CN117730082A - 取代的三环酰胺及其类似物的合成 - Google Patents

Abstract

本公开内容包括用于制备某些取代的三环酰胺的合成方法，所述取代的三环酰胺可用于在受试者中治疗、减轻和/或预防乙型肝炎病毒(HBV)和/或丁型肝炎病毒(HDV)感染。

Description

取代的三环酰胺及其类似物的合成

相关申请的交叉引用

根据35U.S.C.§119(e)，本申请要求2021年7月19日提交的美国临时专利申请号63/223,297的优先权，在此其通过引用以其整体并入本文。

背景技术

乙型肝炎是世界上最流行的疾病之一，被美国过敏和传染病研究所(NIAID)列为高度优先感兴趣的领域。尽管大多数人会在急性症状后解决感染，但是大约30％的病例会变成慢性病。据估计，全世界有3.5-4亿人患有慢性乙型肝炎，每年导致50-100万人死亡，这主要是由于肝细胞癌、肝硬化和/或其他并发症的发展。

目前已批准用于治疗慢性乙型肝炎的药物数量有限，包括抑制α-干扰素的两种制剂(标准和聚乙二醇化的)和抑制HBV DNA聚合酶的五种核苷/核苷酸类似物(拉米夫定、阿德福韦、恩替卡韦、替比夫定和替诺福韦)。目前，一线治疗的选择是恩替卡韦、替诺福韦和/或聚乙二醇干扰素α-2a。然而，聚乙二醇干扰素α-2a仅在三分之一的治疗患者中达到了理想的血清学里程碑，并且经常伴有严重的副作用。恩替卡韦和替诺福韦是有效的HBV抑制剂，但需要长期或可能终生施用以持续抑制HBV复制，并可能由于耐药病毒的出现而最终失败。因此，迫切需要为慢性乙型肝炎引入新型、安全和有效的疗法。

HBV是属于嗜肝病毒科的非致细胞病变型嗜肝DNA病毒。前基因组(pg)RNA是HBVDNA逆转录复制的模板。pg RNA与病毒DNA聚合酶一起衣壳化为核衣壳对于随后的病毒DNA合成至关重要。抑制pg RNA衣壳化可能会阻止HBV复制，并为HBV治疗提供新的治疗方法。衣壳抑制剂通过直接或间接抑制衣壳蛋白的表达和/或功能发挥作用：例如，它可以抑制衣壳装配、诱导非衣壳聚合物形成、促进过量的衣壳装配或衣壳装配方向错误、影响衣壳稳定和/或抑制RNA衣壳化。衣壳抑制剂还可以通过在复制过程中的一个或多个下游事件中抑制衣壳功能来发挥作用，这些事件比如但不限于病毒DNA合成、松环DNA(rcDNA)转运入细胞核中、共价闭合环状DNA(cccDNA)的形成、病毒成熟、出芽和/或释放。

在临床上，抑制pg RNA衣壳化或更普遍地抑制核衣壳装配可能提供某些治疗优势。在一方面，抑制pg RNA衣壳化可以通过向无法耐受或无法从当前药物中获益的患者亚群提供选择来补充当前的药物。在另一方面，基于其独特的抗病毒机制，对pg RNA衣壳化的抑制可有效地抵抗对当前可用的DNA聚合酶抑制剂具有抗性的HBV变体。在另一方面，pgRNA衣壳化抑制剂与DNA聚合酶抑制剂的联合治疗可以协同抑制HBV复制并防止耐药性的出现，因此为慢性乙型肝炎感染提供了更有效的治疗。

丁型肝炎病毒(HDV)是仅在HBV存在时才能繁殖的一种小的环状包膜RNA病毒。具体而言，HDV需要HBV表面抗原蛋白自我繁殖。与单独感染HBV相比，感染HBV和HDV会导致更严重的并发症。这些并发症包括在急性感染中经历肝衰竭的可能性更大，并迅速发展为肝硬化，并且增加在慢性感染中发展为肝癌的机会。与乙型肝炎结合时，丁型肝炎在所有肝炎感染中死亡率最高。HDV的传播途径与HBV相似。感染主要限于处于HBV感染的高风险人群，特别是注射吸毒者和接受凝血因子浓缩物的人群。

当前，没有有效的可用于治疗急性或慢性丁型肝炎的抗病毒疗法。每周给予干扰素-α，持续12至18个月是丁型肝炎的唯一许可疗法。对该疗法的反应有限，因为仅约四分之一的患者在治疗后6个月无法检测到血清HDV RNA。

在临床上，抑制pg RNA衣壳化或更普遍地抑制核衣壳装配可能为乙型肝炎和/或丁型肝炎的治疗提供某些治疗优势。在一方面，抑制pg RNA衣壳化可以通过向无法耐受或无法从当前药物中获益的患者亚群提供选择来补充当前的药物。在另一方面，基于其独特的抗病毒机制，对pg RNA衣壳化的抑制可有效地抵抗对当前可用的DNA聚合酶抑制剂具有抗性的HBV和/或HDV变体。在另一方面，pg RNA衣壳化抑制剂与DNA聚合酶抑制剂的联合治疗可以协同抑制HBV和/或HDV复制并防止耐药性的出现，因此为慢性乙型肝炎和/或丁型肝炎感染提供了更有效的治疗。

因此，本领域中需要鉴定可用于在受试者中治疗和/或预防HBV和/或HDV感染的新型化合物。在某些实施方式中，新型化合物抑制HBV和/或HDV核衣壳装配。在其他实施方式中，新型化合物可用于HBV和/或HBV-HDV感染的患者、有被HBV和/或HBV-HDV感染的风险的患者和/或感染了耐药性HBV和/或HDV的患者中。本领域还需要确定允许大规模批量制备这种化合物的可放大合成方案。本发明解决了这一需求。

发明内容

在一方面，本公开内容包括制备(S)-N-(8,9-二氟-6-氧-1,4,5,6-四氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-1-基)-5,6-二氟-N-甲基-1H-吲哚-2-甲酰胺(X)、或其盐、溶剂化物、前药、同位素标记衍生物、立体异构体(比如在非限制性实例中，对映异构体或其任意混合物，比如在非限制性实例中，其对映异构体的任意比例的混合物)和/或互变异构体及任意混合物的方法，

在另一方面中，式(X)的化合物、或其盐、溶剂化物、前药、同位素标记衍生物、立体异构体和/或互变异构体及任意混合物可用于在受试者中治疗、减轻和/或预防乙型肝炎(HBV)和/或丁型肝炎(HDV)感染和相关病症。

具体实施方式

在某些方面，本公开内容涉及发现可放大的合成路线，该路线允许可重复的多克合成可用于治疗、减轻和/或预防受试者中的乙型肝炎病毒(HBV)和/或丁型肝炎病毒(HDV)感染和相关病症的某些含取代的三环酰胺的化合物。在某些实施方式中，本公开内容的化合物是病毒衣壳抑制剂。

2021年5月13日提交的PCT国际申请号PCT/US2021/032155和2020年5月14日提交的美国临时申请号63/024,559的公开内容通过引用以其整体并入本文。

定义

如本文所使用的，以下每个术语在本节中具有与其相关的含义。除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语通常具有与本公开内容所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。通常，本文所用的命名法以及动物药理学、药物科学，分离科学和有机化学中的实验室程序是本领域众所周知的和常用的。应当理解，只要本教导仍然可操作，步骤的顺序或用于执行某些动作的顺序是不重要的。章节标题的任何使用均旨在帮助阅读文件，而不应理解为限制性的；与章节标题相关的信息可能发生在该特定章节之内或之外。该文件中引用的所有出版物、专利和专利文件都通过引用以其整体并入本文，如同通过引用将其单独并入。

在本申请中，在叙述元素或组分被包括在所列举的元素或组分的列表中和/或选自所列举的元素或组分的列表的情况下，应当理解，该元素或组分可以是所列举的元素或组分中的任一个并且可以选自所列举的元件或组分中的两个或更多个。

在本文描述的方法中，可以以任何顺序执行动作，除非明确地陈述了时间或操作序列。此外，指定的动作可以同时执行，除非明确的声明语言陈述了它们是分开执行的。例如，可以在单个操作中同时进行要求保护的X动作和要求保护的Y动作，并且所得过程将落入要求保护的过程的字面范围内。

在本文中，除非上下文另外明确指出，否则术语“一(a)”、“一(an)”或“所述(the)”用于包括一个或多个。除非另有说明，否则术语“或(or)”用于表示非排他性的“或”。陈述“A和B中的至少一个”或“A或B中的至少一个”具有与“A、B或A和B”相同的含义。

如本文中所使用的，术语“约(about)”将被本领域普通技术人员理解，并且将在使用它的上下文中在某种程度上变化。如本文中所使用的，当“约”指代可测量值比如量、时间持续时间等时，旨在涵盖与指定值具有±20％、±10％、±5％、±1％或±0.1％的变化，因为这样的变化适合执行所公开的方法。

如本文所使用的，除非另有说明，否则单独或与其他术语组合使用的术语“烯基”是指具有规定数目的碳原子的稳定的单不饱和或二不饱和直链或支链烃基。实例包括乙烯基、丙烯基(或烯丙基)、丁烯基(crotyl)、异戊烯基、丁二烯基、1,3-戊二烯基、1,4-戊二烯基以及更高的同系物和异构体。代表烯烃的官能团的实例为-CH₂-CH＝CH₂。

如本文所使用的，除非另有说明，否则单独或与其他术语组合使用的术语“烷氧基(alkoxy)”是指经由氧原子连接到分子的其余部分的如本文其他地方所定义的具有指定数目的碳原子的烷基，诸如例如甲氧基、乙氧基、1-丙氧基、2-丙氧基(或异丙氧基)和更高的同系物和异构体。具体实例是(C₁-C₃)烷氧基，比如，但不限于乙氧基和甲氧基。

如本文所使用的，除非另有说明，术语“烷基(alkyl)”本身或作为另一取代基的一部分是指具有指定数目的碳原子(即，C₁-C₁₀表示1至10个碳原子)的直链或支链烃，并且包括直链、支链或环状取代基。实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基和环丙基甲基。具体实施方式是(C₁-C₆)烷基，比如，但不限于乙基、甲基、异丙基、异丁基、正戊基、正己基和环丙基甲基。

如本文所使用的，除非另有说明，否则单独或与其他术语组合使用的术语“炔基(alkynyl)”是指具有规定数目的碳原子的具有碳-碳三键的稳定的直链或支链烃基。非限制性实例包括乙炔基和丙炔基，以及更高的同系物和异构体。术语“炔丙基(propargylic)”是指以-CH₂-C≡CH为例的基团。术语“均炔丙基(homopropargylic)”是指以-CH₂CH₂-C≡CH为例的基团。

如本文所使用的，术语“芳族”是指具有一个或多个多不饱和环并且具有芳族特征，即具有(4n+2)个离域的π(pi)电子(其中‘n’是整数)的碳环或杂环。

如本文所使用的，除非另有说明，否则单独或与其他术语组合使用的术语“芳基”是指含有一个或多个环(通常为一个、两个或三个环)的碳环芳族系统，其中这些环可以以侧链方式连接在一起，比如联苯，或者可以稠合，比如萘。实例包括苯基、蒽基和萘基。芳基还包括例如与一个或多个饱和或部分饱和的碳环(例如，双环[4.2.0]八-1,3,5-三烯基或茚满基)稠合的苯环或萘环，其可以在芳环和/或饱和或部分饱和的环的一个或多个碳原子处被取代。

如本文所使用的，术语“芳基-(C₁-C₆)烷基”是指其中1至6个碳亚烷基链连接至芳基的官能团，例如，-CH₂CH₂-苯基或-CH₂-苯基(或苄基)。具体实例是芳基-CH₂-和芳基-CH(CH₃)-。术语“取代的芳基-(C₁-C₆)烷基”是指其中芳基被取代的芳基-(C₁-C₆)烷基官能团。具体实例是取代的芳基(CH₂)-。类似地，术语“杂芳基-(C₁-C₆)烷基”是指其中1至3个碳亚烷基链连接至杂芳基的官能团，例如，-CH₂CH₂-吡啶基。具体实例是杂芳基-(CH₂)-。术语“取代的杂芳基-(C₁-C₆)烷基”是指其中杂芳基被取代的杂芳基-(C₁-C₆)烷基官能团。具体实例是取代的杂芳基-(CH₂)-。

如本文所使用的，除非另有说明，术语“环烷基(cycloalkyl)”本身或作为另一取代基的一部分是指具有指定数目的碳原子的环链烃(即，C₃-C₆是指包括由3至6个碳原子组成的环基团的环状基团)并且包括直链、支链或环状取代基。(C₃-C₆)环烷基的实例是环丙基、环丁基、环戊基和环己基。环烷基环可以任选地被取代。环烷基的非限制性实例包括：环丙基、2-甲基-环丙基、环丙烯基、环丁基、2,3-二羟基环丁基、环丁烯基、环戊基、环戊烯基、环戊二烯基、环己基、环己烯基、环庚基、环辛基、十氢萘基、2,5-二甲基环戊基、3,5-二氯环己基、4-羟基环己基、3,3,5-三甲基环己-1-基、八氢戊烯基、八氢-1H-茚基、3a,4,5,6,7,7a-六氢-3H-茚-4-基、十氢薁基(azulenyl)；双环[6.2.0]癸基、十氢萘基和十二氢-1H-芴基。术语“环烷基”还包括双环烃环，其非限制性实例包括双环[2.1.1]己烷基、双环[2.2.1]庚烷基、双环[3.1.1]庚烷基、1,3-二甲基[2.2.1]庚烷-2-基、双环[2.2.2]辛烷基和双环[3.3.3]十一烷酰基(undecanyl)。

如本文所使用的，“疾病”是受试者的健康状态，其中受试者不能维持体内稳态，并且如果疾病没有得到改善，则受试者的健康继续恶化。

如本文所使用的，受试者中的“紊乱(disorder)”是其中受试者能够维持稳态的健康状态，但是其中受试者的健康状态比没有紊乱时的健康状态不利。如果不及时治疗，紊乱不一定会导致受试者的健康状态进一步下降。

如本文所使用的，术语“卤离子(halide)”是指带有负电荷的卤素原子。卤化物阴离子是氟离子(F^-)、氯离子(Cl^-)、溴离子(Br^-)和碘离子(I^-)。

如本文所使用的，除非另有说明，术语“卤基(halo)”或“卤素(halogen)”单独或作为另一取代基的一部分是指氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。

如本文所使用的，除非另有说明，术语“杂烯基(heteroalkenyl)”本身或与另一术语组合是指由规定数目的碳原子和选自O、N和S的一个或两个杂原子组成的稳定的直链或支链单不饱和或二不饱和烃基，并且其中氮原子和硫原子可任选地被氧化，和氮杂原子可任选地被季铵化。可以连续放置至多两个杂原子。实例包括-CH＝CH-O-CH₃、-CH＝CH-CH₂-OH、-CH₂-CH＝N-OCH₃、-CH＝CH-N(CH₃)-CH₃和-CH₂-CH＝CH-CH₂-SH。

如本文所使用的，除非另有说明，术语“杂烷基(heteroalkyl)”本身或与另一术语组合是指由规定数目的碳原子和选自O、N和S的一个或两个杂原子组成的稳定的直链或支链烷基，并且其中氮原子和硫原子可以任选地被氧化，和氮杂原子可以任选地被季铵化。杂原子(一个或多个)可位于杂烷基的任何位置，包括在杂烷基的其余部分和其连接的片段之间，以及连接至杂烷基中最远端的碳原子。实例包括：-OCH₂CH₂CH₃、-CH₂CH₂CH₂OH、-CH₂CH₂NHCH₃、-CH₂SCH₂CH₃和-CH₂CH₂S(＝O)CH₃。至多两个杂原子可以是连续的，诸如例如-CH₂NH-OCH₃或-CH₂CH₂SSCH₃。

