率73.16％)，为淡黄色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.02-3.85(m,1H),3.70-3.43(m,4H),3.39-3.21(m,2H),2.05(br dd,J＝7.5,12.7Hz,1H),1.78-1.53(m,3H),1.51-1.33(m,13H)。
步骤3：(R)-8-(叔丁氧基羰基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-3-胺(R)-2-羟基-2-苯基乙酸盐(2-4)(D-扁桃酸盐)的合成。在15℃(环境温度)下向3-氨基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁基酯(2-2，25克，97.53毫摩尔)在乙腈(350毫升)中的混合物中分批加入(2R)-2-羟基-2-苯基-乙酸(2-3，7.42克，48.76毫摩尔)，形成沉淀，然后混合物在70℃下搅拌2小时。在缓慢冷却到15℃后，悬浮液在15℃下再搅拌12小时。过滤沉淀物，用乙腈(100mL)洗涤，并真空干燥。获得(R)-8-(叔丁氧基羰基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-3-胺(R)-2-羟基-2-苯基乙酸盐(2-4，19.5g)。
1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ＝7.52-7.45(m,2H),7.35-7.28(m,2H),7.28-7.21(m,1H),4.89(br s,1H),4.01(dd,J＝5.4,10.1Hz,1H),3.91-3.79(m,2H),3.65(tdd,J＝4.5,8.7,13.1Hz,2H),3.32-3.21(m,2H),2.24(dd,J＝8.0,13.9Hz,1H),1.80-1.62(m,4H),1.55-1.49(m,1H),1.48(s,9H)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝7.37(d,J＝7.3Hz,2H),7.28-7.21(m,2H),7.20-7.13(m,1H),4.57(s,1H),3.86(dd,J＝6.0,9.5Hz,2H),3.71(ddd,J＝5.6,8.0,10.9Hz,2H),3.62(dd,J＝4.9,9.5Hz,2H),3.42(qd,J＝4.2,13.1Hz,3H),3.19(br d,J＝10.3Hz,3H),2.05(dd,J＝8.1,13.4Hz,1H),1.66-1.54(m,3H),1.54-1.45(m,1H),1.45-1.40(m,1H),1.39(s,9H)。
步骤4：(3R)-3-氨基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁基酯(1-2)的合成。将(R)-8-(叔丁氧基羰基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-3-胺(R)-2-羟基-2-苯乙酸盐2-4悬浮于水(200mL)中，并用氢氧化钠水溶液(2M，25mL)中和。混合物用乙酸乙酯(3×250mL)萃取，合并的有机层用盐水(3×100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩以得到作为白色固体的(3R)-3-氨基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁基酯(1-2，10.3g，95.3％e.e.)。
可以重复步骤3和4以更高对映体纯度获得1-2
在15℃(环境温度)下向(3R)-3-氨基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁基酯(1-2，10.3克，39毫摩尔)在乙腈(350毫升)中的混合物中分批加入(2R)-2-羟基-2-苯基-乙酸(2-3，5.76克，37.8毫摩尔)，形成沉淀，然后将混合物在70℃下搅拌2小时。在缓慢冷却到15℃后，悬浮液在15℃下再搅拌12小时。过滤沉淀物，用乙腈(40mL)洗涤，并真空干燥。(保持掌握3克)。其余D-扁桃酸盐悬浮于水(80mL)中，用氢氧化钠水溶液(2M，20mL)中和并用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。合并的有机层用盐水(3×50mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩以得到作为白色固体的(3R)-3-氨基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁基酯(1-2，6.5g，23.80mmol，99.5％e.e.)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.93(dd,J＝5.8,8.8Hz,1H),3.72-3.43(m,4H),3.41-3.23(m,2H),2.05(dd,J＝7.3,12.6Hz,1H),1.79-1.53(m,4H),1.52-1.34(m,13H)。
化合物2-4的立体化学测定。
实施例2中的扁桃酸盐2-4通过X射线晶体学测定为(R)-8-(叔丁氧基羰基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-3-胺(R)-2-羟基-2-苯基乙酸盐。(单晶体X射线晶体学结构测定见实施例32)。该中间体2-4进行到1-7的合成，其基于后续反应的机理，也是R-异构体。
然后使用手性SFC和旋光性测定法将实施例2(路线2)中获得的化合物1-7的立体化学与实施例1(路线1)中获得的进行比较。
手性SFC方法:
柱：AD-3，50×4.6mm I.D.,3um；
流动相：CO2的A相，MeOH(0.05％ DEA)的B相；
梯度洗脱：CO2中40％ MeOH(0.05％ DEA))；
流速：3mL/min；
检测器：PDA；
柱温：35℃；
反压：100巴。
1-7(路线2)的保留时间＝1.70分钟(晚洗脱峰)。
1-7(路线1)的保留时间＝1.69分钟(晚洗脱峰)。
外消旋1-7(对照)的保留时间＝0.96分钟(早洗脱峰)和1.77分钟(晚洗脱峰)。
1-7(路线2)的旋光度
1-7(路线1)的旋光度
由于来自路线1和路线2的中间体1-7是手性SFC(相同方法)上的晚洗脱峰，并且具有相同的负号旋光度，因此路线1中的化合物1-7被确定为R-异构体。这也证实了化合物1的绝对立体化学性质如下所述为R。
实施例3：2-(1-(3-(2,4-二氧代四氢嘧啶-1(2H)-基)-5-氟-1-甲基-1H-吲唑-6-基)-4-羟基哌啶-4-基)乙酸的合成
步骤1可按生产规模进行以制备大量3-3用于化合物1的制备。
以下提供了该放大反应和原料投入的非限制性示例。
步骤2可按生产规模进行以制备大量3-4用于化合物1的制备。
以下提供了该放大反应和原料投入的非限制性示例。
步骤3可按生产规模进行以制备大量3-6用于化合物1的制备。
以下提供了该放大反应和原料投入的非限制性示例。
步骤4可按生产规模进行，以制备大量3-7用于化合物1的制备。
以下提供了该放大反应和原料投入的非限制性示例。
实施例4：(3R)-3-[6-[2-氰基-3-[[乙基(甲基)氨磺酰基]氨基]-6-氟代苯氧基]-4-氧代喹唑啉-3-基]-8-[2-[1-[3-(2,4-二氧代-1,3-二嗪烷-1-基)-5-氟-1-甲基吲唑-6-基]-4-羟基哌啶-4-基]乙酰基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(化合物1)的合成
化合物1由三种起始原料4-1、1-7和3-7以七个步骤制备，如以上方案所示。原料4-1在三乙基胺(TEA)存在下用硫酰氯(SO2Cl2)处理以得到氨磺酰氯4-2，其在甲醇(NH3/MeOH)存在下与氨反应以产生磺酰胺4-3。1-7(>99％e.e.)用4-3的亲核芳族置换(SNAr)得到中间体4-4，而不损失其对映体纯度(>99％e.e.)。使用HCl将4-4中的Boc基团脱保护得到作为游离碱的中间体4-5。用TSTU处理3-7产生了其激活形式4-6。在DIEA存在下，在4-5和4-6之间形成酰胺键得到作为无定形固体的化合物1。将无定形化合物1从丙酮和水的混合物重结晶得到大于99％e.e.的化合物1药物物质，为结晶固体。
化合物1药物物质以七个步骤生产，一般过程描述如下。
步骤1：起始原料4-1在-10至5℃之间用二氯甲烷中的硫酰氯和三乙基胺处理，以生成氨磺酰氯4-2。反应完成后，向反应混合物中缓慢加入水。收集所得有机层，用水洗涤，真空浓缩以得到作为二氯甲烷溶液的4-2。
步骤2：在-10℃至0℃之间，将二氯甲烷中的氨磺酰氯4-2加入到氨在甲醇中的溶液中，随后将反应升温至15℃至25℃以产生磺酰胺4-3。反应完成后，反应混合物在真空下浓缩，用乙酸乙酯和水进行水性处理。进行溶剂切换以分离作为二甲基乙酰胺溶液的4-3。
步骤3：将起始原料1-7、磺酰胺4-3和碳酸铯在二甲基乙酰胺中的混合物在55-65℃下搅拌以生成中间体4-4。在反应达到目标转化率后，在20-30℃下向反应混合物中加入水，并进行过滤以去除残留固体。所得水溶液用甲基叔丁基醚洗涤，用1N盐酸中和，用乙酸乙酯萃取。含产物的乙酸乙酯层通过CUNO过滤器。过滤的溶液在真空下浓缩以得到作为乙酸乙酯溶液的4-4，手性纯度保持(>99％)。
步骤4：乙酸乙酯中的中间体4-4在45-55℃下用盐酸水溶液处理以得到脱保护的形式4-5。反应完成后，向反应混合物中加入水，然后加入20％的碳酸钠水溶液，从而将反应混合物的pH值调节至约9。通过过滤分离作为固体的游离碱4-5。
步骤5：起始原料3-7在乙腈中在二异丙基乙基胺(DIEA)存在下，首先在-5至5℃下和随后升温至20至30℃，用N,N,N’,N’-四甲基-O-(N-琥珀酰亚胺基)脲四氟硼酸盐(TSTU)处理，以产生激活形式的4-6。反应达到目标转化率后，过滤收集所得固体。过滤的固体用水洗涤，然后用乙腈洗涤。将洗涤的固体干燥以得到作为白色固体的4-6。
步骤6：中间体4-5和4-6在二甲基甲酰胺中的混合物用三乙胺处理，并在20-30℃下搅拌以生成化合物1。反应达到目标转化率后，将反应混合物加入含水的第二反应器中。首先通过过滤收集所得固体，并将其重新溶解在二氯甲烷中。含产物的二氯甲烷层通过CUNO过滤器。过滤的溶液在真空下浓缩。从二甲基甲酰胺-水混合物研磨浓缩材料得到为无定形固体的化合物1。
步骤7：无定形化合物1从丙酮、水和乙醇的混合物重结晶以得到结晶化合物1药物物质。无定形化合物1首先在48-58℃下溶解于丙酮和水的混合物中，然后在35-45℃下用少量结晶化合物1作为种子进行处理。搅拌数小时后，向混合物中缓慢加入乙醇。将所得混合物冷却至-3至3℃，并在该温度下搅拌数小时。过滤，然后用乙醇洗涤并干燥，得到为结晶固体的化合物1药物物质。
步骤1可按生产规模进行，以制备大量4-2用于化合物1的制备。
