CN115105451A - 舒缓功效的植物复合提取物及制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及护肤品领域，公开了一种舒缓功效的植物复合提取物及制备方法及应用。一种舒缓功效的植物复合提取物，由龙胆根、粉防己根、积雪草茎叶、苦参根提取而得；龙胆根、粉防己根的质量比例为1：1，所述龙胆根、粉防己根组成A组分；积雪草茎叶、苦参根的质量比例为1：1，所述积雪草茎叶、苦参根组成B组分；A组分与B组分的质量比例为2‑3：1。本发明具有提高舒缓功效的植物复合提取物的稳定性的优点。

Description

舒缓功效的植物复合提取物及制备方法及应用
技术领域
本发明涉及护肤品领域，尤其是涉及一种舒缓功效的植物复合提取物及制备方法及应用。
背景技术
随着环境的日益恶化，化妆品的过度使用，舒缓和修护功效成为个人护理品的开发重点，而天然来源的成分因为安全和中医的传承等原因成为这一领域的热点。目前使用较多的这一类植物有：龙胆草、积雪草、粉防己、苦参、马齿苋、洋甘菊、芦荟、甘草等，但是这些成分在使用时也有些缺陷需要进一步完善。
比如，龙胆草的活性成分主要是龙胆苦苷、獐牙菜苦苷，这些成分在应用过程中，在个人护理品长达3年的货架期中，会发生水解，引起PH下降并失效；积雪草的主要功效成分积雪草总苷在提取和应用过程中会降解引起溶解能力下降可能导致析出；粉防己的主要成分汉防己甲素在水中溶解度很差，因此在应用过程中需要调酸碱引起离子性偏高，带来配方应用的难度并可能增加额外的刺激性；苦参的主要成分苦参总碱应用时除了需要酸碱处理外，还有胺类化合物的通病，即易氧化变黄的缺点。其他的常用原料马齿苋有草酸盐含量过高问题，洋甘菊黄酮类成分以变色问题，芦荟需要去除易致敏成分芦荟苷的缺点，甘草中甘草酸类成分溶解度差需要衍生成盐等问题。
因此，现有的护肤品通过添加植物提取物以获得舒缓功效是，容易存在添加的植物提取物稳定性较低的问题，导致还在货架期内的护肤品功效出现下降的情况，因此，还有改善空间。
发明内容
为了提高舒缓功效的植物复合提取物的稳定性，本申请提供一种舒缓功效的植物复合提取物及制备方法及应用。
第一方面，本申请提供一种舒缓功效的植物复合提取物，采用如下的技术方案：
一种舒缓功效的植物复合提取物，由龙胆根、粉防己根、积雪草茎叶、苦参根提取而得；
所述龙胆根、粉防己根的质量比例为1：1，所述龙胆根、粉防己根组成A组分；
所述积雪草茎叶、苦参根的质量比例为1：1，所述积雪草茎叶、苦参根组成B组分；
所述A组分与B组分的质量比例为2-3：1。
通过采用上述技术方案，通过龙胆根、粉防己根、积雪草茎叶、苦参根以特定比例配合，提取后的提取物相互协同作用，具有较好的功效，同时使得各有效成分通过形成氢键、增溶等效果增强个有效成分的稳定性，进而是功效较为稳定，并减少了杂质成分的形成，从而减少了形成新的刺激源的情况，使得舒缓功效的植物复合提取物添加至护肤品中后，护肤品的功效更为稳定，长久保持，有效提升产品质量，尤其是在长久放置至货架期后期，护肤品还能具有较好的护理效果。
第二方面，本申请提供一种舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，采用如下的技术方案：
一种根据权利要求1所述的舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，包括以下步骤：
步骤1)，按比例称量粉防己根、苦参根，将粉防己根、苦参根加入至粉防己根和苦参根总质量4-6倍的水中，在50-60℃下搅拌1-2h，离心取渣，得药渣W1；
步骤2)，按比例称量龙胆根和积雪草茎叶，将龙胆根和积雪草茎叶装入一号罐中，在一号罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量6-10倍的水，70-80℃下，外循环提取1.5-2.5h；
步骤3)，将一号罐中的提取液泵入二号罐中，70-80℃下，外循环提取1.5-2.5h，同时一号罐中再次加入龙胆根和积雪草茎叶总质量6-10倍的水，在70-80℃下，外循环提取1.5-2.5h；
步骤4)，将二号罐中的提取液泵入絮凝罐中进行絮凝，然后将一号罐中的提取液泵入二号罐中，70-80℃下，外循环提取1.5-2.5h，然后将一号罐中的药渣卸出，并向一号罐中装入部分药渣W1；
步骤5)，将絮凝罐中的絮凝混合料液泵入一号罐中，保温50-60℃，浸泡1.5-2.5h；
步骤6)，将二号罐中的提取液泵入絮凝罐进行絮凝，然后将二号罐中的药渣卸出并装入剩下的药渣W1；
