CN118076243A - 包含印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物（ib复合物）作为活性成分的用于抗老化和皮肤改善的组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及用于抗氧化、皱纹减少、弹性改善和皮肤保湿的健康功能性食品、食品和化妆品组合物，其包含印度醋栗(Phyllanthus emblica)提取物和大麦(Hordeum vulgare)芽提取物的复合物作为活性成分。由本发明提供的所述复合物表现出非常优异的DPPH清除活性、弹性蛋白酶抑制活性、MMP‑1抑制活性和透明质酸增加效果，并因此可以用于针对皮肤抗老化的抗氧化、皱纹减少、弹性改善和皮肤保湿用的健康功能性食品、食品和化妆品组合物。

Description

包含印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物(IB复合物)作 为活性成分的用于抗老化和皮肤改善的组合物
技术领域
本申请要求基于于2021年10月6日提交的韩国专利申请第10-2021-0132678号的优先权，并且相应申请的说明书和附图中公开的全部内容并入本申请中。
本发明涉及包含天然提取物作为活性成分的用于抗老化和皮肤改善的组合物。
背景技术
从活体外部流入或在活体中产生的活性氧加速活体的老化或导致癌症。因此，对抑制由活性氧引起的氧化的抗氧化物质的研究正在进行中，并且已知诸如酚类化合物、类黄酮、生育酚、维生素C、硒等的抗氧化物质。然而，无法期望自然界中存在的抗氧化物质在被应用于皮肤时具有实际上足够的效果。另一方面，一些具有高抗氧化能力的廉价的合成抗氧化剂存在的问题在于由于安全问题例如人体副作用等而使其使用受到限制。
皮肤是起物理屏障的作用以保护身体免受各种环境因素的第一器官，并且各种环境刺激导致免疫系统的激活。皮肤老化可以分为由于随着衰老生理功能降低和皮肤的结构变化而发生的内致性老化，以及由因外部刺激例如紫外线引起的化学应力导致的外致性老化。内致性老化由皮肤中存在的细胞的代谢过程期间产生的活性氧物种(reactive oxygenspecies，ROS)等引起，而外致性老化由外部因素例如UV和污染引起，并且光老化是造成外致性老化的主要原因。由内致性和外致性老化引起的皮肤变化中存在的常见现象是由于作为真皮的主要组成蛋白质的胶原蛋白和弹性蛋白的减少和改性以及作为真皮的基质的透明质酸的减少而导致的皮肤弹性丧失。真皮由纤维组分和基质组分构成，并且作为纤维组分，胶原蛋白起到赋予皮肤强度和张力以及保护皮肤的作用，并且占真皮层的90％。弹性蛋白占真皮层的约3％至4％并且影响皮肤的弹性。特别地，根据迄今为止的研究结果，已知作为真皮中主要蛋白质的胶原蛋白和弹性蛋白的减少和改性直接涉及皱纹的产生和皮肤弹性的降低。此外，人体中胶原蛋白的合成和降解过程受到适当调节，并且随着老化进行，作为皮肤中基质蛋白水解酶的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)的活性增加，这通过皮肤的胶原蛋白含量的减少导致弹性的降低和皱纹产生。
透明质酸为保持皮肤的水分和弹性的组分，并且主要由表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞合成，并且是通过与水结合而在创造细胞可以正常发挥功能的环境中起重要作用的物质。皮肤中透明质酸含量的减少由于降低皮肤弹性和降低水分含量是皮肤老化的主要原因。
因此，在各个领域中正在积极进行对用于防止老化的皮肤改善效果的研究。特别地，为了不对人体造成毒性或刺激，继续进行使用天然物质的研究。
发明内容
技术问题
本发明的一个目的是提供能够通过同时产生抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的效果而显示出皮肤老化预防和改善效果的健康功能性食品、食品和化妆品组合物。
本发明的另一个目的是提供包含所述组合物的健康功能性食品、食品和化妆品。
本发明的另外的目的是提供包含印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物作为活性成分的用于抗老化和皮肤改善的组合物。所述组合物可以具有选自皮肤抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿中的一种或更多种用途。
更具体地，本发明的一个目的是提供以下实施方案。
实施方案1.一种用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和/或皮肤保湿的组合物，其包含印度醋栗(Phyllanthus emblica)提取物和大麦芽(Hordeum vulgare)提取物的复合物作为活性成分；印度醋栗(Phyllanthus emblica)提取物和大麦芽(Hordeum vulgare)提取物的复合物用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和/或皮肤保湿，优选地用于皮肤抗氧化、皮肤皱纹改善、皮肤弹性改善和/或皮肤保湿的用途；印度醋栗(Phyllanthus emblica)提取物和大麦芽(Hordeum vulgare)提取物的复合物在制造用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和/或皮肤保湿的食品产品中的用途；或者印度醋栗(Phyllanthus emblica)提取物和大麦芽(Hordeum vulgare)提取物的复合物在制造用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和/或皮肤保湿的化妆品产品中的用途。