这种放大反应的非限制性示例如下提供。
步骤2可按生产规模进行以制备大量4-3用于化合物1的制备。
这种放大反应的非限制性示例如下提供。
步骤3可按生产规模进行以制备大量4-4用于化合物1的制备。
这种放大反应的非限制性示例提供如下。
步骤4可按生产规模进行以制备大量4-5用于化合物1的制备。
这种放大反应的非限制性示例提供如下。
步骤5可按生产规模进行以制备大量4-6用于化合物1的制备。
这种放大反应的非限制性示例提供如下。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 1.70-2.01(m,4H)2.66-2.93(m,8H)2.99-3.22(m,4H)3.76-4.09(m,5H)4.96(br s,1H)7.13(br d,J＝1.10Hz,1H)7.33(br d,J＝11.49Hz,1H)10.54(br s,1H)。
步骤6可按生产规模进行以制备大量化合物1(无定形)用于化合物1的制备。这种放大反应的非限制性示例提供如下。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δppm 10.53(s,1H),10.20(br s,1H),8.36(s,1H),7.95-7.75(m,2H),7.70(dd,J＝3.2,8.8Hz,1H),7.50(dd,J＝4.4,9.6Hz,1H),7.41-7.26(m,2H),7.11(d,J＝7.2Hz,1H),5.40-5.19(m,1H),5.03(br s,1H),4.18-4.08(m,2H),3.94(s,3H),3.89(t,J＝6.7Hz,2H),3.78(br dd,J＝4.8,12.8Hz,1H),3.68-3.58(m,1H),3.56-3.39(m,2H),3.19-3.14(m,4H),3.10-3.00(m,2H),2.79(s,3H),2.73(t,J＝6.7Hz,2H),2.57(br s,2H),2.42-2.32(m,1H),2.14-1.97(m,1H),1.86-1.49(m,8H),1.05(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤7可在生产规模下进行以制备大量结晶化合物1。这种放大反应的非限制性示例提供如下。
实施例5：(3R)-3-[6-[2-氰基-3-[[乙基(甲基)氨磺酰基]氨基]-6-氟苯氧基]-4-氧代-喹唑啉-3-基]-8-[2-[3,3,5,5-四氘代-1-[3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-5-氟-1-甲基-吲唑-6-基]-4-羟基-4-哌啶基]乙酰基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4,5]癸烷的合成
步骤1：向1-苄基哌啶-4-酮(10克，52.84毫摩尔，9.80毫升，1eq.)在CDCl3氯化镉(50毫升)和D2O(50毫升)中的溶液加入3,4,6,7,8,9-六氢-2H-嘧啶并[1,2-a]嘧啶(1.40克，10.06毫摩尔，0.19eq.)。混合物在密封管中于15℃下搅拌16小时。向反应混合物中加入HCl水溶液(1M)以将pH调节至约7，分离的有机相用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩以得到作为黄色油的化合物1-苄基-3,3,5,5-四氘代-哌啶-4-酮(9.8g，粗品)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝7.53-7.14(m,5H),3.64(s,2H),2.75(s,4H)。
步骤2：在-65℃下向LDA的溶液(2M，30.11mL，1.2eq.)加入乙酸叔丁酯(7.00克，60.22毫摩尔，8.08毫升，1.2eq.)在THF(75mL)中的溶液，将混合物在-60℃下搅拌0.5小时，然后在-60℃下加入1-苄基-3,3,5,5-四氘代-哌啶-4-酮(9.7g，50.19mmol，1.76mL，1eq.)在THF(10mL)中的溶液。将混合物在-60℃下搅拌1.5小时，然后将混合物在10℃下搅拌0.5小时。将反应混合物倾倒到NH4Cl水溶液(100mL)中，用EtOAc(100mL×2)萃取，合并的有机相用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩以得到作为黄色固体的化合物2-(1-苄基-3,3,5,5-四氘代-4-羟基-4-哌啶基)乙酸叔丁酯(17g，粗品)。LCMS m/z(ESI):310.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝7.28-7.14(m,5H),3.53(s,1H),3.45(s,2H),2.49(br d,J＝11.4Hz,2H),2.34(br d,J＝11.4Hz,2H),2.30(s,2H),1.39(s,9H)。
步骤3：向2-(1-苄基-3,3,5,5-四氘代-4-羟基-4-哌啶基)乙酸叔丁酯(17克，54.94毫摩尔，1当量)在EtOH(170毫升)中的溶液加入Pd(OH)2/C(3.40克，20％纯度)和HCOOH(5.28克，109.88毫摩尔，2当量)。将混合物在50℃下搅拌2小时。过滤并浓缩反应混合物。残留物用石油/EtOAc(10/1，5V)在25℃下研磨2小时，过滤悬浮液，收集滤饼。获得黄色固体的化合物2-(3,3,5,5-四氘代-4-羟基-4-哌啶基)乙酸叔丁酯(10g，粗品)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝3.02(br d,J＝12.4Hz,2H),2.82(d,J＝12.4Hz,2H),2.38(s,2H),1.47(s,9H)。
步骤4：向2-(3,3,5,5-四氘代-4-羟基-4-哌啶基)乙酸叔丁酯(10克，45.60毫摩尔，1当量)在DMF(40毫升)中的溶液加入DIEA(11.79克，91.19毫摩尔，15.88毫升，2当量)和2,4,5-三氟苯甲腈(6.80克，43.32毫摩尔，0.95eq.)。将混合物在70℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至25℃，并倒入水(250mL)中。将所得混合物在25℃下搅拌2小时，过滤，并收集滤饼。获得黄色固体的化合物2-[1-(4-氰基-2,5-二氟-苯基)-3,3,5,5-四氘代-4-羟基-4-哌啶基]乙酸叔丁酯(12克，粗)。LCMS m/z(ESI):357.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝7.17(dd,J＝6.0,12.4Hz,1H),6.66(dd,J＝7.0,11.0Hz,1H),3.87(s,1H),3.46-3.35(m,2H),3.31-3.22(m,2H),2.43(s,2H),1.49(s,9H)。
步骤5：在55℃下向2-[1-(4-氰基-2,5-二氟-苯基)-3,3,5,5-四氘代-4-羟基-4-哌啶基]乙酸叔丁酯(12克，33.67毫摩尔，1当量)在NMP(100mL)中的溶液缓慢加入甲基肼(19.43g，168.70mmol，22.21mL，40％纯度，5.0eq.)。将混合物在90℃下搅拌16小时。通过在25℃下加入柠檬酸水溶液以将pH调节至6～7使反应混合物淬灭，然后向混合物中加入水至600mL。将所得混合物在20℃下搅拌2小时，过滤，收集滤饼。获得黄色固体的化合物2-[1-(3-氨基-5-氟-1-甲基-吲唑-6-基)-3,3,5,5-四氘代-4-羟基-4-哌啶基]乙酸叔丁酯(11克，粗品)。LCMS m/z(ESI):383.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ＝7.12(d,J＝11.8Hz,1H),6.73-6.65(m,1H),3.81(s,1H),3.79(s,3H),3.27-3.22(m,2H),3.18-3.09(m,2H),2.46(s,2H),1.50(s,9H)。
步骤6：向2-[1-(3-氨基-5-氟-1-甲基-吲唑-6-基)-3,3,5,5-四氘代-4-羟基-4-哌啶基]乙酸叔丁基酯(11克，28.76毫摩尔，1当量)在二噁烷(110mL)中的溶液加入丙烯酸(6.22g，86.28mmol，5.92mL，3eq.)。将混合物在100℃下搅拌30小时。将反应混合物用水(300mL)稀释，用2-MeTHF/MeOH(5/1，200×3)萃取，有机相用盐水(200mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物用石油醚/EtOAc(1/1，110mL)在20℃下研磨2小时，然后过滤。收集滤饼，在50℃下用i-PrOH/i-PrOAc(5/1，10V)进一步研磨2小时。将悬浮混合物在50℃下过滤。获得白色固体的化合物3-[[6-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)-3,3,5,5-四氘代-4-羟基-1-哌啶基]-5-氟-1-甲基-吲唑-3-基]氨基]丙酸(5.2克，10.53毫摩尔,产率36.60％,纯度92％)。LCMS m/z(ESI):455.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝7.36(d,J＝12.6Hz,1H),6.86(d,J＝7.0Hz,1H),3.70(s,3H),3.40(br t,J＝6.8Hz,2H),3.13-3.05(m,2H),3.02-2.95(m,2H),2.56(t,J＝6.8Hz,2H),2.37(s,2H),1.42(s,9H)。
步骤7：向3-[[6-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代-乙基)-3,3,5,5-四氘代-4-羟基-1-哌啶基]-5-氟-1-甲基-吲唑-3-基]氨基]丙酸(5.2克，11.44毫摩尔，1当量)在AcOH(50mL)中的溶液加入氰酸钠(1.49克，22.88毫摩尔，2eq.)。将混合物在60℃下搅拌12小时，然后加入HCl(2M，52.00毫升，9.09当量)，并将混合物在60℃下搅拌16小时。向反应混合物中加入饱和Na2CO3和NaHCO3以将pH值调节至约5，将混合物在15℃下搅拌2小时，固体沉淀出来，并过滤。收集滤饼，用水(10V)在100℃下研磨16小时，然后过滤。获得灰色固体的化合物2-[3,3,5,5-四氘代-1-[3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-5-氟-1-甲基-吲唑-6-基]-4-羟基-4-哌啶基]乙酸(2.4g，5.64mmol，49.30％收率，99.5％纯度)。LCMS m/z(ESI):424.1[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.53(s,1H),7.33(br d,J＝12.8Hz,1H),7.12(br d,J＝6.8Hz,1H),4.03-3.81(m,5H),3.15(br d,J＝11.6Hz,2H),3.04(br d,J＝11.6Hz,2H),2.74(brt,J＝6.4Hz,2H),2.43(s,2H)。
