CN117860634A - 一种舒缓护肤组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本申请涉及护肤品/化妆品领域，尤其涉及一种舒缓护肤组合物及其制备方法和应用。所述舒缓护肤组合物至少包括复合植物提取物；所述复合植物提取物至少包括獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物以及槐米提取物。本申请中提供的一种舒缓护肤组合物，其不仅具有优异的肌肤炎症舒缓效果，还能够进一步地帮助肌肤解决止痒、发红或红肿等问题，相比于现有的护肤舒缓产品其功效更加全面，更适宜用于油脂性肌肤以及敏感性肌肤，保持了十分优秀的护肤保养效果，具有优异的护肤领域市场前景。
Description
技术领域
本申请涉及护肤品/化妆品领域，尤其涉及一种舒缓护肤组合物及其制备方法和应用。
背景技术
随着社会的进步和经济的发展，城市生活节奏的加快，人们在生活过程中所承受的压力逐步增大，加上环境的影响，越来越多的人们开始出现各类肌肤问题。而肌肤是我们身体的保护屏障，当肌肤屏障受损，角质层不能防止水分散失，皮肤内部就会大量失水，污染、微生物就会进入毛囊，刺激其中的皮脂腺，引起皮脂过度分泌，造成多种肌肤炎症，以及肌肤瘙痒、发红等问题。这些问题的出现不仅会加快肌肤的损伤和衰老，严重的肌肤问题也容易造成人们的心理问题。所以，如何有效解决肌肤的发炎、瘙痒以及红肿等问题，成为了护肤品/化妆品领域的热门课题。
现有技术(CN201710435655.5)公开了一种修护敏感肌的护肤组合物，制备原料包含神经酰胺30.05～0.1份、海棠果籽油1～2份、硅烷二醇水杨酸酯1～5份、β-葡聚糖1～5份等，并声称其制得的组合物可以有效增强皮肤屏障、抑制炎症等效果。但是该申请的方案中作用成分的类型较为单一，主要效果是消除炎症，对于肌肤瘙痒、发红等症状无明显的改善效果。
因此，为了有效解决上述问题，本申请提供了一种舒缓护肤组合物，其不仅具有优异的肌肤炎症舒缓效果，还能够进一步地帮助肌肤解决止痒、发红或红肿等问题，相比于现有的护肤舒缓组合物，其功效更加全面，更适宜用于油脂性肌肤以及敏感性肌肤。
发明内容
为了解决上述问题，本申请第一方面提供了一种舒缓护肤组合物，所述舒缓护肤组合物至少包括复合植物提取物。
作为一种优选的方案，所述复合植物提取物至少包括獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物以及槐米提取物。
作为一种优选的方案，所述獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物以及槐米提取物的质量比为(5～10)：(2～4)：(3～5)：(0.5～2)。
作为一种优选的方案，所述獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物以及槐米提取物的质量比为(6～8)：(3～3.5)：(4～4.5)：(1～1.5)。
作为一种优选的方案，所述獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物以及槐米提取物的质量比为7：3.5：4：1.2。
本申请中，通过采用上述复配植物提取物不仅有功效协同，也有其他方面的组合优势。首先，獐牙菜的主要成分是环烯醚萜皂苷，有天然表活样作用，在组合物中可以起到增溶促进稳定的额外作用，比如槐米和青柑中的黄酮成分；青柑中含有大量的天然有机酸，能够和苦参生物碱形成离子对，将PH稳定在适合皮肤安全使用的弱酸性环境；而槐米和青柑中的黄酮成分如芦丁、柚皮苷都是带酚羟基的结构，有极强的抗氧化作用，可以高效清除自由基，抵御紫外线对皮肤的损伤，在问题肌肤舒缓的同时，可以清除自由基、紫外线灯外部干扰，协同加速问题肌肤的恢复，同时几者的复配组合，能够有效稳定组合物中体系稳定性，这是因为活性成分之间不仅能够在组合物中与短链醇形成稳定的包裹相，特有活性分子之间还能够形成良好的水性体系相持效果，进而在水性体系中避免了活性分子的过度碰撞而导致的杂质反应，进而能够具有优异的自身稳定性以及耐黄变性。
