CN117695324A - 杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花的新用途以及包含其的组合物 - Google Patents
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Abstract
本申请公开了杜仲雄花花粉或杜仲雄花的新用途以及包含其的组合物。本发明提供的组合物组分搭配得当、营养合理,具有提升精子质量,改善男性生殖功能的作用。
Description
技术领域
本发明涉及食品、保健食品或药品领域,具体涉及杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花改善男性精子质量的用途以及包含其的组合物,该组合物用于改善男性备孕人群的精子质量及少弱精症、精子畸形、精子活力低下的男性不育患者。
背景技术
2023年4月3日,世界卫生组织(WHO)发布的《不孕症患病率估计(1990-2021)》报告显示,全球约17.5%的成年人(约占1/6人口)受到不孕不育的影响。报告显示,全球不同区域之间,不孕不育症患病率存在一定差异。终生患病率最高的为西太平洋地区(23.2%),其次是美洲地区(20%)和欧洲地区(16.5%),而地中海地区最低(10.7%)。不同收入国家的不孕不育症患病率几乎相当,高收入国家为17.8%,低收入和中等收入国家为16.5%。其中值得关注的是1973年至2018年短短45年间,全球男性平均精子数量下降62%,精液中的精子浓度下降52%,全球男性精子浓度下降速度约为每年1.16%,2000年后的下降速度已经提高到2.64%。北京大学乔杰院士团队进行的一项全国生殖健康流行病学调查显示,2007年至2020年间,我国不孕症发病率已从12%升至18%,患者人数超过6000万,据预测数据2023年我国不孕率预计将达到18.2%。在不孕不育的病人当中,男女双方共有因素约占20%~30%,男性因素约占30%~40%。我国男性不育率已达到10%~15%,约占已婚夫妇的25%~37%。
目前临床治疗男性不育常用的方法主要包括:药物治疗、手术治疗和辅助生殖技术的治疗,以及针灸辅助治疗等。但目前用于治疗男性不育的药物多为激素或抗生素类,存在多种副作用,亟待开发新的安全有效的产品。
杜仲雄花为杜仲科杜仲属植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.雄树开的花,由雄花外苞片和花粉组成。已于2014年被我国批准为新食品原料。杜仲雄花富含多糖、黄酮等次生代谢产物,还有环烯醚萜类成分、木脂素类、苯丙素类成分。传统认为其具有降血糖、润肠通便、安神的功效,现代研究则提示其具有镇静催眠、抗炎镇痛、抗氧化应激、抗衰老、抑菌、免疫调节等药理作用。
杜仲雄花花粉为杜仲雄性植株花簇中的花粉,含有丰富的营养物质,其中总氨基酸、必需氨基酸、维生素C和维生素B的含量远高于叶片和树皮中的含量,蛋白质含量比其他40种常见花粉的平均含量高8.2%。此外含有多种活性成分,包括黄酮类、酚酸类、环烯醚萜类、木脂素类等,具有较高的营养价值和医疗保健功能。动物实验表明,杜仲雄花花粉具有明显的抗氧化、降血压、降血脂的功效,能有效抵抗有毒物质对身体的伤害,降低化疗药物的毒副作用。
发明内容
为了达到改善男性,特别是少弱精症、精子畸形、精子活力低下的男性不育患者的精子质量,促进优生优育的目的,本发明提供了杜仲雄花花粉或杜仲雄花的新用途以及包含其的组合物。
由此,本发明提供杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花在制备改善精子质量的食品或药品中的用途。
优选地,本发明提供杜仲雄花花粉在制备改善精子质量的食品或药品中的用途。
优选地,所述改善精子质量包括:改善精子浓度、提升精子活力、降低精子畸形率、增加受精几率、改善血清中性激素水平中的一种或多种。
此外,本发明提供一种改善精子质量的组合物,其中,所述组合物包含杜仲雄花花粉或杜仲雄花。
优选地,所述组合物中,杜仲雄花花粉或杜仲雄花的重量百分比含量为0.1~99.9%。
