CN117617324A - 一种可增加海马体中纤维束丰富程度的配方奶粉及其制备方法 - Google Patents

一种可增加海马体中纤维束丰富程度的配方奶粉及其制备方法 Download PDF

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CN117617324A CN202311703109.7A CN202311703109A CN117617324A CN 117617324 A CN117617324 A CN 117617324A CN 202311703109 A CN202311703109 A CN 202311703109A CN 117617324 A CN117617324 A CN 117617324A
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Abstract

本发明提供一种可增加海马体中纤维束丰富程度的配方奶粉及其制备方法,所述配方奶粉包含特定比例的唾液酸、鞘磷脂(Sphingomyelin,SM)、脑磷脂(PE),能够增强胼胝体和左右海马体中白质纤维束丰富程度,有助于提升空间学习与记忆能力。

Description

一种可增加海马体中纤维束丰富程度的配方奶粉及其制备 方法
技术领域
本发明涉及一种配方奶粉,其包含特定比例的唾液酸(Sialic acids,SA)、鞘磷脂(Sphingomyelin,SM)、脑磷脂(Phosphatidyl ethanolamine,PE,又称为磷脂酰乙醇胺),能够增强胼胝体和左右海马体中纤维束丰富程度,有助于提升空间学习与记忆能力。
背景技术
鞘磷脂(Sphingomyelin,SM)是人乳和牛乳中主要的鞘脂之一,是神经元和脂质双层的关键结构成分。SM作为磷脂的一类,是一分子脂肪酸已酰胺键与鞘氨醇的氨基相连形成的。SM是新生儿胆碱的主要来源之一,而胆碱是神经递质乙酰胆碱的前体氨基醇。胆碱一方面可作为信号转导发挥作用,另一方面也可作为甲基源支持婴儿大脑发育。SM的含量随泌乳期的进行而下降,但其占母乳总磷脂的比例却随着母乳期的进行而逐渐升高(“不同泌乳期人乳磷脂成分的研究”,上海交通大学学报(医学版),高润颖等,2017年,Vol37,p1511-1155)。
SM多存在于人体中枢神经系统中富集,特别是在包围神经元轴突的髓鞘中富集。以往研究结果显示SM在调节细胞生长、分化及凋亡、炎症反应调节、神经信号转导、以及调节胆固醇吸收等方面发挥着重要作用。此外,SM在维持髓鞘完成性、髓鞘功能以及轴突成熟发挥着重要作用。此外,SM对中枢神经系统髓鞘化、婴儿和儿童的大脑网络成熟、协调的信息处理以及最终的认知表现中非常重要。因此,SM可能通过参与中枢神经系统髓鞘化的结构和功能,在认知发育中发挥重要作用。
脑磷脂(Phosphatidyl ethanolamine,PE),又称为磷脂酰乙醇胺,是构成生物膜的重要磷脂之一,占哺乳动物细胞磷脂总量的15%~25%。研究结果表明,脑磷脂主要存在于脑、神经、微生物和大豆中,在信号传导和维持生命功能等方面发挥重要作用。例如,对阿尔茨海默病人大脑中磷脂含量的研究中发现,患者额叶中的脑磷脂含量大量减少。
当母乳缺乏或不足时,婴幼儿配方奶粉是其最佳的替代品。由于磷脂主要位于乳脂肪球膜上,而现有婴幼儿配方奶粉的研发重点多集中于甘油三酯构型和脂肪酸的组成,对磷脂,尤其是鞘磷脂和脑磷脂等磷脂及其亚类成分关注较少,导致婴幼儿配方奶粉中的磷脂与母乳有较大差异,是现阶段面临的挑战。
唾液酸(Sialic acids,SA)是一类带羧基的九碳糖化合物酰基衍生物的统称,多位于糖蛋白和糖脂等大分子的末端,是细胞膜上的糖蛋白和糖脂的重要组成部分。前期研究表明唾液酸在细胞增殖分化、细胞系别、与病原微生物相互作用、免疫反应、神经发育、记忆的形成及提高学习能力等方面有着重要作用。唾液酸在脑中含量最高,尤其是在大脑灰质中,与神经节苷脂上结合。神经节苷脂可调节突触可塑性,在学习和记忆等神经活动中起到重要作用。