作为一种优选的方案，所述舒缓护肤组合物还可以包括有姜黄根提取物、睡茄提取物、黄菊花提取物、积雪草提取物、库拉索芦荟提取物、北美金缕梅提取物、薰衣草提取物、七叶树提取物、紫罗兰提取物、苹果提取物、沙棘果提取物、藏红花提取物、兰花提取物中的至少一种。
作为一种优选的方案，所述舒缓护肤组合物包括獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物，槐米提取物以及姜黄根提取物。
作为一种优选的方案，所述舒缓护肤组合物包括獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物，槐米提取物以及积雪草提取物。
本命申请中，通过采用上述植物提取物的组合能够有效提高组合物及其应用产品的抗炎舒缓作用，并且消除红肿、瘙痒。这主要是因为，苦参提取物中存在的大量生物碱物质能够有效清除肌肤内部杂质、收敛毛孔并且与獐牙菜提取物共同作用，大幅提高其炎症分子的抑制作用，促进肌肤愈合。另一方面，青柑提取物与槐米提取物的加入，能够在獐牙菜提取物以及苦参提取物促进肌肤愈合，抑制炎症因子，去红肿胀血管的同时，释放更多的氨基酸以及生物酚促进对于弹性蛋白酶以及活性自由基的抑制作用，能够有效的活化皮肤，舒缓肌肤紧张状态。
作为一种优选的方案，所述复合植物提取物的提取工艺，步骤包括以下几步：S1：收集植物提取物所需提取部位，按比例进行组合，去离子水清洗，控制含水率为10～30wt％，之后将其用破碎机完全破碎至平均粒径为0.5～2cm，得待提取碎料；S2：将待提取碎料加入至容器，并加入盐水溶液，茶多酚以及抗氧化剂，升温至60～70℃，浸泡6～12h；S3：将浸泡后的物料取出，将物料在-5～0℃下静置破壁，直至物料转变为暗褐色，滤网过滤得粗提物料；S4：将粗提物料800～1200r/min转速下离心4～5min，得到粗提液，在粗提取液中加入壳聚糖吸附溶液去除茶多酚以及抗氧化剂，吸附搅拌时间为3～4h，之后将其通过0.1～0.2μm过滤得到过滤液；S5：取过滤液，通过纳滤膜过滤去除多余盐分，过滤完成后在恒温45℃下加热保温3天，之后将过滤液与双歧杆菌种子液接种，保持温度为25～35℃以及厌氧环境，发酵4～6天，得复合植物提取物的发酵液，将发酵液加入活性碳池匀速搅拌进行脱味处理，之后再经过0.1～0.2μm过滤去除多余活性炭粒子；S6：将发酵液加入真空设备减压浓缩，浓缩完成后即得复合植物提取物。
作为一种优选的方案，所述壳聚糖吸附溶液为壳聚糖和柠檬酸的复配水溶液。
作为一种优选的方案，所述壳聚糖和柠檬酸的质量比为1:1；所述壳聚糖和柠檬酸的总浓度为1～2wt％。
作为一种优选的方案，壳聚糖吸附溶液的加入量为粗提液体积百分比5～10％。
作为一种优选的方案，所述抗氧化剂为花青素或原花青素。
作为一种优选的方案，所述抗氧化剂为花青素。
作为一种优选的方案，所述待提取碎料与茶多酚以及抗氧化剂的质量比为(120～150)：(4～5)：(1～2)。
作为一种优选的方案，所述待提取碎料与茶多酚以及抗氧化剂的质量比为(120～140)：(4～5)：1。
作为一种优选的方案，所述待提取碎料与茶多酚以及抗氧化剂的质量比为125：4：1。
作为一种优选的方案，所述待提取碎料与盐水溶液的体积比为(1～2.5)：(1～1.5)。
作为一种优选的方案，所述待提取碎料与盐水溶液的体积比为1.5：1。
作为一种优选的方案，所述盐水溶液为质量浓度为15～35％的氯化钠溶液。
作为一种优选的方案，所述盐水溶液为质量浓度为25％的氯化钠溶液。