如本文所使用的，术语“杂芳基(heteroaryl)”或“杂芳族(heteroaromatic)”是指具有芳族特性的杂环。多环杂芳基可以包括一个或多个部分饱和的环。实例包括四氢喹啉和2，3-二氢苯并呋喃基。

如本文所使用的，除非另有说明，否则术语“杂环(heterocycle)”或“杂环基(heterocyclyl)”或“杂环的(heterocyclic)”本身或作为另一取代基的一部分是指包括碳原子和选自N、O和S的至少一个杂原子的未取代或取代的、稳定的单环或多环杂环系统，并且其中氮和硫杂原子可以任选地被氧化，和氮原子可以任选地被季铵化。除非另有说明，杂环系统可以连接在提供稳定结构的任何杂原子或碳原子上。杂环本质上可以是芳族的或非芳族的。在某些实施方式中，杂环是杂芳基。

非芳族杂环的实例包括单环基团，比如氮丙啶、环氧乙烷、硫杂丙环(thiirane)、氮杂环丁烷、氧杂环丁烷、硫杂环丁烷、吡咯烷、吡咯啉、咪唑啉、吡唑烷、二氧戊环、环丁砜、2,3-二氢呋喃、2,5-二氢呋喃、四氢呋喃、四氢噻吩(thiophane)、哌啶、1,2,3,6-四氢吡啶、1,4-二氢吡啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、吡喃、2,3-二氢吡喃、四氢吡喃、1,4-二噁烷、1,3-二噁烷、高哌嗪、高哌啶、1,3-二氧杂环庚烷、4,7-二氢-1,3-二噁庚(dioxepin)和环氧己烷(hexamethyleneoxide)。

杂芳基的实例包括吡啶基、吡嗪基、嘧啶基(比如，但不限于2-和4-嘧啶基)、哒嗪基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡唑基、异噻唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,3,4-三唑基、四唑基、1,2,3-噻唑基、1,2,3-噁二唑基、1,3,4-噻唑基和1,3,4-噁二唑基。

多环杂环的实例包括吲哚基(比如，但不限于3-、4-、5-、6-和7-吲哚基)、二氢吲哚基、喹啉基、四氢喹啉基、异喹啉基(比如，但不限于1-和5-异喹啉基)、1,2,3,4-四氢异喹啉基、噌啉基(cinnolinyl)、喹喔啉基(比如，但不限于2-和5-喹喔啉基)、喹唑啉基、酞嗪基、1,8-萘啶基、1,4-苯并二噁烷基、香豆素、二氢香豆素、1,5-萘啶基、苯并呋喃基(比如，但不限于3-、4-、5-、6-和7-苯并呋喃基)、2,3-二氢苯并呋喃基、1,2-苯并噁唑基、苯并噻吩基(比如，但不限于3-、4-、5-、6-和7-苯并噻吩基)、苯并噁唑基、苯并噻唑基(比如，但不限于2-苯并噻唑基和5-苯并噻唑基)、嘌呤基、苯并咪唑基、苯并三唑基、硫代黄嘌呤基(thioxanthinyl)、咔唑基、咔啉基、吖啶基、吡咯啶基(pyrrolizidinyl)和喹嗪啶基(quinolizidinyl)。

杂环基和杂芳基部分的上述列举旨在是代表性的，而不是限制性的。

如在本文中使用的，术语“NMT”指的是不超过。

如本文所使用的，术语“药物组合物”或“组合物”是指在本公开内容中有用的至少一种化合物与药学上可接受的载体的混合物。药物组合物促进将化合物施用至受试者。

如本文所使用的，术语“药学上可接受的”是指不消除本公开内容中有用的化合物的生物活性或特性并且相对无毒的材料，比如载体或稀释剂，即可以在不引起不良生物效应或不会以有害方式与包含其的组合物的任何组分相互作用的情况下将该材料施用至受试者。

如本文所使用的，术语“药学上可接受的载体”是指参与在受试者中或向受试者携带或运输本公开内容中有用的化合物使得它可以执行预期的功能的药学上可接受的材料、组合物或载体，比如液体或固体填充剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、稀释剂、赋形剂、增稠剂、溶剂或封装材料。典型地，将这种构建体从一个器官或身体的一部分携带或运输到另一器官或身体的一部分。在与制剂的其他成分(包括本公开内容中有用的化合物)相容的意义上，每种载体必须是“可接受的”，并且对受试者无害。可用作药学上可接受的载体的材料的的一些实例包括：糖，比如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，比如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，比如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉末状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，比如可可脂和栓剂蜡；油，比如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，比如丙二醇；多元醇，比如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；酯，比如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，比如氢氧化镁和氢氧化铝；表面活性剂；藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；和药物制剂中使用的其他无毒的相容性物质。如本文所使用的，“药学上可接受的载体”还包括与本公开内容中有用的化合物的活性相容的并且是受试者生理上可接受的任何和所有包衣、抗细菌和抗真菌剂，以及吸收延迟剂等。补充活性化合物也可以并入组合物中。“药学上可接受的载体”可以进一步包括在本公开内容中有用的化合物的药学上可接受的盐。在本公开内容的实践中使用的药物组合物中可以包含的其他另外的成分是本领域已知的，并且在例如《雷明顿药物科学》(Genaro，Ed.，Mack Publishing Co.，1985，Easton，PA)中描述，其通过引用并入本文。

如本文所使用的，语言“药学上可接受的盐”是指由包括无机酸、无机碱、有机酸、无机碱、溶剂化物(包括水合物)和其包合物(clathrate)的药学上可接受的无毒酸和/或碱制备的施用化合物的盐。

如本文所使用的，化合物的“药学上有效量”、“治疗有效量”或“有效量”是足以向施用化合物的受试者提供有益作用的化合物的量。

如本文所使用的，术语“预防(prevent)”、“预防(preventing)”和“预防(prevention)”是指在开始施用药剂或化合物时在未发展出这种症状的受试者中避免或延迟与疾病或病症相关的症状的发作。疾病、病症和紊乱在本文可互换使用。

如本文所使用的术语“特异性结合(specifically bind)”或“特异性结合(specifically binds)”是指第一分子优先结合第二分子(例如，特定受体或酶)，但不一定仅结合该第二分子。

如本文所使用的，术语“受试者(subject)”和“个体(individual)”和“患者(patient)”可以互换使用，并且可以指人类或非人类哺乳动物或鸟类。非人类哺乳动物包括例如牲畜和宠物，比如绵羊、牛科、猪科、犬科、猫科和鼠科哺乳动物。在某些实施方式中，受试者是人类。

如本文所使用的，术语“取代的”是指原子或原子团已取代氢作为连接至另一基团的取代基。

如本文所使用的，术语“取代的烷基”、“取代的环烷基”、“取代的烯基”或“取代的炔基”是指如本文其他地方所定义的烷基、环烷基、烯基或炔基，其被独立地选自卤素、-OH、烷氧基、四氢-2-H-吡喃基、-NH₂、-NH(C₁-C₆烷基)、-N(C₁-C₆烷基)₂、1-甲基-咪唑-2-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、-C(＝O)OH、-C(＝O)O(C₁-C₆)烷基、三氟甲基、-C≡N、-C(＝O)NH₂、-C(＝O)NH(C₁-C₆)烷基、-C(＝O)N((C₁-C₆)烷基)₂、-SO₂NH₂、-SO₂NH(C₁-C₆烷基)、-SO₂N(C₁-C₆烷基)₂、-C(＝NH)NH₂和-NO₂的一个、两个或三个取代基取代，在某些实施方式中含有独立地选自卤素、-OH、烷氧基、-NH₂、三氟甲基、-N(CH₃)₂和-C(＝O)OH的一个或两个取代基，在某些实施方式中独立地选自卤素、烷氧基和-OH。取代的烷基的实例包括但不限于2,2-二氟丙基、2-羧基环戊基和3-氯丙基。

对于芳基、芳基-(C₁-C₃)烷基和杂环基，应用于这些基团的环的术语“取代的”是指在允许这种取代的地方的任何取代水平，即单、二、三、四或五取代。取代基是独立选择的，并且取代可以在任何化学可及的位置。在某些实施方式中，取代基的数目在1和4之间变化。在其他实施方式中，取代基的数目在1和3之间变化。在另一个实施方式中，取代基的数目在1和2之间变化。在又其他实施方式中，取代基独立地选自C₁-C₆烷基、-OH、C₁-C₆烷氧基、卤素、氨基、乙酰氨基和硝基。如本文所使用的，当取代基是烷基或烷氧基时，碳链可以是支链、直链或环状的。

除非另有说明，当两个取代基一起形成具有指定数目的环原子的环时(例如，R²和R³与它们所连接的氮一起形成具有3至7个环成员的环)，该环可以具有碳原子和任选地一个或多个(例如，1至3个)独立地选自氮、氧或硫的另外的杂原子。该环可以是饱和的或部分饱和的，并且可以任选地被取代。

每当术语或其前缀根中的任一个出现在取代基的名称中时，该名称应解释为包括本文提供的那些限制。例如，每当术语“烷基”或“芳基”或其前缀根中的任一个出现在取代基(例如芳基烷基、烷基氨基)的名称中时，该名称应解释为包括本文其他地方分别对“烷基”和“芳基”给出的那些限制。

在某些实施方式中，化合物的取代基以组或范围公开。具体期望该描述包括这些组和范围的成员的每个和每一个单独的子组合。例如，术语“C_1-6烷基”明确地旨在单独公开C₁、C₂、C₃、C₄、C₅、C₆、C₁-C₆、C₁-C₅、C₁-C₄、C₁-C₃、C₁-C₂、C₂-C₆、C₂-C₅、C₂-C₄、C₂-C₃、C₃-C₆、C₃-C₅、C₃-C₄、C₄-C₆、C₄-C₅和C₅-C₆烷基。

本文所用的术语“治疗(treat)”、“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”是指通过向受试者施用药剂或化合物来降低受试者经历疾病或病症的症状的频率或严重程度。

本文使用的某些缩写如下：cccDNA，共价闭合的环状DNA；DMSO，二甲基亚砜；HBsAg，HBV表面抗原；HBV，乙型肝炎病毒；HDV，丁型肝炎病毒；HPLC，高压液相色谱法；LCMS，液相色谱质谱法；NARTI或NRTI，逆转录酶抑制剂；NMR，核磁共振；NtARTI或NtRTI，核苷酸类似物逆转录酶抑制剂；pg RNA，前基因组RNA；rcDNA，松环DNA；RT，保留时间；sAg，表面抗原；TLC，薄层色谱法。

范围：在整篇公开内容中，可以以范围格式来呈现本公开内容的各个方面。应当理解，范围格式的描述仅是为了方便和简洁，而不应被解释为对本公开内容范围的僵化限制。因此，应该将范围的描述视为已明确公开了所有可能的子范围以及该范围内的各个数值。例如，对范围比如从1至6的描述应视为已明确公开了子范围，比如从1至3、从1至4、从1至5、从2至4、从2至6、从3至6等，以及该范围内的单个数值，例如，1、2、2.7、3、4、5、5.3和6。例如，“约0.1％至约5％”或“约0.1％至5％”的范围应视为不仅包括约0.1％至约5％，而且还包括指示范围内的单个值(例如，1％、2％、3％和4％)和子范围(例如，0.1％至0.5％、1.1％至2.2％、3.3％至4.4％)。除非另外指出，否则陈述“约X至Y”具有与“约X至约Y”相同的含义。同样，除非另外指出，否则陈述“约X、Y或Z”与“约X、约Y或约Z”具有相同的含义。无论范围的广度如何，这都适用。

合成

本公开内容进一步提供了制备本公开内容的化合物的方法。本教导的化合物可以通过使用本领域技术人员已知的标准合成方法和程序，根据本文概述的程序，由商业上可获得的起始原料、文献中已知的化合物或容易制备的中间体制备。可从相关的科学文献或本领域的标准教科书中容易地获得用于制备有机分子以及官能团转化和操纵的标准合成方法和程序。

应当理解，除非另有说明，在给出典型的或优选的工艺条件(即反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力等)的情况下，也可以使用其他工艺条件。最佳反应条件可以随所使用的特定反应物或溶剂而变化，但是这种条件可以由本领域技术人员通过常规优化程序来确定。有机合成领域的技术人员将认识到，出于优化本文所述化合物的形成的目的，可以改变所呈现的合成步骤的性质和顺序。

可以根据本领域中已知的任何合适的方法来监测本文描述的过程。例如，产物形成可以通过光谱方法(spectroscopic means)，比如核磁共振光谱法(例如，¹H或¹³C)、红外光谱法、分光光度法(例如紫外可见)、质谱法，或通过色谱法比如高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、凝胶渗透色谱发的(GPC)或薄层色谱法(TLC)来监测。

化合物的制备可以涉及各种化学基团的保护和脱保护。保护和脱保护的需要以及合适保护基团的选择可以由本领域技术人员容易地确定。保护基团的化学性质可以在例如Greene等人，Protective Groups in Organic Synthesis，第2版(Wiley&Sons，1991)中找到，出于所有目的通过引用将其全部公开内容并入本文。

本文所述的反应或方法可以在有机合成领域的技术人员可以容易选择的合适溶剂中进行。在进行反应的温度下，即在溶剂的冷冻温度至溶剂的沸腾温度的范围内的温度下，合适的溶剂通常与反应物、中间体和/或产物基本上不反应。给定的反应可以在一种溶剂或多于一种溶剂的混合物中进行。取决于特定的反应步骤，可以选择用于特定反应步骤的合适溶剂。

本公开内容包括制备(S)-N-(8,9-二氟-6-氧-1,4,5,6-四氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-1-基)-5,6-二氟-N-甲基-1H-吲哚-2-甲酰胺(也称为化合物(X))或其盐、溶剂化物、前药、同位素标记的衍生物、立体异构体(比如，在非限制性实例中，对映异构体或其任意混合物，比如，在非限制性实例中，其对映异构体的任意比例的混合物)和/或互变异构体及任意混合物的方法：

在某些实施方式中，式(X)的化合物或其盐、溶剂化物、前药、同位素标记的衍生物和/或互变异构体可根据方案1-2中概述的非限制性合成方案制备。

可以在例如两步法中将可商购的芳基溴(A)转化为相应的异色烯酮(B)，其中(A)与吡喃-3,5-二酮在过渡金属催化剂比如但不限于铜(I)盐的存在下，在碱比如但不限于碱性碳酸盐的存在下反应以产生酮-酸中间体，可以对该酮-酸中间体进行酸催化环化以产生异色烯酮(B)。

异色烯酮(B)可以与铵盐比如但不限于氢氧化铵反应，以提供相应的异喹啉酮(C)。

可以在例如两步法中将异喹啉酮(C)转化为苄胺(D)，其中(C)与α-甲基苄胺在路易斯酸比如但不限于钛(IV)醇盐的存在下反应以产生亚胺中间体，可以使用还原剂比如但不限于硼氢化物试剂(比如但不限于NaBH₄)将该亚胺中间体还原为苄胺(D)。

可以使用甲醛或甲醛供体(比如但不限于多聚甲醛)在酸存在下通过还原烷基化将苄胺(D)在苄基氮处甲基化以产生亚铵(iminium)中间体，可以使用还原剂比如但不限于NaBH(OAc)₃(即，STAB)将该亚铵中间体还原为叔胺(E)。

可以在Pd/C存在下使用合适的还原剂(比如但不限于H₂)将叔胺(E)还原裂解成相应的甲胺(F)。

可以通过使羧酸(G)与合适的酰基氯化试剂(包括但不限于草酰氯和亚硫酰氯)反应来制备酰基氯(acid chloride)(H)。

化合物(F)和化合物(H)可以在碱(包括但不限于碱性碳酸盐)的存在下偶联，以提供化合物(X)。

在某些实施方式中，可以在例如两步法中将异喹啉酮(C)转化为苄胺(D’)，其中(C)与α-甲基4-甲氧基-苄胺在路易斯酸比如但不限于钛(IV)醇盐的存在下反应，以产生亚胺中间体，可以使用还原剂比如但不限于硼氢化物(比如但不限于NaBH₄)将该中间体还原为苄胺(D’)。

