CN117947029A - 一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸及其应用 - Google Patents
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Abstract
本申请提供了一种靶向JAK1mRNA的反义寡核苷酸，所述反义寡核苷酸的序列包括：核糖核酸序列、脱氧核糖核酸序列、核糖核酸与脱氧核糖核酸的嵌合体序列中的一种或多种；所述反义寡核苷酸的序列与SEQ ID NO：1‑SEQ ID NO：3任一所示的序列互补配对；并提供了其应用。与现有技术相对比，本申请具有以下优点：本发明提供的靶向JAK1mRNA的反义寡核苷酸，能够有效降低炎症状态下细胞中JAK1的表达量，减轻炎症状态进而治疗肠道炎症。
Description
技术领域
本申请涉及基因药物技术领域，具体涉及一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸及其应用。
背景技术
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)作为炎症性肠病的亚型之一，是一种慢性的，易复发的胃肠道炎症性疾病。我国现有的流行病学资料统计数据显示，溃疡性结肠炎患病率、发病率均呈上升趋势，已成为我国的常见病和多发病。UC病因和发病机制比较复杂，其诊断和治疗都相当棘手，现有治疗手段很难将其完全治愈，同时也增加了患者罹患结直肠癌的风险，严重危害患者的生命健康。
在肠道炎症期间，巨噬细胞表现出促炎表型并分泌趋化因子和促炎细胞因子，包括肿瘤坏死因子TNFα、白细胞介素IL6、IL-12和IL-23，在肠道部位阻断JAK1的功能可以缓解UC患者肠道炎症。Janus激酶(JAK)家族是一类与细胞因子受体组成性相关的非受体酪氨酸激酶家族，JAK1在免疫系统的重要信号转导中起着枢纽作用，对免疫功能有重要影响。JAK1过度活跃是炎症性疾病的潜在驱动因素之一。目前，针对JAK1的小分子抑制剂和抗体等已经被广泛用于溃疡性结肠炎的治疗。已经上市的药物托法替尼已被投入到炎症性肠病的治疗中。但是使用JAK1抑制剂治疗存在一些安全隐患，包括白细胞数量减少，从而导致严重感染、恶性肿瘤的风险增加。主要是由于抑制JAK1的同时也抑制了宿主防御功能而引起全身性免疫抑制。
核酸药物包括反义核酸(ASO)、干扰RNA和微小RNA等，作为一种新型的抑制基因表达的技术，给肠炎、肠癌等疾病治疗带来了新的契机和全新的治疗理念。核酸药物已被广泛用于肠炎、肠癌及其并发症的模型治疗研究，并取得了较好的效果，但目前临床尚无靶向JAK1反义寡核苷酸获批。
发明内容
针对上述存在的技术局限性，本申请提出了一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸及其应用；其克服了背景技术中提到的不足和缺陷，有希望开发出能够以更低用量抑制JAK1的表达、能够安全广泛地在炎症性肠病中使用的新的核酸药物。
为实现上述目的，本申请采用了以下技术方案：
本申请的发明点是提供一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，所述反义寡核苷酸的序列包括：核糖核酸序列、脱氧核糖核酸序列、核糖核酸与脱氧核糖核酸的嵌合体序列中的一种或多种；所述反义寡核苷酸的序列与SEQ ID NO：1-SEQ ID NO：3任一所示的序列互补配对。
SEQ ID NO：1：AAUCUCGGGAUCCAGUGGCG；
SEQ ID NO：2：CUCCGGGAAGAGUGGAACAA；
SEQ ID NO：3：CCAUUCGGGACCCCAAGACG。
可选地，上述的一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，所述反义寡核苷酸的序列选自SEQ ID NO：4-SEQ ID NO：6中的一条或多条；优选为SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5组合使用、SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：6组合使用、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6组合使用以及SEQID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6组合使用。
