CN117858624A - 干燥的生物组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种干燥的生物组合物，其包含至少一种二氧化硅、多糖和糖蛋白的混合物、至少一种微生物、至少一种糖或糖醇以及树脂。所述干燥的生物组合物通过以下步骤生产：(a)将至少一种二氧化硅、多糖和糖蛋白的混合物、至少一种微生物和至少一种糖或糖醇在水性溶液中混合，(b)喷雾干燥(a)的混合物，(c)在流化床中用含有树脂的化合物涂覆所述喷雾干燥的混合物(b)。所述组合物适用于农业用途，如叶喷或种子处理。

Description

干燥的生物组合物及其制备方法
技术领域
本公开一般性地涉及干燥的生物组合物及其制备和使用方法。
发明背景
美国专利号8,409,822(Trevino等)公开了用于以干燥模式递送微生物的组合物，其包含具有多孔结构的沉淀的二氧化硅(silica)颗粒和在整个沉淀的二氧化硅颗粒的孔中荷载的微生物，其中对所述组合物可以进行操作以使得所述微生物可以在沉淀的二氧化硅颗粒的孔内增殖。此外，美国专利号9,296,989(Trevino等)也公开了用于以干燥模式递送活细胞的组合物，其包含具有孔的惰性载体基质、在所述惰性载体基质的孔内荷载的活细胞和配置在荷载活细胞的惰性载体基质的外表面上的表面层，其中所述表面层对于有助于所述活细胞的细胞生长的分子是可渗透的，由此与不具有所述表面层的另一种组合物相比，可以对所述组合物进行操作以使得活细胞在惰性载体基质内的增殖增加。尽管Trevino等所述方法中的组合物被公开为处于“干燥模式”，但它们实际上并未干燥，因为包括活微生物的液体被公开为基本上加载到沉淀的二氧化硅颗粒孔中。Trevino等所述方法中的二氧化硅作为吸附剂，载有25-75％的活微生物。在此荷载水平下，荷载的二氧化硅是自由流动的，被定义为触感干燥。这些组合物的用途相对有限，因为所述生物体的浓度和二氧化硅中的水含量没有被优化，并且由于所述生物体仍在呼吸而可能导致活性快速丧失。
各种保护剂如亚砜、醇、单糖、多糖、氨基酸、肽、糖蛋白和其他添加剂已被用来保护微生物免受脱水损害。美国专利号5,360,607(Eyal等)公开了改进的、稳定的、干燥的、颗粒状的生物农药组合物，其包含能够支持真菌生长并促进分生孢子形成的惰性载体和通过真菌玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosoroeus)分离株的深层发酵制备的虫生真菌生物质。然而，这种方法使用藻酸盐封装天然颗粒，其会发生变化，特别是微生物赖以生存和呼吸的水分含量(例如水分活度(aw)水平)会发生变化。
WO 2020/104612 A1描述了一种干燥的生物组合物，其包含(1)基质和(2)加载于所述基质表面上的微生物，其中所述组合物的总水分含量为约0.01wt.％至约15wt.％。
WO 2012/118795 A2描述了包含种子和特定涂覆层的种子涂覆组合物。
CN101069499 A描述了一种处理种子的方法，其包含成膜剂、着色剂和富氧多孔无机材料。
现有技术都没有解决以干燥形式储存时保持微生物稳定性的问题。因此，本发明的目的是提供在储存期间以高浓度干燥且稳定形式的微生物。
发明概述
这个目的通过包含至少一种二氧化硅、多糖和糖蛋白的混合物、至少一种微生物、至少一种糖或糖醇和至少一种树脂的干燥的生物组合物来实现。
所述二氧化硅可以是气相(fumed)二氧化硅或沉淀的二氧化硅，优选地沉淀的二氧化硅。所述沉淀二氧化硅优选地具有10m2/g至550m2/g、更优选地200m2/g至550m2/g、还优选地480m2/g至520m2/g的BET表面积。所述沉淀的二氧化硅优选地具有5μm至200μm、更优选地30μm至100μm、还优选地40μm至60μm的粒径d50。所述沉淀的二氧化硅的总水分含量优选地在1wt.％至15wt.％之间，更优选地在5wt.％至10wt.％之间，还优选地在6wt.％至8wt.％之间。所述沉淀的二氧化硅优选地具有10mL/100g至500mL/100g、更优选地200mL/100g至400mL/100g、还优选地280mL/100g至300mL/100g的吸油值(DOA)。
所述干燥的生物组合物优选地具有0.1m2/g至5m2/g、更优选地0.5m2/g至2m2/g、还优选地0.5m2/g至1m2/g的BET表面积。所述干燥的生物组合物优选地具有5μm至700μm、更优选地300μm至600μm、还优选地450μm至550μm的粒径d50。所述干燥的生物组合物优选地具有0wt.％至15wt.％、更优选地2wt.％至10wt.％、还优选地3wt.％至6wt.％的总水分含量。所述干燥的生物组合物优选地具有0.1至0.6、更优选地0.15至0.5、还优选地0.2至0.4的水分活度。