步骤7)，将一号罐中的提取液持续泵入二号罐中进行渗漉提取，同时将絮凝罐中的絮凝混合料液持续泵入一号罐中进行渗漉提取；
步骤8)，将二号罐中的渗漉提取液进行过滤后，进行柱吸附；
步骤9)，对吸附柱进行洗脱，得洗脱液；
步骤10)，将洗脱液进行超滤，取透过液；
步骤11)，将透过液进行浓缩，至活性物含量M1≥6000ppm，得舒缓功效的植物复合提取物。
通过采用上述技术方案，通过连续化工艺设计，提高提取率，减少能耗和试剂消耗缩短工艺周期，同时通过皂苷类成分的增溶作用，实现常规条件提取生物碱的效果，使得提取效果较佳，提取得到的有效成分含量较高，舒缓功效的植物复合提取物的功效较好，稳定性较高，质量较佳。
优选的，所述步骤1)中，先将粉防己根、苦参根粉碎成10-20目的粗粉后再加入水中搅拌。
通过采用上述技术方案，通过先粉碎，使得后续提取过程中，有效成分更易于被提取，舒缓功效的植物复合提取物的质量更佳。
优选的，所述步骤8)中，通过2μm管道过滤器进行过滤。
通过采用上述技术方案，通过具体选择过滤工艺，使得过滤效果更佳，减少杂质残留，得到的舒缓功效的植物复合提取物的质量较佳。
优选的，所述步骤8)中，采用大孔树脂吸附柱进行柱吸附。
通过采用上述技术方案，通过具体选择吸附工艺，使得有效成分有效保留，提取得到所需的有效成分，使得舒缓功效的植物复合提取物功效较佳，质量较好。
优选的，所述步骤9)中，先用渗漉提取液质量2倍的纯化水冲洗大孔吸附树脂柱后，以渗漉提取液质量8-10倍的浓度为45-55％的丁二醇溶液对大孔吸附树脂柱进行洗脱。
通过采用上述技术方案，通过具体选择洗脱工艺，洗脱彻底，获得的舒缓功效的植物复合提取物充分发挥各组分的协同作用，稳定性更好，功效更佳，质量更好。
优选的，所述步骤10)中，采用100-200nm陶瓷膜进行超滤，压力为2-3bar。
通过采用上述技术方案，通过具体选择超滤工艺，使得得到的舒缓功效的植物复合提取物更为纯净，稳定性更高，质量更好。
优选的，所述步骤11)中，采用150D纳滤膜进行浓缩，压力为4-6bar。
通过采用上述技术方案，通过具体选择浓缩工艺，浓缩效果较佳，并且减少有效成分的流失，制得的舒缓功效的植物复合提取物质量更佳。
优选的，所述絮凝罐中进行絮凝时，絮凝剂为壳聚糖。
通过采用上述技术方案，通过具体选择絮凝剂，絮凝效果较好，减少杂质残留，制得的舒缓功效的植物复合提取物质量较佳。
第三方面，本申请提供一种舒缓功效的植物复合提取物的应用，采用如下的技术方案：
一种舒缓功效的植物复合提取物的应用，所述舒缓功效的植物复合提取物添加至洗护用品、护肤品中，所述舒缓功效的植物复合提取物的添加量为洗护用品、护肤品总质量的1-5％。
通过采用上述技术方案，将舒缓功效的植物复合提取物添加至洗护用品、护肤品中后，使得洗护用品、护肤品具有舒缓皮肤的功效，且舒缓的功效稳定性较高，在洗护用品、护肤品的较长货架期内，持续保持较高且较为稳定的功效，使制得的洗护用品、护肤品的质量更佳。
综上所述，本申请具有以下有益效果：
1、由于本申请通过龙胆根、粉防己根、积雪草茎叶、苦参根以特定比例配合，提取后的提取物相互协同作用，具有较好的功效，同时使得各有效成分通过形成氢键、增溶等效果增强个有效成分的稳定性，进而是功效较为稳定，并减少了杂质成分的形成，从而减少了形成新的刺激源的情况，使得舒缓功效的植物复合提取物添加至护肤品中后，护肤品的功效更为稳定，长久保持，有效提升产品质量，尤其是在长久放置后，护肤品还能具有较好的护理效果。
2、本申请的方法，通过连续化工艺设计，提高提取率，减少能耗和试剂消耗缩短工艺周期，同时通过皂苷类成分的增溶作用，实现常规条件提取生物碱的效果，使得提取效果较佳，提取得到的有效成分含量较高，舒缓功效的植物复合提取物的功效较好，稳定性较高，质量较佳。
具体实施方式
以下结合实施例对本申请作进一步详细说明。
实施例1
一种舒缓功效的植物复合提取物，由龙胆根、粉防己根、积雪草茎叶、苦参根提取而得。
本实施例中，各组分的具体投入量(单位kg)如下：
龙胆根2kg、粉防己根2kg、积雪草茎叶1kg、苦参根1kg。
龙胆根、粉防己根、积雪草茎叶、苦参根均来源于市售，为经晒制的中药材。
舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，包括以下步骤：
