CN118119641A - Ige调节的疾病的治疗 - Google Patents

Ige调节的疾病的治疗 Download PDF

Info

Publication number
CN118119641A
CN118119641A CN202280068465.3A CN202280068465A CN118119641A CN 118119641 A CN118119641 A CN 118119641A CN 202280068465 A CN202280068465 A CN 202280068465A CN 118119641 A CN118119641 A CN 118119641A
Authority
CN
China
Prior art keywords
ige
antibody
seq
amino acid
acid sequence
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202280068465.3A
Other languages
English (en)
Inventor
郭必盛
李昭鋐
李元凤
林淑菁
王长怡
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
United Biomedical Inc
Original Assignee
United Biomedical Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by United Biomedical Inc filed Critical United Biomedical Inc
Publication of CN118119641A publication Critical patent/CN118119641A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
    • C07K16/4283—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig
    • C07K16/4291—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig against IgE
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本发明有关于使用抗IgE抗体治疗IgE调节的疾病。特别是，抗IgE抗体为针对IgE的多功能性抗体，其中和IgE并抑制IgE合成。特定而言，本发明的治疗有效提供快速及/或持续抑制疾病症状。

Description

IGE调节的疾病的治疗
相关申请案
本申请案系主张美国暂时专利申请号63/254,729于2021年10月12日提申的内容，其内容在此通过引用整体并入本案。
技术领域
本发明系有关使用抗IgE抗体治疗IgE调节的疾病。特别是，抗IgE抗体为针对IgE的多功能性抗体，其中和IgE并抑制IgE合成。具体而言，本发明的治疗有效提供快速及/或持续抑制疾病症状。
背景技术
针对各种过敏性疾病的医疗需求仍未得到满足，其中综合疾病的盛行率急剧上升，影响了全世界25％以上的人口，造成全球健康威胁及日益增加的经济负担1,2。过敏性(异位性)疾病，例如食物过敏、异位性皮肤炎、气喘及过敏性鼻炎，可能相互关联，有时称为“过敏进行曲(Atopic March)”3-5，其可能从儿童时期开始，且主要由IgE调节。非过敏性疾病亦可能与IgE相关联，其不参与对外来抗原的免疫反应，特别是发炎性皮肤病，包括慢性自发性荨麻疹(chronic spontaneous urticaria，CSU)。
IgE的功能取决于其Fc区(Cε2-Cε4)与两个主要受体的交互作用：高亲和性FcεRI(KD，大约10-10至10-11M)6，主要表达在肥大细胞及嗜碱性球上，其负责过敏性过敏反应及发炎反应；以及低亲和性的单体型CD23(FcεRII)(KD，大约10-6至10-7M)7，主要表达在B细胞上，其参与IgE合成及IgE清除的调节，且为其他免疫学功能的宿主8-11。细胞表面上的CD23通常以同元三聚体形式存在。IgE与游离三聚体CD23的结合亲和力，或以IgE免疫复合体(IgE-IC)形式与CD23的交互作用，可产生接近IgE-FcεRI交互作用的亲和力强度(KD，10-9至10- 10M)12。
鉴于IgE对蠕虫及癌症的有益保护作用的报导13,14，由于IgE表现在过敏症状中的有害效应功能，通常被认为在生理上是可有可无的，且为药物开发的合法、安全性标靶。奥马佐单抗(omalizumab)为迄今唯一获批准的抗IgE抗体，其用于少数IgE相关疾病，且仅限于作为中重度持续性过敏性气喘(2003)、慢性自发性荨麻疹(CSU，2014)及鼻息肉(2020)的第三线附加治疗剂15。新的抗IgE生物制剂已在临床前及临床上使用16,17。然而，在后期临床试验中探索并保持可行的替代性IgE标靶抗体(抗Cε)仅有利格珠单抗(ligelizumab)(QGE031)18,19。
作为CSU的标准第一线治疗，小分子药物(例如，抗组织胺)或环状胜肽药物(例如，环孢素)通常以高的投剂频率投予。然而，每日服用药丸或胶囊长达数周，通常会导致不顺从性，从而使其等的疾病难以控制。当第一线治疗无效时，患者需要求助于生物制剂，亦即唯一获批准的奥马佐单抗或利格珠单抗，其已在关键的3期试验中进行过测试，但最终在后期开发中失败。同时，彼等两种抗IgE单株抗体系每4周投予。
在本领域中，仍然需要有效且改进的抗IgE抗体，以治疗IgE调节的疾病。
发明内容
本发明至少基于所述发现，亦即多功能性抗IgE抗体(其中和IgE并抑制IgE合成)在治疗IgE调节的疾病中提供有效及改进的效果。特别是，抗IgE抗体抑制或阻断CD23调节的IgE产生的下调。具体而言，使用此类多功能性抗IgE抗体的治疗提供快速及/或持续症状缓解，且需要较不频繁投剂，其增加患者舒适性及便利性。
在一态样中，本发明提供一种治疗IgE调节的疾病的方法，其包含投予有需求的个体抗IgE抗体，其中抗体为多功能性抗体，其中和IgE并抑制IgE合成。具体而言，本发明的方法在个体中提供快速及/或持续症状缓解。
在一些具体实施例中，该抗体结合至游离IgE、B淋巴球上的膜结合IgE，及/或CD23结合的IgE，但不结合至肥大细胞上FcεRI结合的IgE。
在一些具体实施例中，该抗体以游离形式与CD23结合的IgE结合，并以IgE复合物形式与CD23结合。
在一些具体实施例中，该抗体为其抗原结合片段。
在一些具体实施例中，该抗体系经人源化。
在一些具体实施例中，该抗体或抗原结合片段包含
(a)重链可变区(VH)，其包括包含SEQ ID NO:2的胺基酸序列的重链互补决定区1(HC CDR1)、包含SEQ ID NO:4的胺基酸序列的重链互补决定区2(HC CDR2)，以及包含SEQID NO:6的胺基酸序列的重链互补决定区3(HC CDR3)；以及
(b)轻链可变区(VL)，其包括包含SEQ ID NO:9的胺基酸序列的轻链互补决定区1(LC CDR1)、包含SEQ ID NO:11的胺基酸序列的轻链互补决定区2(LC CDR2)，以及包含SEQID NO:13的胺基酸序列的轻链互补决定区3(LC CDR3)。
在一些具体实施例中，该VH包含SEQ ID NO:15的胺基酸序列。
在一些具体实施例中，该VL包含SEQ ID NO:16的胺基酸序列。
在一些具体实施例中，该症状缓解包括IgE减少、缓解瘙痒，及/或荨麻疹次数减少。
在一些具体实施例中，该症状缓解系在投予后持续2至14周或更久。
在一些具体实施例中，该症状缓解在投予后1周或更快时间内发生症状缓解。
在一些具体实施例中，该抗体系每2至14周或较不频繁投予。
在一些具体实施例中，该抗体系每4周或较不频繁投予。
在一些具体实施例中，该抗体系每12至24周投予。
在一些具体实施例中，该抗体的投予剂量为每1公斤个体体重0.1至10毫克。
在一些具体实施例中，该抗体以整个剂量包括在组合物中，并以单一剂量投予个体。
在一些具体实施例中，该抗体系藉由静脉或皮下注射投予。
在一些具体实施例中，该IgE调节的疾病为过敏性气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎、食物过敏、慢性自发性(特发性)荨麻疹、慢性鼻窦炎、全身性肥大细胞增生症、皮肤肥胖细胞增多症、过敏性支气管与肺的曲菌病、复发性特发性血管性水肿，或嗜酸性球相关胃肠道疾病。
本发明亦提供如本文所述的一种抗IgE抗体或包含其的医药组合物以用于治疗抗IgE调节的疾病。进一步的揭示内容为如本文所述的抗IgE抗体在制造用于治疗抗IgE调节的疾病的药剂的用途。
本发明的一或多个具体实施例的细节阐述于以下描述中。本发明的其他特征或优势将因以下数个具体实施例的详细描述以及所附的申请专利范围而显见。
附图说明
当结合附图阅读时，将更好地理解上述发明内容及以下本发明的实施方式。为了说明本发明，在图示中显示目前较佳的具体实施例。然而，应当理解，本发明不限于所示的精准安排及手段。
在下图中：
图1显示藉由表面电浆共振(SPR)进行的IgE结合至抗IgE单株抗体UB-221与奥马佐单抗的动力学分析。
图2显示藉由表面电浆共振(SPR)进行的IgE结合至抗IgE单株抗体UB-221与利格珠单抗与奥马佐单抗的动力学分析。
图3显示IgE结合至UB-221与奥马佐单抗的竞争性中和反应(上图)，以及抑制由IgE特异性卵白蛋白(OVA)诱导的嗜碱性FcεRI表达的RBX SX-38的去颗粒作用(下图)。
图4显示以单一静脉注射(IV)剂量的UB-221与奥马佐单抗处理的hIGHE嵌入小鼠中血清人源化IgE的减少。
图5A至图5C显示藉由UB-221与利格珠单抗与奥马佐单抗的异位性皮肤炎患者血清中高水平IgE的离体中和反应，其包括低IgE(<4,800ng/mL，图5A)、中IgE(4,800-24,000ng/mL，图5B)，以及高IgE(>24,000ng/mL，图5C)。
图6显示游离形式的UB-221与利格珠单抗与奥马佐单抗与CD23结合的IgE的结合(上图)以及mAb:IgE复合物形式与CD23的结合(下图)。
图7A及图7B显示UB-221与利格珠单抗与奥马佐单抗对人类PBMC中的IgE新合成的影响，其包括剂量为1、3及10μg/mL的数据(图7A)及剂量为10、20及80μg/mL的数据(图7B)。
图8A至图8D显示UB-221可结合石蟹猕猴的IgE及CD23结合的IgE，并在单一IV剂量之后诱导快速、显著的血清IgE减少，其包括显示UB-221可结合至cIgE的数据(图8A)、显示UB-221可剂量依赖性地结合至cCD23结合的cIgE的数据(图8B)、UB-221在IV 5mg/kg剂量之后的药物动力学(PK)数据(图8C)，以及显示出UB-221可诱导快速、显著减少血清游离cIgE的数据(图8D)。
图9显示第期临床试验的设计，以评估15名慢性自发性荨麻疹患者在0.2、0.6、2、6及10mg/kg的单一IV剂量的UB-221投予后的安全性、耐受性、药物动力学(PK)，以及药效动力学(PD)。
图10显示慢性自发性荨麻疹患者在以单一IV剂量的UB-221治疗后血清中UB-221浓度以剂量依赖性半衰期衰减长达22天。