可以通过还原烷基化，在酸存在下使用甲醛或甲醛供体比如但不限于多聚甲醛将4-甲氧基-苄胺(D’)在苄基氮处甲基化，以产生亚铵中间体，可以使用还原剂，比如但不限于NaBH(OAc)₃(即，STAB)将该中间体还原为叔胺(E’)。

可以使用酸比如但不限于三氟乙酸(TFA)将叔胺(E’)裂解成相应的甲胺(F)。在某些实施方式中，将(E’)裂解成(F)进一步包括三烷基硅烷，比如但不限于三乙基硅烷。

在某些实施方式中，化合物(X)可以由化合物(F)和化合物(H)制备，如本文其他地方所描述的。

本公开内容的化合物可以具有一个或多个立构中心，并且每个立构中心可以以(R)或(S)构型独立存在。在某些实施方式中，本文所述的化合物以旋光或外消旋形式存在。本文所述的化合物包括具有本文所述的治疗有用特性的外消旋、旋光、区域异构和立体异构形式或其组合。旋光形式的制备以任何合适的方式实现，作为非限制性实例，包括通过用重结晶技术外消旋形式的解析、由旋光原材料合成、手性合成或使用手性固定相进行色谱分离。本文由外消旋式说明的化合物进一步代表两种对映异构体或其任何混合物，或者在存在两个或更多个手性中心的情况下，代表所有非对映异构体或其任何混合物。

在某些实施方式中，本公开内容的化合物以互变异构体存在。所有互变异构体均包括在本文所述的化合物的范围内。

本文所述的化合物还包括同位素标记的化合物，其中一个或多个原子被具有相同原子序数但原子质量或原子质量数不同于通常在自然界发现的原子质量或原子质量数的原子替代。适于包含在本文所述的化合物中的同位素的实例包括但不限于²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、³⁶Cl、¹⁸F、¹²³I、¹²⁵I、¹³N、¹⁵N、¹⁵O、¹⁷O、¹⁸O、³²P和³⁵S。在某些实施方式中，用较重的同位素比如氘取代提供更高的化学稳定性。可通过任何合适的方法或使用合适的同位素标记的试剂代替否则采用未标记的试剂的方法制备同位素标记的化合物。

在某些实施方式中，本文所述的化合物通过其他方式标记，包括但不限于使用发色团或荧光部分、生物发光标记或化学发光标记。

在本文提供的所有实施方式中，合适的任选取代基的实例不旨在限制要求保护的公开内容的范围。本公开内容的化合物可以包含本文提供的任何取代基或取代基的组合。

盐

本文所述的化合物可与酸或碱形成盐，并且这种盐包括在本公开内容中。术语“盐”包括在本公开内容的方法中有用的游离酸或碱的加成盐。术语“药学上可接受的盐”是指具有在药学应用中有用的范围内的毒性特征的盐。在某些实施方式中，盐是药学上可接受的盐。然而，药学上不可接受的盐可以具有比如高结晶度的性质，其在本公开内容的实践中具有实用性，诸如例如在本公开内容的方法中有用的化合物的合成、纯化或配制过程中的实用性。

合适的药学上可接受的酸加成盐可以由无机酸或有机酸制备。无机酸的实例包括硫酸盐、硫酸氢盐(hydrogen sulfate)、盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、碳酸、硫酸和磷酸(包括磷酸氢盐和磷酸二氢盐)。合适的有机酸可以选自脂族、脂环族、芳族、芳脂族、杂环、羧酸和磺酸类的有机酸，其实例包括甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、葡糖醛酸、马来酸、富马酸、丙酮酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯甲酸、邻氨基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、苯乙酸、扁桃酸、扑酸(或帕莫酸)、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、泛酸、磺胺酸、2-羟基乙磺酸、三氟甲磺酸、对甲苯磺酸、环己基氨基磺酸、硬脂酸、海藻酸、β-羟基丁酸、水杨酸、半乳糖二酸、半乳糖醛酸、甘油膦酸和糖精(例如，糖精盐(saccharinate)、糖酸盐(saccharate))。相对于本公开内容的任何化合物，盐可以由1摩尔当量、1或多于1摩尔当量的酸或碱的部分组成。

本公开内容的化合物的合适的药学上可接受的碱加成盐包括例如铵盐和金属盐，包括碱金属、碱土金属和过渡金属盐，诸如例如钙、镁、钾、钠和锌盐。药学上可接受的碱加成盐还包括由碱性胺诸如例如N,N’-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(或N-甲葡糖胺)和普鲁卡因制备的有机盐。所有这些盐可以通过例如使合适的酸或碱与化合物反应而由相应的化合物制备。

联合治疗

在一个方面，本公开内容的化合物与用于治疗HBV和/或HDV感染的一种或多种另外的试剂组合用于本公开内容的方法中。这些另外的试剂可以包括本文鉴定的化合物或组合物，或已知用于治疗、预防或减轻HBV和/或HDV感染的症状的化合物(例如，商业上可获得的化合物)。

用于治疗HBV和/或HDV感染的一种或多种另外的试剂的非限制性实例包括：(a)逆转录酶抑制剂；(b)衣壳抑制剂；(c)cccDNA形成抑制剂；(d)RNA去稳定剂；(e)靶向HBV基因组的寡聚核苷酸；(f)免疫刺激剂，比如检查点抑制剂(例如，PD-L1抑制剂)；(g)靶向HBV基因转录体的GalNAc-siRNA缀合物；和(h)治疗性疫苗。

(a)逆转录酶抑制剂

在某些实施方式中，逆转录酶抑制剂为逆转录酶抑制剂(NARTI或NRTI)。在其他实施方式中，逆转录酶抑制剂为核苷酸类似物逆转录酶抑制剂(NtARTI或NtRTI)。

报道的逆转录酶抑制剂包括但不限于恩替卡韦、克拉夫定、替比夫定、拉米夫定、阿德福韦和替诺福韦、替诺福韦二吡呋酯(tenofovir disoproxil)、替诺福韦艾拉酚胺、阿德福韦酯(adefovir dipovoxil)、(1R,2R,3R,5R)-3-(6-氨基-9H-9-嘌呤基)-2-氟-5-(羟甲基)-4-亚甲基环戊-1-醇(描述于美国专利号8,816,074中，通过引用以其整体并入本文)、恩曲他滨、阿巴卡韦、依维他滨(elvucitabine)、更昔洛韦、洛布卡韦、泛昔洛韦、喷昔洛韦和氨多索韦(amdoxovir)。

报道的逆转录酶抑制剂进一步包括但不限于恩替卡韦、拉米夫定和(1R,2R,3R,5R)-3-(6-氨基-9H-9-嘌呤基)-2-氟-5-(羟甲基)-4-亚甲基环戊-1-醇。

报道的逆转录酶抑制剂进一步包括但不限于上面提到的逆转录酶抑制剂的共价结合的氨基磷酸酯或膦酰胺部分，或如例如美国专利号8,816,074、美国专利申请公开号US2011/0245484A1和US2008/0286230A1中描述的，所有这些通过引用以其整体并入本文。

报道的逆转录酶抑制剂进一步包括但不限于包括氨基磷酸酯部分的核苷酸类似物，诸如例如((((1R,3R,4R,5R)-3-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-5-羟基-2-亚甲基环戊基)甲氧基)甲基(苯氧基)磷酰基)-(D或L)-丙氨酸酯和((((1R,2R,3R,4R)-3-氟-2-羟基-5-亚甲基-4-(6-氧代-1,6-二氢-9H-嘌呤-9-基)环戊基)甲氧基)甲基(苯氧基)磷酰基)-(D或L)-丙氨酸酯。还包括其单独的非对映异构体，其包括例如((R)-(((1R,3R,4R,5R)-3-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-5-羟基-2-亚甲基环戊基)甲氧基)甲基(苯氧基)磷酰基)-(D或L)-丙氨酸酯和((S)-(((1R,3R,4R,5R)-3-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-5-羟基-2-亚甲基环戊基)甲氧基)甲基(苯氧基)磷酰基)-(D或L)-丙氨酸酯。

报道的逆转录酶抑制剂进一步包括但不限于包括膦酰胺部分的化合物，诸如例如替诺福韦艾拉酚胺，以及在美国专利申请公开号US 2008/0286230 A1中描述的那些，通过引用以其整体并入本文。在例如，美国专利号8,816,074以及美国专利申请公开号US 2011/0245484 A1和US 2008/0286230 A1中描述了用于制备含有立体选择性氨基磷酸酯或膦酰胺的活性物的方法，其全部通过引用以其整体并入本文。

(b)衣壳抑制剂

如本文所描述的，术语“衣壳抑制剂”包括能够直接或间接抑制衣壳蛋白的表达和/或功能的化合物。例如，衣壳抑制剂可以包括但不限于抑制衣壳装配、诱导非衣壳聚合物形成、促进过量的衣壳装配或衣壳装配方向错误、影响衣壳稳定和/或抑制RNA(pgRNA)衣壳化的任何化合物。衣壳抑制剂还包括在复制过程的下游事件(一个或多个)(例如，病毒DNA合成、松环DNA(rcDNA)转运到细胞核、共价闭合环状DNA(cccDNA)形成、病毒成熟、出芽和/或释放等)中抑制衣壳功能的任何化合物。例如，在某些实施方式中，该抑制剂可检测地抑制衣壳蛋白的表达水平或生物活性，例如使用本文所述的测定法所测量的。在某些实施方式中，抑制剂将rcDNA和病毒生命周期下游产物的水平抑制至少5％、至少10％、至少20％、至少50％、至少75％或至少90％。

报道的衣壳抑制剂包括但不限于在国际专利申请公开号WO 2013006394、WO2014106019和WO2014089296中描述的化合物，其全部通过引用以其整体并入本文。

报道的衣壳抑制剂还包括但不限于下述化合物和其药学上可接受的盐和/或溶剂化物：Bay-41-4109(参见国际专利申请公开号WO 2013144129)、AT-61(参见国际专利申请公开号WO 1998033501；和King等人，1998，Antimicrob.Agents Chemother.42(12):3179-3186)、DVR-01和DVR-23(参见国际专利申请公开号WO 2013006394；和Campagna等人，2013，J.Virol.87(12):6931，其全部通过引用以其整体并入本文。

另外，报道的衣壳抑制剂包括但不限于在美国专利申请公开号US2015/0225355、US 2015/0132258、US2016/0083383、US2016/0052921和国际专利申请公开号WO2013096744、WO 2014165128、WO 2014033170、WO 2014033167、WO 2014033176、WO2014131847、WO 2014161888、WO 2014184350、WO 2014184365、WO 2015059212、WO2015011281、WO 2015118057、WO 2015109130、WO 2015073774、WO 2015180631、WO2015138895、WO 2016089990、WO 2017015451、WO 2016183266、WO 2017011552、WO2017048950、WO2017048954、WO 2017048962、WO 2017064156中一般和具体地描述的那些，并通过引用以其整体并入本文。

(c)cccDNA形成抑制剂

共价封闭的环状DNA(cccDNA)在病毒rcDNA的细胞核中产生，并用作病毒mRNA的转录模板。如本文所描述的，术语“cccDNA形成抑制剂”包括能够直接或间接抑制cccDNA的形成和/或稳定性的化合物。例如，cccDNA形成抑制剂可以包括但不限于抑制衣壳解体，rcDNA进入细胞核和/或将rcDNA转化为cccDNA的任何化合物。例如，在某些实施方式中，抑制剂可抑制地抑制cccDNA的形成和/或稳定性，例如使用本文所述的测定法所测量的。在某些实施方式中，抑制剂将cccDNA的形成和/或稳定性抑制至少5％、至少10％、至少20％、至少50％、至少75％或至少90％。

报道的cccDNA形成抑制剂包括但不限于在国际专利申请公开号WO 2013130703中描述的化合物，并且通过引用以其整体并入本文。

另外，报道的cccDNA形成抑制剂包括但不限于在美国专利申请公开号US 2015/0038515A1中一般和具体描述的那些，并且通过引用以其整体并入本文。

(d)RNA去稳定剂

如本文所使用的，术语“RNA去稳定剂”是指在哺乳动物细胞培养物中或在活的人类受试者中减少HBV RNA总量的分子或其盐或溶剂化物。在非限制性实例中，RNA去稳定剂减少了编码以下一种或多种以下HBV蛋白的RNA转录体(一种或多种)的量：表面抗原，核心蛋白，RNA聚合酶和e抗原。在某些实施方式中，RNA去稳定剂使哺乳动物细胞培养物中或活的人类受试者中的HBV RNA的总量减少至少5％、至少10％、至少20％、至少50％、至少75％或至少90％。

报道的RNA去稳定剂包括在美国专利号8,921,381中描述的化合物，以及在美国专利申请公开号US2015/0087659和US2013/0303552中描述的化合物，其全部通过引用以其整体并入本文。

另外，报道的RNA去稳定剂包括但不限于在国际专利申请公开号WO 2015113990、WO 2015173164、US2016/0122344、WO 2016107832、WO 2016023877、WO 2016128335、WO2016177655、WO 2016071215、WO 2017013046、WO 2017016921、WO 2017016960、WO2017017042、WO 2017017043、WO 2017102648、WO 2017108630、WO 2017114812、WO2017140821、WO 2018085619中一般和具体地描述的那些，并且通过引用以其整体并入本文。

(e)靶向HBV基因组的寡聚核苷酸

报道的靶向HBV基因组的寡聚核苷酸包括但不限于Arrowhead-ARC-520(参见美国专利号8,809,293；和Wooddell等人，2013，Molecular Therapy 21(5):973-985，其全部通过引用以其整体并入本文)。

在某些实施方式中，寡聚核苷酸可以设计为靶向HBV基因组的一个或多个基因和/或转录体。靶向HBV基因组的寡聚核苷酸还包括但不限于分离的双链siRNA分子，每个siRNA分子包括有义链和与有义链杂交的反义链。在某些实施方式中，siRNA靶向HBV基因组的一个或多个基因和/或转录体。

(f)免疫刺激剂

检查点抑制剂

如本文所描述的，术语“检查点抑制剂”包括能够抑制作为免疫系统调节剂(例如，刺激或抑制免疫系统活性)的免疫检查点分子的任何化合物。例如，一些检查点抑制剂阻断抑制性检查点分子，从而刺激免疫系统功能，比如刺激针对癌细胞的T细胞活性。检查点抑制剂的非限制性实例是PD-L1抑制剂。

如本文所描述的，术语“PD-L1抑制剂”包括能够直接或间接抑制程序性死亡配体1(PD-L1)蛋白的表达和/或功能的任何化合物。PD-L1，也称为分化簇274(CD274)或B7同系物1(B7-H1)，是在抑制妊娠期间的免疫系统适应性臂、组织同种异体移植、自身免疫性疾病和肝炎中起重要作用的1型跨膜蛋白。PD-L1与其受体、抑制性检查点分子PD-1(在激活的T细胞、B细胞和骨髓细胞上发现)结合，以便调节免疫系统适应性臂的激活或抑制。在某些实施方式中，PD-L1抑制剂将PD-L1的表达和/或功能抑制至少5％、至少10％、至少20％、至少50％、至少75％或至少90％。

报道的PD-L1抑制剂包括但不限于下述专利申请出版物之一中所述的化合物：US2018/0057455；US 2018/0057486；WO 2017/106634；WO 2018/026971；WO 2018/045142；WO2018/118848；WO 2018/119221；WO 2018/119236；WO 2018/119266；WO 2018/119286；WO2018/121560；WO 2019/076343；WO 2019/087214；并且通过引用以其整体并入本文。