所述多糖和糖蛋白的混合物可以是阿拉伯树胶。阿拉伯树胶在干燥的生物组合物中的浓度可以为1wt.％至30wt.％，优选地5wt.％至15wt.％。阿拉伯树胶可以起到保护作用，并可以在喷雾干燥过程中带来存活率方面的益处。
所述微生物可以是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)QST713、Pasteuriausagae、球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、盾壳霉(Coniothyrium minitans)、紫韧革菌(Chondrostereum purpureum)、淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)、粉虱座壳孢(Aschersonia aleyrodis)、布氏白僵菌(Beauveria brongniartii)、汤氏被毛孢(Hirsutella thompsonii)、玫烟色棒束孢(Isaria fumosorosea)、棒束孢属物种(Isariasp.)、长孢蜡蚧菌(Lecanicillium longisporum)、蝇蚧疥霉(Lecanicillium muscarium)、蜡蚧菌属物种(Lecanicillium sp.)、金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)、金龟子绿僵菌蝗变种(Metarhizium anisopliae var.acridum)、莱氏野村菌(Nomuraea rileyi)、Sporothrix insectorum、苹果蠹蛾颗粒体病毒(Cydia pomonella GV)、棕榈疫霉(Phytophthora palmivora)、大链壶菌(Lagenidium giganteum)、苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)、Pseudomonas protegens、慢生根瘤菌(Bradyrhizobium)、菌根菌(Mycorrhiza)、粉红粘帚霉(Clonostachys rosea)、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)、黑曲霉(Aspergillus niger)、米曲霉(Aspergillus oryzae)、或汉逊酵母(Hansenula)、芽孢杆菌属物种(Bacillus spp.)及乳酸杆菌属物种(Lactobacillus spp.)，或它们的任意组合，优选地选自苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、Pseudomonas protegens、慢生根瘤菌、菌根菌、粉红粘帚霉及其任意组合，更优选地Pseudomonas protegens。
所述糖可以是海藻糖、蔗糖、二糖或多糖，优选地异麦芽酮糖或帕拉金糖(palatinose)。所述糖醇可以是异麦芽酮糖醇。
所述树脂可以是虫胶。
所述干燥的生物组合物优选地包含至少一种沉淀的二氧化硅、多糖和糖蛋白的混合物、至少一种微生物、糖或糖醇以及虫胶。
所述干燥的生物组合物更优选地包含至少一种沉淀的二氧化硅、阿拉伯树胶、至少一种微生物、异麦芽酮糖醇和虫胶。
所述干燥的生物组合物最优选地包含至少一种沉淀的二氧化硅、阿拉伯树胶、Pseudomonas protegens、异麦芽酮糖醇和虫胶。
所述干燥的生物组合物可以包含增塑剂，优选地聚乙二醇(PEG)或甘油，更优选地PEG 400。
所述干燥的生物组合物优选地包含5wt.％至15wt.％二氧化硅、5wt.％至15wt.％多糖和糖蛋白的混合物、2wt.％至8wt.％微生物、20wt.％至30wt.％糖或糖醇以及30wt.％至60wt.％树脂。
所述干燥的生物组合物优选地包含5wt.％至15wt.％沉淀的二氧化硅、5wt.％至15wt.％阿拉伯树胶、2wt.％至8wt.％微生物，20wt.％至30wt.％糖或糖醇和30wt.％至60wt.％树脂。
所述干燥的生物组合物优选地包含5wt.％至15wt.％沉淀的二氧化硅、5wt.％至15wt.％阿拉伯树胶、2wt.％至8wt.％Pseudomonas protegens、20wt.％至30wt.％异麦芽酮糖醇和30wt.％至60wt.％虫胶。