实施方案2.根据实施方案1所述的组合物或用途，其中所述印度醋栗提取物或大麦芽提取物为经榨汁的或经选自水、具有1至4个碳原子的低碳醇及其混合溶剂的溶剂提取的。
实施方案3.根据前述实施方案中任一项所述的组合物或用途，其中所述印度醋栗提取物和大麦芽提取物的所述复合物通过将原材料榨汁来获得。
实施方案4.根据前述实施方案中的任一项所述的组合物或用途，其中所述印度醋栗提取物或大麦芽提取物为干粉。
实施方案5.根据前述实施方案中的任一项所述的组合物或用途，其中在所述印度醋栗提取物和大麦芽提取物的所述复合物中，所述印度醋栗提取物与所述大麦芽提取物以1:1至4:1(印度醋栗提取物:大麦芽提取物)的重量比混合。
实施方案6.根据前述实施方案中的任一项所述的组合物或用途，其中所述印度醋栗提取物和大麦芽提取物的所述复合物具有DPPH清除活性、弹性蛋白酶抑制活性、MMP-1抑制活性和/或透明质酸含量增加效果。
实施方案7.一种包含前述实施方案中任一项中所述的组合物的健康功能性食品产品。
实施方案8.一种包含前述实施方案中任一项中所述的组合物的食品产品。
实施方案9.一种用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和/或皮肤保湿的化妆品组合物，所述化妆品组合物包含前述实施方案中任一项中所述的印度醋栗(Phyllanthusemblica)提取物和大麦芽(Hordeum vulgare)提取物的复合物。
实施方案10.根据前述实施方案中任一项所述的组合物或用途，其中所述印度醋栗提取物或大麦芽提取物为经榨汁的或经选自水、具有1至4个碳原子的低碳醇及其混合溶剂的溶剂提取的。
实施方案11.根据前述实施方案中任一项所述的组合物或用途，其中所述印度醋栗提取物和大麦芽提取物的所述复合物通过将原材料榨汁来获得。
实施方案12.根据前述实施方案中任一项所述的组合物或用途，其中所述印度醋栗提取物或大麦芽提取物为干粉。
实施方案13.根据前述实施方案中任一项所述的组合物或用途，其中在所述印度醋栗提取物和大麦芽提取物的所述复合物中，所述印度醋栗提取物与所述大麦芽提取物以1:1至4:1的重量比混合。
实施方案14.根据前述实施方案中任一项所述的组合物或用途，其中所述印度醋栗提取物和大麦芽提取物的所述复合物具有DPPH清除活性、弹性蛋白酶抑制活性、MMP-1抑制活性和/或透明质酸增加效果。
实施方案15.一种包含前述实施方案中任一项所述的组合物的化妆品产品。
实施方案16.一种用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和/或皮肤保湿的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用前述实施方案中任一项所述的组合物。
实施方案17.一种用于制造前述实施方案中任一项所述的组合物的方法，所述方法包括：
通过包括榨汁和干燥过程来由印度醋栗果实获得印度醋栗提取物；
通过包括榨汁和干燥过程来由大麦芽获得大麦芽提取物；以及
将所述印度醋栗提取物和大麦芽提取物以4:1至1:1的重量比混合以制备复合物。
本发明的另外的目的和优点将从以下本发明的详细描述、权利要求和附图中变得更加明显。
技术方案
为了实现上述目的，本发明提供了用于抗老化和皮肤改善的健康功能性食品、食品和化妆品组合物，其包含印度醋栗(Phyllanthus emblica)提取物和大麦芽(Hordeumvulgare)提取物的复合物作为活性成分。
印度醋栗(Phyllanthus emblica L.)是也被称为余甘子(Emblica officinalisGaertn)或阿姆拉(Amla)的植物，并且在野外分布和生长在广泛的区域，例如包括尼泊尔的南亚以及包括马来西亚地区以及中部和南部地区的东南亚。作为可耕种地带，其广泛种植于中国台湾和喜马拉雅的海拔高度高于1500m的山的斜坡上。印度醋栗是高度为3m至8m的落叶树，并且其叶的长度为约10mm，以及宽度为约2mm至3mm的长方形，并且有小的柠檬味的黄绿色花朵在四月至五月开花。果实为平均尺寸为18mm至25mm的扁球形，并且在成熟时其为浅黄色且有光泽的，并且有黄绿色的六条线。新鲜果实的味道是甜的、酸的和苦的，并且余味是甜的。当干燥时果实变黑，并且即使干燥时营养也不减弱，因此分销干燥的果实。阿姆拉也称为阿马拉基(amalaki)，其在尼泊尔被认为是神树。已知在印度醋栗(阿姆拉)中包含维生素C、矿物质、氨基酸、单宁、芸香苷等。印度醋栗包含是橙子20倍的维生素C，并且对热非常稳定，因此即使长时间暴露于高温也几乎不会破坏维生素。认为维生素C的耐热性来自一起被包含的单宁组分，并且这些组分显示出抗氧化、抗肿瘤和抗炎活性等。此外，在印度醋栗中，包含多种生物活性化合物，例如鞣花酸、没食子酸、槲皮素等。