(g)靶向HBV基因转录体的GalNAc-siRNA缀合物

“GalNAc”是N-乙酰基半乳糖胺的缩写，和“siRNA”是小干扰RNA的缩写。在本公开内容的实践中有用的GalNAc-siRNA缀合物中，将靶向HBV基因转录体的siRNA与GalNAc共价结合。尽管不希望受到理论的束缚，但据信GalNAc与肝细胞上的脱唾液酸糖蛋白受体结合，从而促进siRNA靶向感染HBV的肝细胞。siRNA进入感染的肝细胞，并通过RNA干扰现象刺激HBV基因转录体的破坏。

在本公开内容的这一方面的实践中有用的GalNAc-siRNA缀合物的实例在公开的国际申请PCT/CA2017/050447(2017年10月19日公开的PCT申请公开号WO/2017/177326)中阐述，其通过引用以其整体并入本文。

(h)治疗疫苗

在某些实施方式中，治疗性疫苗的施用在本公开内容的实践中用于治疗受试者中的病毒性疾病。在某些实施方式中，病毒性疾病为肝炎病毒。在某些实施方式中，肝炎病毒是选自乙型肝炎病毒(HBV)和丁型肝炎病毒(HDV)中的至少一种。在某些实施方式中，受试者是人。

例如，可以使用合适的方法，诸如例如Sigmoid-E_max方程式(Holford&Scheiner，1981，Clin.Pharmacokinet.6:429-453)、Loewe可加性方程式(Loewe&Muischnek，1926，Arch.Exp.Pathol Pharmacol.114：313-326)和中值效应方程式(Chou&Talalay，1984，Adv.Enzyme Regul.22:27-55)计算协同效应。本文别处提及的每个方程式可以应用于实验数据以生成相应的曲线，以帮助评估药物组合的效果。与本文其他地方提及的方程式相关的相应曲线分别是浓度-效果曲线、等效线图曲线和组合指数曲线。

方法

在一方面，本公开内容提供了在受试者中治疗或预防肝炎病毒感染的方法。在某些实施方式中，感染包括乙型肝炎病毒(HBV)感染。在其他实施方式中，该方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的至少一种本公开内容的化合物。在又其他实施方式中，将至少一种化合物在药学上可接受的组合物中施用至受试者。在又其他实施方式中，进一步向受试者施用用于治疗肝炎感染的至少一种另外的药剂。在又其他实施方式中，至少一种另外的药剂包括选自逆转录酶抑制剂、衣壳抑制剂、cccDNA形成抑制剂、RNA去稳定剂、靶向HBV基因组的寡聚核苷酸、免疫刺激剂比如检查点抑制剂(例如，PD-L1抑制剂)和靶向HBV基因转录体的GalNAc-siRNA缀合物；和治疗性疫苗中的至少一种。在又其他实施方式中，向受试者共同施用至少一种化合物和至少一种另外的药剂。在又其他实施方式中，至少一种化合物和至少一种另外的药剂是共同配制的。

本公开内容进一步提供了在受试者中直接或间接抑制病毒衣壳蛋白的表达和/或功能的方法。在某些实施方式中，该方法包括向需要其的受试者施用治疗有效量的至少一种本公开内容的化合物。在其他实施方式中，将至少一种化合物在药学上可接受的组合物中施用至受试者。在又其他实施方式中，进一步向受试者施用用于治疗HBV感染的至少一种另外的药剂。在又其他实施方式中，至少一种另外的药剂包括选自逆转录酶抑制剂、衣壳抑制剂、cccDNA形成抑制剂、RNA去稳定剂、靶向HBV基因组的寡聚核苷酸、免疫刺激剂比如检查点抑制剂(例如，PD-L1抑制剂)和靶向HBV基因转录体的GalNAc-siRNA缀合物；和治疗性疫苗中的至少一种。在又其他实施方式中，向受试者共同施用至少一种化合物和至少一种另外的药剂。在又其他实施方式中，至少一种化合物和至少一种另外的药剂是共同配制的。

在某些实施方式中，受试者是哺乳动物。在其他实施方式中，哺乳动物为人。

药物组合物和制剂

本公开内容提供了包括至少一种本公开内容的化合物或其盐或溶剂化物的药物组合物，其用于实践本公开内容的方法。这样的药物组合物可由适合施用至受试者的形式的至少一种本公开内容的化合物或盐或溶剂化物组成，或药物组合物可以包括至少一种本公开内容的化合物或其盐或溶剂化物以及一种或多种药学上可接受的载体、一种或多种另外的成分或这些的一些组合。如本领域众所周知的，至少一种本公开内容的化合物可以以生理学上可接受的盐的形式，比如与生理学上可接受的阳离子或阴离子组合存在于药物组合物中。

在某些实施方式中，可以施用用于实践本公开内容的方法的药物组合物以递送在1ng/kg/天和100mg/kg/天之间的剂量。在其他实施方式中，可以施用用于实践本公开内容的药物组合物以递送在1ng/kg/天和1,000mg/kg/天之间的剂量。

本公开内容的药物组合物中的活性成分、药学上可接受的载体和任何另外的成分的相对量将变化，这取决于所治疗的受试者的身份、体型(size)和病症，并且进一步取决于该组合物被施用的途径。举例来说，组合物可以包括在0.1％至100％(w/w)之间的活性成分。

用于本公开内容的方法中的药物组合物可以适当地开发用于经鼻、吸入、口服、直肠、阴道、胸膜、腹膜、肠胃外、局部、经皮、经肺、鼻内、含服、眼内、硬膜外、鞘内、静脉内或另一施用途径。可以将在本公开内容的方法中使用的组合物直接施用至哺乳动物或鸟类的中枢神经系统的大脑、脑干或任何其他部分。其他考虑的制剂包括设计(project)的纳米颗粒、微球、脂质体制剂、包被的颗粒、聚合物缀合物、含有活性成分的重新密封的红细胞以及基于免疫学的制剂。

在某些实施方式中，本公开内容的组合物是药物基质的一部分，其允许处理不溶性材料并改善其生物利用度、开发控释或缓释产品以及产生均质组合物。举例来说，可以使用热熔挤出、固溶体、固体分散体、尺寸减小技术、分子复合物(例如，环糊精等)、微粒以及颗粒和制剂包衣方法来制备药物基质。非晶相或结晶相可用于这种工艺中。

施用途径(一种或多种)对技术人员来说是显而易见的，并且将取决于许多因素，包括所治疗的疾病的类型和严重程度、所治疗的兽医或人类患者的类型和年龄等。

本文描述的药物组合物的制剂可以通过药理学和制药学领域中已知的或以后开发的任何方法来制备。通常，这种制备方法包括以下步骤：使活性成分与载体或一种或多种其他辅助成分结合，并且然后，如果必要或期望，将产品成型或包装成所需的单剂量或多剂量单位。

如本文所使用的，“单位剂量”是包括预定量的活性成分的离散量的药物组合物。活性成分的量通常等于将被施用至受试者的活性成分的剂量或这样的剂量的方便部分，诸如例如这样的剂量的一半或三分之一。单位剂型可以是单次日剂量或多次日剂量之一(例如，每天约1-4次或更多次)。当使用多次日剂量时，每次给药的单位剂型可以相同或不同。

尽管本文提供的药物组合物的描述主要针对适合于对人类进行伦理施用的药物组合物，但是技术人员将理解，这种组合物通常适合于施用至各种动物。为了使组合物适合于向各种动物施用，适合于向人施用的药物组合物的改进是众所周知的，并且普通技术的兽医药理师可以仅通过普通的实验来设计和进行这种改进。预期向其施用本公开内容的药物组合物的受试者包括但不限于人和其他灵长类动物，哺乳动物，包括与商业相关的哺乳动物，比如牛、猪、马、绵羊、猫和狗。

在某些实施方式中，使用一种或多种药学上可接受的赋形剂或载体配制本公开内容的组合物。在某些实施方式中，本公开内容的药物组合物包括治疗有效量的至少一种本公开内容的化合物和药学上可接受的载体。有用的药学上可接受的载体包括但不限于甘油、水、盐水、乙醇、重组人白蛋白(例如，)、可溶凝胶(例如，/>)和其他药学上可接受的盐溶液，比如磷酸盐和有机酸的盐。在Remington’s PharmaceuticalSciences(1991,Mack Publication Co.,New Jersey)中描述了这些和其他药学上可接受的载体的实例。

载体可以是溶剂或分散介质，其包含例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)、重组人白蛋白、可溶明胶、其合适的混合物和植物油。例如，可以通过使用包衣比如卵磷脂，通过在存在分散体的情况下维持所需的粒径以及通过使用表面活性剂来维持合适的流动性。可以通过各种抗细菌剂和抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯、三氯叔丁醇、苯酚、抗坏血酸、硫柳汞等，来防止微生物的作用。在许多情况下，组合物中包括等渗剂，例如糖、氯化钠或多元醇，比如甘露糖醇和山梨糖醇。可以通过在组合物中包含延迟吸收的试剂例如单硬脂酸铝或明胶来实现可注射组合物的延长吸收。

制剂可以与常规赋形剂混合使用，即适合于口服、肠胃外、经鼻、吸入、静脉内、皮下、经皮肠内或本领域已知的任何其他合适的施用方式的药学上可接受的有机或无机载体物质。可以对药物制剂进行灭菌，并且如果需要，可以与辅助剂例如润滑剂、防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、用于影响渗透压缓冲剂的盐、着色剂、调味剂和/或赋予香气的物质等混合。在需要时，它们也可以与其他活性剂，例如其他镇痛剂、抗焦虑剂或催眠剂组合。如本文所使用的，“另外的成分”包括但不限于可用作药物载体的一种或多种成分。

本公开内容的组合物可以包括按组合物的总重量计约0.005％至2.0％的防腐剂。在暴露于环境中的污染物的情况下，防腐剂用于防止变质。根据本公开内容有用的防腐剂的实例包括但不限于选自苄醇、山梨酸、对羟基苯甲酸、咪脲及其组合的那些。一种这样的防腐剂是约0.5％至2.0％的苄醇和0.05-0.5％的山梨酸的组合。

该组合物可以包括抑制化合物降解的抗氧化剂和螯合剂。对于某些化合物，抗氧化剂是BHT、BHA、α-生育酚和抗坏血酸，按组合物的总重量计，其示例性范围为按重量计约0.01％至0.3％，或BHT范围为按重量计0.03％至0.1％。按组合物的总重量计，螯合剂存在的量可以是按重量计0.01％至0.5％。按组合物的总重量计，示例性螯合剂包括在约0.01％至0.20％的重量范围内或在按重量计0.02％至0.10％的范围内的乙二胺四乙酸盐(例如乙二胺四乙酸二钠)和柠檬酸。螯合剂可用于螯合组合物中的金属离子，这可能对制剂的保存期限有害。对于某些化合物，尽管BHT和乙二胺四乙酸二钠分别是示例性的抗氧化剂和螯合剂，但是如本领域技术人员所知，可以用其他合适的和等同的抗氧化剂和螯合剂替代。

可以使用常规方法制备液体悬浮液，以使活性成分悬浮在水性或油性媒介物中。水性媒介物包括例如水和等渗盐水。油性媒介物包括例如杏仁油、油性酯、乙醇、植物油比如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油、分馏的植物油和矿物油比如液体石蜡。液体悬浮液可以进一步包括一种或多种另外的成分，包括但不限于悬浮剂、分散剂或润湿剂、乳化剂、缓和剂、防腐剂、缓冲剂、盐、调味剂、着色剂和甜味剂。油性悬浮液可以进一步包括增稠剂。已知的悬浮剂包括但不限于山梨糖醇糖浆剂、氢化可食用脂肪、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍树胶、阿拉伯树胶和纤维素衍生物比如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素。已知的分散剂或润湿剂包括但不限于天然存在的磷脂比如卵磷脂，烯化氧与脂肪酸、与长链脂族醇、与源自脂肪酸和己糖醇的偏酯或与源自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯(例如，分别是聚氧乙烯硬脂酸酯、十七碳亚乙氧基鲸蜡醇、聚氧乙烯山梨醇单油酸酯和聚氧乙烯山梨聚糖单油酸酯)的缩合产物。已知的乳化剂包括但不限于卵磷脂、阿拉伯胶和离子或非离子表面活性剂。已知的防腐剂包括但不限于对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯、抗坏血酸和山梨酸。已知的甜味剂包括例如甘油、丙二醇、山梨糖醇、蔗糖和糖精。

可以以与液体悬浮液基本相同的方式制备活性成分在水性或油性溶剂中的液体溶液，主要区别在于活性成分是溶解而不是悬浮在溶剂中。如本文所使用的，“油性”液体是包括含碳液体分子并且展现出比水小的极性的液体。本公开内容的药物组合物的液体溶液可包含关于液体悬浮液描述的每种组分，应当理解，悬浮剂不一定会帮助活性成分溶解在溶剂中。水性溶剂包括例如水和等渗盐水。油性溶剂包括例如杏仁油、油性酯、乙醇、植物油比如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油、分馏的植物油和矿物油比如液体石蜡。

可以使用已知方法制备本公开内容的药物制剂的粉末状和颗粒制剂。这样的制剂可以直接施用至受试者，例如用于形成片剂、填充胶囊，或通过向其中添加水性或油性媒介物来制备水性或油性悬浮液或溶液。这些制剂中的每一种可以进一步包括分散剂或润湿剂、悬浮剂、离子和非离子表面活性剂和防腐剂中的一种或多种。这些制剂中还可以包括另外的赋形剂，比如填充剂和甜味剂、调味剂或着色剂。

本公开内容的药物组合物也可以水包油乳剂或油包水乳剂的形式制备、包装或出售。油相可以是植物油比如橄榄油或花生油，矿物油比如液体石蜡，或这些的组合。这样的组合物可以进一步包含一种或多种乳化剂，比如天然存在的树胶比如阿拉伯树胶或黄蓍树胶；天然存在的磷脂，例如大豆或卵磷脂；源自脂肪酸和己糖醇酐的组合的酯或偏酯，比如山梨聚糖单油酸酯，以及这种偏酯与环氧乙烷的缩合产物，比如聚氧乙烯山梨聚糖单油酸酯。这些乳剂还可以包含另外的成分，包括例如甜味剂或调味剂。

用化学组成物浸渍或涂覆材料的方法在本领域中是已知的，并且包括但不限于将化学组成物沉积或结合到表面上的方法，在合成材料(即，比如使用生理学上可降解的材料)期间将化学组成物结合到材料结构中的方法，以及将水性或油性溶液或悬浮液吸收到吸收性材料中的方法，随后进行干燥或不进行干燥。混合组分的方法包括本领域技术人员已知的物理研磨、在固体和悬浮液制剂中使用丸粒以及在透皮贴剂中混合。

施用/给药

给药方案可能会影响有效量的构成。可以在疾病或紊乱发作之前或之后将治疗制剂施用至患者。此外，可以每天或顺序施用几种分开的剂量以及交错剂量，或者可以连续输注该剂量，或者可以是推注注射。此外，治疗制剂的剂量可以根据治疗或预防情况的紧急程度成比例地增加或减少。

可以使用已知的程序，以有效治疗本文考虑的疾病或紊乱的剂量和时间段将本公开内容的组合物施用至患者，比如哺乳动物，比如人。实现治疗效果所必需的治疗化合物的有效量可以根据以下因素而变化，比如所采用的特定化合物的活性；施用时间；该化合物的排泄速率；治疗的持续时间；与该化合物组合使用的其他药物、化合物或材料；疾病或紊乱的状态，所治疗患者的年龄、性别、体重、状况、一般健康状况以及既往病史，以及医学领域众所周知的类似因素。可以调整剂量方案以提供最佳的治疗反应。例如，如治疗状况的紧急情况所指示，可以每天施用数个分开的剂量或可以成比例地减少剂量。本公开内容的治疗化合物的有效剂量范围的非限制性实例为每天约0.01mg/kg至100mg/kg体重。本领域普通技术人员将能够研究相关因素并确定治疗化合物的有效量而无需过度实验。