SEQ ID NO：4：CGCCACTGGATCCCGAGATT；
SEQ ID NO：5：TTGTTCCACTCTTCCCGGAG；
SEQ ID NO：6：CGTCTTGGGGTCCCGAATGG。
可选地，上述的一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，所述反义寡核苷酸上至少有一个核苷酸进行了化学修饰；所述化学修饰位于核苷酸的核糖部分和/或磷酸酯键部分。
可选地，上述的一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，所述反义寡核苷酸上磷酸酯键部分进行的化学修饰为硫代修饰。
可选地，上述的一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，所述反义寡核苷酸上核糖部分进行的化学修饰为2-OMe、2’-OCHCHOMe或2’-F修饰。
可选地，上述的一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，所述反义寡聚核苷酸的5’末端和/或3’末端含有或不含有化学修饰，所述化学修饰包括氨基化修饰、羧基化修饰、巯基化修饰或N-乙酰半乳糖胺修饰。
本申请的第二个发明点是提供了一种靶向JAK1 mRNA的组合物/药物制剂，所述组合物/药物制剂中，包括有上述的反义寡核苷酸和药用载体。
可选地，上述的组合物/药物制剂，所述药用载体包括糖、聚胺、氨基酸、肽和脂质中的至少一种。
本申请的第三个发明点是提供了上述反义寡核苷酸、上述组合物/药物制剂在制备靶向沉默细胞/组织中JAK1基因或抑制细胞/组织中JAK1基因表达的药物中的应用。
可选地，上述的应用，所述细胞为炎症状态巨噬细胞；优选为引起溃疡性结肠炎的炎症状态巨噬细胞；所述组织为肠组织。
与现有技术相对比，本申请具有以下优点：
本发明提供的靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，能够有效降低炎症状态下细胞中JAK1的表达量，减轻炎症状态进而治疗肠道炎症。本发明首先根据鼠源JAK1基因的mRNA序列(NM_146145.2)进行了RNA结构模拟，并选取结构最为松散的区域进行了反义寡核苷酸序列的设计与合成，所得序列可以结合JAK1 mRNA序列并导致RNA降解；基于此作用，本发明中的序列可以作为核酸药物，用于阻断肠道部位JAK1的合成，实现治疗肠道炎症的目的。
附图说明
图1显示为JAK1 mRNA的二级结构模拟图。
图2显示为靶向JAK1反义寡核苷酸高效序列的筛选结果图，纵坐标为JAK1 mRNA相对表达量，阴性对照为不做任何处理的细胞。
图3显示为本申请一实施例中，不同反义寡核苷酸组合作用后，提取细胞的RNA使用反转录聚合酶链式反应测定mRNA表达的结果。
图4显示为本申请一实施例中，采用硫代反义寡核苷酸作用后，提取细胞的RNA使用反转录聚合酶链式反应测定mRNA表达的结果。
图5显示为本申请一实施例中，采用核糖修饰的反义寡核苷酸作用后，提取细胞的RNA使用反转录聚合酶链式反应测定mRNA表达的结果。
图6显示为本申请一实施例中，采用5’末端和3’末端修饰的反义寡核苷酸作用后，提取细胞的RNA使用反转录聚合酶链式反应测定mRNA表达的结果。
具体实施方式
为使本申请的目的、技术方案和优点更加清楚明了，下面对本申请进行进一步详细说明。但是应该理解，此处所描述仅仅用以解释本申请，并不用于限制本申请的范围。
除非另有定义，本文所使用的所有的技术术语和科学术语与属于本申请的技术领域的技术人员通常理解的含义相同，本文中在本申请的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在限制本申请。本文中所使用的试剂和仪器均商购可得，所涉及的表征手段均可参阅现有技术中的相关描述，本文中不再赘述。