大麦芽(Hordeum vulgare L.)是指具有大麦的幼芽的通过播种大麦种子而生长的嫩叶的状态。在一个实施方案中，大麦芽可以为播种之后约8天至15天的约10cm至20cm的嫩叶。大麦是约10,000年前欧亚大陆上种植的最早作物之一，并且已知为由人类种植的最古老的作物之一。已知大麦芽是营养极佳的食物来源，因为其不仅具有高含量的多种维生素(包括维生素A、维生素B和维生素C)以及矿物质(例如钙、镁和钾)等，而且还包含大量的膳食纤维，因此作为功能性食品和药物材料的工业应用潜力正在增加。在美国、日本等，将大麦嫩叶冷冻干燥并制成粉末，其作为健康食品而研发和销售，以及在韩国，作为一般食品和健康功能性食品，其作为粉末、丸剂、青汁、茶、化妆品等被各种各样地营销和销售。在药理学活性方面，大麦芽通过多种生物活性化合物表现出各种功能，例如抗氧化活性、通畅的排便、胆固醇水平改善、血糖水平改善、高脂血症改善和抗肥胖作用等。认为这些生物活性来源于类黄酮，其包括皂草苷、大麦黄苷等。
因此，本发明人发现了这样的事实：印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物同时显示出优异的DPPH清除活性、弹性蛋白酶抑制活性、MMP-1抑制活性和透明质酸含量增加效果，并且同时产生了抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的效果，并因此可以表现出皮肤老化预防和改善效果，从而完成本发明。
在本发明中，印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物的特征在于经榨汁或经选自水、具有1至4个碳原子的低碳醇及其混合溶剂的溶剂提取的。
在本发明中，印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物的特征在于通过将原材料榨汁来获得。
在本发明中，印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物的特征在于为干粉。
在本发明中，印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物的特征在于印度醋栗提取物以与大麦芽提取物相比1:1至4:1的重量比混合。
在本发明中，印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物的特征在于具有DPPH清除活性、弹性蛋白酶抑制活性、MMP-1抑制活性和透明质酸含量增加效果。
此外，本发明提供了包含所述组合物的健康功能性食品、食品和化妆品。
有益效果
本发明提供的复合物具有优异的DPPH清除活性、弹性蛋白酶抑制活性、MMP-1抑制活性和透明质酸含量增加效果，因此其可以用作用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的健康功能性食品、食品和化妆品组合物。
附图说明
图1为示出对实施例5的自由基清除活性的评估的图。
图2为示出实施例5的弹性蛋白酶抑制活性的图。
图3为示出实施例5的MMP-1抑制活性的图。
具体实施方式
除非另外定义，否则本说明书中使用的所有技术术语和科学术语具有与本发明所属领域的技术人员通常理解的相同的含义。一般地，本说明书中使用的术语是公知的，并且在本技术领域中一般地使用。
在本说明书通篇中，当一个部分“包含”任何组分时，除非另有描述，否则这意指还可以包含其他组分，而不是排除其他组分。
根据本发明的一个实施方案，本发明涉及用于抗老化和皮肤改善的健康功能性食品、食品和化妆品组合物，其包含印度醋栗(Phyllanthus emblica)提取物和大麦芽(Hordeum vulgare)提取物的复合物作为活性成分。
根据本发明的提取物可以通过本发明所属领域中已知的各种提取方法来获得，并且具体地，其可以通过将原材料榨汁或用选自水、有机溶剂及其混合溶剂的溶剂进行提取来获得。其中，在稳定地提取活性成分方面，将原材料榨汁、或者用水或醇提取是更优选的。
水可以为碱性水，以及有机溶剂可以包括一种或更多种极性有机溶剂，例如无水或含水的具有1至4个碳原子的低碳醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、丙酮等；非极性有机溶剂，例如乙醚、己烷、苯、氯仿、乙酸乙酯等；植物有机溶剂，例如大豆油、芝麻油等；及其混合物。有机溶剂可以单独使用或者作为两种或更多种的混合物使用。
作为提取期间使用的溶剂，可以使用甲醇、乙醇、丙醇和正丁醇中的一种或更多种有机溶剂以及通过在这些溶剂中包含水的混合溶剂。当使用混合溶剂作为提取溶剂时，可以进一步提高活性成分的提取效率。然后，当使用混合溶剂时，其可以根据任何目的适当地混合并使用。
此外，提取物可以在室温下或者通过在不破坏提取物的活性成分或使活性成分的破坏最小化的条件下加热来提取。提取方法没有特别限制，并且根据提取物的种类和提取方法，例如，可以使用榨汁、水浴提取、回流冷却提取、超声提取和提取香精法提取方法。
在提取步骤中，提取次数可以具体地重复1次至5次。在这种情况下，可以进一步提高活性成分的提取效率。
作为一个实例，提取步骤可以通过经由在不添加提取溶剂的情况下在室温下施加压力将提取材料榨汁来提取。
作为另一种方法，提取步骤可以通过在向提取材料中添加提取溶剂之后，在50℃至100℃的沸水中加热0.5小时至72小时来提取。
作为另外的方法，提取步骤可以在将提取材料和提取溶剂添加到配备有回流冷却器的提取器中之后，在50℃至100℃下进行回流冷却提取4小时至20小时。然后，回流冷却提取为通过在加热的同时在回流之后冷却来进行提取的方法，并且具体地，意指因为由于加热可能发生蒸发并因此可能发生溶剂损失，通过同时进行冷却过程来使溶剂损失最小化的提取方法。