所述干燥的生物组合物可具有核壳结构，所述核包含二氧化硅、多糖和糖蛋白的混合物、微生物和糖或糖醇，并且所述壳包含树脂，优选地虫胶。
所述干燥的生物组合物可含有30wt.％至60wt.％树脂，优选地虫胶。
所述干燥的生物组合物优选地包含5wt.％至15wt.％沉淀的二氧化硅、5wt.％至15wt.％阿拉伯树胶、2wt.％至8wt.％Pseudomonas protegens、20wt.％至30wt.％异麦芽酮糖醇和30wt.％至60wt.％虫胶，并且所述组合物具有核壳结构，所述核包含沉淀的二氧化硅、阿拉伯树胶、Pseudomonas protegens和异麦芽酮糖醇，并且所述壳包含虫胶。
根据本发明的方法包括：
(a)将至少一种二氧化硅、多糖和糖蛋白的混合物、至少一种微生物和至少一种糖或糖醇在水性溶液中混合，
(b)喷雾干燥(a)的混合物，
(c)在流化床中用含有树脂的化合物涂覆喷雾干燥的混合物(b)。
混合步骤(a)可以用在水性溶液中的至少一种二氧化硅、多糖和糖蛋白的混合物、至少一种微生物和至少一种糖或糖醇来进行。
步骤(a)的水性溶液可以是生理盐水溶液。
步骤(a)的水性溶液可以通过以下方式制备：
(i)混合多糖和糖蛋白的混合物，例如阿拉伯树胶、糖或糖醇，例如异麦芽酮糖醇和二氧化硅，优选地沉淀的二氧化硅，例如50，
(ii)离心微生物，可将离心后的残渣悬浮于生理盐水溶液或Luria Broth(Luria-Miller Bertani Broth)培养基中；及
(iii)完全悬浮后，可将两种溶液(i)和(ii)混合约30分钟至60分钟。
所述喷雾干燥方法(b)可以在喷雾干燥器的入口温度在76℃至80℃之间的条件下完成。出口温度可以在45℃至60℃之间。使用空气或惰性气体的双流体喷嘴无法在系统内产生压力。整个过程可以在氮气气氛下进行。
所述混合物的雾化可以与来自喷雾干燥器顶部的热干燥气体并流进行。
在流化床涂覆方法(c)中，所述方法的气体可以是氮气，最高床温在40℃和50℃之间，优选地40℃。所述树脂可以是树脂水性溶液。所述树脂水性溶液可含有聚乙二醇或甘油。可将所述树脂水性溶液喷入流化床中。所述树脂水性溶液可以是虫胶溶液，优选地铵盐虫胶溶液。所述铵盐-虫胶溶液可含有25wt.％的纯虫胶。所述铵盐-虫胶溶液可以含有PEG400(例如，相对于干燥虫胶为5wt.％)作为增塑剂。
本发明的干燥生物组合物可用于农业应用，例如种子处理或叶喷应用以及食品和饲料应用。
最终干燥的生物组合物具有改善的储存稳定性。
实施例
粒径(d50)
根据ISO 13220，在HORIBA激光散射干式粒径分布分析仪LA-950上通过散射激光的角度进行基质粒径测量。
总水分含量
干燥的的基质或微生物粉末的水分测量是在Satorius IR Moisture Balance上进行的。称取约0.3g样品粉末，置于铝盘中，同时将样品加热至105℃至恒重。
水分活度
样品的水分活度(aw)是在22℃下进行的。通过将样品置于规定的水分活度环境中来测量样品的水分活度(aw)，并使用测量设备进行跟踪。所述湿度传感器基于高分子电容式湿度传感元件，该元件由放置在一对电极之间的吸湿介电材料组成。所述传感器使用塑料或高分子作为介电材料。气态水分子可以通过传感器内部。当湿度增加时，所述材料会发生反应，并且传感器的几何形状决定电容值，该值与存在的水分子的量有关。因此，随着时间的推移，跟踪室内以及样品内的相对湿度，因为所述湿度将遵循样品和气态环境之间的平衡状态。
BET表面积和DOA
基质(例如二氧化硅)的BET表面积是用Micromeritics TriStar 3020仪器通过Brunaur et al.,J.Am.Chem.Soc.,60,309(1938)的BET氮气吸附方法测定的，所述方法在颗粒材料例如二氧化硅和硅酸盐材料领域中是已知的。在77K处收集氮气吸附-脱附等温线。测量前将50-100mg粉末样品在105℃下脱气2小时。使用Barrett-Joyner-Halenda(BJH)模型计算BET表面积。DOA吸附测量是根据ISO 19246进行的。
集落形成单位(CFU)
使用连续稀释技术通过平板计数确定微生物的浓度。将含有微生物的产品粉末在存在Triton X-100表面活性剂的无菌水中搅拌，以从载体中动员所述微生物。将所得的个体化微生物悬浮液依次稀释数次，每次稀释10倍。每次将稀释样品铺板在无菌琼脂板上并温育。几天后，可以看到琼脂上存在的生物体呈点状。当稀释度足以将平板上的数量减少到可计数的数量时，计数集落数量并乘以稀释因子以确定原始样品中的种群。
储存测试