本申请中，通过上述提取方法能够最大限度的提高以及保证复合植物提取物的纯度和活性含量的成分。其加入的茶多酚以及花青素能够通过其活泼氢原子与大分子链自由基分离结合，形成稳定的自由基基团，并且还能够进一步地增加体系中的空间阻断作用，提高自由基基团的被保护作用，进而在体系中实现稳定化合物的位点聚集，减少杂质分子的介入，在后续处理中更容易将杂质分子进行分离，从而更多的保留活性成分，进而最终影响了组合物的功效性能，且如果保留更多的杂质分子还将影响组合物在长期使用和储存过程中的自身稳定性，进而影响其稳定效果。
作为一种优选的方案，所述舒缓护肤组合物还包括短链醇和去离子水。
作为一种优选的方案，所述短链醇和去离子水的质量比为(4～5)：(3～5.5)。
作为一种优选的方案，所述短链醇为1,3-丁二醇、1,3-丙二醇、1,2-丙二醇中的至少一种。
作为一种优选的方案，所述短链醇为1,3-丁二醇和1,2-丙二醇。
作为一种优选的方案，所述1,3-丁二醇和1,2-丙二醇的质量比为(1～3)：(1～3)。
作为一种优选的方案，所述1,3-丁二醇和1,2-丙二醇的质量比为2：1。
本申请第二方面提供了一种上述舒缓护肤组合物的制备方法，制备方法包括：将所得复合植物提取物与短链醇和去离子水混合，加热至35～40℃，200～400r/min转速下保温搅拌1～3h，在之后然后自然降至室温并经过抗菌处理，即得舒缓护肤组合物。
作为一种优选的方案，所述长双歧杆菌种子液的含量为复合植物提取物的总质量的1～5％。
作为一种优选的方案，所述长双歧杆菌种子液的含量为复合植物提取物的总质量的1.5～3％。
作为一种优选的方案，所述长双歧杆菌种子液的含量为复合植物提取物的总质量的2％。
本申请第三方面提供了一种上述舒缓护肤组合物的应用，包括该舒缓护肤组合物在护肤精华、护肤水、护肤乳膏、护肤面膜液、护肤洗面奶产品中的应用。
本申请具有的有益效果：
1、本申请中提供的一种舒缓护肤组合物，其不仅具有优异的肌肤炎症舒缓效果，还能够进一步地帮助肌肤解决止痒、发红或红肿等问题，相比于现有的护肤舒缓产品其功效更加全面，更适宜用于油脂性肌肤以及敏感性肌肤，保持了十分优秀的护肤保养效果，具有优异的护肤领域市场前景。
2、本申请中提供的一种舒缓护肤组合物，其采用的复配植物提取物组合，不仅具有护肤功效协同，还可以起到增溶促进稳定的额外作用，比如槐米和青柑中的黄酮成分；青柑中含有大量的天然有机酸，能够和苦参生物碱形成离子对，将PH稳定在适合皮肤安全使用的弱酸性环境；而槐米和青柑中的黄酮成分如芦丁、柚皮苷都是带酚羟基的结构，有极强的抗氧化作用，可以高效清除自由基，抵御紫外线对皮肤的损伤，在问题肌肤舒缓的同时，可以清除自由基、紫外线灯外部干扰，协同加速问题肌肤的恢复，同时几者的复配组合，能够有效提高组合物的体系稳定性。
3、本申请中提供的一种舒缓护肤组合物，通过采用獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物以及槐米提取物的复合植物提取组合液，能够有效提高组合物的抗炎舒缓作用，并且消除红肿、瘙痒，四者之间的相互作用能够有效清除肌肤内部杂质、收敛毛孔，大幅提高对于炎症分子的抑制作用，促进肌肤愈合，并且还能抑制炎症因子，去红肿胀血管的同时，释放更多的氨基酸以及生物酚促进对于弹性蛋白酶以及活性自由基的抑制作用，能够有效的活化皮肤，舒缓肌肤紧张状态。
4、本申请中提供的一种舒缓护肤组合物，通过其特定的复合植物提取物的提取工艺，能够最大限度的提高以及保证复合植物提取物的纯度和活性含量的成分，其加入的茶多酚以及花青素能够通过其活泼氢原子与大分子链自由基分离结合，形成稳定的自由基基团，并且还能够进一步地增加体系中的空间阻断作用，提高自由基基团的被保护作用，进而在体系中实现稳定化合物的位点聚集，减少杂质分子的介入，在后续处理中更容易将杂质分子进行分离，从而更多的保留活性成分，进而最终大幅增强了组合物的功效性。