步骤1)，将粉防己根、苦参根分布粉碎成10-20目的粗粉，按比例称量粉防己根粗粉、苦参根粗粉，将粉防己根粗粉、苦参根粗粉加入搅拌罐中，然后向搅拌罐中加入粉防己根粗粉和苦参根粗粉总质量4倍的水，在60℃下，转速60r/min，搅拌1h，然后将搅拌罐中的全部物料注入离心脱水机中，离心脱水至离心脱水机的出水管无水排出，取出药渣，将药渣投入搅拌罐中，再次向搅拌罐中加入粉防己根粗粉和苦参根粗粉总质量4倍的水，在60℃下搅拌1h，然后将搅拌罐中的全部物料注入离心脱水机中，离心脱水至离心脱水机的出水管无水排出，取出药渣，得药渣W1。
步骤2)，按比例称量龙胆根和积雪草茎叶，将龙胆根和积雪草茎叶装入一号罐中，在一号罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量10倍的水，70℃下，外循环提取2.5h，外循环速度为4罐/h。
步骤3)，将一号罐中的提取液泵入二号罐中，70℃下，外循环提取2.5h，外循环速度为4罐/h，同时一号罐中再次加入龙胆根和积雪草茎叶总质量10倍的水，在70℃下，外循环提取2.5h，外循环速度为4罐/h。
步骤4)，将二号罐中的提取液泵入絮凝罐中，向絮凝罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量的0.5‰的壳聚糖，转速60r/min搅拌5min，进行絮凝，然后将一号罐中的提取液泵入二号罐中，70℃下，外循环提取2.5h，外循环速度为4罐/h，然后将一号罐中的药渣卸出，并向一号罐中装入50％步骤1)得到的药渣W1。
步骤5)，将絮凝罐中的絮凝混合料液泵入一号罐中，保温50℃，浸泡1.5h。
步骤6)，二号罐提取结束后，将二号罐中的提取液泵入絮凝罐中，向絮凝罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量的0.5‰的壳聚糖，转速60r/min搅拌5min，进行絮凝，然后将二号罐中的药渣卸出并装入剩下的50％步骤1)得到的药渣W1。
步骤7)，将一号罐中的提取液持续泵入二号罐中进行渗漉提取，同时将絮凝罐中的絮凝混合料液持续泵入一号罐中进行渗漉提取。
步骤8)，将二号罐中的渗漉提取液通过2μm管道过滤器进行过滤后，上大孔吸附树脂柱进行柱吸附。
步骤9)，吸附结束后，用渗漉提取液质量2倍的纯化水冲洗大孔吸附树脂柱后，以渗漉提取液质量8倍的浓度为55％的丁二醇溶液对大孔吸附树脂柱进行洗脱，得洗脱液。
步骤10)，将洗脱液用200nm陶瓷膜进行超滤，压力为2bar，取透过液。
步骤11)，采用150D纳滤膜将透过液进行浓缩，压力为6bar，至活性物含量M1≥6000ppm，得舒缓功效的植物复合提取物。
实施例2
一种舒缓功效的植物复合提取物，由龙胆根、粉防己根、积雪草茎叶、苦参根提取而得。
本实施例中，各组分的具体投入量(单位kg)如下：
龙胆根3kg、粉防己根3kg、积雪草茎叶1kg、苦参根1kg。
龙胆根、粉防己根、积雪草茎叶、苦参根均来源于市售，为经晒制的中药材。
舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，包括以下步骤：
步骤1)，将粉防己根、苦参根分布粉碎成10-20目的粗粉，按比例称量粉防己根粗粉、苦参根粗粉，将粉防己根粗粉、苦参根粗粉加入搅拌罐中，然后向搅拌罐中加入粉防己根粗粉和苦参根粗粉总质量6倍的水，在50℃下，转速60r/min，搅拌2h，然后将搅拌罐中的全部物料注入离心脱水机中，离心脱水至离心脱水机的出水管无水排出，取出药渣，将药渣投入搅拌罐中，再次向搅拌罐中加入粉防己根粗粉和苦参根粗粉总质量6倍的水，在50℃下搅拌2h，然后将搅拌罐中的全部物料注入离心脱水机中，离心脱水至离心脱水机的出水管无水排出，取出药渣，得药渣W1。
步骤2)，按比例称量龙胆根和积雪草茎叶，将龙胆根和积雪草茎叶装入一号罐中，在一号罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量6倍的水，80℃下，外循环提取2h，外循环速度为4罐/h。
步骤3)，将一号罐中的提取液泵入二号罐中，80℃下，外循环提取2h，外循环速度为4罐/h，同时一号罐中再次加入龙胆根和积雪草茎叶总质量6倍的水，在80℃下，外循环提取2h，外循环速度为4罐/h。
步骤4)，将二号罐中的提取液泵入絮凝罐中，向絮凝罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量的0.5‰的壳聚糖，转速60r/min搅拌5min，进行絮凝，然后将一号罐中的提取液泵入二号罐中，80℃下，外循环提取2h，外循环速度为4罐/h，然后将一号罐中的药渣卸出，并向一号罐中装入50％步骤1)得到的药渣W1。
