CN117642431A - 抗c1s抗体和其用途 - Google Patents

Abstract

提供了与C1s结合并抑制C1s活性且调节补体激活的经典途径(CP)中的至少一种组分的活性的抗体和其抗原结合片段；以及使用抗C1s抗体和片段治疗补体介导的病症的方法。

Description

抗C1S抗体和其用途

相关申请交叉引用

本申请要求于2022年5月16日提交的美国临时申请第63/342,544号和于2021年7月13日提交的美国临时申请第63/221,131号的权益，所述美国临时申请中的每个美国临时申请通过引用整体并入本文。

序列表

本申请含有已经以ASCII格式电子提交的序列表，并且特此通过引用整体并入。创建于2022年6月28日的所述ASCII副本命名为SEQ_LIST_PIPL_1121-102PCT.txt并且大小为279,262字节。

技术领域

本公开涉及与C1s蛋白结合的抗体和抗原结合片段，以及使用与C1s蛋白结合的抗体和抗原结合片段治疗补体介导的病症。

背景技术

补体系统是形成先天性和适应性免疫系统的重要部分的受到严密调节的蛋白质网络。通过多个激活途径和广泛的补体介导的效应子功能，补体系统在炎症、病原体防御和损伤后恢复中发挥着关键作用。补体激活可以具有有益作用和有害作用两者。由补体激活介导的防御应答可以消除病原体。不适当的、不希望的、过度的或缺乏的补体激活与如某些自身免疫性疾病和炎性综合征等疾病病状相关联，这反映了补体在免疫调节与炎性组织损伤之间的复杂平衡作用。

补体系统可以通过在效应子阶段会聚的三种不同途径被激活，其中C3转化酶激活补体C3蛋白并且触发下游效应的级联。每种途径在产生C3转化酶的上游具有不同的触发物、引发剂分子和酶级联：(1)当抗体-抗原复合物与C1复合物结合并且C1被激活时，经典途径(CP)可以被触发；(2)替代性途径(AP)可以由对于宿主是外来的细胞表面成分触发；并且(3)当循环凝集素与微生物表面上的甘露糖残基结合时，甘露糖结合凝集素途径(LP)可以被触发。在每种途径的上游级联产生C3转化酶之后，补体蛋白C3和C5的随后切割：(1)产生过敏毒素C3a和C5a，所述过敏毒素将效应子免疫细胞吸引并激活到抗体结合/补体激活的位点；(2)介导吞噬作用和淋巴细胞激活的C3b调理素的沉积；以及(3)触发裂解途径以形成破坏细胞膜并导致细胞破坏的膜攻击复合物(MAC)。

CP不仅对抗体介导的对外来病原体的防御至关重要，而且已知或疑似参与触发对自身抗体与自身抗原接合的免疫应答，即，自身免疫性病症。CP由C1复合物的激活触发，所述复合物通常作为其子组分蛋白C1q、C1r和C1s的非活性复合物在血浆中循环。在识别并结合抗体-抗原复合物之后，C1复合物的子组分在酶级联中被依次激活，其中C1q与两个结合抗原的抗体的Fc区的结合激活C1r亚基，这进而通过将C1s酶原切割成具有通过链间二硫键连接的两种子组分(A链和B链)的活性C1s来激活C1s。经激活的C1s B链是丝氨酸蛋白酶，所述丝氨酸蛋白酶进而可以切割血清C4和C2以形成C3转化酶C4b2a。然后，在CP中形成C3转化酶触发所有三种补体途径共有的下游效应子过程。

C1s蛋白(补体组分1s)在CP功能中具有中枢性作用，其中非活性C1复合物中的C1s酶原必须被切割成可以切割并激活血清C4的活性双亚基(双链)C1s，以便下游效应子级联继续进行。例如，在人类患者中，C1s蛋白的缺乏可能会引起严重的免疫复合物疾病，因为在没有功能性C1、C2或C4以及随后正常水平的C3b的情况下，免疫复合物沉积物不能被有效清除。已知或疑似一些自身免疫性病症和/或炎性病症涉及通过与自身抗原结合的自身抗体(尤其是补体固定自身抗体)的复合物自发激活CP。已知补体介导的病症包含阵发性夜间血红蛋白尿症(PNH)、非典型溶血性尿毒症综合征(非典型HUS)、遗传性血管性水肿(HAE)、年龄相关性黄斑变性(AMD)和自身免疫性溶血性贫血如冷凝集素病(CAD)。补体系统(具体地是CP)疑似在某些自身免疫性病症中起作用，如免疫性血小板减少性紫癜(ITP)，其是以血小板计数<150,000/μL的孤立性血小板减少症为特征的自身免疫性出血性病症，所述自身免疫性出血性病症疑似是由靶向自身血小板抗原的自身抗体的发展引起的。CP疑似也在视神经脊髓炎(NMO)中起作用，NMO是在中枢神经系统(特别是脊髓和视神经)具有炎性脱髓鞘病变的自身免疫性病症，所述自身免疫性病症被认为是由抗水通道蛋白-4(AQP4)自身抗体与星形胶质细胞结合引起的。治疗补体介导的病症的治疗方法包含如蛋白酶抑制剂等小分子调控因子，尽管已知一些已知疗法(如C1抑制剂C1 INH)发挥的作用超出了对CP的调控，包含对凝集素途径和激肽、凝血和纤维蛋白溶解系统的调节。正在探索使用针对CP途径的组分的抗体的治疗方法。

发明内容

本发明涉及与人补体组分1s(C1s)结合的新型抗体和抗原结合片段，以及制备和使用与C1s结合的抗体和抗原结合片段的方法。

本公开提供了抗C1s抗体、与C1s结合的抗C1s抗体片段、编码抗C1s抗体和抗C1s抗体片段的核酸以及制备和使用抗C1s抗体和抗C1s抗体片段的方法。本公开中的术语“抗C1s抗体”涵盖能够与C1s结合的抗C1s抗体和其抗原结合片段，具体地是与C1s特异性结合的抗C1s抗体和其抗原结合片段。如本文所公开的抗C1s抗体能够与酶原人C1s(天然C1s)结合。如本文所公开的抗C1s抗体能够与活性人C1s结合。如本文所公开的抗C1s抗体能够抑制C1s。如本文所公开的抗C1s抗体能够与酶原C1s结合并抑制C1s。如本文所公开的抗C1s抗体能够与活性C1s结合并抑制C1s。如本文所公开的抗C1s抗体是能够与人C1s特异性结合并抑制C1s的重组抗C1s抗体或其抗原结合片段。

本公开提供了用于体内、离体或体外治疗和诊断用途的抗C1s抗体。如本文所公开的抗C1s抗体可以用于治疗由C1s的功能介导的病症。如本文所公开的抗C1s抗体可以用于治疗补体介导的病症，具体地是由补体激活的经典途径(CP)介导的病症。如本文所公开的抗C1s抗体能够与C1s结合并抑制C1s，这对CP途径的活性具有作用，所述作用可以通过对C1s激活下游的CP的至少一种组分的活性的作用来测量，其中所述组分可以是与CP相关联的分子或生物过程。如本文所公开的抗C1s抗体能够抑制CP途径的活性。如本文所公开的抗C1s抗体可以用于治疗由CP的功能介导的病症。如本文所公开的抗C1s抗体可以用于靶向C1s，以在补体介导的自身免疫性病症和/或炎性病症中选择性抑制CP。如本文所公开的抗C1s抗体可以用于治疗补体介导的自身免疫性病症和/或炎性病症，包含但不限于免疫性血小板减少性紫癜(ITP)或视神经脊髓炎(NMO)。

在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体能够与酶原(天然)C1s结合并抑制C1s激活的作用。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体能够与活性C1s结合并抑制C1s激活的作用。本文所公开的抗C1s抗体能够抑制C1s激活对至少一种下游组分的一或多种作用。在某些实施例中，所述下游组分是C2的切割和/或C4的切割和/或C3转化酶的形成和/或血清补体诱导的抗体致敏细胞的裂解中的至少一者，并且抗C1s抗体与活性C1s的结合具有抑制C2的切割和/或C4的切割和/或C3转化酶的形成和/或血清诱导的抗体致敏细胞的裂解的作用。

在一方面，提供了能够与C1s结合并调节抗体-抗原复合物触发的CP激活的至少一种作用的抗C1s抗体。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体能够以剂量依赖性方式调节抗体-抗原复合物触发的CP激活的至少一种作用。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体能够以剂量依赖性方式抑制抗体-抗原复合物触发的CP激活的至少一种作用。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体能够以剂量依赖性方式抑制血清诱导的抗体致敏细胞的裂解。

在一方面，提供了能够具有调节抗体-抗原复合物触发的C4切割和/或沉积中涉及的至少一种组分的活性的作用的抗C1s抗体。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体能够抑制IgM触发的C4从血清中的沉积中涉及的至少一种组分的活性。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体能够以剂量依赖性方式抑制IgM触发的人C4从人血清中的沉积。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体能够以剂量依赖性方式调节IgM触发的食蟹猴C4从食蟹猴血清中的沉积中涉及的至少一种组分的活性。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体能够以剂量依赖性方式抑制IgM触发的食蟹猴C4从食蟹猴血清中的沉积。

在另一方面，提供了在CP内、在共有补体系统效应子的产生和活性的上游具有选择性作用的抗C1s抗体。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体对CP的选择性抑制阻止C4切割和由C4切割触发的下游效应。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体通过CP途径阻止C3转化酶形成。

在另一方面，提供了与C1s酶原和活性C1s蛋白结合的抗C1s抗体。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体以类似的亲和力与C1s酶原和活性C1s蛋白结合。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体以类似的高亲和力与C1s酶原和活性C1s蛋白特异性结合，其中KD值在低纳摩尔至皮摩尔范围内。

在另一方面，提供了示出了与至少一种非人C1s的交叉反应性的抗C1s抗体。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体可以能够与人C1s和大鼠C1s结合。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体可以能够与人C1s和食蟹猴C1s结合。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体可以能够与人C1s、大鼠C1s和食蟹猴C1s结合。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体未示出与小鼠C1s的可检测的结合。

在另一方面，提供了与在位于N末端重链(NHC)中从残基Y272至R422(M151)的151个氨基酸区内的C1s的内部区域的酶原C1s和活性C1s上可接近的表位的抗C1s抗体，其中关键残基包含R316、K336和人C1s(SEQ ID NO:99)的亚区G390至R422。

如本文所提供的抗C1s抗体是重组表达的并且是重组抗体。如本文所提供的抗C1s抗体可以进一步是以下中的一或多种：人源化抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段、单链可变片段(scFv)、适配体、单结构域抗体(VHH、纳米抗体、骆驼抗体)或任何其它C1s结合片段或变体。具体地，此处所公开的抗C1s抗体是人源化抗体。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体可以包括框架，在所述框架中氨基酸已经被取代到现有抗体框架中，具体地以影响如抗原结合能力等性质。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体可以包括来自来源(亲本)抗体的互补决定区(CDR)，所述CDR已经移植(融合)到来自不同类型(类别)的抗体和/或来自与所述亲本抗体不同的生物体的框架(具体地受体人框架)中。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体可以包括框架，在所述框架中氨基酸已经在所述CDR之外的区域中被取代、突变或替代，以影响如抗原结合或抗体结构等性质，例如，在所述CDR周围的可变区框架中和/或在恒定区(具体地Fc区)中。在某些实施例中，所述CDR中的一或多个CDR已经被取代、突变或替代。在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体可以是人源化抗C1s抗体变体。

在某些实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括至少一种具有如在表1(“抗C1s抗体的可变区”)或序列表中所示的氨基酸序列、或与如在表1或序列表中所示的氨基酸序列基本上相同的序列(例如，至少约85％、90％、92％、95％、97％或98％、99％相同的序列)的多肽。本文所公开的抗C1s抗体可以包括至少一种具有选自以下的氨基酸序列、或与至少一种具有选自以下的氨基酸序列的多肽基本上相同的序列(例如，至少约85％、90％、92％、95％、97％或98％、99％相同的序列)的多肽：SEQ ID NO:1；SEQ ID NO:2；SEQ ID NO:3；SEQID NO:4；SEQ ID NO:6；SEQ ID NO:7；SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:9；SEQ ID NO:11；SEQ IDNO:12；SEQ ID NO:13；SEQ ID NO:14；SEQ ID NO:16；SEQ ID NO:17；SEQ ID NO:18；SEQ IDNO:19；SEQ ID NO:21；SEQ ID NO:22；SEQ ID NO:23；SEQ ID NO:24；SEQ ID NO:26；SEQ IDNO:27；SEQ ID NO:28；SEQ ID NO:29；SEQ ID NO:31；SEQ ID NO:32；SEQ ID NO:33；SEQ IDNO:34；SEQ ID NO:36；SEQ ID NO:37；SEQ ID NO:38；SEQ ID NO:39；SEQ ID NO:41；SEQ IDNO:42；SEQ ID NO:43；SEQ ID NO:44；SEQ ID NO:46；SEQ ID NO:47；SEQ ID NO:48；SEQ IDNO:49；SEQ ID NO:51；SEQ ID NO:52；SEQ ID NO:53；SEQ ID NO:54；SEQ ID NO:56；SEQ IDNO:57；SEQ ID NO:58；SEQ ID NO:59；SEQ ID NO:61；SEQ ID NO:62；SEQ ID NO:63；SEQ IDNO:64；SEQ ID NO:66；SEQ ID NO:67；SEQ ID NO:68；SEQ ID NO:69；SEQ ID NO:71；SEQ IDNO:73；SEQ ID NO:75；SEQ ID NO:77；SEQ ID NO:79；SEQ ID NO:81；SEQ ID NO:83；SEQ IDNO:85；SEQ ID NO:87；SEQ ID NO:89；SEQ ID NO:91；SEQ ID NO:93；SEQ ID NO:95；SEQ IDNO:97；SEQ ID NO:129；SEQ ID NO:130；SEQ ID NO:131；SEQ ID NO:132；SEQ ID NO:133；SEQ ID NO:134；SEQ ID NO:135；SEQ ID NO:136；SEQ ID NO:137；SEQ ID NO:138；SEQ IDNO:139；或SEQ ID NO:140。

在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：重链可变区(VH)多肽，所述VH多肽具有在SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:1基本上相同的序列；以及轻链可变区(VL)多肽，所述VL多肽具有在SEQ ID NO:6中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:6基本上相同的序列。在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：重链互补决定区1(HCCDR1)，所述HC CDR1具有SEQ ID NO:2中所示的氨基酸序列；重链互补决定区2(HC CDR2)，所述HC CDR2具有SEQ ID NO:3中所示的氨基酸序列；重链互补决定区3(HC CDR3)，所述HCCDR3具有SEQ ID NO:4中所示的氨基酸序列；轻链互补决定区1(LC CDR1)，所述LC CDR1具有SEQ ID NO:7中所示的氨基酸序列；轻链互补决定区2(LC CDR2)，所述LC CDR2具有SEQID NO:8中所示的氨基酸序列；以及轻链互补决定区3(LC CDR3)，所述LC CDR3具有SEQ IDNO:9中所示的氨基酸序列；或在所述CDR区中包括1个、2个、3个、4个、5个或6个氨基酸取代的所述抗体的变体。在一个非限制性实施例中，本文所公开的抗C1s抗体是本文中鉴定为2-7的抗体，所述抗体包括：HC多肽，所述HC多肽具有SEQ ID NO:71中所示的氨基酸序列；以及LC多肽，所述LC多肽具有SEQ ID NO:73中所示的氨基酸序列。

在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：VH多肽，所述VH多肽具有SEQ IDNO:11中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:11基本上相同的序列；以及VL多肽，所述VL多肽具有SEQ ID NO:16中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:16基本上相同的序列。在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：HC CDR1，所述HC CDR1具有SEQ ID NO:12中所示的氨基酸序列；HC CDR2，所述HC CDR2具有SEQ ID NO:13中所示的氨基酸序列；HC CDR3，所述HCCDR3具有SEQ ID NO:14中所示的氨基酸序列；LC CDR1，所述LC CDR1具有SEQ ID NO:17中所示的氨基酸序列；LC CDR2，所述LC CDR2具有SEQ ID NO:18中所示的氨基酸序列；以及LCCDR3，所述LC CDR3具有SEQ ID NO:19中所示的氨基酸序列，或在所述CDR区中包括1个、2个、3个、4个、5个或6个氨基酸取代的所述抗体的变体。在一个非限制性实施例中，本文所公开的抗C1s抗体是本文中鉴定为2-8的抗体，所述抗体包括：HC多肽，所述HC多肽具有SEQ IDNO:75中所示的氨基酸序列；以及LC多肽，所述LC多肽具有SEQ ID NO:77中所示的氨基酸序列。

在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：VH多肽，所述VH多肽具有SEQ IDNO:21中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:21基本上相同的序列；以及VL多肽，所述VL多肽具有SEQ ID NO:26中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:26基本上相同的序列。在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：HC CDR1，所述HC CDR1具有SEQ ID NO:22中所示的氨基酸序列；HC CDR2，所述HC CDR2具有SEQ ID NO:23中所示的氨基酸序列；HC CDR3，所述HCCDR3具有SEQ ID NO:24中所示的氨基酸序列；LC CDR1，所述LC CDR1具有SEQ ID NO:27中所示的氨基酸序列；LC CDR2，所述LC CDR2具有SEQ ID NO:28中所示的氨基酸序列；以及LCCDR3，所述LC CDR3具有SEQ ID NO:29中所示的氨基酸序列，或在所述CDR区中包括1个、2个、3个、4个、5个或6个氨基酸取代的所述抗体的变体。在一个非限制性实施例中，本文所公开的抗C1s抗体是本文中鉴定为hz2-7(H1L2)的抗体，所述抗体包括：HC多肽，所述HC多肽具有SEQ ID NO:79中所示的氨基酸序列；以及LC多肽，所述LC多肽具有SEQ ID NO:81中所示的氨基酸序列。

在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：VH多肽，所述VH多肽具有SEQ IDNO:31中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:31基本上相同的序列；以及VL多肽，所述VL多肽具有SEQ ID NO:36中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:36基本上相同的序列。在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：HC CDR1，所述HC CDR1具有SEQ ID NO:32中所示的氨基酸序列；HC CDR2，所述HC CDR2具有SEQ ID NO:33中所示的氨基酸序列；HC CDR3，所述HCCDR3具有SEQ ID NO:34中所示的氨基酸序列；LC CDR1，所述LC CDR1具有SEQ ID NO:37中所示的氨基酸序列；LC CDR2，所述LC CDR2具有SEQ ID NO:38中所示的氨基酸序列；以及LCCDR3，所述LC CDR3具有SEQ ID NO:39中所示的氨基酸序列，或在所述CDR区中包括1个、2个、3个、4个、5个或6个氨基酸取代的所述抗体的变体。在一个非限制性实施例中，本文所公开的抗C1s抗体是本文中鉴定为hz2-7(H1L2 G131A)的抗体，所述抗体包括：HC多肽，所述HC多肽具有SEQ ID NO:83中所示的氨基酸序列；以及LC多肽，所述LC多肽具有SEQ ID NO:85中所示的氨基酸序列。

在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：HC可变区多肽，所述HC可变区多肽具有SEQ ID NO:41中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:41基本上相同的序列；以及LC可变区多肽，所述LC可变区多肽具有SEQ ID NO:46中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:46基本上相同的序列。在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：HC CDR1，所述HC CDR1具有SEQ ID NO:42中所示的氨基酸序列；HC CDR2，所述HC CDR2具有SEQ ID NO:43中所示的氨基酸序列；HC CDR3，所述HC CDR3具有SEQ ID NO:44中所示的氨基酸序列；LC CDR1，所述LC CDR1具有SEQ ID NO:47中所示的氨基酸序列；LC CDR2，所述LC CDR2具有SEQ ID NO:48中所示的氨基酸序列；以及LC CDR3，所述LC CDR3具有SEQ ID NO:49中所示的氨基酸序列，或在所述CDR区中包括1个、2个、3个、4个、5个或6个氨基酸取代的所述抗体的变体。在一个非限制性实施例中，本文所公开的抗C1s抗体是本文中鉴定为hz2-8(H1L2)的抗体，所述抗体包括：HC多肽，所述HC多肽具有SEQ ID NO:87中所示的氨基酸序列；以及LC多肽，所述LC多肽具有SEQ ID NO:89中所示的氨基酸序列。

在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：VH多肽，所述VH多肽具有SEQ IDNO:51中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:51基本上相同的序列；以及VL多肽，所述VL多肽具有SEQ ID NO:56中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:56基本上相同的序列。在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：HC CDR1，所述HC CDR1具有SEQ ID NO:52中所示的氨基酸序列；HC CDR2，所述HC CDR2具有SEQ ID NO:53中所示的氨基酸序列；HC CDR3，所述HCCDR3具有SEQ ID NO:54中所示的氨基酸序列；LC CDR1，所述LC CDR1具有SEQ ID NO:57中所示的氨基酸序列；LC CDR2，所述LC CDR2具有SEQ ID NO:58中所示的氨基酸序列；以及LCCDR3，所述LC CDR3具有SEQ ID NO:59中所示的氨基酸序列，或在所述CDR区中包括1个、2个、3个、4个、5个或6个氨基酸取代的所述抗体的变体。在一个非限制性实施例中，本文所公开的抗C1s抗体是本文中鉴定为hz2-8(H1L2 G80A/T82A)的抗体，所述抗体包括：HC多肽，所述HC多肽具有SEQ ID NO:91中所示的氨基酸序列；以及LC多肽，所述LC多肽具有SEQ IDNO:93中所示的氨基酸序列。

在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：VH多肽，所述VH多肽具有SEQ IDNO:61中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:61基本上相同的序列；以及VL多肽，所述VL多肽具有SEQ ID NO:66中所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:66基本上相同的序列。在一个实施例中，本文所公开的抗C1s抗体包括：HC CDR1，所述HC CDR1具有SEQ ID NO:62中所示的氨基酸序列；HC CDR2，所述HC CDR2具有SEQ ID NO:63中所示的氨基酸序列；HC CDR3，所述HCCDR3具有SEQ ID NO:64中所示的氨基酸序列；LC CDR1，所述LC CDR1具有SEQ ID NO:67中所示的氨基酸序列；LC CDR2，所述LC CDR2具有SEQ ID NO:68中所示的氨基酸序列；以及LCCDR3，所述LC CDR3具有SEQ ID NO:69中所示的氨基酸序列，或在所述CDR区中包括1个、2个、3个、4个、5个或6个氨基酸取代的所述抗体的变体。在一个非限制性实施例中，本文所公开的抗C1s抗体是本文中鉴定为hz2-8(H1L2 G80A)的抗体，所述抗体包括：HC多肽，所述HC多肽具有SEQ ID NO:95中所示的氨基酸序列；以及LC多肽，所述LC多肽具有SEQ ID NO:97中所示的氨基酸序列。

在另一方面，提供了本文所公开的抗C1s抗体的CDR共有序列。表1.b.公开了抗C1s抗体CDR共有序列的非限制性示范性实施例。在一个实施例中，提供了一种抗体，其中所述VH包括：HC CDR 1，所述HC CDR 1具有SEQ ID NO:129中所示的氨基酸序列；HC CDR2，所述HC CDR2具有SEQ ID NO:130中所示的氨基酸序列；以及HC CDR3，所述HC CDR3具有SEQ IDNO:131中所示的氨基酸序列，并且所述VL包括：LC CDR1，所述LC CDR1具有SEQ ID NO:132中所示的氨基酸序列；LC CDR2，所述LC CDR2具有SEQ ID NO:133中所示的氨基酸序列；以及LC CDR3，所述LC CDR3具有SEQ ID NO:134中所示的氨基酸序列。在另一个实施例中，提供了一种抗体，其中所述VH包括：HC CDR1，所述HC CDR1具有SEQ ID NO:135中所示的氨基酸序列；HC CDR2，所述HC CDR2具有SEQ ID NO:136中所示的氨基酸序列；以及HC CDR3，所述HC CDR3具有SEQ ID NO:137中所示的氨基酸序列，并且所述VL包括：LC CDR1，所述LCCDR1具有SEQ ID NO:138中所示的氨基酸序列；LC CDR2，所述LC CDR2具有SEQ ID NO:139中所示的氨基酸序列；以及LC CDR3，所述LC CDR3具有SEQ ID NO:140中所示的氨基酸序列。

在另一方面，提供了抗C1s抗体(包含如本文所公开的变体和片段)，所述抗C1s抗体可以用于治疗由CP激活介导的病症，包含但不限于由抗体-抗原复合物触发的CP激活介导的病症，并且具体地是与通过与自身抗原结合的自身抗体进行的CP激活相关联或以所述CP激活为特征的病症。提供了使用本文所公开的抗C1s抗体用于治疗用途的方法和组合物，所述治疗用途包含但不限于治疗由CP激活介导的病症，具体地是以通过与自身抗原结合的自身抗体进行的CP激活为特征的病症。提供了使用如本文所公开的抗C1s抗体用于治疗用途的方法和组合物，所述治疗用途包含治疗ITP和/或NMO。在某些实施例中，提供了包括本文所公开的抗C1s抗体和合适的载剂和/或赋形剂的药物组合物。

在另一方面，提供了用于治疗补体介导的病症的方法，此类方法包括向有需要的受试者施用有效量的本文所公开的抗C1s抗体。根据此方面，用于治疗补体介导的病症的方法包括施用有效量的本文所公开的抗C1s抗体，以具有调节或抑制一或多种与抗体-抗原复合物触发的CP激活相关联的生物效应的作用。根据此方面，抗C1s抗体的有效量是足以引起期望的调节或抑制水平的抗体的量。在某些实施例中，方法包括向受试者施用有效量的抗C1s抗体，其导致调节一或多种与通过与自身抗原结合的自身抗体进行的CP激活相关联的生物效应，包含但不限于减少由抗血小板抗体触发的血小板裂解和/或抗体介导的血小板去除。

在另一方面，提供了用于治疗其中涉及不希望的、异常的、不适当的或过度的CP激活的疾病或疾病状态的方法，此类方法包括向有需要的受试者施用有效量的本文所公开的抗C1s抗体。

在另一方面，提供了用于诊断或筛选受试者的补体介导的病症的方法。用于诊断或筛选补体介导的病症的方法可以在体内、离体或体外实践。在某些实施例中，方法包括向已知或疑似患有补体介导的自身免疫性病症的受试者施用抗C1s抗体，以及测量一或多种与补体介导的自身免疫性病症相关联的生物效应或症状。在某些实施例中，离体或体外方法包括向取自受试者的样品施用抗C1s抗体，以及测量一或多种与补体介导的自身免疫性病症相关的生物效应或症状。

在另一方面，提供了一或多个分离的核酸分子，所述一或多个分离的核酸分子编码至少一种本文所公开的抗C1s抗体的至少一部分。在某些实施例中，编码本文所公开的抗C1s抗体中的至少一种抗C1s抗体的至少一部分的分离的核酸分子包括本文表2中所示的核苷酸序列或与表2中所示的核苷酸序列基本上相同的序列(例如，至少约85％、90％、92％、95％、97％或98％、99％相同的序列)。在某些实施例中，编码本文所公开的抗C1s抗体的重链(HC)序列中的至少一个HC序列的分离的核酸分子可以包括选自以下中的至少一者的核苷酸序列：SEQ ID NO:5或与SEQ ID NO:5基本上相同的序列；SEQ ID NO:15或与SEQ IDNO:15基本上相同的序列；SEQ ID NO:25或与SEQ ID NO:25基本上相同的序列；SEQ ID NO:35或与SEQ ID NO:35基本上相同的序列；SEQ ID NO:45或与SEQ ID NO:45基本上相同的序列；SEQ ID NO:55或与SEQ ID NO:55基本上相同的序列；SEQ ID NO:65或与SEQ ID NO:65基本上相同的序列；SEQ ID NO:72或与SEQ ID NO:72基本上相同的序列；SEQ ID NO:76或与SEQ ID NO:76基本上相同的序列；SEQ ID NO:80或与SEQ ID NO:80基本上相同的序列；SEQ ID NO:84或与SEQ ID NO:84基本上相同的序列；SEQ ID NO:88或与SEQ ID NO:88基本上相同的序列；SEQ ID NO:92或与SEQ ID NO:92基本上相同的序列；或SEQ ID NO:96或与SEQ ID NO:96基本上相同的序列。

在某些实施例中，编码本文所公开的抗C1s抗体或其抗原结合片段的轻链(LC)序列中的至少一个LC序列的分离的核酸分子可以包括选自以下中的至少一者的核苷酸序列：SEQ ID NO:10或与SEQ ID NO:10基本上相同的序列；SEQ ID NO:20或与SEQ ID NO:20基本上相同的序列；或SEQ ID NO:30或与SEQ ID NO:30基本上相同的序列；SEQ ID NO:40或与SEQ ID NO:40基本上相同的序列；SEQ ID NO:50或与SEQ ID NO:50基本上相同的序列；SEQID NO:60或与SEQ ID NO:60基本上相同的序列；SEQ IDNO:70或与SEQ ID NO:70基本上相同的序列；SEQ ID NO:74或与SEQ ID NO:74基本上相同的序列；SEQ ID NO:78或与SEQ IDNO:78基本上相同的序列；SEQ ID NO:82或与SEQ ID NO:82基本上相同的序列；SEQ ID NO:86或与SEQ ID NO:86基本上相同的序列；SEQ ID NO:90或与SEQ ID NO:90基本上相同的序列；SEQ ID NO:94或与SEQ ID NO:94基本上相同的序列；或SEQ ID NO:98或与SEQ ID NO:98基本上相同的序列。

在另一方面，提供了一种载体，所述载体包括一或多个核酸分子，所述一或多个核酸分子编码本文所公开的抗C1s抗体的至少一个氨基酸序列。在某些实施例中，提供了一种载体，所述载体包括一或多个核酸分子，所述一或多个核酸分子编码本文所公开的抗C1s抗体的重链(HC)或轻链(LC)的序列中的至少一个序列。

在另一方面，提供了至少一种宿主细胞，所述至少一种宿主细胞含有载体，所述载体包括一或多个核酸分子，所述一或多个核酸分子编码本文所公开的抗C1s抗体的氨基酸序列。在某些实施例中，宿主细胞被载体瞬时转染，所述载体包括一或多个核酸分子，所述一或多个核酸分子编码本文所公开的抗C1s抗体或其抗原结合片段的氨基酸序列，其中所述宿主细胞能够支持载体表达和由所述载体编码的抗C1s抗体或其抗原结合片段的重组产生。

附图说明

图1示出了CP和抗C1s抗体的建议作用的示意图，其中Ag指示抗原，IgG和IgM指示可以与Ag结合的抗体类型，C1指示C1复合物，其中C1q、C1r和C1s指示C1复合物的子组分蛋白，抗C1s指示与C1s结合的抗C1s抗体，标记C2a、C2b、C3、C3a、C3b、C4a、C4b和C5指示在级联中的步骤的示意图中排列的CP级联的组分，并且MAC指示膜攻击复合物。