图11A至图11C显示单一IV剂量的UB-221可有效治疗慢性自发性荨麻疹，如UAS7疾病评分、个体(图11A)及平均值(图11B)的快速降低，以及UAS疾病评分的每日变化(图11C)所证实。
图12A及图12B显示单一IV剂量的UB-221可有效治疗慢性自发性荨麻疹，如HSS7评分、个体(图12A)及平均值(图12B)的快速降低所证实。
图13显示慢性自发性荨麻疹患者在以单一IV剂量的UB-221治疗后血清中个别游离IgE浓度。
图14显示接受单一IV剂量的UB-221的慢性自发性荨麻疹患者中同时的平均血清UB-221、游离IgE浓度及UAS7评分。
图15显示UB-221的重链可变区(VH)与轻链可变区(VL)的胺基酸序列。互补决定区(CDR)以下划线表示，其包括GYTFNGYWMH(HC CDR1，SEQ ID NO:2)、YINPTTGHTEYNQKFKD(HCCDR2，SEQ ID NO:4)、ARQEYRHSWFAY(HC CDR3，SEQ ID NO:6)、QSVDYDGDTYM(LC CDR1，SEQID NO:9)、AASNLDS(LC CDR2，SEQ ID NO:11)，以及QQTNEDPWT(LC CDR3，SEQ ID NO:13)。
具体实施方式
下列描述仅旨在说明本发明的各种具体实施例。因此，本文所论及的特定具体实施例或修改不应解释为限制本发明的范畴。对本领域技术人员显见的是，在不背离本发明范畴的情况下可进行各种改变或等效物。
I.定义
为了提供对本发明的清晰及易懂的理解，首先定义某些术语。在整个实施方式中阐述了额外的定义。除非另有定义，否则本文使用的所有技术与科学术语具有与本发明所属领域的技术人员通常理解的相同含义。
如本文所用，单数形式“一”、“一者”及“该”包括复数参考体，除非上下文另有明确规定。因此，例如，提及“组分”包括本领域技术人员已知的复数个此类组分及其等同物。
术语“包含有”或“包含”通常以包括了/包括的含义使用，其意指允许存在一或多个特征、成分或组分。术语“包含有”或“包含”涵盖了术语“组成自”或“由～组成”。
如本文所用，术语“多胜肽”意指由胺基酸残基经由胜肽键连接所组成的聚合物。术语“蛋白”通常意指相对较大的多胜肽。术语“胜肽”通常意指相对较短的多胜肽(例如，含有多达100、90、70、50、30、20或10个胺基酸残基)。
如本文所用，术语“大约”或“约”意指本领域普通技术人员将理解的可接受偏差的程度，可根据使用其的上下文而在一定程度上变化。具体而言，“大约”或“约”可指具有在引用值附近±10％或±5％或±3％的范围内的数值。
如本文所用，术语“实质上相同”意指两序列具有80％或更多，较佳为85％或更多，更佳为90％或更多，甚至更佳为95％或更多的同源性。
如本文所用，术语“抗体”(与复数形式的抗体可互换使用)意指具有特异性结合特定标靶抗原分子能力的免疫球蛋白分子。如本文所用，术语“抗体”不仅包括完整(亦即，全长)抗体分子，还包括保留了抗原结合能力的抗原结合片段，例如，Fab、Fab’、F(ab’)2及Fv。此类片段为本领域中熟知且经常用于体外及体内。术语“抗体”亦包括嵌合抗体、人源化抗体、人类抗体、双价抗体、线型抗体、单链抗体、多特异性抗体(例如，双特异性抗体)，以及免疫球蛋白分子的任何其他修饰配置(包含所需特异性的抗原辨识位点)，包括抗体的胺基酸序列变体、抗体的醣基化变体及共价修饰的抗体。
完整或完全抗体包含两条重链及两条轻链。每条重链包含可变区(VH)与第一、第二及第三恒定区(CH1、CH2及CH3)；且每条轻链含有可变区(VL)及恒定区(CL)。抗体呈“Y”形，其中Y的主干由通过双硫键接结合在一起的两条重链的第二及第三恒定区组成。Y的每一臂包括单一重链的可变区及第一恒定区，其结合至单一轻链的可变区及恒定区。轻链及该等重链的可变区负责抗原结合。两条链的可变区通常负责抗原结合，其的每一者含有三个高度可变区，称为互补决定区(CDR)；亦即，重(H)链CDR，包括HC CDR1、HC CDR2、HC CDR3，以及轻(L)链CDR，包括LC CDR1、LC CDR2及LC CDR3。三个CDR由框架区(FR1、FR2、FR3及FR4)隔开，其等比CDR更高度保留，并形成支持高度可变区的骨架。重链及轻链的恒定区不负责抗原结合，但参与各种效应功能。根据其重链的恒定结构域的抗体胺基酸序列，免疫球蛋白可分为不同类别。免疫球蛋白有五种主要类别：IgA、IgD、IgE、IgG及IgM。对应于不同类别的免疫球蛋白的重链恒定结构域分别称为α、δ、ε、γ及μ。
如本文所用，术语“抗原结合片段”或“抗原结合结构域”意指负责抗原结合的完整抗体分子的部分或区域。抗原结合片段能结合与亲代抗体所结合的相同抗原。抗原结合片段的实例包括但不限于：(i)Fab片段，其可为由VH-CH-1链与VL-CL链组成的单价片段；(ii)F(ab′)2片段，其可为由在铰链区处藉由双硫键连接两个Fab片段而组成的双价片段；(iii)Fv片段，其由藉由非共价交互作用而结合在一起的抗体分子的VH与VL结构域组成；(iv)单链Fv(scFv)，其可为由VH结构域与VL结构域经由胜肽连接子组成的单一多胜肽链；以及(v)(scFv)2，其可含有藉由胜肽连接子连接的两个VH结构域与两个VL结构域，该两个VL结构域经由双硫键与两个VH结构域相连接。
如本文所用，术语“嵌合抗体”意指含有来自不同来源(例如，不同物种)的多胜肽的抗体。在一些具体实施例中，在嵌合抗体中，轻链及重链两者的可变区可模拟源自一哺乳动物物种(例如，非人类哺乳动物，例如小鼠、兔及大鼠)的抗体的可变区，而恒定区可与源自另一哺乳动物(例如，人类)的抗体序列同源。
如本文所用，术语“人源化抗体”意指包含源自人类抗体的框架区及来自非人类(通常为小鼠或大鼠)免疫球蛋白的一或多个CDR的抗体。
如本文所用，术语“人类抗体”意指基本上轻链及重链序列的整个序列，包括互补决定区(CDR)，皆来自人类基因的抗体。在一些情况下，人类抗体可包括一或多个不由人类种系免疫球蛋白序列编码的胺基酸残基，例如，藉由CDR的一或多者的突变，或FR的一或多者的突变，例如，以降低可能的免疫原性、增加亲和力，以及去除可能导致不期望的折迭的半胱胺酸。
如本文所用，术语“特异性结合”或“特异性地结合”意指两个分子的间的非随机结合反应，例如抗体与其标靶抗原的表位的结合。“特异性地结合”至标靶抗原或表位的抗体为本领域熟习的术语，且用以确定此特异性结合的方法亦为本领域熟习。若抗体以比其与其他物质结合更大的亲和性/亲和力、更容易及/或更长的持续时间结合至标靶抗原，则称为抗体“特异性地结合”至标靶抗原。换言之，藉由阅读此定义亦可理解到，例如，特异性地结合至第一个标靶抗原的抗体可能或可能不特异性地或偏好地结合至第二个标靶抗原。因此，“特异性结合”或“偏好结合”不一定需要(尽管其可包括)排他的结合。通常，结合的亲和力可以解离常数(KD)定义。通常，当用于抗体时，特异性地结合可指以小于约10-8M，例如约10-9M或更小、约10-10M或更小、约10-11M或更小、约10-12M或更小，或甚至更小的KD值特异性地结合至(辨识)其标靶的抗体，并以相应于低于结合至非特异性抗原(例如，BSA或酪蛋白)的亲和力至少10倍，例如低于至少100倍，例如低于至少1,000倍或低于至少10,000倍的KD结合至特定标靶。
如本文所用，术语“核酸”或“多核苷酸”可指由核苷酸单元组成的聚合物。多核苷酸包括天然存在的核酸，例如去氧核醣核酸(“DNA”)与核醣核酸(“RNA”)以及核酸类似物，包括具有非天然存在的核苷酸的该等。多核苷酸可例如使用自动化DNA合成仪合成。将理解到，当核苷酸序列以DNA序列(亦即，A、T、G、C)表示时，此亦包括RNA序列(亦即，A、U、G、C)，其中“U”代替“T”。术语“cDNA”意指与mRNA互补或一致的DNA，不论是单股或双股形式。
如本文所用，术语“互补”意指两条多核苷酸的交互作用表面的拓扑学相容性或匹配在一起。当第一条多核苷酸的核苷酸序列与第二条多核苷酸的多核苷酸结合伴侣的核苷酸序列一致时，第一条多核苷酸与第二条多核苷酸互补。因此，序列为5′-ATATC-3′的多核苷酸与序列为5′-GATAT-3′的多核苷酸互补。
如本文所用，术语“编码”意指多核苷酸(例如，基因、cDNA或mRNA)中特定核苷酸序列的天然性质，可用作在具有给定的RNA转录本(亦即，rRNA、tRNA及mRNA)序列或给定的胺基酸序列的生物过程中合成其他聚合物与大分子的模板，以及由此产生的生物学性质。因此，若由该基因产生的mRNA的转录及转译在细胞或其他生物系统中产生蛋白，则该基因编码蛋白。本领域技术人员应当理解，由于遗传密码的退化性，许多不同的多核苷酸及核酸可编码相同的多肽。亦应理解，本领域技术人员可使用常规技术进行不影响由此处所述多核苷酸编码的多胜肽序列的核苷酸取代，以反映欲于其中表达多胜肽的任何特定宿主生物体的密码子使用。因此，除非另有说明，否则“编码胺基酸序列的核苷酸序列”涵盖彼此为退化形式且编码相同胺基酸序列的所有核苷酸序列。
如本文所用，术语“重组核酸”意指具有非天然连接在一起的序列的多核苷酸或核酸。重组核酸可以载体的形式存在。“载体”可含有给定的感兴趣核苷酸序列及调节序列。载体可用于表达给定的核苷酸序列(表达载体)或维持给定的核苷酸序列以将其复制、将其操纵，或在不同位置之间(例如，在不同生物体之间)将其转移。载体可被导入适用的宿主细胞中以用于上述目的。“重组细胞”意指已将重组核酸导入其中的宿主细胞。“转形的细胞”意指透过重组DNA技术而使编码感兴趣蛋白的DNA分子被导入的细胞。
载体可为多种类型，包括质体、黏粒、游离基因组、F型黏接质体、人工染色体、噬菌体、病毒载体等。通常，在载体中，给定的核苷酸序列系可操作地连接至调节序列，使得当载体被导入宿主细胞时，给定的核苷酸序列可在调节序列的控制下表达在宿主细胞中。调节序列可包含，例如但不限于，启动子序列(例如，巨细胞病毒(CMV)启动子、猴病毒40(SV40)早期启动子、T7启动子、及酒精氧化酶基因(AOX1)启动子)、起始密码子、复制起点、增强子、分泌讯号序列(例如，α交配因子讯号)、终止密码子，以及其他控制序列(例如，Shine-Dalgarno序列及终止序列)。较佳地，载体可进一步含有用于后续筛选/选择程序的标记序列(例如，抗生素抗性标记序列)。为了蛋白生产的目的，在载体中，给定的感兴趣核苷酸序列可连接至除上述调节序列以外的另一核苷酸序列，使得产生融合的多胜肽且有利于后续的纯化程序。该融合多胜肽包括用于纯化目的的标签，例如His标签。
如本文所用，术语“治疗”意指将一或多种活性剂施用或投予患有病症、病症的症状或病况，或病症的进展的个体，目的在于治愈、愈合、减轻、缓解、改变、补救、改善、改进，或影响病症、病症的症状或病况、由病症引起的失能，或病症的进展或预先倾向性。
II.针对IgE的抗体
根据本发明，如本文所用，抗IgE抗体为多功能性抗IgE抗体，其中和IgE并抑制IgE合成。
如本文所述，中和抗IgE抗体可部分或完全抑制IgE与肥大细胞和嗜碱性球上的FcεRI的结合，并可能导致通过FcεRI的IgE传讯的任何实质抑制或阻断，其负责过敏反应及发炎反应。中和作用可藉由任何适用方法测量。在一态样中，相较于不存在中和抗体的实质上相同条件中通常发生的去颗粒作用的量，IgE中和作用反映在中和抗体可引起至少约30％，较佳为至少约40％、至少约50％、至少约60％、至少约75％或更多(例如，约25至100％)的抑制由IgE调节的抗原刺激所诱导的去颗粒作用。
