CN117987242A - Svf细胞分离装置及方法 - Google Patents

Abstract

本发明揭示了一种SVF细胞分离装置及方法，包括管体，管体由位于中间段的收集管以及分别位于收集管两端的支撑部，两个支撑部内分别设置有可相对其旋转的消化管和分离管；消化管包括入口和出口，消化管的管体内设有消化珠；分离管包括出液口和进液口；收集管包括收容腔及第一开口和第二开口；消化管和/或分离管相对收集管旋转，使出口与第一开口和/或进液口与第二开口连通或错位设置，实现消化管和/或分离管与收集管连通或隔断；收集管的侧壁上设置有便于提取SVF细胞的肝素帽。SVF细胞提取率高，在消化管内设置有消化珠，消化过程中，脂肪组织样本和消化珠接触可加快脂肪组织样本中的固体杂质与油脂和细胞悬液的分离，提高提取效率。

Description

SVF细胞分离装置及方法

技术领域

本发明属于医疗器械技术领域，尤其是涉及一种SVF细胞分离装置及方法。

背景技术

SVF（Stromal Vascular Fraction），学名“血管基质组分”，是从人体抽取的脂肪组织中提取的，含有多种具有修复功能的细胞以及细胞因子混合物形成的异质细胞群。

SVF 富集了特定种群的间充质干细胞; 造血、脂肪和内皮祖细胞; 以及免疫细胞、成纤维细胞、周细胞、内皮细胞和其他未表征的细胞。由于其强大的治疗潜力，较为简便的分离过程，较高的产量和临床使用上较小的伦理风险，SVF 已迅速获得全球关注，并在糖尿病、骨关节炎、外周动脉病等疾病的治疗以及脂肪填充、器官移植等领域中展示了强大的作用。

SVF细胞的制备工艺主要分为酶消化法和机械乳化法，许多使用酶或非酶脂肪组织来源的细胞分离的可用系统已经上市。其中酶消化法能够收获得更多数量和更高活性，是当前临床研究中普遍使用的方法。具体可参考现有专利CN108004207B，名称为“从脂肪中获取大量脂肪间充质干细胞的方法”，简而言之，酶消化法即是对抽脂所得的，经过清洗的脂肪组织进行消化酶处理，在37°C孵育一段时间后通过离心等方法收获其中的细胞组分。传统的酶消化法主要由人工操作完成，在开放式环境下通过离心管及移液设备进行。操作步骤繁琐且复杂，对操作人员资质要求高，操作过程细胞损耗较大，有污染风险并且人工操作带来的批次差异大。

为解决上述问题，现有专利CN218755728U，名称为“一种脂肪组织消化提取SVF细胞装置”提出了通过装置提高SVF细胞的分离率和培养效率，且相对人工操作而言，该现有专利对脂肪净化程度更高且操作更简单快捷。该现有技术是通过向分离器中注入脂肪组织和生理盐水，且在脂肪组织混合物在注入过程中由钢条筛网进行初步分离；分离液在自重作用下进入消化器中，并在该过程中再次经过筛网过滤出细小杂质，并将废液自与消化器连通的废液排出管排出；再将过滤后的油脂和细胞悬液与消化酶混合溶液接触进行消化，并在消化结束后再与生理盐水接触；消化液进入与消化器连通的分离纯化器中进行离心分离操作。根据该现有技术揭示的内容，先发现如下不足点：1、由于该装置具有垂直设置的分离器和消化器及分离纯化器，所以其体积较大，操作不方便。2、脂肪组织与生理盐水混合后出现的小凝血块、脂肪碎片、纤维组织块等杂质，这些杂质可能会堵塞钢条筛网的网孔，影响分离液进入消化器中的细胞量，存在较多细胞损失的情况，进而影响提取到的SVF细胞的分离得率。3、经过初步分离操作后，废液和有效分离液均存在于消化器中，直接打开废液排出管排液过程中存在将有效分离液排出的风险，进一步影响SVF细胞的提取率。

所以，设计一种小体积高提取率的SVF细胞分离装置及方法是目前本领域技术人员所要解决的重要技术问题。

发明内容

本发明的目的就是为了解决现有技术中存在的上述问题，提供一种SVF细胞分离装置及方法。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：