图2A-2D示出了抗C1s抗体在功能性测定中抑制IgM诱导的C4从血清中的沉积的能力的结果。图2A示出了在所指示的抗体浓度范围内，抗C1s抗体2-7、抗C1s抗体2-8和来自非功能性克隆3-30的抗体对IgM诱导的人C4从人血清(NHS)中的沉积的作用。图2B示出了在所指示的抗体浓度范围内，抗C1s抗体2-7和抗C1s抗体2-8对IgM诱导的食蟹猴C4从食蟹猴血清(CMS)中的沉积的作用。在图2A-2B中，符号如下使用：空心圆表示使用抗C1s抗体2-7的结果；空心三角形表示使用抗C1s抗体2-8的结果；空心正方形表示使用抗C1s抗体3-30的结果。图2C示出了在所指示的抗体浓度范围内，人源化抗C1s抗体hz2-7(H1L2)、人源化抗C1s抗体hz2-8(H1L2)、人源化抗C1s抗体变体hz2-7(H1L2 G131A)、人源化抗C1s抗体变体hz2-8(H1L2 G80A)和人源化抗C1s抗体变体hz2-8(H1L2 G80A/T82A)对IgM诱导的人C4从人血清(NHS)中的沉积的作用。图2D示出了在所指示的抗体浓度范围内，人源化抗C1s抗体hz2-7(H1L2)、人源化抗C1s抗体hz2-8(H1L2)、人源化抗C1s抗体变体hz2-7(H1L2 G131A)、人源化抗C1s抗体变体hz2-8(H1L2 G80A)和人源化抗C1s抗体变体hz2-8(H1L2 G80A/T82A)对IgM诱导的食蟹猴C4从食蟹猴血清(CMS)中的沉积的作用。在图2C-2D中，符号如下使用：空心圆表示使用抗C1s抗体hz2-7(H1L2)的结果；黑色实心圆表示使用抗C1s抗体hz2-7(H1L2G131A)的结果；空心三角形表示使用抗C1s抗体hz2-8(H1L2)的结果；黑色实心三角形表示使用抗C1s抗体hz2-8(H1L2 G80A)的结果；并且具有对角线的三角形表示使用抗C1s抗体hz2-8(H1L2 G80A/T82A)的结果。

图3A-3V示出了抗C1s抗体的结合亲和力和交叉反应性的测定结果。图3A-3D示出了使用生物层干涉测量技术(Bio-Layer Interferometry technology)测量抗C1s抗体亲和力以及通过在所指示的时间内将抗体与所指示浓度的活性人C1s蛋白组合来使用AHC生物传感器用RED96e系统测定活性人C1s蛋白的结合动力学的结果，其中图3A示出了抗C1s抗体2-7与活性人C1s结合的结果，图3B示出了抗C1s抗体2-8与活性人C1s结合的结果，图3C示出了人源化抗C1s抗体hz2-7(H1L2)与活性人C1s结合，并且图3D示出了人源化抗C1s变体hz2-8(H1L2 G80A/T82A)与活性人C1s结合。图3E是示出了针对抗体和靶标的每种所指示组合计算的KD、k_on、k_off和R²的值的汇总表。图3F-3G示出了使用ELISA测量抗C1s抗体与活性和酶原形式的C1s结合的结果，其中图3F示出了所指示浓度的2-7、2-8、hz2-7(H1L2)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)以及作为对照的人IgG1与活性人C1s结合的结果，并且图3G示出了所指示浓度的2-7、2-8、hz2-7(H1L2)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)以及作为对照的人IgG1与人C1s酶原结合的结果。图3H-3Q示出了使用生物层干涉测量技术测量抗C1s抗体亲和力以及测定来自人(HuC1s，图3H-3K)、大鼠(RaC1s，图3L-3M)和食蟹猴(CyC1s，图3N-3Q)来源的重组C1s的结合动力学的结果，其中图3H示出了2-7与人C1s(HuC1s)的结合，图3I示出了2-8与HuC1s的结合，图3J示出了hz2-7(H1L2)与HuC1s的结合，图3K示出了hz2-8(H1L2G80A/T82A)与HuC1s的结合，图3L示出了2-8与RaC1s的结合，图3M示出了hz2-8(H1L2 G80A/T82A)与RaC1s的结合，图3N示出了2-7与CyC1s的结合，图3O示出了2-8与CyC1s的结合，图3P示出了hz2-7(H1L2)与CyC1s的结合，并且图3Q示出了hz2-8(H1L2 G80A/T82A)与CyC1s的结合。图3R是示出了针对抗体和靶标的每种所指示组合计算的KD、k_on、k_off和R²的值的汇总表。图3S-3V示出了使用ELISA进行的抗C1s抗体交叉反应性测量的结果，其中这些图示出了所指示浓度的2-7、2-8、hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2 G80A/T82A)和IgG(对照)与人C1s(HuC1s，图3S)、小鼠C1s(MoC1s，图3T)、大鼠C1s(RatC1s，图3U)和食蟹猴C1s(CyC1s，图3V)的结合。在图3F-3G和3S-3V中，符号如下使用：空心圆表示使用抗C1s抗体2-7的结果；空心三角形表示使用抗C1s抗体2-8的结果；空心正方形表示使用小鼠IgG的结果；黑色实心圆表示使用抗C1s抗体hz2-7(H1L2)的结果；黑色实心三角形表示使用抗C1s抗体hz2-8(H1L2 G80A/T82A)的结果；并且黑色实心正方形表示使用人IgG1的结果。

图4A-4D示出了使用ELISA测量抗C1s抗体与全长和不同截短形式的重组C1s结合的结果。图4A示出了2-7、2-8、hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2)和IgG对照(小鼠IgG，人IgG1)与全长人C1s(HuC1s)结合。图4B示出了2-7、2-8、hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2)和IgG对照(小鼠IgG，人IgG1)与全长小鼠C1s(MoC1s)结合。图4C示出了2-7、2-8、hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2)和IgG对照(小鼠IgG，人IgG1)与截短的人C1s NHC(HuC1s(NHC))结合。图4D示出了2-7、2-8、hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2)和IgG对照(小鼠IgG，人IgG1)与截短的人C1s M151(HuC1s(M151))结合。在图4A-4D中，符号如下使用：空心圆表示使用抗C1s抗体2-7的结果；空心三角形表示使用抗C1s抗体2-8的结果；空心正方形表示使用小鼠IgG的结果；黑色实心圆表示使用抗C1s抗体hz2-7(H1L2)的结果；黑色实心三角形表示使用抗C1s抗体hz2-8(H1L2)的结果；并且黑色实心正方形表示使用人IgG1的结果。

图5A-5B示出了与全长和截短形式(包含缺失突变体)的C1s结合以及其示意性比较。图5A示出了使用蛋白质印迹测量的代表性抗C1s抗体2-8与全长和不同截短形式的C1s的结合的图像。在非还原(左印迹)和还原(右印迹)条件下，在SDS-PAGE上解析泳道1中的200ng全长人C1s(HuC1s)、泳道2中的200ng全长小鼠C1s(MoC1s)、泳道3中的200ng截短人C1s M151(HuC1s(M151))以及泳道4中的200ng截短人C1s NHC(HuC1s(NHC))，随后转移到硝酸纤维素膜(印迹)。将封闭的印记与抗体2-8一起温育，并且用经HRP标记的二级抗体显影。在不使用还原剂的情况下运行的凝胶的印迹(左)中，泳道1示出了抗体2-8与全长人C1s(HuC1s，上带)和自动切割的C1s重链(下带)结合，泳道2示出了抗体2-8与全长小鼠C1s(MoC1s)不结合(没有可检测的抗体结合)，泳道3示出了抗体2-8与截短的人C1s M151(HuC1s(M151))的多种同种型结合，并且泳道4示出了抗体2-8与截短的人C1s NHC(HuC1s(NHC))结合。在使用还原剂的情况下运行的凝胶的印迹(右)上，泳道1示出了低水平的抗体2-8与来自全长人C1s(HuC1s)的自动切割的C1s重链结合，泳道2示出了抗体2-8与全长小鼠C1s(MoC1s)不结合(没有可检测的结合)，泳道3示出了抗体2-8与截短的人C1s M151(HuC1s(M151))结合，并且泳道4示出了抗体2-8与截短的人C1s NHC(HuC1s(NHC))结合。图5B示出了全长人C1s、HuC1s(例如，如SEQ ID NO:99中所例示者)、指定为HuC1s(M151)或M151的人C1s缺失突变体1(M151)(例如，如SEQ ID NO:107中所例示者)、指定为HuC1s(NHC)或NHC的人缺失突变体2(NHC)(例如，如SEQ ID NO:109中所例示者)以及指定为人C1s(NHCΔ33)或NHCΔ33的人C1s缺失突变体3(NHCΔ33)(例如，如SEQ ID NO:111中所例示者)的示意性比较和比对。图5B还示出了实例6中引入到HuC1s、M151、NHC和NHCΔ33中的点突变的位置。

图6A-6U示出了使用ELISA进行的hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2 G80A)、hz2-8(H1L2G80A/T82A)和人IgG1(对照)与NHCΔ33和人C1s的点突变体M1-M20的结合测量的结果，如下所示：图6A示出了与NHCΔ33结合；图6B示出了与M1(M277I)结合；图6C示出了与M2(M277I和K331Q)结合；图6D示出了与M3(M277I、P278S和N329D)结合；图6E示出了与M4(P280A和E282K)结合；图6F示出了与M5(K336G)结合；图6G示出了与M6(P280A、E282K和K336G)结合；图6H示出了与M7(D343Y和E351A)结合；图6I示出了与M8(E351A)结合；图6J示出了与M9(K336G、D343Y和E351A)结合；图6K示出了与M10(D283I和P285A)结合；图6L示出了与M11(S349P)结合；图6M示出了与M12(G381E和G382E)结合；图6N示出了与M13(A292D)结合；图6O示出了与M14(R316H)结合；图6P示出了与M15(S360N)结合；图6Q示出了与M16(R368H)结合；图6R示出了与M17(N380H)结合。图6S示出了与M18(V288T)结合；图6T示出了与M19(Q303K)结合；并且图6U示出了与M20(A320S)结合。在图6A至6U中，如下所述来使用符号：空心圆表示使用抗C1s抗体hz2-7(H1L2)的结果；黑色实心三角形表示使用抗C1s抗体hz2-8(H1L2 G80A)的结果；具有对角线的三角形表示使用抗C1s抗体hz2-8(H1L2 G80A/T82A)的结果；并且空心正方形表示使用人IgG1(HuIgG1)的结果。

图7A-7B示出了抗C1s抗体抑制补体介导的抗体致敏绵羊红细胞(EA细胞)裂解的能力的结果。示出了抗C1s抗体hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2)、hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)以及同型对照人IgG1对正常人血清(NHS，图7A)或食蟹猴血清(CMS，图7B)诱导的EA细胞裂解的作用。符号如下使用：空心圆表示使用抗C1s抗体hz2-7(H1L2)的结果；空心三角形表示使用抗C1s抗体hz2-8(H1L2)的结果；黑色实心三角形表示使用抗C1s抗体hz2-8(H1L2 G80A)的结果；具有对角线的三角形表示使用抗C1s抗体hz2-8(H1L2 G80A/T82A)的结果；并且空心正方形表示使用人IgG1的结果。

具体实施方式

本发明涉及与C1s结合的新型抗体和其抗原结合片段，以及制备和使用所述新型抗体和其抗原结合片段的方法。

术语/定义

除非另外定义，否则结合本发明使用的科学和技术术语应当具有本领域的普通技术人员通常理解的含义。除非上下文另有明确规定，否则单数术语的使用(“一个或一种(a/an)”或“所述(the)”或单数形式的术语的其它使用)包含复数指代物，并且复数术语应包含单数。因此，例如，提及“抗体”包含“一或多种”抗体或“多种”此类抗体。本文所提及的所有出版物特此通过引用整体并入本文。

通常，本领域的技术人员已知的分子生物学、微生物学、细胞和组织培养、蛋白质和核苷酸化学以及重组DNA技术的术语和技术可以用于本文所公开的抗体、抗原结合片段、组合物和方法。本文所述的技术和程序通常根据本领域中熟知的常规方法并且如在各种一般和更具体的参考文献中所描述的那样执行，所述参考文献尤其是萨姆布鲁克(Sambrook)等人(1989)分子克隆：实验室手册(MOLECULAR CLONING:ALABORATORY MANUAL)(第2版,纽约冷泉港的冷泉港实验室出版社(Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold SpringHarbor,N.Y.))和奥苏贝尔(Ausubel)等人(1994)当代分子生物学实验指南(CURRENTPROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY),第I-III卷(纽约的约翰威利父子公司(John Wiley&Sons,N.Y.))。除非本文另外指明，否则根据制造商的说明书或如本领域通常实现的或如本文所述进行酶促反应和纯化技术。本文中使用常规术语描述了用于药物制备和调配以及受试者治疗的技术和方法。

“抗体”在最广泛的意义上是指通过一或多个免疫球蛋白可变区识别并结合抗原的多肽或多肽组合，其中免疫球蛋白可变区可以是天然存在的或非天然存在的，例如，作为工程化、嵌合化、人源化、优化、CDR移植或亲和力成熟的结果。

如本文所公开的“抗体”可以是完全(完整、全长)抗体、单链抗体或具有一或两条链的抗原结合片段，并且可以是天然存在的和非天然存在的。抗体包括穿插有框架区(FR)的至少足够的互补性决定区(CDR)，以供抗体识别并结合抗原。本文所公开的抗C1s抗体可以是但不限于以下中的至少一种：单克隆抗体、多克隆抗体、人源化抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段、单链可变片段(scFv)、适配体、单结构域抗体(VHH、纳米抗体、骆驼抗体)、重组抗体、具有与抗体连接的肽/其它部分和/或添加N-末端或C-末端的另外的氨基酸的经修饰的抗体、或其它C1s结合片段或变体。完全抗体、全长抗体、完整抗体、天然存在的抗体或等效术语应被理解为是指多肽，具体地指糖蛋白，所述多肽以其标准形式包括通过二硫键互连的至少两条重链(HC)和两条轻链(LC)。每条HC包含重链可变区(VH)和HC恒定区(CH)，并且每条轻链包含轻链可变区(VL)和LC恒定区(CL)。HC可变区VH和LC可变区VL包含与抗原相互作用的结合结构域。VH和VL区可以进一步细分为穿插有通常更保守的FR区的以高变区为特征的CDR区。每个VH和VL通常由按以下顺序从氨基末端至羧基末端排列的三个CDR和四个FR构成：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。应当理解，将氨基酸分配到每个结构域是根据本领域中已知的方法，具体地根据在以下文献中找到的定义进行的：尤其是具有免疫学意义的蛋白质序列(SEQUENCES OF PROTEINS OF IMMUNOLOGICAL INTEREST),卡巴特(Kabat)等人；马里兰州贝塞斯达的国立卫生研究院(National Institutes of Health,Bethesda,Md.)；第5版,NIH出版号91-3242(1991)；乔西亚(Chothia)等人,(1987)分子生物学杂志(JMol.Biol.)196:901-917或乔西亚等人,(1989)自然(Nature)342:878-883。抗体的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿主组织或因子的结合，包含免疫系统和经典补体系统的各种细胞。通常，抗体至少包括重链(HC)CDR1、CDR2和CDR3以及轻链(LC)CDR1、CDR2和CDR3序列，其中这些序列中的任一个序列可以是天然存在的或非天然存在的。抗体可以包括较少的CDR序列，只要抗体可以识别并结合抗原即可。可替代地，完全抗体可以是单链抗体，如抗原结合由一个可变结构域介导的仅重链同型。

本文所公开的抗C1s抗体可以是包括至少一个改变的CDR或框架序列的变体，其中CDR和/或框架序列可以通过使编码此框架序列的核酸分子突变来优化。变体可以由独立地源自不同来源的HC和LC部分构建。用于产生变体的技术包含但不限于保守氨基酸取代、计算机建模、单独地或组合地筛选候选多肽和密码子优化，并且应当理解，技术人员能够根据需要产生抗体变体。本文所公开的抗C1s抗体可以是片段。抗体的抗原结合功能可以通过如以下片段来进行：Fab片段；单价片段，所述单价片段由VL、VH、CL和CH1结构域组成；F(ab)₂片段；二价片段，所述二价片段包括通过二硫键在铰链区处连接的两个Fab片段；Fd片段，所述Fd片段由VH和CH1结构域组成；单链可变片段(scFv)，所述scFv由抗体的单臂的VL和VH结构域组成；单结构域抗体(dAb)片段，所述dAb片段由VH结构域组成；以及分离的CDR(VHH，纳米抗体)或适配体。抗原结合部分可以并入到单结构域抗体、大抗体、微型抗体、纳米抗体、胞内抗体、双功能抗体、三功能抗体、四功能抗体、v-NAR和双-scFv中(参见例如，霍林格(Hollinger)和哈德森(Hudson),2005,自然生物技术(Nature Biotechnology),23(9):1126-1136)。抗体的抗原结合部分可以移植到基于多肽的支架中以形成单抗体(参见例如，美国专利第6,703,199号，所述美国专利描述了纤连蛋白多肽单抗体)。

术语抗体涵盖可以在生物化学上进行区分的各种广泛类别的多肽。抗体的“类别”可以指其重链所具有的恒定结构域或恒定区的类型。本领域的技术人员应理解，存在五种主要类别的抗体，即，IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，并且这些抗体中的若干抗体可以进一步分为亚类(同型)，例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2，这些亚类中的每种亚类被良好表征并且已知赋予功能专门化。这些类别和同型中的每种类别和同型的经修饰的版本是容易辨别的并且在本公开的范围内。所有免疫球蛋白类别都在本公开的范围内。

术语“嵌合”抗体是指其中参与形成免疫反应性位点的重链(HC)和/或轻链(LC)的一部分源自特定来源或物种，而HC和/或LC的其余部分源自不同来源或物种的抗体。在某些实施例中，靶结合区或位点将来自非人来源(例如，小鼠或非人灵长类动物)，并且恒定区来自人来源。

如本文所使用的，短语“人源化抗体”是指包括抗体(免疫球蛋白)的部分的抗体(免疫球蛋白)或抗体变体，所述部分包括具有不同来源的氨基酸序列，其中至少一部分包括人来源的氨基酸序列。人源化抗体包括源自非人抗体，通常源自与所关注靶标结合的小鼠抗体的部分，其中来自非人抗体的部分可以是来自“亲本”非人抗体的整体可变区或可变区的一部分，如来自“亲本”非人抗体的一或多个CDR。人源化抗体可以包括一或多个来自连接到人来源的免疫球蛋白框架，具体地连接到人可变区框架的非人抗体的可变区。人源化抗体可以包括来自在框架中移植(融合)的亲本非人抗体的CDR，所述框架包括源自人免疫球蛋白框架，具体地受体人框架或人共有框架的可变区的部分。用于设计、制备和测试人源化抗体的技术和原理是已知的(琼斯·PT(Jones PT),迪尔·PH(Dear PH),富特·J(FooteJ),纽伯格·MS(Neuberger MS),温特·G.(Winter G.)用来自小鼠的互补性决定区替代人抗体中的互补性决定区(Replacing the complementarity-determining regions in ahuman antibody with those from a mouse.)自然1986,321(6069):522-5；阿尔马格罗·JC(Almagro JC),弗兰松·J(Fransson J.)抗体人源化(Humanization of antibodies).生物科学前沿(Front Biosci).2008,13:1619-33)。应当理解，可以在多个位置处对一或多个CDR序列和/或受体框架进行改变，以便根据期望用途开发具有改进的特征的人源化抗体，例如，对靶标具有高亲和力、对所选表位具有特异性、避免发生不希望的事件，如异构化或脱酰胺、低清除率、低毒性等。本文所公开的抗C1s抗体可以是人源化变体。

“结合”是指由于例如共价、静电、疏水和离子和/或氢键相互作用(包含如盐桥和水桥等相互作用)而产生的两个分子之间的直接缔合。“亲和力”是指分子(例如，抗体)的单个结合位点与其结合配偶体(例如，抗原)之间的非共价相互作用的总和的强度。除非另外指示，否则如本文所使用的结合亲和力是指反映结合对的成员(例如，抗体和抗原)之间的1:1相互作用的内在结合亲和力。亲和力可以通过本领域中已知的常用方法(包含本文所述的方法)来测量。可以将大约50％的最大结合(计算的EC₅₀)时所计算的浓度用作亲和力的估计值。分子X对其配偶体Y的亲和力通常可以由解离常数(Kd或KD，表示针对相互作用测量的k_off/k_on)表示。“特异性结合(Specific binding或specifically binds或bindsspecifically)”或类似术语是指高亲和力结合，具体地以在至少纳摩尔范围内的所测得亲和力(Kd、KD)进行的结合。本公开的抗C1s抗体与C1s蛋白特异性结合。

如用于指与经鉴定的氨基酸序列或核苷酸序列基本上相同的序列的“基本上相同”应被理解为与氨基酸序列或核苷酸序列至少约85％、90％、92％、95％、97％或98％、99％相同的序列，被测定为在比对两个序列并且引入空位(如果必要的话)以实现最大同一性百分比之后候选氨基酸或核酸序列中与经鉴定的参考序列中的残基相同的残基的百分比。用于比对的方法和计算机程序在本领域中是熟知的，例如可公开获得的计算机软件/程序如Clustal Omega(来自欧洲分子生物学实验室欧洲生物信息研究所(EMBL-EBI)，可在https://www.ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalo/获得)；当使用此些软件/程序时，优选地使用默认参数，例如，针对空位罚分和延伸罚分的默认参数。

“受试者”是哺乳动物，其中哺乳动物包含但不限于灵长类动物(例如，人和非人灵长类动物，如猴)、驯养动物(例如，牛、绵羊、猫、狗、猪、美洲驼和马)、兔以及啮齿动物(例如，小鼠和大鼠)。在某些实施例中，受试者是人。短语“向有需要的受试者”或“向有需要的患者”或“向需要治疗的患者”或“向需要治疗的受试者”可以包含将受益于施用本文所公开的抗C1s抗体用于治疗补体介导的病症的受试者。应当理解，抗C1s抗体的施用涵盖施用于“有需要的受试者”可以被解释为是指基于如症状、家族史或基因型等指标，已知或疑似患有如ITP或NMO等补体介导的病症的受试者。应当进一步理解，抗C1s抗体可以施用于未知或不疑似患有补体介导的病症的受试者，其目的可以包含但不限于用于预防性或防治性目的，用于筛查，用于诊断，用于研究目的或用于实现不同于治疗病症的结果。

抗C1s抗体的“有效量”例如在药物调配物中是指以一定剂量并且在必要的时间段内，对于实现期望治疗性或防治性结果有效的量。应当理解，“有效量”旨在指将引起正在被测量的细胞、组织、系统、非人动物受试者、非人哺乳动物受试者或人受试者的生物应答或期望的治疗效果的抗C1s抗体或包括抗C1s抗体的药物组合物的量。术语“治疗有效量”、“药理学有效量”和“生理学有效量”可互换使用，是指在血流或靶组织中提供活性抗体的阈值水平所需的抗C1s抗体的量。精确量将取决于多种因素，例如，特定的抗C1s抗体(活性剂)；组合物的组分和物理特性；待治疗的受试者/患者的预期群体；考虑因素，如受试者的疾病状态、年龄、性别和体重等，并且所述精确量可以由本领域的技术人员基于本文所提供的信息或以其它方式可在相关文献中获得的信息容易地确定。在此上下文中所使用的术语“改善”、“增加”或“减少”指示相对于基线测量结果的值或参数，如在开始本文所述的治疗之前同一受试者的测量结果，或在不存在本文所述的治疗的情况下对照个体(或多个对照个体)的测量结果，或可在如教科书、手册或数据库等信息来源中获得的值。

术语“药物组合物”或“药物调配物”是指其形式使得允许包含在其中的活性成分(具体地本文所公开的抗C1s抗体)的生物活性有效的制剂。应当理解，药物组合物可以含有多于一种活性成分，例如，多于一种抗C1s抗体或抗C1s抗体与作用于不同靶标的另一种活性成分的组合，其中所述组合可以是但不限于是抗C1s抗体与对其它补体途径或炎症中涉及的其它过程具有期望作用的另一种活性成分的组合、抗C1s抗体与基因疗法剂的组合或抗C1s抗体与针对其它靶标的蛋白质(例如，Fc融合蛋白)的组合。“药学上可接受的载剂”是指药物调配物中除了活性成分之外的对受试者无毒的成分。应当理解，药学上可接受的载剂可以是但不限于是缓冲剂、赋形剂、稳定剂、佐剂或防腐剂。

如本文所使用的术语“治疗(treat或treating)”或类似术语可以指在一组限定的情况下被认为对特定受试者是有益的结果。治疗补体介导的病症可以非排他性地指减轻、改善、减缓、中断、阻止、缓解、停止或逆转现有症状、病症、病状或疾病的进展或严重程度中的任一种，并且可以进一步涵盖预防或延迟补体介导的病症的一或多种症状的发作，和/或降低补体介导的病症的一或多种症状的严重程度或频率。术语“治疗”或“治疗方法”或等效形式可以涵盖本文所公开的抗C1s抗体的一或多种用途，包含但不限于治疗性用途、防治性用途、预防性用途、诊断用途、成像用途和筛选用途。

如本文所使用，“载体”是指能够在引入载体的宿主细胞中传播载体序列所连接的核酸的核酸分子。能够指导与其可操作地连接的核酸的表达的载体在本文中被称为“表达载体”。

抗C1S抗体

提供了能够与C1s结合并调节C1s的活性的抗体和抗原结合片段，由此具有调节至少一种补体介导的病症、具体地与结合自身抗原的自身抗体进行的CP激活相关联的至少一种病症中涉及的至少一种组分的活性的作用。提供了能够与C1s结合并调节C1s的活性的抗体和抗原结合片段，由此具有调节ITP和/或NMO中涉及的CP的至少一种组分的活性的作用。能够与C1s结合并调节C1s的活性的抗C1s抗体可以在用于治疗与通过与自身抗原、具体地ITP结合的自身抗体进行的CP激活相关联的补体介导的病症的方法和组合物中使用。

一旦提供了对C1s具有特异性的抗体或片段，就可以通过本领域的技术人员已知的若干方法来测试调节C1s的活性或具有调节补体介导的病症中涉及的至少一种组分的作用的期望生物活性。

应当理解，如本文所使用的“调节(modulate或modulating)”或类似术语可以指当本文所公开的抗C1s抗体与其靶分子C1s结合时可能产生的一或多种效果。“调节”和其等效物可以指取决于所考虑的组分的不同的作用模式和效果，即，调节可以指中和、逆转、抑制、封闭、减少、拮抗、激动、放大、增强或以其它方式改变补体系统，具体地CP中涉及的至少一种组分的活性。应当理解，如本文所使用的“抑制C1s(inhibit C1s或inhibiting C1s)”或“C1s抑制(inhibition of C1s或C1s inhibition)”或类似术语是指抑制补体级联中涉及的C1s的至少一种活性或功能，使得抑制C1s具有下游效应，如抑制补体级联中涉及的酶的激活、补体级联中涉及的分子的缔合或解离、需要C1s激活的下游效应子的产生或血清补体诱导的抗体致敏细胞的裂解程度。应当理解，如本文所使用的“C1s抑制”或类似术语不需要证明当本发明的C1s抗体与C1s靶分子结合时被抑制的C1s的特异性活性或功能，因为示出了已知位于C1s激活下游的过程或效应子的抑制的测量结果可以用作C1s活性或功能的替代测量结果或指标，并且因此用作C1s活性或功能的抑制的指标。因此，能够结合并抑制C1s的C1s抗体是能够进行以下的抗体：尤其抑制补体激活的经典途径(CP)的活性、抑制C1s激活的下游效应、抑制IgM诱导的C4从血清中的沉积、抑制抗体-抗原复合物介导的C4切割、抑制抗体-抗原复合物介导的C4b的沉积、抑制C3转化酶的形成、抑制CP激活的下游效应等。

应当理解，术语“组分”不仅可以指靶分子C1s，而且还指参与位于C1s激活下游的补体介导的效应，具体地位于C1s激活下游的CP介导的效应的下游分子、过程或途径。应当理解，通过用抗C1s抗体靶向C1s，可以选择性地靶向CP，使得可以特异性地或选择性地抑制CP介导的效应。CP的这种选择性靶向效应也被理解为使替代性和凝集素途径保持完整以对抗感染。应当理解，如本文所公开的抗C1s抗体可以用于治疗地靶向抗体-抗原复合物触发的CP激活，并且根据抗体-抗原复合物触发的CP激活来调节CP的活性。如本文所公开的抗C1s抗体可以用于治疗地靶向补体介导的病症中涉及的至少一种组分，具体地特异性靶向CP介导的病症中涉及的至少一种组分，具体地CP介导的自身免疫性病症中涉及的至少一种组分，具体地ITP和/或NMO中涉及的至少一种组分。不希望受特定作用机制的束缚，使用如本文所公开的抗C1s抗体靶向C1s应被理解为特异性地抑制CP介导的细胞裂解，这是导致如自我血小板、红细胞或星形胶质细胞的破坏等的作用的自身免疫性病理学的基础。在某些实施例中，如本文所公开的抗C1s抗体可以用于以剂量依赖性方式抑制CP途径。在某些实施例中，如本文所公开的抗C1s抗体可以用于以剂量依赖性方式抑制抗体-抗原复合物触发的CP激活的作用。

在某些实施例中，如本文所公开的抗C1s抗体可以用于治疗地靶向抗体-抗原复合物触发的CP激活并调节位于抗体-抗原复合物触发的CP激活下游的CP的活性。具体地，如本文所公开的抗C1s抗体可以用于治疗地靶向抗体-抗原复合物触发的CP激活并抑制位于抗体-抗原复合物触发的CP激活下游的CP的活性。

使用如本文所公开的抗C1s抗体治疗地靶向CP介导的病症中涉及的至少一种组分应被理解为允许精确调节CP的活性和CP活性的下游效应。具体地，如本文所公开的抗C1s抗体治疗地靶向CP介导的病症中涉及的至少一种组分应被理解为允许精确抑制CP的活性和CP活性的下游效应。

本文所公开的抗C1s抗体允许开发可以针对每个受试者定制的治疗(例如，剂量、施用频率)，其中所述治疗可以容易地继续和中断，并且与其它疗法组合。在某些战略性实施例中，本文所公开的抗C1s抗体可以与其它疗法组合，所述其它疗法可以解决多个治疗性靶标和/或解决组合疗法中的疗法之一的缺陷或不令人期望的作用。

抗C1s抗体和其用途的示范性实施例

目前公开了本发明的抗C1s抗体的非限制性示范性实施例，具体地在实例、表和附图中。

能够与C1s特异性结合并抑制C1s功能的抗体.