优选地,所述组合物至少包含杜仲雄花花粉。
优选地,所述组合物进一步包含虾青素或辅酶Q10,即虾青素和辅酶Q10中的任意一种。
更优选地,所述组合物进一步包含辅酶Q10。
在一个具体实施方式中,所述组合物包含杜仲雄花花粉和虾青素。
在一个具体实施方式中,所述组合物包含杜仲雄花和虾青素。
在一个具体实施方式中,所述组合物包含杜仲雄花花粉、杜仲雄花和虾青素。
在一个具体实施方式中,所述组合物包含杜仲雄花花粉和辅酶Q10。
在一个具体实施方式中,所述组合物包含杜仲雄花和辅酶Q10。
在一个具体实施方式中,所述组合物包含杜仲雄花花粉、杜仲雄花和辅酶Q10。
杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花:虾青素的重量份比为50∶0.1-400,优选为50∶1-200,更优选为50∶5-50。
在一个具体实施方式中,杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花:虾青素的重量份比为50∶20。
杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花:辅酶Q10的重量份比为:50∶0.1-100,优选为50∶0.5-80,更优选为50∶1-50。
在一个具体实施方式中,杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花:辅酶Q10的重量份比为:50∶20。
优选地,所述组合物进一步包含虾青素和辅酶Q10。
在一个具体实施方式中,所述组合物包括杜仲雄花花粉、虾青素和辅酶Q10。
在一个具体实施方式中,所述组合物包括杜仲雄花、虾青素和辅酶Q10。
在一个具体实施方式中,所述组合物包括杜仲雄花花粉、杜仲雄花、虾青素和辅酶Q10。
杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花:虾青素:辅酶Q10的重量份比为:50∶0.1-400∶0.1-100,优选为50∶0.5-200∶0.5-80,更优选为50∶0.5-50∶0.5-50,进一步优选为50∶0.8-30∶0.8-30。
在一个具体实施方式中,杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花:虾青素:辅酶Q10的重量份比为:50∶5∶5。
优选地,所述组合物制备成食品或药品。
优选地,所述食品为保健食品、功能食品、营养配餐食品、药膳或特殊膳食食用食品。
优选地,所述食品或药品为固体剂型或液体口服剂型。
本发明提供的组合物是按照现代生命科学最新理论进行配方配伍组合,找出最佳配比,不同的组合及其配比分别具有改善精子浓度、提升精子运动能力、降低精子畸形率等功效,同时增加受精几率。即本发明组合物组分搭配得当、营养合理,具有提升精子质量,改善男性生殖功能的作用。
具体实施方式
实施例1:杜仲雄花花粉改善腺嘌呤致SD大鼠生殖损伤功效研究
(1)实验仪器
(2)试药
戊巴比妥钠[北京普瑞斯生物科技有限公司];羧甲基纤维素钠[国药集团化学试剂有限公司];黄原胶[9k8712k);杜仲雄花花粉[产地:河南]。下述的“花粉”与“杜仲雄花花粉”具有相同的含义。
动物:SPF级SD雄性大鼠10-11周龄,体重350±20g;SPF级SD雌性大鼠9-10周,体重330±20g。
(3)溶液的配制
0.3%黄原胶水溶液的配制:取约6g黄原胶固体粉末,精密称定,至玻璃研钵中,按照等量递增法配制,首先加入少许水,研磨均匀后加入与研钵中混合物等体积的水,再次研磨均匀,直至将水全部加入,使其终浓度为0.3%。
花粉混悬液配制:取约3.5g杜仲雄花花粉,精密称定,置玻璃研钵中,按照等量递增法逐步加入0.3%黄原胶溶液100mL,充分研磨使其均匀混悬,使杜仲雄花花粉的终浓度为70.0mg/mL,4℃保存备用。
阳性对照药左卡尼汀溶液:取左卡尼汀口服液10mL,0.3%黄原胶溶液稀释至100mL,混匀,即得终浓度为10mg/mL左卡尼汀溶液,4℃保存备用。