步骤8：在15℃下向2-[3,3,5,5-四氘代-1-[3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-5-氟-1-甲基-吲唑-6-基]-4-羟基-4-哌啶基]乙酸(2.4克，5.67毫摩尔，1eq.)在ACN(24毫升)中的溶液加入TSTU(3.41克，11.34毫摩尔，2当量)和DIEA(1.47克，11.34毫摩尔，1.97毫升，2eq.)。将混合物在15℃下搅拌2小时。过滤反应混合物，用MeCN(10mL)、水(10mL)和MeCN(10mL)洗涤滤饼。获得白色固体的化合物(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)2-[3,3,5,5-四氘代-1-[3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-5-氟-1-甲基-吲唑-6-基]-4-羟基-4-哌啶基]乙酸酯(2.4g，粗品)。LCMS m/z(ESI):521.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.54(s,1H),7.33(br d,J＝12.8Hz,1H),7.14(br d,J＝7.0Hz,1H),4.94(s,1H),4.01-3.78(m,5H),3.18(br d,J＝11.6Hz,2H),3.04(br d,J＝11.6Hz,2H),2.83(br d,J＝9.0Hz,6H),2.73(br t,J＝6.4Hz,2H)。
步骤9：向(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)2-[3,3,5,5-四氘代-1-[3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-5-氟-1-甲基-吲唑-6-基]-4-羟基-4-哌啶基]乙酸酯(1克，1.92毫摩尔，1eq.)在DMF(10mL)中的溶液加入(3R)-3-[6-[2-氰基-3-[[乙基(甲基)氨磺酰基]氨基]-6-氟-苯氧基]-4-氧代-喹唑啉-3-基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(1.07g，1.92mmol，1eq.)和TEA(97.20mg，960.61umol，133.71uL，0.5eq.)。将混合物在25℃下搅拌18小时。将反应混合物缓慢加入水(80mL)中，然后用HCl水溶液(1M)将pH调节至6。并过滤。收集滤饼，在25℃下用i-PrOH/i-PrOAc(5/1，20mL)研磨2小时，然后在25℃下用MeOH(14mL)进一步研磨12小时。获得灰色固体的化合物(3R)-3-[6-[2-氰基-3-[[乙基(甲基)氨磺酰基]氨基]-6-氟-苯氧基]-4-氧代-喹唑啉-3-基]-8-[2-[3,3,5,5-四氘代-1-[3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-5-氟-1-甲基-吲唑-6-基]-4-羟基-4-哌啶基]乙酰基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(1.4g,1.43mmol,74.69％产率,98.6％纯度)。LCMS m/z(ESI):962.5[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.52(s,1H),10.18(br s,1H),8.35(s,1H),7.92-7.75(m,2H),7.69(dd,J＝2.8,9.0Hz,1H),7.49(br dd,J＝3.9,9.0Hz,1H),7.42-7.26(m,2H),7.11(br d,J＝7.0Hz,1H),5.30(br d,J＝6.4Hz,1H),5.00(br s,1H),4.23-4.06(m,2H),4.01-3.83(m,5H),3.82-3.71(m,1H),3.68-3.58(m,1H),3.51(br d,J＝7.4Hz,1H),3.46-3.38(m,1H),3.20-3.10(m,4H),3.04(br d,J＝11.6Hz,2H),2.84-2.69(m,5H),2.56(br s,2H),2.41-2.34(m,1H),2.14-2.00(m,1H),1.84-1.48(m,4H),1.05(t,J＝7.0Hz,3H)。
实施例6：(3R)-3-[6-[2-氰基-3-[[乙基(甲基)氨磺酰基]氨基]-6-氟-苯氧基]-5,7,8-三氘代-4-氧代-喹唑啉-3-基]-8-[2-[1-[3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-5-氟-1-甲基-吲唑-6-基]-4-羟基-4-哌啶基]乙酰基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷的合成
步骤1：向1,2,3,4,5-五氘代-6-硝基-苯(25g，195.10mmol，4.17mL，1eq.)在硫酸(140毫升，98％纯度)中的溶液加入TCCA(15.42克，66.33毫摩尔，0.34当量)，混合物在80℃下搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温，倒入冰/水(200mL)中，用EtOAc(100mL×3)萃取。合并的有机层用水(2×40mL)、盐水(2×40mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩以得到残留物。残留物通过快速硅胶色谱(220g二氧化硅快速柱，0％乙酸乙酯/石油醚的洗脱剂，梯度：50mL/min)纯化以得到浅棕色油状的1-氯-2,3,4-6-四氘代-5-硝基-苯(32g，粗品)。HPLC Rt＝2.386分钟。2H NMR(400MHz,DMSO)δ＝8.72-8.21(m,2H)。
步骤2：向1-氯-2,3,4-6-四氘代-5-硝基-苯(37克，228.99毫摩尔，7.19毫升，1eq.)和NH4Cl在MeOH(480毫升)和H2O(80毫升)中的溶液分批加入Fe(76.73克，1.37摩尔，6当量)(97.99克，1.83摩尔，8eq.)，且混合物在80℃下搅拌1h。将混合物通过硅藻土过滤，用MeOH(4×50mL)和EtOAc(4×50mL)洗涤滤饼。将滤液减压浓缩以得到残留物。残留物用H2O(50mL)稀释，用EtOAc(50mL×3)萃取。合并的有机层用盐水(30mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。粗产物通过反相HPLC(0.1％ FA条件；H2O/ACN＝1/0-1/1)以得到3-氯-2,4,5,6-四氘代-苯胺(17.8克，132.56毫摩尔，57.89％收率，98％纯度)，为浅棕色油。LCMSm/z(ESI):132.0[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝5.36(s,2H).2H NMR(400MHz,DMSO)δ＝7.53(s,1H),7.12-7.04(m,3H)。
步骤3：NaNO2(9.23克，133.74毫摩尔，1.1eq.)在H2O(48mL)中的溶液在0℃下加入到3-氯-2,4,5,6-四氘代-苯胺(16克，121.58毫摩尔，1当量)在硫酸(258.51克，843.44毫摩尔，140.50毫升，32％纯度)中的溶液中，混合物在0℃下搅拌1小时。然后在0℃下加入KI(30.27g,182.38mmol,1.5eq.)在H2O(80mL)中的溶液，所得混合物用EtOAc(80mL×3)萃取，合并的有机层用盐水(50mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩以得到残留物。残留物通过快速硅胶色谱(二所化硅快速柱；洗脱剂：石油醚)纯化以得到浅棕色油状的1-氯-2,3,4-6-四氘代-5-碘-苯(20克，78.77毫摩尔，64.79％收率，95.5％纯度)。2HNMR(400MHz,DMSO)δ＝7.71(s,1H),7.58(s,1H),7.31(s,1H),7.702(s,1H)。
步骤4：在-65℃下向1-氯-2,3,4-6-四氘代-5-碘-苯(19克，78.36毫摩尔，518.13微升，1eq.)在THF中的溶液加入n-BuLi(2.5M，34.48mL，1.1当量)，混合物在-65℃下搅拌1小时。将反应混合物倒入大量干冰中并在-65℃下搅拌1小时。然后混合物通过饱和NH4Cl(50mL)碱化至pH＝11淬灭，用MBTE(3×40mL)萃取。水相用HCl水溶液调节至pH约4，用EtOAc(3×150mL)萃取。合并的有机层用盐水(2×40mL)洗涤，真空干燥以得到白色固体的3-氯-2,4,5,6-四氘代-苯甲酸(9.5g，57.26mmol，73.08％收率，96.8％纯度)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝13.46(s,1H).2H NMR(400MHz,DMSO)δ＝8.44 -8.08(m,4H)。
步骤5：在25℃下向3-氯-2,4,5,6-四氘代-苯甲酸(8.6克，53.55毫摩尔，103.63微升，1eq.)在H2SO4(15毫升，98％纯度)中的溶液加入HNO3(7.60克，82.06毫摩尔，5.43毫升，68％，1.53eq.)和H2SO4(10.72克，107.10毫摩尔，5.83毫升，98％，2eq.)的混合物。将所得混合物在25℃下搅拌2小时，然后在40℃下搅拌1小时。将混合物倒入冰/H2O(180mL)中，用DCM(3×200mL)萃取。有机层用0.1％ HCl水溶液(160mL)洗涤，用Na2SO4干燥并蒸发以得到3-氯-2,4,5-三氘代-6-硝基-苯甲酸(10.2g，43.5mmol，79.68％收率，87.3％纯度)，为淡黄色固体。LCMS m/z(ESI):203.0[M-H]-。2H NMR(400MHz,DMSO)δ＝8.84 -8.70(m,3H)。