可以使用功能性级联来鉴定和表征本发明的抗C1s抗体，其中级联中的第一步骤涉及筛选C1s攻击的克隆以获得能够与C1s结合的抗体，随后对同源可变区进行测序，重组表达来自与人恒定区连接的小鼠克隆的具有VH和VL的嵌合抗体，纯化重组抗体，并且使用功能性测定筛选抗体。

如通过在实例2中公开的示范性实施例所证明的，获得了能够调节C1s功能的重组嵌合抗体，如通过针对IgM诱导的C4从血清中的沉积的测定所测量的。获得了能够抑制C1s功能的示范性重组嵌合抗C1s抗体，如通过抑制IgM诱导的人C4从人血清中的沉积的能力和抑制IgM诱导的食蟹猴C4从食蟹猴血清中的沉积的能力所测量的。获得了能够以剂量依赖性方式抑制C1s功能的示范性重组嵌合抗C1s抗体。

人源化变体

当施用于人受试者时，包括源自非人来源的CDR的移植到人源性抗体框架中的人源化抗体预期是非免疫原性的。如通过在实例2中公开的示范性实施例所证明的，成功地产生、测试、优化和选择了人源化抗C1s抗体变体。2-7和2-8抗体的人源化产生了人源化抗C1s抗体变体，其中鉴定为hz2-7(H1L2)和hz2-8(H1L2)的抗体具有最高体外活性。在初步设计和测试之后，示出了期望的抗原结合亲和力和交叉反应性的变体被选择以供进一步评估和开发，包含但不限于修饰一些亲本CDR序列以避免潜在的不希望事件(如天冬氨酸异构化和天冬酰胺脱酰胺)和框架序列的所选修饰。

对生物学相关靶标具有高亲和力的抗C1s抗体

示范性抗C1s抗体示出了对生物学上适当的靶标的高亲和力。抗C1s抗体示出了与酶原(天然)C1s蛋白和活性C1s蛋白的高亲和力结合。如使用如在实例2和3中公开并且在图2和3中展示的多种方法进行的亲和力测量的示范性实施例所证明的，抗体2-7、2-8、hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2)、hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)表现出有利的亲和力特性。

与非人靶标具有交叉反应性的抗C1s抗体

令人期望的是治疗上有用的抗体或抗体片段与来自与另外的研究(如临床前功效研究、疾病的动物模型、毒理学研究等)相关的来源的非人靶标(非人同源物)具有足够的交叉反应性，使得抗体或抗体片段应当识别例如大鼠同源物和/或灵长类动物同源物，如来自食蟹猴的同源物。如通过在实例2中公开并且在图2中展示的功能性筛选测定中的示范性实施例所证明的，抗体2-7、2-8、hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2)、hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2G80A/T82A)抑制IgM诱导的人C4从人血清中的沉积和IgM诱导的食蟹猴C4从食蟹猴血清中的沉积，从而提供针对人C1s产生的在食蟹猴系统中与食蟹猴C1s具有功能性交叉反应性的抗体。如在实例3中公开并且在图3中展示的结合亲和力测量的示范性实施例所证明的，抗体2-7、2-8、hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2)和hz2-8(H1L2G80A/T82A)对人C1s和食蟹猴C1s表现出可检测的结合和高亲和力，而抗体2-8和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)对大鼠C1s也表现出可检测的结合和相当高的亲和力。

能够选择性地抑制经典途径(CP)的抗C1s抗体

对于CP介导的病症，例如由与抗原结合的补体固定自身抗体触发的CP介导的病症，令人期望的是选择性地抑制CP产生常见补体系统效应子，具体地是C3转化酶的步骤上游的CP。选择性地抑制CP应被理解为抑制抗体-抗原复合物触发的CP激活的作用，同时使替代性和凝集素补体途径保持完整以对抗感染。对于CP介导的病症，选择性地抑制C3转化酶产生的步骤上游的CP应被理解为选择性地抑制与病症相关联的CP激活的不希望的作用，同时使替代性和凝集素补体途径基本上保持完整以对抗感染。本发明的抗C1s抗体在CP内具有通过抑制C1s(即，抑制至少一种C1s活性或功能)的选择性作用，由此在形成共同补体系统效应子的上游起作用。

如通过在实例2中公开的示范性实施例所证明的，本文所公开的抗C1s抗体能够与C1s结合并抑制IgM诱导的C4从人血清和食蟹猴血清中的沉积中涉及的C1s功能，其中应当理解，在测试测定中抑制C4沉积指示以下中的至少一者：未发生C4切割；C3转化酶形成受到抑制(阻止)；和/或CP激活未产生由共同补体途径效应子C3介导的下游效应。具体地，本文所公开的抗C1s抗体能够与C1s特异性结合并抑制C1s的至少一种活性或功能，使得IgM诱导的C4从人血清和食蟹猴血清中的沉积被抑制，C4切割被抑制，C3转化酶形成被抑制(阻止)，并且CP激活被抑制。

在实例7中公开的示范性实施例证明，本文所公开的抗C1s抗体能够调节补体经典途径(CP)中涉及的C1s功能。包被有兔抗绵羊红细胞抗血清(溶血素)的绵羊红细胞，也被称为抗体致敏绵羊红细胞(“EA”或“EA细胞”)，传统上已经用于测定血清样品中补体经典途径(CP)的活性。使用可商购获得的EA细胞(补体科技公司(Complement Technology)，#B202)和已知的测定系统来研究响应于暴露于血清的补体介导的EA裂解。人源化抗C1s抗体hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2)、hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2G80A/T82A)以剂量依赖性方式抑制补体介导的EA裂解(实例7，图7A和7B)，其中抗体hz2-8(H1L2)是最有效的抑制剂，hz2-8(H1L2)、抗体hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2G80A/T82A)也是高度有效的抑制剂，并且抗体hz2-7(H1L2)较不有效并且示出物种依赖性。

本文所公开的抗C1s抗体在不同条件下示出了不同的抑制水平，例如，在相同的测定条件下使用不同的抗体，或在不同的测定条件下使用同一抗体，如使用来自不同物种的血清。因此，本文所公开的抗C1s抗体提供了用于研究CP途径中特异性表位和结合相互作用的作用的工具和路径。

组合物

提供了包括本发明的抗C1s抗体和适于每种组合物的预期用途的药学上可接受的载剂或赋形剂的组合物。此类载剂包含但不限于：盐水、缓冲液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、赋形剂、稳定剂、防腐剂或其组合。应当理解，药物制剂应与施用模式相匹配。

本文所公开的抗C1s抗体可以通过任何合适的方式，包含但不限于注射或肠胃外施用来施用。肠胃外施用可以包含肌内施用、静脉内施用、动脉内施用、腹膜内施用、皮下施用、脊柱内(包含硬膜外或鞘内)施用、眼内施用、大脑内施用、脑室内施用、心内施用、真皮内/皮内施用、关节内施用、淋巴管内施用或骨内施用。本文所公开的抗C1s抗体可以被调配成组合物，以通过肠胃外施用，具体地通过静脉内或动脉内施用引入到循环系统中。本文所公开的抗C1s抗体可以使用装置施用，或作为贮库施用，或以缓释制剂(例如，含有抗体的固体疏水聚合物的半渗透基质，或微胶囊)的形式施用，以允许缓慢和/或测量和/或局部递送。本文所公开的抗C1s抗体可以使用胶体药物递送系统(例如，脂质体、白蛋白微球体、微乳液、纳米颗粒和纳米胶囊)或在粗乳液中调配和施用。

方法

提供了使用有效量的本文所公开的抗C1s抗体治疗补体介导的病症的方法。不希望受特定作用机制的束缚，提供了使用本文所公开的抗C1s抗体精确靶向和抑制C1s的方法，由此允许精确靶向C1s以选择性调节CP的活性。用于精确靶向和抑制C1s的方法可以是使用施用途径来靶向涉及病症的位置或系统的方法、使用施用定时来靶向关键时段的方法以及这些方法的组合。提供了用于治疗补体介导的病症的方法，其中CP被与自身抗原结合的补体固定自身抗体激活，并且其中CP的这种激活导致对携带自身抗原的组织产生有害作用。提供了用于治疗与CP的不希望的激活相关的病症的方法，其中此类方法使用有效量的本文所公开的抗C1s抗体来选择性调节如C4切割和沉积等CP过程的活性，从而导致对自身组织的不希望的攻击和破坏。具体地，提供了通过抑制血小板上与自身抗原结合的补体固定自身抗体的复合物进行的CP激活的下游效应来治疗自身免疫性病状的方法。

提供了使用施用途径靶向涉及病症的位置或系统来精确靶向和抑制C1s的方法和组合物。不希望受特定作用机制的束缚，提供了用于治疗以循环系统中不希望的、异常的、不适当的或过度的CP激活可以通过例如通过静脉内或动脉内施用将抗C1s抗体引入到循环系统中来靶向为特征的病症的方法和组合物。不希望受特定作用机制的束缚，提供了用于治疗以中枢神经系统(CNS)中不希望的、异常的、不适当的或过度的CP激活可以通过脊柱内(包含硬膜外或鞘内)施用、眼内施用、大脑内施用或脑室内施用将抗C1s抗体引入到一或多个CNS组织或结构中来靶向为特征的病症的方法和组合物。不希望受特定作用机制的束缚，提供了用于治疗以一或多个关节中不希望的、异常的、不适当的或过度的CP激活可以通过关节内施用将抗C1s抗体引入到一或多个关节中来靶向为特征的病症的方法和组合物。

提供了通过使用有效量的本文所公开的抗C1s抗体精确靶向C1s来治疗免疫性血小板减少性紫癜(ITP)的方法。此处所公开的抗C1s抗体的组合物可以被调配成用于引入到循环系统中，例如，静脉内和/或动脉内施用，并且通过允许靶向和抑制循环系统中C1s的方法来引入。不希望受特定作用机制的束缚，使用本文所公开的抗C1s抗体的方法可以通过抑制CP来抑制抗体介导的血小板去除。不希望受特定作用机制的束缚，使用本文所公开的抗C1s抗体的方法可以抑制C4在血小板上的沉积，所述沉积会导致不希望的血小板破坏。当CP途径已经被血小板上与自身抗原结合的补体固定自身抗体激活时，本文所提供的方法允许精确靶向C1s，其中C1s活性的抑制中断CP途径并防止下游效应，包含但不限于抑制IgM诱导的C4从血清中的沉积；抑制抗体-抗原复合物介导的C4切割；抑制抗体-抗原复合物介导的C4b在血小板上的沉积；血小板破坏；血小板消除；血小板减少症；以及出血性病症。

提供了通过使用有效量的本文所公开的抗C1s抗体精确靶向C1s来治疗免疫性视神经脊髓炎(NMO)的方法。本文所公开的抗C1s抗体的组合物可以被调配成靶向引入到CNS中，具体地用于脊柱内(例如，硬膜外或鞘内)或大脑内/脑室内引入，并且通过允许靶向和抑制可能发生补体依赖性细胞毒性(CDC)的CNS中的C1s的方法来引入。不希望受特定作用机制的束缚，使用本文所公开的抗C1s抗体的方法可以抑制由与自身抗原结合的自身抗体触发的补体依赖性细胞毒性(CDC)，包含但不限于抑制抗体-抗原复合物介导的C4切割；抑制抗体-抗原复合物介导的C4b在星形胶质细胞上的沉积；抑制抗体-抗原复合物介导的CP激活的下游效应以及抑制导致例如寡突神经胶细胞和神经元损伤的下游炎症，以及CNS，具体地脊髓和视神经中的炎性脱髓鞘病变。

本文所提供的方法和组合物允许治疗的精确定时。不希望受特定作用机制的束缚，本文所公开的抗C1s抗体可以在病症的急性期期间施用，以在病症的急性期期间抑制CP介导的过程。不希望受特定作用机制的束缚，使用抗C1s抗体在病症的急性期期间选择性抑制CP介导的过程可以中断急性事件和/或防止病症的进展，并且之后允许CP在抗C1s抗体已经从C1s靶标解离之后恢复至正常活性。

本文所提供的方法和组合物允许通过治疗的定时和位置进行精确靶向。不希望受特定作用机制的束缚，本文所公开的抗C1s抗体的施用定时可以在病症的急性期之前(例如，响应于急性期可能发作的指标)或急性期期间发生，以在急性期期间选择性抑制CP介导的过程，而不抑制其它补体途径的功能，并且可以选择施用途径以靶向涉及病症的特定组织、系统或结构。不希望受特定作用机制的束缚，使用抗C1s抗体在病症的急性期之前或期间抑制CP介导的过程可以防止或中断急性事件而不抑制其它补体途径的正常功能，并且之后允许CP在抗C1s抗体已经从C1s靶标解离之后恢复至正常活性。

本文所提供的方法和组合物允许控制治疗期间在一或多个时间点存在的治疗剂的量。本文所公开的抗C1s抗体可以以剂量依赖性方式抑制C1s活性并选择性抑制CP途径活性。不希望受特定作用机制的束缚，足以改善病症的至少一种生物效应或症状的剂量(“有效量”)可以取决于对有需要的受试者特定的因素，使得治疗可以包括测定构成待治疗的受试者的有效量所需的抗C1s抗体的剂量以及向受试者施用有效量的抗C1s抗体，其中治疗剂(抗C1s抗体)的水平预期在治疗之后由于与C1s靶标的解离和从血液中的清除而有所下降。

如本文所提供的用于治疗补体介导的病症的方法包括向有需要的受试者施用有效量的本文所公开的抗C1s抗体，其中施用有效量的抗C1s抗体改善了与病症相关联的至少一种生物效应或症状。提供了用于治疗与自身抗体触发的CP激活相关联的补体介导的病症的方法，其中向有需要的受试者施用有效量的本文所公开的抗C1s抗体抑制CP途径并防止不希望的CP激活的下游效应。

提供以下实例以说明而非限制所要求保护的本发明。

实例

实例1：抗体产生和与C1S结合的抗体的鉴定

针对C1s的新型单克隆抗体的产生是由美国金斯瑞公司(GenScript USA,Inc.)(新泽西州皮斯卡塔韦(Piscataway,NJ))根据合同利用体内啮齿动物免疫和单个B细胞克隆技术进行的。C1s蛋白的活性形式(补体科技公司，CompTech A104 C1s酶)用作抗原来使BALB/cJ和SJL小鼠免疫(杰克逊实验室(The Jackson Laboratories))。获得如通过酶联免疫吸附测定(ELISA)测定的足够的血浆滴度，这触发了下游抗体回收和筛选活性。收获次级淋巴器官以供CD138浆细胞富集，然后将其加载在14K芯片(加利福尼亚州埃默里维尔的伯克利之光公司(Berkeley Lights,Inc.,Emeryville,CA))上，以筛选分泌与C1s抗原特异性结合的抗体的单个B细胞。阳性单个B细胞克隆被选择和导出以供随后的可变结构域测序和重组抗体表达。通过使用pcDNA3.4-VH-CH(其中VH来自阳性B细胞克隆(小鼠)并且CH是IgG1(人))和pcDNA3.4-VL-CL(其中VL来自阳性B细胞克隆(小鼠)并且CL是κ(人))在ExpiCHO细胞中表达来获得全长重组嵌合抗体。在体外无细胞系统中进一步筛选经重组表达和经纯化的抗体的功能性活性。从所获得的阳性C1s结合B细胞克隆，成功导出159个克隆以供抗体测序，并且用一对同源重链和轻链对39个克隆进行测序。对所有39个抗C1s克隆进行重组表达和纯化，并且进行功能性筛选。

实例2.抗C1S抗体的功能性筛选

对来自所有39个抗C1s克隆的抗C1s抗体进行重组表达和纯化，并且然后进行功能性筛选测定，以鉴定能够抑制IgM诱导的C4沉积的抗C1s抗体。简言之，在适于IgM诱导的C4从血清中的沉积的条件下，将抗C1s抗体与血清在IgM包被的板中一起温育，随后检测所沉积的C4的量。根据功能性模型，此功能性测定用作C1s活性的替代测定，其中C4必须在C4b沉积(具体地，C4b在如血小板等靶细胞上的沉积)之前被活性C1s切割，使得测量抗C1s抗体对IgM诱导的C4从血清中的沉积的作用用于报告抗C1s抗体对C1s活性的作用。此功能性测定用作抗体-抗原复合物介导的CP激活中的C1s活性(C1s功能，C1s生物活性)和这种CP激活的下游效应的替代测定(参见图1)。选择能够抑制IgM诱导的C4沉积的抗C1s抗体以供进一步研究。

通过首先在96孔板中包被300ng/孔的来自人血清的IgM(西格玛奥德里奇公司(Sigma-Aldrich)I8260)过夜来进行功能性筛选。第二天早上，在将在明胶封闭缓冲液中稀释的各种浓度的抗C1s抗体添加到每个孔中之前，将板用明胶封闭缓冲液(1％于PBS中，阿尔法艾瑟公司(Alfa Aesar)J62755)封闭1小时。在通过轻轻摇动板使抗C1s抗体短暂平衡之后，将NHS(正常人血清，CompTech NHS)添加到每个孔中以使最终浓度为1.25％(v/v)。将板充分混合并在37℃下温育1小时，以允许由IgM诱导的C4沉积。然后，在与在明胶封闭缓冲液中稀释的山羊抗人C4(CompTech A205)一起温育1小时之前，将板充分洗涤。在温育之后，将板再次洗涤并与在明胶封闭缓冲液中稀释的兔抗山羊IgG(H+L)次级抗体HRP缀合(英杰公司(Invitrogen)81-1620)一起温育1小时。最后，将板用PBS洗涤，并且用ELISA液体底物(西格玛奥德里奇公司T4444)显色，随后通过添加相同体积的1M H₂SO₄的ELISA液体底物来停止反应。通过OD_450nm处的吸光度测量结合的抗体，以测定所沉积的C4的量。图2A示出了顶级候选物来自克隆2-7的重组抗体(指定为抗C1s抗体2-7)和来自克隆2-8的重组抗体(指定为抗C1s抗体2-8)的结果，以及来自非功能性克隆(3-30)之一的与C1s结合但在功能性测定中测量不明显抑制C1s功能的抗体的结果。测定每种抗体的半最大抑制剂浓度(IC50)，其示出了抑制IgM诱导的C4沉积的能力，其中抗C1s抗体2-7和抗C1s抗体2-8的IC₅₀值介于0.3μg/ml与0.7μg/ml之间。

使用正常食蟹猴血清(CMS，CompTech NCYS)重复如上所述的功能性筛选测定。图2B示出了抗C1s抗体2-7和2-8也有效地抑制IgM诱导的食蟹猴C4的沉积，其中抗C1s抗体2-7的IC₅₀为大约0.3μg/ml，并且抗C1s抗体2-8的IC₅₀为大约0.5μg/ml。

人源化抗C1s抗体变体的产生和筛选

利用CDR移植到人抗体框架上进行亲本抗体的人源化。首先进行亲本抗体的3维结构的同源性建模，以建立亲本抗体的结构模型。基于总体序列同一性、匹配VH-VL界面位置、类似分类的CDR标准位置(卡巴特编号)和潜在N糖基化位点的去除鉴定可变片段框架的氨基酸序列。通过产生将亲本抗体序列的所选部分与人框架序列融合的多个杂交序列来设计人源化抗体。选择形成人源化抗体的同型是重链的IgG1和轻链的IgG1κ。使用3D模型，通过眼睛和计算机建模对这些人源化序列进行系统分析，以分离出最有可能保留抗原结合的序列。目标是使最终人源化抗体中的人序列的量最大化，同时保持原始抗体特异性。然后，使用pcDNA3.4-VL-CL-IRES-VH-CH载体在ExpiCHO细胞中表达将人源化VH和VL配对的人源化变体，其中IRES是允许轻链和重链同时表达的“内部核糖体进入位点”，设计和构建了所述人源化变体。然后，对经表达的重组人源化变体进行纯化以供亲和力分析。

作为亲和力分析的一部分，在一轮设计、产生和测试变体中，在三种不同的人IgG1衍生的框架中的对应位置中产生具有亲本抗体的VH-CDR的三种VH变体，并且在三种不同的人IgG1κ衍生的框架中的对应位置中产生具有亲本抗体的VL-CDR的三种VL(VK)变体。根据3VH x 3VK矩阵制备了表示VH和VL(VK)变体的每种组合的总共九(9)种人源化变体，对所述人源化变体的抗原结合特性(k_on、k_off、KD)进行评估。

基于截断值示出了期望的抗原结合亲和力的变体被选择以供进一步评估和开发。在一些情况下，对亲本CDR序列进行修饰以避免潜在的不希望的事件，如天冬氨酸异构化或天冬酰胺脱酰胺。

人源化抗C1s抗体hz2-7(H1L2)和hz2-8(H1L2)选自所测试的所有人源化变体，因为它们具有抑制IgM诱导的C4从NHS和CMS沉积的优异能力(参见图2C和2D)。IC₅₀值的比较示出了抗体hz2-7(H1L2)抑制IgM诱导的C4从NHS(图2D)和CMS(图2C)沉积不如其亲本抗体2-7(图2A(NHS)、图2B(CMS))有效，但是抗体hz2-8(H1L2)抑制IgM诱导的C4从NHS(图2C)和CMS(图2D)沉积比其亲本抗体2-8(图2A(NHS)、图2B(CMS))更有效。

图2C示出了人源化抗体hz2-7(H1L2)和hz2-8(H1L2)以及变体hz2-7(H1L2G131A)、hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)抑制IgM诱导的C4从NHS沉积的结果。对于能够抑制IgM诱导的C4从NHS沉积的C1s结合抗体，计算以下IC₅₀值(图2C)：hz2-7(H1L2)的IC₅₀为1.1μg/ml；hz2-8(H1L2)的IC₅₀为0.2μg/ml；hz2-8(H1L2G80A)的IC₅₀为0.5μg/ml；并且hz2-8(H1L2 G80A/T82A)的IC₅₀为0.4μg/ml。如图2C中所示，变体hz2-7(H1L2 G131A)在引入位于CDR3内的突变G131A之后变得功能失活，因此没有计算出功能失活变体hz2-7(H1L2G131A)的IC₅₀值。变体hz2-8(H1L2G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)两者均具有功能活性，但是这两者均不如hz2-8(H1L2)(图2C)有效。

图2D示出了人源化抗体hz2-7(H1L2)和hz2-8(H1L2)以及变体hz2-7(H1L2G131A)、hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)抑制IgM诱导的C4从CMS沉积的结果。图2C和图2D的比较示出了当利用CMS(图2D)代替NHS(图2C)时，获得了相同模式的结果。对于能够抑制IgM诱导的C4从CMS沉积的C1s结合抗体，计算以下IC₅₀值(图2D)：hz2-7(H1L2)的IC₅₀为0.9μg/ml；hz2-8(H1L2)的IC₅₀为0.2μg/ml；hz2-8(H1L2 G80A)的IC₅₀为0.5μg/ml；并且hz2-8(H1L2 G80A/T82A)的IC₅₀为0.4μg/ml。没有计算出功能失活变体hz2-7(H1L2 G131A)的IC₅₀值。

已经去除了天冬氨酸异构化和天冬酰胺脱酰胺位点两者的抗体hz2-8(H1L2G80A/T82A)被选择以供进一步开发。

下表1.a.示出了分配给在实例中使用的每种全长抗体的重链(HC)和轻链(LC)的SEQ ID NO，并且呈现了每种抗体的VH氨基酸序列和SEQ ID NO:以及VL氨基酸序列和SEQID NO:，其中CDR用下划线指示。

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实例3.抗C1S抗体的结合亲和力

抗C1s抗体亲和力和结合动力学：使用生物层干涉测量的测量

用RED96e系统(赛多利斯公司(Sartorius AG))将生物层干涉测量技术用于抗C1s抗体亲和力测量和结合动力学测定。对于第一基线，首先将预水合的抗人IgG Fc捕获(AHC)生物传感器在1x KB(动力学缓冲液，1xPBS pH 7.4+0.02％ Tween-20+0.1％BSA)中平衡120秒，随后用10mg/ml抗C1s抗体(2-7，图3A；2-8，图3B；hz2-7(H1L2)，图3C；hz2-8(H1L2 G80A/T82A)，图3D)加载在AHC生物传感器上持续240秒。然后，在与各种浓度的活性人C1s(CompTech A104)缔合240至360秒之前，建立第二基线信号持续120秒。最后，将分析物在1x KB中解离360秒。还针对人C1s酶原(CompTech A103)分析了抗C1s抗体2-7和2-8(数据未示出)。使用/>数据分析HT软件(赛多利斯公司)进行数据分析。计算了每种抗体和靶标组合的KD、k_on、k_off和R²值，如图3E中所总结的，示出了高亲和力结合，其中KD值在低纳摩尔至皮摩尔范围内。图3E进一步示出了抗C1s抗体2-7和2-8对于C1s酶原和活性C1s蛋白给出了完全相同的计算值，其中K_D值介于0.14nM至1.2nM之间。

抗C1s抗体结合亲和力：使用ELISA的测量

ELISA是通过首先用200ng/孔的人活性C1s(CompTech A104，图3F)或人C1s酶原(CompTech A103，图3G)蛋白包被96孔板过夜来进行的。第二天早上，在轻轻摇动下，将板用超级块(SuperBlock)T20封闭缓冲液(赛默飞世尔科技公司(Thermo Fisher ScientificInc.)，目录号37536)封闭1小时。然后，将在超级块T20封闭缓冲液中稀释的各种浓度的抗C1s抗体添加到板中并且在轻轻摇动下温育1小时。人IgG1(BioXCell公司(BioXCell)BP0297)用作阴性对照。在轻轻摇动下，在与在超级块T20封闭缓冲液(山羊抗人IgG抗体，HRP缀合物(密理博公司(Millipore)AP309P))中稀释的HRP缀合的二级抗体一起温育1小时之前，将板洗涤。最后，将板洗涤，并且用ELISA液体底物(西格玛奥德里奇公司)显色，随后通过添加相同体积的1M H₂SO₄的ELISA液体底物来停止反应。通过OD_450nm处的吸光度来测量结合的抗体。

图3F和图3G一起证明，顶级候选物2-7和2-8以及其人源化变体hz2-7(H1L2)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)分别都示出了与人活性C1s(CompTech A104)(图3F)和人C1s酶原(CompTech A103)(图3G)的强结合，其中半最大有效浓度(EC₅₀)值介于8ng/ml至13ng/ml之间。每种抗体和靶标组合的EC₅₀测定如下：对于抗体2-7，人活性C1s的EC₅₀为12ng/ml并且人C1s酶原的EC₅₀为9ng/ml；对于抗体2-8，人活性C1s的EC₅₀为12ng/ml并且人C1s酶原的EC₅₀为10ng/ml；对于变体hz2-7(H1L2)，人活性C1s的EC₅₀为13ng/ml并且人C1s酶原的EC₅₀为12ng/ml；并且对于变体hz2-8(H1L2 G80A/T82A)，人活性C1s的EC₅₀为10ng/ml并且人C1s酶原的EC₅₀为8ng/ml。使用相同浓度的人IgG1的对照测定示出了这些模式不反映非特异性结合(图3F-3G)。

抗C1s抗体交叉反应性：使用生物层干涉测量的测量

对于第一基线，首先将预水合的抗人IgG Fc捕获(AHC)生物传感器在1x KB(动力学缓冲液，1xPBS pH 7.4+0.02％ Tween-20+0.1％ BSA)中平衡120秒，随后用10mg/ml抗C1s抗体(2-7，图3H和3N；2-8，图3I、3L和3O；hz2-7(H1L2)，图3J和3P；hz2-8(H1L2 G80A/T82A)，图3K、3M和3Q)加载在AHC生物传感器上持续240秒。然后，在与各种浓度的人C1s(在内部产生(SEQ ID NO:99)，图3H-3K中所示)、大鼠C1s(在内部产生(SEQ ID NO:105)，图3L-3M中所示)或食蟹猴C1s(在内部产生(SEQ ID NO:103)，图3N-3Q中所示)缔合240至360秒之前，建立第二基线信号持续120秒。最后，将分析物在1x KB中解离360秒。使用数据分析HT软件(赛多利斯公司)进行数据分析。计算了每种抗体和靶标组合的KD、k_on、k_off和R²值，如图3R中所总结的。顶级候选物2-7和2-8以及其人源化变体hz2-7(H1L2)和hz2-8(H1L2G80A/T82A)分别都示出了与人C1s和食蟹猴C1s的强结合，但是没有示出与小鼠C1s(图3R)的结合，其中K_D介于0.012nM至3.5nM之间。抗C1s抗体2-7和其人源化变体hz2-7(H1L2)没有示出与大鼠C1s的结合，而2-8和其人源化变体hz2-8(H1L2 G80A/T82A)示出了与大鼠C1s的结合，其中K_D值介于16nM至17nM之间(图3R)。2-8和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)对大鼠C1s的结合亲和力弱于对人C1s和食蟹猴C1s的结合亲和力(图3R)。

抗C1s抗体交叉反应性：使用ELISA的测量

ELISA是通过首先用200ng/孔的人C1s(鉴定为全长人C1s、HuC1s、wt人C1s)(在内部产生(SEQ ID NO:99)，图3S)、小鼠C1s(在内部产生(SEQ ID NO:101)，图3T)、大鼠C1s(在内部产生(SEQ ID NO:105)，图3U)或食蟹猴C1s(在内部产生(SEQ ID NO:103)，图3V)蛋白包被96孔板过夜来进行的。第二天早上，在轻轻摇动下，将板用超级块T20封闭缓冲液(赛默飞科技公司(Thermo Scientific)37536)封闭1小时。然后，将在超级块T20封闭缓冲液中稀释的各种浓度的抗C1s抗体添加到板中并且在轻轻摇动下温育1小时。小鼠IgG(西格玛奥德里奇公司I5381)和人IgG1(BioXCell公司BP0297)用作阴性对照。在轻轻摇动下，在与在超级块T20封闭缓冲液中稀释的HRP缀合的二级抗体(山羊抗小鼠IgG(H+L)交叉吸附的次级抗体HRP(英杰公司G-21040)或山羊抗人IgG抗体，HRP缀合物(密理博公司AP309P))一起温育1小时之前，将板洗涤。最后，将板洗涤，并且用ELISA液体底物(西格玛奥德里奇公司)显色，随后通过添加相同体积的1MH₂SO₄的ELISA液体底物来停止反应。通过OD_450nm处的吸光度来测量结合的抗体。顶级候选物2-7和2-8以及其人源化变体hz2-7(H1L2)和hz2-8(H1L2G80A/T82A)分别都示出了与人C1s(图3S)和食蟹猴C1s(图3V)的强结合，但是没有示出与小鼠C1s(图3T)的结合，其中EC₅₀介于4ng/ml至15ng/ml之间。抗C1s 2-7和其人源化变体hz2-7(H1L2)没有示出与大鼠C1s的结合，而2-8和其人源化变体hz2-8(H1L2 G80A/T82A)示出了与大鼠C1s(图3U)的较弱结合，其中EC₅₀介于63ng/ml至105ng/ml之间。