附图说明
图1为实施例1舒缓护肤组合物抗炎测试中空白对照组显色结果图，图左为放大20倍，图右为放大200倍。
图2为实施例1舒缓护肤组合物抗炎测试中模型对照组显色结果图，图左为放大20倍，图右为放大200倍。
图3为实施例1舒缓护肤组合物抗炎测试中阳性药组显色结果图，图左为放大20倍，图右为放大200倍。
图4为实施例1舒缓护肤组合物抗炎测试中2％样品组显色结果图，图左为放大20倍，图右为放大200倍。
图5为实施例1舒缓护肤组合物抗炎测试中5％样品组显色结果图，图左为放大20倍，图右为放大200倍。
图6为实施例1舒缓护肤组合物抗炎测试中IL-1β免疫组化测试的阳性面积比率对比图。
图7为实施例1舒缓护肤组合物抗炎测试中IL-6免疫组化测试的阳性面积比率对比图。
图8为实施例1舒缓护肤组合物抗炎测试中TNF-α免疫组化测试的阳性面积比率对比图。
具体实施方式
下文将以具体实施方案的方式对本申请上述发明内容中的技术方案做更进一步的说明和展示。且下述实施例仅为实际的实例用于说明和解释说明书中技术方案的内容，不应限制本申请所要保护的权利要求范围。凡是基于本申请发明内容所述的技术方案的技术产物均应该涵盖在本申请所要保护的范围之中。
在以下实施例中，除有特殊说明之外，原料均为可以获得的市售产品，或者可以以本领域技术人员的所熟知的方法进行制备。
实施例1
实施例1第一方面提供了一种舒缓护肤组合物，以质量份计，原料包括复合植物提取物13份，短链醇45份，去离子水42份。
复合植物提取物包括獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物以及槐米提取物，其质量比为7：3.5：4：1.2。
复合植物提取物的提取工艺，步骤包括以下几步：S1：收集獐牙菜，青柑提取物，苦参提取物以及槐米提取物的提取部位，按比例进行组合，去离子水清洗，控制含水率为20wt％，之后将其用破碎机完全破碎至平均粒径为1cm，得待提取碎料；S2：将待提取碎料加入至容器，并加入盐水溶液，茶多酚以及花青素，升温至65℃，浸泡10h；
S3：将浸泡后的物料取出，将物料在-5℃下静置破壁，直至物料转变为暗褐色，400目滤网过滤得粗提物料；S4：将粗提物料1000r/min转速下离心5min，得到粗提液，在粗提取液中加入壳聚糖吸附溶液去除茶多酚以及花青素，吸附搅拌时间为3h，之后将其通过0.1μm过滤得到过滤液；S5：取过滤液，通过纳滤膜过滤去除多余盐分，过滤完成后在恒温45℃下加热保温3天，之后将过滤液与双歧杆菌种子液接种，保持温度为30℃以及厌氧环境，发酵6天，得复合植物提取物的发酵液，将发酵液加入活性碳池匀速搅拌进行脱味处理，之后再经过0.1μm过滤去除多余活性炭粒子；S6：将发酵液加入真空设备减压浓缩，浓缩完成后即得复合植物提取物。
纳滤膜为美国陶氏NF90-4040纳滤膜产品。
壳聚糖吸附溶液为壳聚糖和柠檬酸的复配水溶液；壳聚糖和柠檬酸的质量比为1:1，壳聚糖和柠檬酸的总浓度为1wt％；壳聚糖吸附溶液的加入量为粗提液体积百分比8％。
待提取碎料与茶多酚以及花青素的质量比为125：4：1。
待提取碎料与盐水溶液的体积比为1.5：1；盐水溶液为质量浓度为25％的氯化钠溶液。
短链醇为1,3-丁二醇和1,2-丙二醇，其质量比为2：1。
本实施例第二方面提供了一种上述舒缓护肤组合物的制备方法，制备方法包括：将所得复合植物提取物与短链醇和去离子水混合，加热至40℃，250r/min转速下保温搅拌2.5h，在之后然后自然降至室温并经过抗菌处理，即得舒缓护肤组合物。
实施例2
实施例2第一方面提供了一种舒缓护肤组合物，以质量份计，原料包括复合植物提取物13份，短链醇45份，去离子水42份。