作为另外的方法，提取步骤可以通过在向提取材料添加提取溶剂之后在5℃至37℃下沉积并进行提取香精法1天至15天来提取。
作为另外的方法，提取步骤可以通过添加基于植物复合物的干燥固体的提取材料重量的10倍至50倍的乙醇、在20℃至80℃下提取1小时至72小时、过滤和浓缩来获得浓缩状态的提取液。
此外，本发明的提取材料不仅包括通过前述提取溶剂提取的提取材料，还包括通过常规纯化过程提取的提取材料。例如，在本发明的提取物中包括通过穿过具有恒定分子量截留值的超滤膜而获得的级分，以及通过另外进行的各种纯化方法例如通过(准备用于根据尺寸、电荷、疏水性或亲水性进行分离的)各种色谱法的分离等获得的活性级分。
过滤为从提取液中去除悬浮固体颗粒的过程，并且可以使用棉花、尼龙、纸等，或者使用超滤、冷冻过滤、离心等来过滤颗粒，但不限于此。
将滤液浓缩之后的干燥步骤可以包括冷冻干燥、真空干燥、热空气干燥、喷雾干燥、减压干燥、泡沫干燥(foam mat drying)、高频干燥、红外干燥等，但不限于此。在一些情况下，可以添加对最终干燥的提取物进行粉碎的过程。
根据本发明的一个实施方案，提取物可以作为各种加工形式例如提取物、通过将提取物干燥而获得的粉末、通过将提取物浓缩和过滤而获得的浓缩物等来使用。此外，提取物没有特别限制，但例如，其可以以包含作为浸出溶剂的含水醇的酊、浓缩物、提取物、流体提取物等形式使用。
根据本发明的另一个实施方案，上述制备的印度醋栗提取物可以包含1mg/g至25mg/g的鞣花酸，并且在根据分析方法的酸水解的条件下可以包含1mg/g至5mg/g的鞣花酸，并且在没有酸水解的条件下可以包含5mg/g至25mg/g的游离鞣花酸。此外，上述制备的大麦芽提取物可以包含6mg/g至11mg/g的皂草苷。
根据本发明的另外的实施方案，在能够改善抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的全部效果方面，印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物优选通过将印度醋栗提取物和大麦芽提取物以1:1至4:1(印度醋栗提取物:大麦芽提取物)的重量比混合来制备，并且最优选的是其通过将它们以1:1至2:1(印度醋栗提取物:大麦芽提取物)的重量比混合来制备。如果超出以上范围，则其不是优选的，因为无法同时改善抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的效果。
印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物可以同时提供DPPH清除活性、弹性蛋白酶抑制活性、MMP-1抑制活性和透明质酸含量增加效果，因此其不仅具有简单的皮肤护理，而且具有能够实现根本性皮肤健康改善的效果。
如上所述，印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物具有优异的抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的效果，因此其可以用作用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的健康功能性食品、食品和化妆品组合物。
根据本发明的一个实施方案，食品组合物可以用作食品、食品添加剂、饮料、饮料添加剂、发酵乳、健康功能性食品等。当用作食品、食品添加剂、饮料、饮料添加剂或健康功能性食品时，其可以为各种食品、发酵乳、肉类、饮料、巧克力、零食、糖果、比萨、拉面、其他面条、口香糖、冰淇淋、酒精饮料、维生素复合物、酒和其他健康功能性食品，但不限于此。
当将本发明的印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物制备为食品组合物时，其不仅可以包含作为活性成分的印度醋栗和大麦芽，还可以包含在食品制造期间通常添加的组分。
另外的组分包括例如蛋白质、碳水化合物、脂肪、营养素、调味品和调味剂。碳水化合物为常规的糖类，例如单糖(例如，葡萄糖、果糖等)、二糖(例如，麦芽糖、蔗糖、低聚糖等)和多糖(例如，糊精、环糊精等)以及糖醇例如木糖醇、山梨糖醇、赤藓糖醇等。作为调味剂，可以使用天然调味剂(奇异果甜蛋白、甜叶菊提取物(例如，莱鲍迪苷A、甘草甜素等))和合成调味剂(糖精、阿斯巴甜等)。
例如，当将本发明的食品组合物制造为饮料时，除了本发明的活性成分印度醋栗和大麦芽之外，还可以包含果胶、柠檬酸、液体果糖、糖、葡萄糖、乙酸、苹果酸、果汁等。
本发明的食品组合物包括所有天然材料的加工形式，例如食品、功能性食品、营养补充剂、健康食品和食品添加剂等。这些类型的食品组合物可以根据本领域中已知的常规方法以多种形式制造。
例如，作为健康食品，印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物可以以茶、汁和饮品的形式制造和消费，或者可以通过造粒、胶囊化和粉末化摄取。此外，作为食品，其可以通过添加本发明的植物提取物复合物来制造，例如饮料(包括酒精饮料)、水果及其加工食品(例如，罐装水果、瓶装水果、果酱、橘子酱等)、鱼、肉类及其加工食品(例如，火腿、香肠、腌牛肉等)、面包和面条(例如，乌冬面、荞麦面、拉面、意大利面、通心粉等)、果汁、各种饮品、曲奇、太妃糖、乳制品(例如，酸奶、发酵乳、黄油、奶酪等)、食用植物油、人造黄油、植物蛋白、甑煮食品、冷冻食品、各种调味品(例如，豆瓣酱、酱油、调味汁等)等。此外，为了以食品添加剂的形式使用本发明的印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物，其可以以粉末或浓缩物的形式制备和使用。
根据本发明的一个实施方案，用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的食品组合物的使用可以根据个体差异(例如年龄、健康状况等)、制剂和类型进行适当调节，并且所述组合物可以有用地用作用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的食品组合物。
由上述方法获得的组合物可以通过表现出DPPH清除活性、弹性蛋白酶抑制活性、MMP-1抑制活性和透明质酸含量增加效果来提供抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿优异的健康功能性食品和食品。
根据本发明的一个实施方案，化妆品组合物可以包含选自以下中的一种或更多种：纯净水、甘油、肉豆蔻酸、丁二醇、氢氧化钾、聚乙二醇、硬脂酸盐/酯、硬脂酸、月桂酸、月桂酰胺DEA、硬脂酸甘油酯、山嵛醇、微晶蜡、苯氧乙醇、乙基己基甘油、生育酚乙酸酯、1,2-己二醇、辛甘醇、羟亚乙基纤维素、黄原胶、胶原蛋白、柠檬酸钠、柠檬酸盐/酯、抗坏血酸镁和芳香剂。
此外，在本发明的化妆品组合物中，如有需要，可以混合其他混合至常规化妆品中的组分。作为一个实例，脂肪和油组分、保湿剂、润肤剂、表面活性剂、有机和无机颜料、有机粉末、紫外线吸收剂、防腐剂、消毒剂、抗氧化剂、植物提取物、pH调节剂、醇、颜料、芳香剂、血液循环促进剂、冷却剂、止汗剂或纯净水是优选的，但不限于此。
根据本发明的一个实施方案，当用作化妆品组合物时，其可以具有选自以下中的任何一种制剂：皮肤膏、乳霜、皮肤、收敛剂、乳液、剥撕式面膜面膜、精华、生发剂、洗发剂、染发剂、护发素、毛发处理剂、喷剂、糊剂、凝胶、凝胶膏、贴剂、皮肤洗剂、皮肤软化剂、皮肤爽肤水、收敛乳液、乳液洗剂、保湿乳液、营养乳液、按摩霜、营养霜、眼霜、保湿霜、护手霜、粉底、粉状粉底、营养精华、防晒霜、肥皂、卸妆油、清洁泡沫、清洁洗剂、清洁霜、清洁水、粉末、身体乳和身体清洁剂，但不限于此。这些制剂中的每一者的组合物可以包含用于配制制剂所必需的和合适的各种碱和添加剂，并且本领域技术人员可以容易地选择这些组分的类型和量。
当本发明的化妆品组合物的制剂为糊剂、乳霜或凝胶时，作为载体组分，可以使用动物油、植物油、蜡、石蜡、淀粉、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅、膨润土、二氧化硅、黄芪胶、滑石或氧化锌、氧化钛等。
当本发明的化妆品组合物的制剂为身体凝胶时，除了前述活性成分之外，还可以使用为身体凝胶制造期间通常使用的组分的卡波姆、三乙醇胺、薄荷醇、乙醇、甘油、EDTA二钠、对羟基苯甲酸甲酯、香料等。在本文中，卡波姆和三乙醇胺充当增稠剂，以及薄荷醇充当香料组分，以及乙醇起到提供清爽感的功能，以及甘油起到保湿剂的作用，以及EDTA二钠起到金属组分螯合物的功能，并且添加对羟基苯甲酸甲酯用于起防腐剂的功能。此外，作为香料，除了薄荷醇香料之外，还可以添加各种香料例如草药香料等。
除了前述具体组分之外，通过应用在本领域中广泛使用的用以实现前述增稠剂、清爽感提供物、香料组分、保湿剂等的功能的已知材料而制备的组合物也可以包括在本发明的范围内。
当本发明的制剂为粉末或喷剂时，作为载体组分，可以添加乳糖、滑石、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉末，并且特别地，在喷剂的情况下，可以另外包含推进剂例如氯氟烃、丙烷/丁烷或二甲醚。
当本发明的制剂为液体或乳剂时，作为载体组分，添加溶剂、增溶剂或乳化剂，并且其实例包括水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、甘油脂族酯、聚乙二醇、脱水山梨糖醇脂肪酸酯等。
当本发明的制剂为悬浮液时，作为载体组分，可以使用液体稀释剂例如水、乙醇或丙二醇，悬浮液例如乙氧基化异硬脂醇和聚氧乙烯脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、氢氧化铝、膨润土、琼脂、黄芪胶等。
当本发明的制剂为含有表面活性剂的清洁剂时，作为载体组分，可以使用脂族醇硫酸盐/酯、脂族醇醚硫酸盐/酯、磺基琥珀酸单酯、羟乙磺酸盐/酯、咪唑啉衍生物、甲基牛磺酸盐、肌氨酸盐/酯、脂肪酸酰胺醚硫酸盐/酯、烷基酰胺基甜菜碱、脂族醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸二乙醇酰胺、植物油、羊毛脂衍生物、或乙氧基化甘油脂肪酸酯等。
根据本发明的一个实施方案，可以将用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的化妆品组合物制备为用于促进脂肪分解的组合物，例如身体凝胶、身体乳液、身体霜、身体油等，并且可以制备成气溶胶型。在这种情况下，化妆品组合物优选通过直接将其施加或喷洒到皮肤上的皮肤施用的方法来使用。
根据本发明的一个实施方案，用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的化妆品组合物的使用可以根据个体差异(例如年龄、皮肤脂肪状况)、制剂和类型进行适当调节，并且所述组合物可以有用地用作用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的效果的组合物。
由上述方法获得的组合物可以提供通过显示出DPPH清除活性、弹性蛋白酶抑制活性、MMP-1抑制活性和透明质酸含量增加效果而抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿优异的化妆品。
在下文中，将通过实例更详细地描述本发明。这些实例仅旨在更具体地举例说明本发明，并且对本发明所属领域中的技术人员将明显的是，根据本发明的要点，本发明的范围不受这些实例的限制。
实施例
I.测试材料的制备和标记化合物的分析
<实施例1至7>印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物的制备
在将印度醋栗的果实清洗和榨汁之后，获得印度醋栗果实提取物。之后，将其过滤并浓缩，然后干燥，以制备粉末形式的印度醋栗提取物。在将大麦芽收获并榨汁之后，将其过滤以去除不溶性纤维例如纤维素，然后干燥。然后，将干燥的粉末均质化以制备大麦芽提取物。将所制备的呈粉末形式的印度醋栗提取物和大麦芽提取物以下表1的重量比混合，以制备印度醋栗提取物和大麦芽提取物的最终复合物。
[表1]
<比较例1>印度醋栗提取物的制备
在将印度醋栗的果实清洗和榨汁之后，获得印度醋栗果实提取物。之后，将其过滤并浓缩，然后干燥，以制备粉末形式的印度醋栗提取物。
<比较例2>大麦芽提取物的制备
在将大麦芽收获并榨汁之后，将其过滤以去除不溶性纤维例如纤维素，然后干燥。之后，将干燥的粉末均质化以制备大麦芽提取物。
<标记化合物的分析>
为了分析印度醋栗提取物和大麦芽提取物的标记化合物以及对原材料的标准化，对印度醋栗提取物(比较例1-1、比较例1-2、比较例1-3)和大麦芽提取物(比较例2-1、比较例2-2、比较例2-3)中的每种原材料制备3个批次样品。
将印度醋栗提取物的标记化合物设定为“鞣花酸”，以及将大麦芽提取物的标记化合物设定为皂草苷，以对其进行分析。根据分析方法，印度醋栗提取物的标记化合物的含量汇总于表2和表3中，以及大麦芽提取物的标记化合物的含量汇总于表4中。
更具体地，每种提取物的标记化合物含量的分析如下进行。
用于对印度醋栗提取物的鞣花酸定量所使用的分析方法如下。
在酸水解之后，使用高效液相色谱法测量印度醋栗提取物中鞣花酸的含量。为了分析，使用Capcellpak C18 UG120柱(4.6mm×50mm，5μm)以用UV检测器检测在370nm的波长处的鞣花酸。流动相为0.85％的磷酸溶液与甲醇的6：4混合物(溶剂A)和甲醇(溶剂B)，并将其应用于梯度洗脱法。作为结果，根据上述比较例1制备的印度醋栗提取物中鞣花酸的含量被分析为在1mg/g至5mg/g的范围内。
[表2]
类别 鞣花酸的含量(mg/g)
比较例1-1 3.17
比较例1-2 1.91
比较例1-3 4.65
在用于对印度醋栗提取物的游离鞣花酸定量所使用的分析方法中，在没有酸水解的条件下的分析方法如下。
在甲醇超声提取之后，使用高效液相色谱法来测量印度醋栗提取物中游离鞣花酸的含量。为了分析，使用Capcellpak C18 UG120柱(4.6mm×50mm，5μm)以用UV检测器检测在370nm的波长处的鞣花酸。流动相为0.85％的磷酸溶液与甲醇的6：4混合物(溶剂A)和甲醇(溶剂B)，并将其应用于梯度洗脱法。作为结果，根据上述比较例1制备的印度醋栗提取物中游离鞣花酸的含量被分析为在5mg/g至25mg/g的范围内。
[表3]
类别 游离鞣花酸的含量(mg/g)
比较例1-1 11.73
比较例1-2 5.36
比较例1-3 24.15
用于对大麦芽提取物的皂草苷定量所使用的分析方法如下。
在甲醇超声提取之后，使用高效液相色谱法来测量大麦芽提取物中皂草苷的含量。为了分析，使用Capcellpak C18 UG120柱(4.6mm×50mm，5μm)以用UV检测器检测在340nm的波长处的皂草苷。流动相为0.1％的甲酸(溶剂A)和甲醇(溶剂B)，并将其应用于梯度洗脱法。作为结果，根据上述比较例2制备的大麦芽提取物中皂草苷的含量被分析为在6mg/g至11mg/g的范围内。
[表4]
类别 皂草苷的含量(mg/g)
比较例2-1 6.56
比较例2-2 7.38
比较例2-3 10.54
II.功效评估
<实验例1>抗氧化测试：DPPH清除活性
为了使用实施例1至7和比较例1至2来研究抗氧化效果，对DPPH(2，2-二苯基-1-苦基偕腙肼)自由基清除活性进行评估。
通过浓缩将实施例1至7和比较例1至2与450μl的55μM DPPH溶液混合然后在4℃下反应30分钟。在反应完成之后，将各样品置于96孔板中，并使用酶标仪在520nm下测量样品的吸光度。然后，使用未经样品处理的组作为对照组，并且样品的自由基清除活性(％)按照以下等式1计算。
然后，作为清除自由基的阳性对照，使用抗坏血酸，并且当自由基清除活性为50％时，抗坏血酸的浓度显示为1.63μg/mL。
[等式1]
自由基清除活性(％)＝[(1-经样品处理的组的吸光度/未经样品处理的组的吸光度)×100]
[表5]
IC50意指当经处理的样品的自由基清除活性为50％时样品的浓度。上述表5汇总了5μg/mL的各样品中的自由基清除活性。作为结果，如上述表5中所示，实施例4至7在5μg/mL处理浓度下显示出53.89％至57.48％的DPPH自由基清除活性，并且与比较例1至2的在5μg/mL处理浓度下的4.08％至41.83％的DPPH自由基清除活性相比显著优异。可以确定实施例5的DPPH自由基清除活性是其中最优异的。
此外，如图1中所示，当对实施例5通过浓缩进行处理时，DPPH自由基清除活性以剂量依赖性方式增加，并且确定了抗氧化活性非常优异。
<实验例2>皱纹和弹性改善的功效测试：弹性蛋白酶抑制活性
为了使用实施例1至7和比较例1至2来研究皱纹和弹性的改善效果，评估了弹性蛋白酶抑制活性。
将实施例1至7和比较例1至2的最终浓度制备为100μg/mL，并将溶解在10mM Tris-HCL缓冲液(pH 8.0)中N-琥珀酰-(丙氨酸)3-对硝基苯胺的浓度为1.6mM的底物和0.4U/mL的来自猪胰的IV型弹性蛋白酶混合，并在25℃下反应5分钟，然后置于96孔板中，并使用酶标仪在410nm下测量样品的吸光度。然后，使用未经样品处理的组作为对照组，并且样品的弹性蛋白酶抑制活性(％)按照以下等式2计算。
然后，使用齐墩果酸作为阳性对照组，并且当弹性蛋白酶抑制活性为50％时齐墩果酸的浓度显示为19.63μg/mL。
[等式2]
弹性蛋白酶抑制活性(％)＝[(1-经样品处理的组的吸光度/未经样品处理的组的吸光度)×100]
[表6]
作为结果，如表6中所示，可以确定与比较例1至2在100μg/mL处理浓度下显示的28.53％至45.52％的弹性蛋白酶抑制活性相比，实施例1至5的在100μg/mL处理浓度下显示的弹性蛋白酶抑制活性是显著优异的，为70.89％至75.28％。
此外，如图2中所示，确定了当通过浓缩对实施例5的印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物进行处理时，皱纹和弹性的改善效果优异，因为弹性蛋白酶抑制活性以剂量依赖性方式增加。
<实验例3>细胞毒性测试：WST(水溶性四唑盐)测定
为了使用实施例1至7和比较例1至2确定对皮肤细胞的毒性，在人角质形成细胞HaCaT细胞中进行了细胞毒性实验。
为了确定影响对人角质形成细胞HaCaT细胞的毒性，使用DMEM(Dulbecco的改良Eagle培养基)培养基以5×105个细胞/孔的浓度在24孔板中接种细胞，然后在37℃和5％CO2的条件下培养24小时。将实施例1至7和比较例1至2与培养基混合使得相对于培养24小时的细胞的最终浓度为100μg/mL，并对每个孔进行处理，然后在37℃和5％CO2的条件下培养24小时，去除上清液，并对每个孔进行WST-1测定溶液处理，并在培养箱中反应2小时，然后使用酶标仪在450nm下测量吸光度，并按照以下等式3计算细胞存活率。
[等式3]
细胞存活率(％)＝[(经样品处理的组的吸光度/未经样品处理的组的吸光度)×100]
[表7]
样品(混合比) 处理浓度 细胞存活率(％)
实施例1(1∶6) 100μg/mL 96.11±2.56
实施例2(1∶4) 100μg/mL 96.39±1.54
实施例3(1∶2) 100μg/mL 97.04±1.01
实施例4(1∶1) 100μg/mL 97.19±0.70
实施例5(2∶1) 100μ/mL 99.94±1.83
实施例6(4∶1) 100μg/mL 96.16±0.76
实施例7(6∶1) 100μg/mL 95.86±0.66
比较例1(1∶0) 100μg/mL 95.53±0.77
比较例2(0∶1) 100μg/mL 95.58±1.06
作为结果，如上述表7中所示，确定了在实施例1至7和比较例1至2的100μg/mL处理浓度下没有显示出细胞毒性，因此其可以用作用于食品和化妆品的安全材料，并且特别地，确定了由于在实施例5的印度醋栗提取物和大麦芽提取物2∶1的混合比下细胞存活率为99.94％，因此根本没有显示出细胞毒性。
<实验例4>皱纹和弹性改善测试：MMP-1(基质金属蛋白酶-1)抑制活性
为了在细胞水平上研究使用实施例1至7和比较例1至2的皱纹和弹性的改善效果，在人角质形成细胞HaCaT细胞中评估了MMP-1抑制活性。
为了评估通过使HaCaT细胞中的胶原蛋白分解而诱导皱纹产生的MMP-1的抑制活性，使用DMEM(Dulbecco的改良Eagle培养基)培养基以5×105个细胞/孔的浓度在24孔板中接种细胞，然后在37℃和5％CO2的条件下培养24小时。在通过对培养24小时的细胞进行UV-B处理来模拟MMP-1的形成之后，将实施例1至7和比较例1至2与培养基混合使得最终浓度为100μg/mL，并对每个孔进行处理，然后在37℃和5％CO2的条件下培养24小时。在24小时之后，收集上清液，并使用MMP-1 ELISA试剂盒(RAB0361)根据试剂盒中的手册来测量MMP-1浓度，并按照以下等式4计算MMP-1抑制活性。对照组意指其中进行UV-B处理但样品未经处理的测试组。
[等式4]
MMP-1抑制活性(％)＝[{1-(经UV-B处理且经样品处理的组的MMP-1浓度/经UV-B处理且未经样品处理的组的MMP-1浓度)}×100]
[表8]
样品(混合比) 处理浓度 MMP-1抑制活性(％)
对照组 0μg/mL 0±2.44
实施例1(1∶6) 100μg/mL 7.41±0.69
实施例2(1∶4) 100μg/mL 9.79±1.31
实施例3(1∶2) 100μg/mL 14.41±0.16
实施例4(1∶1) 100μg/mL 23.33±0.16
实施例5(2∶1) 100μg/mL 26.78±0.06
实施例6(4∶1) 100μg/mL 17.92±1.25
实施例7(6∶1) 100μg/mL 18.81±2.12
比较例1(1∶0) 100μg/mL 13.55±0.62
比较例2(0∶1) 100μg/mL 6.53±0.16
作为结果，如表8中所示，可以确定，与比较例1至2的在100μg/mL处理浓度下显示的13.55％至6.53％的MMP-1抑制活性相比，实施例4至5的在100μg/mL处理浓度下显示的23.33％至26.78％的MMP-1抑制活性显著优异。确定了实施例5的MMP-1抑制效果是其中最优异的。
此外，如图3中所示，确定了皱纹和弹性的改善效果优异，因为实施例5的处理(印度醋栗提取物和大麦芽提取物的复合物)以剂量依赖性方式增加了MMP-1抑制活性。
<实验例5>皮肤保湿测试：透明质酸含量测量
为了在细胞水平上研究使用实施例1至7和比较例1至2的皮肤保湿效果，测量了在人角质形成细胞HaCaT细胞中的透明质酸含量。
为了测量通过与HaCaT细胞中的水结合而显示出保湿效果的透明质酸的含量，使用DMEM(Dulbecco的改良Eagle培养基)培养基以5×105个细胞/孔的浓度在24孔板中接种细胞，然后在37℃和5％CO2的条件下培养24小时。将实施例1至7和比较例1至2与培养基混合使得相对于培养24小时的细胞的最终浓度为100μg/mL，并对每个孔进行处理，然后在37℃和5％CO2的条件下培养24小时。在24小时之后，收集上清液，并使用Hyaluronan ELISA试剂盒(DHYAL0)根据试剂盒中的手册来测量透明质酸含量，并按照以下等式5计算透明质酸含量。
[等式5]
透明质酸含量(％)＝[(经样品处理的组的透明质酸含量/未经样品处理的组的透明质酸含量)×100]
[表9]
样品(混合比) 处理浓度 透明质酸含量(％)
实施例1(1∶6) 100μg/mL 89.94±0.88
实施例2(1∶4) 100μg/mL 104.52±0.53
实施例3(1∶2) 100μg/mL 106.07±2.67
实施例4(1∶1) 100μg/mL 113.03±1.26
实施例5(2∶1) 100μg/mL 119.11±0.88
实施例6(4∶1) 100μg/mL 107.28±1.85
实施例7(6∶1) 100μg/mL 94.44±0.53
比较例1(1∶0) 100μg/mL 103.94±2.89
比较例2(0∶1) 100μg/mL 105.03±1.26
作为结果，如表9中所示，可以确定，与比较例1至2的在100μg/mL处理浓度下显示的103.94％至105.03％的透明质酸含量相比，实施例4至5的在100μg/mL处理浓度下显示的113.03％至119.11％的透明质酸含量显著增加。通过确定实施例5的透明质酸含量是其中最高的，确定了皮肤保湿效果优异。到目前为止，已经详细描述了本发明的内容的具体部分，因此对于本领域技术人员而言，清楚的是这些具体描述仅为优选实施方案，并且本发明的范围并不因此受到限制。因此，本发明的实质范围将由所附权利要求及其等同方案限定。

Claims (15)

1.一种用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的组合物，包含印度醋栗(Phyllanthus emblica)提取物和大麦芽(Hordeum vulgare)提取物的复合物作为活性成分。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述印度醋栗提取物或大麦芽提取物为经榨汁的或经选自水、具有1至4个碳原子的低碳醇及其混合溶剂的溶剂提取的。
3.根据权利要求1所述的组合物，其中所述印度醋栗提取物和大麦芽提取物的所述复合物通过将原材料榨汁来获得。
4.根据权利要求1所述的组合物，其中所述印度醋栗提取物或大麦芽提取物为干粉。
5.根据权利要求1所述的组合物，其中在所述印度醋栗提取物和大麦芽提取物的所述复合物中，所述印度醋栗提取物与所述大麦芽提取物以1:1至4:1(印度醋栗提取物:大麦芽提取物)的重量比混合。
6.根据权利要求1所述的组合物，其中所述印度醋栗提取物和大麦芽提取物的所述复合物具有DPPH清除活性、弹性蛋白酶抑制活性、MMP-1抑制活性和透明质酸含量增加效果。
7.一种包含根据权利要求1至6中任一项所述的组合物的健康功能性食品产品。
8.一种包含根据权利要求1至6中任一项所述的组合物的食品产品。
9.一种用于抗氧化、皱纹改善、弹性改善和皮肤保湿的化妆品组合物，包含印度醋栗(Phyllanthus emblica)提取物和大麦芽(Hordeum vulgare)提取物的复合物作为活性成分。
10.根据权利要求9所述的化妆品组合物，其中所述印度醋栗提取物或大麦芽提取物为经榨汁的或经选自水、具有1至4个碳原子的低碳醇及其混合溶剂的溶剂提取的。
11.根据权利要求9所述的化妆品组合物，其中所述印度醋栗提取物和大麦芽提取物的所述复合物通过将原材料榨汁来获得。
12.根据权利要求9所述的化妆品组合物，其中所述印度醋栗提取物或大麦芽提取物为干粉。
13.根据权利要求9所述的化妆品组合物，其中在所述印度醋栗提取物和大麦芽提取物的所述复合物中，所述印度醋栗提取物与所述大麦芽提取物以1:1至4:1(印度醋栗提取物:大麦芽提取物)的重量比混合。
14.根据权利要求9所述的化妆品组合物，其中所述印度醋栗提取物和大麦芽提取物的所述复合物具有DPPH清除活性、弹性蛋白酶抑制活性、MMP-1抑制活性和透明质酸含量增加效果。
15.一种包含根据权利要求9至14中任一项所述的组合物的化妆品产品。
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