为了进一步了解本申请，下面结合最佳实施例对本申请作进一步的详细说明。
实施例1
一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，其序列包括：核糖核酸序列、脱氧核糖核酸序列、核糖核酸与脱氧核糖核酸的嵌合体序列中的一种或多种；反义寡核苷酸的序列与SEQID NO：1-SEQ ID NO：3任一所示的序列互补配对。
SEQ ID NO：1：AAUCUCGGGAUCCAGUGGCG；
SEQ ID NO：2：CUCCGGGAAGAGUGGAACAA；
SEQ ID NO：3：CCAUUCGGGACCCCAAGACG。
反义寡核苷酸的序列选自SEQ ID NO：4-SEQ ID NO：6中的一条或多条；优选为SEQID NO：4和SEQ ID NO：5组合使用、SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：6组合使用、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6组合使用以及SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6组合使用。
SEQ ID NO：4：CGCCACTGGATCCCGAGATT；
SEQ ID NO：5：TTGTTCCACTCTTCCCGGAG；
SEQ ID NO：6：CGTCTTGGGGTCCCGAATGG。
反义寡核苷酸上至少有一个核苷酸进行了化学修饰；化学修饰位于核苷酸的核糖部分和/或磷酸酯键部分。
反义寡核苷酸上磷酸酯键部分进行的化学修饰为硫代修饰。
反义寡核苷酸上核糖部分进行的化学修饰为2-OMe、2’-OCHCHOMe或2’-F修饰。
反义寡聚核苷酸的5’末端和/或3’末端含有或不含有化学修饰，所述化学修饰包括氨基化修饰、羧基化修饰、巯基化修饰或N-乙酰半乳糖胺修饰。
本申请还提供了一种靶向JAK1 mRNA的组合物/药物制剂，所述组合物/药物制剂中，包括有上述的反义寡核苷酸和药用载体。
药用载体包括糖、聚胺、氨基酸、肽和脂质中的至少一种。
本申请还提供了上述反义寡核苷酸、上述组合物/药物制剂在制备靶向沉默细胞/组织中JAK1基因或抑制细胞/组织中JAK1基因表达的药物中的应用。
细胞为炎症状态巨噬细胞；优选为引起溃疡性结肠炎的炎症状态巨噬细胞；组织为肠组织。
实施例2
靶向JAK1基因的反义核酸序列设计：
使用RNA结构分析软件(http：//rna.tbi.univie.ac.at/cgi-bin/RNAWebSuite/RNAfold.cgi)分析JAK1的基因编码的mRNA二级结构(图1)，mRNA在生理条件下(36-38℃)，由于碱基互补配对原则，自身碱基对之间形成氢键导致mRNA环化，但由于mRNA，首尾碱基并非完全配对，因此在条带中部形成多个未配对的碱基。基于未形成配对的碱基序列设计能与之结合的反义寡核苷酸，用来阻断该mRNA后续的翻译，以达到治疗炎症性肠病的目的。
反义核酸及硫代修饰委托上海生工生物公司进行，具体硫代修饰方法采用文献“Sully，E.K.，and Geller，B.L.(2016).Antisense antimicro bialtherapeutics.Current Opinion in Microbiology 33，47-55.”中公开的方法。
表1显示为靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸序列设计结果。
表1
| 序号 | 序列(5’-3’) |
| ASO1 | CGCCACTGGATCCCGAGATT |
| ASO2 | TTGTTCCACTCTTCCCGGAG |
| ASO3 | CGTCTTGGGGTCCCGAATGG |
实施例3
小鼠巨噬细胞的提取以及炎症状态巨噬细胞的制备
从集萃药康公司获得9只体重35-45g的正常雄性C57BL/6J小鼠。以每笼3只圈养，把小鼠安置在南京大学的动物中心。并在进入研究前适应环境至少三天。动物室设置为每小时保持最少12至15次换气，自动计时器开启/关闭12小时的明/暗循环，给小鼠饮用正常无菌水。