复合植物提取物包括獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物，槐米提取物以姜黄根提取物，其质量比为7：2.5：3：1.2：2。
复合植物提取物的提取工艺，步骤包括以下几步：S1：收集獐牙菜，青柑提取物，苦参提取物以及槐米提取物的提取部位，按比例进行组合，去离子水清洗，控制含水率为20wt％，之后将其用破碎机完全破碎至平均粒径为1cm，得待提取碎料；S2：将待提取碎料加入至容器，并加入盐水溶液，茶多酚以及花青素，升温至65℃，浸泡10h；S3：将浸泡后的物料取出，将物料在-5℃下静置破壁，直至物料转变为暗褐色，400目滤网过滤得粗提物料；S4：将粗提物料1000r/min转速下离心5min，得到粗提液，在粗提取液中加入壳聚糖吸附溶液去除茶多酚以及花青素，吸附搅拌时间为3h，之后将其通过0.1μm过滤得到过滤液；S5：取过滤液，通过纳滤膜过滤去除多余盐分，过滤完成后在恒温45℃下加热保温3天，之后将过滤液与双歧杆菌种子液接种，保持温度为30℃以及厌氧环境，发酵6天，得复合植物提取物的发酵液，将发酵液加入活性碳池匀速搅拌进行脱味处理，之后再经过0.1μm过滤去除多余活性炭粒子；S6：将发酵液加入真空设备减压浓缩，浓缩完成后即得复合植物提取物。
纳滤膜为美国陶氏NF90-4040纳滤膜产品。
壳聚糖吸附溶液为壳聚糖和柠檬酸的复配水溶液；壳聚糖和柠檬酸的质量比为1:1，壳聚糖和柠檬酸的总浓度为1wt％；壳聚糖吸附溶液的加入量为粗提液体积百分比8％。
待提取碎料与茶多酚以及花青素的质量比为125：4：1。
待提取碎料与盐水溶液的体积比为1.5：1；盐水溶液为质量浓度为25％的氯化钠溶液。
短链醇为1,3-丁二醇和1,2-丙二醇，其质量比为2：1。
本实施例第二方面提供了一种上述舒缓护肤组合物的制备方法，制备方法包括：将所得复合植物提取物与短链醇和去离子水混合，加热至40℃，250r/min转速下保温搅拌2.5h，在之后然后自然降至室温并经过抗菌处理，即得舒缓护肤组合物。
实施例3
实施例3第一方面提供了一种舒缓护肤组合物，以质量份计，原料包括复合植物提取物13份，短链醇45份，去离子水42份。
复合植物提取物包括獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物，槐米提取物以及积雪草提取物，其质量比为5：3.5：4：1.2：2。
复合植物提取物的提取工艺，步骤包括以下几步：S1：收集獐牙菜，青柑提取物，苦参提取物以及槐米提取物的提取部位，按比例进行组合，去离子水清洗，控制含水率为20wt％，之后将其用破碎机完全破碎至平均粒径为1cm，得待提取碎料；S2：将待提取碎料加入至容器，并加入盐水溶液，茶多酚以及花青素，升温至65℃，浸泡10h；S3：将浸泡后的物料取出，将物料在-5℃下静置破壁，直至物料转变为暗褐色，400目滤网过滤得粗提物料；S4：将粗提物料1000r/min转速下离心5min，得到粗提液，在粗提取液中加入壳聚糖吸附溶液去除茶多酚以及花青素，吸附搅拌时间为3h，之后将其通过0.1μm过滤得到过滤液；S5：取过滤液，通过纳滤膜过滤去除多余盐分，过滤完成后在恒温45℃下加热保温3天，之后将过滤液与双歧杆菌种子液接种，保持温度为30℃以及厌氧环境，发酵6天，得复合植物提取物的发酵液，将发酵液加入活性碳池匀速搅拌进行脱味处理，之后再经过0.1μm过滤去除多余活性炭粒子；S6：将发酵液加入真空设备减压浓缩，浓缩完成后即得复合植物提取物。
纳滤膜为美国陶氏NF90-4040纳滤膜产品。
壳聚糖吸附溶液为壳聚糖和柠檬酸的复配水溶液；壳聚糖和柠檬酸的质量比为1:1，壳聚糖和柠檬酸的总浓度为1wt％；壳聚糖吸附溶液的加入量为粗提液体积百分比8％。
待提取碎料与茶多酚以及花青素的质量比为125：4：1。
待提取碎料与盐水溶液的体积比为1.5：1；盐水溶液为质量浓度为25％的氯化钠溶液。