可以将该化合物每天几次频繁地施用至动物，或者可以更不频繁地施用，比如每天一次、每周一次、每两周一次、每月一次或甚至更不频繁地，比如每几个月一次，甚至一年一次或更低。应当理解，在非限制性实例中，每天给药的化合物的量可以每天、每隔一天、每2天、每3天、每4天或每5天施用一次。例如，每隔一天施用一次，可以在星期一开始5mg的每日剂量，在星期三施用第一个随后5mg的每日剂量，在星期五施用第二个随后5mg的每日剂量，等等。剂量的频率对技术人员而言是显而易见的，并且取决于许多因素，比如但不限于所治疗的疾病的类型和严重程度以及动物的类型和年龄。

可以改变本公开内容的药物组合物中活性成分的实际剂量水平，以便获得有效实现特定患者、组合物和给药方式所需的治疗反应的活性成分的量，而对患者是无毒的。

具有本领域普通技术的医生，例如医师或兽医，可以容易地确定和开处方所需的有效量的药物组合物。例如，医师或兽医可以以低于所需要的水平开始在药物组合物中使用的本公开内容化合物的剂量，以便获得所需的治疗效果并逐渐增加剂量，直到获得所需的效果。

在具体实施方式中，以剂量单位形式配制化合物对于施用的容易性和剂量的均匀性是特别有利的。如本文所使用的剂量单位形式是指适合作为待治疗患者的单位剂量的物理上离散的单位；每个单位都包含预定量的治疗化合物，该化合物经计算可与所需的药物媒介物结合以产生所需的治疗效果。本公开内容的剂量单位形式由以下决定并直接取决于(a)治疗化合物的独特特征和要实现的特定治疗效果，以及(b)在配制/配制用于治疗患者的疾病或紊乱的这种治疗化合物的领域中固有的局限性。

在某些实施方式中，本公开内容的组合物以每天1-5次或更多次的范围内的剂量施用至患者。在其他实施方式中，本公开内容的组合物以包括但不限于每天一次、每两天一次、每三天一次至一周一次以及每两周一次的剂量范围施用至患者。对于本领域技术人员而言显而易见的是，本公开内容的各种组合组合物的施用频率将因受试者而异，这取决于许多因素，包括但不限于年龄、待治疗的疾病或紊乱、性别、整体健康状况和其他因素。因此，本公开内容不应被解释为限于任何特定的剂量方案，并且将由主治医师考虑到患者的所有其他因素来确定要施用至任何患者的精确剂量和组成。

用于施用的本公开内容的化合物可以在以下范围内：约1μg至约7,500mg、约20μg至约7,000mg、约40μg至约6,500mg、约80μg至约6,000mg、约100μg至约5,500mg、约200μg至约5,000mg、约400μg至约4,000mg、约800μg至约3,000mg、约1mg至约2,500mg、约2mg至约2,000mg、约5mg至约1,000mg、约10mg至约750mg、约20mg至约600mg、约30mg至约500mg、约40mg至约400mg、约50mg至约300mg、约60mg至约250mg、约70mg至约200mg、约80mg至约150mg和它们之间的任何完整增量和部分增量。

在一些实施方式中，本公开内容的化合物的剂量为约0.5μg和约5,000mg。在一些实施方式中，本文描述的组合物中使用的本公开内容的化合物的剂量小于约5,000mg、或小于约4,000mg、或小于约3,000mg、或小于约2,000mg、或小于约1,000mg、或小于约800mg、或小于约600mg、或小于约500mg、或小于约200mg、或小于约50mg。类似地，在一些实施方式中，如本文描述的第二化合物的剂量小于约1,000mg、或小于约800mg、或小于约600mg、或小于约500mg、或小于约400mg、或小于约300mg、或小于约200mg、或小于约100mg、或小于约50mg、或小于约40mg、或小于约30mg、或小于约25mg、或小于约20mg、或小于约15mg、或小于约10mg、或小于约5mg、或小于约2mg、或小于约1mg、或小于约0.5mg、以及其任何完全增量和部分增量。

在某些实施方式中，本公开内容涉及包装的药物组合物，其包含单独地或与第二种药物组合地容纳治疗有效量的本公开内容化合物的容器；以及使用该化合物治疗、预防或减轻患者的疾病或紊乱的一种或多种症状的说明书。

术语“容器”包括用于容纳药物组合物或用于管理稳定性或水吸收的任何接受器(receptacle)。例如，在某些实施方式中，容器是包含药物组合物的包装，比如存在于双室中的液体(溶液和悬浮液)、半固体、冻干固体、溶液和粉末或冻干制剂。在其他实施方式中，容器不是包含药物组合物的包装，即，容器是接受器，比如包含包装的药物组合物或未包装的药物组合物以及药物组合物使用说明书的盒子或小瓶。此外，包装技术是本领域众所周知的。应当理解，药物组合物的使用说明书可以包含在含有药物组合物的包装上，并且因此，说明书与包装的产品形成增加的功能关系。然而，应当理解，说明书中可能包含有关该化合物执行其预期功能的能力，例如治疗、预防或减轻患者的疾病或紊乱的信息。

施用

本公开内容任何组合物的给药途径包括吸入、口服、经鼻、直肠、肠胃外、舌下、经皮、经粘膜(例如舌下、舌、(经)含服、(经)尿道、阴道(例如，经阴道和阴道周围)、鼻(内)和((经)直肠)、膀胱内、肺内、十二指肠内、胃内、鞘内、硬膜外、胸膜内、腹膜内、皮下、肌内、皮内、动脉内、静脉内、支气管内、吸入和局部施用。

合适的组合物和剂型包括例如片剂、胶囊、囊片、丸剂、软胶囊、锭剂、乳剂、分散剂、悬浮剂、溶液、糖浆剂、颗粒剂、珠剂、透皮贴剂、凝胶剂、粉末、丸粒、乳浆剂(magma)、锭剂、乳膏、糊剂、膏药、洗剂、片剂(discs)、栓剂、用于经鼻或口服施用的液体喷雾剂、用于吸入的干粉或雾化制剂、用于膀胱内施用的组合物和制剂等。应当理解，可用于本公开内容的制剂和组合物不限于本文描述的特定制剂和组合物。

口服施用

对于口服施用，特别地合适的是片剂、锭剂、液体、滴剂、胶囊、囊片和软胶囊。其他适合口服施用的制剂包括但不限于粉末或颗粒制剂、水性或油性悬浮剂、水性或油性溶液、糊剂、凝胶剂、牙膏、漱口剂、包衣剂、口腔冲洗剂或乳剂。可以根据本领域已知的任何方法来制备预期用于口服使用的组合物，并且这种组合物可以包含选自适合用于制造片剂的惰性、无毒、通常被认为是安全的(GRAS)药学上的赋形剂的一种或多种试剂。这种赋形剂包括例如惰性稀释剂比如乳糖；制粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉；粘合剂，比如淀粉；和润滑剂，比如硬脂酸镁。

片剂可以是未被涂覆的，或者可以使用已知方法涂覆，以在受试者的胃肠道中实现延迟崩解，从而提供活性成分的持续释放和吸收。举例来说，可以使用比如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯的材料涂覆片剂。进一步举例来说，可以使用在美国专利号4,256,108；4,160,452；和4,265,874中描述的方法涂覆片剂以形成渗透控释片。片剂可以进一步包含甜味剂、调味剂、着色剂、防腐剂或这些的某种组合以提供药学上鲜美(elegant)且可口的制剂。包括活性成分的硬胶囊可以使用生理学上可降解的组合物例如明胶来制备。胶囊包括活性成分，并且可以进一步包括另外的成分，包括例如惰性固体稀释剂，比如碳酸钙、磷酸钙或高岭土。

包括活性成分的硬胶囊可以使用生理学上可降解的组合物比如明胶来制备。这种硬胶囊包括活性成分，并且可以进一步包含另外的成分，包括例如惰性固体稀释剂，比如碳酸钙、磷酸钙或高岭土。

包括活性成分的软胶囊可以使用生理学上可降解的组合物比如来自动物胶原或羟丙甲纤维素(纤维素的改性形式)的明胶来制备，并使用明胶、水和增塑剂比如山梨糖醇或甘油的任选的混合物制造。这样的软胶囊包括可以与水或油介质比如花生油、液体石蜡或橄榄油混合的活性成分。

对于口服施用，本公开内容的化合物可以是通过常规方法与药学上可接受的赋形剂比如粘合剂；填充剂；润滑剂；崩解剂；或润湿剂制备的片剂或胶囊的形式。如果期望的，可以使用合适的方法和包衣材料比如可获得自Colorcon,West Point,Pa.(例如，OY型、OYC型、有机肠溶型OY-P型、水性肠溶型OY-A型、OY-PM型和/>White,32K18400)的/>膜包衣系统涂覆片剂。应当理解，可以使用其他公司的类似类型的膜涂层或聚合产物。

包括活性成分的片剂可以例如通过将活性成分任选地与一种或多种另外的成分一起压制或模制来制备。制备压制片剂可以通过在合适的装置中压制自由流动形式的活性成分比如粉末或颗粒制剂，任选地与一种或多种粘合剂、润滑剂、赋形剂、表面活性剂和分散剂混合。模制片剂可以通过在合适的装置中模制活性成分、药学上可接受的载体和至少足以润湿混合物的液体的混合物来制备。用于制造片剂的药学上可接受的赋形剂包括但不限于惰性稀释剂、制粒剂和崩解剂、粘合剂和润滑剂。已知的分散剂包括但不限于马铃薯淀粉和羟甲基淀粉钠。已知的表面活性剂包括但不限于月桂基硫酸钠。已知的稀释剂包括但不限于碳酸钙、碳酸钠、乳糖、微晶纤维素、磷酸钙、磷酸氢钙和磷酸钠。已知的制粒剂和崩解剂包括但不限于玉米淀粉和藻酸。已知的粘合剂包括但不限于明胶、阿拉伯胶、预糊化的玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和羟丙基甲基纤维素。已知的润滑剂包括但不限于硬脂酸镁、硬脂酸、二氧化硅和滑石。

制粒技术在制药领域是众所周知的，用于改性活性成分的起始粉末或其他颗粒材料。通常将粉末与粘合剂材料混合成较大的永久性自由流动的附聚物或颗粒，称为“制粒”。例如，使用溶剂的“湿法”制粒工艺的一般特征是，将粉末与粘合剂材料混合，并在一定条件下用水或有机溶剂润湿，形成湿的粒状物料，然后必须将溶剂从中蒸发。

熔融制粒通常包括使用在室温下为固体或半固体的材料(即，具有相对较低的软化或熔点范围)在基本上没有添加水或其他液体溶剂的情况下促进粉末或其他材料的制粒。当加热到熔点范围内的温度时，低熔点固体液化以充当粘合剂或制粒介质。液化的固体将其自身散布在与之接触的粉末状材料的表面上，并在冷却后形成固体颗粒状物质，在其中将初始物质粘合在一起。然后可以将所得的熔融制粒提供给压片机或封装以制备口服剂型。熔融制粒通过形成固体分散体或固溶体来改善活性物质(即，药物)的溶解速率和生物利用度。

美国专利号5,169,645公开了具有改善的流动特性的可直接压缩的含蜡颗粒。当蜡在熔体中与某些改善流动性的添加剂混合，然后将混合物冷却并制粒时，可得到颗粒。在某些实施方式中，在蜡(一种或多种)和添加剂(一种或多种)的熔融组合物中只有蜡本身熔融，并且在其他情况下，蜡(一种或多种)和添加剂(一种或多种)二者都将熔融。

本公开内容还包括多层片剂，其包括提供用于延迟释放在本公开内容的方法中有用的一种或多种化合物的层，和提供用于立即释放在本公开内容的方法中有用的一种或多种化合物的其他层。使用蜡/pH敏感的聚合物混合物，可以获得胃不溶性组合物，其中捕获(entrap)了活性成分，从而确保了其延迟释放。

用于口服施用的液体制剂可以是溶液、糖浆剂或悬浮剂的形式。液体制剂可以通过常规方式用药学上可接受的添加剂比如悬浮剂(例如，山梨糖醇糖浆剂、甲基纤维素或氢化可食用脂肪)；乳化剂(例如，卵磷脂或阿拉伯胶)；非水性媒介物(例如，杏仁油、油性酯或乙醇)；和防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸)制备。适用于口服施用的本公开内容的药物组合物的液体制剂可以以液体形式或干燥产物的形式制备、包装和出售，该干燥产物旨在在使用前用水或另一种合适的载体重构。

肠胃外施用

如本文所使用的，药物组合物的“肠胃外施用”包括特征在于对受试者的组织进行物理破坏和通过组织中的破坏施用药物组合物的任何施用途径。因此肠胃外施用包括但不限于通过注射组合物施用药物组合物、通过外科切口施用组合物、通过穿透组织的非外科伤口施用组合物等方式施用药物组合物。特别地，预期肠胃外施用包括但不限于皮下、静脉内、腹膜内、肌内、胸骨内注射和肾透析输注技术。

适用于肠胃外施用的药物组合物的制剂包括与药学上可接受的载体，比如无菌水或无菌等渗盐水组合的活性成分。这样的制剂可以以适合于推注施用或连续施用的形式制备、包装或出售。可注射制剂可以在单位剂型，比如在含有防腐剂的安瓿或多剂量容器中制备、包装或出售。还可以在装置比如患者自控的镇痛(PCA)装置中制备、包装或出售可注射制剂。肠胃外施用的制剂包括但不限于混悬剂、溶液、在油性或水性媒介物中的乳剂、膏剂和可植入的缓释或生物可降解的制剂。这样的制剂可以进一步包含一种或多种另外的成分，包括但不限于悬浮剂、稳定剂或分散剂。在用于肠胃外施用的制剂的一个实施方式中，活性成分以干燥(即，粉末或颗粒)形式提供，以与合适的媒介物(例如，无菌无热原水)重构，然后肠胃外施用重构的组合物。

药物组合物可以以无菌可注射的水性或油性悬浮液或溶液的形式制备、包装或出售。该悬浮液或溶液可以根据已知技术配制，并且除了活性成分外还可以包含另外的成分，比如本文所述的分散剂、润湿剂或悬浮剂。可以使用无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂，诸如例如水或1,3-丁二醇来制备这种无菌可注射制剂。其他可接受的稀释剂和溶剂包括但不限于林格氏溶液、等渗氯化钠溶液和不挥发性油比如合成的甘油单酯或甘油二酯。有用的其他可肠胃外施用的制剂包括包含活性成分的那些，该活性成分为重组人白蛋白、流化明胶、脂质体制剂或生物可降解的聚合物体系的组分中的微晶形式。用于持续释放或植入的组合物可以包括药学上可接受的聚合物或疏水材料，比如乳剂、离子交换树脂、微溶聚合物或微溶盐。

局部施用

局部施用药物制剂的障碍是表皮的角质层。角质层是由蛋白质、胆固醇、鞘脂、游离脂肪酸和各种其他脂质组成的高抗蚀层，并且包括角质化细胞和活细胞。限制化合物穿过角质层的渗透率(通量)的因素之一是可以负载或施加到皮肤表面上的活性物质的量。每单位皮肤面积施加的活性物质的量越大，皮肤表面与皮肤下层之间的浓度梯度越大，进而活性物质穿过皮肤的扩散力越大。因此，与其他浓度较低的制剂相比，含有较高浓度的活性物质的制剂更可能导致更多的活性物质以更一致的速率渗透穿过皮肤，所有其他内容都是一样的。

适用于局部施用的制剂包括但不限于液体或半液体制剂，比如擦剂、洗剂、水包油或油包水乳剂，比如乳膏、药膏或糊剂，以及溶液或悬浮液。尽管活性成分的浓度可以与活性成分在溶剂中的溶解度极限相同，但是可局部施用的制剂可以例如包括约1％至约10％(w/w)的活性成分。用于局部施用的制剂可以进一步包括一种或多种本文所述的另外的成分。

