CN117580585A - Cd40l拮抗剂及其在治疗狼疮性肾炎中的用途 - Google Patents

Abstract

本文提供了用于治疗狼疮性肾炎的人CD40L特异性Tn3分子及其治疗用途。还提供了包含CD40L特异性Tn3支架的治疗方案。

Description

CD40L拮抗剂及其在治疗狼疮性肾炎中的用途

相关申请的交叉引用

本申请要求于2021年5月21日提交的美国临时专利申请第63/191,514号和于2021年8月20日提交的美国临时专利申请第63/235,520的优先权，两者出于所有目的以引用方式整体并入本文。

以电子方式提交的文本文件的描述

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技术领域

本公开涉及CD40L拮抗剂以及制备和利用所述拮抗剂预防和治疗狼疮性肾炎的方法。

背景技术

CD40/CD40L途径在驱动体液免疫反应中起着关键作用，并与几种自身免疫性疾病的发病机制有关。CD40在多种抗原呈递细胞上组成性地表达，包括树突状细胞(DC)、巨噬细胞和B细胞(S.Sugio,A等人,1999)，并且也可以在非造血细胞上表达。

CD40配体CD40L(也称为CD154)的表达受到高度调节，并且大部分在活化的CD4+T细胞上发现(Lederman等人,1992)。B细胞与活化的T细胞之间的CD40/CD40L相互作用对于建立针对T-依赖性抗原的有效体液反应是必需的(M.Croft等人,1994；T.M.Foy等人,1994；J.B.Splawski等人,1994)。CD40/CD40L轴在体外驱动B细胞扩增、分化和同种型转换(R.J.Armitage等人,1992；P.Garside等人,1998；D.Hollenbaugh等人,1992；R.J.Noelle等人,1992)。在体内，生发中心(GC)形成、体细胞超突变以及记忆B细胞和长寿浆细胞的生成都需要CD40信号传导(T.M.Foy等人,1994；T.M.Foy等人,1993；S.Han等人,1995；T.Kawabe等人,1994)。人体中的CD40或CD40L缺陷导致X连锁高免疫球蛋白综合征，这是一种以同种型转换受损为特征的疾病，其表现为高水平的血清IgM，而IgG、IgA或IgE水平低或检测不到，以及对感染的易感性增加(R.C.Allen等人,1993；A.Aruffo等人,1993；J.P.DiSanto等人,1993)。

二价CD40L特异性Tn3蛋白与人血清白蛋白(HSA)的融合产生能够结合人CD40L并防止其与CD40受体相互作用的分子，即，VIB4920。与这种CD40L/CD40相互作用中的破坏一致，VIB4920能够通过阻断CD40信号传导事件在体外有效地抑制人B细胞的活化和分化。

目前可用的方法涉及治疗自身免疫性疾病，而不是预防此类疾病。此外，自身免疫性疾病的常规治疗选项包括与多种副作用相关的免疫抑制药物。因此，需要用于治疗和预防自身免疫性疾病，特别是狼疮性肾炎的更好的治疗替代物。本公开解决了这些需要。

发明内容

本说明书提供了一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架；其中所述Tn3支架与CD40L结合；其中所述单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ ID NO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ ID NO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16，其中所述包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架以约1500mg的剂量施用，并且其中所述Tn3支架约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。

本说明书提供了一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架；其中所述Tn3支架与CD40L结合；其中所述单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ ID NO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ ID NO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16，其中所述包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架以约1500mg的剂量施用，并且其中所述Tn3支架约每2周施用一次，持续至少3个剂量，并且此后约每月施用一次。

本说明书提供了一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架与吗替麦考酚酯(MMF)的组合；其中所述Tn3支架与CD40L结合；其中所述单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ ID NO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ ID NO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16，其中所述Tn3支架以约1500mg的剂量施用。

本说明书提供了用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架与吗替麦考酚酯(MMF)和甲泼尼龙的组合；其中所述Tn3支架与CD40L结合；其中所述单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ ID NO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ ID NO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16，其中所述Tn3支架以约1500mg的剂量施用。