腺嘌呤混悬液的配制:取腺嘌呤粉末约1.5g,精密称定,置玻璃研钵中,按照等量递增法逐步加入0.3%黄原胶溶液,充分研磨使其均匀混悬,即得终浓度为15mg/mL的花粉混悬液,4℃保存备用。
实验动物分组及给药
SD雄性大鼠70只,置于室温22~26℃的清洁级动物室中,自由进食饮水,适应1周后,将其按照体重随机分为正常组、模型组、杜仲雄花花粉组(简称花粉组)、左卡尼汀阳性药组(简称阳性组),每组10只。
正常组:喂饲水;模型组:上午喂饲0.3%黄原胶溶液,4h后喂饲腺嘌呤混悬液;花粉组:上午分别喂饲花粉混悬液(给药剂量:350mg/kg/d),4h后喂饲腺嘌呤混悬液150mg/kg;阳性组:上午分别喂饲左卡尼汀溶液(给药剂量:100mg/kg/d),4h后喂饲腺嘌呤混悬液(给药剂量:150mg/kg)。喂饲体积均为10mL/kg/次。以上各药均用0.3%黄原胶溶液配制,给药体积均为1mL/100g,每天1次,实验总持续时间均为30d,腺嘌呤混悬液给药时间为15d。杜仲雄花花粉相当于人用剂量的2倍。实验期间每7天称体重1次,记录体重并调整给药量。给药30d后,禁食不禁水12h,腹主动脉取血,离心后去血清以测定相关指标;取肾、睾丸、附睾、前列腺、精囊、脑,称重并计算脏脑指数(脏脑指数=脏器重量/脑重量)。
指标监测与结果
(1)大鼠一般情况
经腺嘌呤混悬液灌胃一段时间后,大鼠逐渐出现肾阳虚的症状,饮水量减少、尿量增多、活动减少,随着灌胃时间延长,逐渐出现体重下降、反应迟钝、弓背蜷缩、畏寒、体毛稀疏、失去光泽等表现。正常组大鼠则在体重、进食及反应等方面未出现异常。治疗组经随着灌胃时间的延长,以上症状逐渐改善。
(2)杜仲雄花花粉对肾阳虚型大鼠体重及附属性腺组织的影响
杜仲雄花花粉对大鼠体重的影响:表1结果显示,与正常组相比,给予腺嘌呤一周后其他各组大鼠体重均明显下降,差异显著具有统计学意义(P<0.05),杜仲雄花花粉给药组与左卡尼汀组没有明显差异,说明杜仲雄花花粉与左卡尼汀对大鼠体重变化基本没有影响。
表1杜仲雄花花粉对大鼠体重的影响
注:与正常组相比:#P<0.05,##P<0.01;与模型组相比:*P<0.05,**P<0.01。
杜仲雄花花粉对大鼠肾、睾丸、附睾、前列腺、精囊脏脑指数的影响
表2结果显示,除正常组外,其他各组肾-脑指数均显著升高(P<0.01),睾丸、附睾、前列腺及精囊与脑的指数均明显降低(P<0.01或P<0.05),差异显著具有统计学意义。与模型组相比,杜仲雄花花粉组与左卡尼汀阳性组肾脑指数分别下降约9%和12%,其余各脏脑指数均有升高,杜仲雄花花粉组与左卡尼汀组的睾丸-脑指数及精囊-脑指数显著改善(P<0.05)。脏脑指数=脏器质量(g)/脑质量(g)。
表2给予杜仲雄花花粉30d对大鼠肾、睾丸、附睾、前列腺、精囊脏脑指数的影响
注:与正常组相比,#P<0.05,##P<0.01;与模型组相比,*P<0.05,**P<0.01
(3)生殖力检测
在开始给药后第21天按照雌雄1:1进行合笼,于合笼的第2天起,每天清晨8时观察雌鼠阴栓出现情况,观察到阴栓后雌雄分开,并作为受孕第0天,受孕第18天解剖孕鼠,观察并计算受孕率、活胎数、吸收胎数、着床腺数以及胎鼠数量。
表3结果显示,与正常组对比,模型组大鼠受孕率及胎鼠数量均显著降低,花粉组与阳性组雌鼠受孕率、总胎数、活胎数以及着床腺数均有提高,且花粉组活胎率更高。
表3杜仲雄花花粉对孕鼠胚胎发育的影响
(4)杜仲雄花花粉对精子计数与精子活动率的影响
剪取左侧附睾尾部组织,置提前预热至37℃(装有4mL PBS缓冲液)的EP管中,适当剪碎,振摇;37℃水浴中保温5min使精子自行游离至溶液中,制成悬液;吹打均匀后取100μL,PBS稀释5倍,取8μL精子悬液置载玻片上,在精子测定仪中进行精子计数并记录精子活动能力。
表4的结果显示,与正常组相比,模型组大鼠精子数量减少(P<0.01),精子活动率明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,花粉组与阳性组精子数量与精子活动率均显著升高并恢复或高于正常水平,且杜仲雄花花粉组效果更优。
表4杜仲雄花花粉对大鼠精子数量和精子活动率的影响