如本文所述，IgE合成包括从新产生IgE。IgE水平及IgE合成的抑制可藉由任何适用方法测量。在一态样中，相较于来自不存在抑制性抗体的实质上相同条件下的细胞的IgE水平，在以抑制性抗体处理的细胞中，实质上抑制IgE合成的抑制性抗体可导致35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或更多的IgE水平降低。具体而言，抑制IgE合成的抑制性抗体涉及以游离形式或IgE复合物形式或两者与CD23交互作用。更具体而言，抑制性抗体经由以游离形式及IgE复合物形式与CD23交互作用而抑制IgE合成，从而实质上抑制或阻断CD23调节的IgE产生的下调。
在一些具体实施例中，如本文所述，抗IgE抗体为抗IgE单株抗体UB-221mAb。UB-221mAb的重链可变区(VH)及轻链可变区(VL)的胺基酸序列，以及其等的互补决定区(HCCDR1、HC CDR2及HC CDR3)(LC CDR1、LC CDR2及LC CDR3)系如下表1所示。本发明的抗IgE抗体包括UB-221mAb及其功能性变体。
在一些具体实施例中，本发明的抗IgE抗体为UB-221mAb的功能性变体，其特征在于包含(a)VH，其包含SEQ ID NO:2的HC CDR1、SEQ ID NO:4的HC CDR2，以及SEQ ID NO:6的HC CDR3；以及(b)VL，其包含SEQ ID NO:9的LC CDR1、SEQ ID NO:11的LC CDR2，以及SEQ IDNO:13的HC CDR3，或其抗原结合片段。
在一些具体实施例中，本发明的抗IgE抗体具有(a)VH，其包含SEQ ID NO:2的HCCDR1、SEQ ID NO:4的HC CDR2，以及SEQ ID NO:6的HC CDR3；以及(b)VL，其包含SEQ ID NO:9的LC CDR1、SEQ ID NO:11的LC CDR2，以及SEQ ID NO:13的HC CDR3，可包含VH，其包含SEQID NO:15或实质上与其一致的胺基酸序列，以及VL，其包含SEQ ID NO:16或实质上与其一致的胺基酸序列。具体而言，本发明的抗IgE抗体包括VH，其包含与SEQ ID NO:15具有至少80％(例如，82％、84％、85％、86％、88％、90％、92％、94％、95％、96％、98％或99％)一致性的胺基酸序列，以及VL，其包含与SEQ ID NO:16具有至少80％(例如，82％、84％、85％、86％、88％、90％、92％、94％、95％、96％、98％或99％)一致性的胺基酸序列。本发明的抗IgE抗体亦包括由编码如本文所述的相关VH或VL胺基酸序列的多核苷酸序列所编码的任何以重组方式(工程化)衍生的抗体。
美国专利号10,047,166描述了本发明抗IgE抗体的一实例，其的每一相关揭示内容皆通过引用并入本文中以针对本文提及的目的或主题。
术语“实质上相同”可指变体的相关胺基酸序列(例如，在FRs、CDR、VH或VL中)与参考抗体相比几乎无差异，使得变体相对于参考抗体具有实质上类似的结合活性(例如，亲和力、特异性或两者)及生物活性。此变体可能包括较小的胺基酸变化。可理解的是，多胜肽可能具有数量有限的变化或修饰，彼等可在与其活性或功能无关的多胜肽的某个部分内进行，但仍会产生具有可接受水平的等效或类似生物活性或功能的变体。在一些实例中，胺基酸残基变化为保留性胺基酸取代，意指胺基酸残基与另一胺基酸残基具有类似的化学结构，而对多胜肽功能、活性或其他生物作用的影响较小或实质上无影响。通常，与CDR区相比，FR区可进行相对更多的取代，只要其等不会对抗体的结合功能及生物活性产生不利影响(例如，相较于原始抗体，结合亲和力降低超过50％)。在一些具体实施例中，在参考抗体与变体之间，序列一致性可为约80％、82％、84％、85％、86％、88％、90％、92％、94％、95％、96％、98％，或99％或更高。可根据本领域普通技术人员已知的用于改变多胜肽序列的方法制备变体，例如结合此类方法的该等参考文献，例如，Molecular Cloning:ALaboratoryManual,J.Sambrook等人，第二版，Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold SpringHarbor，New York，1989。举例而言，胺基酸的保留性取代包括在下列群组内的胺基酸之间进行的取代：(i)A、G；(ii)S、T；(iii)Q、N；(iv)E、D；(v)M、I、L、V；(vi)F、Y、W；以及(vii)K、R、H。
本文所述的抗体可为动物抗体(例如，小鼠衍生的抗体)、嵌合抗体(例如，小鼠-人类嵌合抗体)、人源化抗体，或人类抗体。本文所述的抗体亦可包括其等的抗原结合片段，例如，Fab片段、F(ab′)2片段、Fv片段、单链Fv(scFv)，以及(scFv)2。抗体或其等的抗原结合片段可藉由本领域已知的方法制备。
III.抗体的制备
本领域的许多常规方法可用于获得抗体或其抗原结合片段。
在一些具体实施例中，本文提供的抗体可藉由常规杂交瘤技术制备。通常，可选地与载体蛋白耦接及/或与佐剂混合的标靶抗原可用于使宿主动物进行免疫以产生结合至该抗原的抗体。收取分泌单株抗体的淋巴球并与骨髓瘤细胞融合以产生杂交瘤。随后，筛选以此方式形成的杂交瘤殖株，以确定及选择分泌所需单株抗体的该等。
在一些具体实施例中，本文提供的抗体可经由重组技术制备。在相关态样中，亦提供编码所揭示胺基酸序列的分离的核酸，以及包含此类核酸的载体，以及以该核酸转形或转染的宿主细胞。
举例而言，可将包含编码此类抗体的重链及轻链可变区的核苷酸序列的核酸经由常规技术选殖至表达载体(例如，细菌载体，例如大肠杆菌载体、酵母菌载体、病毒载体，或哺乳动物载体)中，并可将任何载体导入适用的细胞(例如，细菌细胞、酵母菌细胞、植物细胞，或哺乳动物细胞)中以表达抗体。哺乳动物宿主细胞株的实例为人类胚胎肾细胞株(293细胞)、幼仓鼠肾细胞(BHK细胞)、中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)、非洲绿猴肾细胞(VERO细胞)，以及人类肝细胞(Hep G2细胞)。用于表达本文所述抗体的重组载体通常含有编码抗体胺基酸序列的核酸，该核酸可操作地连接至组成型或诱导型启动子。典型的载体含有用于调节编码抗体的核酸表达的转录及转译终止子、起始序列，以及启动子。载体可选地含有用于原核及真核系统的选择标记。在一些实例中，重链及轻链编码序列皆包括在相同的表达载体中。在其他实例中，抗体的每条重链及轻链系选殖至单独载体中并分开产生，其随后可在适用条件下培养以进行抗体组装。
用于表达本文所述抗体的重组载体通常含有编码抗体胺基酸序列的核酸，该核酸可操作地连接至组成型或诱导型启动子。重组抗体可在原核或真核表达系统中产生，例如细菌、酵母菌、昆虫，以及哺乳动物细胞。典型的载体含有用于调节编码抗体的核酸表达的转录及转译终止子、起始序列，以及启动子。载体可选地含有用于原核及真核系统的选择标记。可进一步分离或纯化所产生的抗体蛋白，以获得实质上均质的制备物，其系用于进一步的试验及应用。适用的纯化程序，例如，可包括在免疫亲和性或离子交换管柱上的分离、乙醇沉淀、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、高效能液相层析术(HPLC)、硫酸铵沉淀，以及凝胶过滤。
当需要全长抗体时，本文所述的任何VH及VL链的编码序列可连接至免疫球蛋白的Fc区的编码序列，从而所得的编码全长抗体重链及轻链的基因可在适用的宿主细胞(例如，植物细胞、哺乳动物细胞、酵母菌细胞，或昆虫细胞)中表达及组装。
抗原结合片段可经由常规方法制备。举例而言，F(ab')2片段可藉由全长抗体分子的胃蛋白酶消化生成，而Fab片段可藉由还原F(ab')2片段的双硫键而产生。或者，此类片段亦可经由重组技术制备，其系藉由在适用的宿主细胞中表达重链及轻链片段，并在体内或体外使其等组装以形成所需的抗原结合片段。单链抗体可经由重组技术制备，其系藉由连接编码重链可变区的核苷酸序列与编码轻链可变区的核苷酸序列。较佳地，在两个可变区之间并入挠性连接子。
IV.组合物
根据本发明，抗IgE抗体可与医药上可接受的载体一起配制成组合物，其系用于输送及吸收。
如本文所用，“医药上可接受”意指载体与组合物中的活性成分相容，且较佳为可稳定该活性成分，并对接受个体具有安全性。该载体可为活性成分的稀释剂、载具、赋形剂，或基质。通常，包含如本文所述的抗IgE抗体以作为活性成分的组合物可为溶液形式，例如水溶液(亦即，盐溶液)，或其可以粉末形式提供。组合物可进一步含有所需的医药上可接受辅助物质以近似于生理条件，例如，pH调节剂及缓冲剂，例如乙酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、乳酸钠等。组合物的形式可为悬浮剂、洗剂、溶液、无菌注射液，以及包装粉末。本发明的组合物可经由任何生理上可接受的途径输送，例如肠胃外(例如，肌内、静脉内、皮下，以及腹腔)及鼻内方法。在某些具体实施例中，本发明的组合物作为液体可注射制剂投予，其可作为即用剂型或作为可重构的稳定粉末提供。
V.治疗
本发明提供一种治疗IgE调节的疾病的方法，其系藉由投予如本文所述的多功能性抗IgE抗体。本发明的方法可有效提供快速及/或持续症状缓解，且投剂较不频繁，以增加患者的舒适性及便利性。
如本文所用，术语“症状缓解”可指减少或消除疾病或其他异常状态的一或多个感知症状的活性剂。疾病的症状严重程度可藉由本领域已知的任何适用指数或评分而确定。通常，指数水平愈高或评分愈高表示疾病严重程度愈高。在一些具体实施例中，相较于本领域普通技术人员及/或医疗专业人员(例如，医生)期望具有类似身体特征及病史的患病个体或群体的患病指数水平或患病评分，症状缓解可包括此类指数水平下降或评分减少，例如，5％、10％、15％、20％、25％、30％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或更多。在一些具体实施例中，症状缓解可指疾病或其他异常状态的一或多个感知症状被减轻至正常状态。
在一些具体实施例中，如本文所述的症状缓解可包括IgE减少、瘙痒缓解，及/或CSU荨麻疹次数减少。具体而言，已使用两种评分系统进行CSU的体征及症状的评分，包括：1)基于UAS7(荨麻疹活动评分)的每日评分，在7天内以0至3的等级评分每日风疹数量及瘙痒强度；以及2)HSS7(荨麻疹严重程度评分)，基于在7天内以0至3的等级评分荨麻疹的数量。UAS7评分分为5个评分段：(i)无荨麻疹，评分0，(ii)荨麻疹控制良好，评分1至6；(iii)轻度荨麻疹，评分7至15；(iv)中度荨麻疹，评分16至27；以及(v)重度荨麻疹，评分28至42。HSS7评分分为4个评分段：(i)无，评分0；(ii)轻度(1至6次荨麻疹/12小时)；(iii)中度(7至12次荨麻疹/12小时)；以及(iv)重度(>12次荨麻疹/12小时)。在某些实例中，如本文所述的症状缓解可指患者的状况从重度状态改善为中度、轻度或无症状状态。