可以使用渗透促进剂。这些材料增加了药物穿过皮肤的渗透率。本领域中典型的促进剂包括乙醇、单月桂酸甘油酯、PGML(聚乙二醇单月桂酸酯)、二甲基亚砜等。其他促进剂包括油酸、油醇、乙氧基乙二醇、月桂氮酮、链烷羧酸、二甲基亚砜、极性脂质或N-甲基-2-吡咯烷酮。

用于局部递送本公开内容的一些组合物的一种可接受的媒介物可以包含脂质体。脂质体的组成及其用途是本领域已知的(即，美国专利号6,323,219)。

在可选的实施方式中，局部活性药物组合物可以任选地与其他成分比如佐剂、抗氧化剂、螯合剂、表面活性剂、发泡剂、润湿剂、乳化剂、增粘剂、缓冲剂、防腐剂等组合。在其他实施方式中，渗透或渗透促进剂包括在组合物中，并且相对于缺乏渗透促进剂的组合物，对于改善活性成分渗透到皮肤中和穿过角质层是有效的。各种渗透促进剂，包括油酸、油醇、乙氧基乙二醇、月桂氮酮、链烷羧酸、二甲基亚砜、极性脂质或N-甲基-2-吡咯烷酮是本领域技术人员已知的。在另一方面，所述组合物可以进一步包含水溶助剂，其起到增加角质层结构的紊乱的作用，并因此允许增加穿过角质层的运输。各种水溶助剂比如异丙醇、丙二醇或二甲苯磺酸钠是本领域技术人员已知的。

局部活性药物组合物应以有效影响所需变化的量施用。如本文所使用的“有效量”是指足以覆盖需要改变的皮肤表面区域的量。活性化合物应该以按组合物的重量体积计约0.0001％至约15％的量存在。例如，它应该以组合物的约0.0005％至约5％的量存在；例如，它应该以组合物的约0.001％至约1％的量存在。这样的化合物可以源自合成的或天然的。

含服施用

本公开内容的药物组合物可以适合于含服施用的制剂来制备、包装或出售。这样的制剂可以例如为使用常规方法制备的片剂或锭剂的形式，并且可以包含例如0.1至20％(w/w)的活性成分，余量包括口腔可溶解的或可降解的组合物，以及任选地本文所述的一种或多种另外的成分。可选地，适合含服施用的制剂可以包括包含活性成分的粉末状或气雾化(aerosolized)或喷雾化(atomized)溶液或悬浮液。当分散时，这种粉末状、气雾化或喷雾化的制剂可具有在约0.1至约200微米范围内的平均颗粒或液滴尺寸，并且可以进一步包括一种或多种本文所述的另外的成分。本文描述的制剂的实例不是穷举的，并且应当理解，本公开内容包括本文未描述但本领域技术人员已知的这些和其他制剂的另外的修改。

直肠施用

本公开内容的药物组合物可以以适于直肠施用的制剂制备、包装或出售。这样的组合物可以是例如栓剂、保留灌肠制剂和用于直肠或结肠灌洗的溶液的形式。

栓剂制剂可通过将活性成分与无刺激性的药学上可接受的赋形剂混合来制备，该赋形剂在正常室温(即，约20℃)下呈固体，并且在受试者的直肠温度(即，在健康人体内约37℃)下呈液体。合适的药学上可接受的赋形剂包括但不限于可可脂、聚乙二醇和各种甘油酯。栓剂制剂可以进一步包含各种另外的成分，包括但不限于抗氧化剂和防腐剂。

用于直肠或结肠灌洗的保留灌肠制剂或溶液可通过将活性成分与药学上可接受的液体载体混合来制备。如本领域中众所周知的，可以使用适合于受试者的直肠解剖结构的递送装置来施用灌肠制剂，并且可以将灌肠制剂包装在递送装置中。灌肠制剂可以进一步包含各种另外的成分，包括但不限于抗氧化剂和防腐剂。

另外的施用形式

本公开内容的另外的剂型包括如在美国专利号6,340,475、6,488,962、6,451,808、5,972,389、5,582,837和5,007,790中描述的剂型。本公开内容的另外的剂型还包括如在美国专利申请号20030147952、20030104062、20030104053、20030044466、20030039688和20020051820中描述的剂型。本公开内容的另外的剂型还包括如在PCT申请号WO 03/35041、WO 03/35040、WO 03/35029、WO 03/35177、WO 03/35039、WO 02/96404、WO 02/32416、WO01/97783、WO 01/56544、WO 01/32217、WO 98/55107、WO 98/11879、WO 97/47285、WO 93/18755和WO 90/11757中描述的剂型。

控释制剂和药物递送系统：

在某些实施方式中，本公开内容的组合物和/或制剂可以是但不限于短期、快速补偿以及受控的例如持续释放、延迟释放和脉冲释放制剂。

术语持续释放在其常规意义上是指可在延长的时间段内逐渐释放药物的药物制剂，尽管不一定，但在延长的时间段内可导致药物的血液水平基本恒定。该时间段可以长达一个月或更长时间，并且应该是长于以推注形式施用相同量的释放。

为了持续释放，可以将化合物与合适的聚合物或疏水材料一起配制，所述聚合物或疏水材料为化合物提供持续释放特性。这样，用于本公开内容方法的化合物可以以微粒形式通过例如注射施用，或者以晶片或圆盘形式通过植入施用。

在本公开内容的某些实施方式中，使用缓释制剂将本公开内容中有用的化合物单独或与另一种药物制剂组合施用至受试者。

术语延迟释放在本文中在其常规意义上是指在药物施用后的一定延迟之后提供药物的初始释放的药物制剂，并且尽管不是必须的，但是可以包括从约10分钟直至大约12个小时。

术语脉冲释放在本文中在其常规意义上是指以药物施用后产生脉冲血浆分布的方式提供药物释放的药物制剂。

术语立即释放在其常规意义上是指在药物施用后立即提供释放药物的药物制剂。

如本文所使用的，短期指在药物施用之后的任何时间段，至多并且包括在药物施用之后约8小时、约7小时、约6小时、约5小时、约4小时、约3小时、约2小时、约1小时、约40分钟、约20分钟或约10分钟和其任何或所有完整增量或部分增量。

如本文所使用的，快速补偿指在药物施用之后的任何时间段，至多并且包括约8小时、约7小时、约6小时、约5小时、约4小时、约3小时、约2小时、约1小时、约40分钟、约20分钟或约10分钟，以及其任何完整增量和部分增量。

仅使用常规实验，本领域技术人员将认识到或能够确定本文所述的具体程序、实施方式、权利要求和实施例的许多等同方案。这样的等同方案被认为在本公开内容的范围内，并由所附权利要求书涵盖。例如，应当理解，利用本领域公认的替代方案并且仅使用常规实验，包括但不限于反应时间、反应规格(size)/规模(volume)和实验试剂比如溶剂、催化剂、压力、大气条件例如氮气气氛、以及还原剂/氧化剂的反应条件的改进均在本申请的范围内。

应当理解，无论在本文何处提供数值和范围，范围格式的描述仅是为了方便和简洁，而不应被解释为对本公开内容范围的僵化限制。因此，这些值和范围所涵盖的所有值和范围意在被涵盖在本公开内容的范围内。此外，本申请还考虑了落入这些范围内的所有值以及该值的范围的上限或下限。范围的描述应被认为已明确公开了所有可能的子范围以及该范围内的单个数值，以及在合适时该范围内的数值的部分整数。例如，对范围从1到6的描述应被视为已明确公开了从1到3、从1到4、从1到5、从2到4、从2到6、从3到6等的子范围，以及该范围内的单个数值，例如1、2、2.7、3、4、5、5.3和6。无论该范围的广度如何，这都适用。

本文提供的实施例说明了本公开内容的方面。然而，它们绝不是对如本文所述的公开内容的教导或公开内容的限制。提供本文中的实施例仅出于说明的目的，并且本公开内容不限于这些实施例，而是涵盖由于本文提供的教导而显而易见的所有变型。

实施例

现在参考以下实施例描述本公开内容。提供这些实施例仅出于说明的目的，并且本公开内容不限于这些实施例，而是涵盖由于本文提供的教导而显而易见的所有变型。

步骤1-8,9-二氟吡喃并[3,4-c]异色烯-1,6(2H,4H)-二酮(B)的合成

将DMF(20.5L)加入50L反应器中并将内容物抽气并用N₂两次回填。接着，加入吡喃-3,5-二酮(1.28kg，11.22mol，1.2eq.)，随后加入2-溴-4,5-二氟苯甲酸(A)(2.20kg，9.28mol，1.0eq.)、L-脯氨酸(214g，1.86mol，0.2eq.)、K₂CO₃(2.59kg，18.6mol，2eq.)和碘化铜(I)(177g，0.93mol，0.1eq.)。将混合物再次脱气并再用N₂回填两次。在1小时内将反应混合物加热到70℃并在该温度下搅拌不少于10小时，直到通过LCMS确认反应完成。将反应混合物冷却至5℃，在此之后在1.5小时内将其用水(20L)稀释，同时保持温度低于12℃。使用4N HCl(7.5L)将所得黑色悬浮液缓慢酸化至pH 2。加入乙酸异丙酯(4.5L)，并在1小时内将所得混合物升温至20℃。因为白色固体沉淀，将混合物在20℃下搅拌不少于48小时，直到通过LCMS确认反应完成(>90％的B形成)。过滤固体，并依次用水(2×3L)和乙酸异丙酯(2×3L)洗涤湿滤饼。在完全脱液之后，将湿滤饼在40℃下真空干燥16小时，以提供化合物(B)(1.659kg，71％)，为灰白色固体。¹H NMR(400MHz，SO(CD₃)₂)δ8.65(dd，J＝7.8，12.4Hz，1H)，8.21(dd，J＝8.0，10.1Hz，1H)，4.80(s，2H)，4.33(s，2H)；¹³C NMR(100.6MHz，SO(CD₃)₂)δ：192.4(s)，168.4(d，J＝2.0Hz)，157.0(s)，154.2(dd，J＝13.2，256.1Hz)，149.1(dd，J＝14.0，251.5Hz)，130.9(d，J＝10.0Hz)，118.3(d，J＝19.3Hz)，117.6(d，J＝6.5Hz)，113.6(d，J＝21.3Hz)，107.3(s)，71.4(s)，64.2(s)；¹⁹F NMR(376.5MHz，SO(CD₃)₂)δ：-124.9(ddd，J＝8.5，12.4，22.0Hz，1F)，-134.5(dt，J＝9.0，23.3Hz，1F)。

步骤2-8,9-二氟-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-1,6(4H,5H)-二酮(C)的合成

将化合物B(1.649kg，6.54摩尔)和28-30％NH₄OH(aq.)(6.27L)装入20L反应器中，并在45min内将所得浆液加热到50℃。固体在加热之后完全溶解，并且在10min之后产物开始沉淀。在50℃下搅拌不少于5小时之后，通过LCMS确认反应完成(B消失且C形成)。将反应混合物冷却至5℃并搅拌30min。将冷浆液过滤，并依次用水(3×1L)和甲醇(2×1L)洗涤湿滤饼。在完全脱液之后，将湿滤饼在40℃下真空干燥12小时，以提供化合物(C)(1.536kg，94％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，SO(CD₃)₂)δ：12.35(br s，1H)，8.90(dd，J＝8.0，13.2Hz，1H)，8.09(dd，J＝8.6，10.8Hz，1H)，4.77(s，2H)，4.27(s，2H)；¹³C NMR(100.6MHz，SO(CD₃)₂)δ：191.7(s)，160.2(s)，153.9(s)，153.5(dd，J＝13.1，251.5Hz)，148.9(dd，J＝14.1，249.5Hz)，132.0(d，J＝9.1Hz)，122.5(s)，115.2(d，J＝17.1Hz)，113.7(d，J＝20.1Hz)，104.9(s)，72.2(s)，64.4(s)；¹⁹F NMR(376.5MHz，SO(CD₃)₂)δ：-128.7(ddd，J＝8.5，13.2，22.4Hz，1F)，-137.1(ddd，J＝8.0，11.0，23.6Hz，1F)；MS(ESI-，m/z)：[C₁₂H₇F₂NO₃-H]^-的计算值：250.0；实测值：250.0。

步骤3-(S)-8,9-二氟-1-(((R)-1-苯乙基)氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(D)的合成

将酮C(670g，2.67mol)、(R)-1-苯乙-1-胺(388g，3.20mol，1.2eq.)和Ti(OEt)₄(913g，4.00mol，1.5eq.)装入100L反应器中。接着，加入2-MeTHF(6.7L)，并将所得悬浮液加热到内部温度为80℃，持续不少于21小时，直到通过HPLC确认反应完成(在以NaBH₄和EtOH淬灭等分试样后形成化合物D)。将反应混合物冷却至50℃并加入另外的2-MeTHF(13.4L)。将所得溶液冷却至-11℃，并在1小时内分4份交替加入EtOH(1.34L)和NaBH₄(151.4g，4.0mol，1.5eq.)，同时保持反应温度低于-8℃。将所得混合物在-11℃和-8℃之间搅拌，持续不少于5小时，直到通过HPLC确认反应转化率>99％(形成化合物D)。

通过加入柠檬酸(3.86kg)和NaOH(643g)在水(20.1L)中的预制溶液来淬灭反应混合物，同时保持温度低于24℃。另外的2-MeTHF(2.0L)用于定量转移。将所得混合物在24℃下搅拌12小时，在此期间混合物分成两个均质层。分离有机层，并用2-MeTHF(6.7L)进一步萃取水性层。用水(6.7L)、8％NaHCO₃(aq.)(13.4L)和水(10.0L)依次洗涤合并的有机层。将有机层用2-MeTHF(5.4L)稀释并通过滤纸过滤。

将过滤的溶液浓缩至总体积为5.4L，在此期间一些固体从混合物中沉淀出来。将混合物用2-MeTHF(1.3L)稀释，同时冲洗反应容器的侧面。将所得浆液在22℃下搅拌6.5小时，在此之后在1.5小时内将混合物加热到40℃。将混合物在40℃下搅拌1.5小时，并且然后在1.5小时内冷却回至22℃。将浆液在相同温度下搅拌3.5小时，在此之后过滤固体。在0℃下将湿滤饼用预冷的2-MeTHF(0.67L)洗涤并完全脱液。将湿滤饼在40℃下真空干燥16小时，以提供化合物(D)(503.1g，53％)，为浅棕褐色粉末。通过在结晶过程中使用正庚烷作为抗溶剂可以将分离的产率提高到>65％。¹H NMR(400MHz，SO(CD₃)₂)δ：11.31(br s，1H)，7.94(dd，J＝8.4，11.0Hz，1H)，7.69(dd，J＝7.6，12.4Hz，1H)，7.31-7.10(m，5H)，4.37(d，J＝16.1Hz，1H)，4.27(d，J＝16.1Hz，1H)，4.09(q，J＝6.5Hz，1H)，3.97(d，J＝11.8Hz，1H)，3.79(s，1H)，3.48(dd，J＝2.3，11.7Hz，1H)，2.10(br s，1H)，1.34(d，J＝6.5Hz，3H)；¹³C NMR(100.6MHz，SO(CD₃)₂)δ：159.8(d，J＝3.1Hz)，152.5(dd，J＝14.1，251Hz)，147.9(dd，J＝14.2，246Hz)，146.9(s)，136.7(d，J＝2.2Hz)，135.6(dd，J＝2.4，8.8Hz)，128.1(s)，126.6(s)，126.4(s)，122.4(dd，J＝1.7，5.5Hz)，114.6(d，J＝18.0Hz)，111.2(d，J＝18.7Hz)，107.3(d，J＝2.9Hz)，67.2(s)，63.4(s)，54.8(s)，47.2(s)，23.7(s)；¹⁹F NMR(376.5MHz，SO(CD₃)₂)δ：-131.6(ddd，J＝8.5，12.4，23.6Hz，1F)，-139.9(ddd，J＝7.6，11.0，23.1Hz，1F)；MS(ESI+，m/z)：[C₂₀H₁₈F₂N₂O₂+H]⁺的计算值：357.1；实测值：357.1。