大脑神经纤维是神经细胞(或神经元)的长线状延伸组成,正常大脑功能的运转需要通过纤维通道使得各特殊区域能精密链接。脑组织中的水分子不断在进行弥散运动,该运动不仅受组织细胞本身特征的影响,还受细胞内部结构的影响,如髓鞘、细胞膜、白质纤维束。水分子通常更倾向于沿着神经纤维束走形的方向进行弥散,这种具有方向依赖性的弥散称为弥散的各向异性。各向异性分数(fractional anisotropy,FA)是弥散张量成像的重要参数之一,指弥散各向异性与整个弥散的比值,FA的数值可以反映纤维束丰度程度。有研究表明FA在大脑发育早期快速增加,然后在老年期逐渐下降。
唾液酸被发现在人脑和母乳中具有高浓度,且其被提出作为可能对中枢神经系统的发育产生影响的乳因子(B.Wang等Eur J Clin Nutr,(2003)57,1351-1369)。唾液酸在仔猪饮食中的富集已被证明可以提高记忆力和学习能力(B.Wang等Am J Clin Nutr,2007;85:561-569)。
但是,以往研究仅关注三种物质中的1个物质对大脑发育的影响,未对三种物质不同比例的促进效果进行深入挖掘。另外,对于营养组合来说,唾液酸、鞘磷脂、脑磷脂通常是通过乳成分(例如乳清蛋白粉)和/或大豆磷脂加入的,但是,以往没有认识到三种物质不同比例对大脑发育的促进效果,不会精准地调整其比例关系。
专利文件CN 112042750 A公开了一种婴幼儿配方奶粉,每100克所述婴幼儿配方奶粉中,含有唾液酸0.15g、神经鞘磷脂0.12g、脑磷脂0.14g(参见其权利要求2)。但其对于不同比例的唾液酸、神经鞘磷脂、脑磷脂对海马体中纤维束丰富程度没有任何记载。
另外,专利文件CN 105744845 A公开了一种具有磷脂的营养组合物,但其仅要求包含量为至少300mg/L的磷脂,对于鞘磷脂和脑磷脂以及唾液酸的比例没有任何记载,特别是对于鞘磷脂以及脑磷脂与唾液酸的比例没有任何记载。
发明内容
本案发明人在研究中发现,鞘磷脂、脑磷脂、唾液酸以特定比例组合时,能够增强胼胝体和左右海马体中纤维束丰富程度,有助于提升空间学习与记忆能力。
从而,本发明提供一种配方奶粉,以重量比计,其包含(0.2~0.7):(0.3~0.7):1的鞘磷脂:脑磷脂:唾液酸,且鞘磷脂/脑磷脂在0.30~2.33的范围。
另外,本发明的配方奶粉中,鞘磷脂/脑磷脂的下限优选为0.50、0.55、0.60、0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.95、1.00、1.05、1.10、1.15、1.20、1.25、1.30、1.35、1.40。鞘磷脂/脑磷脂的上限优选为2.33,更优选为2.30、2.25、2.20、2.15、2.10、2.05、2.00。
另外,本发明的配方奶粉中,以固体成分计,相对于每100mg唾液酸,含有20~70mg鞘磷脂、30~70mg的脑磷脂。
另外,本发明的配方奶粉中,以固体成分计,相对于每100mg唾液酸,鞘磷脂含量的下限优选为30mg、32mg、34mg、36mg、38mg、40mg、42mg、44mg、46mg;鞘磷脂含量的上限优选为67mg、65mg、63mg、62mg;脑磷脂的含量下限优选为35mg、37mg、39mg、41mg;脑磷脂含量的上限优选为65mg、63mg、61mg、59mg、57mg、55mg、53mg、51mg、49mg。
本发明所述的配方奶粉,每100g配方奶粉中包括蛋白质9-23g,脂肪7-30g,膳食纤维0.05-7.5g,碳水化合物45-60g。
在本发明中,所述蛋白质的来源包括但不限于生乳(牛/羊)、全脂奶粉(牛/羊)、脱脂奶粉(牛/羊)、乳清蛋白粉(牛/羊)、脱盐乳清粉中(牛/羊)、β-酪蛋白的一种或多种,其中蛋白质中乳清蛋白质的质量含量为20-70%。