如本文所用，术语“快速缓解”可指在投予活性剂后疾病的症状缓解发生在1周或更快时间内(例如，在7天、6天、5天、4天、3天、2天或1天内，亦即24小时内)。关于“持续缓解”，其意指在投予活性剂后疾病的症状缓解持续2周或更久时间(例如，2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、13周、14周)。具体而言，术语“快速及持续缓解”可指在投予活性剂后在1周或更快时间内(例如，在7天、6天、5天、4天、3天、2天或1天内，亦即24小时或更短)立即缓解，并持续保持恒定与稳定长达至少2周或更久(例如，2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、12周、13周、14周或更久)，特别是至少3周或更久(例如，3至14周或更久)、至少4周或更久(例如，4至14周或更久)、至少5周或更久(例如，5至14周或更久)、至少6周或更久(例如，6至14周或更久)、至少7周或更久(例如，7至14周或更久)、至少8周或更久(例如，8至14周或更久)、至少9周或更久(例如，9至14周或更久)、至少10周或更久(例如，10至14周或更久)、至少11周或更久(例如，11至14周或更久)、至少12周或更久(例如，12至14周或更久)、至少13周或更久(例如，13至14周或更久)，或至少14周或更久。在一些具体实施例中，缓解可持续至少8至24周(2至6个月)、至少12至24周(3至6个月)、至少16至24周(4至6个月)、至少20至24周(5至6个月)，或至少24周(6个月)。
如本文所用，关于投剂的术语“较不频繁”或“较不频繁地”可指治疗疾病的活性剂(例如，UB-221)系每2至14周或较不频繁投予，例如，每3周、每4周、每5周、每6周、每7周、每8周、每9周、每10周、每11周、每12周、每13周，或每14周或较不频繁投予。在一些具体实施例中，活性剂(例如，UB-221)系每3至14周或较不频繁、每4至14周或较不频繁、每5至14周或较不频繁、每6至14周或较不频繁、每7至14周或较不频繁、每8至14周或较不频繁、每9至14周或较不频繁、每10至14周或较不频繁、每11至14周或较不频繁、每12至14周或较不频繁、每13至14周或较不频繁，或每14周或较不频繁投予。在一些具体实施例中，活性剂(例如，UB-221)系每8至24周(每2至6个月)、每12至24周(每3至6个月)、每16至24周(每4至6个月)、每20至24周(每5至6个月)，或每24周(每6个月)投予。
在一些具体实施例中，如本文所述的多功能性抗IgE抗体作为治疗IgE调节的疾病的活性剂可提供持续症状缓解，其与个体接受其他治疗(例如，小分子药物、环状胜肽药物或其他生物制剂)时相比，可持续更长时间且投剂较不频繁。小分子药物(例如，抗组织胺与环状胜肽药物[例如，环孢素])通常以高的投剂频率投予，例如每日服用药丸或胶囊长达数周周。其他生物制剂的实施例，例如奥马佐单抗与利格珠单抗(抗IgE抗体)系每2或4周投予。此类抗IgE抗体被视为单功能性抗IgE抗体(或称为普通IgE中和剂)，其等能中和IgE，但无法提供实质上抑制从头产生IgE(例如，导致35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或更多的IgE水平下降)。具体而言，此类单功能性抗IgE抗体对CD23的反应有限或保持惰性，从而实质上不会抑制CD23调节的IgE产生的下调。
本发明的方法可有效治疗IgE调节的疾病，包括过敏性或非过敏性。如本文所述的IgE调节的疾病的实施例包括但不限于过敏性气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎、食物过敏、慢性自发性(特发性)荨麻疹、慢性鼻窦炎、全身性肥大细胞增生症、皮肤肥胖细胞增多症、过敏性支气管与肺的曲菌病、复发性特发性血管性水肿，或嗜酸性球相关胃肠道疾病。
本文所用的术语“有效量”意指在受治疗的个体或细胞中赋予所需生物效果的活性成分的量。举例而言，如本文所述，有效量可为作为活性剂的多功能性抗IgE抗体的量，其可提供实质抑制从头产生IgE，并导致IgE调节的疾病的快速及/或持续症状缓解。有效量可根据各种原因而改变，例如投予途径及频率、接受该医药的个体的体重及物种，以及投予目的。本领域技术人员可基于本文揭示内容、建立的方法，以及其等自身经验确定每一情况下的剂量。
在一些具体实施例中，如本文所述的多功能性抗IgE抗体系以个体每公斤体重0.1至10mg，较佳为0.3至10mg，更佳为0.5至10mg，又更佳为1至10mg，以及甚至更佳为2至10mg、3至10mg、4至10mg、5至10mg、6至10mg、7至10mg、8至10mg的范围，或10mg投予。
在一些具体实施例中，抗体以整个剂量包括在组合物中，并以单一剂量投予个体。
欲藉由本文所述治疗方法治疗的个体可为哺乳动物，更佳为人类。哺乳动物包括但不限于农场动物、运动动物、宠物、灵长类、马、狗、猫、小鼠及大鼠。需要治疗的人类个体可为患有、处于风险中或怀疑患有标靶疾病/病症的人类患者。怀疑患有任何此类标靶疾病/病症的个体可能表现出疾病/病症的一或多个症状。处于疾病/病症风险中的个体可为具有该疾病/病症的一或多个风险因子的个体。
本发明藉由下列实施例进一步说明，其等的提供目的出于说明而非限制。鉴于本揭示内容，本领域的技术人员应理解到，在不脱离本发明的精神及范畴的情况下，可对所揭示的特定具体实施例进行许多改变且仍获得相似或类似的结果。
实施例
实施例1：在表面电浆共振(SPR)分析中确定UB-221与奥马佐单抗的IgE结合亲和力
IgE结合至抗IgE单株抗体UB-221(UBP产品，来自亲代CHO-S殖株)与奥马佐单抗(Novartis，CA-075)的动力学分析系藉由表面电浆共振(SPR)技术进行，其使用Biacore X100仪器(GE Healthcare)。首先藉由胺基耦合将抗人类IgG Fc片段抗体(BR-1008-39，GE)固定在CM5金感应器晶片表面，其中捕获1μg/mL的稀释的抗IgE抗体。将在HBS-EP缓冲液中稀释的0.312-50nM Expi293表达的人类全长IgE样本注射120秒，并在恒定缓冲液流下测量解离720秒。使用1:1朗缪耳曲线拟合模型(Langmuir curve fitting model)计算解离速率常数(Kd)、结合速率常数(Ka)及平衡解离速率常数(KD)。结果指出，UB-221与IgE的结合亲和力(KD，1.15x 10-11M)比奥马佐单抗(KD，8.98x 10-11M)的高约8倍。动力学传感图及结合亲和力值如图1所示。
实施例2：在表面电浆共振(SPR)分析中确定UB-221与利格珠单抗与奥马佐单抗的IgE结合亲和力
IgE结合至抗IgE单株抗体UB-221(UBP产品，来自稳定CHO-S殖株)、利格珠单抗的替代抗体(SA)(Creative Biolabs，CB190513)及奥马佐单抗(Novartis，CA-075)的动力学分析系藉由表面电浆共振(SPR)技术进行，其使用Biacore X100仪器(GEHealthcare)。首先藉由胺基耦合将抗人类IgG Fc片段抗体(BR-1008-39，GE)固定至CM5金感应器晶片表面，其中捕获1μg/mL的稀释的抗IgE抗体。将在HBS-EP缓冲液中稀释的0.312-50nM Expi293表达的人类全长IgE样本注射120秒，并在恒定缓冲液流下测量解离720秒。使用1:1朗缪耳曲线拟合模型计算解离速率常数(Kd)、结合速率常数(Ka)，以及平衡解离速率常数(KD)。结果指出，利格珠单抗以最大亲和力结合至IgE(KD，1.61x 10-11M)，其比UB-221的高约4倍(KD，5.85x 10-11M)，且比奥马佐单抗的高约14倍。动力学传感图及结合亲和力值如图2所示。
实施例3：IgE:FcεRI交互作用的竞争性抑制及嗜碱性球去颗粒作用
3.1抑制IgE与表达FcεRI的RBL SX-38细胞的结合
将1x 105个RBL SX-38细胞与400ng/mL的重组人类IgE在冰上混合1小时。在以1％BSA/PBS洗涤3次后，将浓度范围为25,000至6ng/mL的UB-221及奥马佐单抗添加至细胞中并在冰上培养1小时。最后，细胞以1％ BSA/PBS洗涤3次，并以0.75μg/mL的PE键接的抗人类IgE(eBioscience，CN.12-6986，Lot.E11877-1636)在冰上培养30分钟。经染色的细胞于洗涤三次后在FACS Verse细胞仪上进行分析。如图3(上图)所示，在IgE与表达FcεRI的RBLSX-38结合的竞争抑制(平均值±SD，n＝3)中，UB-221抑制IgE结合优于奥马佐单抗3倍(IC50：0.035与0.106mg/mL)。
3.2RBL SX-38去颗粒试验
β-己醣胺酶为一种在刺激后释放的溶酶体酵素，其与组织胺的释放密切相关，从而可用于测量去颗粒作用。RBL SX-38细胞(表达人类FcεRI的大鼠嗜碱性球细胞)与1μg/mL的OVA特异性hIgE(AllerMAbs，CN:OVA8G9-02)及0.002至15μg/mL的抗IgE抗体(UB-221或奥马佐单抗)在37℃下共同培养2小时。随后，以培养基洗涤细胞两次，并以OVA/Triton X-100(含有10μg/ml OVA的1％ Triton X-100)诱导去颗粒反应30分钟。收取细胞上清液中的β-己醣胺酶，并藉由添加含有4-MUG(4-甲基伞形基-N-乙酰基-b-D-葡萄胺糖苷，Sigma-Aldrich，CN:M2133)的柠檬酸而反应1小时。藉由萤光读取仪测量产生的萤光(激发波长355nm；发射波长460nm)。去颗粒百分比表示为β-己醣胺酶释放百分比。如图3(下图)所示，在抑制由IgE特异性卵白蛋白(OVA)-IgE复合物诱导的RBL SX-38去颗粒时(平均值±SD，n＝6)，UB-221显示出优于奥马佐单抗7倍的抑制效果(IC50：0.14与0.94mg/mL)。
实施例4：以单一IV剂量的UB-221与奥马佐单抗治疗的hIGHE嵌入小鼠中血清人源化IgE减少
在人类IgE嵌入C57BL/6小鼠中，在其等基因体中Cg1与Ck恒定区系替换为人类Ce与Ck恒定区，其等的分泌IgE的B细胞可产生远高于小鼠IgE水平的人源化IgE。在接受单一i.p.剂量(0.3或3.0mg/kg)的UB-221或奥马佐单抗的hIGHE嵌入小鼠(n＝6)中，如图4所示，观察到UB-221在低的0.3mg/kg剂量下诱导血清游离IgE快速减少>90％，而奥马佐单抗需要10倍以上的剂量(3.0mg/kg)才能达到IgE水平减少。数据以平均值±SEM表示。*P<0.05表示具有统计学上意义。
实施例5：异位性皮肤炎患者血清中高水平IgE的离体中和反应
基于IgE与ELISA上固定的FcεRI结合的竞争性抑制，比较了UB-221、利格珠单抗及奥马佐单抗在30名异位性皮肤炎患者中降低血清中高IgE的效力。将收集的血清样本分为三个IgE范围：低(<4,800ng/mL，n＝9)、中(4,800-24,000ng/mL，n＝11)，以及高IgE(>24,000ng/mL，n＝10)。将血清样本与三个递增的抗IgE mAb浓度一起培养。利用Mann-WhitneyU检定(P<0.001，ns＝不显著)进行估计比较。结果指出，UB-221与利格珠单抗在中和血清IgE方面系等效，而奥马佐单抗效力较低，如图5A至5C所示，以低IgE组为例(图5A)，UB-221、利格珠单抗及奥马佐单抗达到50％ IgE减少的mAb药物浓度(EC50，平均值±SEM)据估计分别为450±100、419±100及1,647±317ng/mL。