步骤6：3-氯-2,4,5-三氘代-6-硝基-苯甲酸的混合物(8克，39.10毫摩尔，103.63微升，1eq.)和NaOH(12.51克，312.83毫摩尔，8eq.)在D2O(156.4mL)中的混合物于100℃(内部)下搅拌20小时。将混合物冷却至室温，用6N HCl酸化，用EtOAc(3×80mL)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发至干。将粗产物用EtOAc/Tol(1/10，10V)在25℃下研磨12小时以得到淡黄色固体的2,4,5-三氘代-3-羟基-6-硝基-苯甲酸(6.1克，30.48毫摩尔，77.94％收率，93％纯度)。LCMS m/z(ESI):185.1[M+H]-。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝14.30-13.13(m,1H),11.91-10.84(m,1H).2H NMR(400MHz,DMSO)δ＝8.80-8.29(m,1H),7.72-7.31(m,2H)。
步骤7：向2,4,5-三氘代-3-羟基-6-硝基-苯甲酸(2克，10.74毫摩尔，1当量)在CD3OD(20mL)中的溶液中加入Pd/C(0.4g，10％纯度)。在D2(15psi)气氛下，将混合物在25℃下搅拌16小时。过滤反应混合物，浓缩滤液以得到黑色固体的化合物2-氨基-3,4-6-三氘代-5-羟基苯甲酸(1.2g，粗品)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.60(s,1H),8.50-7.76(m,2H)。
步骤8：在120℃下向2-氨基-3,4-6-三氘代-5-羟基-苯甲酸(1.2克，7.68毫摩尔，1当量)在n-BuOH(12mL)中的溶液加入n-BuOH(12mL)中的(3R)-3-氨基-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(1.97g，7.68mmol，1eq.)，将混合物在125℃下搅拌15分钟，然后加入二乙氧基甲氧基乙烷(2.73g，18.44mmol，3.07mL，2.4eq.)。混合物在125℃下搅拌16小时。用水(50mL)、EtOAc(50mL)稀释反应混合物，然后过滤。滤液用HCl水溶液(1M，20毫升)、NaHCO3水溶液(20mL)、水(20mL)和盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。残留物用石油/EtOAc(3/1，15mL)在20℃下研磨2小时，然后过滤，收集滤饼。获得棕色固体的化合物(3R)-3-(5,7,8-三氘代-6-羟基-4-氧代-喹唑啉-3-基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(1.5g，3.40mmol，44.30％收率，91.8％纯度)。LCMS m/z(ESI):405.1[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.49-9.97(m,1H),8.19(s,1H),5.34(br s,1H),4.10(br d,J＝5.0Hz,2H),3.42(br s,2H),2.37(br dd,J＝9.0,13.0Hz,1H),1.98(br dd,J＝5.2,13.4Hz,1H),1.73-1.61(m,3H),1.54(br d,J＝7.8Hz,1H),1.39(br s,9H)。
步骤9：向2,3,6-三氟苯甲腈(704.22毫克，4.08毫摩尔，91％纯度，1.1eq.)在ACN(15mL)中的溶液加入Cs2CO3(3.02g，9.27mmol，2.5当量)和(3R)-3-(5,7,8-三氘代-6-羟基-4-氧代-喹唑啉-3-基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(1.5g，3.71mmol，1eq.)。将混合物在20℃下搅拌2小时。浓缩反应混合物，然后EtOAc(20mL)和水(20mL)稀释。有机相用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩以得到棕色泡沫固体的化合物(3R)-3-[6-(2-氰基-3,6-二氟-苯氧基)-5,7,8-三氘代-4-氧代-喹唑啉-3-基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(1.4g，粗品)。LCMS m/z(ESI):542.3[M+H]+。1HNMR(400MHz,氯仿-d)δ＝8.33(s,1H),7.46(dt,J＝5.0,9.4Hz,1H),7.12(ddd,J＝3.6,7.6,9.2Hz,1H),5.50(dt,J＝4.0,9.0Hz,1H),4.27-4.10(m,2H),3.66(br s,2H),3.45-3.16(m,2H),2.48(dd,J＝8.9,14.0Hz,1H),1.89(dd,J＝4.2,14.0Hz,1H),1.83-1.69(m,3H),1.60-1.51(m,1H),1.46(s,9H)。
步骤10：向[甲基(氨磺酰基)氨基]乙烷(535.85毫克，3.88毫摩尔，1.5eq.)在DMAc(12mL)中的溶液加入Cs2CO3(2.53g，7.76mmol，3eq.)和(3R)-3-[6-(2-氰基-3,6-二氟-苯氧基)-5,7,8-三氘代-4-氧代-喹唑啉-3-基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(1.4克，2.59毫摩尔，1eq.)。将混合物在65℃下密封管中搅拌16小时。将反应混合物倒入水(60mL)中，用MTBE(20mL×3)洗涤。水相通过HCl(水溶液，1M)调节至pH 6～7，用EtOAc(20mL×2)萃取。将有机相用盐水(20mL×2)洗涤，用Na2SO干燥，过滤并浓缩以得到棕色泡沫固体的化合物(3R)-3-[6-[2-氰基-3-[[乙基(甲基)氨磺酰基]氨基]-6-氟-苯氧基]-5,7,8-三氘代-4-氧代-喹唑啉-3-基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(1.1g，1.47mmol，56.76％收率，88％纯度)。LCMS m/z(ESI):660.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CHLOROFORM-d)δ＝8.32(s,1H),7.58-7.50(m,1H),7.45-7.34(m,1H),5.48(br dd,J＝4.6,8.6Hz,1H),4.22-4.04(m,2H),3.64(br s,2H),3.39-3.23(m,4H),3.00(s,3H),2.46(dd,J＝8.8,14.0Hz,1H),1.86(dd,J＝4.2,14.0Hz,1H),1.81-1.66(m,3H),1.59-1.49(m,1H),1.44(s,9H),1.20-1.11(m,3H)。
步骤11：向(3R)-3-[6-[2-氰基-3-[[乙基(甲基)氨磺酰基]氨基]-6-氟-苯氧基]-5,7,8-三氘代-4-氧代-喹唑啉-3-基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-羧酸叔丁酯(1.1克，1.67毫摩尔，1eq.)在丙酮(6mL)中的溶液加入HCl(12M，486.30uL，3.5eq)。将混合物在50℃下搅拌3小时。浓缩反应混合物。残留物用水(3mL)和EtOAc(3mL)稀释，然后用NaHCO3水溶液调节至pH 7～8。，大量固体沉淀。将悬浮混合物在25℃下搅拌1小时，过滤，收集滤饼。获得灰色固体的化合物(3R)-3-[6-[2-氰基-3-[[乙基(甲基)氨磺酰基]氨基]-6-氟-苯氧基]-5,7,8-三氘代-4-氧代-喹唑啉-3-基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(0.63g，1.07mmol，64.14％收率，95％纯度)。LCMS m/z(ESI):560.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝8.29(s,1H),7.34-7.13(m,2H),5.28(br s,1H),4.27-4.01(m,2H),3.09(br d,J＝1.2Hz,4H),2.96(q,J＝7.0Hz,2H),2.53(s,3H),2.43-2.32(m,1H),2.13(br d,J＝8.8Hz,1H),2.01-1.68(m,4H),1.01(br t,J＝7.0Hz,3H)。
步骤12：向(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)2-[1-[3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-5-氟-1-甲基-吲唑-6-基]-4-羟基-4-哌啶基]乙酸酯(273.49mg，519.99umol，98.2％纯度，1当量)在DMF(3mL)中的溶液加入(3R)-3-[6-[2-氰基-3-[[乙基(甲基)氨磺酰基]胺基]-6-氟-苯氧基]-5,7,8-三氘代-4-氧代-喹唑啉-3-基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(0.3g，519.99umol，97％纯度，1eq.)和TEA(26.31mg，259.99umol，36.19uL，0.5eq)。混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物缓慢加入水(20mL)中，然后通过HCl水溶液(1M)将pH调节至6，将悬浮混合物在20℃下搅拌0.5小时并过滤。将滤饼在25℃下用i-PrOH/i-PrOAc(5/1，3mL)研磨2小时，过滤并在25℃下用MeOH(3mL)进一步研磨2小时，并过滤。获得灰色固体的化合物(3R)-3-[6-[2-氰基-3-[[乙基(甲基)氨磺酰基]氨基]-6-氟-苯氧基]-5,7,8-三氘代-4-氧代-喹唑啉-3-基]-8-[2-[1-[3-(2,4-二氧代六氢嘧啶-1-基)-5-氟-1-甲基-吲唑-6-基]-4-羟基-4-哌啶基]乙酰基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(250mg,242.71umol,46.68％收率,93.3％纯度)。LCMS m/z(ESI):961.5[M+H]+。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.52(br s,1H),10.18(br d,J＝0.9Hz,1H),8.35(br s,1H),7.85(br t,J＝9.1Hz,1H),7.49(br d,J＝5.6Hz,1H),7.40-7.24(m,1H),7.11(br d,J＝6.0Hz,1H),5.29(br s,1H),5.03(br s,1H),4.14(br s,2H),4.02-3.83(m,5H),3.78(br d,J＝4.8Hz,1H),3.62(br d,J＝3.6Hz,1H),3.56-3.44(m,2H),3.16(br d,J＝6.4Hz,4H),3.07(br d,J＝10.0Hz,2H),2.86-2.67(m,5H),2.56(br s,2H),2.37(br s,1H),2.07(br dd,J＝5.4,6.8Hz,1H),1.88-1.46(m,8H),1.05(br t,J＝6.4Hz,3H)。