小鼠脱颈处死后浸泡于装有75％酒精的烧杯内，约5分钟，用剪刀从腹部中线剪开，并斜向下剪开腿部皮肤，分离双腿，剔除腿部肌肉组织及其他软组织，并去掉腓骨；用2mL注射器吸取无血清的1640培养基，将针头刺入骨髓腔，反复冲骨髓至骨髓变白，将骨髓冲洗液加入到50mL离心管中，1000rpm离心5min；将离心得到的骨髓巨噬细胞用含M-CSF(10ng/mL)和含10％血清的1640培养基重悬后分装到细胞培养瓶中，置于5％ CO2 37℃培养3天；弃上清，换含M-CSF(10ng/mL)和含10％血清的1640培养基继续培养4天。向培养体系中加入终浓度为500ng/ml的LPS刺激24小时，即得炎症状态巨噬细胞。
实施例4
高效序列筛选
使用LipofectamineTM2000(Invitrogen公司)在24孔板上培养炎症状态巨噬细胞用于转染ASO。配置A液：用100μl不含血清的Opi-MEM培养基(gibco)稀释JAK1反义寡聚核苷酸，终浓度为200nM，混匀，每组设置三孔。配置B液：取2μl LipofectamineTM2000稀释到100μl的Opi-MEM培养基中，轻轻混匀后在室温下孵育5min后，A液和B液混匀，并静置20min。按每孔AB混合液200μl加入到预先加入300μl Opi-MEM培养基的孔板中。37℃，5％CO2培养箱孵育6h，更换含10％胎牛血清的培养基继续培养24h。提取细胞的RNA使用反转录聚合酶链式反应测定mRNA表达。
实施例5
反义寡核苷酸组合在细胞中的应用
使用LipofectamineTM2000(Invitrogen公司)在24孔板上培养炎症状态巨噬细胞用于转染ASO。配置A液：用100μl不含血清的Opi-MEM培养基(gibco)稀释JAK1反义寡聚核苷酸，所用反义寡聚核苷酸为SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5为1：1、SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：6为1：1、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6为1：1、SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6为1：1：1，反义寡聚核苷酸终浓度为300nM，混匀，每组设置三孔。配置B液：取2μlLipofectamineTM2000稀释到100μl的Opi-MEM培养基中，轻轻混匀后在室温下孵育5min后，A液和B液混匀，并静置20min。按每孔AB混合液200μl加入到预先加入300μl Opi-MEM培养基的孔板中。37℃，5％CO2培养箱孵育6h，更换含10％胎牛血清的培养基继续培养24h。不同反义寡核苷酸组合作用后，提取细胞的RNA使用反转录聚合酶链式反应测定mRNA表达，如图3所示。
实施例6
硫代反义寡核苷酸在炎症状态巨噬细胞中的应用
使用LipofectamineTM2000(Invitrogen公司)在24孔板上培养炎症状态巨噬细胞用于转染硫代ASO。配置A液：用100μl不含血清的Opi-MEM培养基(gibco)稀释硫代JAK1反义寡聚核苷酸，硫代反义寡聚核苷酸终浓度为200nM，混匀，每组设置三孔。配置B液：取2μlLipofectamineTM2000稀释到100μl的Opi-MEM培养基中，轻轻混匀后在室温下孵育5min后，A液和B液混匀，并静置20min。按每孔AB混合液200μl加入到预先加入300μl Opi-MEM培养基的孔板中。37℃，5％CO2培养箱孵育6h，更换含10％胎牛血清的培养基继续培养24h。硫代反义寡核苷酸作用后，提取细胞的RNA使用反转录聚合酶链式反应测定mRNA表达，如图4所示。
实施例7
核糖修饰的反义寡核苷酸在炎症状态巨噬细胞中的应用