实施例6：游离或IgE复合物形式的抗IgE mAb与CD23的交互作用
96孔ELISA盘以100μL的5mg/mL CD23涂覆，并以PBS-0.5％ BSA阻断。针对mAb与CD23结合的IgE的结合试验，添加100μL含有100ng/mL IgE的PBS-0.5％BSA，并在室温下培养1小时。在洗涤后，添加以浓度0.0001至100μg/mL连续稀释的UB-221、奥马佐单抗及利格珠单抗，并在室温下培养1小时。以山羊抗人类IgG Fc-HRP(Jackson Immuno Research,Inc.Cat.109-035-098)检测抗IgE mAb的结合。利用相同的ELISA研究以预先形成的IgE复合物形式的抗IgE mAb与CD23的结合，其中一个改进为，UB-221、奥马佐单抗及利格珠单抗以1.0至200ng/mL的浓度在室温下培养1小时以允许形成复合物，并将混合物添加至CD23固定的ELISA盘中，接着以山羊抗人类IgG Fc-HRP检测结合在CD23上的抗IgE mAb。
在预填载IgE的CD23固定的ELISA上，游离形式的UB-221表现出与CD23结合的IgE有强的浓度依赖性结合，如图6(上图)所示，估计为利格珠单抗的10倍以上，如38.4±3.6与402±47.3ng/mL的EC50值(平均值±SD)所示，而奥马佐单抗无活性。预先形成的UB-221:IgE复合物亦表现出与CD23的强结合，如图6(下图)所示，其中EC50为41.6±4.6ng/mL，几乎与CD23结合的IgE的结合相同，而利格珠单抗与IgE的复合物完全失去结合CD23的能力，且奥马佐单抗:IgE复合物对CD23保持惰性。
实施例7：UB-221、利格珠单抗及奥马佐单抗减少人类PBMC中的IgE新合成
在UB-221、奥马佐单抗或利格珠单抗存在下，以人类重组IL-4及抗人类CD40抗体刺激来自健康供体的人类PBMC而进行从头IgE合成。在一项以来自14名捐血者(n＝14)的PBMC的研究中，研究了UB-221对第7天与第11天IgE产生的影响，并与药物剂量为(a)1μg/mL，(b)3μg/mL，以及(c)10μg/mL的奥马佐单抗进行比较。在另一项以3至5名捐血者的研究中，聚焦在以药物剂量为(d)10μg/mL(n＝3)，(e)20μg/mL(n＝5)，以及(f)80μg/mL(n＝5)的UB-221、奥马佐单抗及利格珠单抗对第11天IgE产生的影响。利用ELISA对细胞培养基上清液样本中的总IgE进行定量。IgE减少的百分比系以来自个别未经处理细胞的IgE水平设为100％而计算。数据以平均值±SEM表示。使用双因子ANOVA搭配参考未治疗的对照的Tukey氏多重比较，将不同的治疗组与未治疗组进行比较。*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。
结果显示于图7A中，其指出UB-221在1、3及10μg/mL的所有剂量水平下显示总IgE总体减少87至94％，其优于奥马佐单抗，系因后者以7.9至53.5％的较低速率减少IgE。以剂量为10、20及80μg/mL的额外研究(图7B)确认了UB-221优于奥马佐单抗，较高69％至74％的减少对比较低4.9％至31％的减少。利格珠单抗总体上使IgE减少16％至31％，具有比奥马珠单抗更好的减少趋势，但没有统计学上意义。因此，UB-221在CD23调节的IgE产生下调中超越利格珠单抗及奥马佐单抗，其与游离形式的UB-221大量结合至占据CD23的IgE以及IgE:mAb复合物形式UB-221自由地结合CD23的结果(图6)一致，而利格珠单抗反应受限且奥马佐单抗对CD23保持惰性。
实施例8：UB-221可结合石蟹猕猴的IgE及CD23结合的IgE，并在单一IV剂量后诱导血清IgE快速、显著的减少。
UB-221可结合至石蟹猕猴cIgE(图8A)，并以剂量依赖性方式结合cCD23结合的cIgE(图8B)，证明了石蟹猕猴可作为适当的药理学及毒理学动物模型。在接受单一IV剂量的5.0mg/kg UB-221的石蟹猕猴(n＝3)中，血清中的抗体减少，其中平均消除半衰期为6.3天(图8C)，其中UB-221可诱导血清游离cIgE从其等的基础水平约400ng/mL快速、显著的减少90％至100％(图8D)。针对1号、2号及3号猕猴，基础IgE水平分别为434、399及411ng/mL。
实施例9：首次人体1期临床试验的设计证实UB-221安全且耐受性良好，并在以单一IV剂量治疗的慢性自发性荨麻疹患者中能诱导持久(3至6个月)的疾病改进效果(UAS7评分及HSS7评分)
进行1期、单剂量、剂量递增的UB-221的藉由IV输注的附加疗法，以评估慢性自发性荨麻疹(CSU)个体在第一线H1抗组织胺治疗下的安全性、耐受性、药物动力学(PK)，以及药效动力学(PD)。从中国台湾的两个研究地点招募了总共15名符合条件的个体，并分配至5个群中的每一者，以接受单一IV输注剂量的UB-221，分别为0.2(群1)、0.6(群2)、2.0(群3)、6.0(群4)及10mg/kg(群5)(图9)。所有15名入选的个体皆为亚裔成人，包括8名男性及7名女性，年在21至72岁之间，且体重在49.0至87.6公斤之间。使用两种评分系统进行CSU的体征及症状的评分：1)基于UAS7(荨麻疹活动评分)的每日评分，在7天内以0至3的等级评分每日风疹数量及瘙痒强度；以及2)HSS7(荨麻疹严重程度评分)，基于在7天内以0至3的等级评分荨麻疹的数量。在15名个体中，在基线时有9名个体具有重度CSU(UAS7评分28至42)、有4名个体具有中度CSU(UAS7评分16至27)且2名个体具有轻度CSU(UAS7评分7至15)。
UB-221安全且耐受性良好。所有15名个体皆完成研究。其等未有停止治疗、退出或失联。由于未观察到剂量限制性毒性，因此将10mg/kg时的群5的剂量水平判定为最大耐受剂量。39起治疗紧急不良事件(treatment emergent adverse event，TEAE)中的大多数皆为轻度或中度，并与UB-221无关。在2.0mg/kg及更高的剂量下观察到疾病症状的持久性抑制持续2个月或更久的时间。
实施例10：在单一IV输注UB-221后荨麻疹患者中血清浓度曲线及药物动力学轮廓
藉由ELISA测定单一IV输注剂量后UB-221的血清中浓度，其系使用中和抗UB-221特应单株抗体(其可特异性地结合至UB-221)以作为涂覆在盘上的捕获抗体。小鼠抗人类IgG Fc-HRP作为检测抗体。结果证实UB-221暴露期间的剂量依赖性方式。在0.6至10mg/kg的剂量下，UB-221的半衰期据估计在16至22天的范围内(图10)。
实施例11：以UB-221治疗的荨麻疹患者的功效评分UAS
11.1 7天内的荨麻疹活动评分(UAS7)
UB-221的另一功效标记为藉由缓解疾病症状(如UAS7相对于基线的变化)而评估。在14周内5个剂量群的每一者中疾病评分UAS7的个体每周变化如图11A所示。从每一剂量群的3名个别个体(n＝3)中计算出平均(平均值±SD)(图11B)。UAS7评分愈高，表示疾病严重程度愈高。结果显示，在基线时具有重度至中度CSU(UAS7评分≧16)的所有13名个体中，在接受单一剂量的UB-221IV输注后的第一周内发生UAS7快速减少。CSU较轻的个体，例如在基线时UAS7评分为14的群5的个体，在接受单一剂量的10mg/kg UB-221后延迟反应直至第8周为止。症状缓解至控制良好/无病阶段(UAS7≤6)似乎具有剂量依赖性，且在15名个体中有10名达成(图11A)。特别是，群3的所有3名个体(2mg/kg)、群4的所有3名个体(6mg/kg)皆经历持续无病阶段，亦即，在2至14周的追踪期间完全反应(UAS7＝0)。单一剂量的UB-221保留了达到平均评分UAS7≤6(疾病得到良好控制)的潜力(图11B)，显示单一剂量的>2mg/kg可有效抑制疾病3至6个月。
11.2UAS疾病评分的每日变化
每日收集来自每群3名个体的UAS评分并取平均。将输注后的每日平均值与基线值进行比较，基线值为在UB-221输注前7天内来自相同个体的平均每日UAS评分。表2及图11C显示结果。
该轮廓显示，UAS疾病评分在第1天及的后迅速下降，显示CSU患者在投予UB-221的24小时内经历快速症状缓解。
实施例12：以UB-221治疗的荨麻疹患者的功效评分HSS7
UB-221的一功效标记系藉由缓解疾病症状(如7天内荨麻疹严重程度评分(HSS7)相对于基线的变化)而评估。在14周内5个剂量群的每一者中疾病评分HSS7的个体每周变化如图12A所示。从每一剂量群的3名个别个体(n＝3)中计算出平均(平均值±SD)(图12B)。HSS7评分愈高，表示疾病严重程度愈高。结果显示，在所有个体中，HSS7评分类似于UAS7评分(图11A至图11C)。在接受UB-221的单一IV输注后的第一周内发生HSS7快速减少。症状缓解至控制良好/无病阶段(HSS7≤6)似乎具有剂量依赖性，且在15名个体中有12名达成(图12A)。特别是，群1的2名个体(0.2mg/kg)、群2的2名个体(0.6mg/kg)、群3的所有3名个体(2mg/kg)、群4的所有3名个体(6mg/kg)，以及群5的2名个体(10mg/kg)皆经历持续无病阶段，亦即，在2至14周的追踪期间完全反应(HSS7＝0)。如同对HSS7评分的影响，单一剂量的UB-221保留了达到平均评分HSS7≤6(疾病得到良好控制)的潜力(图12B)，显示单一剂量的>2mg/kg可有效抑制疾病3至6个月。
实施例13：以UB-221治疗的荨麻疹患者中游离IgE的血清中浓度
投予荨麻疹患者单一IV剂量的UB-221可诱导快速、显著的血清游离IgE减少(图13)。血清游离IgE由ELISA测定，其使用重组FcεRIα-IgG.Fc融合蛋白作为捕获蛋白以及生物素键结的小鼠抗人类IgE单株抗体，随后添加链霉亲和素-聚HRP以增强信号。游离IgE的定量下限(lower limit of quantification，LLOQ)为24ng/mL。在UB-221输注前，基线处的游离IgE浓度范围在群1(0.2mg/kg)中为3999至272ng/mL、在群2(0.6mg/kg)中为1015至<24ng/mL、在群3(2mg/kg)中为129至697ng/mL、在群4(6mg/kg)中为48.9至233ng/mL，以及在群5(10mg/kg)中为593至<24ng/mL。针对所有15名个体，血清IgE在UB-221输注后4小时内被UB-221完全中和(游离IgE水平<LLOQ)。完全IgE中和在群1(0.2mg/kg)中持续2至22天、在群2(0.6mg/kg)中持续15至99天、在群3(2mg/kg)中持续29至85天、在群4(6mg/kg)中持续>99天，以及在群5(10mg/kg)中持续85至>99天。彼等数据显示，UB-221的功效系有效且持久。
实施例14：荨麻疹患者在单一IV剂量的UB-221后血清UB-211浓度、血清游离IgE水平及UAS7疾病评分的同时变化
并列显示在14周的单一剂量试验期内参与5个剂量群的每一者的个体的UB-221的平均血清浓度、血清游离IgE水平及UAS7疾病评分。从每一群的3名个别个体(n＝3)中计算出平均(平均值)及SD。彼等三个参数之间存在良好的相关性，亦即在较高的UB-221血清浓度下，血清游离IgE水平被完全抑制，且UAS7疾病评分的下降维持较长时间(图14)。剂量依赖性相关性显示，>2.0mg/kg的单一IV剂量可能允许每3至6个月投予UB-221，且在慢性自发性荨麻疹(CSU)(一种血清IgE水平扮演关键角色的疾病)的治疗中达到完全反应(UAS7＝0)或良好控制阶段(UAS7≤6)。