步骤5)，将絮凝罐中的絮凝混合料液泵入一号罐中，保温60℃，浸泡2h。
步骤6)，二号罐提取结束后，将二号罐中的提取液泵入絮凝罐中，向絮凝罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量的0.5‰的壳聚糖，转速60r/min搅拌5min，进行絮凝，然后将二号罐中的药渣卸出并装入剩下的50％步骤1)得到的药渣W1。
步骤7)，将一号罐中的提取液持续泵入二号罐中进行渗漉提取，同时将絮凝罐中的絮凝混合料液持续泵入一号罐中进行渗漉提取。
步骤8)，将二号罐中的渗漉提取液通过2μm管道过滤器进行过滤后，上大孔吸附树脂柱进行柱吸附。
步骤9)，吸附结束后，用渗漉提取液质量2倍的纯化水冲洗大孔吸附树脂柱后，以渗漉提取液质量10倍的浓度为50％的丁二醇溶液对大孔吸附树脂柱进行洗脱，得洗脱液。
步骤10)，将洗脱液用100nm陶瓷膜进行超滤，压力为3bar，取透过液。
步骤11)，采用150D纳滤膜将透过液进行浓缩，压力为4bar，至活性物含量M1≥6000ppm，得舒缓功效的植物复合提取物。
实施例3
一种舒缓功效的植物复合提取物，由龙胆根、粉防己根、积雪草茎叶、苦参根提取而得。
本实施例中，各组分的具体投入量(单位kg)如下：
龙胆根2.5kg、粉防己根2.5kg、积雪草茎叶1kg、苦参根1kg。
龙胆根、粉防己根、积雪草茎叶、苦参根均来源于市售，为经晒制的中药材。
舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，包括以下步骤：
步骤1)，将粉防己根、苦参根分布粉碎成10-20目的粗粉，按比例称量粉防己根粗粉、苦参根粗粉，将粉防己根粗粉、苦参根粗粉加入搅拌罐中，然后向搅拌罐中加入粉防己根粗粉和苦参根粗粉总质量5倍的水，在55℃下，转速60r/min，搅拌1.5h，然后将搅拌罐中的全部物料注入离心脱水机中，离心脱水至离心脱水机的出水管无水排出，取出药渣，将药渣投入搅拌罐中，再次向搅拌罐中加入粉防己根粗粉和苦参根粗粉总质量5倍的水，在55℃下搅拌1.5h，然后将搅拌罐中的全部物料注入离心脱水机中，离心脱水至离心脱水机的出水管无水排出，取出药渣，得药渣W1。
步骤2)，按比例称量龙胆根和积雪草茎叶，将龙胆根和积雪草茎叶装入一号罐中，在一号罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量8倍的水，75℃下，外循环提取1.5h，外循环速度为4罐/h。
步骤3)，将一号罐中的提取液泵入二号罐中，75℃下，外循环提取1.5h，外循环速度为4罐/h，同时一号罐中再次加入龙胆根和积雪草茎叶总质量8倍的水，在75℃下，外循环提取1.5h，外循环速度为4罐/h。
步骤4)，将二号罐中的提取液泵入絮凝罐中，向絮凝罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量的0.5‰的壳聚糖，转速60r/min搅拌5min，进行絮凝，然后将一号罐中的提取液泵入二号罐中，75℃下，外循环提取1.5h，外循环速度为4罐/h，然后将一号罐中的药渣卸出，并向一号罐中装入50％步骤1)得到的药渣W1。
步骤5)，将絮凝罐中的絮凝混合料液泵入一号罐中，保温55℃，浸泡2.5h。
步骤6)，二号罐提取结束后，将二号罐中的提取液泵入絮凝罐中，向絮凝罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量的0.5‰的壳聚糖，转速60r/min搅拌5min，进行絮凝，然后将二号罐中的药渣卸出并装入剩下的50％步骤1)得到的药渣W1。
步骤7)，将一号罐中的提取液持续泵入二号罐中进行渗漉提取，同时将絮凝罐中的絮凝混合料液持续泵入一号罐中进行渗漉提取。
步骤8)，将二号罐中的渗漉提取液通过2μm管道过滤器进行过滤后，上大孔吸附树脂柱进行柱吸附。
步骤9)，吸附结束后，用渗漉提取液质量2倍的纯化水冲洗大孔吸附树脂柱后，以渗漉提取液质量9倍的浓度为45％的丁二醇溶液对大孔吸附树脂柱进行洗脱，得洗脱液。
步骤10)，将洗脱液用100nm陶瓷膜进行超滤，压力为2.5bar，取透过液。
步骤11)，采用150D纳滤膜将透过液进行浓缩，压力为5bar，至活性物含量M1≥6000ppm，得舒缓功效的植物复合提取物。
对比例1
一种舒缓功效的植物复合提取物，与实施例1相比，区别仅在于：
本对比例中，各组分的具体投入量(单位kg)如下：
龙胆根1kg、粉防己根2kg、积雪草茎叶2kg、苦参根1kg。