实例4.通过ELISA测量的抗C1S抗体与全长和截短的C1S的结合

通过ELISA测量抗C1s抗体与全长人C1s蛋白、全长小鼠C1s蛋白、人C1s蛋白的NHC片段(图5B用于比对)以及位于NHC内的人C1s的中间片段(鉴定为“M151”或“huC1sM151”)的结合，其涵盖人C1s的残基272至422处的151个氨基酸，位于自动切割位点R422-I423的上游(图5B用于比对)。开发了用于表达全长人C1s(HuC1s或“wt人C1s”)(SEQ ID NO:99)、全长小鼠C1s(moC1s)(SEQ ID NO:101)、人C1s缺失突变体1(huC1sM151)(SEQ ID NO:107)以及与C1s的NHC相对应的人C1s缺失突变体2(huC1sNHC)(SEQ ID NO:109)的构建体，在每个经表达的蛋白质上具有C末端6xHis标签。全长和截短的C1s构建体(SEQ ID NO:100、102、108、110)和所得蛋白质(SEQ ID NO:99、101、107、109)的所有表达和纯化均是在内部进行的。

ELISA是通过首先用200ng/孔的全长或截短的C1s蛋白包被96孔板过夜来进行的。第二天早上，在轻轻摇动下，将板用超级块T20封闭缓冲液(赛默飞科技公司37536)封闭1小时。然后，将在超级块T20封闭缓冲液中稀释的各种浓度的抗C1s抗体添加到板中并且在轻轻摇动下温育1小时。小鼠IgG(西格玛奥德里奇公司I5381)和人IgG1(BioXCell公司BP0297)用作阴性对照。在轻轻摇动下，在与在超级块T20封闭缓冲液中稀释的HRP缀合的二级抗体(山羊抗小鼠IgG(H+L)交叉吸附的次级抗体HRP(英杰公司G-21040)或山羊抗人IgG抗体，HRP缀合物(密理博公司AP309P))一起温育1小时之前，将板洗涤。最后，将板洗涤，并且用ELISA液体HRP底物(西格玛奥德里奇公司)显色，随后通过添加与ELISA液体底物相同体积的1M H₂SO₄来停止反应。通过OD_450nm处的吸光度来测量结合的抗体。结果示出于图4中。顶级候选物2-7和2-8以及其人源化变体hz2-7(H1L2)和hz2-8(H1L2)分别都示出了与全长人C1s(图4A)的强结合，但是没有示出与全长小鼠C1s(图4B)的结合。所有抗C1s抗体示出了与全长C1s相比，与两个截短的人C1s(NHC和M151)的结合具有更高的EC₅₀(图4C-D)，这表明人C1s(M151)保留了抗C1s的主要结合位点，并且侧接区可以有助于保持正确的(或优选的)构象。

实例5.通过蛋白质印迹证明的抗C1S抗体与全长和截短的C1S的结合

蛋白质印迹分析是通过首先在使用或不使用还原剂(英杰公司B0004)的情况下在SDS-PAGE上解析200ng/泳道全长或截短的C1s(人C1s、小鼠C1s、人C1s的NHC和人C1s的M151)来进行的，如下所示：在泳道1中，200ng全长人C1s(HuC1s；SEQ ID NO:99)；在泳道2中，200ng全长小鼠C1s(MoC1s；SEQ ID NO:101)；在泳道3中，200ng截短的人C1s M151(HuC1s(M151)；SEQ ID NO:107)；并且在泳道4中，200ng截短的人C1s NHC(HuC1s(NHC)；SEQID NO:109)。随后将蛋白质转移到硝酸纤维素膜，并且用在TBST(天惠华公司(Teknova)T1688)中稀释的5％blotto(ChemCruz sc-2325)封闭过夜。第二天早上，在轻轻摇动下，将经封闭的膜首先与在5％blotto-TBST中稀释的1μg/ml的抗C1s抗体一起温育1小时。然后，在轻轻摇动下，将膜洗涤，并且与在5％blotto-TBST(山羊抗人IgG抗体，HRP缀合物(密理博公司AP309P))中稀释的HRP缀合的次级抗体一起温育1小时。最后，将膜充分洗涤，并且使用SuperSignal West Dura持久性底物(赛默飞科技公司34075)显影，并且在azure生物系统下成像。代表性结果示出于图5A中，呈现了抗C1s抗体2-8的结果，

其中左侧的印迹来自在非还原条件下运行的凝胶，并且右侧的印迹来自在还原条件下运行的凝胶。在不使用还原剂(左)的情况下运行的凝胶的印迹上，泳道1示出了抗体2-8与全长人C1s(HuC1s)的两(2)个主要带结合，其中顶带对应于全长HuC1s并且底带对应于自动切割的重链，泳道2未示出可检测的抗体2-8与全长小鼠C1s(MoC1s)，泳道3示出了抗体2-8与截短的人C1s M151(HuC1s(M151))的多个带结合，并且泳道4示出了抗体2-8与截短的人C1s NHC(HuC1s(NHC))的几个高分子量带结合。在使用还原剂的情况下运行的凝胶的印迹(右)上，泳道1示出了低水平的抗体2-8与对应于全长人C1s(HuC1s)的自动切割的重链的带结合，泳道2未示出可检测的抗体2-8与全长小鼠C1s(MoC1s)，泳道3示出了低水平的抗体2-8与截短的人C1s M151(HuC1s(M151))的单体结合，并且泳道4示出了低水平的抗体2-8与截短的人C1s NHC(HuC1s(NHC))的单体结合。

使用抗C1s抗体2-7、hz2-7(H1L2)和hz2-8(H1L2)的结果示出了与图5A中所示的针对抗体2-8的结果相同的结合模式(数据未示出)。这些结果示出了抗C1s抗体2-7、抗C1s抗体2-8、抗C1s抗体hz2-7(H1L2)和抗C1s抗体hz2-8(H1L2)的结合位点位于NHC上的人C1sM151区内。

实例6.使用截短的C1S和具有点突变的C1S的抗C1S抗体的表位定位

如实例4-5中所指示的，本文所公开的抗C1s抗体的表位位于人C1s(M151)(SEQ IDNO:107)内。人C1s(M151)是位于人C1s NHC内的自动切割位点(R422-I423)上游的最后151个氨基酸。为了进一步限定人C1s(M151)内的表位，设计了另外的截短的C1s突变体。此突变体被命名为人C1s缺失突变体3(NHCΔ33)(SEQ ID NO:111)，并且缺少与人C1s NHC的G390-R422片段(图5B用于比对)相对应的最后33个氨基酸。将C1s(NHCΔ33)(SEQ ID NO:111)克隆并用C末端6xHis标签进行表达，并且在内部进行其表达和纯化。图5B示出了在这些实验中使用的全长人C1s、HuC1s(SEQ ID NO:99)、人C1s缺失突变体1(M151)、HuC1s(M151)(SEQID NO:107)、人缺失突变体2(NHC)、HuC1s(NHC)(SEQ ID NO:109)以及人C1s缺失突变体3(NHCΔ33)、人C1s(NHCΔ33)(SEQ ID NO:111)的示意性比较和比对。

如实例4中所述，通过ELISA进行各种抗C1s抗体与人C1s(NHCΔ33)(SEQ ID NO:111)的结合，并且结果示出于图6A中。Hz2-7(H1L2)示出了几乎不与人C1s(NHCΔ33)结合，而hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)示出了与C1s(NHCΔ33)强结合，其中EC₅₀值分别为8ng/ml和15ng/ml。如所预期的，人IgG1未示出结合。人源化2-7变体对人源化2-8变体的这种不同的结合谱有力地表明抗体2-7和2-8与人C1s(M151)内的不同表位结合，如实例4所证明的。结果指示hz2-7(H1L2)的表位在位于切割位点(G390-R422)上游的33个氨基酸内，并且hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)的表位位于M151的其余部分(Y272-A389)内。

为了鉴定hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)的表位，单独地或以双/三重组合将各种点突变引入到人C1s，并且获得了命名为M1-M20(SEQ ID NO:112-128和141-143)的20个人C1s突变体，如表2中所示。

对于所有点突变，人C1s的某一位置处的残基被小鼠C1s的对应残基取代。在突变的22个残基中，6个残基在人C1s与大鼠C1s之间是相同的，10个残基在大鼠C1s与小鼠C1s之间相同，并且剩余6个残基是人C1s、大鼠C1s和小鼠C1s的对应位置处的独特残基。将人C1s的M1-M20(SEQ ID NO:112-128和141-143)用C末端6xHis标签进行克隆，在内部表达和纯化。

表2：人C1s的点突变以及大鼠和小鼠C1s的对应残基

如实例4中所述，通过ELISA测量抗C1s抗体与人C1s的突变体M1-M20的结合，并且结果示出于图6B-6U中。包含hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2G80A/T82A)在内的所有抗C1s人源化变体维持了与大多数(20种中的16种)C1s突变体的强结合性质，包含M1(图6B)、M2(图6C)、M3(图6D)、M4(图6E)、M7(图6H)、M8(图6I)、M10(图6K)、M11(图6L)、M12(图6M)、M13(图6N)、M15(图6P)、M16(图6Q)、M17(图6R)、M18(图6S)、M19(图6T)和M20(图6U)。同型对照人IgG1未示出与任何突变体结合。这些结果有力地表明22个点突变中的20个点突变(即，M277I、P278S、P280A、E282K、D283I、P285A、V288T、A292D、Q303K、A320S、N329D、K331Q、D343Y、S349P、E351A、S360N、R368H、N380H、G381E和G382E)对hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)与C1s的结合没有影响。因此，20个残基对于所检查的抗C1s抗体中的任何抗C1s抗体都不是关键结合位点。

如图6A中所示，hz2-7(H1L2)的结合位点位于C1s NHC的最后33个氨基酸(G390-R422)内。人C1s的M1-M20预期不会影响hz2-7(H1L2)的结合，因为没有一个点突变位于此区内。令人惊讶的是，仅含有单点突变R316H的人C1s(SEQ ID NO:125)的M14完全消除了hz2-7(H1L2)的结合，而其对hz2-8(H1L2 G80A)或hz2-8(H1L2G80A/T82A)的结合没有影响(图6O)。人IgG1未示出如预期那样的与M14的结合(图6O)。这些结果有力地表明，除了G390-R422之外，R316是参与hz2-7(H1L2)的结合的另一个关键残基，进一步证实了先前的指示：hz2-7(H1L2)的结合位点与hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)的结合位点不同。

此外，如图6J中所示，涵盖点突变K336G、D343Y和E351A的突变体M9(SEQ ID NO:120)完全消除了hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)的结合，而hz2-7(H1L2)以高效力保持结合。如先前所证明的，D343Y和E351A对于所检查的抗C1s抗体中的任何抗C1s抗体的结合都不重要(图6H-6I)。因此，K336是(或可能是)hz2-8(H1L2G80A)和hz2-8(H1L2G80A/T82A)结合的关键残基。除了M9之外，K336G点突变也存在于人C1s的M5和M6中，单独地(M5)存在或与其它非必需残基(M6)组合地存在。如图6F-6G中所示，K336G单突变导致hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)的结合显著降低，但是对hz2-7(H1L2)没有影响，这证实了K336是hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)与C1s结合的关键残基，构成了2-8抗体的独特表位。

总之，hz2-7(H1L2)的表位包括R316和G390-R422，并且hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)与C1s结合的关键残基是K336。结果表明，抗体2-7对抗体2-8的表位是不同的，但是全部都出现在人C1s的中间151个氨基酸区内(M151)。

实例7.抗C1S抗体对补体介导的抗体致敏绵羊红细胞裂解的抑制

包被有兔抗绵羊红细胞抗血清(溶血素)的绵羊红细胞，也被称为抗体致敏绵羊红细胞(EA)，传统上已经用于测定血清样品中补体经典途径的活性，其中这些测定允许测定血清的CH50滴度。利用可商购获得的EA(补体科技公司，#B202)，对抗C1s抗体对补体介导的EA裂解的抑制进行评估。简言之，首先将包含hz2-7(H1L2)、hz2-8(H1L2)、hz2-8(H1L2G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)在内的人源化抗C1s变体连续稀释在GVB++缓冲液中(补体科技公司，目录#B100，制造商成分清单：0.1％明胶、5mM佛罗拿、145mM NaCl、0.025％NaN₃、0.15mM氯化钙、0.5mM氯化镁，pH 7.3)。然后，将经稀释的抗C1s抗体与正常人血清(NHS，图7A)或食蟹猴血清(CMS，图7B)混合，以达到最终血清浓度1％。在添加EA细胞之前，使抗体和血清混合物在室温下平衡。对于每个反应，使用大约0.5-1x 10⁸个EA细胞。为了确定0％裂解背景对照值，将EA细胞仅与缓冲液(“无血清对照”)混合。为了测定100％裂解对照值，用水替代GVB++缓冲液。将EA细胞与抗体和血清轻轻混合，然后将混合物在周期性混合下在37℃下温育1小时。在温育之后，将剩余的EA细胞旋转沉降，并且通过测量OD_540nm来测定上清液的吸光度。为了计算在特定温育条件下发生的裂解百分比，首先从每个吸光度读数中减去0％裂解背景的值，并且然后将结果相对于100％裂解对照(减去0％裂解背景)归一化以测定所发生的裂解百分比。

抗C1s抗体对人补体抑制的结果示出于图7A中。抗体hz2-8(H1L2)是补体介导的EA裂解的最有效抑制剂，其中IC₅₀为0.2μg/ml。各自是hz2-8(H1L2)的序列优化变体的抗体hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2 G80A/T82A)也有效地抑制人补体介导的EA裂解，其中类似的IC₅₀介于0.4μg/ml至0.5μg/ml之间。hz2-7(H1L2)在这种情况下是最弱的抑制剂，其中IC₅₀为4.1μg/ml，并且在所测试的最高浓度(4μg/ml)下最大抑制仅达到约50％。在图7B中所示的食蟹猴补体抑制的结果与人血清结果类似，其中hz2-8(H1L2)是食蟹猴补体介导的EA裂解的最有效的抑制剂，其中IC₅₀为0.1μg/ml，并且其变体hz2-8(H1L2 G80A)和hz2-8(H1L2G80A/T82A)也维持高抑制效力，其中类似的IC₅₀值介于0.3μg/ml至0.4μg/ml之间。Hz2-7(H1L2)抑制食蟹猴补体比抑制人补体更有效，其中IC₅₀为0.8μg/ml，并且抑制程度达到最大(图7B)。这些结果有力地支持各种抗C1s抗体在抑制经典补体途径中的作用，这与来自实例2的发现一致。

虽然已经参考本发明的某些具体实施例描述了本发明，但是本领域的技术人员应当理解，在不偏离本发明的原理的情况下，可以对具体描述的实施例进行改变和修改，本发明的原理旨在仅由所附权利要求的范围限制。

序列表

<110> 迈威(美国)生物治疗有限公司(MABWELL THERAPEUTICS, INC.)

<120> 抗C1S抗体和其用途

<130> 1121-102PCT

<140>

<141>

<150> 63/342,544

<151> 2022-05-16

<150> 63/221,131

<151> 2021-07-13

<160> 143

<170> PatentIn第3.5版

<210> 1

<211> 141

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 抗体2-7 VH的蛋白质序列

<400> 1

Met Tyr Leu Gly Leu Asn Cys Val Phe Ile Val Phe Leu Leu Lys Gly

1 5 10 15

Val Gln Ser Glu Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Pro

20 25 30

Pro Gly Gly Ser Met Lys Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe

35 40 45

Ser Asn Tyr Phe Met Asn Trp Val Arg Gln Ser Pro Glu Lys Gly Leu

50 55 60

Glu Trp Val Ala Glu Ile Arg Leu Lys Phe Thr Asn Tyr Ala Thr His

65 70 75 80

Tyr Ala Glu Ser Val Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser

85 90 95

Lys Ser Ser Val Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr

100 105 110

Gly Ile Tyr Tyr Cys Thr Arg Asp Tyr Gly Ser Arg Asn Gly Tyr Phe

115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser

130 135 140

<210> 2

<211> 10

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 2-7 HC CDR-1

<400> 2

Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Phe Met Asn

1 5 10

<210> 3

<211> 19

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 2-7 HC CDR-2

<400> 3

Glu Ile Arg Leu Lys Phe Thr Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Glu Ser

1 5 10 15

Val Glu Gly

<210> 4

<211> 11

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 2-7 HC CDR-3

<400> 4

Asp Tyr Gly Ser Arg Asn Gly Tyr Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 5

<211> 423

<212> DNA

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 抗体2-7 VH的核苷酸序列

<400> 5

atgtacttgg gactgaactg tgtattcata gtttttctct taaaaggtgt ccagagtgaa 60

gtgaagcttg aggagtctgg aggaggcttg gtgccacctg gaggatccat gaaactctcc 120

tgtgttgcct ctggattcac tttcagtaac tactttatga actgggtccg ccagtctcca 180

gagaaggggc ttgagtgggt tgctgaaatt agattgaaat ttactaatta tgcaacacat 240

tatgcggagt ctgtggaagg gaggttcacc atctcaagag atgattccaa aagtagtgtc 300

tacctccaaa tgaacaactt aagagctgaa gacactggca tttattactg taccagggac 360

tacggtagta ggaatgggta ctttgactac tggggccaag gcaccactct cacagtctcc 420

tca 423

<210> 6

<211> 132

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 抗体2-7 VL的蛋白质序列

<400> 6

Met Arg Cys Leu Ala Glu Phe Leu Gly Leu Leu Val Leu Trp Ile Pro

1 5 10 15

Gly Ala Ile Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Pro Ser Val Pro

20 25 30

Val Thr Pro Gly Glu Ser Val Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser

35 40 45

Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Phe Leu Tyr Trp Phe Leu Gln Arg

50 55 60

Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala

65 70 75 80

Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ala Phe

85 90 95

Thr Leu Arg Val Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile Tyr Tyr

100 105 110

Cys Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys

115 120 125

Leu Glu Ile Lys

130

<210> 7

<211> 16

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 2-7 LC CDR-1

<400> 7

Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Phe Leu Tyr

1 5 10 15

<210> 8

<211> 7

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 2-7 LC CDR-2

<400> 8

Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 9

<211> 9

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 2-7 LC CDR-3

<400> 9

Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Tyr Thr

1 5

<210> 10

<211> 396

<212> DNA

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 抗体2-7 VL的核苷酸序列

<400> 10

atgaggtgcc tagctgagtt cctggggctg cttgtgctct ggatccctgg agccattggg 60

gatattgtga tgactcaggc tgcaccctct gtacctgtca ctcctggaga gtcagtatcc 120

atctcctgca ggtctagtaa gagtctcctg catagtaacg gcaacacttt cttgtattgg 180

ttcctacaga ggccaggcca gtctcctcag ctcctgatat atcggatgtc caaccttgcc 240

tcaggagtcc cagacaggtt cagtggcagt gggtcaggaa ctgctttcac actgagagtc 300

agtagagtgg aggctgagga tgtgggtatt tattactgta tgcaacatct agaatatccg 360

tacacgttcg gaggggggac caagctggaa ataaaa 396

<210> 11

<211> 135

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 抗体2-8 VH的蛋白质序列

<400> 11

Met Lys Cys Ser Trp Val Ile Phe Phe Leu Met Ala Val Val Thr Gly

1 5 10 15

Val Asn Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg

20 25 30

Pro Gly Ala Leu Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile

35 40 45

Lys Glu Tyr Tyr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu

50 55 60

Glu Trp Ile Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Ile Tyr Asp

65 70 75 80

Pro Lys Phe Gln Gly Lys Ala Ser Ile Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn

85 90 95

Thr Ala Tyr Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val

100 105 110

Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Arg Leu Phe Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

115 120 125

Thr Leu Val Thr Val Ser Ala

130 135

<210> 12

<211> 10

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 2-8 HC CDR-1

<400> 12

Gly Phe Asn Ile Lys Glu Tyr Tyr Met His

1 5 10

<210> 13

<211> 17

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 2-8 HC CDR-2

<400> 13

Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Ile Tyr Asp Pro Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 14

<211> 7

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 2-8 HC CDR-3

<400> 14

Ser Arg Leu Phe Phe Ala Tyr

1 5

<210> 15

<211> 405

<212> DNA

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 抗体2-8 VH的核苷酸序列

<400> 15

atgaaatgca gctgggtcat cttcttcctg atggcagtgg ttacaggggt caattcagag 60

gttcagctgc agcagtctgg ggctgaactt gtgaggccag gggccttagt caagttgtcc 120

tgcaaagctt ctggcttcaa cattaaagag tattatatgc attgggtgaa gcagaggcct 180

gaacagggcc tggagtggat tggatggatt gatcctgaga atggtgatac tatatatgac 240

ccgaagttcc agggcaaggc cagtataaca gcagacacat cctccaacac agcctacctg 300

caactcagca gcctgacatc tgaggacact gccgtctatt actgtgctag atcgagacta 360

ttctttgctt actggggcca agggactctg gtcactgtct ctgca 405

<210> 16

<211> 127

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 抗体2-8 VL的蛋白质序列

<400> 16

Met Glu Ser Gln Ile Gln Val Leu Val Phe Val Phe Leu Trp Leu Ser

1 5 10 15

Gly Val Asp Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser

20 25 30

Thr Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp

35 40 45

Val Arg Thr Ala Val Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro

50 55 60

Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp

65 70 75 80

Arg Phe Thr Gly Thr Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser

85 90 95

Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gln Tyr

100 105 110

Thr Thr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

<210> 17

<211> 11

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 2-8 LC CDR-1

<400> 17

Lys Ala Ser Gln Asp Val Arg Thr Ala Val Asp

1 5 10

<210> 18

<211> 7

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 2-8 LC CDR-2

<400> 18

Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr

1 5

<210> 19

<211> 9

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 2-8 LC CDR-3

<400> 19

Gln Gln Gln Tyr Thr Thr Pro Tyr Thr

1 5

<210> 20

<211> 381

<212> DNA

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 抗体2-8 VL的核苷酸序列

<400> 20

atggagtcac agattcaggt ccttgtattc gtgtttctct ggttgtctgg tgttgacgga 60

gacattgtaa tgacccagtc tcacaaattc atgtccacat cagtaggaga cagggtcagc 120

ttcacctgca aggccagtca ggatgtgcgc actgctgtag actggtatca acagaaacca 180

ggacaatctc ctaaactact gatttactcg gcatcctacc ggtacactgg agtccctgat 240

cgcttcactg gcactggatc tgggacggat ttcactttca ccatcagcag tgtgcaggct 300

gaagacctgg cagtttactt ctgtcagcaa caatatacta ctccgtacac gttcggaggg 360

gggaccaagc tggaaataaa a 381

<210> 21

<211> 146

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 抗体hz2-7 (H1L2) VH的蛋白质序列

<400> 21

Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser

1 5 10 15

Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly

20 25 30

Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala

35 40 45

Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Phe Met Asn Trp Val Arg Gln Ala

50 55 60

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Glu Ile Arg Leu Lys Phe Thr

65 70 75 80

Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile

85 90 95

Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu

100 105 110

Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Arg Asp Tyr Gly Ser

115 120 125

Arg Asn Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

130 135 140

Ser Ser

145

<210> 22

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-7(H1L2) HC CDR-1

<400> 22

Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Phe Met Asn

1 5 10

<210> 23

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-7(H1L2) HC CDR-2

<400> 23

Glu Ile Arg Leu Lys Phe Thr Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Asp Ser

1 5 10 15

Val Lys Gly

<210> 24

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-7(H1L2) HC CDR-3

<400> 24

Asp Tyr Gly Ser Arg Asn Gly Tyr Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 25

<211> 438

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 抗体hz2-7 (H1L2) VH的核苷酸序列

<400> 25

atggacccca agggcagcct gagctggaga atcctgctgt tcctgagcct ggccttcgag 60

ctgagctacg gcgaggttca gctgctcgag agcggaggtg gtctggtgca gcctggcggt 120

agcctgaggc tgagctgcgc cgcaagcggc tttaccttca gcaactactt tatgaattgg 180

gtgaggcagg caccgggcaa gggcctggag tgggtaagcg agatcaggct gaagttcacc 240

aattacgcta cccattacgc cgacagcgtg aagggccgct tcaccatcag cagggacgac 300

tctaagagca ccctgtacct gcagatgaac tcactgaggg ccgaggacac cgccgtgtac 360

tactgcacta gggactacgg cagcaggaac ggctacttcg actactgggg ccagggcact 420

ctggtcaccg tgagcagc 438

<210> 26

<211> 132

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 抗体hz2-7 (H1L2) VL的蛋白质序列

<400> 26

Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro

1 5 10 15

Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro

20 25 30

Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser

35 40 45

Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Phe Leu Tyr Trp Phe Leu Gln Lys

50 55 60

Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala

65 70 75 80

Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe

85 90 95

Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr

100 105 110

Cys Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys

115 120 125

Leu Glu Ile Lys

130

<210> 27

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-7(H1L2) LC CDR-1

<400> 27

Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Phe Leu Tyr

1 5 10 15

<210> 28

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-7(H1L2) LC CDR-2

<400> 28

Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 29

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-7(H1L2) LC CDR-3

<400> 29

Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Tyr Thr

1 5

<210> 30

<211> 396

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 抗体hz2-7 (H1L2) VL的核苷酸序列

<400> 30

atggagaccg acaccctgct gctctgggtg ctgctgctct gggtgcccgg ctccaccgga 60

gacatcgtga tgacccagac acccctgagc ctgcccgtga cccccggtga gcccgccagc 120

atcagctgca ggtcaagcaa gagcctcctg cacagcaacg gcaacacctt tctgtactgg 180

ttcctgcaga agccgggaca gagcccccag ctgctgatct acaggatgag caacctggcc 240

tctggcgtgc ccgacaggtt cagcggcagt ggcagcggaa ccgacttcac cctgaagatt 300

agcagggtgg aggccgagga cgtgggcgtg tactactgta tgcagcacct ggagtacccc 360

tacaccttcg gcggagggac caaactggaa atcaag 396

<210> 31

<211> 146

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 抗体hz2-7 (H1L2 G131A) VH的蛋白质序列

<400> 31

Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser

1 5 10 15

Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly

20 25 30

Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala

35 40 45

Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Phe Met Asn Trp Val Arg Gln Ala

50 55 60

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Glu Ile Arg Leu Lys Phe Thr

65 70 75 80

Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile

85 90 95

Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu

100 105 110

Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Arg Asp Tyr Gly Ser

115 120 125

Arg Asn Ala Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

130 135 140

Ser Ser

145

<210> 32

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-7(H1L2 G131A) HC CDR-1

<400> 32

Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Phe Met Asn

1 5 10

<210> 33

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-7(H1L2 G131A) HC CDR-2

<400> 33

Glu Ile Arg Leu Lys Phe Thr Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Asp Ser

1 5 10 15

Val Lys Gly

<210> 34

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-7(H1L2 G131A) HC CDR-3

<400> 34

Asp Tyr Gly Ser Arg Asn Ala Tyr Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 35

<211> 438

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 抗体hz2-7 (H1L2 G131A) VH的核苷酸序列

<400> 35

atggacccca agggcagcct gagctggaga atcctgctgt tcctgagcct ggccttcgag 60

ctgagctacg gcgaggttca gctgctcgag agcggaggtg gtctggtgca gcctggcggt 120

agcctgaggc tgagctgcgc cgcaagcggc tttaccttca gcaactactt tatgaattgg 180

gtgaggcagg caccgggcaa gggcctggag tgggtaagcg agatcaggct gaagttcacc 240

aattacgcta cccattacgc cgacagcgtg aagggccgct tcaccatcag cagggacgac 300

tctaagagca ccctgtacct gcagatgaac tcactgaggg ccgaggacac cgccgtgtac 360

tactgcacta gggactacgg cagcaggaac gcctacttcg actactgggg ccagggcact 420

ctggtcaccg tgagcagc 438

<210> 36

<211> 132

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 抗体hz2-7 (H1L2 G131A) VL的蛋白质序列

<400> 36

Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro

1 5 10 15

Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro

20 25 30

Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser

35 40 45

Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Phe Leu Tyr Trp Phe Leu Gln Lys

50 55 60

Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala

65 70 75 80

Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe

85 90 95

Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr

100 105 110

Cys Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys

115 120 125

Leu Glu Ile Lys

130

<210> 37

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-7(H1L2 G131A) LC CDR-1

<400> 37

Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Phe Leu Tyr

1 5 10 15

<210> 38

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-7(H1L2 G131A) LC CDR-2

<400> 38

Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 39

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-7(H1L2 G131A) LC CDR-3

<400> 39

Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Tyr Thr

1 5

<210> 40

<211> 396

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 抗体hz2-7 (H1L2 G131A) VL的核苷酸序列

<400> 40

atggagaccg acaccctgct gctctgggtg ctgctgctct gggtgcccgg ctccaccgga 60

gacatcgtga tgacccagac acccctgagc ctgcccgtga cccccggtga gcccgccagc 120

atcagctgca ggtcaagcaa gagcctcctg cacagcaacg gcaacacctt tctgtactgg 180

ttcctgcaga agccgggaca gagcccccag ctgctgatct acaggatgag caacctggcc 240

tctggcgtgc ccgacaggtt cagcggcagt ggcagcggaa ccgacttcac cctgaagatt 300

agcagggtgg aggccgagga cgtgggcgtg tactactgta tgcagcacct ggagtacccc 360

tacaccttcg gcggagggac caaactggaa atcaag 396

<210> 41

<211> 140

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 抗体hz2-8 (H1L2) VH的蛋白质序列

<400> 41

Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser

1 5 10 15

Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly

20 25 30

Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala

35 40 45

Ser Gly Phe Asn Ile Lys Glu Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala

50 55 60

Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly

65 70 75 80

Asp Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala

85 90 95

Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser

100 105 110

Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Arg Leu Phe Phe Ala

115 120 125

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

130 135 140

<210> 42

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8(H1L2) HC CDR-1

<400> 42

Gly Phe Asn Ile Lys Glu Tyr Tyr Met His

1 5 10

<210> 43

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8(H1L2) HC CDR-2

<400> 43

Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 44

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8(H1L2) HC CDR-3

<400> 44

Ser Arg Leu Phe Phe Ala Tyr

1 5

<210> 45

<211> 420

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 抗体hz2-8 (H1L2) VH的核苷酸序列

<400> 45

atggacccca agggcagcct gagctggaga atcctgctgt tcctgagcct ggccttcgag 60

ctgagctacg gccaggtgca gctggtgcag agtggggccg aggtgaagaa gccgggagcc 120

agcgtgaagg tgagctgcaa ggccagcggc ttcaacatca aggagtacta catgcactgg 180

gtgaggcaag cgccggaaca gggcctggag tggatgggct ggatcgaccc cgagaacggc 240

gataccatct acgcccagaa gttccagggc agggtgacca tcaccgctga caccagcacc 300

aacaccgcct acatggagct gagcagcctg agaagcgagg acacagccgt gtactactgc 360

gccaggtcac gcttgttctt cgcctactgg ggccaaggca ccctggtgac cgtgagctct 420

<210> 46

<211> 127

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 抗体hz2-8 (H1L2) VL的蛋白质序列

<400> 46

Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro

1 5 10 15

Gly Ser Thr Gly Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser Leu Ser

20 25 30

Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp

35 40 45

Val Arg Thr Ala Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro

50 55 60

Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser

65 70 75 80

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

85 90 95

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gln Tyr

100 105 110

Thr Thr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

<210> 47

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8(H1L2) LC CDR-1

<400> 47

Arg Ala Ser Gln Asp Val Arg Thr Ala Leu Asp

1 5 10

<210> 48

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8(H1L2) LC CDR-2

<400> 48

Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser

1 5

<210> 49

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8(H1L2) LC CDR-3

<400> 49

Gln Gln Gln Tyr Thr Thr Pro Tyr Thr

1 5

<210> 50

<211> 381

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 抗体hz2-8 (H1L2) VL的核苷酸序列

<400> 50

atggagaccg acaccctgct gctctgggtg ctgctgctct gggtgcccgg ctccaccgga 60

gacatccaga tgacccaaag cccaaagagc ctgagcgcca gcgtgggcga cagggtgacg 120

atcacctgca gagccagcca ggacgtgagg accgccctgg attggtatca gcagaagccc 180

ggtcagagcc ccaagctcct gatctacagc gcaagctaca ggtacagcgg cgtgcccagc 240

aggttcagcg gctccggcag cggcaccgac ttcactctta ccatcagctc actgcagccc 300

gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag cagtacacca ccccctacac cttcggccag 360

ggcaccaagt tggagatcaa g 381

<210> 51

<211> 140

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 抗体hz2-8 (H1L2 G80A/T82A)的蛋白质序列