储存测试在25℃下进行。储存测试在气候室中进行，盐浓度定义了周围大气中相对湿度为40％(碘化钠)的水分活度环境，相当于0.4的水分活度。将来自喷雾干燥过程的未涂覆样品作为参考，以及将来自流化床涂覆过程的涂覆的样品以1g份量加入到开放式falcon管中的室中。随着时间的推移，密闭大气中的相对湿度与每个1g样品的开放样品管中的相对湿度相同。因此，所述细胞与周围大气的相对湿度保持平衡。在给定的时间段(几周)内，定期从气候室中抽取样本。然后通过所述CFU方法分析样品。
使用上述分析方法，测量所述基质的物理性质并总结如下。
实施例1(比较)
在一个烧瓶中提供6390g生理盐水溶液。这将被称为溶液(i)。称取655g阿拉伯树胶，并用螺旋桨搅拌机搅拌直至阿拉伯树胶完全溶解。然后将1829g糖醇异麦芽酮糖醇加入所述溶液中。完全溶解后，将770g的/>50加入所述液体中并混合直至均匀分布。/>50是Evonik Operations GmbH的产品，BET为500m2/g，d50为50μm，总水分含量≤7wt.％。
通过以12000rpm离心10分钟，从摇瓶中的过夜培养物中收获Migula命名的Pseudomonas protegensPf-5的细菌生物量。将收获的含有微生物的生物质细胞沉淀转移到第二个烧瓶中。使用螺旋桨混合器将1600g这些微生物重新悬浮在1600g新鲜LuriaBroth(Luria-Miller Bertani Broth)培养基中。此溶液被称为溶液(ii)。
将溶液(i)加入到溶液(ii)中并另外搅拌60分钟。这个溶液被称为溶液(iii)。
使用GEA生产的Niro Minor(MM-100)喷雾干燥机对溶液(iii)进行喷雾干燥。将入口温度调节至80℃，流速为18g/min至20g/min。相应的出口温度在50℃至53℃之间。干燥机以并流方式使用，使用双流体喷嘴雾化的颗粒在机器内几秒钟内干燥。雾化干燥气体为氮气。使用旋风分离器(cyclone)收集产生的颗粒，然后将产品在4℃下冷藏储存。
实施例2(发明实施例)
将2.4kg实施例1的喷雾干燥产品储存在4℃的冰箱内，直至第二天在名为ProcellLabSystems(由Glatt生产)的流化床中使用。在一次运行中，在流化床机器内提供350g实施例1的喷雾干燥产品。将用于流化粉末的30m3/h氮气预热至80℃，然后使用1.5bar喷射压力将1475g铵-虫胶溶液(Stoever GmbH&Co.KG Bremen的AQUAGOLD)喷入流化床粉末中。所述铵-虫胶水性溶液中干虫胶在水中的浓度为25wt.％。根据所用的干虫胶重量，将增塑剂以5wt％的浓度加入这个溶液中。所述增塑剂是PEG 400。干燥时间为140分钟。
床温度约为40℃。所述虫胶将在喷雾干燥的颗粒周围形成外壳并相应地涂覆其。涂覆的粉末的外部含有虫胶。
使用上述或类似描述的方法，测量直接在处理之后的产品的BET表面积和平均粒径并总结在表1中。
表1
基质 方法 BET表面积[m2/g] 粒径d50[μm]
实施例1 喷雾干燥 20.48 60
实施例2 流化床涂覆 00.73 500
使用上述或类似描述的方法，测量直接在处理之后的产品的总水分含量和水分活度(aw)水平并总结在表2中。
表2
基质 方法 总水分含量[wt.％] 水分活度(aw)[-]
实施例1 喷雾干燥 4.0 0.33
实施例2 流化床涂覆 4.2 0.38
表3总结了储存水分活度(aw)，其描述了一到三周后样品储存所在大气的水分活度、储存温度(℃)、初始CFU以及水分含量对CFU的影响。
表3
从以上表1可以看出，通过添加虫胶涂覆，由于开放孔的堵塞，BET表面积降低。
在40％RH下，在相同的储存条件下(表3)，未涂覆的粉末(实施例1)与虫胶涂覆的粉末(实施例2)相比表现出较低的稳定性。三周后，涂覆材料的LOG损失为3.09，未涂覆材料的LOG损失为7.46。
因此，可以得出结论，与未涂覆的材料相比，虫胶涂层显著降低了储存期间活细胞的死亡率，并保护细胞免于死亡。
权利要求书(按照条约第19条的修改)
1.一种干燥的生物组合物，其包含至少一种二氧化硅、多糖和糖蛋白的混合物、至少一种糖或糖醇、至少一种微生物和至少一种树脂，其中所述组合物具有核壳结构，所述核包含二氧化硅、多糖和糖蛋白的混合物、微生物和糖或糖醇，并且所述壳包含树脂。
2.根据权利要求1的干燥的生物组合物，其中所述二氧化硅是沉淀的二氧化硅。
3.根据权利要求2的干燥的生物组合物，其中所述沉淀的二氧化硅的BET表面积为10m2/g至550m2/g，优选地200m2/g至550m2/g，更优选地480m2/g至520m2/g。