对比例2
一种舒缓功效的植物复合提取物，与实施例1相比，区别仅在于：
本对比例中，各组分的具体投入量(单位kg)如下：
龙胆根2kg、粉防己根1kg、积雪草茎叶1kg、苦参根2kg。
对比例3
一种舒缓功效的植物复合提取物，由龙胆根、粉防己根、积雪草茎叶、苦参根提取而得。
本实施例中，各组分的具体投入量(单位kg)如下：
龙胆根2kg、粉防己根2kg、积雪草茎叶1kg、苦参根1kg。
舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，包括以下步骤：
步骤1)，将粉防己根、苦参根分布粉碎成10-20目的粗粉，按比例称量粉防己根粗粉、苦参根粗粉，将粉防己根粗粉、苦参根粗粉加入搅拌罐中，然后向搅拌罐中加入粉防己根粗粉和苦参根粗粉总质量10倍的浓度为1％的盐酸水溶液，在50℃保温浸泡1.5h，然后在50℃下，转速60r/min，搅拌提取4h，然后将搅拌罐中的全部物料注入离心脱水机中，离心脱水至离心脱水机的出水管无水排出，取滤液。
步骤2)，将滤液经过0.45μm膜过滤，得膜滤液，将膜滤液上离子交换柱，然后有纯水洗脱离子交换柱中的杂质至流出液呈无色，然后用膜滤液体积5倍的洗脱剂对离子交换柱进行洗脱，得提取液，洗脱剂含1％氨水、75％乙醇，余量为水。
步骤3)，将提取液加热浓缩至质量等于步骤1)中的粉防己根粗粉和苦参根粗粉总质量，调节pH＝5，得浓缩提取液。
步骤4)，按比例称量龙胆根和积雪草茎叶，将龙胆根和积雪草茎叶装入提取罐中，在提取罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量10倍的水，70℃下，外循环提取2.5h，外循环速度为4罐/h，得一次提取液，然后再次在提取罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量10倍的水，70℃下，外循环提取2.5h，外循环速度为4罐/h，得二次提取液，将一次提取液和二次提取液注入絮凝罐中，然后向絮凝罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量的0.5‰的壳聚糖，转速60r/min搅拌5min，进行絮凝，200目滤布过滤后区滤液上大孔吸附树脂柱进行柱吸附。
步骤5)，吸附结束后，用渗漉提取液质量2倍的纯化水冲洗大孔吸附树脂柱后，以渗漉提取液质量8倍的浓度为55％的丁二醇溶液对大孔吸附树脂柱进行洗脱，得洗脱液。
步骤6)，将洗脱液与步骤3)得到的浓缩提取液混合，用200nm陶瓷膜进行超滤，压力为2bar，取透过液。
步骤7)，采用150D纳滤膜将透过液进行浓缩，压力为6bar，至活性物含量M1≥6000ppm，得舒缓功效的植物复合提取物。
实验1
稳定性测试(d)：待测样品4℃、48℃、常温光照各条件下无严重变色、无肉眼可见析出、M1含量减少≤10％的最长时间。
M1下降率＝(M1初始含量-M1考察后含量)÷M1初始含量×100％。
M1得率＝M1提取质量÷M1理论含量×100％。
M1理论含量：将药材粉碎成80目粉末，加30倍的50％的乙醇溶液，超声提取30min，过滤；滤渣重复前述提取4次，合并5次提取液，测试M1含量。
M1检测方法：龙胆苦苷参照《中国药典2015版》一部P136:“龙胆”；汉防己甲素参照《中国药典2015版》一部P148:“防己”；积雪草参照《中国药典2015版》一部P283:“积雪草”；苦参参照《中国药典2015版》一部P202:“苦参”。
实验2
鸡胚试验：SNT2329-2009-化妆品眼刺激性-腐蚀性的鸡胚绒毛尿囊膜试验，IS＜1为无刺激；1≤IS＜5为轻度刺激；5≤IS＜9为中度刺激。
实验3
NO抑制细胞模型测试：将小鼠单核巨噬细胞RAW264.7用LPS脂多糖诱导一氧化氮合成酶的生成，同时加入待测化合物处理，吸取培养基通过Griess法在570nm波长测吸光值来检测亚硝酸盐(NO2-)。将RAW264.7细胞接种至96孔板，用1μg/ml LPS进行诱导刺激，同时加入待测化合物(终浓度50μg/ml和500μg/ml)处理，设置不含药物组和L-NMMA阳性药物组做对照。细胞过夜培养后取培养基检测NO生成，在570nm处测定吸光值。在剩余培养基中加入MTS进行细胞存活率检测，排除化合物对细胞的毒性影响。
NO生成抑制率(％)＝(非药物处理组OD570nm-样品组OD570nm)/非药物处理组OD570nm×100％。
实验4