<400> 51

Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser

1 5 10 15

Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly

20 25 30

Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala

35 40 45

Ser Gly Phe Asn Ile Lys Glu Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala

50 55 60

Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Ala

65 70 75 80

Asp Ala Ile Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala

85 90 95

Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser

100 105 110

Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Arg Leu Phe Phe Ala

115 120 125

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

130 135 140

<210> 52

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8 (H1L2 G80A/T82A) HC CDR-1

<400> 52

Gly Phe Asn Ile Lys Glu Tyr Tyr Met His

1 5 10

<210> 53

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8 (H1L2 G80A/T82A) HC CDR-2

<400> 53

Trp Ile Asp Pro Glu Asn Ala Asp Ala Ile Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 54

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8 (H1L2 G80A/T82A) HC CDR-3

<400> 54

Ser Arg Leu Phe Phe Ala Tyr

1 5

<210> 55

<211> 420

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 抗体hz2-8 (H1L2 G80A/T82A) VH的核苷酸序列

<400> 55

atggacccta agggctctct gtcttggaga atcctgctgt tcctgagcct ggccttcgag 60

ctgtcttatg gccaggtgca gctggtgcag tctggcgccg aagtgaaaaa gcctggcgcc 120

tctgtgaagg tgtcctgcaa ggcctctggc ttcaacatca aagaatatta catgcactgg 180

gtccgacagg cccctgagca aggattggaa tggatgggct ggatcgaccc cgagaacgcc 240

gatgccatct acgcccagaa attccagggc agagtgacca tcaccgccga cacctctacc 300

aacaccgcct acatggaact gtccagcctg agatctgagg acaccgccgt gtactactgc 360

gcccggtcca gactgttctt cgcctattgg ggccagggca ccctggtcac agtttcttcc 420

<210> 56

<211> 127

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 抗体hz2-8 (H1L2 G80A/T82A) VL的蛋白质序列

<400> 56

Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro

1 5 10 15

Gly Ser Thr Gly Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser Leu Ser

20 25 30

Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp

35 40 45

Val Arg Thr Ala Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro

50 55 60

Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser

65 70 75 80

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

85 90 95

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gln Tyr

100 105 110

Thr Thr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

<210> 57

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8 (H1L2 G80A/T82A) LC CDR-1

<400> 57

Arg Ala Ser Gln Asp Val Arg Thr Ala Leu Asp

1 5 10

<210> 58

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8 (H1L2 G80A/T82A) LC CDR-2

<400> 58

Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser

1 5

<210> 59

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8 (H1L2 G80A/T82A) LC CDR-3

<400> 59

Gln Gln Gln Tyr Thr Thr Pro Tyr Thr

1 5

<210> 60

<211> 381

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 抗体hz2-8 (H1L2 G80A/T82A) VL的核苷酸序列

<400> 60

atggaaaccg acacactgct gctgtgggtg ctgctcttgt gggtgccagg atctaccggc 60

gacatccaga tgacccagtc tccaaagtct ctgtccgcct ccgtgggcga cagagtgacc 120

atcacctgta gagcctctca ggacgtgcgg accgctctgg attggtatca gcagaagcct 180

ggccagtctc ctaagctgct gatctactcc gcctcctacc ggtactctgg cgtgccctcc 240

agattctccg gctctggctc tggcaccgac tttaccctga caatctccag cctgcagcct 300

gaggacttcg ccacctacta ctgccagcaa cagtacacca caccttacac cttcggccag 360

ggcaccaagc tggaaatcaa g 381

<210> 61

<211> 140

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 抗体hz2-8 (H1L2 G80A) VH的蛋白质序列

<400> 61

Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser

1 5 10 15

Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly

20 25 30

Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala

35 40 45

Ser Gly Phe Asn Ile Lys Glu Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala

50 55 60

Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Ala

65 70 75 80

Asp Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala

85 90 95

Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser

100 105 110

Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Arg Leu Phe Phe Ala

115 120 125

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser

130 135 140

<210> 62

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8 (H1L2 G80A) HC CDR-1

<400> 62

Gly Phe Asn Ile Lys Glu Tyr Tyr Met His

1 5 10

<210> 63

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8 (H1L2 G80A) HC CDR-2

<400> 63

Trp Ile Asp Pro Glu Asn Ala Asp Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 64

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8 (H1L2 G80A) HC CDR-3

<400> 64

Ser Arg Leu Phe Phe Ala Tyr

1 5

<210> 65

<211> 420

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 抗体hz2-8 (H1L2 G80A) VH的核苷酸序列

<400> 65

atggacccta agggctctct gtcttggaga atcctgctgt tcctgagcct ggccttcgag 60

ctgtcttatg gccaggtgca gctggtgcag tctggcgccg aagtgaaaaa gcctggcgcc 120

tctgtgaagg tgtcctgcaa ggcctctggc ttcaacatca aagaatatta catgcactgg 180

gtccgacagg cccctgagca aggattggaa tggatgggct ggatcgaccc cgagaacgcc 240

gataccatct acgcccagaa attccagggc agagtgacca tcaccgccga cacctctacc 300

aacaccgcct acatggaact gtccagcctg agatctgagg acaccgccgt gtactactgc 360

gcccggtcca gactgttctt cgcctattgg ggccagggca ccctggtcac agtttcttcc 420

<210> 66

<211> 127

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 抗体hz2-8 (H1L2 G80A) VL的蛋白质序列

<400> 66

Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro

1 5 10 15

Gly Ser Thr Gly Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser Leu Ser

20 25 30

Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp

35 40 45

Val Arg Thr Ala Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro

50 55 60

Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser

65 70 75 80

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

85 90 95

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gln Tyr

100 105 110

Thr Thr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

115 120 125

<210> 67

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8 (H1L2 G80A) LC CDR-1

<400> 67

Arg Ala Ser Gln Asp Val Arg Thr Ala Leu Asp

1 5 10

<210> 68

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8 (H1L2 G80A) LC CDR-2

<400> 68

Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser

1 5

<210> 69

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> hz2-8 (H1L2 G80A) LC CDR-3

<400> 69

Gln Gln Gln Tyr Thr Thr Pro Tyr Thr

1 5

<210> 70

<211> 381

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 抗体hz2-8 (H1L2 G80A) VL的核苷酸序列

<400> 70

atggaaaccg acacactgct gctgtgggtg ctgctcttgt gggtgccagg atctaccggc 60

gacatccaga tgacccagtc tccaaagtct ctgtccgcct ccgtgggcga cagagtgacc 120

atcacctgta gagcctctca ggacgtgcgg accgctctgg attggtatca gcagaagcct 180

ggccagtctc ctaagctgct gatctactcc gcctcctacc ggtactctgg cgtgccctcc 240

agattctccg gctctggctc tggcaccgac tttaccctga caatctccag cctgcagcct 300

gaggacttcg ccacctacta ctgccagcaa cagtacacca caccttacac cttcggccag 360

ggcaccaagc tggaaatcaa g 381

<210> 71

<211> 471

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体2-7 HC蛋白质序列

<400> 71

Met Tyr Leu Gly Leu Asn Cys Val Phe Ile Val Phe Leu Leu Lys Gly

1 5 10 15

Val Gln Ser Glu Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Pro

20 25 30

Pro Gly Gly Ser Met Lys Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe

35 40 45

Ser Asn Tyr Phe Met Asn Trp Val Arg Gln Ser Pro Glu Lys Gly Leu

50 55 60

Glu Trp Val Ala Glu Ile Arg Leu Lys Phe Thr Asn Tyr Ala Thr His

65 70 75 80

Tyr Ala Glu Ser Val Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser

85 90 95

Lys Ser Ser Val Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr

100 105 110

Gly Ile Tyr Tyr Cys Thr Arg Asp Tyr Gly Ser Arg Asn Gly Tyr Phe

115 120 125

Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr

130 135 140

Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser

145 150 155 160

Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu

165 170 175

Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His

180 185 190

Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser

195 200 205

Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys

210 215 220

Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu

225 230 235 240

Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro

245 250 255

Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys

260 265 270

Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val

275 280 285

Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp

290 295 300

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr

305 310 315 320

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp

325 330 335

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu

340 345 350

Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg

355 360 365

Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys

370 375 380

Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp

385 390 395 400

Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys

405 410 415

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser

420 425 430

Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser

435 440 445

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser

450 455 460

Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys

465 470

<210> 72

<211> 1413

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长抗体2-7 HC核苷酸序列

<400> 72

atgtacttgg gactgaactg tgtattcata gtttttctct taaaaggtgt ccagagtgaa 60

gtgaagcttg aggagtctgg aggaggcttg gtgccacctg gaggatccat gaaactctcc 120

tgtgttgcct ctggattcac tttcagtaac tactttatga actgggtccg ccagtctcca 180

gagaaggggc ttgagtgggt tgctgaaatt agattgaaat ttactaatta tgcaacacat 240

tatgcggagt ctgtggaagg gaggttcacc atctcaagag atgattccaa aagtagtgtc 300

tacctccaaa tgaacaactt aagagctgaa gacactggca tttattactg taccagggac 360

tacggtagta ggaatgggta ctttgactac tggggccaag gcaccactct cacagtctcc 420

tcagccagca ccaagggccc ttccgtgttt ccactggccc cctcctctaa atccacatct 480

ggcggcaccg ccgccctggg ctgtctggtg aaggactact tcccagagcc tgtgacagtg 540

tcctggaact ctggcgccct gacatccggc gtgcacacat ttccagccgt gctgcagagc 600

tccggcctgt acagcctgtc tagcgtggtg acagtgccct cctctagcct gggcacacag 660

acctatatct gcaacgtgaa tcacaagcca agcaatacca aggtggacaa gaaggtggag 720

cccaagtcct gtgataagac acacacctgc cccccttgtc ctgctcccga gctgctgggc 780

ggccctagcg tgttcctgtt tccacccaag cctaaggaca ccctgatgat ctcccggaca 840

cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg tctcacgagg atcctgaggt gaagttcaac 900

tggtatgtgg atggcgtgga ggtgcacaat gccaagacca agcccagaga ggagcagtac 960

aactctacat atagggtggt gagcgtgctg accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 1020

aaggagtata agtgcaaggt gtccaataag gccctgcccg cccccatcga gaagacaatc 1080

agcaaggcca agggccagcc tcgggagcca caggtgtaca ccctgcctcc atccagagac 1140

gagctgacaa agaaccaggt gtctctgaca tgtctggtga agggcttcta tcctagcgat 1200

atcgccgtgg agtgggagtc caatggccag ccagagaaca attacaagac cacaccccct 1260

gtgctggact ccgatggctc cttctttctg tattccaagc tgaccgtgga taagtctcgg 1320

tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgttcc gtgatgcacg aagccctgca taatcactat 1380

actcagaaat ccctgtccct gtcacctgga aag 1413

<210> 73

<211> 238

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体2-7 LC蛋白质序列

<400> 73

Met Arg Cys Leu Ala Glu Phe Leu Gly Leu Leu Val Leu Trp Ile Pro

1 5 10 15

Gly Ala Ile Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ala Ala Pro Ser Val Pro

20 25 30

Val Thr Pro Gly Glu Ser Val Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser

35 40 45

Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Phe Leu Tyr Trp Phe Leu Gln Arg

50 55 60

Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala

65 70 75 80

Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ala Phe

85 90 95

Thr Leu Arg Val Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile Tyr Tyr

100 105 110

Cys Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys

115 120 125

Leu Glu Ile Lys Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro

130 135 140

Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu

145 150 155 160

Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn

165 170 175

Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser

180 185 190

Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala

195 200 205

Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly

210 215 220

Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

225 230 235

<210> 74

<211> 714

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长抗体2-7 LC核苷酸序列

<400> 74

atgaggtgcc tagctgagtt cctggggctg cttgtgctct ggatccctgg agccattggg 60

gatattgtga tgactcaggc tgcaccctct gtacctgtca ctcctggaga gtcagtatcc 120

atctcctgca ggtctagtaa gagtctcctg catagtaacg gcaacacttt cttgtattgg 180

ttcctacaga ggccaggcca gtctcctcag ctcctgatat atcggatgtc caaccttgcc 240

tcaggagtcc cagacaggtt cagtggcagt gggtcaggaa ctgctttcac actgagagtc 300

agtagagtgg aggctgagga tgtgggtatt tattactgta tgcaacatct agaatatccg 360

tacacgttcg gaggggggac caagctggaa ataaaaacag tggccgcccc aagcgtgttc 420

atctttcccc cttccgacga gcagctgaag tctggcaccg ccagcgtggt gtgcctgctg 480

aacaacttct accctcggga ggccaaggtc cagtggaagg tggataacgc cctgcagtct 540

ggcaatagcc aggagtccgt gaccgagcag gactctaagg atagcacata ttccctgtct 600

agcaccctga cactgagcaa ggccgattac gagaagcaca aggtgtatgc ctgtgaagtc 660

acccatcagg ggctgtcatc acccgtcact aagtcattca atcgcggaga atgc 714

<210> 75

<211> 465

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体2-8 HC蛋白质序列

<400> 75

Met Lys Cys Ser Trp Val Ile Phe Phe Leu Met Ala Val Val Thr Gly

1 5 10 15

Val Asn Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg

20 25 30

Pro Gly Ala Leu Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Asn Ile

35 40 45

Lys Glu Tyr Tyr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu

50 55 60

Glu Trp Ile Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Ile Tyr Asp

65 70 75 80

Pro Lys Phe Gln Gly Lys Ala Ser Ile Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn

85 90 95

Thr Ala Tyr Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val

100 105 110

Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Arg Leu Phe Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

115 120 125

Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe

130 135 140

Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu

145 150 155 160

Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp

165 170 175

Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu

180 185 190

Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser

195 200 205

Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro

210 215 220

Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys

225 230 235 240

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro

245 250 255

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser

260 265 270

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp

275 280 285

Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn

290 295 300

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val

305 310 315 320

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu

325 330 335

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys

340 345 350

Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr

355 360 365

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr

370 375 380

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu

385 390 395 400

Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu

405 410 415

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys

420 425 430

Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu

435 440 445

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

450 455 460

Lys

465

<210> 76

<211> 1395

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长抗体2-8 HC核苷酸序列

<400> 76

atgaaatgca gctgggtcat cttcttcctg atggcagtgg ttacaggggt caattcagag 60

gttcagctgc agcagtctgg ggctgaactt gtgaggccag gggccttagt caagttgtcc 120

tgcaaagctt ctggcttcaa cattaaagag tattatatgc attgggtgaa gcagaggcct 180

gaacagggcc tggagtggat tggatggatt gatcctgaga atggtgatac tatatatgac 240

ccgaagttcc agggcaaggc cagtataaca gcagacacat cctccaacac agcctacctg 300

caactcagca gcctgacatc tgaggacact gccgtctatt actgtgctag atcgagacta 360

ttctttgctt actggggcca agggactctg gtcactgtct ctgcagccag caccaagggc 420

ccttccgtgt ttccactggc cccctcctct aaatccacat ctggcggcac cgccgccctg 480

ggctgtctgg tgaaggacta cttcccagag cctgtgacag tgtcctggaa ctctggcgcc 540

ctgacatccg gcgtgcacac atttccagcc gtgctgcaga gctccggcct gtacagcctg 600

tctagcgtgg tgacagtgcc ctcctctagc ctgggcacac agacctatat ctgcaacgtg 660

aatcacaagc caagcaatac caaggtggac aagaaggtgg agcccaagtc ctgtgataag 720

acacacacct gccccccttg tcctgctccc gagctgctgg gcggccctag cgtgttcctg 780

tttccaccca agcctaagga caccctgatg atctcccgga cacccgaggt gacctgcgtg 840

gtggtggacg tgtctcacga ggatcctgag gtgaagttca actggtatgt ggatggcgtg 900

gaggtgcaca atgccaagac caagcccaga gaggagcagt acaactctac atatagggtg 960

gtgagcgtgc tgaccgtgct gcaccaggac tggctgaacg gcaaggagta taagtgcaag 1020

gtgtccaata aggccctgcc cgcccccatc gagaagacaa tcagcaaggc caagggccag 1080

cctcgggagc cacaggtgta caccctgcct ccatccagag acgagctgac aaagaaccag 1140

gtgtctctga catgtctggt gaagggcttc tatcctagcg atatcgccgt ggagtgggag 1200

tccaatggcc agccagagaa caattacaag accacacccc ctgtgctgga ctccgatggc 1260

tccttctttc tgtattccaa gctgaccgtg gataagtctc ggtggcagca gggcaacgtg 1320

ttcagctgtt ccgtgatgca cgaagccctg cataatcact atactcagaa atccctgtcc 1380

ctgtcacctg gaaag 1395

<210> 77

<211> 233

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体2-8 LC蛋白质序列

<400> 77

Met Glu Ser Gln Ile Gln Val Leu Val Phe Val Phe Leu Trp Leu Ser

1 5 10 15

Gly Val Asp Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser His Lys Phe Met Ser

20 25 30

Thr Ser Val Gly Asp Arg Val Ser Phe Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp

35 40 45

Val Arg Thr Ala Val Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro

50 55 60

Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp

65 70 75 80

Arg Phe Thr Gly Thr Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser

85 90 95

Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Gln Tyr

100 105 110

Thr Thr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Thr

115 120 125

Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu

130 135 140

Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro

145 150 155 160

Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly

165 170 175

Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr

180 185 190

Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His

195 200 205

Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val

210 215 220

Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

225 230

<210> 78

<211> 699

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长抗体2-8 LC核苷酸序列

<400> 78

atggagtcac agattcaggt ccttgtattc gtgtttctct ggttgtctgg tgttgacgga 60

gacattgtaa tgacccagtc tcacaaattc atgtccacat cagtaggaga cagggtcagc 120

ttcacctgca aggccagtca ggatgtgcgc actgctgtag actggtatca acagaaacca 180

ggacaatctc ctaaactact gatttactcg gcatcctacc ggtacactgg agtccctgat 240

cgcttcactg gcactggatc tgggacggat ttcactttca ccatcagcag tgtgcaggct 300

gaagacctgg cagtttactt ctgtcagcaa caatatacta ctccgtacac gttcggaggg 360

gggaccaagc tggaaataaa aacagtggcc gccccaagcg tgttcatctt tcccccttcc 420

gacgagcagc tgaagtctgg caccgccagc gtggtgtgcc tgctgaacaa cttctaccct 480

cgggaggcca aggtccagtg gaaggtggat aacgccctgc agtctggcaa tagccaggag 540

tccgtgaccg agcaggactc taaggatagc acatattccc tgtctagcac cctgacactg 600

agcaaggccg attacgagaa gcacaaggtg tatgcctgtg aagtcaccca tcaggggctg 660

tcatcacccg tcactaagtc attcaatcgc ggagaatgc 699

<210> 79

<211> 475

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体hz2-7 (H1L2) HC蛋白质序列

<400> 79

Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser

1 5 10 15

Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly

20 25 30

Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala

35 40 45

Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Phe Met Asn Trp Val Arg Gln Ala

50 55 60

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Glu Ile Arg Leu Lys Phe Thr

65 70 75 80

Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile

85 90 95

Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu

100 105 110

Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Arg Asp Tyr Gly Ser

115 120 125

Arg Asn Gly Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

130 135 140

Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser

145 150 155 160

Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys

165 170 175

Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu

180 185 190

Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu

195 200 205

Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr

210 215 220

Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val

225 230 235 240

Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro

245 250 255

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe

260 265 270

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val

275 280 285

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe

290 295 300

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro

305 310 315 320

Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr

325 330 335

Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val

340 345 350

Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala

355 360 365

Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg

370 375 380

Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

385 390 395 400

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro

405 410 415

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser

420 425 430

Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln

435 440 445

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His

450 455 460

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

465 470 475

<210> 80

<211> 1428

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长抗体hz2-7 (H1L2) HC核苷酸序列

<400> 80

atggacccca agggcagcct gagctggaga atcctgctgt tcctgagcct ggccttcgag 60

ctgagctacg gcgaggttca gctgctcgag agcggaggtg gtctggtgca gcctggcggt 120

agcctgaggc tgagctgcgc cgcaagcggc tttaccttca gcaactactt tatgaattgg 180

gtgaggcagg caccgggcaa gggcctggag tgggtaagcg agatcaggct gaagttcacc 240

aattacgcta cccattacgc cgacagcgtg aagggccgct tcaccatcag cagggacgac 300

tctaagagca ccctgtacct gcagatgaac tcactgaggg ccgaggacac cgccgtgtac 360

tactgcacta gggactacgg cagcaggaac ggctacttcg actactgggg ccagggcact 420

ctggtcaccg tgagcagcgc tagcaccaag ggccccagcg tgttccctct ggcccccagc 480

agcaagagca ccagcggcgg aaccgccgcc ctgggctgcc tggtgaagga ctacttcccc 540

gagcccgtga ccgtgtcctg gaacagcggc gctctgacca gcggagtgca caccttccct 600

gccgtgctgc agagcagcgg cctgtactcc ctgagcagcg tggtgaccgt gcccagcagc 660

agcctgggca cccagaccta catctgcaac gtgaaccaca agccctccaa caccaaggtg 720

gacaagaagg tggagcctaa gagctgcgac aagacccaca cctgccctcc ctgccccgcc 780

cccgagctgc tgggcggacc cagcgtgttc ctgttccctc ccaagcccaa ggacaccctg 840

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gactggctga acggcaagga gtacaagtgc aaggtgagca acaaggccct gcccgctccc 1080

atcgagaaga ccatcagcaa ggccaagggc cagccccggg agcctcaggt gtacaccctg 1140

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gtggacaagt cccggtggca gcagggcaac gtgttcagct gcagcgtgat gcacgaggcc 1380

ctgcacaacc actacaccca gaagagcctg agcctgagcc ccggatag 1428

<210> 81

<211> 239

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体hz2-7 (H1L2) LC蛋白质序列

<400> 81

Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro

1 5 10 15

Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro

20 25 30

Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser

35 40 45

Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Phe Leu Tyr Trp Phe Leu Gln Lys

50 55 60

Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala

65 70 75 80

Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe

85 90 95

Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr

100 105 110

Cys Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys

115 120 125

Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro

130 135 140

Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu

145 150 155 160

Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp

165 170 175

Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp

180 185 190

Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys

195 200 205

Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln

210 215 220

Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

225 230 235

<210> 82

<211> 720

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长抗体hz2-7 (H1L2) LC核苷酸序列

<400> 82

atggagaccg acaccctgct gctctgggtg ctgctgctct gggtgcccgg ctccaccgga 60

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gtgacccacc agggactgtc tagccccgtg accaagagct tcaaccgggg cgagtgctaa 720

<210> 83

<211> 475

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体hz2-7 (H1L2 G131A) HC蛋白质序列

<400> 83

Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser

1 5 10 15

Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly

20 25 30

Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala

35 40 45

Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Phe Met Asn Trp Val Arg Gln Ala

50 55 60

Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Glu Ile Arg Leu Lys Phe Thr

65 70 75 80

Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile

85 90 95

Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu

100 105 110

Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Arg Asp Tyr Gly Ser

115 120 125

Arg Asn Ala Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val

130 135 140

Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser

145 150 155 160

Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys

165 170 175

Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu

180 185 190

Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu

195 200 205

Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr

210 215 220

Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val

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Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro

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Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val

275 280 285

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Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro

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Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr

325 330 335

Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val

340 345 350

Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala

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Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg

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Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly

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405 410 415

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser

420 425 430

Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln

435 440 445

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His

450 455 460

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly

465 470 475

<210> 84

<211> 1428

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长抗体hz2-7 (H1L2 G131A) HC核苷酸序列

<400> 84

atggacccca agggcagcct gagctggaga atcctgctgt tcctgagcct ggccttcgag 60

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tctaagagca ccctgtacct gcagatgaac tcactgaggg ccgaggacac cgccgtgtac 360

tactgcacta gggactacgg cagcaggaac gcctacttcg actactgggg ccagggcact 420

ctggtcaccg tgagcagcgc tagcaccaag ggccccagcg tgttccctct ggcccccagc 480

agcaagagca ccagcggcgg aaccgccgcc ctgggctgcc tggtgaagga ctacttcccc 540

gagcccgtga ccgtgtcctg gaacagcggc gctctgacca gcggagtgca caccttccct 600

gccgtgctgc agagcagcgg cctgtactcc ctgagcagcg tggtgaccgt gcccagcagc 660

agcctgggca cccagaccta catctgcaac gtgaaccaca agccctccaa caccaaggtg 720

gacaagaagg tggagcctaa gagctgcgac aagacccaca cctgccctcc ctgccccgcc 780

cccgagctgc tgggcggacc cagcgtgttc ctgttccctc ccaagcccaa ggacaccctg 840

atgatcagcc gcacccccga ggtgacctgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaggacccc 900

gaggtgaagt tcaactggta cgtggacggc gtggaggtgc acaacgccaa gaccaagcct 960

cgggaggagc agtacaactc cacctaccgc gtggtgagcg tgctgaccgt gctgcaccag 1020

gactggctga acggcaagga gtacaagtgc aaggtgagca acaaggccct gcccgctccc 1080

atcgagaaga ccatcagcaa ggccaagggc cagccccggg agcctcaggt gtacaccctg 1140

ccccccagcc gcgaagagat gaccaagaac caggtgagcc tgacctgcct ggtgaagggc 1200

ttctacccct ccgacatcgc cgtggagtgg gagagcaacg gccagcctga gaacaactac 1260

aagaccaccc ctcccgtgct ggacagcgac ggcagcttct tcctgtacag caagctgacc 1320

gtggacaagt cccggtggca gcagggcaac gtgttcagct gcagcgtgat gcacgaggcc 1380

ctgcacaacc actacaccca gaagagcctg agcctgagcc ccggatag 1428

<210> 85

<211> 239

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体hz2-7 (H1L2 G131A) LC蛋白质序列

<400> 85

Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro

1 5 10 15

Gly Ser Thr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro

20 25 30

Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Lys Ser

35 40 45

Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Phe Leu Tyr Trp Phe Leu Gln Lys

50 55 60

Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Arg Met Ser Asn Leu Ala

65 70 75 80

Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe

85 90 95

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100 105 110

Cys Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys

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Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro

130 135 140

Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu

145 150 155 160

Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp

165 170 175

Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp

180 185 190

Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys

195 200 205

Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln

210 215 220

Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

225 230 235

<210> 86

<211> 720

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长抗体hz2-7 (H1L2 G131A) LC核苷酸序列

<400> 86

atggagaccg acaccctgct gctctgggtg ctgctgctct gggtgcccgg ctccaccgga 60

gacatcgtga tgacccagac acccctgagc ctgcccgtga cccccggtga gcccgccagc 120

atcagctgca ggtcaagcaa gagcctcctg cacagcaacg gcaacacctt tctgtactgg 180

ttcctgcaga agccgggaca gagcccccag ctgctgatct acaggatgag caacctggcc 240

tctggcgtgc ccgacaggtt cagcggcagt ggcagcggaa ccgacttcac cctgaagatt 300

agcagggtgg aggccgagga cgtgggcgtg tactactgta tgcagcacct ggagtacccc 360

tacaccttcg gcggagggac caaactggaa atcaagcgga ccgtggccgc ccccagcgtg 420

ttcatcttcc ctcccagcga cgagcagctg aagtctggca ccgccagcgt ggtgtgcctg 480

ctgaacaact tctacccccg cgaggccaag gtgcagtgga aggtggacaa cgccctgcag 540

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agcagcaccc tgaccctgag caaggccgac tacgagaagc acaaggtgta cgcctgcgag 660

gtgacccacc agggactgtc tagccccgtg accaagagct tcaaccgggg cgagtgctaa 720

<210> 87

<211> 469

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体hz2-8 (H1L2) HC蛋白质序列

<400> 87

Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser

1 5 10 15

Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly

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Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala

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Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser

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Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Arg Leu Phe Phe Ala

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Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys

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Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly

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Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro

165 170 175

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Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val

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Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn

210 215 220

Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro

225 230 235 240

Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu

245 250 255

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

260 265 270

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

275 280 285

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

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Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn

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Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp

325 330 335

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro

340 345 350

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355 360 365

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn

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Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

385 390 395 400

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

405 410 415

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys

420 425 430

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys

435 440 445

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

450 455 460

Ser Leu Ser Pro Gly

465

<210> 88

<211> 1410

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长抗体hz2-8 (H1L2) HC核苷酸序列

<400> 88

atggacccca agggcagcct gagctggaga atcctgctgt tcctgagcct ggccttcgag 60

ctgagctacg gccaggtgca gctggtgcag agtggggccg aggtgaagaa gccgggagcc 120

agcgtgaagg tgagctgcaa ggccagcggc ttcaacatca aggagtacta catgcactgg 180

gtgaggcaag cgccggaaca gggcctggag tggatgggct ggatcgaccc cgagaacggc 240

gataccatct acgcccagaa gttccagggc agggtgacca tcaccgctga caccagcacc 300

aacaccgcct acatggagct gagcagcctg agaagcgagg acacagccgt gtactactgc 360

gccaggtcac gcttgttctt cgcctactgg ggccaaggca ccctggtgac cgtgagctct 420

gctagcacca agggccccag cgtgttccct ctggccccca gcagcaagag caccagcggc 480

ggaaccgccg ccctgggctg cctggtgaag gactacttcc ccgagcccgt gaccgtgtcc 540

tggaacagcg gcgctctgac cagcggagtg cacaccttcc ctgccgtgct gcagagcagc 600

ggcctgtact ccctgagcag cgtggtgacc gtgcccagca gcagcctggg cacccagacc 660

tacatctgca acgtgaacca caagccctcc aacaccaagg tggacaagaa ggtggagcct 720

aagagctgcg acaagaccca cacctgccct ccctgccccg cccccgagct gctgggcgga 780

cccagcgtgt tcctgttccc tcccaagccc aaggacaccc tgatgatcag ccgcaccccc 840

gaggtgacct gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaggacc ccgaggtgaa gttcaactgg 900

tacgtggacg gcgtggaggt gcacaacgcc aagaccaagc ctcgggagga gcagtacaac 960

tccacctacc gcgtggtgag cgtgctgacc gtgctgcacc aggactggct gaacggcaag 1020

gagtacaagt gcaaggtgag caacaaggcc ctgcccgctc ccatcgagaa gaccatcagc 1080

aaggccaagg gccagccccg ggagcctcag gtgtacaccc tgccccccag ccgcgaagag 1140

atgaccaaga accaggtgag cctgacctgc ctggtgaagg gcttctaccc ctccgacatc 1200

gccgtggagt gggagagcaa cggccagcct gagaacaact acaagaccac ccctcccgtg 1260

ctggacagcg acggcagctt cttcctgtac agcaagctga ccgtggacaa gtcccggtgg 1320

cagcagggca acgtgttcag ctgcagcgtg atgcacgagg ccctgcacaa ccactacacc 1380

cagaagagcc tgagcctgag ccccggatag 1410

<210> 89

<211> 234

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体hz2-8 (H1L2) LC蛋白质序列

<400> 89

Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro

1 5 10 15

Gly Ser Thr Gly Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser Leu Ser

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Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp

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Val Arg Thr Ala Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro

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Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser

65 70 75 80

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

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Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gln Tyr

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Thr Thr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg

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Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

130 135 140

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

145 150 155 160

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

165 170 175

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

180 185 190

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

195 200 205

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

210 215 220

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

225 230

<210> 90

<211> 705

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长抗体hz2-8 (H1L2) LC核苷酸序列

<400> 90

atggagaccg acaccctgct gctctgggtg ctgctgctct gggtgcccgg ctccaccgga 60

gacatccaga tgacccaaag cccaaagagc ctgagcgcca gcgtgggcga cagggtgacg 120

atcacctgca gagccagcca ggacgtgagg accgccctgg attggtatca gcagaagccc 180

ggtcagagcc ccaagctcct gatctacagc gcaagctaca ggtacagcgg cgtgcccagc 240

aggttcagcg gctccggcag cggcaccgac ttcactctta ccatcagctc actgcagccc 300

gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag cagtacacca ccccctacac cttcggccag 360

ggcaccaagt tggagatcaa gcggaccgtg gccgccccca gcgtgttcat cttccctccc 420

agcgacgagc agctgaagtc tggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac 480

ccccgcgagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 540

gagagcgtga ccgagcagga ctccaaggac agcacctaca gcctgagcag caccctgacc 600

ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccaggga 660

ctgtctagcc ccgtgaccaa gagcttcaac cggggcgagt gctaa 705

<210> 91

<211> 469

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体hz2-8 (H1L2 G80A/T82A) HC蛋白质序列

<400> 91

Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser

1 5 10 15

Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly

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Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala

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Ser Gly Phe Asn Ile Lys Glu Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala

50 55 60

Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Ala

65 70 75 80

Asp Ala Ile Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala

85 90 95

Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser

100 105 110

Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Arg Leu Phe Phe Ala

115 120 125

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys

130 135 140

Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly

145 150 155 160

Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro

165 170 175

Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr

180 185 190

Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val

195 200 205

Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn

210 215 220

Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro

225 230 235 240

Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu

245 250 255

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

260 265 270

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

275 280 285

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

290 295 300

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn

305 310 315 320

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp

325 330 335

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro

340 345 350

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu

355 360 365

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn

370 375 380

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

385 390 395 400

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

405 410 415

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys

420 425 430

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys

435 440 445

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

450 455 460

Ser Leu Ser Pro Gly

465

<210> 92

<211> 1410

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长抗体hz2-8 (H1L2 G80A/T82A) HC核苷酸序列

<400> 92

atggacccta agggctctct gtcttggaga atcctgctgt tcctgagcct ggccttcgag 60

ctgtcttatg gccaggtgca gctggtgcag tctggcgccg aagtgaaaaa gcctggcgcc 120

tctgtgaagg tgtcctgcaa ggcctctggc ttcaacatca aagaatatta catgcactgg 180

gtccgacagg cccctgagca aggattggaa tggatgggct ggatcgaccc cgagaacgcc 240

gatgccatct acgcccagaa attccagggc agagtgacca tcaccgccga cacctctacc 300

aacaccgcct acatggaact gtccagcctg agatctgagg acaccgccgt gtactactgc 360

gcccggtcca gactgttctt cgcctattgg ggccagggca ccctggtcac agtttcttcc 420

gcttccacca agggacccag cgtgttccct ctggctcctt ccagcaagtc tacctctggc 480

ggaacagctg ctctgggctg cctggtcaag gactactttc cagagcctgt gaccgtgtcc 540

tggaactctg gcgctctgac atctggcgtg cacacctttc cagctgtgct gcagtcctcc 600

ggcctgtact ctctgtcctc tgtcgtgacc gtgccttcca gctctctggg aacccagacc 660

tacatctgca atgtgaacca caagccttcc aacaccaagg tggacaagaa ggtggaaccc 720

aagtcctgcg acaagaccca cacctgtcct ccatgtcctg ctccagaact gctcggcgga 780

ccttccgtgt tcctgtttcc tccaaagcct aaggacaccc tgatgatctc tcggacccct 840

gaagtgacct gcgtggtggt ggatgtgtct cacgaggacc cagaagtgaa gttcaattgg 900

tacgtggacg gcgtggaagt gcacaacgcc aagaccaagc ctagagagga acagtacaac 960

tccacctaca gagtggtgtc cgtgctgacc gtgctgcacc aggattggct gaacggcaaa 1020

gagtacaagt gcaaggtgtc caacaaggca ctgcccgctc ctatcgaaaa gaccatctcc 1080

aaggccaagg gccagcctag ggaaccccag gtttacaccc tgcctccaag ccgggaagag 1140

atgaccaaga accaggtgtc cctgacctgc ctcgtgaagg gcttctaccc ttccgacatc 1200

gccgtggaat gggagagcaa tggccagcca gagaacaact acaagacaac ccctcctgtg 1260

ctggactccg acggctcatt cttcctgtac tccaagctga cagtggacaa gtccagatgg 1320

cagcagggca acgtgttctc ctgctccgtg atgcacgagg ccctgcacaa tcactacaca 1380

cagaagtccc tgtctctgtc ccctggctag 1410

<210> 93

<211> 234

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体hz2-8 (H1L2 G80A/T82A) LC蛋白质序列

<400> 93

Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro

1 5 10 15

Gly Ser Thr Gly Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser Leu Ser

20 25 30

Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp

35 40 45

Val Arg Thr Ala Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro

50 55 60

Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser

65 70 75 80

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

85 90 95

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gln Tyr

100 105 110

Thr Thr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg

115 120 125

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

130 135 140

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

145 150 155 160

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

165 170 175

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

180 185 190

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

195 200 205

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

210 215 220

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

225 230

<210> 94

<211> 705

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长抗体hz2-8 (H1L2 G80A/T82A) LC核苷酸序列

<400> 94

atggaaaccg acacactgct gctgtgggtg ctgctcttgt gggtgccagg atctaccggc 60

gacatccaga tgacccagtc tccaaagtct ctgtccgcct ccgtgggcga cagagtgacc 120

atcacctgta gagcctctca ggacgtgcgg accgctctgg attggtatca gcagaagcct 180

ggccagtctc ctaagctgct gatctactcc gcctcctacc ggtactctgg cgtgccctcc 240

agattctccg gctctggctc tggcaccgac tttaccctga caatctccag cctgcagcct 300

gaggacttcg ccacctacta ctgccagcaa cagtacacca caccttacac cttcggccag 360

ggcaccaagc tggaaatcaa gagaaccgtg gccgctcctt ccgtgttcat cttcccacct 420

tccgacgagc agctgaagtc cggcacagct tctgtcgtgt gcctgctgaa caacttctac 480

cctcgggaag ccaaggtgca gtggaaggtg gacaatgccc tgcagtccgg caactcccaa 540

gagtctgtga ccgagcagga ctccaaggac agcacctaca gcctgtcctc cacactgaca 600

ctgtccaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaagtgac ccatcagggc 660

ctgtctagcc ctgtgaccaa gtctttcaac cggggcgagt gttag 705

<210> 95

<211> 469

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体hz2-8 (H1L2 G80A) HC蛋白质序列

<400> 95

Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser

1 5 10 15

Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly

20 25 30

Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala

35 40 45

Ser Gly Phe Asn Ile Lys Glu Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala

50 55 60

Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Ala

65 70 75 80

Asp Thr Ile Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala

85 90 95

Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser

100 105 110

Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Arg Leu Phe Phe Ala

115 120 125

Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys

130 135 140

Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly

145 150 155 160

Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro

165 170 175

Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr

180 185 190

Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val

195 200 205

Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn

210 215 220

Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro

225 230 235 240

Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu

245 250 255

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp

260 265 270

Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp

275 280 285

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly

290 295 300

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn

305 310 315 320

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp

325 330 335

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro

340 345 350

Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu

355 360 365

Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn

370 375 380

Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile

385 390 395 400

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr

405 410 415

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys

420 425 430

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys

435 440 445

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu

450 455 460

Ser Leu Ser Pro Gly

465

<210> 96

<211> 1410

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长抗体hz2-8 (H1L2 G80A) HC核苷酸序列

<400> 96

atggacccta agggctctct gtcttggaga atcctgctgt tcctgagcct ggccttcgag 60

ctgtcttatg gccaggtgca gctggtgcag tctggcgccg aagtgaaaaa gcctggcgcc 120

tctgtgaagg tgtcctgcaa ggcctctggc ttcaacatca aagaatatta catgcactgg 180

gtccgacagg cccctgagca aggattggaa tggatgggct ggatcgaccc cgagaacgcc 240

gataccatct acgcccagaa attccagggc agagtgacca tcaccgccga cacctctacc 300

aacaccgcct acatggaact gtccagcctg agatctgagg acaccgccgt gtactactgc 360

gcccggtcca gactgttctt cgcctattgg ggccagggca ccctggtcac agtttcttcc 420

gcttccacca agggacccag cgtgttccct ctggctcctt ccagcaagtc tacctctggc 480

ggaacagctg ctctgggctg cctggtcaag gactactttc cagagcctgt gaccgtgtcc 540

tggaactctg gcgctctgac atctggcgtg cacacctttc cagctgtgct gcagtcctcc 600

ggcctgtact ctctgtcctc tgtcgtgacc gtgccttcca gctctctggg aacccagacc 660

tacatctgca atgtgaacca caagccttcc aacaccaagg tggacaagaa ggtggaaccc 720

aagtcctgcg acaagaccca cacctgtcct ccatgtcctg ctccagaact gctcggcgga 780

ccttccgtgt tcctgtttcc tccaaagcct aaggacaccc tgatgatctc tcggacccct 840

gaagtgacct gcgtggtggt ggatgtgtct cacgaggacc cagaagtgaa gttcaattgg 900

tacgtggacg gcgtggaagt gcacaacgcc aagaccaagc ctagagagga acagtacaac 960

tccacctaca gagtggtgtc cgtgctgacc gtgctgcacc aggattggct gaacggcaaa 1020

gagtacaagt gcaaggtgtc caacaaggca ctgcccgctc ctatcgaaaa gaccatctcc 1080

aaggccaagg gccagcctag ggaaccccag gtttacaccc tgcctccaag ccgggaagag 1140

atgaccaaga accaggtgtc cctgacctgc ctcgtgaagg gcttctaccc ttccgacatc 1200

gccgtggaat gggagagcaa tggccagcca gagaacaact acaagacaac ccctcctgtg 1260

ctggactccg acggctcatt cttcctgtac tccaagctga cagtggacaa gtccagatgg 1320

cagcagggca acgtgttctc ctgctccgtg atgcacgagg ccctgcacaa tcactacaca 1380

cagaagtccc tgtctctgtc ccctggctag 1410

<210> 97

<211> 234

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 全长抗体hz2-8 (H1L2 G80A) LC蛋白质序列

<400> 97

Met Glu Thr Asp Thr Leu Leu Leu Trp Val Leu Leu Leu Trp Val Pro

1 5 10 15

Gly Ser Thr Gly Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser Leu Ser

20 25 30

Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp

35 40 45

Val Arg Thr Ala Leu Asp Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro

50 55 60

Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Ser Gly Val Pro Ser

65 70 75 80

Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser

85 90 95

Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Gln Tyr

100 105 110

Thr Thr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg

115 120 125

Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln

130 135 140

Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr

145 150 155 160

Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser

165 170 175

Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr

180 185 190

Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys

195 200 205

His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro

210 215 220

Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys

225 230

<210> 98

<211> 705

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 全长LC抗体hz2-8 (H1L2 G80A)核苷酸序列

<400> 98

atggaaaccg acacactgct gctgtgggtg ctgctcttgt gggtgccagg atctaccggc 60

gacatccaga tgacccagtc tccaaagtct ctgtccgcct ccgtgggcga cagagtgacc 120

atcacctgta gagcctctca ggacgtgcgg accgctctgg attggtatca gcagaagcct 180

ggccagtctc ctaagctgct gatctactcc gcctcctacc ggtactctgg cgtgccctcc 240

agattctccg gctctggctc tggcaccgac tttaccctga caatctccag cctgcagcct 300

gaggacttcg ccacctacta ctgccagcaa cagtacacca caccttacac cttcggccag 360

ggcaccaagc tggaaatcaa gagaaccgtg gccgctcctt ccgtgttcat cttcccacct 420

tccgacgagc agctgaagtc cggcacagct tctgtcgtgt gcctgctgaa caacttctac 480

cctcgggaag ccaaggtgca gtggaaggtg gacaatgccc tgcagtccgg caactcccaa 540

gagtctgtga ccgagcagga ctccaaggac agcacctaca gcctgtcctc cacactgaca 600

ctgtccaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaagtgac ccatcagggc 660

ctgtctagcc ctgtgaccaa gtctttcaac cggggcgagt gttag 705

<210> 99

<211> 673

<212> PRT

<213> 智人(Homo sapiens)

<220>

<223> 人C1s全长wt蛋白质序列(huC1s)

<400> 99

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

20 25 30

Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

35 40 45

Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Asp Thr Glu Glu

50 55 60

Gly Arg Leu Cys Gly Gln Arg Ser Ser Asn Asn Pro His Ser Pro Ile

65 70 75 80

Val Glu Glu Phe Gln Val Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Ile Phe Lys

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Val Ala Thr Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Val Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Lys Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Leu Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Ala Ala Asp Ser Ala Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

210 215 220

Phe Val Ala Gly Asp Arg Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly His Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Asn Ile Glu Thr Lys Ser Asn Ala Leu Asp Ile Ile

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Lys Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Met Pro Cys Pro Lys Glu Asp Thr Pro Asn Ser Val

275 280 285

Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Gln Ile

290 295 300

Thr Cys Leu Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ala Thr

305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Asn Gly Gly Gly Gly

370 375 380

Glu Tyr His Cys Ala Gly Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Val Leu Gly

385 390 395 400

Pro Glu Leu Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro

405 410 415

Phe Glu Glu Lys Gln Arg Ile Ile Gly Gly Ser Asp Ala Asp Ile Lys

420 425 430

Asn Phe Pro Trp Gln Val Phe Phe Asp Asn Pro Trp Ala Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asn Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Val Glu Gly

450 455 460

Asn Arg Glu Pro Thr Met Tyr Val Gly Ser Thr Ser Val Gln Thr Ser

465 470 475 480

Arg Leu Ala Lys Ser Lys Met Leu Thr Pro Glu His Val Phe Ile His

485 490 495

Pro Gly Trp Lys Leu Leu Glu Val Pro Glu Gly Arg Thr Asn Phe Asp

500 505 510

Asn Asp Ile Ala Leu Val Arg Leu Lys Asp Pro Val Lys Met Gly Pro

515 520 525

Thr Val Ser Pro Ile Cys Leu Pro Gly Thr Ser Ser Asp Tyr Asn Leu

530 535 540

Met Asp Gly Asp Leu Gly Leu Ile Ser Gly Trp Gly Arg Thr Glu Lys

545 550 555 560

Arg Asp Arg Ala Val Arg Leu Lys Ala Ala Arg Leu Pro Val Ala Pro

565 570 575

Leu Arg Lys Cys Lys Glu Val Lys Val Glu Lys Pro Thr Ala Asp Ala

580 585 590

Glu Ala Tyr Val Phe Thr Pro Asn Met Ile Cys Ala Gly Gly Glu Lys

595 600 605

Gly Met Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Val Gln

610 615 620

Asp Pro Asn Asp Lys Thr Lys Phe Tyr Ala Ala Gly Leu Val Ser Trp

625 630 635 640

Gly Pro Gln Cys Gly Thr Tyr Gly Leu Tyr Thr Arg Val Lys Asn Tyr

645 650 655

Val Asp Trp Ile Met Lys Thr Met Gln Glu Asn Ser Thr Pro Arg Glu

660 665 670

Asp

<210> 100

<211> 2022

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 重组人C1s核苷酸序列(经密码子优化)

<400> 100

gagcctacta tgtacggcga gatcctgtct cctaactacc ctcaggctta cccctccgag 60

gtggaaaagt cctgggatat cgaggtgccc gaaggctacg gcatccacct gtacttcacc 120

cacctggaca tcgagctgtc cgagaactgc gcctacgact ccgtgcagat catctccggc 180

gataccgaag agggcagact gtgcggccag cggtcctcta acaatcccca ctctcctatc 240

gtggaagagt tccaggtgcc atacaacaag ctgcaagtga tcttcaagtc cgacttctcc 300

aacgaggaac ggttcaccgg cttcgccgct tactatgtgg ccaccgacat caacgagtgc 360

accgacttcg tggacgtgcc ctgctctcac ttctgcaaca actttatcgg cggctacttc 420

tgcagctgcc ctcctgagta cttcctgcac gacgacatga agaactgcgg cgtgaactgc 480

tccggcgacg tgttcacagc tctgatcgga gagatcgcct ctccaaatta ccccaagcct 540

tatcctgaga actcccgctg cgagtaccag atcagactgg aaaagggctt ccaggtggtg 600

gtcaccctgc ggcgcgagga ttttgatgtg gaagccgctg attccgccgg caactgcctg 660

gattctctgg tgtttgtggc cggcgacaga cagttcggcc cttattgtgg ccatggcttc 720

cccggacctc tgaacatcga gacaaagagc aacgccctgg atatcatctt ccagaccgac 780

ctgaccggcc agaagaaagg ctggaagctg agataccacg gcgaccccat gccttgtcct 840

aaagaggaca cccctaactc cgtgtgggag cccgccaagg ccaaatacgt gttcagagat 900

gtggtccaga tcacctgtct ggacggcttt gaggtggtgg aaggcagagt gggcgccacc 960

tctttctact ctacctgcca gtccaacggc aagtggtcca actccaagct gaagtgccag 1020

cctgtggact gcggcatccc tgagtctatc gagaacggca aggtggaaga tcccgagagc 1080

accctgttcg gctccgtgat cagatatacc tgcgaggaac cctactacta catggaaaac 1140

ggcggaggcg gcgagtatca ctgtgctggc aatggctctt gggtcaacga ggtgctggga 1200

cccgaactgc ctaagtgtgt tcctgtgtgt ggcgtgccca gagagccctt cgaggaaaag 1260

cagagaatca tcggcggcag cgacgccgat atcaagaact tcccctggca agtgttcttc 1320

gacaacccct gggctggcgg cgctctgatc aatgagtatt gggtgctgac cgccgctcac 1380

gtggtcgagg gaaatagaga acccactatg tatgtgggct ccaccagcgt gcagacctcc 1440

agactggcca agtccaagat gctgacccct gagcacgtgt tcatccatcc tggctggaaa 1500

ctgctggaag tgcccgaggg cagaacaaac ttcgataacg atatcgccct cgtgcggctg 1560

aaggaccctg tgaagatggg ccctaccgtg tctcctatct gtctgcctgg cacctcctcc 1620

gactacaacc tgatggatgg cgacctgggc ctgatctctg gatggggaag aaccgagaag 1680

cgggatagag ccgtcagact gaaggccgct agactgcctg ttgctcctct gcggaagtgc 1740

aaagaagtga aggtcgagaa gcctaccgcc gatgccgagg cctatgtgtt caccccaaac 1800

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ggacctcagt gtggaaccta cggcctgtac accagagtga agaactacgt ggactggatc 1980

atgaagacca tgcaagagaa cagcacccct agagaggact ag 2022

<210> 101

<211> 673

<212> PRT

<213> 家鼠(Mus musculus)

<220>

<223> 小鼠C1s蛋白质序列(moC1s)

<400> 101

Glu Pro Thr Met His Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Asn Asp Val Val Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

20 25 30

Phe Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Val Asp Ile Glu Pro Ser Glu

35 40 45

Ser Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Gly Ile Glu Glu

50 55 60

Gly Arg Leu Cys Gly Gln Lys Thr Ser Lys Ser Pro Asn Ser Pro Ile

65 70 75 80

Ile Glu Glu Phe Gln Phe Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Val Phe Thr

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Thr Ala Ile Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Thr Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Arg Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ser Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Asn Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Gln

180 185 190

Leu Gln Glu Gly Phe Gln Val Val Val Thr Met Gln Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Pro Ala Asp Ser Glu Gly Asn Cys Pro Asp Ser Leu Thr

210 215 220

Phe Ala Ser Lys Asn Gln Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly Asn Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Thr Ile Arg Thr Gln Ser Asn Thr Leu Gly Ile Val

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Met Gly Gln Lys Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Ile Ser Cys Ala Lys Lys Ile Thr Ala Asn Ser Thr

275 280 285

Trp Glu Pro Asp Lys Ala Lys Tyr Val Phe Lys Asp Val Val Lys Ile

290 295 300

Thr Cys Val Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly His Val Ser Ser Thr

305 310 315 320

Ser Tyr Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asp Gly Gln Trp Ser Asn Ser Gly

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Tyr Cys Gly Ile Pro Asp Pro Ile Ala Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Glu Pro Glu Asn Ser Val Phe Gly Thr Val Val His

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu His Glu Glu Gly Gly

370 375 380

Glu Tyr Arg Cys Ala Ala Asn Gly Arg Trp Val Asn Asp Gln Leu Gly

385 390 395 400

Ile Glu Leu Pro Arg Cys Ile Pro Ala Cys Gly Val Pro Thr Glu Pro

405 410 415

Phe Gln Val His Gln Arg Ile Phe Gly Gly Gln Pro Ala Lys Ile Glu

420 425 430

Asn Phe Pro Trp Gln Val Phe Phe Asn His Pro Arg Ala Ser Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asn Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Leu Glu Lys

450 455 460

Ile Ser Asp Pro Leu Met Tyr Val Gly Thr Met Ser Val Arg Thr Thr

465 470 475 480

Leu Leu Glu Asn Ala Gln Arg Leu Tyr Ser Lys Arg Val Phe Ile His

485 490 495

Pro Ser Trp Lys Lys Glu Asp Asp Pro Asn Thr Arg Thr Asn Phe Asp

500 505 510

Asn Asp Ile Ala Leu Val Gln Leu Lys Asp Pro Val Lys Met Gly Pro

515 520 525

Lys Val Ser Pro Ile Cys Leu Pro Gly Thr Ser Ser Glu Tyr Asn Val

530 535 540

Ser Pro Gly Asp Met Gly Leu Ile Ser Gly Trp Gly Ser Thr Glu Lys

545 550 555 560

Lys Val Phe Val Ile Asn Leu Arg Gly Ala Lys Val Pro Val Thr Ser

565 570 575

Leu Glu Thr Cys Lys Gln Val Lys Glu Glu Asn Pro Thr Val Arg Pro

580 585 590

Glu Asp Tyr Val Phe Thr Asp Asn Met Ile Cys Ala Gly Glu Lys Gly

595 600 605

Val Asp Ser Cys His Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Phe Gln Val

610 615 620

Pro Asn Val Thr Val Pro Lys Phe Tyr Val Ala Gly Leu Val Ser Trp

625 630 635 640

Gly Lys Arg Cys Gly Thr Tyr Gly Val Tyr Thr Lys Val Lys Asn Tyr

645 650 655

Val Asp Trp Ile Leu Lys Thr Met Gln Glu Asn Ser Gly Pro Arg Lys

660 665 670

Asp

<210> 102

<211> 2022

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 重组小鼠C1s核苷酸序列(经密码子优化)

<400> 102

gagcctacaa tgcacggcga gatcctgtct ccaaactacc ctcaggctta ccccaacgac 60

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ggaatcgaag agggcagact gtgcggccag aaaacctcca agtctcccaa ctctcccatt 240

atcgaggaat ttcagttccc ctacaacaag ctgcaggtcg tgttcacctc cgacttctcc 300

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accgacttca ccgatgtgcc ctgcagccac ttctgcaaca actttatcgg cggctacttc 420

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tccggcgacg tgttcacagc tctgatcgga gagatctcct ctcctaatta ccccaatcct 540

tatcctgaga actcccgctg cgagtaccag atccagctgc aagagggctt ccaggtggtg 600

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ctgatgggcc agaagaaagg ctggaagctg agataccacg gcgaccccat cagctgcgcc 840

aagaagatca ccgccaactc cacctgggag cctgacaagg ccaaatacgt gttcaaggac 900

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tccgtgtttg gcaccgtggt gcactatacc tgcgaggaac cctactacta catggaacat 1140

gaggaaggcg gcgagtaccg ctgtgccgct aatggaagat gggtcaacga ccagctgggc 1200

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aatcacccca gagcctctgg cgccctgatc aatgagtact gggtgctgac cgctgctcac 1380

gtgctggaaa agatcagcga ccctcttatg tacgtgggca ccatgtccgt gcggaccaca 1440

ctgttggaga acgcccagcg gctgtactcc aagagagtgt tcatccatcc tagctggaag 1500

aaagaggacg accccaacac caggaccaac ttcgacaacg atatcgccct ggtgcagctg 1560

aaggaccccg tgaagatggg ccctaaggtg tcccctatct gtctgcccgg cacctcctct 1620

gagtacaatg tgtctcctgg cgacatgggc ctgatctctg gctggggctc taccgagaag 1680

aaagtgttcg tgatcaacct gagaggcgcc aaggtgcccg tgacctctct ggaaacatgc 1740

aagcaagtga aagaagagaa ccccaccgtc cggcctgagg actatgtgtt caccgacaac 1800

atgatctgtg ccggcgagaa aggcgtggac tcttgccacg gcgattctgg cggagccttc 1860

gcctttcaag tgcccaatgt gaccgtgcct aagttctacg tggccggcct ggtgtcttgg 1920

ggcaagagat gtggtactta cggcgtgtac accaaagtga agaactacgt ggactggatt 1980

ctcaagacca tgcaagagaa cagcggccct cggaaggact ag 2022

<210> 103

<211> 673

<212> PRT

<213> 食蟹猕猴(Macaca fascicularis)

<220>

<223> 食蟹猴C1s蛋白质序列(cyC1s)

<400> 103

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

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Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

35 40 45

Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Met Ser Gly Asp Ile Glu Glu

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Gly Arg Leu Cys Gly Gln Arg Thr Ser Asn Asn Pro His Ser Pro Ile

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Val Glu Glu Phe Gln Val Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Ile Phe Lys

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Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Val Ala Thr Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Val Asp Ala Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Lys Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Val Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Pro Ala Asp Ser Glu Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

210 215 220

Phe Val Ala Gly Asp Gln Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly Arg Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Asn Ile Glu Thr Lys Ser Asn Ala Leu Asp Ile Ile

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Asn Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Met Pro Cys Pro Lys Glu Glu Thr Pro Thr Ser Val

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Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Arg Ile

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Thr Cys Leu Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ala Thr

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Ser Phe His Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Thr Arg

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Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Asn Gly Gly Asn Gly

370 375 380

Gln Tyr His Cys Ala Ser Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Ala Leu Ser

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Pro Glu Leu Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro

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Phe Glu Gly Lys Gln Arg Ile Ile Gly Gly Ser Asp Ala Asp Ile Lys

420 425 430

Asn Phe Pro Trp Gln Val Phe Phe Asp Asn Pro Trp Ala Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asp Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Val Glu Gly

450 455 460

Asn Gln Glu Pro Thr Met Tyr Val Gly Ser Thr Ser Val Gln Thr Ser

465 470 475 480

Arg Leu Ala Lys Ser Lys Met Leu Thr Ser Glu Arg Val Phe Ile His

485 490 495

Pro Gly Trp Lys Leu Leu Glu Val Pro Glu Ala Arg Thr Asn Phe Asp

500 505 510

Asn Asp Ile Ala Leu Val Gln Leu Lys Asp Pro Val Lys Met Gly Pro

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Thr Val Ala Pro Ile Cys Leu Pro Gly Thr Ser Ser Asp Tyr Asn Leu

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Met Asp Gly Asp Leu Gly Leu Ile Ala Gly Trp Gly Arg Thr Glu Lys

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Arg Asp Arg Ala Leu Arg Leu Lys Ala Ala Arg Leu Pro Val Ala Pro

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Leu Arg Lys Cys Arg Glu Val Lys Val Glu Asn Pro Lys Ala Asp Ala

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Gly Ala Tyr Val Phe Thr Pro Asn Met Ile Cys Ala Gly Gly Glu Lys

595 600 605

Gly Met Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Val Gln

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Gly Pro Gln Cys Gly Thr Tyr Gly Leu Tyr Thr Arg Val Gln Asn Tyr

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Asp

<210> 104

<211> 2022

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 重组食蟹猴C1s核苷酸序列(经密码子优化)

<400> 104

gagcctacta tgtacggcga gatcctgtct cctaactacc ctcaggctta cccctccgag 60

gtggaaaagt cctgggatat cgaggtgccc gaaggctacg gcatccacct gtacttcacc 120

cacctggaca tcgagctgtc cgagaactgc gcctacgact ccgtgcagat catgtccggc 180

gatatcgaag agggcagact gtgcggccag cggacctcta acaatcccca ctctcctatc 240

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accctgtttg gcagcgtgac cagatatacc tgcgaggaac cctactacta catggaaaac 1140

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agactggcca agtccaagat gctgaccagc gagcgggtgt tcatccatcc tggctggaaa 1500

ctgctggagg tcccagaggc caggaccaac ttcgacaatg atatcgccct ggtgcagctg 1560

aaggaccccg tgaagatggg acctaccgtg gctcctatct gtctgcctgg cacctcctcc 1620

gactacaacc tgatggatgg cgacctgggc ctgatcgctg gatggggaag aaccgagaag 1680

agagacagag ccctgagact gaaggccgcc agattgcctg ttgctcctct gcggaagtgc 1740

cgggaagtga aggtcgagaa ccctaaggct gatgccggcg cttatgtgtt cacccctaat 1800

atgatctgcg ctggcggcga gaaaggcatg gactcttgca aaggcgattc tggcggcgca 1860

ttcgcagtgc aggaccctaa cgataaggcc aagttctacg tggccggcct ggtgtcttgg 1920

ggacctcagt gtggaacata cggcctgtac acacgggtgc agaactacgt ggactggatc 1980

aagaaaacca tgcaagagaa cagcacccct tccaaggact ag 2022

<210> 105

<211> 673

<212> PRT

<213> 褐家鼠(Rattus norvegicus)

<220>

<223> 大鼠C1s蛋白质序列(raC1s)

<400> 105

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Asn Glu Val Val Lys Thr Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

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Phe Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Met Glu Leu Ser Glu