结论
本发明系有关发现UB-221单株抗体，一种在CHO-S细胞株中表达的人源化抗IgEIgG1，其可能每3至6个月投予，以有效治疗与IgE相关联的慢性自发性荨麻疹。此在单一剂量1期UB-221试验(实施例9)的实施中得到证实，其支持性结果如上述(实施例9至14)。此种每3个月(12周)或6个月(24周)较不频繁剂量方案与其他两种抗IgE mAb形成鲜明对比，亦即唯一批准的奥马佐单抗及3期试验利格珠单抗无法进一步开发，其等在CSU的管理中每4周投予。24
相较于奥马佐单抗及利格珠单抗，较不频繁剂量方案的效用系由于UB-221的独特结合及功能性轮廓。UB-221以强的亲和力结合IgE(实施例1及2)，其在IgE中和(实施例3)及在经处理的hIGHE嵌入小鼠血清中游离IgE减少(实施例4)方面优于奥马佐单抗。UB-221及利格珠单抗在中和异位性皮肤炎患者的高血清IgE方面系等效，而奥马佐单抗系低效(实施例5)。在石蟹猕猴中，单一剂量的UB-221可快速、显著降低血清IgE水平(实施例8)。彼等观察指出，UB-221为有效的IgE中和剂。
UB-221mAb为一类较新颖的人源化抗IgE IgG1，其在与CD23的交互作用方式不同于奥马佐单抗及利格珠单抗。游离形式的UB-221结合至CD23结合的IgE，且IgE:mAb复合物形式以不受限的方式结合CD23，而利格珠单抗及奥马佐单抗两者在与CD23的任何间接交互作用方式皆受限(实施例6)，其与UB-221下调人类PBMC中CD23调节的IgE新合成的最大水平(实施例7)的发现相关。彼等观察指出，UB-221除了是有效的IgE中和剂以外，亦为多功能性抗IgE抗体，其亦充当重要的IgE合成抑制剂，导致成为有效的IgE捕获剂：1)以清除循环中的可溶性游离IgE及IgE:CD23复合物，2)以形成UB-221:IgE复合物，其结合CD23以进行CD23依赖性转胞吞作用及清除23)，以透过UB-221:IgE复合物运输穿过胃肠腔及支气管肺泡的上皮细胞而移除IgE:过敏原复合物及IgE:自体抗体复合物。CD23在多种类型的细胞中表达10。相比之下，奥马佐单抗及利格珠单抗主要用作普通IgE中和剂。
UB-221作为有效的IgE中和剂及重要的IgE合成抑制剂而发挥双重角色的独特特征与UB-221的有效IgE下调及其在治疗荨麻疹中的持久疾病改善效果相关。因此，较不频繁剂量方案的效用，亦即，每3个月(12周)或6个月(24周)，可应用于IgE调节或IgE相关联的各种过敏性与非过敏性疾病。
参考文献
1.Awankar R.Allergic diseases and asthma:a global public healthconcern and a callto action.World Allergy Organ J.2014；7:12.doi:10.1186/1939-4551-7-12
2.Dierick BJH,van der Molen T,Flokstra-de Blok BMJ,Muraro A,PostmaMJ,JWH Kocks,van Boven JFM.Burden and socioeconomics of asthma,allergicrhinitis,atopic dermatitis and food allergy.Expert RevPharmacoeconomicsOutcomes Res.2020；20:437-453.
3.Bantz SK,Zhu Z,Zheng T.The atopic march:progression from atopicdermatitis toallergic rhinitis and asthma.J Clin Cell Immunol.2014；5:202.doi:10.4172/2155-9899.1000202
4.Hill DA,Spergel JM.The atopic march-Critical evidence and clinicalrelevance.Ann Allergy Asthma Immunol.2018；120:131-137.
5.Paller Amy SAS.The atopic march and atopic multimorbidity:manytrajectories,many pathways.J Allergy Clin Immunol.2019；143:46–55.
6.Kinet J-P.The high-affinity IgEreceptor(FcεRI):from physiology topathology.Annu Rev Immunol 1999；17:931–972.
7.Conrad DH.FcεRII/CD23:the low affinity receptor for IgE.Annu RevImmunol1990；8:623–645.
8.Gould HJ,Sutton BJ.IgE in allergy and asthma today.Nat Rev Immunol2008；8(3):205-217.
9.Sutton BJ,Davies AM.Structure and dynamics of IgE-receptorinteraction:FcεRIand CD23/FceRII.Immnol.Rev.2015；268:222-235.
10.Acharya,M.et al.CD23/FcεRII:molecular multi-tasking.Clin.Exp.Immunol.2010；162:12–23.
11.Conrad,D.H.,Ford,J.W.,Sturgill,J.L.&Gibb,D.R.CD23:anoverlookedregulator of allergic disease.Curr.Allergy Asthma Rep.2007；7:331–337.
12.Kelly AE,Chen B-H,Woodward EC,Conrad DH.Production of a chimericform ofCD23 that is oligomeric and blocks IgE binding to the FcεRI.JImmunol1998；161:6696–6704.
13.Schwartz C,Turqueti-Neves A,Hartmann S,Yu P,Nimmerjahn F,Voehringer D.Basophil-mediated protection against gastrointestinal helminthsrequiresIgE-induced cytokine secretion.Proc Natl Acad Sci USA 2014；111:E5169-5177.
14.Ferastraoaru D,Jordakieva G,Jensen-Jarolim E.The other side of thecoin:IgEdeficiency,a susceptibility factor for malignancy occurrence.WorldAllergyOrganization J.2021；14:100505.http://doi.org/10.1016/j.waojou.2020.100505
15.Xolair FDA Approval History.Drug.com https://www.drugs.com/history/xolair.html
16.Guntern P,Eggel A.Past,present,and future of anti-IgEbiologics.Allergy2020；75:2491-2502.
17.Balbino B,Conde E,Marichal T,Starkl P,Reber LL.Approaches totarget IgEantibodies in allergic diseases.Pharmacol.Ther.2018；191:50-64.
18.Pharmacokinetics,pharmacodynamics and safety of QGE031(ligelizumab),anovel high-affinity anti-IgE antibody,in atopic subjects.ClinExp Allergy2014；44:1371-1385.
19.Maurer M,Giménez-Arnau AM,Sussman G,Metz M,Baker DR,etal.Ligelizumab for chronic spontaneous urticaria.New Engl J Med.2019；381:1321-1332.
20.Gasser P,Tarchevkaya SS,Guntern P,Brigger D,Ruppli R,et al.Themechanisticand functional profile of the therapeutic anti-IgE antibodyligelizumab differs fromomalizumab.Nat Communication 2020；11:165 DOI:10.1038/s41467-019-13815-w
21.Chen J-B,Ramadani F,Pang MOY,Rebecca L.Beavil RL,et al.Structuralbasis forselective inhibition of immunoglobulin E-receptor interactions by ananti-IgEantibody.Sci Rep.2018；8:11548.DOI:10.1038/s41598-018-29664-4.
22.Shiung Y-Y,Chiang C-Y,Chen J-B,Wu PC,Hung AF-H,et al.An anti-IgEmonoclonal antibody that binds to IgE on CD23 but not on high-affinityIgE.Fcreceptors.Immunobiol.2012；217:676–683.
23.Tu Y,Salim S,Bourgeois J,et al.CD23-Mediated IgE Transport AcrossHumanIntestinal Epithelium:Inhibition by Blocking Sites of Translation orBinding”,Gasgtroenterol.2005；129:928-940.
24.Maurer M,Eggel A,Bernstein JA,Gimenez AM,Soong W.Breakthrough intheunderstanding of the anti-IgE pathway in chronic spontaneous urticaria andthepotential of ligelizumab.EMJ Allerg Immuno,2020；5:20-27.