TRPV1抑制细胞模型测试：按1.8×105个/孔的接种密度接种角质形成细胞至6孔板，培养箱(37℃、5％CO2)中孵育过夜。待6孔板中细胞铺板率达到40％～50％时，进行分组给药(同时用辣椒素15μM刺激)，阳性对照为15.6μg/mL trans-4-tert-butylcyclohexanol，每孔给药量为2mL，每组设3个复孔。给药完成后将6孔板放置在培养箱(37℃、5％CO2)中孵育培养24h。用4％的多聚甲醛进行固定处理，固定30min后，进行辣椒素受体(TRPV1)的免疫荧光检测，显微镜下拍照观察，采集图片并分析。应用GraphPad Prism作图，结果表示为Mean±SD。各组间比较采用t-test统计分析(双尾)。
TRPV1蛋白生成抑制率(％)＝(模型组相对IOD/细胞数平均值-测试组相对IOD/细胞数平均值)/(模型组相对IOD/细胞数平均值-空白组相对IOD/细胞数平均值)×100％。
实验5
环氧合酶COX-2活性抑制实验：COX-2首先将花生四烯酸等底物环氧化生成PGG2等中间产物，继而将PGG2等中间产物催化生成PGH2等最终产物，同时把几乎没有荧光的COX-2探针催化生成有强荧光的探针。因此通过荧光检测可以检测COX-2的酶活性。如果在反应中加入COX-2抑制剂，荧光的生成就会被抑制，荧光强度与抑制剂的抑制效果成反比，这样就可以检测出抑制剂的抑制效果。使用96孔黑板设置对照孔和样品孔，并按照试剂盒方法依次加入样品和各反应试剂，阳性对照为100nM塞来昔布。37℃避光孵育后进行荧光测定。激发波长为560nm，发射波长为590nm。
COX-2抑制率(％)＝(RFU100％酶活性对照-RFU样品)/(RFU100％酶活性对照-RFU空白对照)×100％。
实验6
抗炎实验：KM小鼠随机分组，每组10只，雌雄各半。空白组、模型组、地塞米松磷酸钠注射液组、2％样品组，给药方法0.2g/只。连续给药15d，使用1-氯-2，4-二硝基甲苯(DNCB)诱发小鼠迟发性过敏，在实验第1天、第2天分别使用7％DNCB/50μl在背部致敏一次，第6天、第8天用0.5％DNCB/25μl激发，第10天、第12天、第14天用1％DNCB/50μl激发。实验结束将小鼠麻醉(5％水合氯醛)并注射鲁米诺钠盐10min后做活体成像测试，统计炎症强弱。模型组炎症强弱记作100％。
活体成像炎症强弱(％)＝(模型组-给药组)/(模型组-空白组)*100％。
实验1-2的具体检测数据详见表1。
表1
Figure BDA0003770371990000161
从表1可以看出，相对于对比例1、2，实施例1-3的产品中M1的得率有较大的提高，说明组方特定的比列有利于M1中物质的共溶共存，促进提取率。
相对于对比例3，实施例1-3的产品中M1的得率有较大的提高，说明实施例1-3的工艺相对于传统工艺，提取率有提高。
相对于对比例，实施列的2个月稳定性考察后M1下降显著减小，与对比例1、2相比，说明组方特定的组成对成分间的稳定有重要作用，这可能与形成特殊浓度的缓冲体系以及分子之间的氢键、分子间作用力的相对比列有关。与对比例3相比说明即使药材比列一定，工艺的变化也会引起提取成分的改变，最终影响成品的稳定性。稳定性数据和鸡胚测试数据(安全性)与M1下降呈对应关系。
实验3-6的具体实验数据详见表2。
表2
Figure BDA0003770371990000171
NO生成抑制率、TRPV1蛋白生成抑制率、COX-2活性抑制率、活体成像炎症强弱与M1下降比列有正相关关系，综合说明实施例1-3通过特有的药材组合比列同时采用连续化的提取精制过程，提高了产品成分的稳定性和协同性，进而带来产品在外观稳定性、安全性、功效性上的有益效果。
实施例1与对比例3的工艺效率对比详见表3。
表3
组别 能耗KJ/kg药材 工艺周期 使用溶剂总量L/kg药材
实施例1 64 20h 16
对比例3 287 43h 34
对比例3代表了传统工艺，与之相比，实施例1在能耗、生产周期、溶剂用量上都有明显优势。
应用例1
一种修复滋养沐浴液，由以下组分组成：
水、柠檬酸、EDTA二钠、月桂醇醚硫酸钠、椰油酰胺MEA、椰油酰胺丙基甜菜碱、氯化钠、PEG-7甘油椰油酸酯、双(羟甲基)咪唑烷基脲、单碘代丙炔基丁基氨基甲酸酯、PEG-7橄榄油酸酯、(日用)香精、舒缓功效的植物复合提取物、泛醇。
修复滋养沐浴液的制备方法如下：
步骤1)，在主锅中加入65.65kg水，加热升温至80℃，然后依次加入0.1kg柠檬酸、0.1kgEDTA二钠、14kg月桂醇醚硫酸钠，转速240r/min，搅拌至完全溶解，然后加入2kg椰油酰胺MEA，转速30r/min，搅拌至完全溶解。