SVF细胞分离装置，包括管体，所述管体由三部分组成，位于中间段的收集管以及分别位于所述收集管两端的支撑部，两个所述支撑部内分别设置有可相对其旋转的消化管和分离管；所述消化管包括设置在其顶部的便于脂肪组织进入其管体内的入口和与其旋转轴线偏置的出口，所述消化管的管体内设有消化珠；所述分离管包括设置在其底部的出液口和设置在其顶部并与所述分离管旋转轴线偏置的进液口；所述收集管包括收容腔及位于所述收容腔两端并与其连通的第一开口和第二开口；所述消化管和/或所述分离管相对所述收集管旋转，使所述出口与所述第一开口和/或所述进液口与所述第二开口连通或错位设置，实现所述消化管和/或所述分离管与所述收集管连通或隔断；所述收集管的侧壁上设置有肝素帽，SVF细胞自所述肝素帽的穿刺口被提取。

优选的，所述收集管的内径小于所述消化管和所述分离管的半径；且所述收集管的轴线与所述管体的轴线偏置。

优选的，所述第一开口与所述出口之间设置有过滤组件；所述过滤组件包括粗过滤网和细过滤网。

优选的，所述消化管与所述管体之间、所述分离管与所述管体之间均设置有硅胶垫，所述硅胶垫上设置有与所述出口对应的通孔。

优选的，所述消化管与所述分离管上均形成有锥形圆周面，所述锥形圆周面的端部与所述出口或进液口连通；所述锥形圆周面端部的外周设置有密封面，且所述密封面与所述硅胶垫平行设置。

优选的，所述消化管与所述管体，及所述分离管与所述管体之间设置有限定其旋转幅度的限位组件；使所述消化管和/或所述分离管与所述收集管完全连通或完全封闭。

优选的，所述消化管与所述分离管远离所述收集管的一端均设置有端盖，所述端盖上设置有排气孔和盖帽；所述排气孔内设置有透气膜；所述盖帽与所述入口或所述出液口对应。

优选的，所述肝素帽的外端不超过所述管体的外壁。

SVF细胞分离方法，包括上述任一所述的SVF细胞分离装置，及如下步骤，

S1，旋转所述消化管，使其和所述收集管隔离；

S2，将脂肪组织样本和消化酶混合溶液自所述入口进入所述消化管中，并将所述管体放入恒温摇床中进行消化操作；

S3，旋转所述消化管，使其和所述收集管及分离管连通，并将所述管体放入离心机中进行离心操作，此时所述消化管位于所述分离管的上方；

S4，油脂和细胞悬液经过所述过滤组件进入所述分离管中；

S5，旋转所述消化管，使其和所述收集管隔离；

S6，将所述管体旋转180°置于离心机中进行离心操作，使得油脂和细胞悬液实现分层，且位于上层的油脂层存储于所述分离管中；

S7，旋转所述分离管，使其和所述收集管隔离，自所述出液口处排出所述分离管内的油脂层；

S8，自所述肝素帽的穿刺口提取所述收集管内的SVF细胞层。

优选的，所述步骤S7至S8之间可选择地进行以下步骤：

S7.1，向所述分离管内注入50±5ml的洗涤液；

S7.2，旋转所述分离管，使其和所述收集管连通；

S7.3，翻转摇晃所述管体，使洗涤液与SVF细胞充分混合；

S7.4，将所述收集管在上的所述管体放入离心机进行离心操作；

S7.5，旋转所述分离管，使其和所述收集管隔离，自所述出液口处排出所述分离管内的废液。

S7.6，重复上述步骤S7.1至步骤S7.5，直至洗涤结束。

本发明技术方案的优点主要体现在：

SVF细胞提取率高，提取操作在同一轴线方向实现，分别通过固液分离，液体分离将不同的固液杂质分别存储于消化管和分离罐内，保证脂肪组织样本内的SVF细胞均可有效且快速进入收集管内，并从收集管上提取所需所有干细胞，提高干细胞的提取率以及干细胞纯度；

SVF细胞提取效率高，在消化管内设置有消化珠，在消化过程中，脂肪组织样本与消化酶混合溶液和消化珠接触可加快脂肪组织样本中的小凝血块、脂肪碎片、纤维组织块等固体杂质与油脂和细胞悬液的分离，在消化管中形成固液混合样本，提高提取效率；在固液分离时通过离心机可有效防止固体杂质和消化珠阻塞出口，保证所有分离液均可快速且有效地进入分离管中；