注:与正常组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
(5)各组动物血清中性激素水平检测比较分析
第30天给药后禁食不禁水12h,腹腔注射1%戊巴比妥钠进行麻醉,腹主动脉取血于真空采血管中,静置约4h,待血液凝固后3500转/分离心10分钟,取血清放置于-80℃冰箱保存,待检测。
表5的结果显示,与正常组比较,模型组中血清睾酮(T)水平降低,LH、GnRH、FSH、E2水平升高,差异显著具有统计学意义(P<0.01或P<0.05),FSH与E2含量亦有增高。给予杜仲雄花花粉治疗后血清睾酮(T)水平升高,LH、FSH、E2、GnRH水平较模型组降低,且花粉组与正常组无显著性差异;与模型组相比,阳性组仅LH水平显著降低(P<0.05),FSH、T水平有一定改善作用。综合比较,杜仲雄花花粉对血清中性激素水平的改善作用优于左卡尼汀。
表5杜仲雄花花粉对血清中性激素水平检测分析
注:与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01;与正常组比较,#P<0.1,##P<0.05
实施例2:组合物对精子数量、精子活力及提高雌鼠受孕率的影响
实验操作同实施例1。实验分组为正常组、模型组、杜仲雄花花粉(简称花粉)组、杜仲雄花组、辅酶Q10组、虾青素组、花粉+虾青素组,花粉+辅酶Q10组、花粉+虾青素+辅酶Q10组。各给药组的试药组成见表6。正常组:喂饲水;模型组:上午喂饲0.3%黄原胶溶液,4h后喂饲腺嘌呤混悬液150mg/kg;花粉组和其他各组:上午分别喂饲花粉/各组试药混悬液(给药剂量见表6),4h后喂饲腺嘌呤溶液150mg/kg,喂饲体积均为10mL/kg/次。以上各药均用0.3%黄原胶溶液配制,给药体积均为1mL/100g,每天1次,实验总持续时间均为30d,腺嘌呤给药时间为15d。杜仲雄花花粉相当于人用剂量的2倍。实验期间每7天称体重1次,记录体重并调整给药量。于开始给药后第21天按照雌雄1:1进行合笼,于合笼的第2天起,每天清晨8时观察雌鼠阴栓出现情况,观察到阴栓后雌雄分开,并作为受孕第0天,受孕第18天解剖孕鼠,观察并计算受孕率、活胎数、吸收胎数、着床腺数以及胎鼠数量。雄鼠于给药30d后,禁食不禁水12h,附睾抽取精液测定精子活力及并计数。
表6各给药组的试药组成和给药剂量
注:“份”指的是“重量份”。
表7不同组别对大鼠精子数量和精子活动率的影响
注:与正常组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
由表7结果可知,杜仲雄花花粉组改善精子数量及活力功效优于杜仲雄花组,提示杜仲雄花花粉活性更优。对比单用杜仲雄花花粉与单用虾青素或辅酶Q10,单用杜仲雄花花粉的效果亦优于单用虾青素或辅酶Q10,特别是单用虾青素并无改善精子数量及活力的效果。从含杜仲雄花花粉的各组合物来看,各组均可明显改善精子质量,提高精子数量及活力,且组合物组优于单用花粉组,显示具有增效作用,特别是三者的组合物,可实现各成分均在较低剂量下,展现出最佳的效果。
表8不同组别对孕鼠胚胎发育的影响
由表8结果可知,各给药组均可不同程度提高雌鼠的受孕率,尤以杜仲雄花花粉+辅酶Q10组及杜仲雄花花粉+虾青素+辅酶Q10组改善最为明显。从胎鼠数量看,含杜仲雄花花粉的组别总胎数明显高于不含花粉的组别及模型组,且含杜仲雄花花粉的组别其活胎比率也更高。对比单用花粉组,组合物组,特别是含花粉+辅酶Q10的组合物,活胎率及总胎数优于单用花粉组。虽然虾青素本身对于提高受孕率及总胎数效果不明显,但在组合物中加入一定量虾青素可起到意想不到的协同增效效果,使花粉的效果更为突出。
实施例3:不同比例组合物对精子数量、精子活力及提高雌鼠受孕率的影响