Claims (49)

1.一种治疗IgE调节的疾病的方法，其包含投予有需求的个体抗IgE抗体，其中该抗体为针对IgE的多功能性抗体，其中和IgE并抑制IgE合成。
2.如权利要求1的方法，其中该抗体以有效提供IgE调节的疾病快速及/或持续症状缓解的量投予。
3.如权利要求1或2的方法，其中该抗体结合至游离IgE、B淋巴球上的膜结合IgE，及/或CD23结合的IgE，但不结合至肥大细胞上FcεRI结合的IgE。
4.如权利要求1至3中任一项的方法，其中该抗体以游离形式与CD23结合的IgE结合，并以IgE复合物形式与CD23结合。
5.如权利要求1至4中任一项的方法，其中该抗体为其抗原结合片段。
6.如权利要求1至5中任一项的方法，其中该抗体经人源化。
7.如权利要求1至6中任一项的方法，其中该抗体或抗原结合片段包含
(a)重链可变区(VH)，其包括包含SEQ ID NO:2的胺基酸序列的重链互补决定区1(HCCDR1)、包含SEQ ID NO:4的胺基酸序列的重链互补决定区2(HC CDR2)，以及包含SEQ IDNO:6的胺基酸序列的重链互补决定区3(HC CDR3)；以及
(b)轻链可变区(VL)，其包括包含SEQ ID NO:9的胺基酸序列的一轻链互补决定区1(LCCDR1)、包含SEQ ID NO:11的胺基酸序列的一轻链互补决定区(LC CDR2)，以及包含SEQ IDNO:13的胺基酸序列的轻链互补决定区3(LC CDR3)。
8.如权利要求7的方法，其中
该VH包含SEQ ID NO:15的胺基酸序列；及/或
该VL包含SEQ ID NO:16的胺基酸序列。
9.如权利要求2至8中任一项的方法，其中该症状缓解包括IgE减少、缓解瘙痒，及/或荨麻疹次数减少。
10.如权利要求2至9中任一项的方法，其中该症状缓解在投予后持续2至14周或更久。
11.如权利要求2至10中任一项的方法，其中该症状缓解在投予后1周或更快时间内发生。
12.如权利要求1至11中任一项的方法，其中该抗体系每2至14周或较不频繁投予。
13.如权利要求1至12中任一项的方法，其中该抗体系每4周或较不频繁投予。
14.如权利要求1至13中任一项的方法，其中该抗体系每12至24周投予。
15.如权利要求1至14中任一项的方法，其中该抗体的投予剂量为每1公斤个体体重0.1至10毫克。
16.如权利要求1至15中任一项的方法，其中该抗体以整个剂量包括在组合物中，并以单一剂量投予该个体。
17.如权利要求1至16中任一项的方法，其中该抗体藉由静脉或皮下注射投予。
18.如权利要求1至17中任一项的方法，其中该IgE调节的疾病为过敏性气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎、食物过敏、慢性自发性(特发性)荨麻疹、慢性鼻窦炎、全身性肥大细胞增生症、皮肤肥胖细胞增多症、过敏性支气管与肺的曲菌病、复发性特发性血管性水肿，或嗜酸性球相关胃肠道疾病。
19.一种用于治疗有需求的个体中IgE调节的疾病的抗IgE抗体，其中该抗体为针对IgE的多功能性抗体，其中和游离IgE并抑制IgE合成。
20.如权利要求19使用的抗IgE抗体，其在该个体中提供快速及/或持续症状缓解。
21.如权利要求19或20使用的抗IgE抗体，其中该抗体结合至游离IgE、B淋巴球上的膜结合IgE或CD23结合的IgE，但不结合至肥大细胞上FcεRI结合的IgE。
22.如权利要求19至21中任一项使用的抗IgE抗体，其中该抗体以游离形式与CD23结合的IgE结合，并以IgE复合物形式与CD23结合。
23.如权利要求19至22中任一项使用的抗IgE抗体，其中该抗体为其抗原结合片段。
24.如权利要求19至23中任一项使用的抗IgE抗体，其中该抗体经人源化。
25.如权利要求19至24中任一项使用的抗IgE抗体，其中该抗体或抗原结合片段包含
(a)重链可变区(VH)，其包括包含SEQ ID NO:2的胺基酸序列的一重链互补决定区1(HCCDR1)、包含SEQ ID NO:4的胺基酸序列的重链互补决定区2(HC CDR2)，以及包含SEQ IDNO:6的胺基酸序列的一重链互补决定区3(HC CDR3)；以及
(b)轻链可变区(VL)，其包括包含SEQ ID NO:9的胺基酸序列的轻链互补决定区1(LCCDR1)、包含SEQ ID NO:11的胺基酸序列的轻链互补决定区(LC CDR2)，以及包含SEQ IDNO:13的胺基酸序列的轻链互补决定区3(LC CDR3)。
26.如权利要求25使用的抗IgE抗体，其中
该VH包含SEQ ID NO:15的胺基酸序列；及/或
该VL包含SEQ ID NO:16的胺基酸序列。
27.如权利要求20至26中任一项使用的抗IgE抗体，其中该症状缓解包括IgE减少、缓解瘙痒，及/或荨麻疹次数减少。
28.如权利要求20至27中任一项使用的抗IgE抗体，其中该症状缓解在投予后持续2至14周或更久。
29.如权利要求20至28中任一项使用的抗IgE抗体，其中该症状缓解在投予后1周或更快时间内发生。
30.如权利要求19至29中任一项使用的抗IgE抗体，其中该抗体每2至14周或较不频繁投予。
31.如权利要求19至30中任一项使用的抗IgE抗体，其中该抗体每4周或较不频繁投予。
32.如权利要求19至31中任一项使用的抗IgE抗体，其中该抗体系每12至24周投予。
33.如权利要求19至32中任一项使用的抗IgE抗体，其中该抗体的投予剂量为每1公斤个体体重0.1至10毫克。
34.如权利要求19至33中任一项使用的抗IgE抗体，其中该抗体以整个剂量包括在组合物中，并以单一剂量投予该个体。
35.如权利要求19至34中任一项使用的抗IgE抗体，其中该抗体藉由静脉或皮下注射投予。
36.如权利要求19至35中任一项使用的抗IgE抗体，其中该IgE调节的疾病为过敏性气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎、食物过敏、慢性自发性(特发性)荨麻疹、慢性鼻窦炎、全身性肥大细胞增生症、皮肤肥胖细胞增多症、过敏性支气管与肺的曲菌病、复发性特发性血管性水肿，或嗜酸性球相关胃肠道疾病。
37.一种抗IgE抗体在制造用于治疗IgE调节的疾病的药剂的用途，其中该抗体为针对IgE的多功能性抗体，其中和反应游离IgE并抑制IgE合成。
38.如权利要求37的用途，其提供该个体快速及/或持续症状缓解。
39.如权利要求37或38的用途，其中
该抗体结合至游离IgE、B淋巴球上的膜结合IgE，及/或CD23结合的IgE，但不结合至肥大细胞上FcεRI结合的IgE；
该抗体以游离形式与CD23结合的IgE结合，并以IgE复合物形式与CD23结合；
该抗体为其抗原结合片段；
该抗体经人源化；及/或
该抗体或抗原结合片段包含
(a)重链可变区(VH)，其包括包含SEQ ID NO:2的胺基酸序列的重链互补决定区1(HCCDR1)、包含SEQ ID NO:4的胺基酸序列的重链互补决定区2(HC CDR2)，以及包含SEQ IDNO:6的胺基酸序列的重链互补决定区3(HC CDR3)；以及
(b)轻链可变区(VL)，其包括包含SEQ ID NO:9的胺基酸序列的轻链互补决定区1(LCCDR1)、包含SEQ ID NO:11的胺基酸序列的轻链互补决定区(LC CDR2)，以及包含SEQ IDNO:13的胺基酸序列的轻链互补决定区3(LC CDR3)；
较佳为该VH包含SEQ ID NO:15的胺基酸序列；及/或
较佳为该VL包含SEQ ID NO:16的胺基酸序列。
40.如权利要求38或39的用途，其中
该症状缓解包括IgE减少、缓解瘙痒，及/或荨麻疹次数减少；
该症状缓解在投予后持续2至14周或更久；及/或
该症状缓解在投予后1周或更快时间内发生。
41.如权利要求37至40中任一项的用途，其中
该抗体每2至14周或较不频繁投予；
该抗体每4周或较不频繁投予；
该抗体每12至24周投予；
该抗体的投予剂量为每1公斤个体体重0.1至10毫克；
该抗体以整个剂量包括在组合物中，并以单一剂量投予该个体；及/或
该抗体藉由静脉或皮下注射投予。
42.如权利要求37至41中任一项的用途，其中
该IgE调节的疾病为过敏性气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎、食物过敏、慢性自发性(特发性)荨麻疹、慢性鼻窦炎、全身性肥大细胞增生症、皮肤肥胖细胞增多症、过敏性支气管与肺的曲菌病、复发性特发性血管性水肿，或嗜酸性球相关胃肠道疾病。
43.一种用于治疗IgE调节的疾病的医药组合物，其包含抗IgE抗体及医药上可接受赋形剂，其中该抗体为针对IgE的多功能性抗体，其中和反应游离IgE并抑制IgE合成。
44.如权利要求43的医药组合物，其在有需求的个体中有效提供快速及/或持续症状缓解。
45.如权利要求43或44的医药组合物，其中
该抗体结合至游离IgE、B淋巴球上的膜结合IgE，及/或CD23结合的IgE，但不结合至肥大细胞上FcεRI结合的IgE；
该抗体以游离形式与CD23结合的IgE结合，并以IgE复合物形式与CD23结合；
该抗体为其抗原结合片段；
该抗体经人源化；及/或
该抗体或抗原结合片段包含
(a)重链可变区(VH)，其包括包含SEQ ID NO:2的胺基酸序列的重链互补决定区1(HCCDR1)、包含SEQ ID NO:4的胺基酸序列的重链互补决定区2(HC CDR2)，以及包含SEQ IDNO:6的胺基酸序列的重链互补决定区3(HC CDR3)；以及
(b)轻链可变区(VL)，其包括包含SEQ ID NO:9的胺基酸序列的轻链互补决定区1(LCCDR1)、包含SEQ ID NO:11的胺基酸序列的轻链互补决定区(LC CDR2)，以及包含SEQ IDNO:13的胺基酸序列的轻链互补决定区3(LC CDR3)；
较佳为该VH包含SEQ ID NO:15的胺基酸序列；及/或
较佳为该VL包含SEQ ID NO:16的胺基酸序列。
46.如权利要求44或45的医药组合物，其中
该症状缓解包括IgE减少、缓解瘙痒，及/或荨麻疹次数减少；
该症状缓解系在投予后持续2至14周或更久；及/或
该症状缓解系在投予后1周或更快时间内发生。
47.如权利要求43至46中任一项的医药组合物，其中
该抗体系每2至14周或较不频繁投予；
该抗体系每4周或较不频繁投予；
该抗体系每12至24周投予；
该抗体的投予剂量为每1公斤个体体重0.1至10毫克；
该抗体以整个剂量包括在组合物中，并以单一剂量投予该个体；及/或
该抗体系藉由静脉或皮下注射投予。
48.如权利要求43至47中任一项的医药组合物，其中
该IgE调节的疾病为过敏性气喘、过敏性鼻炎、异位性皮肤炎、食物过敏、慢性自发性(特发性)荨麻疹、慢性鼻窦炎、全身性肥大细胞增生症、皮肤肥胖细胞增多症、过敏性支气管与肺的曲菌病、复发性特发性血管性水肿，或嗜酸性球相关胃肠道疾病。
49.一种抗IgE抗体在制造用于治疗IgE调节的疾病的药剂及提供有需求的个体快速及/或持续症状缓解的用途，
其中该抗体包含
(a)重链可变区(VH)，其包括包含SEQ ID NO:2的胺基酸序列的重链互补决定区1(HCCDR1)、包含SEQ ID NO:4的胺基酸序列的重链互补决定区2(HC CDR2)，以及包含SEQ IDNO:6的胺基酸序列的重链互补决定区3(HC CDR3)；以及
(b)轻链可变区(VL)，其包括包含SEQ ID NO:9的胺基酸序列的轻链互补决定区1(LCCDR1)、包含SEQ ID NO:11的胺基酸序列的轻链互补决定区(LC CDR2)，以及包含SEQ IDNO:13的胺基酸序列的轻链互补决定区3(LC CDR3)；以及
其中该抗体系每4周或较不频繁地以单一剂量投予。
CN202280068465.3A 2021-10-12 2022-10-12 Ige调节的疾病的治疗 Pending CN118119641A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202163254729P 2021-10-12 2021-10-12
US63/254,729 2021-10-12
PCT/CN2022/124777 WO2023061390A1 (en) 2021-10-12 2022-10-12 Treatment of ige-mediated diseases