通过过滤组件可将脂肪组织样本中的固体杂质与油脂和细胞悬液分离，保证进入分离管中的油脂和细胞悬液的纯度；

装置整体体积小，消化管、分离管和收集管整体处于同一轴线上，使得装置整体占地面积小，同时方便操作，一定程度上提高了提取效率；

通过硅胶垫及密封面可有效地将消化管与收集管或分离管与收集管分离，并保证管体之间的密封性，进而提高SVF细胞的提取纯度和体量。

附图说明

图1：本发明优选实施例的立体图；

图2：本发明优选实施例的爆炸图；

图3：本发明优选实施例的截面图。

具体实施方式

本发明的目的、优点和特点，将通过下面优选实施例的非限制性说明进行图示和解释。这些实施例仅是应用本发明技术方案的典型范例，凡采取等同替换或者等效变换而形成的技术方案，均落在本发明要求保护的范围之内。

在方案的描述中，需要说明的是，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“前”、“后”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。并且，在方案的描述中，以操作人员为参照，靠近操作者的方向为近端，远离操作者的方向为远端。

如图1至图3所示，本发明揭示了一种SVF细胞分离装置，包括管体100，所述管体100由三部分组成，位于中间段的收集管3以及分别位于所述收集管3两端的支撑部103，两个所述支撑部103内分别设置有可相对其旋转的消化管1和分离管2。如图1或图3所示，本申请优选将所述消化管1与所述分离管2的高度设计成大于所述支撑部103的高度。所述消化管1与所述管体100，及所述分离管2与所述管体100之间设置有限定其旋转幅度的限位组件123；使所述消化管1和/或所述分离管2与所述收集管3完全连通或完全封闭。所述限位组件123具体包括设置于所述支撑部103上且突出于其端部的挡块110，及设置于所述消化管1和所述分离管2的侧壁上并突出于其外表面的凸块120。旋转所述消化管1或所述分离管2时，当所述凸块120与所述挡块110抵接，使所述消化管1和/或所述分离管2与所述收集管3完全连通；当所述凸块120与所述挡块110不接触时，则所述消化管1或所述分离管2与所述收集管3逐渐隔离，直至完全封闭。

进一步的，所述凸块120至少设置有一个，具体数量可根据使用需求进行调整，在此不做限定。在本申请中优选设置有两个，当两个所述凸块120分别与所述挡块110抵接时可使得所述消化管1或所述分离管2与所述收集管3完全连通或完全封闭。

此外，所述限位组件123还可以设计成相互匹配的凹凸结构，通过凹凸结构的卡接和相对移动实现所述消化管1和所述分离管2与所述管体100的旋转及限位，以限定所述消化管1和所述分离管2的旋转范围，并通过卡接确定所述消化管1和所述分离管2与所述收集管3是否连通。

如图2至图3所示，所述消化管1包括设置在其顶部的便于脂肪组织进入其管体内的入口101和与其旋转轴线偏置的出口102。所述分离管2包括设置在其底部的出液口202和设置在其顶部并与所述分离管2旋转轴线偏置的进液口201。所述收集管3包括收容腔及位于所述收容腔两端并与其连通的第一开口301和第二开口302。所述第一开口301与所述第二开口302在本申请中优选同轴设置，当然在其他实施例中两者可非同轴设置，且两者的侧壁均与所述管体100的轴线相切设置。

进一步的，所述收集管3的内径小于所述消化管1和所述分离管2的半径；且所述收集管3的轴线与所述管体100的轴线偏置；即所述第一开口301与所述第二开口302均偏心设置于所述管体100的轴线处。当所述消化管1和/或所述分离管2相对所述收集管3旋转，使所述出口102与所述第一开口301和/或所述进液口201与所述第二开口302连通或错位设置，实现所述消化管1和/或所述分离管2与所述收集管3连通或隔断。

如图3所示，所述消化管1的管体内设有消化珠11；一组所述消化珠11放置于所述消化管1内或错落固定于所述消化管1的内壁上。脂肪组织样本和消化酶混合溶液进入所述消化管1中，并在放入恒温摇床中进行消化过程中，脂肪组织样本与消化酶混合溶液和所述消化珠11接触后，可对脂肪组织进行研磨，提高管体的搅拌混合效率，促进消化酶混合溶液也与脂肪组织的充分接触；进而，加快脂肪组织样本中的小凝血块、脂肪碎片、纤维组织块等固体杂质与油脂和细胞悬液的形成，且固体杂质将与分离液共存于所述消化管1中，形成固液混合样本，提高提取效率。