使用LipofectamineTM2000(Invitrogen公司)在24孔板上培养炎症状态巨噬细胞用于转染2-OMe修饰、2’-OCHCHOMe修饰或2’-F修饰的ASO。配置A液：用100μl不含血清的Opi-MEM培养基(gibco)稀释2-OMe、2’-OCHCHOMe修饰或2’-F修饰的JAK1反义寡聚核苷酸，、2’-OCHCHOMe修饰或2’-F修饰的反义寡聚核苷酸终浓度为200nM，混匀，每组设置三孔。配置B液：取2μlLipofectamineTM2000稀释到100μl的Opi-MEM培养基中，轻轻混匀后在室温下孵育5min后，A液和B液混匀，并静置20min。按每孔AB混合液200μl加入到预先加入300μl Opi-MEM培养基的孔板中。37℃，5％CO2培养箱孵育6h，更换含10％胎牛血清的培养基继续培养24h。核糖修饰的反义寡核苷酸作用后，提取细胞的RNA使用反转录聚合酶链式反应测定mRNA表达，如图5所示。
实施例8
5’末端和3’末端修饰的反义寡核苷酸在炎症状态巨噬细胞中的应用
使用LipofectamineTM2000(Invitrogen公司)在24孔板上培养炎症状态巨噬细胞用于转染5’末端和3’末端氨基化修饰、羧基化修饰、巯基化修饰或N-乙酰半乳糖胺修饰的ASO。配置A液：用100μl不含血清的Opi-MEM培养基(gibco)稀释5’末端和3’末端氨基化修饰、羧基化修饰、巯基化修饰或N-乙酰半乳糖胺修饰的JAK1反义寡聚核苷酸，5’末端和3’末端氨基化修饰、羧基化修饰、巯基化修饰或N-乙酰半乳糖胺修饰的反义寡聚核苷酸终浓度为200nM，混匀，每组设置三孔。配置B液：取2μl LipofectamineTM2000稀释到100μl的Opi-MEM培养基中，轻轻混匀后在室温下孵育5min后，A液和B液混匀，并静置20min。按每孔AB混合液200μl加入到预先加入300μl Opi-MEM培养基的孔板中。37℃，5％CO2培养箱孵育6h，更换含10％胎牛血清的培养基继续培养24h。5’末端和3’末端修饰的反义寡核苷酸作用后，提取细胞的RNA使用反转录聚合酶链式反应测定mRNA表达，如图6所示。
实施例9
小鼠肠炎模型的构建和寡核苷酸灌肠剂的治疗效果
1)从集萃药康获得10-12周龄、体重35-45g的正常雄性C57BL/6J雄性小鼠。将小鼠随机分组(每组5只动物)，并以每笼5只圈养，把小鼠安置在南京大学的动物中心。并在进入研究前适应环境至少三天。动物室设置为每小时保持最少12至15次换气，自动计时器开启/关闭12小时的明/暗循环，给小鼠饮用正常无菌水。
2)模型建立：IPAA术前禁食24h，并给予0.9％氯化钠与5％葡萄糖(1：1)的溶液自由饮用，使用300mg/kg剂量10％水合氯醛溶液腹腔注射麻醉，腹正中切口3cm，用自备消毒干净的小拉钩暴露肠管。寻找回盲部，游离回肠末端血管，用8-0缝合线结扎并剪断血管，随后结扎末端回肠并剪断。在回盲部系膜内寻找右半结肠血管，结扎后剪断血管，之后沿着结肠走向由近端向远端依次结扎血管，剪断系膜，在分离到直肠处距离肛缘1cm切断肠管，牵引残留直肠。无菌剪剪开末段回肠对系膜缘3cm切口，行锁边缝合进行后壁缝合。完全缝合后壁后，再用浸润生理盐水的棉签对合前壁缝合，最终留8-10mm肠壁用于与直肠残端的吻合，以此方法制成J形结肠。将残留的直肠两侧壁对准至结肠开口两侧壁，均以8-0显微线锁边缝，先吻合后壁再吻合前壁。结肠吻合结束后从肛门注水检查结肠是否缝合完整。之后用4-0丝线分两层进行逐层关腹腹肌筋膜和皮肤，伤口再次消毒后放入鼠笼，术后恢复30日后，对小鼠进行分组：IPAA组、IPAA+DSS组、IPAA+DSS+ASO1+ASO2组、IPAA+DSS+ASO1+ASO3组、IPAA+DSS+ASO1+ASO2+ASO3组、IPAA+DSS+硫代ASO组、IPAA+DSS+核糖修饰组、IPAA+DSS+5’末端和3’末端修饰组，其中IPAA组给予纯净水、IPAA+DSS组给予每日4％ DSS溶液100ml饮用，IPAA+DSS+ASO组给予：每日4％ DSS溶液100ml饮用以及灌肠剂2ml内含核酸药物(5mg/kg)每日处理。在分组第5天处死小鼠。灌肠剂为磷脂酰丝氨酸化修饰，灌肠剂与核酸质量比为2：1。
3)样本获取及炎症评估
模型建立过程中称取小鼠体重，观察小鼠粪便情况，评分指标如下：正常的粪便评分为5分，大便松散不成形评分4分，粪便呈糊状稀便为3分，表现为腹泻样稀便为2分，1分为少量稀便。