步骤3’-(S)-8,9-二氟-1-(((R)-1-(4-甲氧苯基)乙基)氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(D’)的合成

向50L反应器加入酮C(650g，2.59mol)、(R)-1-(4-甲氧苯基)乙-1-胺(470g，3.11mol，1.2eq.)和Ti(OEt)₄(890g，3.89mol，1.5eq.)。加入2-MeTHF(6.5L)并将所得悬浮液加热到温度为80℃，持续不少于15小时，直到通过HPLC确认反应完成(在以NaBH₄和EtOH淬灭等分试样之后形成D’)。将反应混合物冷却至50℃并加入另外2-MeTHF(13L)。将悬浮液加热到温度为70℃并且混合物变成澄清溶液。

将溶液冷却至50℃并加入乙醇(1.05L，834g，18.1mol，7eq.)。将混合物冷却至-2℃并加入NaBH₄(28.6g，778mmol，0.3eq.)，并将混合物在-2至0℃的温度下搅拌30min。加入另外的NaBH₄(28.6g，778mmol，0.3eq.)并将混合物在相同温度下搅拌30min。加入第三份NaBH₄(57.2g，1.55mol，0.6eq.)并将混合物在0℃下搅拌1.5小时。加入另外的NaBH₄(28.6g，778mmol，0.3eq.)并将混合物在0℃下搅拌30min。加入乙醇(150mL，2.59mol，1eq.)和NaBH₄(28.6g，778mmol，0.3eq.，共1.8eq.)并将混合物在0℃下搅拌30min。在0℃下搅拌反应混合物直到通过HPLC确认反应完成(形成D’)。

在0℃下通过控制添加柠檬酸钠水溶液(1.0M柠檬酸/0.8M NaOH缓冲液，6.0L)来淬灭反应混合物，使温度上升至24℃。将反应混合物在室温下搅拌12小时。分离各层，并将有机层依次用10％NaCl水溶液(2×3L)、8％NaHCO₃(aq.)(2.4L)和水(3L)洗涤。向分离的有机层加入庚烷(3L)，使另外的水性层分开。将有机层通过烧结的玻璃漏斗过滤并通过真空蒸馏浓缩至体积为～6.5L。将所得红色溶液加热到35℃并在1.5小时内逐滴加入庚烷(2.0L)。将所得稀浆液在35℃下搅拌2小时，在此之后将其冷却至27℃并在该温度下搅拌30min。将混合物过滤，并用2-MeTHF-庚烷的1:2混合物(2×650mL)洗涤湿滤饼。在完全脱液之后，将湿滤饼在40℃下真空干燥4小时，以提供D’(397g，40％)，为灰白色固体。¹H NMR(400MHz，SO(CD₃)₂)δ：11.16(br s，1H)，7.97(dd，J＝8.5，11.0Hz，1H)，7.70(dd，J＝7.6，12.4Hz，1H)，7.20(d，J＝8.6Hz，2H)，6.77(d，J＝8.6Hz，2H)，4.37(d，J＝16.1Hz，1H)，4.28(d，J＝16.1Hz，1H)，4.05(q，J＝6.5Hz，1H)，3.97(d，J＝11.6Hz，1H)，3.78(s，1H)，3.68(s，3H)，3.48(dd，J＝2.4，11.7Hz，1H)，1.98(br s，1H)，1.30(d，J＝6.4Hz，3H)；¹³C NMR(100.6MHz，SO(CD₃)₂)δ：159.9(d，J＝3.0Hz)，158.0(s)，152.6(dd，J＝14.1，251.0Hz)，148.1(dd，J＝14.3，246.9Hz)，138.9(s)，136.7(d，J＝2.2Hz)，135.6(d，J＝8.8Hz)，127.4(s)，122.4(d，J＝5.4Hz)，114.6(d，J＝18.0Hz)，113.5(s)，111.2(d，J＝18.7Hz)，107.4(d，J＝2.8Hz)，67.2(s)，63.5(s)，55.0(d，J＝1.6Hz)，54.1(s)，47.2(s)，23.7(s)；¹⁹F NMR(376.5MHz，SO(CD₃)₂)δ：-131.6(ddd，J＝8.5，12.4，23.4Hz，1F)，-139.9(ddd，J＝7.6，11.1，23.0Hz，1F)；MS(ESI+，m/z)：[C₂₁H₂₀F₂N₂O₃+H]⁺的计算值：387.2；实测值：387.2。

步骤4-(S)-8,9-二氟-1-(甲基((R)-1-苯乙基)氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(E)的合成

向20L反应器加入胺D(480.0g，1.347mol)并将固体悬浮在2-MeTHF(9.6L)中。然后加入乙酸(97.1g，1.62mol，1.2eq.)和37％甲醛(273.3g，101g甲醛，3.37mol，2.5eq.)。将所得悬浮液冷却至16℃并在25min内分4份加入NaBH(OAc)₃(571g，2.69mol，2.0eq.)，保持温度低于23℃。将反应混合物在21℃下搅拌不长于3小时，直到通过HPLC确认反应完成(D的转化率>99％并形成E)。在20min内将混合物用1M NaOH(aq.)(4.8L)淬灭并且然后用水(3.4L)稀释。在室温下搅拌所得悬浮液直到固体被完全溶解。分离有机层，并将水性层用2-MeTHF(4.8L)进一步萃取。将合并的有机层用水(4.8L)洗涤并经Na₂SO₄(0.96kg)干燥1小时。将混合物过滤，和通过真空蒸馏将过滤的溶液浓缩至总体积为7.2L。加入环戊基甲醚(CPME，4.8L)，并将混合物浓缩至7.2L，为固体沉淀。加入另外的CPME(4.8L)并将混合物浓缩至总体积为5.8L。加入另外的CPME(1.4L)并用于冲洗反应容器的侧面。将所得浆液在21℃下搅拌2小时，并过滤固体。将湿滤饼依次用CPME(0.96L)和正庚烷(2×0.96L)洗涤，然后完全脱液。将湿滤饼在55℃下真空干燥，以提供化合物(E)(454.0g，用残留的正庚烷和CPME进行修正，为449.5g，90％)，为灰白色固体。¹H NMR(400MHz，SO(CD₃)₂)δ：11.46(s，1H)，8.02(dd，J＝8.5，10.8Hz，1H)，7.98(dd，J＝7.8，12.7Hz，1H)，7.28-7.11(m，5H)，4.44(d，J＝16.1Hz，1H)，4.29(d，J＝16.1Hz，1H)，4.26(d，J＝12.8Hz，1H)，4.12(s，1H)，3.95(q，J＝6.7Hz，1H)，3.54(dd，J＝3.4，12.4Hz，1H)，2.05(s，3H)，1.41(d，J＝6.7Hz，3H)；¹⁹F NMR(376.5MHz，SO(CD₃)₂)δ：-131.5(ddd，J＝8.6，12.8，22.2Hz，1F)，-139.4(ddd，J＝7.9，11.1，23.1Hz，1F)；MS(ESI+，m/z)：[C₂₁H₂₀F₂N₂O₂+H]⁺的计算值：371.2；实测值：371.2。

步骤4’-(S)-8,9-二氟-1-(((R)-1-(4-甲氧苯基)乙基)(甲基)氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(E’)的合成

向20L反应器加入D’(803.5g，2.079mol)并将固体悬浮在CH₂Cl₂(8.8L)中。将悬浮液冷却至温度为13℃并加入乙酸(143mL，150g，2.50mol，1.2eq.)和37％甲醛(422g，156g甲醛，5.20mol，2.5eq.)。在1小时内分6份加入NaBH(OAc)₃(882g，4.19mol，2.0eq.)，保持温度低于18℃。在最终加入之后，将溶液在12-14℃下搅拌不少于1小时，直到通过HPLC确认反应完成(D’消失并形成E’)。将反应混合物用3M NaOH(4L)分批淬灭。将所得混合物搅拌20min，并加入CH₂Cl₂(4L)，随后加入水(1L)。分离各层，并将有机层用另外的水(4L)洗涤。将有机层通过无水Na₂SO₄垫过滤，在此之后通过真空蒸馏将其浓缩至总体积为5L。将含有化合物(E’)的有机层原样用于下一步(步骤5’)。

步骤5-(S)-8,9-二氟-1-(甲氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮三氟乙酸盐(F)的合成

/>

向20L高压釜反应器加入化合物E(420.0g，1.134mol)并将固体悬浮在甲醇(4.2L)中。加入三氟乙酸(420mL)并在室温下搅拌该混合物直到固体完全溶解。将混合物脱气并用N₂吹扫5min，并加入10％Pd/C(湿的，12.1g原样，1.21g Pd，11.4mmol，0.01eq.)。将悬浮液脱气并用氢气吹扫5min，并将混合物用氢气(0.8巴)回填。该吹扫和回填过程再重复两次。将反应混合物在氢气气氛(0.8巴)下搅拌不少于3.5小时，直到通过HPLC确认反应完成(E的转化率>99％并形成F)。将混合物用N₂吹扫5min，并将反应器的顶部空间用N₂回填。该吹扫和回填过程再重复三次。将反应混合物通过垫过滤，并用甲醇(2.1L)洗涤固体。通过真空蒸馏将滤液浓缩至总体积为2.1L，在此之后加入2-MeTHF(8.4L)。将混合物浓缩至总体积为6.3L，并且为固体沉淀，加入另外的2-MeTHF(8.4L)。将浆液浓缩至总体积为5.5L，并使用另外2-MeTHF(0.8L)冲洗反应容器的侧面。将悬浮液在室温下搅拌2小时，在此之后过滤固体，并将湿滤饼用2-MeTHF(2×0.65L)洗涤。在完全脱液之后，将湿滤饼在50℃下真空干燥，以提供化合物(F)(462.9g，用残留的2-MeTHF进行修正，为411.5g，95％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，SO(CD₃)₂)δ：11.82(br s，1H)，9.04(br s，2H)，8.08(dd，J＝8.4，10.8Hz，1H)，8.02(dd，J＝7.3，12.3Hz，1H)，4.64-4.51(m，3H)，4.46(d，J＝12.8Hz，1H)，3.89(dd，J＝1.8，12.9Hz，1H)，2.66(s，3H)；¹³C NMR(100.6MHz，SO(CD₃)₂)δ：159.9(d，J＝2.9Hz)，158.3(q，J＝31.2Hz)，153.0(dd，J＝13.9，252.2Hz)，148.5(dd，J＝14.4，248.4Hz)，140.0(d，J＝2.2Hz)，133.9(dd，J＝2.4，8.6Hz)，122.2(dd，J＝2.2，6.1Hz)，117.2(q，J＝299.6Hz)，115.2(d，J＝18.2Hz)，111.6(d，J＝19.4Hz)，100.9(s)，63.9(s)，62.5(s)，48.6(s)，30.5(s)；¹⁹F NMR(376.5MHz，SO(CD₃)₂)δ：-73.7(s，3F)，-130.5(ddd，J＝8.4，12.2，22.9Hz，1F)，-138.7(ddd，J＝7.3，10.7，22.9Hz，1F)；MS(ESI+，m/z)：[C₁₃H₁₂F₂N₂O₂+H]⁺的计算值：267.1；实测值：267.1。

步骤5’-(S)-8,9-二氟-1-(甲氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮三氟乙酸盐(F)的合成

向E’的溶液加入三乙基硅烷(484g，4.16mol，2eq.)，随后加入三氟乙酸(3.7L)。将所得溶液在室温下搅拌不少于35小时，直到通过HPLC确认反应完成(E’消失并且形成F)。将反应混合物在减压下蒸馏至总体积为5L。加入甲醇(1L)并将混合物进一步蒸馏至体积为5L，此时一些固体开始沉淀。将稀浆液用2-MeTHF/甲醇(4L，3:1v/v)的混合物稀释，使固体溶解。将溶液浓缩至体积为7L，并加入另外2-MeTHF/甲醇(2L，3:1v/v)。将溶液浓缩至体积为8L。加入2-MeTHF(2L)并将混合物再次浓缩至总体积为8L，此时固体开始沉淀。将该过程再重复两次。将所得浆液调节至温度为27℃并过滤固体。在脱液之后，将湿滤饼用2-MeTHF(1L，然后2×0.5L)洗涤。在完全脱液之后，将湿滤饼在40℃下真空干燥24小时，以提供化合物(F)(673g，用残留的2-MeTHF进行修正，为628g，79％)，为白色固体。在某些实施方式中，通过进行另外的溶剂交换以确保在过滤前完全除去甲醇来提高产率。¹H NMR(400MHz，SO(CD₃)₂)δ：11.82(br s，1H)，9.04(br s，2H)，8.08(dd，J＝8.4，10.8Hz，1H)，8.02(dd，J＝7.3，12.3Hz，1H)，4.64-4.51(m，3H)，4.46(d，J＝12.8Hz，1H)，3.89(dd，J＝1.8，12.9Hz，1H)，2.66(s，3H)；¹³C NMR(100.6MHz，SO(CD₃)₂)δ：159.9(d，J＝2.9Hz)，158.3(q，J＝31.2Hz)，153.0(dd，J＝13.9，252.2Hz)，148.5(dd，J＝14.4，248.4Hz)，140.0(d，J＝2.2Hz)，133.9(dd，J＝2.4，8.6Hz)，122.2(dd，J＝2.2，6.1Hz)，117.2(q，J＝299.6Hz)，115.2(d，J＝18.2Hz)，111.6(d，J＝19.4Hz)，100.9(s)，63.9(s)，62.5(s)，48.6(s)，30.5(s)；¹⁹F NMR(376.5MHz，SO(CD₃)₂)δ：-73.7(s，3F)，-130.5(ddd，J＝8.4，12.2，22.9Hz，1F)，-138.7(ddd，J＝7.3，10.7，22.9Hz，1F)；MS(ESI+，m/z)：[C₁₃H₁₂F₂N₂O₂+H]⁺的计算值：267.1；实测值：267.1。

步骤6-(S)-N-(8,9-二氟-6-氧-1,4,5,6-四氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-1-基)-5,6-二氟-N-甲基-1H-吲哚-2-甲酰胺(X)的合成

向10L反应器加入5,6-二氟-1H-吲哚-2-羧酸(G)(159.7g，0.81mol，1.1eq.)和DMF(5.4g，73.9mmol，0.1eq.)，并将内容物溶解在THF(3.36L)中。将所得溶液冷却至3℃并在12min内加入草酰氯(102.8g，0.81mol，1.1eq.)。将溶液在3℃下搅拌1小时，在此之后将温度调整至22℃，并将混合物在该温度下搅拌30min。加入另外的草酰氯(4.7g，37mmol，0.05eq.)并将溶液在室温下再搅拌30min，直到通过HPLC确认反应完成(在用5％甲醇钠的甲醇溶液淬灭之后5,6-二氟-1H-吲哚-2-羧酸消失并且形成相应的甲酯)。