4.根据权利要求1的干燥的生物组合物，其中所述微生物是枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)QST713、Pasteuria usagae、球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、盾壳霉(Coniothyrium minitans)、紫韧革菌(Chondrostereum purpureum)、淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)、粉虱座壳孢(Aschersonia aleyrodis)、布氏白僵菌(Beauveria brongniartii)、汤氏被毛孢(Hirsutella thompsonii)、玫烟色棒束孢(Isaria fumosorosea)、棒束孢属物种(Isaria sp.)、长孢蜡蚧菌(Lecanicilliumlongisporum)、蝇蚧疥霉(Lecanicillium muscarium)、蜡蚧菌属物种(Lecanicilliumsp.)、金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)、金龟子绿僵菌蝗变种(Metarhiziumanisopliae var.acridum)、莱氏野村菌(Nomuraea rileyi)、Sporothrix insectorum、苹果蠹蛾颗粒体病毒(Cydia pomonella GV)、棕榈疫霉(Phytophthora palmivora)、大链壶菌(Lagenidium giganteum)、苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)、慢生根瘤菌(Bradyrhizobium)、菌根菌(Mycorrhiza)、粉红粘帚霉(Clonostachys rosea)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)、黑曲霉(Aspergillus niger)、米曲霉(Aspergillus oryzae)、或汉逊酵母(Hansenula)、芽孢杆菌属物种(Bacillus spp.)及乳酸杆菌属物种(Lactobacillusspp.)，或它们的任意组合，优选地选自苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、Pseudomonas protegens、慢生根瘤菌、菌根菌、粉红粘帚霉及它们的任意组合。
5.根据权利要求4的干燥的生物组合物，其中所述微生物是Pseudomonas protegens。
6.根据权利要求1的干燥的生物组合物，其中所述树脂是虫胶。
7.根据权利要求1的干燥的生物组合物，其中所述糖或糖醇是海藻糖、蔗糖或多糖或异麦芽酮糖醇。
8.根据权利要求1的干燥的生物组合物，包含沉淀的二氧化硅、阿拉伯树胶、Pseudomonas protegens、异麦芽酮糖醇和虫胶。
9.根据权利要求1的干燥的生物组合物，其中所述组合物含有30wt.％至60wt.％的树脂。
10.根据权利要求1的干燥的生物组合物，其包含5wt.％至15wt.％的二氧化硅、5wt.％至15wt.％的多糖和糖蛋白的混合物、2wt.％至8wt.％的微生物、30wt.％至60wt.％的树脂和20wt.％至30wt.％的糖或糖醇。
11.用于生产根据权利要求1的干燥的生物组合物的方法，包括以下步骤：
(a)将至少一种二氧化硅、多糖和糖蛋白的混合物、至少一种微生物和至少一种糖或糖醇在水性溶液中混合，
(b)喷雾干燥(a)的混合物，
(c)在流化床中用含有树脂的化合物涂覆所述喷雾干燥的混合物(b)。
12.根据权利要求11的用于生产干燥的生物组合物的方法，在步骤(a)中添加生理盐水溶液。
13.根据权利要求11的用于生产干燥的生物组合物的方法，在步骤(c)中添加甘油或聚乙二醇。
14.根据权利要求1的干燥的生物组合物在种子制剂或叶喷应用中的用途。

Claims (16)

1.一种干燥的生物组合物，其包含至少一种二氧化硅、多糖和糖蛋白的混合物、至少一种糖或糖醇、至少一种微生物和至少一种树脂。
2.根据权利要求1的干燥的生物组合物，其中所述二氧化硅是沉淀的二氧化硅。
3.根据权利要求2的干燥的生物组合物，其中所述沉淀的二氧化硅的BET表面积为10m2/g至550m2/g，优选地200m2/g至550m2/g，更优选地480m2/g至520m2/g。