取结肠组织，4％多聚甲醛固定，进行HE染色并进行组织病理学评分，评分标注如下：
糜烂情况：0分-无糜烂，1分-灶性糜烂，2分-多处糜烂，3分-广泛糜烂；
溃疡范围：0分-无溃疡，1分-灶性溃疡，2分-多处溃疡，3分-广泛溃疡；
溃疡深度：1分-浸润到黏膜上层1/2，2分-全黏膜层，3分侵及肌层或超出肌层；
绒毛萎缩程度：0分-无萎缩，1分-轻度萎缩，2分-中度萎缩，3分-重度萎缩；
固有层水肿情况：0分-不存在，1分-存在。
4)结果
服用本发明制备的寡核苷酸显著缓解小鼠结肠炎症状，挽救了小鼠结肠炎导致的体重减轻，服药小鼠结肠粪便和组织病理学评分显著降低，结果如表2和表3所示，表明本发明制备的寡核苷酸对于小鼠结肠炎具有良好的治疗效果。
表2
表3
数据均以平均值±标准差的形式加以显示，显著性差异通过ANOVA检验加以确定。*代表P≤0.05，均与IPAA+DSS组比较
以上所述仅为本申请的较佳实施例而已，并不用以限制本申请，凡在本申请的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，其特征在于，所述反义寡核苷酸的序列包括：核糖核酸序列、脱氧核糖核酸序列、核糖核酸与脱氧核糖核酸的嵌合体序列中的一种或多种；所述反义寡核苷酸的序列与SEQ ID NO：1-SEQ ID NO：3任一所示的序列互补配对。
2.根据权利要求1所述的一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，其特征在于，所述反义寡核苷酸的序列选自SEQ ID NO：4-SEQ ID NO：6中的一条或多条；优选为SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5组合使用、SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：6组合使用、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6组合使用以及SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6组合使用。
3.根据权利要求1所述的一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，其特征在于，所述反义寡核苷酸上至少有一个核苷酸进行了化学修饰；所述化学修饰位于核苷酸的核糖部分和/或磷酸酯键部分。
4.根据权利要求3所述的一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，其特征在于，所述反义寡核苷酸上磷酸酯键部分进行的化学修饰为硫代修饰。
5.根据权利要求3所述的一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，其特征在于，所述反义寡核苷酸上核糖部分进行的化学修饰为2-OMe、2’-OCHCHOMe或2’-F修饰。
6.根据权利要求1-5任意一项所述的一种靶向JAK1 mRNA的反义寡核苷酸，其特征在于，所述反义寡聚核苷酸的5’末端和/或3’末端含有或不含有化学修饰，所述化学修饰包括氨基化修饰、羧基化修饰、巯基化修饰或N-乙酰半乳糖胺修饰。
7.一种靶向JAK1 mRNA的组合物/药物制剂，其特征在于，所述组合物/药物制剂中，包括有权利要求1-6任意一项所述的反义寡核苷酸和药用载体。
8.根据权利要求7所述的组合物/药物制剂，其特征在于，所述药用载体包括糖、聚胺、氨基酸、肽和脂质中的至少一种。
9.权利要求1-6任意一项所述的反义寡核苷酸、权利要求7或8所述的组合物/药物制剂在制备靶向沉默细胞/组织中JAK1基因或抑制细胞/组织中JAK1基因表达的药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述细胞为炎症状态巨噬细胞；优选为引起溃疡性结肠炎的炎症状态巨噬细胞；所述组织为肠组织。
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