化合物1游离多晶型物的评价
以下技术用于表征化合物1游离多晶型物。
实施例7：在25℃和50℃下的近似溶解度
将约5mg化合物1晶型A称量至2mL玻璃小瓶中。加入20μL等份的每种溶剂以在25℃下溶解药物物质。将约10毫克化合物1晶型A称量至2毫升玻璃小瓶中。加入20μL等份的每种溶剂以在50℃下溶解药物物质。应用涡旋和超声处理来辅助溶解。加入的每种溶剂的最大体积为1mL。通过目视观察确定近似溶解度。
将约5mg化合物1晶型B称量至2mL玻璃小瓶中。加入20μL等份的每种溶剂以在25℃下溶解药物物质。将约10毫克化合物1晶型B称量至2毫升玻璃小瓶中。加入20μL等份的每种溶剂以在50℃下溶解药物物质。应用涡旋和超声处理来辅助溶解。加入的每种溶剂的最大体积为1mL。通过目视观察确定近似溶解度。
结果总结于表1中。
表1.表A和表B在25℃和50℃下的近似溶解度
实施例8：在25℃下用溶剂平衡4周
将约50mg化合物1游离晶型A在0.1-1mL溶剂中于25℃下在磁力搅拌板上用搅拌棒以300rpm的速率平衡4周。通过以14,000rpm离心，将获得的悬浮液通过0.45μm尼龙膜过滤器过滤。固体部分(湿饼)通过XRPD研究。结果总结于表2和表3中。
表2.在25℃下晶型A用溶剂平衡4周
溶剂 XRPD 注释
甲醇 晶型B 低结晶度
丙酮 晶型B 中等结晶度
MEK 晶型B 中等结晶度
乙腈 晶型B 中等结晶度
THF/庚烷(v:v＝1:1) 晶型B 中等结晶度
乙酸乙酯 晶型C* 中等结晶度
异丙醇 晶型A 低结晶度
MTBE 晶型A 低结晶度
1,4-二噁烷/庚烷(v:v＝1:1) 未进行 粘性材料
DMF 未进行 透明溶液(约500mg/mL)
2-MeTHF 晶型C 中等结晶度
乙醇 晶型A 低结晶度
乙酸异丙酯 晶型A 低结晶度
甲苯 晶型A 低结晶度
*通过DSC对晶型C进行了额外分析：从25.9℃开始的吸热峰；Tonset 185.3℃；TGA:180℃下2.2％；和1H NMR:2.7重量％乙酸乙酯(0.2当量摩尔比)。
表3.在25℃下晶型A用溶剂平衡4周
*二元溶剂体系的水活度是根据UNIFAC方法(UNIQUAC官能团活度系数)计算的。
图1描述了化合物1晶型B的XRPD图谱，图7描述了化合物1晶型A的XRPD图谱，和图10描述了化合物1晶型C的XRPD图谱。
实施例9：温度循环下的平衡
在5℃至40℃的温度循环下，以0.1℃/分钟的加热/冷却速率，将约50mg化合物1晶型A在0.1-1mL溶剂中平衡16个循环。平衡在磁力搅拌板上用搅拌棒以300rpm的速度进行。通过以14,000rpm的速度离心，将获得的悬液通过0.45μm尼龙膜过滤器过滤。固体部分(湿饼)通过XRPD研究。结果总结于表4和表5中。
表4.化合物1晶型A在温度循环下的平衡
表5.化合物1晶型A在温度循环下的平衡
*二元溶剂体系在5℃下的水活度是根据UNIFAC方法(UNIQUAC官能团活度系数)计算的。
**约8个循环后，XRPD：中等结晶度，晶型B；DSC：熔化Tonset195.4℃；TGA:170℃下1.9％；1H NMR：未检测到残留溶剂。
实施例10：通过缓慢蒸发在室温下结晶
将约30mg化合物1晶型A溶解于0.2-10mL溶剂中。获得的溶液通过0.45μm的注射器膜过滤器过滤。透明溶液在环境条件下(约20-25℃，40-80％ RH)缓慢蒸发。固体残留物通过XRPD进行研究。结果总结于表6中。
表6.通过缓慢蒸发在室温下结晶
实施例11：通过缓慢冷却从热的饱和溶液结晶
在50℃下，将约50mg化合物1晶型A溶解在最少量的选择溶剂中。将获得的溶液通过0.45μm注射器膜过滤器过滤。透明溶液以0.1℃/分钟冷却至5℃。在5℃下无沉淀的样品进一步冷却至-20℃。通过0.45μm尼龙膜过滤器以14,000rpm离心过滤收集沉淀。固体部分(湿饼)通过XRPD研究。
为了确定化合物1晶型B是否可以从透明溶液获得，还尝试冷却以制备晶型B。在50℃下，将约50mg化合物1晶型A溶解在最少量的ACN或丙酮中。将获得的溶液通过0.45μm注射器膜过滤器过滤。透明溶液以0.1℃/分钟冷却至5℃。当冷却至约24℃时，向透明溶液中加入约2mg种子。将获得的悬浮液以0.1℃/分钟冷却至5℃，并在5℃下保持约12小时。通过0.45μm尼龙膜过滤器以14,000rpm离心过滤收集沉淀。固体部分(湿饼)通过XRPD研究。结果表明，通过在加入晶型B晶种的情况下冷却，可直接从丙酮澄清溶液获得晶型B。结果总结于表7。
表7.通过缓慢冷却从热饱和溶液结晶
实施例12：通过添加反溶剂结晶
在环境温度(约20-25℃)下，将约50mg化合物1晶型A溶解在最少量的选择良溶剂中。获得的溶液通过0.45μm的注射器膜过滤器过滤。向澄清溶液中缓慢加入1-4倍的反溶剂，直至大量固体沉淀出来。通过0.45μm尼龙膜过滤器以14,000rpm的速度离心过滤收集沉淀。固体部分(湿饼)通过XRPD研究。结果总结于表8中。
表8.通过加入反溶剂结晶
实施例13：通过蒸汽扩散结晶
在环境温度(约20-25℃)下，将约50mg化合物1晶型A溶解在最少量的选择溶剂中。获得的溶液通过0.45μm的注射器膜过滤器过滤。将透明溶液转移至8mL无盖玻璃小瓶中。然后，将这些8mL无盖小瓶置于40mL玻璃小瓶中。向40mL小瓶中加入反溶剂。然后，将这40mL样品小瓶紧密加盖并置于环境条件下达21天。通过0.45μm尼龙膜过滤器以14,000rpm离心过滤收集沉淀。固体部分(湿饼)通过XRPD研究。结果总结于表9中。
表9.通过蒸汽扩散结晶
溶剂(mL) 反溶剂(mL) XRPD 结果
DMSO(0.2) 乙醇(0.8) 未进行 油材料
丙酮(2.5) MTBE(10.0) 未进行 油材料
乙腈(3.0) MTBE(12.0) 未进行 油材料
THF(0.2) MTBE(0.8) 几乎无定形形式 -
2-MeTHF(8.0) MTBE(32.0) 未进行 很少固体
1,4-二噁烷(0.2) MTBE(0.8) 几乎无定形形式 -
实施例14：通过热-冷DSC结晶
通过两个不同的冷热DSC循环研究了化合物1晶型A的多晶行为。本实验使用Tzero盘和带销孔的Tzero密封盖。通过热-冷DSC未获得新的晶型。结果总结于表10中。
表10.通过热-冷DSC结晶
实施例15：体积稳定性
化合物1晶型B置于25℃/92％ RH的开口容器中，40℃/75％ RH的开口容器和60℃的密闭容器中1周。应激后的样品通过XRPD和HPLC进行表征，并检查颜色变化。结果总结于表11中。
表11.体积稳定性
实施例16：水吸附和解吸附实验
在25℃下，以40-0-95-0-40％ RH，dm/dt 0.002，min平衡时间60分钟，最大平衡时间360分钟的循环，通过DVS研究化合物1晶型B的水吸附和解吸附行为。XRPD在DVS测试后测量以确定晶型变化。结果总结于表12中。
表12.水吸附和解吸附实验
*N/A：不适用
实施例17：压缩模拟实验
将约20mg化合物1晶型B在2MPa和10MPa下用水压机压缩5分钟。通过XRPD评估潜在的晶型变化和结晶度。结果总结于表13中。
表13.压缩模拟实验
压力 XRPD 注释
2MPa 晶型B 结晶度略有下降；轻微变色。
10MPa 晶型B 结晶度略有下降；轻微变色。
实施例18：干磨模拟实验
约20mg化合物1晶型B用研钵和研杵手工研磨1、2和5分钟。XRPD评估潜在的晶型变化和结晶度。结果总结于表14中。
表14.干磨模拟实验
研磨时间 XRPD 注释
1分钟 晶型B 结晶度略有下降。
2分钟 晶型B 结晶度略有下降。
5分钟 晶型B 结晶度略有下降。
实施例19：湿法制粒模拟实验
将水或乙醇滴加至约20mg化合物1晶型B直至样品充分湿润。湿样品用研钵和研杵轻轻研磨。制粒后样品在环境条件下干燥10分钟。通过XRPD评估潜在的晶型变化和结晶度。结果总结于表15中。
表15.湿法制粒模拟实验
制粒溶剂 XRPD
水 晶型B；结晶度没有降低。
乙醇 晶型B；结晶度没有降低。
实施例20：化合物1晶型B的制备
晶型B采用以下程序制备。
实验1.将约500mg化合物1晶型A称量到20mL玻璃小瓶中。然后，在40℃下搅拌约5分钟，将3mL ACN/H2O(v:v＝96:4)加入小瓶中以获得悬浮液。
向上述悬浮液中加入约2mg晶型B种子。
悬浮液在以0.1℃/分钟的加热/冷却速率的5℃至40℃的温度循环下平衡约9个循环。
通过抽滤收集固体，然后在35℃下真空干燥约1小时。
以80％的收率获得灰白色固体的400mg晶型B。
实验2.将约300mg化合物1晶型A称量入20mL玻璃小瓶中。然后，在40℃下搅拌约5分钟，将3mL ACN/H2O(v:v＝96:4)加入小瓶中以获得粘性材料。(粘性材料)
向上述粘性材料中加入约5mg晶型B种子。7小时后，转化为悬浮液。(粘性材料至悬浮液)
在以0.1℃/分钟的加热/冷却速率的5℃至40℃的温度循环下，在磁性搅拌板上以300rpm的速率进行平衡约8个循环。(悬浮液)。
通过抽滤收集固体，然后在30℃下真空干燥约4小时。
以58％的收率获得灰白色固体的174mg晶型B。
化合物1盐多晶型物的评价
实施例21：浆液平衡
将约30mg化合物1晶型A和0.5或1当量的碱加入到2mL玻璃小瓶的溶剂中。对于使用NaHCO3、Ca(OH)2和Mg(OH)2的实验，加入5％体积的水以提高反离子在测试溶剂中的溶解度。将所得混合物在25℃下搅拌至少48小时。
获得的悬浮液通过0.45μm尼龙膜过滤器以14,000rpm离心过滤。在25℃下真空干燥2小时后，通过XRPD分析固体部分。结果总结于表16中。
表16.浆液平衡
*根据IC的游离形式，游离形式与NH4 +的比率为1:0.1(图37)。
图23描述了化合物1钠盐晶型D的XRPD图谱，图26描述了化合物1钠盐晶型E的XRPD图谱，图17描述了化合物1钠盐晶型F的XRPD图谱，图29描述了化合物1钾盐晶型G的XRPD图谱，和图32描述了化合物1钾盐晶型H的XRPD图谱。
实施例22：反溶剂添加
通过加入反溶剂处理从浆液平衡获得的透明溶液(表17)。
表17.反溶剂添加
抗衡离子 溶剂/mL 反溶剂/mL 注
胆碱 甲醇/0.2 MTBE/0.3 粘性材料
实施例23：再浆化
通过在环境条件下缓慢蒸发和加入MTBE、甲苯和乙酸乙酯(EA)处理从浆液平衡获得的粘性物质或透明溶液(表18)。
表18.重新浆化
抗衡离子 MTBE 甲苯 乙酸乙酯
胆碱 粘性材料 粘性材料 粘性材料
甲基葡糖胺 未进行 未进行 晶型A
Ca(OH)2 未进行 未进行 几乎无定形的
研究中鉴定的盐形式(表16)进一步通过XRPD、DCS、TGA、KF、HPLC和1H NMR/IC进行表征(表19)。
表19.盐形式的表征
实施例24：化合物1钠盐晶型F的制备
钠盐晶型F采用以下程序制备。
将500mg化合物1晶型A和47mg NaHCO3(约1.0当量)称量入20mL玻璃小瓶中。然后，在25℃下以400rpm搅拌下将8mL ACN和100μL水加入小瓶中约1分钟以获得悬浮液。(悬浮液)