步骤2)，将主锅内的物料降温至60℃，加入14kg椰油酰胺丙基甜菜碱，转速30r/min，搅拌至完全溶解，然后降温至45℃，加入0.4kg氯化钠，转速30r/min，搅拌至完全溶解。
步骤3)，将主锅内的物料降温至40℃，依次加入0.5kgPEG-7甘油椰油酸酯、0.5kg双(羟甲基)咪唑烷基脲、0.1kg单碘代丙炔基丁基氨基甲酸酯、0.5kgPEG-7橄榄油酸酯、(日用)香精、1kg舒缓功效的植物复合提取物、1kg泛醇，转速30r/min，搅拌15min，分散完全，得修复滋养沐浴液。
舒缓功效的植物复合提取物为实施例1的舒缓功效的植物复合提取物。
应用例2
一种修复乳，由以下组分组成：
水、甘油、丁二醇、尿囊素、透明质酸钠、羟苯甲酯、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡硬脂醇橄榄油酸酯、山梨坦橄榄油酸酯、牛油果树果脂、辛酸/癸酸甘油三酯、植物甾醇酯、神经酰胺NS/神经酰胺NG、角鲨烷、生育酚乙酸酯、丙烯酸(酯)类共聚物钠、卵磷脂、聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷醇、泛醇、舒缓功效的植物复合提取物、燕麦β-葡聚糖、(日用)香精、苯氧乙醇、乙基己基甘油。
修复乳的制备方法如下：
步骤1)，将6kg甘油、6kg丁二醇、0.3kg尿囊素、0.1kg透明质酸钠、0.12kg羟苯甲酯预混后加入主锅中，然后向主锅中刚加入61.03kg水，转速120r/min，持续搅拌并升温至85℃。
步骤2)，将0.8kg鲸蜡硬脂醇、2kg鲸蜡硬脂醇橄榄油酸酯、0.5kg山梨坦橄榄油酸酯、2kg牛油果树果脂、7kg辛酸/癸酸甘油三酯、0.5kg植物甾醇酯、0.1kg神经酰胺NS/神经酰胺NG、3kg角鲨烷、0.5kg生育酚乙酸酯预混后加入油锅中，转速120r/min，持续搅拌并升温至85℃，搅拌至完全溶解，然后加入0.5kg丙烯酸(酯)类共聚物钠、0.4kg卵磷脂，转速120r/min，搅拌5min，然后将油锅中物料投入主锅中，2400r/min，均质15min，降温至60℃，加入1kg聚二甲基硅氧烷、0.5kg聚二甲基硅氧烷醇，2400r/min，均质3min。
步骤3)，降温至45℃，加入1kg泛醇、5kg舒缓功效的植物复合提取物、1kg燕麦β-葡聚糖、0.15kg(日用)香精、0.4kg苯氧乙醇、0.1kg乙基己基甘油，转速120r/min，搅拌5min，分散均匀，得修复乳。
舒缓功效的植物复合提取物为实施例1的舒缓功效的植物复合提取物。
应用例3
一种舒缓修护喷雾，由以下组分组成：
水、透明质酸钠、甘油、EDTA二钠、尿囊素、羟苯甲酯、舒缓功效的植物复合提取物、四氢甲基嘧啶羧酸、PEG-40氢化蓖麻油、(日用)香精、燕麦β-葡聚糖、泛醇、1,2-己二醇。
修护喷雾的制备方法如下：
步骤1)，将水投入主锅中，转速120r/min，持续搅拌，然后依次加入透明质酸钠、甘油、EDTA二钠、尿囊素、羟苯甲酯，转速120r/min，持续搅拌并升温至85℃，转速120r/min，持续搅拌，85℃保温20min。
步骤2)，降温至45℃，加入舒缓功效的植物复合提取物、四氢甲基嘧啶羧酸、PEG-40氢化蓖麻油、(日用)香精、燕麦β-葡聚糖、泛醇、1,2-己二醇，转速120r/min，搅拌10min，得舒缓修护喷雾。
舒缓功效的植物复合提取物为实施例1的舒缓功效的植物复合提取物。
应用例4
一种祛红修护精华，由以下组分组成：
水、卡波姆、黄原胶、透明质酸钠、甘油、尿囊素、氯苯甘醚、浓度为10％的氢氧化钠溶液、舒缓功效的植物复合提取物、四氢甲基嘧啶羧酸、PEG-40氢化蓖麻油、(日用)香精、甘油葡糖苷、PEG/PPG-17/6共聚物、丁二醇、乳酸杆菌/人参根发酵产物滤液、水解人参皂草苷类、泛醇、1,2-己二醇。
祛红修护精华的制备方法如下：
步骤1)，在主锅中加入85.07kg水，转速120r/min，持续搅拌，并加入0.3kg卡波姆，搅拌3mn后，加入预混均匀的0.08kg黄原胶、0.1kg透明质酸钠、6kg甘油，转速120r/min，持续搅拌并升温至85℃，转速120r/min，持续搅拌，85℃保温20min，加入0.2kg尿囊素、0.18kg氯苯甘醚，搅拌1min。
步骤2)，降温至55℃，加入0.6kg浓度为10％的氢氧化钠溶液，转速120r/min，搅拌至溶解均匀。