在本发明中,所述脂肪的来源包括乳脂和植物油中的任意一种或多种。所述植物油包括磷脂、葵花籽油、玉米油、大豆油、低芥酸菜籽油、椰子油、棕榈油、紫苏油或核桃油中的任意一种或多种。此外,提供脂肪的原料还可选择性包括为提供1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯而添加的原料OPO结构脂,其中有效成分1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯的含量为40%-70%。
在本发明中,所述膳食纤维的来源包括低聚果糖、低聚半乳糖、棉子糖、母乳低聚糖的一种或多种。
在本发明中,碳水化合物一部分来自含有乳糖的基础原料如牛奶、全脂奶粉和/或脱脂奶粉等,剩余部分来源于额外添加的乳糖、麦芽糊精等原料。
根据本发明的具体实施方案,本发明的配方奶粉的原料中还可以包括适当的DHA、ARA、核苷酸、乳铁蛋白、益生菌等中的一种或两种以上的组合。
根据本发明的具体实施方案,本发明的配方奶粉的原料中还可以包括包含钙粉、维生素和矿物质的复配营养素。该复配营养素为符合国家标准的营养成分的组合,按照不同配方使用不同添加量。
本发明的婴幼儿配方奶粉,其原料包括:
其中,乳清蛋白粉或羊乳清蛋白粉(富含乳脂肪球膜)、α-乳清蛋白粉、大豆磷脂包含唾液酸、鞘磷脂和/或脑磷脂,复配营养素包含钙粉、维生素和矿物质。
本发明的配方奶粉可以为婴幼儿配方奶粉、儿童配方奶粉、中老年配方奶粉或特殊医学用途婴儿配方奶粉。
本发明的配方奶粉中,未详细说明或列出的产品性能指标均应按照婴幼儿配方奶粉或调制乳粉的国家标准及相关标准和法规的规定执行。
本发明的配方奶粉中,各原料均可商购获得,各原料的选用应符合相关标准要求,其中所述蛋白组合物应满足本发明所述要求。此外,所述复配营养素也可自行复配。本发明中仅是为方便表述而采用“复配”,并不意味着复配物中各组分必须先混合在一起再应用。各原料均应在满足相关法规前提下添加使用。
另一方面,本发明还提供了上述配方奶粉的制备方法,其制备的工艺流程主要包括:配料、均质、浓缩杀菌、喷雾干燥、干混得到成品。具体制备方法包括:
将经过粗滤均质杀菌的牛奶、粉类原料和溶化的油脂原料混合,在小料斗中加入低聚半乳糖浆,在营养素缸中加入复配营养强化剂,得到混合料液;
对混合料液进行过滤、均质、冷却、浓缩杀菌、喷雾干燥、流化床干燥冷却得到干燥的奶粉,与DHA、ARA、乳铁蛋白、核苷酸、双歧杆菌混合,经过筛分得到所述婴幼儿奶粉。
在上述制备方法中,优选混合料液的均质处理的一级压力为105±5bar,二级压力为32±3bar。
在上述制备方法中,优选所述浓缩杀菌采用双效浓缩,更优选地,杀菌温度≥83℃,杀菌时间为25秒;进一步优选地,出料浓度均为48%-52%干物质。
在上述制备方法中,优选所述喷雾干燥的进风温度为165-180℃,排风温度为75-90℃,高压泵压力为160-210bar,塔负压为-4mbar至-2mbar。
在上述制备方法中,优选流化床干燥冷却包括两次干燥冷却,二次干燥冷却后的奶粉温度为25-30℃;同时将磷脂与载体混合后加热至60-65℃,在压缩空气作用下,均匀分散到奶粉表面。
重要的是,在本发明的制造方法中,首先要检测乳清蛋白粉或羊乳清蛋白粉(富含乳脂肪球膜)、α-乳清蛋白粉、大豆磷脂中的鞘磷脂、脑磷脂、唾液酸的含量,然后根据检测结果确定乳清蛋白粉或羊乳清蛋白粉(富含乳脂肪球膜)、α-乳清蛋白粉、大豆磷脂的添加量。
在本发明的一个具体实施方案中,本发明的婴幼儿配方奶粉的制备过程可以包括以下具体步骤:
1)牛奶粗滤:牛奶经过粗过滤及平衡缸脱气后,经过板式换热器预热后,经过分离机分离杂质。
2)牛奶均质杀菌:去除杂质后的牛奶一部分进入均质机均质,另一部分不均质,经过均质的牛奶和未经均质的牛奶混合之后进入杀菌系统杀菌,杀菌后进入混料罐。