向上述悬浮液中加入约2毫克钠盐晶型F种子。(悬浮液)
约5分钟后，悬浮液转化成粘性物质。(悬浮液至粘性材料)
在25℃下平衡约6小时后，粘性材料转化为悬浮液。(粘性材料至悬浮液)
在25℃下平衡约9天后通过抽滤收集固体，然后在30℃真空干燥约3小时。
以76％的收率获得约419mg钠盐晶型F，为灰白色固体。表20总结了化合物1钠盐晶型F的化学和物理化学性质。
表20.钠盐晶型F的化学和物理化学性质
实施例25：化合物1钠盐晶型F的体积稳定性
将钠盐晶型F置于25℃/92％ RH的开口容器中，40℃/75％ RH的开口容器和60℃的密闭容器中1周。应激后的样品通过XRPD和HPLC表征，并检查颜色变化。结果总结于表21中。
表21.钠盐晶型F的体积稳定性
实施例26：化合物1晶型B和化合物1钠盐晶型F的溶解度
在7种水性pH缓冲液和生物相关液体(包括pH 1.2HCl溶液(0.2N)、pH 4.5乙酸盐缓冲液(50mM)、pH 6.8磷酸盐缓冲液(50mM)、pH 2.0SGF、pH 6.5FaSSIF-v1、pH 5.0FeSSIF-v1和水)中在37℃下2小时和24小时分别测量晶型B和钠盐晶型F的溶解度。
将准确的20毫克晶型B称量入20毫升的玻璃小瓶中。然后，加入10mL溶解介质。钠盐晶型F的使用量相当于20毫克无水形式。将获得的悬浮液在37℃下以400rpm的速度搅拌，并分别在2小时和24小时取样。样品在37℃下以4,000rpm离心4分钟。上清液分别通过HPLC和酸度计分析其溶解度和pH值。通过XRPD对24小时样品中的残留固体(湿饼)进行表征以确定物理形式。结果见表22。
表22.37℃下的溶解度，目标浓度2mg/mL(晶型)，平衡24小时，LOQ:1.5g/mL
钠盐晶型F和晶型B在水性介质中均表现出pH依赖性的溶解度。钠盐晶型F显示出比晶型B更好的溶解性，尤其是在pH 1.2HCl溶液、pH 4.5乙酸盐缓冲液、SGF和FeSSIF-v1中。晶型B在溶解度测试后未显示晶型变化。钠盐晶型F在pH 1.2HCl溶液和SGF中的溶解度测试后显示结晶度降低。IC显示，钠盐晶型F在溶解度测试后部分歧化形成。
实施例27：化合物1钠盐晶型F的吸湿性
钠盐晶型F的吸湿性通过在25℃下的动态蒸汽吸附(DVS)测试进行评估。结果总结于表23中。
钠盐晶型F在低于80％ RH下轻微吸湿。然后，在25℃下，其变为吸湿的，并从80％RH至95％ RH显示出12.6％的水吸收。在DVS测试后，钠盐晶型F未显示出晶型变化且无结晶度降低。
表23.25℃下通过DVS的吸湿性，dm/dt＝0.002％
实施例28：仪器方法X射线粉末衍射仪(XRPD)
单晶X射线衍射
差示扫描量热(DSC)法
热重分析(TGA)
动态蒸汽吸附(DVS)
Karl Fischer(KF)
仪器 Mettler Toledo Coulometric KF Titrator C30
方法 库仑法
样品质量 约5-10毫克
偏光显微镜(PLM)
仪器 Nikon LV100POL
方法 交叉偏振镜，添加硅油
核磁共振(NMR)
离子色谱法(IC)
超高效液相色谱(UPLC)
高效液相色谱(HPLC)
实施例29：化合物1晶型A的稳定性研究
表24.化合物1晶型A在5±3℃储存条件下的稳定性研究的结果
表25.化合物1晶型A在25℃±2℃/60％ RH±5％ RH储存条件下的稳定性研究的结果
表26.化合物1晶型A在30±2℃/65±5％RH储存条件下的稳定性研究的结果
表27.化合物1晶型A在40℃±2℃/75％ RH±5％ RH储存条件下的稳定性研究的结果
如前述化合物1晶型A的稳定性研究结果所示，所有测试参数，包括外观、水含量、手性纯度、测定和相关物质均符合接受标准。在各种稳定条件下，水含量随时间增加。
实施例30：化合物1晶型B的稳定性研究
表28.化合物1晶型B在5±3℃储存条件下的稳定性研究的结果
表29.化合物1晶型B在25℃±2℃/60％ RH±5％ RH储存条件下的稳定性研究的结果
表30.化合物1晶型B在40℃±2℃/75％ RH±5％ RH储存条件下的稳定性研究的结果
根据化合物1晶型B的稳定性研究结果，所有测试参数，包括外观、纯度、测定、相关物质、手性纯度、水含量和X射线粉末衍射(XRPD)在6M时间点(储存条件：5±3℃、25±2℃/60％ RH±5％ RH和40±2℃/75％ RH±5％ RH)均符合接受标准。在5±3℃，25±2℃/60％RH±5％RH和40±2℃/75％RH±5％RH条件下，水含量呈上升趋势。
实施例31：药物产品制剂
药物产品(化合物1，片剂)的描述和组成
用于口服施用的化合物1片剂以10mg、40mg和80mg活性部分剂量强度制造。各片剂强度的组成见表31。
表31.药物产品的组成
*HPMCAS：乙酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯；TPGS：d-α-生育酚聚乙二醇琥珀酸酯
药物产品的组分
药物物质
化合物1药物物质的溶解度数据见表32。
表32.化合物1的溶解度数据
赋形剂
以下赋形剂用于开发药物产品的临床制剂：HPMCAS-LG、维生素E TPGS、甘露醇、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、未处理的热解二氧化硅胶和硬脂酸镁。进行了赋形剂相容性研究，并证明其与制剂所选组分不存在相容性问题。
药物产品
化合物1片剂的配方开发允许喷雾干燥中间体(SDI)的开发以提高药物产品的渗透性。发现了提供与净API相比具有改善的溶解性和渗透性的SDI的分散体赋形剂和渗透增强剂。从测试的制剂中，用于开发生产工艺的SDI配方为20:70:10的化合物1:HPMCAS-L:维生素E TPGS。与净API相比，20:70:10化合物1:HPMCAS-L:维生素ETPGS SDI显示在FaSSIF生物相关介质中的溶解度提高。
物理化学和生物学特性
初步研究表明，化合物1是生物制药学分类系统(BCS)II类分子和药物可开发性分类系统(DCS)IIb类分子。在20:70:10化合物1:HPMCAS-L:维生素E TPGS SDI上进行的溶出度研究显示，与药物本身相比，溶出度特征改善，在FaSSIF中210分钟的溶解度保持为52.4μg/mL。SDI在0.01N HCl中的溶解度为11μg/mL，其与药物物质的溶解度相似。
制造工艺开发
制造工艺由三个阶段组成：
(i)制备喷雾干燥的中间体；
(ii)制粒；和
(iii)制片。
喷雾干燥中间体(SDI)
选择80:20二氯甲烷:甲醇的溶剂体系用于喷雾干燥，因为其为化合物1药物物质和赋形剂提供了足够的溶解度(>100mg/mL)。喷雾溶液的总固体浓度为8重量％，这在喷雾干燥能力和HPMCAS-L规定的溶液粘度之间提供了良好的平衡。在盘式干燥前，湿SDI在室温下表现为物理和化学稳定的。SDI的稳定性得到了XRPD和HPLC纯度和分析数据的支持。建立二级干燥参数以确保干燥过程中的充分SDI稳定性，并确保可达到二氯甲烷和甲醇的残留的ICH限值。通过可行性批次和工程化批次，建立SDI制造工艺。
制粒
通过原型批次、放大批次和工程化批次的工作，开发了一种制粒工艺，其包括化合物1SDI与颗粒内赋形剂的共混、通过辊压产生条带、研磨条带和研磨的颗粒与颗粒外赋形剂的最终共混。确定了颗粒内和颗粒外共混物中适当量的交联羧甲基纤维素钠(崩解剂)(总共2.0重量％)，以确保所有片剂强度均具有良好的崩解特性。共混速度和时间通过放大和工程化批次进行定义和证明。定义了辊压参数，例如辊速度、螺杆速度和辊压力，以及研磨筛网尺寸(18目)，以达到约0.48至0.54g/mL的理想堆积密度。
制片
通过工程化批次定义并确认片剂加工，以提供所需的片剂尺寸和形状(10mg和40mg强度的圆形片剂，80mg强度的椭圆形片剂)。对于每种强度定义了压缩参数，例如填充凸轮尺寸(fill cam size)、进料架速度(feed frame speed)和压缩力，以实现所需的片剂硬度和脆性。
容器封闭系统
工程化批次包装在30cc(10mg和40mg强度的片剂)和60cc(80mg强度的片剂)HDPE瓶内，瓶具有带感应密封的28mm或33mm儿童安全封口。
微生物属性
化合物1片剂意图用于口服施用。微生物学质量符合对于USP<1111>中所列的口服使用药物的非无菌剂型的非水性制备质量的USP推荐接受标准。规定口服剂型微生物含量的适当限制的质量标准包括对微生物计数和特定微生物(大肠杆菌)的USP<61>和USP<62>限制。
批制剂(化合物1，片剂)
表33显示了所制备的剂量强度的批制剂。
表33.制备化合物1片剂的批制剂
*重量根据SDI的测定进行调整
生产工艺和工艺控制的说明(化合物1，片剂)
生产总结
化合物1片剂分三个阶段制备：
1.喷雾干燥中间体(SDI)
使用化合物1、HPMC AS-LG、维生素E TPGS、二氯甲烷和甲醇制备喷雾干燥的中间体。
化合物1药物产品工艺的第一阶段是产生化合物1:HPMCAS-LG:维生素E TPGS喷雾干燥中间体。化合物1溶解在二氯甲烷和甲醇中。向溶液中加入维生素E TPGS和HPMCAS-LG，并混合直至两种赋形剂溶解。溶液被喷雾干燥，同时控制喷雾干燥器的溶液进料速度、出口温度和入口压力。SDI随后在盘式干燥器中干燥，直至测试残留溶剂的过程中样品显示残留溶剂水平低于过程中控制水平。
设备：喷雾干燥器；盘式干燥器。
材料输入：化合物1；HPMCAS-LG；维生素E TPGS；二氯甲烷；甲醇。
过程控制：入口温度；出口温度；溶液进料速率；干燥时间；干燥温度。
2.制粒
进行制粒用于制片过程。所有强度均使用100mg/g最终共混物制备。
化合物1药物产品的所有强度均采用制粒工艺。将甘露醇、化合物1:HPMCAS-LG:维生素E TPGS SDI、交联羧甲基纤维素钠、未处理的热解胶体二氧化硅和微晶纤维素加入V形壳式搅拌器。将混合物共混并通过约20目筛磨粉。将磨粉后的材料与硬脂酸镁一起加回到V形壳式搅拌器。将混合物混合并装入碾压机料斗中。在控制辊压力、辊速和螺杆速度的同时，将制粒的混合物辊压成条带。条带通过18目筛磨粉，并放回到V形壳式搅拌器中。将颗粒外赋形剂(微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁)加入到混合器中并混合以产生最终制粒材料。
设备：混合器；磨机；碾压机。
材料输入：化合物1SDI中间体；甘露醇；微晶纤维素；交联羧甲基纤维素钠；胶体二氧化硅；硬脂酸镁。
工艺控制：混合速度和时间；磨机速度；筛目大小；辊速度；螺杆速度；辊压力。
3.压制
将制粒压制以产生10mg、40mg和80mg片剂强度。
化合物1片剂使用上述制粒法制备。通过将制粒装入压片机的料斗中并在监控压机速度、进料架速度、预压缩力、压缩力和填充深度的同时对材料进行压缩来制造每种强度。在压片过程中以预定时间间隔检查片剂重量、片剂厚度、硬度和视觉外观。压制的片通过除尘器和金属检测器。取出样品进行测试，且剩余片剂在主包装前进行散装包装。
设备：压片机。
工艺控制：片剂重量；片剂硬度；目视检查。