步骤3)，降温至45℃，加入5kg舒缓功效的植物复合提取物、0.1kg四氢甲基嘧啶羧酸、0.06kgPEG-40氢化蓖麻油、0.01kg(日用)香精、0.3kg甘油葡糖苷、0.2kgPEG/PPG-17/6共聚物、0.9kg丁二醇、0.05kg乳酸杆菌/人参根发酵产物滤液、0.05kg水解人参皂草苷类、0.3kg泛醇、0.5kg1,2-己二醇，转速120r/min，搅拌10min，得祛红修护精华。
舒缓功效的植物复合提取物为实施例1的舒缓功效的植物复合提取物。
本具体实施例仅仅是对本申请的解释，其并不是对本申请的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (10)

1.一种舒缓功效的植物复合提取物，其特征在于：由龙胆根、粉防己根、积雪草茎叶、苦参根提取而得；
所述龙胆根、粉防己根的质量比例为1：1，所述龙胆根、粉防己根组成A组分；
所述积雪草茎叶、苦参根的质量比例为1：1，所述积雪草茎叶、苦参根组成B组分；
所述A组分与B组分的质量比例为2-3：1。
2.一种根据权利要求1所述的舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1），按比例称量粉防己根、苦参根，将粉防己根、苦参根加入至粉防己根和苦参根总质量4-6倍的水中，在50-60℃下搅拌1-2h，离心取渣，得药渣W1；
步骤2），按比例称量龙胆根和积雪草茎叶，将龙胆根和积雪草茎叶装入一号罐中，在一号罐中加入龙胆根和积雪草茎叶总质量6-10倍的水，70-80℃下，外循环提取1.5-2.5h；
步骤3），将一号罐中的提取液泵入二号罐中，70-80℃下，外循环提取1.5-2.5h，同时一号罐中再次加入龙胆根和积雪草茎叶总质量6-10倍的水，在70-80℃下，外循环提取1.5-2.5h；
步骤4），将二号罐中的提取液泵入絮凝罐中进行絮凝，然后将一号罐中的提取液泵入二号罐中，70-80℃下，外循环提取1.5-2.5h，然后将一号罐中的药渣卸出，并向一号罐中装入部分药渣W1；
步骤5），将絮凝罐中的絮凝混合料液泵入一号罐中，保温50-60℃，浸泡1.5-2.5h；
步骤6），将二号罐中的提取液泵入絮凝罐进行絮凝，然后将二号罐中的药渣卸出并装入剩下的药渣W1；
步骤7），将一号罐中的提取液持续泵入二号罐中进行渗漉提取，同时将絮凝罐中的絮凝混合料液持续泵入一号罐中进行渗漉提取；
步骤8），将二号罐中的渗漉提取液进行过滤后，进行柱吸附；
步骤9），对吸附柱进行洗脱，得洗脱液；
步骤10），将洗脱液进行超滤，取透过液；
步骤11），将透过液进行浓缩，至活性物含量M1≥6000ppm，得舒缓功效的植物复合提取物。
3.根据权利要求2所述的一种舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤1）中，先将粉防己根、苦参根粉碎成10-20目的粗粉后再加入水中搅拌。
4.根据权利要求2所述的一种舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤8）中，通过2μm管道过滤器进行过滤。
5.根据权利要求4所述的一种舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤8）中，采用大孔树脂吸附柱进行柱吸附。
6.根据权利要求2所述的一种舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤9）中，先用渗漉提取液质量2倍的纯化水冲洗大孔吸附树脂柱后，以渗漉提取液质量8-10倍的浓度为45-55%的丁二醇溶液对大孔吸附树脂柱进行洗脱。
7.根据权利要求2所述的一种舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤10）中，采用100-200nm陶瓷膜进行超滤，压力为2-3bar。
8.根据权利要求2所述的一种舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤11）中，采用150D纳滤膜进行浓缩，压力为4-6bar。
9.根据权利要求2所述的一种舒缓功效的植物复合提取物的制备方法，其特征在于：所述絮凝罐中进行絮凝时，絮凝剂为壳聚糖。
10.一种舒缓功效的植物复合提取物的应用，其特征在于：所述舒缓功效的植物复合提取物添加至洗护用品、护肤品中，所述舒缓功效的植物复合提取物的添加量为洗护用品、护肤品总质量的1-5%。
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