3)粉类添加:各种粉类原料按配方经计量后通过风送系统统一加入到配粉罐中贮存。
4)真空吸粉:配粉罐中的各种粉类原料通过真空系统吸入混料罐中。
5)溶化配油:按配方要求将配方中规定的油脂放入化油间,化油间的温度应保持在50-90℃,待油溶化后,按配方比例要求通过油泵和流量计打入混合油贮罐中。
6)混合油料贮存:混合油在油贮存罐中保温贮存,温度为40-50℃,贮存时间小于12小时,防止脂肪氧化。
7)称重:按配方要求将混合油经油泵打入混料罐。
8)复配营养强化剂溶解添加:复配营养强化剂用100-800kg纯净水分别溶解后,打入混料罐,每打完一种用100kg纯净水冲洗添加罐和管线。
9)小料添加:在小料斗里添加低聚半乳糖桨,抽取到混料罐中。
10)过滤:在混料罐中将各部分原料混合,混合得到的料液经滤网过滤,去除原料中可能带入的物理杂质。
11)均质:混合后的料液通过均质机进行均质,一级压力为105±5bar,二级压力为32±3bar,将脂肪球进行机械处理,把它们分散成均匀一致的脂肪球。
12)冷却与贮存:均质后的料液进入板式换热器进行冷却,冷却至20℃以下,暂存在预存缸中,6小时内进入下道工序,搅拌器按设定需求开启。
13)浓缩杀菌:生产时使用双效浓缩,杀菌温度≥83℃,杀菌时间25秒;出料浓度均为48%-52%干物质。
14)浓奶贮存、预热过滤、喷雾干燥:浓缩后的奶暂存在浓奶平衡罐;经刮板预热器预热到60-70℃,预热后物料经1mm孔径的过滤器过滤后,用高压泵打入干燥塔喷雾干燥,细粉按要求在塔顶或流化床附聚;其中,进风温度为165-180℃,排风温度为75-90℃,高压泵压力为160-210bar,塔负压为-4mbar至-2mbar。
15)流化床干燥冷却:从干燥塔出来的奶粉再经流化床(一级)二次干燥后,经流化床(二级)冷却到25-30℃;同时将磷脂与载体混合后加热至60-65℃,在压缩空气作用下,使磷脂均匀分散到奶粉表面,使粉颗粒附聚增加其颗粒度和速溶性。
16)分装:按照配方要求,将DHA、ARA、乳铁蛋白、核苷酸、双歧杆菌称量封袋分装。
17)干混:将称量好的DHA、ARA、乳铁蛋白、核苷酸、双歧杆菌与奶粉在干混机内混均。
18)筛粉:通过振动筛,使奶粉的颗粒度均匀,粉渣报废处理。
19)出粉:用经过消毒的集粉箱接粉,并由出粉间运至上粉间。
20)上粉:将奶粉按包装要求倒入大小包装机上的储粉罐中。
21)包装:不同规格自动包装机充氮包装;充氮时含氧量低于1-5%。
22)装箱:将已包装的小袋装入纸箱中同时加入粉勺,用封箱机封口。
23)成品检验:对包装完后的产品按检验计划进行抽样检验。
24)入库贮存:经检验合格的产品入库贮存,要求在常温下贮存,湿度≤65%。
附图说明
图1:示出了仔猪体重随食用营养组合物的天数的变化。
图2:示出了各组仔猪的体重增加情况。
图3:示出了各组仔猪的摄食量情况。
图4:示出了各组仔猪T迷宫移动距离。
图5:示出了各组仔猪T迷宫移动速度。
图6:示出了各组仔猪T迷宫选择正确率。
图7:示出了各组仔猪T迷宫单向选择比例。
图8:示出了各组仔猪第4天和第5天T迷宫单向选择比例。
图9:示出了各组仔猪完成学习的天数。
图10:示出了各组仔猪脑部不同部位各向异性分数(FA)的影响。
图11:T迷宫试验的示意图。
具体实施方式
为了对本发明的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解,现结合具体实例及附图对本发明的技术方案进行以下详细说明,应理解这些实例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。除非另外专门定义,本文使用的所有技术和科学术语都与相关领域普通技术人员的通常理解具有相同的含义。
本发明中,该配方奶粉通常是合成配方奶粉,即并非来自人类的配方奶粉(例如,该配方奶粉不是母乳)。