实施例32.来自实施例2的(R)-8-(叔丁氧基羰基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-3-胺(R)-2-羟基-2-苯乙酸盐(2-4)的单晶结构
将化合物(R)-8-(叔丁氧基羰基)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-3-胺(R)-2-羟基-2-苯乙酸盐(2mg)溶解于0.2mL丙酮/H2O(4:1)中，并保持在半密封的4mL小瓶中。溶液在室温下缓慢蒸发。第二天观察并收集晶体用于单晶X射线衍射。
在4.778至133.152的2θ范围内共收集16982个反射。限制指数为：-5≤h≤7，-10≤k≤11，-43≤l≤44；其产生了3843个独特反射(Rint＝0.0769)。该结构使用SHELXT解析(Sheldrick，G.M.2015.Acta Cryst.A71,3-8)，并使用SHELXL(针对F2)优化(Sheldrick，G.M.2015.Acta Cryst.C71,3-8)。优化的参数总数为267，与3843个数据相比。所有反射包含在优化中。F2的拟合优度为1.083，对于[I>2σ(I)]最终R值为R1＝0.0780和wR2＝0.2037。最大差分峰和孔分别为0.47和图38描述了ORTEP结构。
晶体学数据见表34，且原子坐标见表35。
表34.化合物2-4的晶体学数据和单晶X射线衍射实验参数
表35.单晶X射线衍射实验中化合物2-4的原子坐标(x 10^4)和等效各向同性位移参数(A^2x 10^3)。
本说明书中引用的所有公开出版物和专利申请均通过引用并入本文，如同每个单独的公开出版物或专利申请均被明确且单独地指明通过引用并入。
尽管为了清楚理解的目的，已经通过例示和实例的方式对前述发明进行了一些详细描述，但是对于本领域普通技术人员很清楚，根据本发明的教导，在不脱离权利要求书中定义的本发明的精神或范围的情况下，可以对其进行某些改变和修改。

Claims (92)

1.如下结构的化合物的分离的晶型B：
其特征在于包含至少五个选自7.5±0.2°、8.8±0.2°、10.0±0.2°、10.5±0.2°、12.6±0.2°、14.7±0.2°、15.4±0.2°、16.4±0.2°、16.7±0.2°、18.6±0.2°、22.7±0.2°和25.3±0.2°的2θ值的X射线粉末衍射(XRPD)图谱。
2.根据权利要求1所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少六个选自7.5±0.2°、8.8±0.2°、10.0±0.2°、10.5±0.2°、12.6±0.2°、14.7±0.2°、15.4±0.2°、16.4±0.2°、16.7±0.2°、18.6±0.2°、22.7±0.2°和25.3±0.2°的2θ值。
3.根据权利要求1所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少七个选自7.5±0.2°、8.8±0.2°、10.0±0.2°、10.5±0.2°、12.6±0.2°、14.7±0.2°、15.4±0.2°、16.4±0.2°、16.7±0.2°、18.6±0.2°、22.7±0.2°和25.3±0.2°的2θ值。
4.根据权利要求1所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少八个选自7.5±0.2°、8.8±0.2°、10.0±0.2°、10.5±0.2°、12.6±0.2°、14.7±0.2°、15.4±0.2°、16.4±0.2°、16.7±0.2°、18.6±0.2°、22.7±0.2°和25.3±0.2°的2θ值。
5.根据权利要求1所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少九个选自7.5±0.2°、8.8±0.2°、10.0±0.2°、10.5±0.2°、12.6±0.2°、14.7±0.2°、15.4±0.2°、16.4±0.2°、16.7±0.2°、18.6±0.2°、22.7±0.2°和25.3±0.2°的2θ值。
6.根据权利要求1所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少十个选自7.5±0.2°、8.8±0.2°、10.0±0.2°、10.5±0.2°、12.6±0.2°、14.7±0.2°、15.4±0.2°、16.4±0.2°、16.7±0.2°、18.6±0.2°、22.7±0.2°和25.3±0.2°的2θ值。
7.根据权利要求1所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少十一个选自7.5±0.2°、8.8±0.2°、10.0±0.2°、10.5±0.2°、12.6±0.2°、14.7±0.2°、15.4±0.2°、16.4±0.2°、16.7±0.2°、18.6±0.2°、22.7±0.2°和25.3±0.2°的2θ值。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少三个选自7.5±0.1°、8.8±0.1°、10.0±0.1°、10.5±0.1°、12.6±0.1°、14.7±0.1°、15.4±0.1°、16.4±0.1°、16.7±0.1°、18.6±0.1°、22.7±0.1°和25.3±0.1°的2θ值。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少16.4±0.2°的2θ值。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少10.0±0.2°的2θ值。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少15.4±0.2°的2θ值。
12.根据权利要求1-11中任一项所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少16.7±0.2°的2θ值。
13.根据权利要求1-12中任一项所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少8.8±0.2°的2θ值。
14.根据权利要求1-13中任一项所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少12.6±0.2°的2θ值。
15.根据权利要求1-14中任一项所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少14.7±0.2°的2θ值。
16.根据权利要求1-15中任一项所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少10.5±0.2°的2θ值。
17.根据权利要求1-16中任一项所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少25.3±0.2°的2θ值。
18.根据权利要求1-17中任一项所述的分离的晶型B，其中所述XRPD图谱包含至少22.7±0.2°的2θ值。
19.根据权利要求1-18中任一项所述的分离的晶型B，其特征在于具有图1的特征2θ值的XRPD图谱。
20.根据权利要求1-19中任一项所述的分离的晶型B，其具有约194±20℃的差示扫描量热法(DSC)起始吸热。
21.根据权利要求1-20中任一项所述的分离的晶型B，其具有约194±10℃的差示扫描量热法(DSC)起始吸热。
22.一种药物组合物，其包含在药学上可接受的载体中的权利要求1-21中任一项所述的分离的晶型B。
23.一种药物组合物，包含化合物1、溶解度增强剂、渗透增强剂、填充剂、粘合剂/助流剂和粘膜粘着剂/崩解剂，其中化合物1为如下结构：
或其药学上可接受的盐。
24.根据权利要求23所述的药物组合物，其中：
a.所述溶解度增强剂为乙酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯；
b.所述渗透增强剂为维生素E；
c.所述填充剂为甘露醇；
d.所述粘合剂/助流剂为纤维素；和
e.所述粘膜粘着剂为交联羧甲基纤维素钠。
25.一种治疗突变体BRAF介导的障碍的方法，包括向有需要的患者施用有效量的权利要求1-21中任一项所述的分离的晶型B或权利要求22-24中任一项所述的药物组合物。
26.根据权利要求25所述的方法，其中所述患者是人。
27.根据权利要求25或26所述的方法，其中所述突变体BRAF介导的障碍为癌症。
28.根据权利要求27所述的方法，其中所述突变体BRAF介导的癌症为黑色素瘤。
29.根据权利要求27所述的方法，其中所述突变体BRAF介导的癌症为肺癌。
30.根据权利要求27所述的方法，其中所述突变体BRAF介导的癌症是非小细胞肺癌。
31.根据权利要求27所述的方法，其中所述突变体BRAF介导的癌症为结肠直肠癌。
32.根据权利要求27所述的方法，其中所述突变体BRAF介导的癌症是微卫星稳定的结肠直肠癌。
33.根据权利要求27所述的方法，其中所述突变体BRAF介导的癌症为甲状腺癌。
34.根据权利要求27所述的方法，其中所述突变体BRAF介导的癌症为卵巢癌。
35.根据权利要求25所述的方法，其中所述突变体BRAF介导的障碍为胆管癌、erdeheim-chester病、朗格汉斯组织细胞增多症、神经节神经胶质瘤、神经胶质瘤、成胶质细胞瘤、毛细胞白血病、多发性骨髓瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、毛细胞粘液样星形细胞瘤、间变性多形性黄色星形细胞瘤、星形细胞瘤、乳头状甲状腺癌、间变性甲状腺癌、胰腺癌、胸部透明细胞肉瘤、唾液腺癌或微卫星稳定的结肠直肠癌。
36.根据权利要求25-35中任一项所述的方法，其中所述患者还接受另外的活性剂。
37.根据权利要求36所述的方法，其中所述另外的活性剂是MEK抑制剂。
38.根据权利要求37所述的方法，其中所述MEK抑制剂为曲美替尼。
39.根据权利要求36所述的方法，其中所述另外的活性剂是免疫检查点抑制剂。
40.根据权利要求39所述的方法，其中所述免疫检查点抑制剂选自纳武单抗、派姆单抗、西米普利单抗、伊匹单抗、relatlimab、阿特珠单抗、阿维鲁单抗和德瓦鲁单抗。
41.根据权利要求36所述的方法，其中所述另外的活性剂为西妥昔单抗或帕尼单抗。
42.根据权利要求1-21中任一项所述的分离的晶型B或权利要求22-24中任一项所述的药物组合物，用于治疗性治疗突变体BRAF介导的障碍。
43.根据权利要求42所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的障碍为癌症。
44.根据权利要求43所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症为黑色素瘤。
45.根据权利要求43所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症为肺癌。