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Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Gly Ile Glu Glu

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Glu Arg Leu Cys Gly Gln Arg Thr Ser Lys Ser Pro Asn Ser Pro Thr

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Val Glu Glu Phe Gln Phe Pro Tyr Asn Arg Leu Gln Val Val Phe Thr

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Ser Ala Val Asp Val Asn Glu Cys Thr Asp Phe Thr Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Arg Thr Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Asn Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Gln Glu Gly Phe Arg Leu Val Leu Thr Ile Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Pro Ala Asp Ser Glu Gly Asn Cys His Asp Ser Leu Thr

210 215 220

Phe Ala Ala Lys Asn Gln Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly Asn Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Thr Ile Lys Thr Gln Ser Asn Thr Leu Asp Ile Val

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Asn Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Ile Pro Cys Pro Lys Glu Ile Ser Ala Asn Ser Ile

275 280 285

Trp Glu Pro Glu Lys Ala Lys Tyr Val Phe Lys Asp Val Val Lys Ile

290 295 300

Thr Cys Val Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Asn Val Gly Ser Thr

305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Gln Trp Ser Asn Ser Arg

325 330 335

Leu Glu Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Val Pro Glu Pro Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Asp Thr Val Phe Gly Ser Val Ile His

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Gln Glu Glu Gly Gly

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Phe Lys Val Gln Gln Arg Ile Phe Gly Gly Tyr Ser Thr Lys Ile Gln

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Ser Phe Pro Trp Gln Val Tyr Phe Glu Ser Pro Arg Gly Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asp Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Val Glu Gly

450 455 460

Asn Ser Asp Pro Val Met Tyr Val Gly Ser Thr Leu Leu Lys Ile Glu

465 470 475 480

Arg Leu Arg Asn Ala Gln Arg Leu Ile Thr Glu Arg Val Ile Ile His

485 490 495

Pro Ser Trp Lys Gln Glu Asp Asp Leu Asn Thr Arg Thr Asn Phe Asp

500 505 510

Asn Asp Ile Ala Leu Val Gln Leu Lys Asp Pro Val Lys Met Gly Pro

515 520 525

Thr Val Ala Pro Ile Cys Leu Pro Glu Thr Ser Ser Asp Tyr Asn Pro

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Ser Glu Gly Asp Leu Gly Leu Ile Ser Gly Trp Gly Arg Thr Glu Asn

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Arg Thr Asn Val Ile Gln Leu Arg Gly Ala Lys Leu Pro Ile Thr Ser

565 570 575

Leu Glu Lys Cys Gln Gln Val Lys Val Glu Asn Pro Lys Ala Arg Ser

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Asn Asp Tyr Val Phe Thr Asp Asn Met Ile Cys Ala Gly Glu Lys Gly

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Val Asp Ser Cys Glu Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Leu Pro Val

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Pro Asn Val Lys Asp Pro Lys Phe Tyr Val Ala Gly Leu Val Ser Trp

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Gly Lys Lys Cys Gly Thr Tyr Gly Ile Tyr Thr Lys Val Lys Asn Tyr

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Val Asp Trp Ile Leu Lys Thr Met Gln Glu Asn Ser Gly Pro Lys Lys

660 665 670

Asp

<210> 106

<211> 2022

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 重组大鼠C1s核苷酸序列

<400> 106

gagcctacca tgtatgggga gatcctgtcc cctaattatc cccaggcgta ccccaatgag 60

gtcgtgaaaa cttgggacat agaagtccca gaggggtttg ggattcacct ttacttcacc 120

catctggaca tggagctgtc agagaactgt gcgtacgact cagtgcagat aatctcagga 180

ggcatcgagg aagagagact ctgtggccag aggaccagca agagtcccaa ctcccccact 240

gtagaagagt ttcaattccc atacaatagg ctccaggtgg tctttacgtc agacttctcc 300

aacgaggaac ggtttactgg ctttgcagcg tattactcag ccgtagatgt aaatgaatgc 360

acagacttta cagatgtccc ttgcagccac ttctgcaata acttcattgg tggatacttc 420

tgctcctgcc ccccagaata cttcctccac gatgacatga ggacttgtgg ggtcaactgt 480

agtggggatg tattcactgc cctgattggg gagatcgcaa gtcccaatta tcccaaccca 540

tacccggaga actcaaggtg tgaataccag attcggctgc aggagggctt ccgactggtg 600

ttgactatcc ggagagaaga ttttgatgtg gaaccagctg actcagaggg gaactgccac 660

gacagtttga cttttgctgc aaaaaaccaa cagtttggtc cttactgtgg caatggattc 720

cctggacctc taactattaa aacccagagc aatactcttg atattgtctt tcaaactgac 780

ctaacggggc aaaataaagg ctggaagctt cgttaccatg gagatcccat cccctgtccc 840

aaagaaatca gtgctaattc tatctgggag cccgaaaagg caaaatacgt gttcaaagat 900

gtcgtgaaga taacctgtgt ggatggattc gaagttgtgg agggaaatgt tggctcaaca 960

tcattctatt ccacttgtca aagcaacgga cagtggagca attccaggct agagtgtcaa 1020

cctgtggact gtggtgttcc agaacccatt gagaatggta aagttgaaga cccagaagac 1080

actgtattcg gctccgtcat ccactacacg tgcgaagagc catattacta catggaacag 1140

gaagaaggcg gagagtatca ctgtgctgct aatgggagct gggtgaatga ccagctgggt 1200

gtcgagcttc caaaatgtat tccagtctgt ggagtaccca ccgagccctt taaagtacag 1260

cagaggatat ttggaggata ctctacaaag attcaaagtt ttccttggca ggtctacttt 1320

gagtcccccc gaggtggcgg ggctcttatc gatgagtact gggtgctgac ggccgctcac 1380

gttgtggagg gaaactctga cccagtgatg tatgtcgggt ccacacttct gaaaatagag 1440

cggttgagaa atgcccagag gctcatcact gaacgtgtga ttattcatcc cagctggaaa 1500

caagaggacg acctgaatac acggacaaat tttgacaatg acattgccct ggtgcagctc 1560

aaagaccctg tgaaaatggg acccactgtt gcccccatct gcctgccaga aacctcctca 1620

gactacaacc cctcagaggg tgacctgggg ctgatctctg ggtggggccg aacagagaat 1680

agaaccaatg ttattcaact cagaggggcg aagttaccca taacatcttt agaaaagtgc 1740

cagcaggtga aagtggaaaa cccgaaagcg aggtcaaacg actatgtttt cactgacaac 1800

atgatctgtg ctggggaaaa gggtgtggac agctgtgaag gtgacagcgg aggggctttt 1860

gctctgccgg tccccaatgt caaggacccc aaattctatg tggctggcct ggtgtcctgg 1920

gggaaaaagt gtgggaccta tgggatctac acaaaggtaa agaactacgt ggactggatc 1980

ctgaaaacta tgcaggagaa tagtgggccc aagaaggact ag 2022

<210> 107

<211> 147

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s缺失突变体1 (huC1sM151)蛋白质序列

<400> 107

Tyr His Gly Asp Pro Lys Glu Asp Thr Pro Asn Ser Val Trp Glu Pro

1 5 10 15

Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Gln Ile Thr Cys Leu

20 25 30

Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ala Thr Ser Phe Tyr

35 40 45

Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys Leu Lys Cys

50 55 60

Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn Gly Lys Val

65 70 75 80

Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg Tyr Thr Cys

85 90 95

Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Asn Gly Gly Gly Gly Glu Tyr His

100 105 110

Cys Ala Gly Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Val Leu Gly Pro Glu Leu

115 120 125

Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro Phe Glu Glu

130 135 140

Lys Gln Arg

145

<210> 108

<211> 456

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 重组人C1s缺失突变体1 (huC1sM151)核苷酸序列

<400> 108

taccacggcg accccatgcc ttgtcctaaa gaggacaccc ctaactccgt gtgggagccc 60

gccaaggcca aatacgtgtt cagagatgtg gtccagatca cctgtctgga cggctttgag 120

gtggtggaag gcagagtggg cgccacctct ttctactcta cctgccagtc caacggcaag 180

tggtccaact ccaagctgaa gtgccagcct gtggactgcg gcatccctga gtctatcgag 240

aacggcaagg tggaagatcc cgagagcacc ctgttcggct ccgtgatcag atatacctgc 300

gaggaaccct actactacat ggaaaacggc ggaggcggcg agtatcactg tgctggcaat 360

ggctcttggg tcaacgaggt gctgggaccc gaactgccta agtgtgttcc tgtgtgtggc 420

gtgcccagag agcccttcga ggaaaagcag agatag 456

<210> 109

<211> 428

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s缺失突变体2 (huC1sNHC)蛋白质序列

<400> 109

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

20 25 30

Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

35 40 45

Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Asp Thr Glu Glu

50 55 60

Gly Arg Leu Cys Gly Gln Arg Ser Ser Asn Asn Pro His Ser Pro Ile

65 70 75 80

Val Glu Glu Phe Gln Val Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Ile Phe Lys

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Val Ala Thr Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Val Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Lys Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Leu Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Ala Ala Asp Ser Ala Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

210 215 220

Phe Val Ala Gly Asp Arg Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly His Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Asn Ile Glu Thr Lys Ser Asn Ala Leu Asp Ile Ile

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Lys Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Met Pro Cys Pro Lys Glu Asp Thr Pro Asn Ser Val

275 280 285

Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Gln Ile

290 295 300

Thr Cys Leu Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ala Thr

305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Asn Gly Gly Gly Gly

370 375 380

Glu Tyr His Cys Ala Gly Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Val Leu Gly

385 390 395 400

Pro Glu Leu Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro

405 410 415

Phe Glu Glu Lys Gln Arg His His His His His His

420 425

<210> 110

<211> 1269

<212> DNA

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多核苷酸

<220>

<223> 重组人C1s缺失突变体2 (huC1sNHC)核苷酸序列

<400> 110

gagcctacta tgtacggcga gatcctgtct cctaactacc ctcaggctta cccctccgag 60

gtggaaaagt cctgggatat cgaggtgccc gaaggctacg gcatccacct gtacttcacc 120

cacctggaca tcgagctgtc cgagaactgc gcctacgact ccgtgcagat catctccggc 180

gataccgaag agggcagact gtgcggccag cggtcctcta acaatcccca ctctcctatc 240

gtggaagagt tccaggtgcc atacaacaag ctgcaagtga tcttcaagtc cgacttctcc 300

aacgaggaac ggttcaccgg cttcgccgct tactatgtgg ccaccgacat caacgagtgc 360

accgacttcg tggacgtgcc ctgctctcac ttctgcaaca actttatcgg cggctacttc 420

tgcagctgcc ctcctgagta cttcctgcac gacgacatga agaactgcgg cgtgaactgc 480

tccggcgacg tgttcacagc tctgatcgga gagatcgcct ctccaaatta ccccaagcct 540

tatcctgaga actcccgctg cgagtaccag atcagactgg aaaagggctt ccaggtggtg 600

gtcaccctgc ggcgcgagga ttttgatgtg gaagccgctg attccgccgg caactgcctg 660

gattctctgg tgtttgtggc cggcgacaga cagttcggcc cttattgtgg ccatggcttc 720

cccggacctc tgaacatcga gacaaagagc aacgccctgg atatcatctt ccagaccgac 780

ctgaccggcc agaagaaagg ctggaagctg agataccacg gcgaccccat gccttgtcct 840

aaagaggaca cccctaactc cgtgtgggag cccgccaagg ccaaatacgt gttcagagat 900

gtggtccaga tcacctgtct ggacggcttt gaggtggtgg aaggcagagt gggcgccacc 960

tctttctact ctacctgcca gtccaacggc aagtggtcca actccaagct gaagtgccag 1020

cctgtggact gcggcatccc tgagtctatc gagaacggca aggtggaaga tcccgagagc 1080

accctgttcg gctccgtgat cagatatacc tgcgaggaac cctactacta catggaaaac 1140

ggcggaggcg gcgagtatca ctgtgctggc aatggctctt gggtcaacga ggtgctggga 1200

cccgaactgc ctaagtgtgt tcctgtgtgt ggcgtgccca gagagccctt cgaggaaaag 1260

cagagatag 1269

<210> 111

<211> 389

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s缺失突变体3 (NHCD33)蛋白质序列

<400> 111

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

20 25 30

Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

35 40 45

Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Asp Thr Glu Glu

50 55 60

Gly Arg Leu Cys Gly Gln Arg Ser Ser Asn Asn Pro His Ser Pro Ile

65 70 75 80

Val Glu Glu Phe Gln Val Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Ile Phe Lys

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Val Ala Thr Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Val Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Lys Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Leu Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Ala Ala Asp Ser Ala Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

210 215 220

Phe Val Ala Gly Asp Arg Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly His Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Asn Ile Glu Thr Lys Ser Asn Ala Leu Asp Ile Ile

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Lys Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Met Pro Cys Pro Lys Glu Asp Thr Pro Asn Ser Val

275 280 285

Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Gln Ile

290 295 300

Thr Cys Leu Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ala Thr

305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Asn Gly Gly Gly Gly

370 375 380

Glu Tyr His Cys Ala

385

<210> 112

<211> 673

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M1 (M277I)-His的蛋白质序列

<400> 112

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

20 25 30

Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

35 40 45

Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Asp Thr Glu Glu

50 55 60

Gly Arg Leu Cys Gly Gln Arg Ser Ser Asn Asn Pro His Ser Pro Ile

65 70 75 80

Val Glu Glu Phe Gln Val Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Ile Phe Lys

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Val Ala Thr Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Val Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Lys Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Leu Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Ala Ala Asp Ser Ala Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

210 215 220

Phe Val Ala Gly Asp Arg Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly His Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Asn Ile Glu Thr Lys Ser Asn Ala Leu Asp Ile Ile

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Lys Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Ile Pro Cys Pro Lys Glu Asp Thr Pro Asn Ser Val

275 280 285

Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Gln Ile

290 295 300

Thr Cys Leu Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ala Thr

305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Asn Gly Gly Gly Gly

370 375 380

Glu Tyr His Cys Ala Gly Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Val Leu Gly

385 390 395 400

Pro Glu Leu Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro

405 410 415

Phe Glu Glu Lys Gln Arg Ile Ile Gly Gly Ser Asp Ala Asp Ile Lys

420 425 430

Asn Phe Pro Trp Gln Val Phe Phe Asp Asn Pro Trp Ala Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asn Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Val Glu Gly

450 455 460

Asn Arg Glu Pro Thr Met Tyr Val Gly Ser Thr Ser Val Gln Thr Ser

465 470 475 480

Arg Leu Ala Lys Ser Lys Met Leu Thr Pro Glu His Val Phe Ile His

485 490 495

Pro Gly Trp Lys Leu Leu Glu Val Pro Glu Gly Arg Thr Asn Phe Asp

500 505 510

Asn Asp Ile Ala Leu Val Arg Leu Lys Asp Pro Val Lys Met Gly Pro

515 520 525

Thr Val Ser Pro Ile Cys Leu Pro Gly Thr Ser Ser Asp Tyr Asn Leu

530 535 540

Met Asp Gly Asp Leu Gly Leu Ile Ser Gly Trp Gly Arg Thr Glu Lys

545 550 555 560

Arg Asp Arg Ala Val Arg Leu Lys Ala Ala Arg Leu Pro Val Ala Pro

565 570 575

Leu Arg Lys Cys Lys Glu Val Lys Val Glu Lys Pro Thr Ala Asp Ala

580 585 590

Glu Ala Tyr Val Phe Thr Pro Asn Met Ile Cys Ala Gly Gly Glu Lys

595 600 605

Gly Met Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Val Gln

610 615 620

Asp Pro Asn Asp Lys Thr Lys Phe Tyr Ala Ala Gly Leu Val Ser Trp

625 630 635 640

Gly Pro Gln Cys Gly Thr Tyr Gly Leu Tyr Thr Arg Val Lys Asn Tyr

645 650 655

Val Asp Trp Ile Met Lys Thr Met Gln Glu Asn Ser Thr Pro Arg Glu

660 665 670

Asp

<210> 113

<211> 673

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M2 (M277I、K331Q)-His的蛋白质序列

<400> 113

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

20 25 30

Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

35 40 45

Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Asp Thr Glu Glu

50 55 60

Gly Arg Leu Cys Gly Gln Arg Ser Ser Asn Asn Pro His Ser Pro Ile

65 70 75 80

Val Glu Glu Phe Gln Val Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Ile Phe Lys

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Val Ala Thr Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Val Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Lys Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Leu Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Ala Ala Asp Ser Ala Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

210 215 220

Phe Val Ala Gly Asp Arg Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly His Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Asn Ile Glu Thr Lys Ser Asn Ala Leu Asp Ile Ile

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Lys Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Ile Pro Cys Pro Lys Glu Asp Thr Pro Asn Ser Val

275 280 285

Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Gln Ile

290 295 300

Thr Cys Leu Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ala Thr

305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Gln Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Asn Gly Gly Gly Gly

370 375 380

Glu Tyr His Cys Ala Gly Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Val Leu Gly

385 390 395 400

Pro Glu Leu Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro

405 410 415

Phe Glu Glu Lys Gln Arg Ile Ile Gly Gly Ser Asp Ala Asp Ile Lys

420 425 430

Asn Phe Pro Trp Gln Val Phe Phe Asp Asn Pro Trp Ala Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asn Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Val Glu Gly

450 455 460

Asn Arg Glu Pro Thr Met Tyr Val Gly Ser Thr Ser Val Gln Thr Ser

465 470 475 480

Arg Leu Ala Lys Ser Lys Met Leu Thr Pro Glu His Val Phe Ile His

485 490 495

Pro Gly Trp Lys Leu Leu Glu Val Pro Glu Gly Arg Thr Asn Phe Asp

500 505 510

Asn Asp Ile Ala Leu Val Arg Leu Lys Asp Pro Val Lys Met Gly Pro

515 520 525

Thr Val Ser Pro Ile Cys Leu Pro Gly Thr Ser Ser Asp Tyr Asn Leu

530 535 540

Met Asp Gly Asp Leu Gly Leu Ile Ser Gly Trp Gly Arg Thr Glu Lys

545 550 555 560

Arg Asp Arg Ala Val Arg Leu Lys Ala Ala Arg Leu Pro Val Ala Pro

565 570 575

Leu Arg Lys Cys Lys Glu Val Lys Val Glu Lys Pro Thr Ala Asp Ala

580 585 590

Glu Ala Tyr Val Phe Thr Pro Asn Met Ile Cys Ala Gly Gly Glu Lys

595 600 605

Gly Met Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Val Gln

610 615 620

Asp Pro Asn Asp Lys Thr Lys Phe Tyr Ala Ala Gly Leu Val Ser Trp

625 630 635 640

Gly Pro Gln Cys Gly Thr Tyr Gly Leu Tyr Thr Arg Val Lys Asn Tyr

645 650 655

Val Asp Trp Ile Met Lys Thr Met Gln Glu Asn Ser Thr Pro Arg Glu

660 665 670

Asp

<210> 114

<211> 673

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M3 (M277I、P278、N329D)-His的蛋白质序列

<400> 114

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

20 25 30

Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

35 40 45

Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Asp Thr Glu Glu

50 55 60

Gly Arg Leu Cys Gly Gln Arg Ser Ser Asn Asn Pro His Ser Pro Ile

65 70 75 80

Val Glu Glu Phe Gln Val Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Ile Phe Lys

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Val Ala Thr Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Val Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Lys Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Leu Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Ala Ala Asp Ser Ala Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

210 215 220

Phe Val Ala Gly Asp Arg Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly His Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Asn Ile Glu Thr Lys Ser Asn Ala Leu Asp Ile Ile

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Lys Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Ile Ser Cys Pro Lys Glu Asp Thr Pro Asn Ser Val

275 280 285

Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Gln Ile

290 295 300

Thr Cys Leu Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ala Thr

305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asp Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Asn Gly Gly Gly Gly

370 375 380

Glu Tyr His Cys Ala Gly Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Val Leu Gly

385 390 395 400

Pro Glu Leu Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro

405 410 415

Phe Glu Glu Lys Gln Arg Ile Ile Gly Gly Ser Asp Ala Asp Ile Lys

420 425 430

Asn Phe Pro Trp Gln Val Phe Phe Asp Asn Pro Trp Ala Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asn Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Val Glu Gly

450 455 460

Asn Arg Glu Pro Thr Met Tyr Val Gly Ser Thr Ser Val Gln Thr Ser

465 470 475 480

Arg Leu Ala Lys Ser Lys Met Leu Thr Pro Glu His Val Phe Ile His

485 490 495

Pro Gly Trp Lys Leu Leu Glu Val Pro Glu Gly Arg Thr Asn Phe Asp

500 505 510

Asn Asp Ile Ala Leu Val Arg Leu Lys Asp Pro Val Lys Met Gly Pro

515 520 525

Thr Val Ser Pro Ile Cys Leu Pro Gly Thr Ser Ser Asp Tyr Asn Leu

530 535 540

Met Asp Gly Asp Leu Gly Leu Ile Ser Gly Trp Gly Arg Thr Glu Lys

545 550 555 560

Arg Asp Arg Ala Val Arg Leu Lys Ala Ala Arg Leu Pro Val Ala Pro

565 570 575

Leu Arg Lys Cys Lys Glu Val Lys Val Glu Lys Pro Thr Ala Asp Ala

580 585 590

Glu Ala Tyr Val Phe Thr Pro Asn Met Ile Cys Ala Gly Gly Glu Lys

595 600 605

Gly Met Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Val Gln

610 615 620

Asp Pro Asn Asp Lys Thr Lys Phe Tyr Ala Ala Gly Leu Val Ser Trp

625 630 635 640

Gly Pro Gln Cys Gly Thr Tyr Gly Leu Tyr Thr Arg Val Lys Asn Tyr

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Val Asp Trp Ile Met Lys Thr Met Gln Glu Asn Ser Thr Pro Arg Glu

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<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

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<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

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<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M6 (P280A、E282K、K336G)-His的蛋白质序列

<400> 117

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<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M7 (D343Y、E351A)-His的蛋白质序列

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<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M8 (E351A)-His的蛋白质序列

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Asp

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<211> 673

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M9 (K336G、D343Y、E351A)-His的蛋白质序列

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<210> 121

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<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M10 (D283I、P285A)-His的蛋白质序列

<400> 121

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595 600 605

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<210> 122

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<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M11 (S349P)-His的蛋白质序列

<400> 122

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Asp

<210> 123

<211> 673

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M12 (G381E、G382E)-His的蛋白质序列

<400> 123

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325 330 335

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Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

355 360 365

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<210> 124

<211> 673

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M13 (A292D)-His的蛋白质序列

<400> 124

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

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Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

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Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

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Asp

<210> 125

<211> 673

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M14 (R316H)-His的蛋白质序列

<400> 125

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

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Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

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Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Leu Arg Arg Glu Asp Phe

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Asp Val Glu Ala Ala Asp Ser Ala Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

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Phe Val Ala Gly Asp Arg Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly His Gly Phe

225 230 235 240

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245 250 255

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260 265 270

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275 280 285

Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Gln Ile

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305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

355 360 365

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370 375 380

Glu Tyr His Cys Ala Gly Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Val Leu Gly

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Pro Glu Leu Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro

405 410 415

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420 425 430

Asn Phe Pro Trp Gln Val Phe Phe Asp Asn Pro Trp Ala Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asn Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Val Glu Gly

450 455 460

Asn Arg Glu Pro Thr Met Tyr Val Gly Ser Thr Ser Val Gln Thr Ser

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Arg Leu Ala Lys Ser Lys Met Leu Thr Pro Glu His Val Phe Ile His

485 490 495

Pro Gly Trp Lys Leu Leu Glu Val Pro Glu Gly Arg Thr Asn Phe Asp

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Arg Asp Arg Ala Val Arg Leu Lys Ala Ala Arg Leu Pro Val Ala Pro

565 570 575

Leu Arg Lys Cys Lys Glu Val Lys Val Glu Lys Pro Thr Ala Asp Ala

580 585 590

Glu Ala Tyr Val Phe Thr Pro Asn Met Ile Cys Ala Gly Gly Glu Lys

595 600 605

Gly Met Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Val Gln

610 615 620

Asp Pro Asn Asp Lys Thr Lys Phe Tyr Ala Ala Gly Leu Val Ser Trp

625 630 635 640

Gly Pro Gln Cys Gly Thr Tyr Gly Leu Tyr Thr Arg Val Lys Asn Tyr

645 650 655

Val Asp Trp Ile Met Lys Thr Met Gln Glu Asn Ser Thr Pro Arg Glu

660 665 670

Asp

<210> 126

<211> 673

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M15 (S360N)-His的蛋白质序列

<400> 126

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

20 25 30

Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

35 40 45

Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Asp Thr Glu Glu

50 55 60

Gly Arg Leu Cys Gly Gln Arg Ser Ser Asn Asn Pro His Ser Pro Ile

65 70 75 80

Val Glu Glu Phe Gln Val Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Ile Phe Lys

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Val Ala Thr Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Val Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Lys Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Leu Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Ala Ala Asp Ser Ala Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

210 215 220

Phe Val Ala Gly Asp Arg Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly His Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Asn Ile Glu Thr Lys Ser Asn Ala Leu Asp Ile Ile

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Lys Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Met Pro Cys Pro Lys Glu Asp Thr Pro Asn Ser Val

275 280 285

Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Gln Ile

290 295 300

Thr Cys Leu Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ala Thr

305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Asn Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Asn Gly Gly Gly Gly

370 375 380

Glu Tyr His Cys Ala Gly Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Val Leu Gly

385 390 395 400

Pro Glu Leu Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro

405 410 415

Phe Glu Glu Lys Gln Arg Ile Ile Gly Gly Ser Asp Ala Asp Ile Lys

420 425 430

Asn Phe Pro Trp Gln Val Phe Phe Asp Asn Pro Trp Ala Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asn Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Val Glu Gly

450 455 460

Asn Arg Glu Pro Thr Met Tyr Val Gly Ser Thr Ser Val Gln Thr Ser

465 470 475 480

Arg Leu Ala Lys Ser Lys Met Leu Thr Pro Glu His Val Phe Ile His

485 490 495

Pro Gly Trp Lys Leu Leu Glu Val Pro Glu Gly Arg Thr Asn Phe Asp

500 505 510

Asn Asp Ile Ala Leu Val Arg Leu Lys Asp Pro Val Lys Met Gly Pro

515 520 525

Thr Val Ser Pro Ile Cys Leu Pro Gly Thr Ser Ser Asp Tyr Asn Leu

530 535 540

Met Asp Gly Asp Leu Gly Leu Ile Ser Gly Trp Gly Arg Thr Glu Lys

545 550 555 560

Arg Asp Arg Ala Val Arg Leu Lys Ala Ala Arg Leu Pro Val Ala Pro

565 570 575

Leu Arg Lys Cys Lys Glu Val Lys Val Glu Lys Pro Thr Ala Asp Ala

580 585 590

Glu Ala Tyr Val Phe Thr Pro Asn Met Ile Cys Ala Gly Gly Glu Lys

595 600 605

Gly Met Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Val Gln

610 615 620

Asp Pro Asn Asp Lys Thr Lys Phe Tyr Ala Ala Gly Leu Val Ser Trp

625 630 635 640

Gly Pro Gln Cys Gly Thr Tyr Gly Leu Tyr Thr Arg Val Lys Asn Tyr

645 650 655

Val Asp Trp Ile Met Lys Thr Met Gln Glu Asn Ser Thr Pro Arg Glu

660 665 670

Asp

<210> 127

<211> 673

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M16 (R368H)-His的蛋白质序列

<400> 127

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

20 25 30

Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

35 40 45

Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Asp Thr Glu Glu

50 55 60

Gly Arg Leu Cys Gly Gln Arg Ser Ser Asn Asn Pro His Ser Pro Ile

65 70 75 80

Val Glu Glu Phe Gln Val Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Ile Phe Lys

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Val Ala Thr Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Val Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Lys Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Leu Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Ala Ala Asp Ser Ala Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

210 215 220

Phe Val Ala Gly Asp Arg Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly His Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Asn Ile Glu Thr Lys Ser Asn Ala Leu Asp Ile Ile

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Lys Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Met Pro Cys Pro Lys Glu Asp Thr Pro Asn Ser Val

275 280 285

Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Gln Ile

290 295 300

Thr Cys Leu Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ala Thr

305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile His

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Asn Gly Gly Gly Gly

370 375 380

Glu Tyr His Cys Ala Gly Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Val Leu Gly

385 390 395 400

Pro Glu Leu Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro

405 410 415

Phe Glu Glu Lys Gln Arg Ile Ile Gly Gly Ser Asp Ala Asp Ile Lys

420 425 430

Asn Phe Pro Trp Gln Val Phe Phe Asp Asn Pro Trp Ala Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asn Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Val Glu Gly

450 455 460

Asn Arg Glu Pro Thr Met Tyr Val Gly Ser Thr Ser Val Gln Thr Ser

465 470 475 480

Arg Leu Ala Lys Ser Lys Met Leu Thr Pro Glu His Val Phe Ile His

485 490 495

Pro Gly Trp Lys Leu Leu Glu Val Pro Glu Gly Arg Thr Asn Phe Asp

500 505 510

Asn Asp Ile Ala Leu Val Arg Leu Lys Asp Pro Val Lys Met Gly Pro

515 520 525

Thr Val Ser Pro Ile Cys Leu Pro Gly Thr Ser Ser Asp Tyr Asn Leu

530 535 540

Met Asp Gly Asp Leu Gly Leu Ile Ser Gly Trp Gly Arg Thr Glu Lys

545 550 555 560

Arg Asp Arg Ala Val Arg Leu Lys Ala Ala Arg Leu Pro Val Ala Pro

565 570 575

Leu Arg Lys Cys Lys Glu Val Lys Val Glu Lys Pro Thr Ala Asp Ala

580 585 590

Glu Ala Tyr Val Phe Thr Pro Asn Met Ile Cys Ala Gly Gly Glu Lys

595 600 605

Gly Met Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Val Gln

610 615 620

Asp Pro Asn Asp Lys Thr Lys Phe Tyr Ala Ala Gly Leu Val Ser Trp

625 630 635 640

Gly Pro Gln Cys Gly Thr Tyr Gly Leu Tyr Thr Arg Val Lys Asn Tyr

645 650 655

Val Asp Trp Ile Met Lys Thr Met Gln Glu Asn Ser Thr Pro Arg Glu

660 665 670

Asp

<210> 128

<211> 673

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M17 (N380H)-His的蛋白质序列

<400> 128

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

20 25 30

Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

35 40 45

Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Asp Thr Glu Glu

50 55 60

Gly Arg Leu Cys Gly Gln Arg Ser Ser Asn Asn Pro His Ser Pro Ile

65 70 75 80

Val Glu Glu Phe Gln Val Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Ile Phe Lys

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Val Ala Thr Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Val Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Lys Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Leu Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Ala Ala Asp Ser Ala Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

210 215 220

Phe Val Ala Gly Asp Arg Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly His Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Asn Ile Glu Thr Lys Ser Asn Ala Leu Asp Ile Ile

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Lys Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Met Pro Cys Pro Lys Glu Asp Thr Pro Asn Ser Val

275 280 285

Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Gln Ile

290 295 300

Thr Cys Leu Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ala Thr

305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu His Gly Gly Gly Gly

370 375 380

Glu Tyr His Cys Ala Gly Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Val Leu Gly