短链醇为1,3-丁二醇和1,2-丙二醇，其质量比为2：1。
本实施例第二方面提供了一种上述舒缓护肤组合物的制备方法，制备方法包括：将所得复合植物提取物与短链醇和去离子水混合，加热至40℃，250r/min转速下保温搅拌2.5h，在之后然后自然降至室温并经过抗菌处理，即得舒缓护肤组合物。
对比例1
本对比例的具体实施方式与实施例1基本相同，不同之处仅在于：复合植物提取物包括獐牙菜提取物，青柑提取物，其质量比为3：1。
对比例2
本对比例的具体实施方式与实施例1基本相同，不同之处仅在于：复合植物提取物包括獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物以及槐米提取物，其质量比为2.5：5：2：3.5。
对比例3
本对比例的具体实施方式与实施例1基本相同，不同之处仅在于：待提取碎料与茶多酚以及花青素的质量比为125：5：0.1。
对比例4
本对比例的具体实施方式与实施例1基本相同，不同之处仅在于：待提取碎料与茶多酚以及花青素的质量比为125：1.5：1.5。
对比例5
本对比例的具体实施方式与实施例1基本相同，不同之处仅在于：所述短链醇为1,3-丁二醇。
性能评价
1.舒缓功效测试：
测试目标项为TNF-α、IL-1α以及PGE2；检测模型为角质形成细胞；分为空白对照组，阴性对照组(CAP培养液15μM)，阳性对照组(CAP培养液15μM，地塞米松0.01wt％)，以及包含实施例1～3舒缓护肤组合物的样品组(CAP培养液15μM，0.625wt％的实施例以及对比例样品)。
检测步骤：S1：细胞接种：复苏细胞后，待铺板率达到60％左右时，接种细胞至6孔板，CO2培养箱(37℃，5％CO2)中孵育过夜；S2：给药:待6孔板中细胞铺板率达到30％～40％时，进行分组给药，每组设3个复孔；空白对照组和阴性对照组每孔加入2mL培养液，阳性对照组每孔加入2mL含有地塞米松的培养液，样品组每孔加入2mL含有相应浓度待测样品的培养液；给药完成后将6孔板放置在CO2培养箱(37℃，5％CO2)中继续培养24h；S3：UVB辐照:除空白对照组外，其余组别均进行UVB辐照，辐照剂量为300mJ/cm，辐照结束后，置于CO2培养箱(37℃，5％CO2)中继续培养24h；S4：ELISA检测:孵育结束后，收集细胞培养上清液，按照ELISA试剂盒说明书进行ELISA检测；S5：抑制率计算:抑制率(％)＝(阴性对照组-样品组)/阴性对照组×100％，TNF-α、IL-1α以及PGE2抑制率结果记入表1。
2.抗炎功效测试：将实施例1所得舒缓护肤组合物进行抗炎测试，测试对象为昆明种小鼠，18～22g，上海杰思捷实验动物有限公司提供。
测试方法：KM小鼠50只，随机分组，每组10只，雌雄各半。(1)空白对照组、(2)模型对照组、(3)阳性药组、(4)2％样品组、(5)5％样品组。
模型对照组：去离子水，给药量0.2mL/只；阳性对照组：复方醋酸地塞米松，给药量0.2mL/只；2％样品组：2wt％实施例1舒缓护肤组合物水溶液，给药量0.2mL/只；5％样品组：5wt％实施例1舒缓护肤组合物水溶液，给药量0.2mL/只。
各组连续给药15天，除空白组外，其他各组使用DNCB诱发小鼠迟发型过敏性炎症，具体方法:在实验第1天第2天分别使用5％DNCB 25uL在小鼠腹部致敏一次，第6天、第9天、第12天、第15天用1％DNCB 0ul激发背部。末次给药后，脱颈处死小鼠，取背皮打孔测量皮肤厚度及重量，并取背皮进行包埋切片病理观察、免疫组化测定炎性细胞因子。皮肤厚度(重量)抑制率(％)＝(模型组-给药组)/(模型组-空白组)*100％。
结果：2％样品组抑制率为56.30％，5％样品组抑制率为72.65％。