如图2至图3所示，为防止脂肪组织样本中的固体杂质进入后续分离操作中，本申请中优选在所述第一开口301与所述出口102之间设置有过滤组件13。具体的，所述过滤组件13包括粗过滤网131和细过滤网132。所述粗过滤网131优选为钢条筛网，并设置于所述消化管1内，且靠近所述出口102的位置，保证所述消化珠11存储于所述消化管1内，且在消化珠11与脂肪组织搅拌混合过程中所述粗过滤网131不会被破坏，进而影响所述细过滤网132的正常使用；所述细过滤网132设置于所述收集管3内，且靠近所述第一开口301的位置。当所述消化管1与所述收集管3及所述分离管2连通时，消化管1内的固体杂质将被所述粗过滤网131隔离在所述消化管1中，而油脂和细胞悬液将在离心作用下进入流经所述收集管3并进入所述分离管2内。进一步的，分离液中的细小杂质将被所述细过滤网132隔离在所述收集管3的上方。由此可见，通过所述过滤组件13可将脂肪组织样本中的固体杂质与油脂和细胞悬液分离，保证进入所述分离管2中的油脂和细胞悬液的纯度。

此外，在固液分离过程中，由于所述管体100放置于离心机中，在离心过程中，所述消化珠11和固体杂质均不会堵塞所述消化管1的出口，可使分离液完全进入所述分离管2中，同时，所述消化珠11在离心过程中不会损坏所述粗过滤网131影响过滤效果。

如图2所示，所述消化管1与所述管体100之间、所述分离管与所述管体100之间均设置有硅胶垫14，所述硅胶垫14上设置有与所述出口102对应的通孔140。通过所述硅胶垫14对所述消化管1和所述分离管2在旋转过程中进行密封，保证密封效果，有效防止消化管1或分离管2内的部分液体掉落至所述收集管3内，影响提取纯度。

进一步的，如图2至图3所示，本申请中优选将所述消化管1与所述分离管2上均形成有锥形圆周面121，所述锥形圆周面121的端部与所述出口102或进液口201连通。在油脂和细胞悬液过程中所述锥形圆周面121可对液体起到导流作用，同时最大程度上将液体从所述消化管1或所述分离管2中导出，有效避免液体残留与所述消化管1或所述分离管2内，进而提高提取干细胞的容量。

更进一步的，如图2所示，所述锥形圆周面121端部的外周设置有密封面122，且所述密封面122与所述硅胶垫14平行设置。在出口102或所述进液口201的外周设置密封面122在旋转过程中保证消化管1和/或分离管2旋转的流畅程度，同时通过密封面122将消化管1和/或分离管2与收集管3分离，实现两两之间的有效密封，进一步增强密封效果。

如图1或图3所示，所述收集管3的侧壁上设置有肝素帽31，SVF细胞自所述肝素帽31的穿刺口被提取。进一步的，本申请中优选将所述肝素帽31的外端不超过所述管体100的外壁，以便于对所述管体100进行包装，同时保证在包装、运输及使用过程中不会折断或损坏所述肝素帽31，提高使用安全性和稳定性。

如图2所示，所述消化管1与所述分离管2远离所述收集管3的一端均设置有端盖23，所述端盖23与所述消化管1或所述分离管2同步旋转，或者所述消化管1或所述分离管2相对所述端盖23旋转。所述端盖23上设置有排气孔230和盖帽231；所述排气孔230内设置有透气膜，该透气膜具有透气不透水的作用，即在注入脂肪组织样本或消化酶混合溶液的过程中可将所述消化管1内的空气排出，或向分离管2内注入生理盐水的过程中将所述分离管2内的空气排出。所述盖帽231与所述入口101或所述出液口202对应，且所述盖帽231上居中设置有便于刺破的橡胶体。

本申请还揭示了一种SVF细胞分离方法，包括上述任一所述的SVF细胞分离装置，其具体操作步骤如下，

S1，旋转所述消化管1，使其和所述收集管3隔离；此时所述消化管1上的出口102与所述收集管3上的第一开口301错位设置，且所述第一开口301的上方由所述消化管1的密封面122堵塞。