本发明以下实施例中所用的实验原料均可从市场上购买或者按照本领域技术人员熟知的常规制备方法制备得到。
实施例1
本实施例提供一种婴幼儿配方奶粉,其中总蛋白质含量为13.5g/100g粉,脂肪含量为27.5g/100g粉;碳水化合物含量为48.4g/100g粉,鞘磷脂72.9mg/100g粉,脑磷脂53.6mg/100g粉,唾液酸130.5mg/100g粉,所述鞘磷脂:脑磷脂:唾液酸的比例为0.56:0.41:1,鞘磷脂/脑磷脂的比例为1.36:1。
本实施例由以下重量份的原料复配实现,其原料组成包括(制备1000份重量):
生牛乳1000份、脱盐乳清粉(D90)300份、食用植物调和油190份、乳糖185份、α-乳清蛋白粉(含3%鞘磷脂和15%唾液酸)45份、低聚半乳糖40份、乳清蛋白粉(富含乳脂肪球膜)(含5%鞘磷脂和20%唾液酸)30份、磷脂(含15%鞘磷脂、17%脑磷脂和5%唾液酸)35份、低聚果糖18份、酪蛋白17份、复配营养素24份(复配营养素包括复配维生素营养包约4份、氯化胆碱营养包约2份、矿物质二营养包约12份、矿物质一营养包约1份、氯化镁营养包约2份和氯化钾营养包约3份,各营养包的基料为乳糖)、DHA 11份,ARA 15份,双歧杆菌0.2份,核苷酸约0.7份。
本实施例的婴幼儿配方奶粉具体制备工艺如下:
1)牛乳粗滤:将牛乳经过粗过滤及平衡缸脱气后,经过板式换热器预热后,经过分离机分离杂质。
2)牛乳均质杀菌:去除杂质后的生牛乳一部分进入均质机均质,另一部分不均质,二者在均质后进行混合进入杀菌系统杀菌。
3)粉类添加:各种粉类原料按配方经计量后通过风送系统统一加入到配粉罐中,并通过真空系统吸入真空混料罐中;
4)溶化配油:按配方要求将配方中规定的油脂放入化油间,化油间的温度保持在50~90℃,待油溶化后,打入混合油贮罐中,并按配方要求将混合油经油泵打入混料罐中;
5)营养素溶解添加:将钙粉、维生素、矿物质等营养素包用纯净水分别溶解后,依序添加到混料罐中,得到混合的料液。
6)过滤:经混合的料液经滤网过滤,去除原料中可能带入的物理杂质。
7)均质:混合后的料液通过均质机进行均质,将脂肪球进行机械处理,把它们分散成均匀一致的脂肪球。
8)冷却与贮存:均质后的料液进入板式换热器进行冷却:冷却至20℃以下,暂存在预存缸中,6小时内进入下道工序,搅拌器按设定需求开启。
9)浓缩杀菌:生产时使用双效浓缩,杀菌温度≥83℃,杀菌时间25秒。出料浓度均为50%干物质。
10)浓奶贮存、预热过滤、喷雾干燥:浓缩后的奶暂存在浓奶平衡罐。经刮板预热器预热到60℃,预热后物料经1mm孔径的过滤器过滤后,用高压泵打入干燥塔喷雾干燥,细粉按要求在塔顶或流化床附聚。进风温度:180℃,排风温度86℃,高压泵压力200bar,塔负压-4mba左右。
11)流化床干燥冷却:从干燥塔出来的粉再经流化床(一级)二次干燥后,经流化床(二级)冷却到30℃,得到奶粉主料。
12)分装:按照配方要求,将DHA、ARA或双歧杆菌称量封袋分装。
13)干混:将称量好的DHA、ARA或双歧杆菌与奶粉主料在干混机内混均。
14)筛粉:通过振动筛,使奶粉的颗粒度均匀,粉渣报废处理。
15)出粉:用经过消毒的集粉箱接粉,并由出粉间运至上粉间。
16)上粉:将奶粉按包装要求倒入大小包装机上的储粉罐中。
17)包装:400克自动包装机充氮包装。充氮时含氧量低于1%。900克铁听自动充氮包装含氧量低于5%。
18)装箱:将已包装的小袋装入纸箱中同时加入粉勺,用封箱机封口。
19)成品检验:对包装完后的产品按检验计划进行抽样检验。
20)入库贮存:经检验合格的产品入库贮存,要求在常温下贮存,湿度≤65%。
实施例2
本实施例提供一种婴幼儿配方奶粉,其中总蛋白质含量为15.2g/100g粉,脂肪含量为23.5g/100g粉;碳水化合物含量为50.8g/100g粉,鞘磷脂75.2mg/100g粉,脑磷脂58.1mg/100g粉,唾液酸127.4mg/100g粉,所述鞘磷脂:脑磷脂:唾液酸的比例为0.59:0.45:1,鞘磷脂/脑磷脂的比例为1.29:1。
本实施例由以下重量份的原料复配实现,其原料组成包括(制备1000份重量):
生牛乳1000份、食用植物调和油150份、脱脂奶粉120份、脱盐乳清粉(D90)200份、乳糖260份、α-乳清蛋白粉(含3%鞘磷脂和15%唾液酸)55份、磷脂(含15%鞘磷脂、17%脑磷脂和5%唾液酸)38份、乳清蛋白粉(富含乳脂肪球膜)(含5%鞘磷脂和20%唾液酸)20份、低聚半乳糖12份、低聚果糖5份、复配营养素21份(复配营养素包括复配维生素营养包约3份、氯化胆碱营养包约2份、矿物质二营养包约10份、矿物质一营养包约1份、氯化镁营养包约2份和氯化钾营养包约3份,各营养包的基料为乳糖)、DHA 12份、ARA 16份、双歧杆菌0.2份。
本实施例的婴幼儿配方奶粉具体制备工艺与实施例1一致。
实施例3
本实施例提供一种婴幼儿配方奶粉,其中总蛋白质含量为11.5g/100g粉,脂肪含量为25.0g/100g粉;碳水化合物含量为53.2g/100g粉,鞘磷脂65.7mg/100g粉,脑磷脂49.0mg/100g粉,唾液酸104.4mg/100g粉,所述鞘磷脂:脑磷脂:唾液酸的比例为0.63:0.47:1,鞘磷脂/脑磷脂的比例为1.34:1。
本实施例由以下重量份的原料复配实现,其原料组成包括(制备1000份重量):
全脂羊奶粉200份、脱盐羊乳清粉(D90)250份、食用植物调和油150份、乳糖285份、低聚半乳糖5份、羊乳清蛋白粉(含5%鞘磷脂和20%唾液酸)50份、低聚果糖5份、磷脂(含15%鞘磷脂、17%脑磷脂和5%唾液酸)32份、复配营养素20份(复配营养素包括复配维生素营养包约4份、氯化胆碱营养包约2份、矿物质二营养包约10份、矿物质一营养包约1份、氯化镁营养包约1份和氯化钾营养包约2份,各营养包的基料为乳糖)、DHA 11份、ARA 11份、双歧杆菌0.2份、核苷酸1份。
本实施例的婴幼儿配方奶粉具体制备工艺与实施例1一致。
经评价,实施例1-3所制得的婴幼儿配方奶粉的粉体均匀性好,无结团,并且易冲调。
实验例
试验材料
基础粉:仔猪代乳粉,北京市昌平区中国农业科学院试验基地生产的“精准”
鞘磷脂:商购获得,食品级;
脑磷脂:商购获得,食品级;
唾液酸:购自嘉必优公司,纯度大于等于98%。
营养组合物的制备
每100g仔猪常规饲料,按下述表1所示的量添加鞘磷脂、脑磷脂和唾液酸,得到实验例1~4以及比较实验例1的营养组合物1M~5M。
表1:各组营养素添加量表(mg/100g)
鞘磷脂 脑磷脂 唾液酸
实验例1(1M) 60 40 100
实验例2(2M) 67 33 100
实验例3(3M) 52 48 100
实验例4(4M) 35 65 100
比较实验例1(5M) 71 29 100
比较实验例2(6M) 50 50 40
各营养组合物中鞘磷脂/脑磷脂的比如下述表2所示。
表2
组别 鞘磷脂/脑磷脂
实验例1(1M) 1.50
实验例2(2M) 2.03
实验例3(3M) 1.07
实验例4(4M) 0.53
比较实验例1(5M) 2.43
比较实验例2(6M) 1.00
实验动物
实验使用新生2日龄普通级雄性三元杂交仔猪。仔猪体重范围为1.3~2.0kg,每个实验组别纳入10头仔猪,共计60头。
动物饲养条件
仔猪饲养条件依照中华人民共和国国家标准GB14925-2010执行,具体为:
温度:室温16~26℃;
湿度:相对湿度40~70%;
光照:人工照明,12小时明暗交替;
换气次数:≥8次/小时,100%全新风;
饲喂方法:每天5次,饲喂时间为9am,1pm,5pm,9pm和1am。
试验设计
动物入组与饲养