4.根据权利要求1的干燥的生物组合物，其中所述微生物是枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)QST713、Pasteuria usagae、球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、盾壳霉(Coniothyrium minitans)、紫韧革菌(Chondrostereum purpureum)、淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)、粉虱座壳孢(Aschersonia aleyrodis)、布氏白僵菌(Beauveria brongniartii)、汤氏被毛孢(Hirsutella thompsonii)、玫烟色棒束孢(Isaria fumosorosea)、棒束孢属物种(Isaria sp.)、长孢蜡蚧菌(Lecanicilliumlongisporum)、蝇蚧疥霉(Lecanicillium muscarium)、蜡蚧菌属物种(Lecanicilliumsp.)、金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)、金龟子绿僵菌蝗变种(Metarhiziumanisopliae var.acridum)、莱氏野村菌(Nomuraea rileyi)、Sporothrix insectorum、苹果蠹蛾颗粒体病毒(Cydia pomonella GV)、棕榈疫霉(Phytophthora palmivora)、大链壶菌(Lagenidium giganteum)、苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)、慢生根瘤菌(Bradyrhizobium)、菌根菌(Mycorrhiza)、粉红粘帚霉(Clonostachys rosea)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)、黑曲霉(Aspergillus niger)、米曲霉(Aspergillus oryzae)、或汉逊酵母(Hansenula)、芽孢杆菌属物种(Bacillus spp.)及乳酸杆菌属物种(Lactobacillusspp.)，或它们的任意组合，优选地选自苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、Pseudomonas protegens、慢生根瘤菌、菌根菌、粉红粘帚霉及它们的任意组合。
5.根据权利要求4的干燥的生物组合物，其中所述微生物是Pseudomonas protegens。
6.根据权利要求1的干燥的生物组合物，其中所述树脂是虫胶。
7.根据权利要求1的干燥的生物组合物，其中所述糖或糖醇是海藻糖、蔗糖或多糖或异麦芽酮糖醇。
8.根据权利要求1的干燥的生物组合物，包含沉淀的二氧化硅、阿拉伯树胶、Pseudomonas protegens、异麦芽酮糖醇和虫胶。
9.根据权利要求1的干燥的生物组合物，其包含5wt.％至15wt.％的二氧化硅、5wt.％至15wt.％的多糖和糖蛋白的混合物、2wt.％至8wt.％的微生物、20wt.％至30wt.％的糖或糖醇和30wt.％至60wt.％的树脂。
10.根据权利要求1的干燥的生物组合物，其中所述组合物具有核壳结构，所述壳包含二氧化硅、多糖和糖蛋白的混合物、微生物和糖或糖醇，并且所述壳包含树脂。
11.根据权利要求10的干燥的生物组合物，其中所述组合物含有30wt.％至60wt.％的树脂。
12.根据权利要求10的干燥的生物组合物，其包含5wt.％至15wt.％的二氧化硅、5wt.％至15wt.％的多糖和糖蛋白的混合物、2wt.％至8wt.％的微生物、30wt.％至60wt.％的树脂和20wt.％至30wt.％的糖或糖醇。
13.用于生产根据权利要求1的干燥的生物组合物的方法，包括以下步骤：
(a)将至少一种二氧化硅、多糖和糖蛋白的混合物、至少一种微生物和至少一种糖或糖醇在水性溶液中混合，
(b)喷雾干燥(a)的混合物，
(c)在流化床中用含有树脂的化合物涂覆所述喷雾干燥的混合物(b)。
14.根据权利要求13的用于生产干燥的生物组合物的方法，在步骤(a)中添加生理盐水溶液。
15.根据权利要求13的用于生产干燥的生物组合物的方法，在步骤(c)中添加甘油或聚乙二醇。
16.根据权利要求1的干燥的生物组合物在种子制剂或叶喷应用中的用途。
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