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN118119641A true CN118119641A (zh) 2024-05-31

Family

ID=85981469

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202280068465.3A Pending CN118119641A (zh) 2021-10-12 2022-10-12 Ige调节的疾病的治疗

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20230122862A1 (zh)
KR (1) KR20240082392A (zh)
CN (1) CN118119641A (zh)
TW (1) TW202332691A (zh)
WO (1) WO2023061390A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2024050455A2 (en) * 2022-08-31 2024-03-07 Heitmeyer Jamie Nicole Anti-rhd antibodies for treating inflammatory dermal condition

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2012204078A1 (en) * 2007-02-15 2012-08-02 Astrazeneca Ab Binding members for IgE molecules
WO2015195631A1 (en) * 2014-06-17 2015-12-23 Academia Sinica HUMANIZED ANTI-IgE ANTIBODIES THAT CROSSLINK CD23 ON B LYMPHOCYTES BUT DO NOT SENSITIZE MAST CELLS
JP6068582B2 (ja) * 2015-08-07 2017-01-25 アカデミア シニカＡｃａｄｅｍｉａ Ｓｉｎｉｃａ Ｂリンパ球上のヒトｍＩｇＥに結合可能な抗ＣεｍＸ抗体
GB201610198D0 (en) * 2016-06-10 2016-07-27 Ucb Biopharma Sprl Anti-ige antibodies
BR112020008488A2 (pt) * 2017-10-31 2020-10-20 Oneness Biotech Co. Ltd. tratamento de doenças alérgicas mediadas por ige

Also Published As

Publication number Publication date
KR20240082392A (ko) 2024-06-10
US20230122862A1 (en) 2023-04-20
WO2023061390A1 (en) 2023-04-20
TW202332691A (zh) 2023-08-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5969102B2 (ja) 治療用イヌ免疫グロブリンおよびそれを用いる方法
JP5990701B2 (ja) 治療用イヌ免疫グロブリンおよびそれを用いる方法
JP2022174089A (ja) 炎症性状態の処置方法
US20220169719A1 (en) Il-6 antibodies
JP7499228B2 (ja) 神経成長因子に対するモノクローナル抗体、並びにそれをコードする遺伝子及びその使用
EP3489258A1 (en) Il-6 antagonists and uses thereof
US11634484B2 (en) Use of anti-family with sequence similarity 19, member A5 antibodies for the treatment of neuropathic pain
CN102197052A (zh) 抗人il-4受体的高亲和性人抗体
KR20120075457A (ko) 톨-유사 수용체 2에 대한 인간화 항체 및 이의 용도
JP2020536495A (ja) 抗ｌａｇ−３抗体及びその使用
AU2018341959B2 (en) Anti-PACAP antibody
AU2020350715A1 (en) GIPR antibody and fusion protein between same and GLP-1, and pharmaceutical composition and application thereof
KR20230048439A (ko) 항-par-2 항체 및 이의 사용 방법
CN108178798B (zh) pH工程化的NGF抗体及其医药用途
CN118119641A (zh) Ige调节的疾病的治疗
WO2019001559A1 (zh) 抗gitr抗体、其抗原结合片段及其医药用途
EP1972640A1 (en) Apoptosis inducing antibodies
WO2013103783A1 (en) Murine il-13 antibodies
TW202336035A (zh) 治療自體免疫疾病及癌症之方法及組成物
KR20230078657A (ko) 자가면역 질환 및 암을 치료하기 위한 방법 및 조성물
US20220288226A1 (en) Methods and compositions to treat autoimmune diseases and cancer
RU2809500C2 (ru) СВЯЗЫВАЮЩИЙ RGMa БЕЛОК И ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕ
NZ617450B2 (en) Therapeutic canine immunoglobulins and methods of using the same

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination