CN118006561A - 一株高裂解率空肠弯曲杆菌噬菌体rdp-cj-22002、其杀菌组合物及其应用 - Google Patents
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Landscapes
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Abstract
本发明公开了一株高裂解率空肠弯曲杆菌噬菌体RDP‑CJ‑22002、其杀菌组合物及其应用,该噬菌体的保藏号为CGMCC NO.45406。该噬菌体不仅可用于预防和治疗空肠弯曲菌病的药物,还可以用于制备家禽饲料添加剂和消毒剂等。该噬菌体对温度有较好的耐受性;具有较好的耐酸碱性能;其裂解率达99.3%,对宿主有较好的裂解效果,适合在养殖过程中使用。通过与多种抗生素的协同实验,证实该噬菌体可以与β‑内酰胺类、氨基糖类、四环素类、大环内酯类、林可胺类、多肽类和多磷类抗生素有较好的协同作用,通过研究发现,该噬菌体可以大幅提高病原菌对抗生素的敏感性,在生产养殖过程中可以有效降低抗生素的使用量,增加收益,保证食品安全,保障人民身体的健康。
Description
技术领域
本发明属于微生物技术领域,具体涉及一株高裂解率空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002、其杀菌组合物及其应用。
背景技术
空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)是一种人兽共患的革兰氏阴性致病菌,生长条件极为苛刻,需要在微需氧(5%O2,10%CO2,85%N2)的条件下生长。在自然界高氧压力环境下,该菌也能广泛传播。
家禽作为空肠弯曲菌最常见的宿主,被认为是空肠弯曲菌病最主要的来源。空肠弯曲菌可以在家禽肠道内大量定殖,并通过家禽生产过程进行传递,最终传播给人,对人类的生命健康造成威胁。对于养殖环节,空肠弯曲菌的水平传播是防控的主要侧重点。研究发现,鸡群通常在2-3周后开始出现空肠弯曲菌的感染,且一旦有一只鸡感染,空肠弯曲菌便会通过粪、口、食物和水源等途径在数天之内迅速感染整个鸡群。基于空肠弯曲菌的传播特点,养殖环节中,空肠弯曲菌的防控手段主要包括以下三类:①通过生物安全措施阻断空肠弯曲菌的传播;②使用抗菌物质降低鸡体内的空肠弯曲菌定殖水平;③通过免疫等方式增强鸡群对空肠弯曲菌的抵抗能力,抗菌物质可以有效降低鸡体内空肠弯曲菌的定殖水平,常用的抗菌物质主要包含有机酸,细菌素和抗生素等。对于以上空肠弯曲菌的防控手段,大多时候通过在家禽饲养过程中添加抗生素进行预防性治疗,由于养殖过程中抗生素的使用,空肠弯曲菌的耐药问题日趋严重,多重耐药菌的出现更是严重影响了人们的健康。噬菌体是一类细菌病毒,它可以特异性地吸附并感染宿主菌,并在宿主体内进行复制,最终导致宿主菌裂解死亡。噬菌体通常不具有生物毒性,相对安全,且由于其具有很强的宿主特异性,可以有针对性地使用噬菌体对特定的细菌进行防控,而不会对正常的菌群造成损害。噬菌体通常不具有广谱性,在进行治疗前需要对病原体进行复杂的鉴定和裂解谱测定来筛选出合适的用于治疗的噬菌体。
但是,目前还未出现能有效预防和治疗空肠弯曲菌病的安全、高裂解率的噬菌体产品,因此,亟待开发一种耐酸碱、对温度有耐受性、稳定遗传且裂解率高的噬菌体产品用于防治空肠弯曲菌病。
发明内容
本发明旨在针对现有技术的不足,提供一株高裂解率空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002、其杀菌组合物及其应用。该噬菌体不仅可用于制备预防和治疗空肠弯曲菌病的药物,还可用于制备家禽养殖用的饲料添加剂以及家禽养殖和肉品加工过程中的消毒剂等。该噬菌体对引起空肠弯曲菌病的空肠弯曲菌有较强的裂解作用,裂解率达99.3%,对宿主有较好的裂解效果,适合在养殖过程中使用。
本发明上述目的通过以下技术方案实现:
第一方面,本发明提供了一株高裂解率空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002,该噬菌体是从蛋鸡肠道内容物、粪便中分离得到的,于2023年1月6日被保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,其保藏编号为CGMCC NO.45406,并被分类命名为空肠弯曲杆菌噬菌体。
通过电镜观察到:该噬菌体有一个多面体立体对称的头部,包裹着核酸,直径约40nm,有尾,尾长约100nm;根据病毒分类国际委员会(ICTV)的定义,该噬菌体的形态符合有尾噬菌体科的特征,属于肌尾噬菌体科,并被命名为RDP-CJ-22002。
进一步的,该噬菌体RDP-CJ-22002在pH在6-8范围内能维持较好的活性,其效价在108PFU/mL之上,说明该噬菌体有较好的耐酸碱性能。
进一步地,该噬菌体RDP-CJ-22002在30-50℃的温度范围内,效价稳定,尤其在50℃条件下处理30min和60min,效价仍然在108PFU/mL以上,说明该噬菌体对温度有较好的耐受性。
进一步地,该噬菌体RDP-CJ-22002连续传30代后,其效价稳定在108PFU/mL以上,说明该噬菌体具有较好的遗传稳定性,适合工业化生产。
进一步地,该噬菌体RDP-CJ-22002可有效感染空肠弯曲菌,其最佳感染复数为1:10。
进一步地,该噬菌体RDP-CJ-22002裂解率达99.3%,对宿主有较好的裂解效果,适合在养殖过程中使用。
第二方面,基于同一个发明构思,本发明还提供了一种杀菌组合物,包括如上所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002。
进一步地,如上所述的杀菌组合物,还包括用于抗空肠弯曲菌的抗生素。这种杀菌组合物可通过空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002与其他抗生素复配,用于制备防治空肠弯曲菌病的各类产品。优选的,所述抗生素包括β-内酰胺类、氨基糖类、四环素类、大环内酯类、林可胺类、多肽类、多磷类等。更优选的,所述抗生素包括阿莫西林、安普霉素、阿米卡星、新霉素、单硫酸卡那霉素、多西环素、氟苯尼考、金霉素、土霉素、泰乐菌素、替米考星、林可霉素、黏菌素、磷霉素钠等。
进一步地,该噬菌体RDP-CJ-22002与抗生素有较好的协同作用,可以将其最小抑菌浓度(以下简称“MIC”)降低至原来的1/4-1/8,这在禽类养殖过程中,可以大幅减少抗生素的使用量,提高养殖效益,保障食品健康。
第三方面,基于同一个发明构思,本发明还提供了如上所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002或者所述的杀菌组合物在制备预防和治疗空肠弯曲菌感染的疾病的药物中的应用。本文中术语“预防”是指包括通过给予所述噬菌体或者杀菌组合物来抑制或延迟所述疾病的所有行为。本文中术语“治疗”是指包括通过给予所述噬菌体或者杀菌组合物而使所述疾病好转或有所改善的所有行为。优选的,所述空肠弯曲菌选自鸡源空肠弯曲菌。
第四方面,基于同一个发明构思,本发明还提供了如上所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002或者所述的杀菌组合物在制备预防和治疗空肠弯曲菌感染的疾病的饲料中的应用。
第五方面,基于同一个发明构思,本发明还提供了一种噬菌体制剂,所述噬菌体制剂的有效成分包括如上所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002。优选的,所述噬菌体制剂中还包含药学上可接受的载体,其剂型为溶液剂、粉剂、凝胶剂、颗粒剂或冻干剂。
第六方面,基于同一个发明构思,本发明还提供了一种饲料添加剂,所述饲料添加剂的有效成分包括如上所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002或者所述的杀菌组合物。
第七方面,基于同一个发明构思,本发明还提供了一种饲料,包括如上所述的饲料添加剂。饲料添加剂通过与家禽饲料进行混拌后,进行饲喂,从而达到预防或者治疗空肠弯曲菌病的作用。优选的,饲料中噬菌体的效价至少为103PFU/g。
第八方面,基于同一个发明构思,本发明还提供了一种消毒剂,所述消毒剂的有效成分包括如上所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002。优选的,消毒剂中噬菌体的效价至少104PFU/mL。上述消毒剂还包含其他用于环境中细菌抑制或者消灭的活性成分或其他助剂等。
本发明的有益效果是:
1、本发明提供的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002在家禽肠道中广泛存在,容易分离,产品开发周期短;对其宿主具有专一性,不会损害正常的肠道菌群;此外,还具有自我复制和自限性特征等优点,为工业化生产噬菌体用于预防或者治疗空肠弯曲菌病的防治、环境消毒提供了噬菌体来源。
2、本发明提供的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002的裂解率达99.3%,对宿主有较好的裂解效果,适合在养殖过程中使用。
3、本发明提供的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002与抗生素协同作用,是一种安全、高效、廉价的防控抗生素耐药空肠弯曲菌的方法,实验证明,通过与多种抗生素的协同实验,证实该噬菌体可以与β-内酰胺类、氨基糖类、四环素类、大环内酯类、林可胺类、多肽类和多磷类抗生素有较好的协同作用。本发明提供的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002可以有效降低抗生素的使用量,将其MIC降至至原来的1/4-1/8,提高养殖收益,保障食品安全、保护消费者健康。
4、本发明提供的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002在30-50℃的温度范围内,效价稳定,尤其在50℃条件下处理30min和60min,效价仍然在108PFU/mL以上;经55℃处理30min和60min,效价仅下降一个数量级,仍保持在107PFU/mL,说明该空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002对温度有较好的耐受性。
5、本发明提供的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002在pH 6-8的条件下,37℃培养1h后,其效价仅下降1个数量级,效价仍保持在108PFU/mL以上,说明该空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002有较好的耐酸碱性能。
附图说明
图1为空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002的噬菌斑照片;
图2为空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002的电镜图片;
图3为空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002的酸碱稳定性曲线;
图4为空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002的热稳定性曲线;
图5为空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002的遗传稳定性曲线;
图6为空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002的一步生长曲线。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的内容,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
在本发明中,若非特指,所采用的设备和原料等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法,如无特别说明,均为本领域的常规方法。除非另有定义,本说明书所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。
实施例1噬菌体的分离培养和生物学特性
(一)样品处理
将鸡盲肠道内容物和粪便置于0.9%生理盐水中,室温浸泡8小时。12000rpm离心10min,取上清液用0.45μm的膜过滤除菌,得到滤液,备用。
(二)共培养
取100μL宿主菌液与400μL上述过滤液置于5mL液体培养基中,42℃,微氧条件下培养16h,得到共培养液。
其中,宿主菌BSJ-22002从蛋鸡场采集病料(粪便或者盲肠)从中分离得到,具体分离方法如下:
空肠弯曲菌的分离:采集新鲜盲肠样品或粪便,用棉拭子蘸取样品接种到弯曲菌CCDA培养基上,42℃微氧环境培养48h。挑取具有弯曲菌特征的菌落,同时三区划线接种在CCDA琼脂平板上,42℃微氧环境继续培养36-48h。
空肠弯曲菌的鉴定:再次挑取具有明显空肠弯曲菌特征的疑似菌落采用煮沸法提取DNA模板,通过弯曲菌属16SrRNA和空肠弯曲菌MapA基因多重PCR进一步鉴定。引物序列相关信息见下表。
表1 PCR反应体系
表2 PCR反应程序
PCR产物用10G/L琼脂糖凝胶电泳,在凝胶成像系统中观察并拍照。
本实施例中的微氧环境:85%N2,10%CO2,5%O2;本实施例中的引物序列如下:
表3引物序列
经鉴定确定为空肠弯曲杆菌,将其命名为BCJ-22003,采用20%的甘油保藏与-80℃冰箱中。
(三)噬菌体的分离与纯化
采用双层平板法进行噬菌体的分离,将共培养液12000rpm离心10min,过0.22μm的膜过滤除菌后过滤清液备用。取100μL上述过滤清液与100μL宿主菌液置于上层培养基中,铺双层平板,42℃,微氧条件下培养48h。抠取较大较亮的噬菌斑置于灭菌的0.9%生理盐水中,室温放置30min,然后10倍梯度稀释,取100μL的稀释液与100μL宿主菌置于上层培养基中,混合均匀,铺双层平板,42℃,微氧条件下培养48h,完成一次纯化。按照以上步骤纯化3-4次,直至噬菌斑大小均匀,形成圆形透明斑块,边界清晰,斑块直径约1mm的噬菌斑,如图1所示。
液体培养基成分:酵母浸粉0.5%,酵母蛋白胨1.5%,胰酪蛋白胨0.25%,氯化钠0.5%,氯化镁20ppm,氯化钙20ppm,pH 7.4±0.1,121℃灭菌。上层培养基:在液体培养基的基础上添加0.5%的琼脂。固体培养基:在液体培养基的基础上添加1.5%琼脂。
(四)噬菌体的保藏
抠取纯化好的噬菌斑,置于灭菌后的生理盐水中,浸泡30min,过0.22μm的滤芯除菌,10倍稀释过滤液,取适当浓度的稀释液100μL与200μL菌液置于上层培养基中,铺双层平板,42℃,微氧条件下培养48h。选取云雾状的平板,用生理盐水浸泡平板,然后刮取上层至50mL离心管中,振荡10min,5000rpm,10min,离心,用注射吸取清液,过0.22μm的膜,然后与冻干保护剂(16%脱脂奶粉,2%甘露醇,0.5%维生素C)1∶1(W/V)混合均匀,分装于安瓿管中,置于冻干机中预冻6h后,然后真空冷冻干燥48h,对冻干后的样品,抽真空封存。
(五)透射电镜观察噬菌体的形态
1、实验方法:
取高于105PFU/mL噬菌体样品50μl滴于微孔铜网上,沉淀1min,用滤纸吸去多余的液体。在铜网上滴加50μ1的1%的磷钨酸(PTA),染色5min,用滤纸吸去多余的染液,干燥后用透射电镜观察并拍照。
2、实验结果及分析:
如图2所示,电镜条件测定得到,该噬菌体有一个多面体立体对称的头部,包裹着核酸,直径约40nm,有尾,尾长约100nm;根据病毒分类国际委员会(ICTV)的定义,该噬菌体的形态符合有尾噬菌体科的特征,属于肌尾噬菌体科,并将该噬菌体命名为RDP-CJ-22002。
(七)噬菌体的基因组分析
基因分析由青岛氟贝斯生物科技有限公司完成,基因长度64158bp,对全基因进行测序和基因分析后,发现该噬菌体不含毒力基因和溶原性基因,在基因水平说明该噬菌体具有较好的安全性。该噬菌体的基因中含有多个裂解酶的基因,其裂解后的产物中含有该基因表达的裂解酶,在产品使用过程中可以再次裂解相关的空肠弯曲杆菌。
实施例2空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002的酸碱稳定性
1、实验方法:
用稀盐酸和稀NaOH溶液调节生理盐水的酸碱度,配成pH值为3、4、5、6、7、8、9、10、11的缓冲液,再用配置好的缓冲溶液将噬菌体稀释成1×108PFU/mL,将稀释液在42℃,水浴1h,用生理盐水10倍比稀释后铺双平板测定效价。42℃,微氧条件下培养48h。
2、实验结果:
实验结果显示,如图3所示,在pH 6-8的条件下,42℃培养1h后,其效价仅下降1个数量级,效价仍保持在108PFU/mL以上,说明RDP-CJ-22002有较好的耐酸碱性能。该特性在治疗疾病过程中有很好的应用价值,RDP-CJ-22002本身具有高的活性,且对酸碱具有较好的耐受性,这可以保证有足够数量的噬菌体到达肠道发挥杀菌作用。
实施例3空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002热稳定性
1、实验方法:
将噬菌体原液分装到50毫升灭菌离心管中,分别在35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、80℃和90℃的条件下孵育30min和60min,然后用生理盐水10倍梯度稀释后,铺双平板测定其效价。
2、实验结果:
实验结果显示,如图4所示,随温度的升高和时间的延长,噬菌体RDP-CJ-22002效价逐渐下降,在50℃条件下处理30min和60min,效价仍然在108PFU/mL以上,经55℃处理30min和60min,噬菌体效价仅下降1个数量级,效价仍然在107PFU/mL以上,RDP-CJ-22002对温度具有较好的耐受性。该特性在噬菌体的生产、运输和存储中有非常重要的意义。
实施例4空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002遗传稳定性
1、实验方法:
将RDP-CJ-22002连续传代30次,每代培养基中加入等量的RDP-CJ-22002和BCJ-22002,每代培养时间36h,然后铺双平板,测定其效价。
2、实验结果:
实验结果显示,如图5所示,将RDP-CJ-22002连续传30代后,测定其效价,其效价稳定在108PFU/mL以上,均保持较高的活性,说明该噬菌体具有较好的遗传稳定性,适合工业化生产。
实施例5空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002最佳感染复数
1、实验方法:
按照感染复数为10∶1、1∶1、1∶10、1∶100、1∶1000、1∶10000的比例将噬菌体增殖液和宿主加入液体培养基中,并且确保培养体系的总体积相同。42℃,微氧条件下培养12h,常温下12000r/min离心5min,取上清液铺双平板测定其效价。42℃,微氧条件下培养48h,观察噬菌斑。
2、实验结果:
实验结果显示,如表4所示,当感染复数为1∶10时,培养12h后,此时效价最高,说明RDP-CJ-22002的最佳感染复数为1∶10。
表4最佳感染复数实验结果表
实施例6空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002一步生长曲线
1、实验方法:
取对数生长期的菌悬液,按照最佳感染复数的比例接种空肠弯曲菌BSJ-22002和噬菌体RDP-CJ-22002,在42℃的条件下,水浴10min,然后常温下12000r/min离心5min,弃上清液,除去未吸附在宿主上的游离噬菌体,如此用液体培养基洗涤两次。再将沉淀重悬于42℃的液体培养基中,迅速置于42℃微氧环境下。定点取样测定其效价,以时间为横坐标,噬菌体效价对数值为纵坐标,绘制生长曲线,得出噬菌体的潜伏期、裂解期,并计算出平均裂解量。平均裂解量=爆发末期噬菌体滴度/感染初期宿主菌浓度。
2、实验结果:
实验结果如图6所示,该噬菌体感染宿主菌后,40min效价没有明显变化,说明其潜伏期约为40min;噬菌体侵染宿主菌后的40-120min内,噬菌体数量急剧增加,可见噬菌体的裂解期约为80min;在随后的360min内,噬菌体数量基本不变,进入稳定生长期。最后计算出平均裂解量为106PFU/感染细胞。
实施例7空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002裂解率实验
1、实验方法:
无菌条件下,分别取1mL样品和1mL宿主菌菌液(1×105CFU/mL),32℃孵育15分钟,混匀后用生理盐水稀释至10-1-10-3个梯度,每个梯度取100μL涂布于固体平板上,42℃,微氧条件下培养48h。每个梯度重复两次。同时取1mL生理盐水和1mL宿主菌菌液(1×105CFU/mL)作为空白对照,重复以上步骤。选取30-300个菌落数的平板进行计数。该试验重复3次,取其平均值。噬菌体裂解率=(1-处理组菌落数/对照组菌落数)×100%。
2、实验结果:
实验结果显示,噬菌体RDP-CJ-22002的裂解率达99.3%,对宿主有较好的裂解效果,适合在养殖过程中使用。
实施例8空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002的应用
1、实验方法:
本实验通过考察噬菌体与抗生素的协同作用,提高抗生素的敏感性,降低抗生素用量。
用LB培养基配制抗生素溶液,其中氟苯尼考、多西环素、黏菌素、泰乐军属、新霉素浓度为0.1024%,其余抗生素浓度为1.024%。于96孔板中先加入100μL灭菌LB培养基,于第1列孔中分别加入配好的100μL,依次倍比稀释至第11列,弃去,最后一列为阳性对照。再分别加入100μL纯化菌株菌悬液(增殖液稀释100倍)和再分别加入100μL菌和噬菌体RDP-CJ-22002,于42℃微氧条件下培养48h。空肠弯曲菌在96孔板中没有增殖的、透亮的孔判定为最小抑菌浓度(MIC)。
2、实验结果:
实验结果显示,如表5所示,空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002与抗生素有较好的协同作用,可以将其MIC降低至原来的1/4-1/8,这在禽类养殖过程中,可以大幅减少抗生素的使用量,提高养殖效益,保障食品健康。
表5噬菌体与抗生素的协同作用实验结果
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一株高裂解率空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002,其特征在于,其保藏编号为CGMCCNO.45406。
2.一种杀菌组合物,其特征在于,包括如权利要求1所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002。
3.根据权利要求2所述的杀菌组合物,其特征在于,还包括用于抗空肠弯曲菌的抗生素。
4.根据权利要求3所述的杀菌组合物,其特征在于,所述抗生素包括β-内酰胺类、氨基糖类、四环素类、大环内酯类、林可胺类、多肽类、多磷类中的任意一种;优选的,所述抗生素包括阿莫西林、安普霉素、阿米卡星、新霉素、单硫酸卡那霉素、多西环素、氟苯尼考、金霉素、土霉素、泰乐菌素、替米考星、林可霉素、黏菌素、磷霉素钠中的任意一种。
5.根据权利要求1所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002或者权利要求3所述的杀菌组合物在制备预防和治疗空肠弯曲菌感染的疾病的药物中的用途。
6.根据权利要求1所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002或者权利要求3所述的杀菌组合物在制备预防和治疗空肠弯曲菌感染的疾病的饲料中的用途。
7.一种噬菌体制剂,其特征在于,所述噬菌体制剂的有效成分包括如权利要求1所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002。
8.一种饲料添加剂,其特征在于,所述饲料添加剂的有效成分包括如权利要求1所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002或者权利要求3所述的杀菌组合物。
9.一种饲料,其特征在于,所述饲料包含权利要求8所述的饲料添加剂。
10.一种消毒剂,其特征在于,所述消毒剂的有效成分包括如权利要求1所述的空肠弯曲杆菌噬菌体RDP-CJ-22002。
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