385 390 395 400

Pro Glu Leu Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro

405 410 415

Phe Glu Glu Lys Gln Arg Ile Ile Gly Gly Ser Asp Ala Asp Ile Lys

420 425 430

Asn Phe Pro Trp Gln Val Phe Phe Asp Asn Pro Trp Ala Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asn Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Val Glu Gly

450 455 460

Asn Arg Glu Pro Thr Met Tyr Val Gly Ser Thr Ser Val Gln Thr Ser

465 470 475 480

Arg Leu Ala Lys Ser Lys Met Leu Thr Pro Glu His Val Phe Ile His

485 490 495

Pro Gly Trp Lys Leu Leu Glu Val Pro Glu Gly Arg Thr Asn Phe Asp

500 505 510

Asn Asp Ile Ala Leu Val Arg Leu Lys Asp Pro Val Lys Met Gly Pro

515 520 525

Thr Val Ser Pro Ile Cys Leu Pro Gly Thr Ser Ser Asp Tyr Asn Leu

530 535 540

Met Asp Gly Asp Leu Gly Leu Ile Ser Gly Trp Gly Arg Thr Glu Lys

545 550 555 560

Arg Asp Arg Ala Val Arg Leu Lys Ala Ala Arg Leu Pro Val Ala Pro

565 570 575

Leu Arg Lys Cys Lys Glu Val Lys Val Glu Lys Pro Thr Ala Asp Ala

580 585 590

Glu Ala Tyr Val Phe Thr Pro Asn Met Ile Cys Ala Gly Gly Glu Lys

595 600 605

Gly Met Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Val Gln

610 615 620

Asp Pro Asn Asp Lys Thr Lys Phe Tyr Ala Ala Gly Leu Val Ser Trp

625 630 635 640

Gly Pro Gln Cys Gly Thr Tyr Gly Leu Tyr Thr Arg Val Lys Asn Tyr

645 650 655

Val Asp Trp Ile Met Lys Thr Met Gln Glu Asn Ser Thr Pro Arg Glu

660 665 670

Asp

<210> 129

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> 通过比对抗体2-7；hz2-7 (H1L2)；以及hz2-7 (H1L2 G131A)得到的

共有HC-CDR-1序列

<400> 129

Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Phe Met Asn

1 5 10

<210> 130

<211> 19

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> 通过比对抗体2-7；hz2-7 (H1L2)；以及hz2-7 (H1L2 G131A)得到的

共有HC-CDR-2序列

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> E或D

<220>

<221> MOD_RES

<222> (18)..(18)

<223> E或K

<400> 130

Glu Ile Arg Leu Lys Phe Thr Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Xaa Ser

1 5 10 15

Val Xaa Gly

<210> 131

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> 通过比对抗体2-7；hz2-7 (H1L2)；以及hz2-7 (H1L2 G131A)得到的

共有HC-CDR-3序列

<220>

<221> MOD_RES

<222> (7)..(7)

<223> G或A

<400> 131

Asp Tyr Gly Ser Arg Asn Xaa Tyr Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 132

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> 通过比对抗体2-7；hz2-7 (H1L2)；以及hz2-7 (H1L2 G131A)得到的

共有LC-CDR-1序列

<400> 132

Arg Ser Ser Lys Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Phe Leu Tyr

1 5 10 15

<210> 133

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> 通过比对抗体2-7；hz2-7 (H1L2)；以及hz2-7 (H1L2 G131A)得到的

共有LC-CDR-2序列

<400> 133

Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser

1 5

<210> 134

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> 通过比对抗体2-7；hz2-7 (H1L2)；以及hz2-7 (H1L2 G131A)得到的

共有LC-CDR-3序列

<400> 134

Met Gln His Leu Glu Tyr Pro Tyr Thr

1 5

<210> 135

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> 通过比对抗体2-8；hz2-8 (H1L2)；hz2-8 (H1L2 G80A/T82A)；

以及hz2-8 (H1L2 G80A)得到的共有HC-CDR-1序列

<400> 135

Gly Phe Asn Ile Lys Glu Tyr Tyr Met His

1 5 10

<210> 136

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> 通过比对抗体2-8；hz2-8 (H1L2)；hz2-8 (H1L2 G80A/T82A)；

以及hz2-8 (H1L2 G80A)得到的共有HC-CDR-2序列

<220>

<221> MOD_RES

<222> (7)..(7)

<223> G或A

<220>

<221> MOD_RES

<222> (9)..(9)

<223> T或A

<220>

<221> MOD_RES

<222> (12)..(12)

<223> D或A

<220>

<221> MOD_RES

<222> (13)..(13)

<223> P或Q

<400> 136

Trp Ile Asp Pro Glu Asn Xaa Asp Xaa Ile Tyr Xaa Xaa Lys Phe Gln

1 5 10 15

Gly

<210> 137

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> 通过比对抗体2-8；hz2-8 (H1L2)；hz2-8 (H1L2 G80A/T82A)；

以及hz2-8 (H1L2 G80A)得到的共有HC-CDR-3序列

<400> 137

Ser Arg Leu Phe Phe Ala Tyr

1 5

<210> 138

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> 通过比对抗体2-8；hz2-8 (H1L2)；hz2-8 (H1L2 G80A/T82A)；

以及hz2-8 (H1L2 G80A)得到的共有LC-CDR-1序列

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> K或R

<220>

<221> MOD_RES

<222> (10)..(10)

<223> V或L

<400> 138

Xaa Ala Ser Gln Asp Val Arg Thr Ala Xaa Asp

1 5 10

<210> 139

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> 通过比对抗体2-8；hz2-8 (H1L2)；hz2-8 (H1L2 G80A/T82A)；

以及hz2-8 (H1L2 G80A)得到的共有LC-CDR-2序列

<220>

<221> MOD_RES

<222> (7)..(7)

<223> T或S

<400> 139

Ser Ala Ser Tyr Arg Tyr Xaa

1 5

<210> 140

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成肽

<220>

<223> 通过比对抗体2-8；hz2-8 (H1L2)；hz2-8 (H1L2 G80A/T82A)；

以及hz2-8 (H1L2 G80A)得到的共有LC-CDR-3序列

<400> 140

Gln Gln Gln Tyr Thr Thr Pro Tyr Thr

1 5

<210> 141

<211> 673

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M18 (V288T)-His的蛋白质序列

<400> 141

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

20 25 30

Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

35 40 45

Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Asp Thr Glu Glu

50 55 60

Gly Arg Leu Cys Gly Gln Arg Ser Ser Asn Asn Pro His Ser Pro Ile

65 70 75 80

Val Glu Glu Phe Gln Val Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Ile Phe Lys

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Val Ala Thr Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Val Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Lys Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Leu Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Ala Ala Asp Ser Ala Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

210 215 220

Phe Val Ala Gly Asp Arg Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly His Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Asn Ile Glu Thr Lys Ser Asn Ala Leu Asp Ile Ile

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Lys Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Met Pro Cys Pro Lys Glu Asp Thr Pro Asn Ser Thr

275 280 285

Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Gln Ile

290 295 300

Thr Cys Leu Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ala Thr

305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Asn Gly Gly Gly Gly

370 375 380

Glu Tyr His Cys Ala Gly Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Val Leu Gly

385 390 395 400

Pro Glu Leu Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro

405 410 415

Phe Glu Glu Lys Gln Arg Ile Ile Gly Gly Ser Asp Ala Asp Ile Lys

420 425 430

Asn Phe Pro Trp Gln Val Phe Phe Asp Asn Pro Trp Ala Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asn Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Val Glu Gly

450 455 460

Asn Arg Glu Pro Thr Met Tyr Val Gly Ser Thr Ser Val Gln Thr Ser

465 470 475 480

Arg Leu Ala Lys Ser Lys Met Leu Thr Pro Glu His Val Phe Ile His

485 490 495

Pro Gly Trp Lys Leu Leu Glu Val Pro Glu Gly Arg Thr Asn Phe Asp

500 505 510

Asn Asp Ile Ala Leu Val Arg Leu Lys Asp Pro Val Lys Met Gly Pro

515 520 525

Thr Val Ser Pro Ile Cys Leu Pro Gly Thr Ser Ser Asp Tyr Asn Leu

530 535 540

Met Asp Gly Asp Leu Gly Leu Ile Ser Gly Trp Gly Arg Thr Glu Lys

545 550 555 560

Arg Asp Arg Ala Val Arg Leu Lys Ala Ala Arg Leu Pro Val Ala Pro

565 570 575

Leu Arg Lys Cys Lys Glu Val Lys Val Glu Lys Pro Thr Ala Asp Ala

580 585 590

Glu Ala Tyr Val Phe Thr Pro Asn Met Ile Cys Ala Gly Gly Glu Lys

595 600 605

Gly Met Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Val Gln

610 615 620

Asp Pro Asn Asp Lys Thr Lys Phe Tyr Ala Ala Gly Leu Val Ser Trp

625 630 635 640

Gly Pro Gln Cys Gly Thr Tyr Gly Leu Tyr Thr Arg Val Lys Asn Tyr

645 650 655

Val Asp Trp Ile Met Lys Thr Met Gln Glu Asn Ser Thr Pro Arg Glu

660 665 670

Asp

<210> 142

<211> 673

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M19 (Q303K)-His的蛋白质序列

<400> 142

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

20 25 30

Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

35 40 45

Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Asp Thr Glu Glu

50 55 60

Gly Arg Leu Cys Gly Gln Arg Ser Ser Asn Asn Pro His Ser Pro Ile

65 70 75 80

Val Glu Glu Phe Gln Val Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Ile Phe Lys

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Val Ala Thr Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Val Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Lys Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Leu Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Ala Ala Asp Ser Ala Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

210 215 220

Phe Val Ala Gly Asp Arg Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly His Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Asn Ile Glu Thr Lys Ser Asn Ala Leu Asp Ile Ile

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Lys Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Met Pro Cys Pro Lys Glu Asp Thr Pro Asn Ser Val

275 280 285

Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Lys Ile

290 295 300

Thr Cys Leu Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ala Thr

305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Asn Gly Gly Gly Gly

370 375 380

Glu Tyr His Cys Ala Gly Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Val Leu Gly

385 390 395 400

Pro Glu Leu Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro

405 410 415

Phe Glu Glu Lys Gln Arg Ile Ile Gly Gly Ser Asp Ala Asp Ile Lys

420 425 430

Asn Phe Pro Trp Gln Val Phe Phe Asp Asn Pro Trp Ala Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asn Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Val Glu Gly

450 455 460

Asn Arg Glu Pro Thr Met Tyr Val Gly Ser Thr Ser Val Gln Thr Ser

465 470 475 480

Arg Leu Ala Lys Ser Lys Met Leu Thr Pro Glu His Val Phe Ile His

485 490 495

Pro Gly Trp Lys Leu Leu Glu Val Pro Glu Gly Arg Thr Asn Phe Asp

500 505 510

Asn Asp Ile Ala Leu Val Arg Leu Lys Asp Pro Val Lys Met Gly Pro

515 520 525

Thr Val Ser Pro Ile Cys Leu Pro Gly Thr Ser Ser Asp Tyr Asn Leu

530 535 540

Met Asp Gly Asp Leu Gly Leu Ile Ser Gly Trp Gly Arg Thr Glu Lys

545 550 555 560

Arg Asp Arg Ala Val Arg Leu Lys Ala Ala Arg Leu Pro Val Ala Pro

565 570 575

Leu Arg Lys Cys Lys Glu Val Lys Val Glu Lys Pro Thr Ala Asp Ala

580 585 590

Glu Ala Tyr Val Phe Thr Pro Asn Met Ile Cys Ala Gly Gly Glu Lys

595 600 605

Gly Met Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Val Gln

610 615 620

Asp Pro Asn Asp Lys Thr Lys Phe Tyr Ala Ala Gly Leu Val Ser Trp

625 630 635 640

Gly Pro Gln Cys Gly Thr Tyr Gly Leu Tyr Thr Arg Val Lys Asn Tyr

645 650 655

Val Asp Trp Ile Met Lys Thr Met Gln Glu Asn Ser Thr Pro Arg Glu

660 665 670

Asp

<210> 143

<211> 673

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 人工序列的描述：合成多肽

<220>

<223> 人C1s M20 (A320S)-His的蛋白质序列

<400> 143

Glu Pro Thr Met Tyr Gly Glu Ile Leu Ser Pro Asn Tyr Pro Gln Ala

1 5 10 15

Tyr Pro Ser Glu Val Glu Lys Ser Trp Asp Ile Glu Val Pro Glu Gly

20 25 30

Tyr Gly Ile His Leu Tyr Phe Thr His Leu Asp Ile Glu Leu Ser Glu

35 40 45

Asn Cys Ala Tyr Asp Ser Val Gln Ile Ile Ser Gly Asp Thr Glu Glu

50 55 60

Gly Arg Leu Cys Gly Gln Arg Ser Ser Asn Asn Pro His Ser Pro Ile

65 70 75 80

Val Glu Glu Phe Gln Val Pro Tyr Asn Lys Leu Gln Val Ile Phe Lys

85 90 95

Ser Asp Phe Ser Asn Glu Glu Arg Phe Thr Gly Phe Ala Ala Tyr Tyr

100 105 110

Val Ala Thr Asp Ile Asn Glu Cys Thr Asp Phe Val Asp Val Pro Cys

115 120 125

Ser His Phe Cys Asn Asn Phe Ile Gly Gly Tyr Phe Cys Ser Cys Pro

130 135 140

Pro Glu Tyr Phe Leu His Asp Asp Met Lys Asn Cys Gly Val Asn Cys

145 150 155 160

Ser Gly Asp Val Phe Thr Ala Leu Ile Gly Glu Ile Ala Ser Pro Asn

165 170 175

Tyr Pro Lys Pro Tyr Pro Glu Asn Ser Arg Cys Glu Tyr Gln Ile Arg

180 185 190

Leu Glu Lys Gly Phe Gln Val Val Val Thr Leu Arg Arg Glu Asp Phe

195 200 205

Asp Val Glu Ala Ala Asp Ser Ala Gly Asn Cys Leu Asp Ser Leu Val

210 215 220

Phe Val Ala Gly Asp Arg Gln Phe Gly Pro Tyr Cys Gly His Gly Phe

225 230 235 240

Pro Gly Pro Leu Asn Ile Glu Thr Lys Ser Asn Ala Leu Asp Ile Ile

245 250 255

Phe Gln Thr Asp Leu Thr Gly Gln Lys Lys Gly Trp Lys Leu Arg Tyr

260 265 270

His Gly Asp Pro Met Pro Cys Pro Lys Glu Asp Thr Pro Asn Ser Val

275 280 285

Trp Glu Pro Ala Lys Ala Lys Tyr Val Phe Arg Asp Val Val Gln Ile

290 295 300

Thr Cys Leu Asp Gly Phe Glu Val Val Glu Gly Arg Val Gly Ser Thr

305 310 315 320

Ser Phe Tyr Ser Thr Cys Gln Ser Asn Gly Lys Trp Ser Asn Ser Lys

325 330 335

Leu Lys Cys Gln Pro Val Asp Cys Gly Ile Pro Glu Ser Ile Glu Asn

340 345 350

Gly Lys Val Glu Asp Pro Glu Ser Thr Leu Phe Gly Ser Val Ile Arg

355 360 365

Tyr Thr Cys Glu Glu Pro Tyr Tyr Tyr Met Glu Asn Gly Gly Gly Gly

370 375 380

Glu Tyr His Cys Ala Gly Asn Gly Ser Trp Val Asn Glu Val Leu Gly

385 390 395 400

Pro Glu Leu Pro Lys Cys Val Pro Val Cys Gly Val Pro Arg Glu Pro

405 410 415

Phe Glu Glu Lys Gln Arg Ile Ile Gly Gly Ser Asp Ala Asp Ile Lys

420 425 430

Asn Phe Pro Trp Gln Val Phe Phe Asp Asn Pro Trp Ala Gly Gly Ala

435 440 445

Leu Ile Asn Glu Tyr Trp Val Leu Thr Ala Ala His Val Val Glu Gly

450 455 460

Asn Arg Glu Pro Thr Met Tyr Val Gly Ser Thr Ser Val Gln Thr Ser

465 470 475 480

Arg Leu Ala Lys Ser Lys Met Leu Thr Pro Glu His Val Phe Ile His

485 490 495

Pro Gly Trp Lys Leu Leu Glu Val Pro Glu Gly Arg Thr Asn Phe Asp

500 505 510

Asn Asp Ile Ala Leu Val Arg Leu Lys Asp Pro Val Lys Met Gly Pro

515 520 525

Thr Val Ser Pro Ile Cys Leu Pro Gly Thr Ser Ser Asp Tyr Asn Leu

530 535 540

Met Asp Gly Asp Leu Gly Leu Ile Ser Gly Trp Gly Arg Thr Glu Lys

545 550 555 560

Arg Asp Arg Ala Val Arg Leu Lys Ala Ala Arg Leu Pro Val Ala Pro

565 570 575

Leu Arg Lys Cys Lys Glu Val Lys Val Glu Lys Pro Thr Ala Asp Ala

580 585 590

Glu Ala Tyr Val Phe Thr Pro Asn Met Ile Cys Ala Gly Gly Glu Lys

595 600 605

Gly Met Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Ala Phe Ala Val Gln

610 615 620

Asp Pro Asn Asp Lys Thr Lys Phe Tyr Ala Ala Gly Leu Val Ser Trp

625 630 635 640

Gly Pro Gln Cys Gly Thr Tyr Gly Leu Tyr Thr Arg Val Lys Asn Tyr

645 650 655

Val Asp Trp Ile Met Lys Thr Met Gln Glu Asn Ser Thr Pro Arg Glu

660 665 670

Asp

Claims (22)

1.一种重组抗C1s抗体或其抗原结合片段，其能够与人C1s特异性结合并抑制C1s，所述重组抗C1s抗体或其抗原结合片段包括重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)，所述VH包括三个重链互补决定区(HC CDR)，所述VL包括三个轻链互补决定区(LC CDR)，所述VH和所述VL选自：

(a)包括以下各项的所述VH：HC CDR 1，所述HC CDR 1具有氨基酸序列GFTFSNYFMN(SEQID NO:129)；HC CDR2，所述HC CDR2具有氨基酸序列EIRLKFTNYATHYA(E/D)SV(E/K)G(SEQID NO:130)；以及HC CDR3，所述HC CDR3具有氨基酸序列DYGSRN(G/A)YFDY(SEQ ID NO:131)；以及包括以下各项的所述VL：LC CDR1，所述LC CDR1具有氨基酸序列RSSKSLLHSNGNTFLY(SEQ ID NO:132)；LC CDR2，所述LC CDR2具有氨基酸序列RMSNLAS(SEQID NO:

133)；以及LC CDR3，所述LC CDR3具有氨基酸序列MQHLEYPYT(SEQ ID NO:134)，以及

(b)包括以下各项的所述VH：HC CDR1，所述HC CDR1具有氨基酸序列GFNIKEYYMH(SEQID NO:135)；HC CDR2，所述HC CDR2具有氨基酸序列WIDPEN(G/A)D(T/A)IY(D/A)(P/Q)KFQG(SEQ ID NO:136)；以及HC CDR3，所述HC CDR3具有氨基酸序列SRLFFAY(SEQ ID NO:137)；以及包括以下各项的所述VL：LC CDR1，所述LC CDR1具有氨基酸序列ASQDVRTA(V/L)D(SEQID NO:138)；LC CDR2，所述LC CDR2包括氨基酸序列SASYRY(T/S)(SEQ ID NO:139)；以及LCCDR3，所述LC CDR3包括氨基酸序列QQQYTTPYT(SEQ ID NO:140)。

2.根据权利要求1所述的抗C1s抗体，其中所述抗体能够与人C1s(SEQ ID NO:99)的残基K336、R316和涵盖A390–R422的区中的至少一者结合。

3.根据权利要求1所述的抗C1s抗体，其中所述抗C1s抗体能够抑制补体激活的经典途径(CP)的活性。

4.根据权利要求3所述的抗C1s抗体，其中所述抗C1s抗体能够进行以下各项中的至少一者：抑制C1s激活的下游效应、抑制IgM诱导的C4从血清中的沉积、抑制抗体-抗原复合物介导的C4切割、抑制抗体-抗原复合物介导的C4b沉积、抑制C3转化酶的形成以及抑制CP激活的下游效应。

5.根据权利要求1所述的抗C1s抗体，其中所述抗体示出与至少一种非人C1s的交叉反应性。

6.根据权利要求5所述的抗C1s抗体，其中所述非人C1s是食蟹猴C1s。

7.根据权利要求6所述的抗C1s抗体，其中所述抗C1s抗体示出与大鼠C1s的交叉反应性。

8.根据权利要求1所述的抗C1s抗体，其中所述抗体是嵌合抗体、人源化抗体和抗原结合片段中的至少一种。

9.根据权利要求1所述的抗C1s抗体，其包括至少一种具有选自以下的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO:1；SEQ ID NO:2；SEQ ID NO:3；SEQ ID NO:4；SEQ ID NO:6；SEQ ID NO:7；SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:9；SEQ ID NO:11；SEQ ID NO:12；SEQ ID NO:13；SEQ ID NO:14；SEQ ID NO:16；SEQ ID NO:17；SEQ ID NO:18；SEQ ID NO:19；SEQ ID NO:21；SEQ ID NO:22；SEQ ID NO:23；SEQ ID NO:24；SEQ ID NO:26；SEQ ID NO:27；SEQ ID NO:28；SEQ IDNO:29；SEQ ID NO:31；SEQ ID NO:32；SEQ ID NO:33；SEQ ID NO:34；SEQ ID NO:36；SEQ IDNO:37；SEQ ID NO:38；SEQ ID NO:39；SEQ ID NO:41；SEQ ID NO:42；SEQ ID NO:43；SEQ IDNO:44；SEQ ID NO:46；SEQ ID NO:47；SEQ ID NO:48；SEQ ID NO:49；SEQ ID NO:51；SEQ IDNO:52；SEQ ID NO:53；SEQ ID NO:54；SEQ ID NO:56；SEQ ID NO:57；SEQ ID NO:58；SEQ IDNO:59；SEQ ID NO:61；SEQ ID NO:62；SEQ ID NO:63；SEQ ID NO:64；SEQ ID NO:66；SEQ IDNO:67；SEQ ID NO:68；SEQ ID NO:69；SEQ ID NO:71；SEQ ID NO:73；SEQ ID NO:75；SEQ IDNO:77；SEQ ID NO:79；SEQ ID NO:81；SEQ ID NO:83；SEQ ID NO:85；SEQ ID NO:87；SEQ IDNO:89；SEQ ID NO:91；SEQ ID NO:93；SEQ ID NO:95；或SEQ ID NO:97。

10.根据权利要求1所述的抗C1s抗体，其中所述抗体是以下各项之一：

a.抗体，所述抗体包括：重链(HC)多肽，所述HC多肽具有SEQ ID NO:71的氨基酸序列或与SEQ ID NO:71至少约85％相同的序列；以及轻链(LC)多肽，所述LC多肽具有SEQ ID NO:73的氨基酸序列或与SEQ ID NO:73至少约85％相同的序列；

b.抗体，所述抗体包括：HC多肽，所述HC多肽具有SEQ ID NO:75的氨基酸序列或与SEQID NO:75至少约85％相同的序列；以及LC多肽，所述LC多肽具有SEQ ID NO:77的氨基酸序列或与SEQ ID NO:77至少约85％相同的序列；

c.抗体，所述抗体包括：HC多肽，所述HC多肽具有SEQ ID NO:79的氨基酸序列或与SEQID NO:79至少约85％相同的序列；以及LC多肽，所述LC多肽具有SEQ ID NO:81的氨基酸序列或与SEQ ID NO:81至少约85％相同的序列；

d.抗体，所述抗体包括：HC多肽，所述HC多肽具有SEQ ID NO:83的氨基酸序列或与SEQID NO:83至少约85％相同的序列；以及LC多肽，所述LC多肽具有SEQ ID NO:85的氨基酸序列或与SEQ ID NO:85至少约85％相同的序列；

e.抗体，所述抗体包括：HC多肽，所述HC多肽具有SEQ ID NO:87的氨基酸序列或与SEQID NO:87至少约85％相同的序列；以及LC多肽，所述LC多肽具有SEQ ID NO:89的氨基酸序列或与SEQ ID NO:89至少约85％相同的序列；

f.抗体，所述抗体包括：HC多肽，所述HC多肽具有SEQ ID NO:91的氨基酸序列或与SEQID NO:91至少约85％相同的序列；以及LC多肽，所述LC多肽具有SEQ ID NO:93的氨基酸序列或与SEQ ID NO:93至少约85％相同的序列；或

g.抗体，所述抗体包括：HC多肽，所述HC多肽具有SEQ ID NO:95的氨基酸序列或与SEQID NO:95至少约85％相同的序列；以及LC多肽，所述LC多肽具有SEQ ID NO:97的氨基酸序列或与SEQ ID NO:97至少约85％相同的序列。

11.根据权利要求1所述的抗C1s抗体，其中所述抗体是以下各项之一：

a.抗体，所述抗体包括：重链可变区(VH)，所述VH具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列或与SEQ ID NO:1至少约85％相同的序列；以及轻链可变区(VL)，所述VL具有SEQ ID NO:6的氨基酸序列或与SEQ ID NO:6至少约85％相同的序列；

b.抗体，所述抗体包括：VH，所述VH具有SEQ ID NO:11的氨基酸序列或与SEQ ID NO:11至少约85％相同的序列；以及VL，所述VL具有SEQ ID NO:16的氨基酸序列或与SEQ ID NO:16至少约85％相同的序列；

c.抗体，所述抗体包括：VH，所述VH具有SEQ ID NO:21的氨基酸序列或与SEQ ID NO:21至少约85％相同的序列；以及VL，所述VL具有SEQ ID NO:26的氨基酸序列或与SEQ ID NO:26至少约85％相同的序列；

d.抗体，所述抗体包括：VH，所述VH具有SEQ ID NO:31的氨基酸序列或与SEQ ID NO:31至少约85％相同的序列；以及VL，所述VL具有SEQ ID NO:36的氨基酸序列或与SEQ ID NO:36至少约85％相同的序列；

e.抗体，所述抗体包括：VH，所述VH具有SEQ ID NO:41的氨基酸序列或与SEQ ID NO:41至少约85％相同的序列；以及VL，所述VL具有SEQ ID NO:46的氨基酸序列或与SEQ ID NO:46至少约85％相同的序列；

f.抗体，所述抗体包括：VH，所述VH具有SEQ ID NO:51的氨基酸序列或与SEQ ID NO:51至少约85％相同的序列；以及VL，所述VL具有SEQ ID NO:56的氨基酸序列或与SEQ ID NO:56至少约85％相同的序列；或

g.抗体，所述抗体包括：VH，所述VH具有SEQ ID NO:61的氨基酸序列或与SEQ ID NO:61至少约85％相同的序列；以及VL，所述VL具有SEQ ID NO:66的氨基酸序列或与SEQ ID NO:66至少约85％相同的序列。

12.根据权利要求1所述的抗C1s抗体，其中所述抗体包括SEQ ID NO:22的HC CDR1、SEQID NO:23的HC CDR2、SEQ ID NO:24的HC CDR3、SEQ ID NO:27的LC CDR1、SEQ ID NO:28的LC CDR2和SEQ ID NO:29的LC CDR3，并且进一步地其中所述抗体能够包括所述CDR区中的6个或更少的总氨基酸取代。

13.根据权利要求1所述的抗C1s抗体，其中所述抗体包括SEQ ID NO:52的HC CDR1、SEQID NO:53的HC CDR2、SEQ ID NO:54的HC CDR3、SEQ ID NO:57的LC CDR1、SEQ ID NO:58的LC CDR2和SEQ ID NO:59的LC CDR3，并且进一步地其中所述抗体能够包括所述CDR区中的6个或更少的总氨基酸取代。

14.一种治疗补体介导的病症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用有效量的根据权利要求1所述的抗C1s抗体，其中施用所述有效量的抗C1s抗体可抑制所述CP的活性。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述补体介导的病症是自身免疫性病症，所述自身免疫性病症以补体固定抗体与至少一种自身抗原的结合为特征。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述自身免疫性病症选自免疫性血小板减少性紫癜(ITP)和视神经脊髓炎(NMO)之一。

17.根据权利要求14所述的方法，其中施用所述有效量的抗C1s抗体可抑制C1s激活、抗体-抗原复合物介导的C4切割和共同补体途径效应子的形成中的至少一者。

18.根据权利要求14所述的方法，其中所述有效量的抗C1s抗体是在所述病症的急性期期间施用的。

19.一种药物组合物，其包括根据权利要求1所述的抗C1s抗体和合适的载剂和/或赋形剂。

20.一种分离的核酸分子，其编码根据权利要求1所述的抗C1s抗体的至少一部分，其中所述核酸包括至少一个选自以下的核苷酸序列：

a.抗体，所述抗体包括重链可变区(VH)，所述VH具有氨基酸序列重链(HC)核苷酸序列，所述HC核苷酸序列选自：包括SEQ ID NO:5的序列的核苷酸序列、包括与SEQ ID NO:5至少约85％相同的序列的核苷酸序列、包括SEQ ID NO:15的序列的核苷酸序列、包括与SEQ IDNO:15至少约85％相同的序列的核苷酸序列、包括SEQ ID NO:25的序列的核苷酸序列、包括与SEQ ID NO:25至少约85％相同的序列的核苷酸序列、包括SEQ ID NO:35的序列的核苷酸序列、包括与SEQ ID NO:35至少约85％相同的序列的核苷酸序列、包括SEQ ID NO:45的序列的核苷酸序列、包括与SEQ ID NO:45至少约85％相同的序列的核苷酸序列、包括SEQ IDNO:55的序列的核苷酸序列、包括与SEQ ID NO:55至少约85％相同的序列的核苷酸序列、包括SEQ ID NO:65的序列的核苷酸序列以及包括与SEQ ID NO:65至少约85％相同的序列的核苷酸序列，以及

b.轻链(LC)核苷酸序列，所述LC核苷酸序列选自：包括SEQ ID NO:10的序列的核苷酸序列、包括与SEQ ID NO:10至少约85％相同的序列的核苷酸序列、包括SEQ ID NO:20的序列的核苷酸序列、包括与SEQ ID NO:20至少约85％相同的序列的核苷酸序列、包括SEQ IDNO:30的序列的核苷酸序列、包括与SEQ ID NO:30至少约85％相同的序列的核苷酸序列、包括SEQ ID NO:40的序列的核苷酸序列、包括与SEQ ID NO:40至少约85％相同的序列的核苷酸序列、包括SEQ ID NO:50的序列的核苷酸序列、包括与SEQ ID NO:50至少约85％相同的序列的核苷酸序列、包括SEQ ID NO:60的序列的核苷酸序列、包括与SEQ ID NO:60至少约85％相同的序列的核苷酸序列、包括SEQ ID NO:70的序列的核苷酸序列以及包括与SEQ IDNO:70至少约85％相同的序列的核苷酸序列。

21.一种载体，其包括根据权利要求20所述的核酸分子。

22.一种宿主细胞，其包括根据权利要求21所述的载体。