病理观察方法:小鼠皮肤经4％多聚甲醛固定，修剪、脱水、包埋、切片、染色、封片最后进行镜检。在显微镜下详细观察组织切片情况，对切片中基本病理改变如充血、淤血、出血、水肿、变性、坏死、增生、纤维化、机化、肉芽组织、炎性变化等情况进行评价。
免疫组化测定方法:石蜡切片脱蜡至水，经抗原修复、过氧化物酶阻断、血清封闭后进行一抗和二抗孵育，最后进行DAB显色。对显色的切片进行苏木素细胞核染色，脱水封片，于显微镜下拍照，用ImageJ进行阳性面积比率计算。
相较于空白组：##P＜0.01；相较于模型组：**P＜0.01。
显色结果如图1～5所示。
结果：
图1：皮肤组织的表皮完整，各层结构清晰；真皮层胶原纤维排列整齐，皮肤附属器毛囊以及皮脂腺等散在分布；皮下组织位于真皮下方，由疏松结缔组织、脂肪组织及肌层组成，未见明显异常。
图2：皮肤组织中局部表皮可见脓肿(黑色箭头)，内部多见坏死的细胞碎片；局部角质层角化不全(深红色箭头)，可见残留的细胞核；局部表皮增厚(橙色箭头)；棘层偶见点状坏死(紫色箭头)，胞核固缩:棘层多见细胞胞质疏松(棕色箭头)；可见表皮皮突延长(蓝色箭头)；真皮层胶原纤维排列整齐，散在分布少量淋巴细胞与粒细胞(红色箭头)，真皮浅层偶见出血，皮肤附属器毛囊以及皮脂腺等散在分布:未见其它明显异常。
图3：皮肤组织的表皮完整，各层结构清晰；真皮层胶原纤维排列整齐，真皮浅层可见少量纤维细胞增生(蓝色箭头)，皮肤附属器毛囊以及皮脂腺等散在分布；皮下组织位于真皮下方，由疏松结缔组织、脂肪组织及肌层组成，未见明显异常。
图4：皮肤组织中表皮结构完整,表皮多见细胞坏死，胞核固缩,伴有多量淋巴细胞浸润(黑色箭头)；棘层可见少量细胞胞质疏松(棕色箭头)；真皮层胶原纤维排列整齐，真皮层与皮下组织中可见少量淋巴细胞与粒细胞浸润(红色箭头)；皮肤附属器毛囊以及皮脂腺等散在分布；未见其它明显异常。
图5：皮肤组织中表皮结构完整，各层结构清晰；多见表皮增厚(橙色箭头)；真皮层胶原纤维排列整齐；皮肤附属器毛囊以及皮脂腺等散在分布；皮下组织位于真皮下方，由疏松结缔组织、脂肪组织及肌层组成，未见明显异常。
免疫组化结果如图6～8所示。
3.止痒功效测试：将实施例1所得舒缓护肤组合物进行止痒测试，测试对象为昆明种小鼠，18～22g，上海杰思捷实验动物有限公司提供。
测试方法：对小鼠皮下注射磷酸组胺法所致小鼠止痒的影响，小鼠30只，随机分组雌雄各半，每组10只。(1)模型对照组、(2)阳性对照组、(3)样品组。
模型对照组：去离子水，给药量0.2mL/只；阳性对照组：复方醋酸地塞米松乳膏，给药量0.1g/只；样品组：5wt％实施例1舒缓护肤组合物水溶液，给药量0.2mL/只。
适应性喂养后，在实验前一天将小鼠颈背部毛用剪刀剪掉，再用脱毛膏脱毛使其露出皮肤，脱毛区域面积约为2cm*2cm，取皮肤无损伤的小鼠进行涂抹给药。每天均各给药1次，连续给药2d。致痒:末次给药1h后，各组每只小鼠皮下注射0.05％磷酸组胺生理盐水注射液02ml(10ml/kg)，观察以小鼠前爪搔抓头部，后爪播抓躯干，嘴咬全身各部位作为痒反应指标。观察并记录30min内各组小鼠搔痒次数、搔痒潜伏期、持续时间。根据癌痒抑制率判断测试组止痒作用强弱。
抑制率(％)＝(模型对照组抓挠次数-给药组抓挠次数)/模型对照组抓挠次数×100％。
结果：
阳性对照组的抑制率为24.78％；样品组的抑制率为50.97％。
4.组合物稳定性测试：分别将实施例和对比例制得舒缓护肤组合物在温度60℃，75％湿度的恒温箱内恒温保存28天，之后恢复至室温25℃保存2天，观察第30天是否存在白色絮状物、白色沉底以及明显的变黄现象，如有则判定为不合格，反之则为合格，每个实施例和对比例测试100组试样计算合格率，合格率(％)＝合格个数/100×100％，测得的结果的记入表2。
表1
| 实施例 | PGE2(％) | IL-1α(％) | TNF-α(％) |
| 实施例1 | 28.53 | 42.54 | 25.72 |