S2，将脂肪组织样本和消化酶混合溶液自所述入口101进入所述消化管1中，并将所述管体100放入恒温摇床中进行消化操作。本申请中优选向所述消化管1中注入70±5ml的脂肪组织样本，且摇床温度优选为37℃。消化过程中脂肪组织样本与所述消化管1内的消化珠11接触，使其快速实现固液分离，以提高提取效率。

S3，旋转所述消化管1，使其和所述收集管3及分离管2连通，并将所述管体100放入离心机中进行离心操作；此时，所述消化管1位于所述分离管2的上方，且所述消化管1被打开，其出口102与所述第一开口301连通。

S4，油脂和细胞悬液经过所述过滤组件13进入所述分离管2中。经实验表明，经过固液分离后的油脂和细胞悬液容量为50±5ml。

S5，旋转所述消化管1，使其和所述收集管3隔离。

S6，将所述管体100旋转180°置于离心机中进行离心操作，使得油脂和细胞悬液实现分层，且位于上层的油脂层存储于所述分离管2中；具体的，离心操作后所述分离管2中自上而下依次形成有油脂层、液体层和干细胞层，所以位于最下方的干细胞层将自动落入所述收集管3中，同时部分液体层将充斥所述收集管3内。

S7，旋转所述分离管2，使其和所述收集管3隔离，自所述出液口202处排出所述分离管2内的油脂层；同时剩余在所述分离管2中的液体层（细胞悬液层）也将自所述出液口202处被抽离。在其他实施例中，由于油脂层及剩余在所述分离管2内的部分液体后续操作中不需要使用，可以在所述分离管2与所述收集管3隔离后直接将其作为废液直接排出或遗弃即可。

S8，自所述肝素帽31的穿刺口提取所述收集管3内的SVF细胞层。通过注射器穿刺所述肝素帽31进行抽吸以提取所述SVF细胞层。

相比人工，上述操作可以降低操作过程中的细胞损耗。

此外，所述分离管2内存储有其自带的清洗液，也可以在上述步骤开始前，将所述分离管2中自带的清洗液从所述出液口202处排出，再更换成其他包括生理盐水在内的清洗液，再进行上述操作步骤即可。

为快速高效地提取SVF细胞层，可在步骤S8之前摇晃所述管体100，使所述收集管3中的SVF细胞层中的分层消失，形成均匀的干细胞混合液，以便于所有干细胞的提取。

为进一步提升最终提取的SVF细胞的洁净度和活力，可在上述步骤S7至S8之间进行如下步骤：

S7.1，向所述分离管2内注入50±5ml的洗涤液（生理盐水）。

S7.2，旋转所述分离管2，使其和所述收集管3连通。

S7.3，翻转摇晃所述管体100，使洗涤液与SVF细胞充分混合。

S7.4，将所述收集管3在上的所述管体放入离心机进行离心操作。

S7.5，旋转所述分离管2，使其和所述收集管3隔离，自所述出液口202处排出所述分离管2内的废液。

S7.6，重复上述步骤S7.1至步骤S7.5，直至洗涤结束。可根据操作要求进行2-3次或多次洗涤，洗涤次数在此不做限定。

上述步骤若采用人工方式进行，则是将样品液放在离心管中离心，结束后需要用移液枪吸弃上层的废液。而这种操作方式在使用移液枪吸取液体的时候容易扰动到底层的细胞沉淀，从而造成损失。所以本申请是通过旋转封闭收集管和分离管，以实现细胞浓缩液和废液的分离，产生的垂直于沉淀层的液流很小，会很大程度上降低细胞损耗。

本发明尚有多种实施方式，凡采用等同变换或者等效变换而形成的所有技术方案，均落在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.SVF细胞分离装置，其特征在于：包括管体（100），所述管体（100）由三部分组成，位于中间段的收集管（3）以及分别位于所述收集管（3）两端的支撑部（103），两个所述支撑部（103）内分别设置有可相对其旋转的消化管（1）和分离管（2）；所述消化管（1）包括设置在其顶部的便于脂肪组织进入其管体内的入口（101）和与其旋转轴线偏置的出口（102），所述消化管（1）的管体内设有消化珠（11）；所述分离管（2）包括设置在其底部的出液口（202）和设置在其顶部并与所述分离管（2）旋转轴线偏置的进液口（201）；所述收集管（3）包括收容腔及位于所述收容腔两端并与其连通的第一开口（301）和第二开口（302）；所述消化管（1）和/或所述分离管（2）相对所述收集管（3）旋转，使所述出口（102）与所述第一开口（301）和/或所述进液口（201）与所述第二开口（302）连通或错位设置，实现所述消化管（1）和/或所述分离管（2）与所述收集管（3）连通或隔断；所述收集管（3）的侧壁上设置有肝素帽（31），SVF细胞自所述肝素帽（31）的穿刺口被提取。