选择2日龄的新生雄性仔猪,体重1.3~2.0kg,根据母猪生育情况,每批次入室5~10只。依照仔猪当日体重,调整每日喂食量。将上述营养组合物1M~5M使用温水(37~40℃)配制奶液,每4~5小时重新配制一次奶液。仔猪饲养到产后第30天。
分组信息如表3所示。
表3
组别 比例(SM:PE:SA) 动物只数
实验例1(1M) 0.6:0.4:1 10
实验例2(2M) 0.67:0.33:1 10
实验例3(3M) 0.52:0.48:1 10
实验例4(4M) 0.35:0.65:1 10
比较实验例1(5M) 0.71:0.29:1 10
比较实验例2(6M) 0.5:0.5:0.4 10
仔猪生理指标
实验期间每日早上记录仔猪空腹体重和摄食量,于喂养第29天时对受试仔猪进行脑部MRI扫描,并于实验最后一天采集仔猪血液和大脑样本,进行血常规检测及大脑重量分析。
仔猪行为学指标
受试仔猪干预第15天时,开始为期5天的T-迷宫行为学实验。在图11所示的迷宫的东向或西向放置奖励食物,仔猪被随机放置在迷宫的南侧或北侧入口,如果仔猪在60秒内在东向或西向上找到相应的食物奖励,记作完成任务,每只仔猪每天进行10次测试,记录仔猪完成任务次数及时间,计算正确率、任务完成率和移动速率及距离等指标。所有参与行为学实验的实施人员均不清楚干预饮食的组别。
仔猪空腹体重和摄食量
仔猪入组时记录初始体重,并在测试阶段每天固定时间记录仔猪体重,跟踪仔猪体重变化情况,结果如图1所示。
如图1所示,各组仔猪体重变化情况均无显著差异,表明受试配方可满足仔猪正常生长需求。
另外,如图2所示,各组动物在试验期间的日体重变化和体重增加情况无显著差异,表明受试配方可满足仔猪正常生长需求。
仔猪每日摄食量如图3所示,仔猪每日摄食量与体重呈正相关,二者变化趋势一致,且各组无显著差异,表明受试配方不会影响仔猪的日采食量。
T迷宫试验
T迷宫是一种评价空间记忆能力的行为实验方法,主要应用于动物的辨别性学习记忆和参考记忆的测试。本发明中对于食用各营养组合物的仔猪进行了T迷宫实验。
具体地说,在图11所示的迷宫的东向或西向放置奖励食物,仔猪被随机放置在迷宫的南侧或北侧入口,如果仔猪在60秒内在东向或西向上找到相应的食物奖励,记作完成任务。每只仔猪每天进行10次测试,记录仔猪完成任务次数及时间,计算正确率、任务完成率和移动速率及距离等指标。所有参与行为学实验的实施人员均不清楚干预饮食的组别。
仔猪在T迷宫移动距离和所用时间如图4和图5所示。
由图4和图5可知,根据仔猪在T迷宫移动距离和所用时间,发现随着受试配方饲喂天数的增加,仔猪在T迷宫的移动距离逐渐减少,移动速度逐渐加快,但是各组之间差异无显著性,表明各组动物的体能处于相接近水平。
另外,各组仔猪在T迷宫食物奖励选择正确率如图6所示。
图6中的A表示受试配方喂养第4天的各组仔猪在T迷宫食物奖励选择正确率,图6中的B表示受试配方喂养第5天的各组仔猪在T迷宫食物奖励选择正确率。由图6可知,随着受试配方喂养天数的增加,各组仔猪在T迷宫食物奖励选择正确率均逐渐升高,但各组间的升高幅度各异。与比较实验例1(5M)以及比较实验例2(6M)相比,实验例1~4(1M~4M)可显著提高仔猪T迷宫食物选择的正确率,随着干预天数的增加,仔猪T迷宫选择正确率也逐步提升,可以看到实验例1~4干预到第4天,仔猪T迷宫选择正确率已达到80%左右,即完成学习。而比较实验例1(5M)在整个测试期间T迷宫选择正确率均低于80%。统计学分析显示,实验例1~4组与比较实验例1(5M)以及比较实验例2(6M)在第四(图6中的A)和五天(图6中的B)具有统计学差异,表明调整鞘磷脂、脑磷脂即唾液酸比例的配方粉可显著提高仔猪T迷宫选择正确率。
另外,为了减少因动物单向偏好选择引起的实验误差,在T迷宫实验中记录仔猪每次进入T迷宫后选择的前进方向,并与前一次比较,计算选择改变比例(alteration rate,AR),分析仔猪的单向偏好情况。由于绝大多数情况下动物的正确率都是大于50%的,因此该比例低者选择正确率高。由图7可以看出,除比较实验例1(5M)和比较实验例2(6M)外,在整个迷宫阶段随着天数的增加,实验例1~4组中AR值是逐渐降低的趋势。重点分析第4天(图8中的A)和第5天(图8中的B)单向选择比例情况,发现与比较实验例1以及比较实验例2相比,实验例1~4组均可明显降低AR比例。
另外,将每天的正确率超过80%定义为动物完成学习,如图9所示,在采集阶段的6天中,实验例1(1M)完成学习的天数最多,为3.89±0.93天,显著高于比较实验例1(5M)的2.30±1.64天和比较实验例2的1.90±0.88天。
另外,在实验第29天,对小猪进行脑部核磁共振(MRI)检测,通过弥散张量成像(diffusion tensor imaging,DTI)技术,来分析仔猪脑部组织各向异性分数(FA)来评估白质纤维素丰富程度,脑组织中白质纤维素丰富程度与脑网格结构发育程度及神经传导速率密切相关。实验结果如图10所示,实验例和比较实验例的全脑的FA值无统计学差异,但是在大脑胼胝体及左/右海马体区域具有显著差异。比较实验例1和比较实验例2中左右侧海马FA值是所有受试组别中最低的,与比较实验例1以及比较实验例2相比,实验例1~4可显著提高动物左/右侧海马体FA值。表明实验例1~4的营养组合物可提高仔猪脑组织中白质纤维素丰富程度,提高仔猪大脑发育程度,该指标与行为学数据有较好的对应关系,可在一定程度上解释实验例1~4组动物行为学表现更优秀的原因。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制,本领域技术人员显然清楚,可以在不脱离本发明范围内对上述各实施例所记载的技术方案进行更改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。

Claims (10)

1.一种配方奶粉,每100g配方奶粉中包括蛋白质9-23g,脂肪7-30g,膳食纤维0.05-7.5g,碳水化合物45-60g,以重量比计,其特征在于,所述配方奶粉包含(0.2~0.7):(0.3~0.7):1的鞘磷脂:脑磷脂:唾液酸,且鞘磷脂/脑磷脂在0.30~2.33的范围。
2.如权利要求1所述的配方奶粉,其特征在于,鞘磷脂/脑磷脂为0.50~2.30。
3.如权利要求1所述的配方奶粉,其特征在于,鞘磷脂/脑磷脂为0.50~1.15。
4.如权利要求1所述的配方奶粉,其特征在于,鞘磷脂/脑磷脂为1.25~2.30。
5.如权利要求1~3任一项所述的配方奶粉,其特征在于,以固体成分计,相对于每100mg唾液酸,含有20~70mg鞘磷脂、30~70mg的脑磷脂。
6.如权利要求4所述的配方奶粉,其特征在于,以固体成分计,相对于每100mg唾液酸,鞘磷脂含量为30mg~70mg;脑磷脂含量为30mg~67mg。
7.一种配方奶粉的制备方法,其特征在于,所述方法包括:
检测步骤,检测α-乳清蛋白粉、富含乳脂肪球膜的乳清蛋白粉、磷脂中的鞘磷脂、脑磷脂、唾液酸的含量的步骤;
鞘磷脂、脑磷脂、唾液酸的调整步骤,按上述检测的结果,调整α-乳清蛋白粉、富含乳脂肪球膜的乳清蛋白粉、磷脂的添加量,使得最终产物中的鞘磷脂:脑磷脂:唾液酸(0.2~0.7):(0.3~0.7):1,且鞘磷脂/脑磷脂在0.30~2.33的范围。
8.如权利要求7所述的制备方法,其特征在于,鞘磷脂、脑磷脂、唾液酸的调整步骤中,使得最终产物中的鞘磷脂/脑磷脂为0.50~2.30。
9.如权利要求7或8所述的制备方法,其特征在于,鞘磷脂、脑磷脂、唾液酸的调整步骤中,使得最终产物中的鞘磷脂/脑磷脂为0.50~1.15。
10.如权利要求7或8所述的制备方法,其特征在于,鞘磷脂、脑磷脂、唾液酸的调整步骤中,使得最终产物中的鞘磷脂/脑磷脂为1.25~2.30。
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