向单独的30L反应器加入化合物F(280.0g，0.736mol)并将固体溶解在水(1.4L)和THF(7.0L)的混合物中。加入K₂CO₃(305.3g，2.21mol，3eq.)在水(0.56L)中的溶液并将混合物加热到32℃。在7min内将如本文所述制备的酰氯(H)溶液加入该混合物，并使用THF(0.84L)来定量转移。将反应混合物在35℃下搅拌不少于45min，在此之后HPLC指示转化率>99％(F的转化率并且形成X)。将混合物用水(0.84L)和乙酸乙酯(5.6L)稀释并将内容物在35℃下搅拌20min。分离各层，并将有机层用水(2.8L)洗涤，将内部温度保持在34℃，持续20min。分离各层，并通过垫过滤有机层。用THF(1.4L)洗涤固体，并将所得滤液冷却至12℃。少量的固体从溶液沉淀出来，并通过滤纸过滤混合物。通过真空蒸馏将溶液浓缩至总体积为8.4L，在此之后加入乙醇(8.4L)。将溶液浓缩至总体积为8.4L，并加入另外的乙醇(5.6L)。将混合物浓缩至体积为4.2L，呈固体沉淀。加入乙醇(5.6L)，并将浆液浓缩至体积为3.9L。使用另外的乙醇(0.3L)来冲洗反应容器的侧面。加入水(0.42L)，并将浆液的温度调节至38℃。将悬浮液在相同温度下搅拌1小时，在此之后将其冷却至22℃并在该温度下搅拌2小时。将混合物过滤，并将湿滤饼用乙醇(0.76L)洗涤。在完全脱液之后，将湿滤饼在60℃下真空干燥，以提供化合物(X)(316.0g，用残留的乙醇和水进行修正，为310.9g，95％)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，SO(CD₃)₂)δ：11.92(br s，1H)，11.74(br s，1H)，8.12(dd，J＝8.4，10.8Hz，1H)，7.61(dd，J＝8.0，11.1Hz，1H)，7.43(dd，J＝7.5，12.0Hz，1H)，7.38(dd，J＝7.2，11.1Hz，1H)，6.95(s，1H)，5.73(app s，1H)，4.62(d，J＝16.2Hz，1H)，4.46(d，J＝15.7Hz，1H)，4.15(d，J＝12.2Hz，1H)，4.02(dd，J＝3.4，12.3Hz，1H)，3.13(s，3H)；¹³CNMR(100.6MHz，SO(CD₃)₂)δ：162.3(s)，160.0(d，J＝2.9Hz)，153.0(dd，J＝13.9，252Hz)，148.4(dd，J＝14.2，248Hz)，148.2(dd，J＝16.3，241Hz)，145.7(dd，J＝15.2，236Hz)，139.8(s)，134.7(d，J＝8.3Hz)，131.6(d，J＝3.6Hz)，131.3(d，J＝11.3Hz)，123.0(d，J＝5.9Hz)，122.3(d，J＝8.6Hz)，115.4(d，J＝18.3Hz)，109.9(d，J＝19.0Hz)，108.0(s)，102.2(s)，99.7(d，J＝21.4Hz)，70.6(s)，63.5(s)，45.6(s)，33.6(s)；¹⁹F NMR(376.5MHz，SO(CD₃)₂)δ：-129.7(dt，J＝10.1，21.4Hz)，-138.8(dt，J＝9.1，20.8Hz)，-141.3(ddd，J＝8.1，11.1，21.9Hz)，-147.1(ddd，J＝7.0，10.9，21.6Hz)；MS(ESI+，m/z)：[C₂₂H₁₅F₄N₃O₃+H]⁺的计算值：446.1；实测值：446.1。

列举的实施方式

提供了以下示例性实施方式，其编号不应解释为指定重要程度：

实施方式1提供了一种制备(S)-N-(8,9-二氟-6-氧-1,4,5,6-四氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-1-基)-5,6-二氟-N-甲基-1H-吲哚-2-甲酰胺(X)或其盐或溶剂化物的方法：

所述方法包括使(S)-8,9-二氟-1-(甲氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(F)与5,6-二氟-1H-吲哚-2-碳酰氯(H)反应，从而产生包括(X)的第一反应体系，

实施方式2提供了实施方式1所述的方法，其中(F)和(H)的反应在碱存在下进行。

实施方式3提供了实施方式2所述的方法，其中碱包括K₂CO₃。

实施方式4提供了实施方式1-3中任一项所述的方法，其中(F)和(H)在包括THF和H₂O中的至少一种的溶剂中反应。

实施方式5提供了实施方式1-4中任一项所述的方法，其中(X)的纯化包括将至少一种有机溶剂加入第一反应体系中以产生双相体系。

实施方式6提供了实施方式5所述的方法，其中所述有机溶剂包括乙酸乙酯。

实施方式7提供了实施方式5-6中任一项所述的方法，其中所述(X)的纯化进一步包括分离所述双相体系以提供水相和有机相。

实施方式8提供了实施方式7所述的方法，其中所述(X)的纯化进一步包括将至少一部分所述有机相与乙醇交换以产生第一溶液。

实施方式9提供了实施方式8所述的方法，其中所述(X)的纯化进一步包括将水加入所述第一溶液中以提供第二溶液。

实施方式10提供了实施方式9所述的方法，其中所述(X)的纯化进一步包括加热和冷却所述第二溶液以产生固体(X)。

实施方式11提供了实施方式1-10中任一项所述的方法，其中通过使5,6-二氟-1H-吲哚-2-羧酸(G)与氯化剂反应来制备(H)。

实施方式12提供了实施方式11所述的方法，其中所述氯化剂选自(COCl)₂和SOCl₂。

实施方式13提供了实施方式1-10中任一项所述的方法，其中通过使(S)-8,9-二氟-1-(甲基((R)-1-苯乙基)氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(E)与氢气(H₂)在氢化催化剂和酸存在下反应来制备(F)，

实施方式14提供了实施方式13所述的方法，其中所述氢化催化剂包括披钯碳(Pd/C)。

实施方式15提供了实施方式13-14中任一项所述的方法，其中所述酸包括三氟乙酸(TFA)。

实施方式16提供了实施方式13-15中任一项所述的方法，其中(E)和氢气在包括甲醇的溶剂中反应。

实施方式17提供了实施方式13-16中任一项所述的方法，其中(F)的纯化包括将至少一部分所述甲醇与2-甲基四氢呋喃交换，从而产生第一溶液。

实施方式18提供了实施方式17所述的方法，其中所述第一溶液的至少部分浓缩产生固体(F)。

实施方式19提供了实施方式13-18中任一项所述的方法，其中通过(S)-8,9-二氟-1-(((R)-1-苯乙基)氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(D)与甲醛的还原烷基化来制备(E)，

实施方式20提供了实施方式19所述的方法，其中(D)的还原烷基化在包括2-甲基四氢呋喃的溶剂中进行。

实施方式21提供了实施方式19-20中任一项所述的方法，其中通过使(R)-1-苯乙-1-胺：与8,9-二氟-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-1,6(4H,5H)-二酮(C)反应，从而形成亚胺中间体，并用还原剂处理所述亚胺中间体来形成(D)，从而制备(D)，

实施方式22提供了实施方式21所述的方法，其中(C)和(R)-1-苯乙-1-胺在钛(IV)醇盐存在下反应以形成所述亚胺中间体。

实施方式23提供了实施方式22所述的方法，其中所述钛(IV)醇盐包括Ti(OEt)₄。

实施方式24提供了实施方式21-23中任一项所述的方法，其中所述还原剂包括硼氢化物。

实施方式25提供了实施方式1-10中任一项所述的方法，其中通过使(S)-8,9-二氟-1-(((R)-1-(4-甲氧苯基)乙基)(甲基)氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(E’)与酸反应来制备(F)，

实施方式26提供了实施方式25所述的方法，其中所述酸包括三氟乙酸(TFA)。

实施方式27提供了实施方式25-26中任一项所述的方法，其中(E')和所述酸在三烷基硅烷存在下反应。

实施方式28提供了实施方式25-27中任一项所述的方法，其中通过(S)-8,9-二氟-1-(((R)-1-(4-甲氧苯基)乙基)氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(D’)与甲醛的还原烷基化来制备(E’)：

实施方式29提供了实施方式28所述的方法，其中通过使(R)-1-(4-甲氧苯基)乙-1-胺：与8,9-二氟-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-1,6(4H,5H)-二酮(C)反应，从而形成亚胺中间体，并用还原剂处理所述亚胺中间体来形成(D’)，从而制备(D’)

实施方式30提供了实施方式29所述的方法，其中(C)和所述(R)-1-(4-甲氧苯基)乙-1-胺在钛(IV)醇盐存在下反应以形成所述亚胺。

实施方式31提供了实施方式29-30中任一项所述的方法，其中所述还原剂包括硼氢化物。

实施方式32提供了实施方式21-24和29-31中任一项所述的方法，其中通过使8,9-二氟吡喃并[3,4-c]异色烯-1,6(2H,4H)-二酮(B)与铵盐反应来制备(C)，

实施方式33提供了实施方式32所述的方法，其中所述铵盐包括氢氧化铵。

实施方式34提供了实施方式33所述的方法，其中所述氢氧化铵包括水溶液。

实施方式35提供了实施方式32-34中任一项所述的方法，其中(B)与所述铵盐的反应在约50℃的温度下发生。

实施方式36提供了实施方式32-35中任一项所述的方法，其中通过使2-溴-4,5-二氟苯甲酸(A)与3,5-吡喃二酮反应，从而形成酮-酸中间体，并用酸处理酮-酸中间体以形成(B)，从而制备(B)：

实施方式37提供了实施方式36所述的方法，其中(A)与3,5-吡喃二酮在路易斯酸存在下反应。

实施方式38提供了实施方式37所述的方法，其中所述路易斯酸包括铜(I)盐。

实施方式39提供了实施方式36-38中任一项所述的方法，其中所述(A)与3,5-吡喃二酮在L-脯氨酸存在下反应。

实施方式40提供了实施方式36-39中任一项所述的方法，其中所述(A)与3,5-吡喃二酮在碱存在下反应。

实施方式41提供了实施方式40所述的方法，其中所述碱包括碱性碳酸盐。

实施方式42提供了实施方式36-41中任一项所述的方法，其中用酸处理所述酮-酸中间体包括将所述酮-酸中间体酸化至pH约为2。

实施方式43提供了实施方式36-42中任一项所述的方法，其中(A)与3,5-吡喃二酮的反应在约70℃的温度下发生。

实施方式44提供了实施方式36-43中任一项所述的方法，其中(A)与所述3,5-吡喃二酮以约1：1.2的摩尔比反应。

本文引用的每篇专利、专利申请和出版物的公开内容通过引用以其整体并入本文。尽管已经参考特定实施方式公开了本公开内容，但是显而易见，本领域的其他技术人员可以设计出本公开内容的其他实施方式和变型而不背离本公开内容的真实精神和范围。所附权利要求旨在被解释为包括所有这样的实施方式和等同变型。

Claims (44)

1.一种制备(S)-N-(8,9-二氟-6-氧-1,4,5,6-四氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-1-基)-5,6-二氟-N-甲基-1H-吲哚-2-甲酰胺(X)或其盐或溶剂化物的方法，

所述方法包括使(S)-8,9-二氟-1-(甲氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(F)与5,6-二氟-1H-吲哚-2-碳酰氯(H)反应，从而产生包括(X)的第一反应体系，

2.根据权利要求1所述的方法，其中(F)和(H)的反应在碱存在下进行。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述碱包括K₂CO₃。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中(F)和(H)在包括THF和H₂O中的至少一种的溶剂中反应。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中(X)的纯化包括将至少一种有机溶剂加入第一反应体系中以产生双相体系。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述有机溶剂包括乙酸乙酯。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其中所述(X)的纯化进一步包括分离所述双相体系以提供水相和有机相。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述(X)的纯化进一步包括将至少一部分所述有机相与乙醇交换以产生第一溶液。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述(X)的纯化进一步包括将水加入所述第一溶液中以提供第二溶液。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述(X)的纯化进一步包括加热和冷却所述第二溶液以产生固体(X)。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中通过使5,6-二氟-1H-吲哚-2-羧酸(G)与氯化剂反应来制备(H)。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述氯化剂选自(COCl)₂和SOCl₂。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的方法，其中通过使(S)-8,9-二氟-1-(甲基((R)-1-苯乙基)氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(E)与氢气(H₂)在氢化催化剂和酸存在下反应来制备(F)，

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述氢化催化剂包括披钯碳(Pd/C)。

15.根据权利要求13或14所述的方法，其中所述酸包括三氟乙酸(TFA)。

16.根据权利要求13-15中任一项所述的方法，其中(E)和氢气在包括甲醇的溶剂中反应。

17.根据权利要求16所述的方法，其中(F)的纯化包括将至少一部分所述甲醇与2-甲基四氢呋喃交换，从而产生第一溶液。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述第一溶液的至少部分浓缩产生固体(F)。

19.根据权利要求13-18中任一项所述的方法，其中通过(S)-8,9-二氟-1-(((R)-1-苯乙基)氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(D)与甲醛的还原烷基化来制备(E)，

20.根据权利要求19所述的方法，其中(D)的还原烷基化在包括2-甲基四氢呋喃的溶剂中进行。

21.根据权利要求19所述的方法，其中通过使(R)-1-苯乙-1-胺：与8,9-二氟-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-1,6(4H,5H)-二酮(C)反应，从而形成亚胺中间体，并用还原剂处理所述亚胺中间体来形成(D)，从而制备(D)，

22.根据权利要求21所述的方法，其中(C)和(R)-1-苯乙-1-胺在钛(IV)醇盐存在下反应以形成所述亚胺中间体。

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述钛(IV)醇盐包括Ti(OEt)₄。

24.根据权利要求21-23中任一项所述的方法，其中所述还原剂包括硼氢化物。

25.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中通过使(S)-8,9-二氟-1-(((R)-1-(4-甲氧苯基)乙基)(甲基)氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(E’)与酸反应来制备(F)，

26.根据权利要求25所述的方法，其中所述酸包括三氟乙酸(TFA)。

27.根据权利要求25或26所述的方法，其中(E')和所述酸在三烷基硅烷存在下反应。

28.根据权利要求25所述的方法，其中通过(S)-8,9-二氟-1-(((R)-1-(4-甲氧苯基)乙基)氨基)-1,5-二氢-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-6(4H)-酮(D’)与甲醛的还原烷基化来制备(E’)，

29.根据权利要求28所述的方法，其中通过使(R)-1-(4-甲氧苯基)乙-1-胺：与8,9-二氟-2H-吡喃并[3,4-c]异喹啉-1,6(4H,5H)-二酮(C)反应，从而形成亚胺中间体，并用还原剂处理所述亚胺中间体来形成(D’)，从而制备(D’)，

30.根据权利要求29所述的方法，其中(C)和所述(R)-1-(4-甲氧苯基)乙-1-胺在钛(IV)醇盐存在下反应以形成所述亚胺中间体。

31.根据权利要求29或30所述的方法，其中所述还原剂包括硼氢化物。

32.根据权利要求21-24和29-31中任一项所述的方法，其中通过使8,9-二氟吡喃并[3,4-c]异色烯-1,6(2H,4H)-二酮(B)与铵盐反应来制备(C)，

33.根据权利要求32所述的方法，其中所述铵盐包括氢氧化铵。

34.根据权利要求33所述的方法，其中所述氢氧化铵包括水溶液。

35.根据权利要求32-34中任一项所述的方法，其中(B)与所述铵盐的反应在约50℃的温度下发生。

36.根据权利要求32所述的方法，其中通过使2-溴-4,5-二氟苯甲酸(A)与3,5-吡喃二酮反应，从而形成酮-酸中间体，并用酸处理所述酮-酸中间体来形成(B)，从而制备(B)，

37.根据权利要求36所述的方法，其中(A)与3,5-吡喃二酮在路易斯酸存在下反应。

38.根据权利要求37所述的方法，其中所述路易斯酸包括铜(I)盐。

39.根据权利要求36-38中任一项所述的方法，其中所述(A)与3,5-吡喃二酮在L-脯氨酸存在下反应。

40.根据权利要求36-39中任一项所述的方法，其中所述(A)与3,5-吡喃二酮在碱存在下反应。

41.根据权利要求40所述的方法，其中所述碱包括碱性碳酸盐。

42.根据权利要求36-41中任一项所述的方法，其中用酸处理所述酮-酸中间体包括将所述酮-酸中间体酸化至pH约为2。

43.根据权利要求36-42中任一项所述的方法，其中(A)与3,5-吡喃二酮的反应在约70℃的温度下发生。

44.根据权利要求36-43中任一项所述的方法，其中(A)和所述3,5-吡喃二酮以约1：1.2的摩尔比反应。