2.根据权利要求1所述的SVF细胞分离装置，其特征在于：所述收集管（3）的内径小于所述消化管（1）和所述分离管（2）的半径；且所述收集管（3）的轴线与所述管体（100）的轴线偏置。

3.根据权利要求1所述的SVF细胞分离装置，其特征在于：所述第一开口（301）与所述出口（102）之间设置有过滤组件（13）；所述过滤组件（13）包括粗过滤网（131）和细过滤网（132）。

4.根据权利要求1所述的SVF细胞分离装置，其特征在于：所述消化管（1）与所述管体（100）之间、所述分离管与所述管体（100）之间均设置有硅胶垫（14），所述硅胶垫（14）上设置有与所述出口（102）对应的通孔（140）。

5.根据权利要求4述的SVF细胞分离装置，其特征在于：所述消化管（1）与所述分离管（2）上均形成有锥形圆周面（121），所述锥形圆周面（121）的端部与所述出口（102）或进液口（201）连通；所述锥形圆周面（121）端部的外周设置有密封面（122），且所述密封面（122）与所述硅胶垫（14）平行设置。

6.根据权利要求1所述的SVF细胞分离装置，其特征在于：所述消化管（1）与所述管体（100），及所述分离管（2）与所述管体（100）之间设置有限定其旋转幅度的限位组件（123）；使所述消化管（1）和/或所述分离管（2）与所述收集管（3）完全连通或完全封闭。

7.根据权利要求1所述的SVF细胞分离装置，其特征在于：所述消化管（1）与所述分离管（2）远离所述收集管（3）的一端均设置有端盖（23），所述端盖（23）上设置有排气孔（230）和盖帽（231）；所述排气孔（230）内设置有透气膜；所述盖帽（231）与所述入口（101）或所述出液口（202）对应。

8.根据权利要求1的SVF细胞分离装置，其特征在于：所述肝素帽（31）的外端不超过所述管体（100）的外壁。

9.SVF细胞分离方法，其特征在于：包括权利要求1-8任一所述的SVF细胞分离装置，及如下步骤，

S1，旋转所述消化管（1），使其和所述收集管（3）隔离；

S2，将脂肪组织样本和消化酶混合溶液自所述入口（101）进入所述消化管（1）中，并将所述管体（100）放入恒温摇床中进行消化操作；

S3，旋转所述消化管（1），使其和所述收集管（3）及分离管（2）连通，并将所述管体（100）放入离心机中进行离心操作，此时所述消化管（1）位于所述分离管（2）的上方；

S4，油脂和细胞悬液经过过滤组件（13）进入所述分离管（2）中；

S5，旋转所述消化管（1），使其和所述收集管（3）隔离；

S6，将所述管体（100）旋转180°置于离心机中进行离心操作，使得油脂和细胞悬液实现分层，且位于上层的油脂层存储于所述分离管（2）中；

S7，旋转所述分离管（2），使其和所述收集管（3）隔离，自所述出液口（202）处排出所述分离管（2）内的油脂层；

S8，自所述肝素帽（31）的穿刺口提取所述收集管（3）内的SVF细胞层。

10.根据权利要求9的SVF细胞分离方法，其特征在于：所述步骤S7至S8之间可选择地进行以下步骤：

S7.1，向所述分离管（2）内注入50±5ml的洗涤液；

S7.2，旋转所述分离管（2），使其和所述收集管（3）连通；

S7.3，翻转摇晃所述管体（100），使洗涤液与SVF细胞充分混合；

S7.4，将所述收集管（3）在上的所述管体放入离心机进行离心操作；

S7.5，旋转所述分离管（2），使其和所述收集管（3）隔离，自所述出液口（202）处排出所述分离管（2）内的；

S7.6，重复上述步骤S7.1至步骤S7.5，直至洗涤结束。