实验操作同实施例1。实验分组为给药组(不同比例的杜仲雄花花粉、虾青素、辅酶Q10的组合物组及花粉组)、正常组及模型组。各给药组的试药组成见表9。正常组:喂饲水;模型组:上午喂饲0.3%黄原胶溶液,4h后喂饲腺嘌呤混悬液150mg/kg;其他各给药组:上午喂饲各组试药混悬液(给药剂量均为350mg/kg/d),4h后喂饲腺嘌呤溶液150mg/kg,喂饲体积均为10mL/kg/次。以上各药均用0.3%黄原胶溶液配制,给药体积均为1mL/100g,每天1次,实验总持续时间均为30d,腺嘌呤给药时间为15d。实验期间每7天称体重1次,记录体重并调整给药量。于开始给药后第21天按照雌雄1:1进行合笼,于合笼的第2天起,每天清晨8时观察雌鼠阴栓出现情况,观察到阴栓后雌雄分开,并作为受孕第0天,受孕第18天解剖孕鼠,观察并计算受孕率、活胎数、吸收胎数、着床腺数以及胎鼠数量。雄鼠于给药30d后,禁食不禁水12h,附睾抽取精液测定精子活力及并计数。
表9各给药组的试药组成和给药剂量
注:“份”指的是“重量份”。
表10不同组别对大鼠精子数量和精子活动率的影响
注:与正常组比较,#P<0.05,##P<0.01;与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01
由表10结果可知,各给药组均可显著提升腺嘌呤造成的少弱精雄性大鼠的精子数量和活力,且各组合物组效果均优于单用杜仲雄花花粉组,均表现出较好的协同增效作用。
表11不同组别对孕鼠胚胎发育的影响
由表11结果可知,各给药组均可不同程度提高雌鼠的受孕率,且组合物组均明显优于单用杜仲雄花花粉组。从胎鼠数量看,亦呈现相同的趋势,组合物组优于受孕率的提升,其胎鼠数量明显提升,活胎率除组合物1组外也较单用杜仲雄花花粉高,分析原因可能是组合物中虾青素及辅酶Q10用量偏低有关,提示适当提升组合物中虾青素,特别辅酶Q10比例可以增强协同增效效果。
基于以上发明内容的描述,本领域技术人员能够全面地应用本发明,所有相同原理或类似的改动均应视为包括在本发明的范围之内。
Claims (10)
1.杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花在制备改善精子质量的食品或药品中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,所述改善精子质量包括:改善精子浓度、提升精子活力、降低精子畸形率、增加受精几率、改善血清中性激素水平中的一种或多种。
3.一种改善精子质量的组合物,其中,所述组合物包含杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花;优选包含杜仲雄花花粉。
4.根据权利要求3所述组合物,其特征在于,所述组合物进一步包含虾青素或辅酶Q10;优选包含辅酶Q10。
5.根据权利要求4所述组合物,其特征在于,
杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花:虾青素的重量份比为50∶0.1-400,优选为50∶1-200,更优选为50∶5-50;或者,
杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花:辅酶Q10的重量份比为:50∶0.1-100,优选为50∶0.5-80,更优选为50∶1-50。
6.根据权利要求3所述组合物,其特征在于,该组合物进一步包含虾青素和辅酶Q10。
7.根据权利要求6所述组合物,其特征在于,
杜仲雄花花粉和/或杜仲雄花:虾青素:辅酶Q10的重量份比为:50∶0.1-400∶0.1-100,优选为50∶0.5-200∶0.5-80,更优选为50∶0.5-50∶0.5-50,进一步优选为50∶0.8-30∶0.8-30。
8.根据权利要求3所述组合物,其特征在于,所述组合物制备成食品或药品。
9.根据权利要求8所述组合物,其特征在于,所述食品为保健食品、功能食品、营养配餐食品、药膳或特殊膳食食用食品。
10.根据权利要求8所述组合物,其特征在于,所述食品或药品为固体剂型或液体口服剂型。
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Legal Events
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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