46.根据权利要求43所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症是非小细胞肺癌。
47.根据权利要求43所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症为结肠直肠癌。
48.根据权利要求43所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症是微卫星稳定的结肠直肠癌。
49.根据权利要求43所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症为甲状腺癌。
50.根据权利要求43所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症为卵巢癌。
51.根据权利要求42所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的障碍为胆管癌、erdeheim-chester病、朗格汉斯组织细胞增多症、神经节神经胶质瘤、神经胶质瘤、成胶质细胞瘤、毛细胞白血病、多发性骨髓瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、毛细胞粘液样星形细胞瘤、间变性多形性黄色星形细胞瘤、星形细胞瘤、乳头状甲状腺癌、间变性甲状腺癌、胰腺癌、胸部透明细胞肉瘤、唾液腺癌或微卫星稳定的结肠直肠癌。
52.根据权利要求1-21中任一项所述的分离的晶型B或权利要求22-24中任一项所述的药物组合物，用于突变体BRAF介导的障碍的治疗中。
53.根据权利要求52所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的障碍为癌症。
54.根据权利要求53所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症为黑色素瘤。
55.根据权利要求53所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症为肺癌。
56.根据权利要求53所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症是非小细胞肺癌。
57.根据权利要求53所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症为结肠直肠癌。
58.根据权利要求53所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症是微卫星稳定的结肠直肠癌。
59.根据权利要求53所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症为甲状腺癌。
60.根据权利要求53所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的癌症为卵巢癌。
61.根据权利要求52所述的分离的晶型B，其中所述突变体BRAF介导的障碍为胆管癌、erdeheim-chester病、朗格汉斯组织细胞增多症、神经节神经胶质瘤、神经胶质瘤、成胶质细胞瘤、毛细胞白血病、多发性骨髓瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、毛细胞粘液样星形细胞瘤、间变性多形性黄色星形细胞瘤、星形细胞瘤、乳头状甲状腺癌、间变性甲状腺癌、胰腺癌、胸部透明细胞肉瘤、唾液腺癌或微卫星稳定的结肠直肠癌。
62.根据权利要求1-21中任一项所述的分离的晶型B或权利要求22-24中任一项所述的药物组合物在制备用于治疗突变体BRAF介导的障碍的药物中的用途。
63.根据权利要求62所述的用途，其中所述突变体BRAF介导的障碍为癌症。
64.根据权利要求63所述的用途，其中所述突变体BRAF介导的癌症为黑色素瘤。
65.根据权利要求63所述的用途，其中所述突变体BRAF介导的癌症为肺癌。
66.根据权利要求63所述的用途，其中所述突变体BRAF介导的癌症是非小细胞肺癌。
67.根据权利要求63所述的用途，其中所述突变体BRAF介导的癌症为结肠直肠癌。
68.根据权利要求63所述的用途，其中所述突变体BRAF介导的癌症是微卫星稳定的结肠直肠癌。
69.根据权利要求63所述的用途，其中所述突变体BRAF介导的癌症为甲状腺癌。
70.根据权利要求63所述的用途，其中所述突变体BRAF介导的癌症为卵巢癌。
71.根据权利要求62所述的用途，其中所述突变体BRAF介导的障碍为胆管癌、erdeheim-chester病、朗格汉斯组织细胞增多症、神经节神经胶质瘤、神经胶质瘤、成胶质细胞瘤、毛细胞白血病、多发性骨髓瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、毛细胞粘液样星形细胞瘤、间变性多形性黄色星形细胞瘤、星形细胞瘤、乳头状甲状腺癌、间变性甲状腺癌、胰腺癌、胸部透明细胞肉瘤、唾液腺癌或微卫星稳定的结肠直肠癌。
72.根据权利要求1-21中任一项所述的分离的晶型B，用作治疗活性物质。
73.一种制备下式的化合物的方法：
包括在异丙基胺或异丙基胺盐和第一碱的存在下，转氨酶催化的下式化合物的还原胺化：
以得到式A-1的化合物；
其中RX选自氢和氨基保护基。
74.根据权利要求73所述的方法，其中：
所述氨基保护基RX为叔丁氧基羰基(BOC)；
所述第一碱是氢氧化钠或氢氧化钾；和
所述异丙基胺盐是盐酸异丙基胺。
75.一种制备下式化合物的方法：
其中该方法包括以下步骤：
(i)使下式化合物：
与手性酸反应以得到式A-3化合物与所述手性酸之间形成的非对映体盐的混合物；
(ii)将在步骤(i)中制备的非对映体盐的混合物从第一溶剂中结晶，以得到在所述手性酸的阴离子和下式的N-保护的(R)-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-3-铵的阳离子之间形成的单独分离的非对映体盐：
(iii)用第二碱处理在步骤(ii)中分离的含式A-4阳离子的所述单独分离的非对映体盐以释放式A-1的化合物；
其中RX选自氢和氨基保护基。
76.根据权利要求75所述的方法，其中：
所述氨基保护基RX为叔丁氧基羰基(BOC)；
所述手性酸为(R)-扁桃酸；
所述第一溶剂为乙腈；和
所述第二碱是氢氧化钠或氢氧化钾。
77.制备下式化合物的方法：
其中该方法包括在第二溶剂中在原甲酸三烷基酯存在下使2-氨基-5-羟基苯甲酸与下式化合物反应：
其中式A-1化合物在根据权利要求73-76中任一项所述的方法中制备；和
RX选自氢和氨基保护基。
78.根据权利要求77所述的方法，其中：
所述氨基保护基RX为叔丁氧基羰基(BOC)；
原甲酸三烷基酯是原甲酸三乙酯；和
所述第二溶剂是正丁醇。
79.一种制备下式化合物的方法：
包括在第三溶剂中在第三碱存在下使2,3,6-三氟苯甲腈与下式化合物反应：
其中
RX选自氢和氨基保护基；和
式A-5的化合物在根据权利要求77-78中任一项所述的方法中制备。
80.根据权利要求79所述的方法，其中：
所述第三碱为碳酸钾，且所述第三溶剂为乙腈；和
所述氨基保护基RX是叔丁氧基羰基(BOC)。
81.一种制备下式化合物的方法：
包括以下步骤：
在第四溶剂中在第四碱存在下使[甲基(氨磺酰基)氨基]乙烷NH2SO2N(Me)Et与下式的化合物反应：
以得到式A-8的化合物：
其中：
式A-6的化合物在权利要求79-80中任一项所述的方法中制备；
RX选自氢和氨基保护基；和
(ii)当RX为氨基保护基时，则在第一酸的存在下除去与式A-8化合物的哌啶氮原子连接的氨基保护基。
82.根据权利要求81所述的方法，其中：
所述第四碱为碳酸铯，且所述第四溶剂为N,N-二甲基乙酰胺；
所述氨基保护基RX为叔丁氧基羰基(BOC)；和
所述第一酸是盐酸。
83.一种制备下式化合物的方法：
包括在第五溶剂中在第五碱存在下使2,4,5-三氟苯甲腈与下式化合物反应：
其中RY是氢或羧酸保护基。
84.根据权利要求83所述的方法，其中：
所述第五碱为N,N-二异丙基乙基胺，且第五溶剂为N,N-二甲基甲酰胺；和
RY是叔丁基(tBu)。
85.一种制备下式化合物的方法：
包括在第六溶剂的存在下使甲基肼与下式化合物反应：
其中式B-1的化合物在根据权利要求83-84中任一项所述的方法中制备；
其中RY是氢或羧酸保护基。
86.根据权利要求85所述的方法，其中：
所述第六溶剂为N-甲基-2-吡咯烷酮；和
RY是叔丁基。
87.一种制备下式化合物的方法：
包括在第七溶剂中使丙烯酸与下式化合物反应:
其中：
式B-3的化合物在根据权利要求85-86中任一项所述的方法中制备；和
RY是氢或羧酸保护基。
88.根据权利要求87所述的方法，其中：
所述第七溶剂为盐酸水溶液；和
RY是叔丁基。
89.一种制备下式化合物的方法：
包括以下步骤：
(i)首先在第二酸的存在下使金属氰酸盐与下式化合物反应：
以得到含有下式的第一中间体化合物的反应混合物：
其中：
式B-4的化合物在根据权利要求87-88中任一项的方法中制备；和
RY是氢或羧酸保护基；
(ii)然后任选地在第三酸的存在下使来自步骤(i)的式B-6的所述第一中间体化合物环化，以得到下式的第二中间体化合物：
(iii)然后，当RY是羧酸保护基时，在第四酸的存在下从来自步骤(ii)的式B-7的第二中间体化合物除去所述羧酸保护基RY，以得到式B-5的化合物。
90.根据权利要求89所述的方法，其中
RY是叔丁基；
金属氰酸盐为氰酸钠或氰酸钾；
所述第二酸是乙酸；
所述第三酸为盐酸或乙酸；和
所述第四酸是盐酸。
91.一种制备下式化合物的方法：
其中该方法包括以下步骤：
(i)首先在第六碱和第八溶剂的存在下使下式化合物：
与羧酸羟基活化试剂反应，以得到下式的第三中间体化合物：
其中所述羧酸羟基被转化为更高反应性的基团-ORZ；
其中式B-5的化合物在根据权利要求89-90中任一项所述的方法中制备；和
(ii)然后在第七碱和第九溶剂的存在下使下式的(3R)-3-[6-[2-氰基-3-[[乙基(甲基)氨磺酰基]氨基]-6-氟-苯氧基]-4-氧代-喹唑啉-3-基]-1-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷：
与步骤(ii)中制备的式B-8的第三中间体化合物反应，以得到式1的化合物，
其中式A-7的化合物在根据权利要求81-82中任一项所述的方法中制备。
92.根据权利要求91所述的方法，其中
(i)所述第六碱是N,N-二异丙基乙基胺；
所述第八溶剂为乙腈；
所述羧酸羟基活化试剂为2-琥珀酰亚胺基-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸盐，且RZ基团为2,5-二氧代吡咯烷-1-基；和
(ii)所述第七碱是三乙胺，且所述第九溶剂是N,N-二甲基甲酰胺。
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