| 实施例2 | 27.96 | 42.11 | 24.98 |
| 实施例3 | 28.21 | 42.48 | 25.08 |
表2
根据实施例和对比例的表1和表2数据以及说明书附图可以得知通过采用本申请中特殊限定技术方案的实施例1～3能够在获得优异的舒缓、抗炎、止痒功效的同时，保持优异的体系稳定性，在特殊的储存环境下也能够保证良好的储存稳定性，保持产品内活性分子的含量，减少析出沉淀黄变等现象的出现。而对比例1～5因为并未采用特殊限定的技术方案导致其在组合物的稳定性方面要明显差于实施例1～3，有力证明了本申请中所采用的技术方案的技术效果的非显而易见效果。
Claims (10)
1.一种舒缓护肤组合物，其特征在于：所述舒缓护肤组合物至少包括复合植物提取物；
所述复合植物提取物至少包括獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物以及槐米提取物；
所述獐牙菜提取物，青柑提取物，苦参提取物以及槐米提取物的质量比为(5～10)：(2～4)：(3～5)：(0.5～2)；
所述复合植物提取物的提取工艺，步骤包括以下几步：S1：收集植物提取物所需提取部位，按比例进行组合，去离子水清洗，控制含水率为10～30wt％，之后将其用破碎机完全破碎至平均粒径为0.5～2cm，得待提取碎料；S2：将待提取碎料加入至容器，并加入盐水溶液，茶多酚以及抗氧化剂，升温至60～70℃，浸泡6～12h；S3：将浸泡后的物料取出，将物料在-5～0℃下静置破壁，直至物料转变为暗褐色，滤网过滤得粗提物料；S4：将粗提物料800～1200r/min转速下离心4～5min，得到粗提液，在粗提取液中加入壳聚糖吸附溶液去除茶多酚以及抗氧化剂，吸附搅拌时间为3～4h，之后将其通过0.1～0.2μm过滤得到过滤液；S5：取过滤液，通过纳滤膜过滤去除多余盐分，过滤完成后在恒温45℃下加热保温3天，之后将过滤液与双歧杆菌种子液接种，保持温度为25～35℃以及厌氧环境，发酵4～6天，得复合植物提取物的发酵液，将发酵液加入活性碳池匀速搅拌进行脱味处理，之后再经过0.1～0.2μm过滤去除多余活性炭粒子；S6：将发酵液加入真空设备减压浓缩，浓缩完成后即得复合植物提取物。
2.根据权利要求1所述的舒缓护肤组合物，其特征在于：所述抗氧化剂为花青素或原花青素。
3.根据权利要求2所述的舒缓护肤组合物，其特征在于：所述待提取碎料与茶多酚以及抗氧化剂的质量比为(120～150)：(4～5)：(1～2)。
4.根据权利要求3所述的舒缓护肤组合物，其特征在于：所述待提取碎料与盐水溶液的体积比为(1～2.5)：(1～1.5)。
5.根据权利要求4所述的舒缓护肤组合物，其特征在于：所述盐水溶液为质量浓度为15～35％的氯化钠溶液。
6.根据权利要求5所述的舒缓护肤组合物，其特征在于：所述舒缓护肤组合物还包括短链醇和去离子水；所述短链醇和去离子水的质量比为(4～5)：(3～5.5)。
7.根据权利要求6所述的舒缓护肤组合物，其特征在于：所述短链醇为1,3-丁二醇、1,3-丙二醇、1,2-丙二醇中的至少一种。
8.一种根据权利要求7所述的舒缓护肤组合物的制备方法，其特征在于：制备方法包括：将所得复合植物提取物与短链醇和去离子水混合，加热至35～40℃，200～400r/min转速下保温搅拌1～3h，在之后然后自然降至室温并经过抗菌处理，即得舒缓护肤组合物。
9.根据权利要求8所述的舒缓护肤组合物的制备方法，其特征在于：所述长双歧杆菌种子液的含量为复合植物提取物的总质量的1～5％。
10.一种根据权利要求1～7任一项所述的舒缓护肤组合物的应用，其特征在于：包括该舒缓护肤组合物在护肤精华、护肤水、护肤乳膏、护肤面膜液、护肤洗面奶产品中的应用。
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