本说明书提供了一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架与环磷酰胺的组合，其中所述Tn3支架与CD40L结合；其中所述单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQID NO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ IDNO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16，其中所述Tn3支架以约1500mg的剂量施用。在各方面，在首次施用所述Tn3支架之前施用环磷酰胺至少约八周、十周、十二周或更多周。在各方面，在首次施用所述Tn3支架之前施用所述环磷酰胺至少约八周。在各方面，在首次施用所述Tn3支架之前施用所述环磷酰胺至少约十周。在各方面，在首次施用所述Tn3支架之前施用所述环磷酰胺至少约十二周。

在各方面，所述Tn3支架约每两周、三周、四周施用一次，或约每月施用一次。在各方面，所述Tn3支架约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。在各方面，所述Tn3支架约每2周施用一次，持续至少3个剂量，并且此后约每月施用一次。

在各方面，静脉内施用所述Tn3支架。

在各方面，所述Tn3支架包含串联连接的两个CD40L特异性单体亚基。在各方面，所述Tn3支架结合CD40L并防止CD40L与CD40结合和/或破坏CD40介导的信号传导。在各方面，所述Tn3支架(a)结合CD40L，从而减少或防止CD40L与CD40的结合；(b)减少或消除CD40介导的信号传导；或(c)a和b。在各方面，所述至少一个CD40L特异性单体亚基与选自由以下组成的组的异源部分融合或缀合：蛋白质、肽、蛋白质结构域、接头、药物、毒素、细胞毒性剂、显像剂、放射性核素、放射性化合物、有机聚合物、无机聚合物、聚乙二醇(PEG)、生物素、白蛋白、人血清白蛋白(HSA)、HSAFcRn结合部分、抗体、抗体结构域、抗体片段、单链抗体、结构域抗体、白蛋白结合结构域、酶、配体、受体、结合肽、非FnIII支架、表位标签、重组多肽聚合物和细胞因子。在各方面，至少一个CD40L特异性单体亚基与PEG缀合或与人血清白蛋白(HSA)融合。在各方面，所述HSA是具有SEQ ID NO:4的氨基酸序列的变体HSA。在各方面，所述Tn3支架包含SEQ ID NO:1的序列。在各方面，所述Tn3支架是VIB4920。

在各方面，所述受试者被进一步施用泼尼松。在各方面，所述受试者在施用所述Tn3支架之前接受一种或多种标准护理疗法。在各方面，所述标准护理疗法是MMF。在各方面，所述标准护理疗法是甲泼尼龙。在各方面，所述标准护理疗法是环磷酰胺。在各方面，所述标准护理疗法是泼尼松。

提供了治疗狼疮性肾炎的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用：a)预备方案，所述预备方案包括以足以降低受试者中免疫反应的量施用至少一种免疫抑制剂；以及b)约1000-2000mg达佐达利贝普(Dazodalibep)，其中所述达佐达利贝普约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。

提供了治疗狼疮性肾炎的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用：a)预备方案，所述预备方案包括：i.以足以降低受试者中免疫反应的量施用免疫抑制剂；和ii.以足以减少受试者中炎症的量施用皮质类固醇；以及b)约1000-2000mg达佐达利贝普，其中所述达佐达利贝普约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。

在各方面，免疫抑制剂选自由以下组成的组：硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯、环孢菌素、甲氨蝶呤、来氟米特、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、氮芥及其组合。在各方面，免疫抑制剂选自由以下组成的组：硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯、环磷酰胺和环孢菌素。在各方面，免疫抑制剂是吗替麦考酚酯。在各方面，免疫抑制剂是环磷酰胺。在各方面，在首次施用所述达佐达利贝普之前施用免疫抑制剂至少约八周、九周、十周、十一周、十二周或更多周。在各方面，每4周施用环磷酰胺。在各方面，每2周施用环磷酰胺。在各方面，施用约1200-1800mg所述达佐达利贝普。在各方面，施用约1500mg达佐达利贝普。在各方面，所述预备方案还包括向所述受试者施用皮质类固醇。在各方面，皮质类固醇是泼尼松。在各方面，皮质类固醇的施用是逐渐减少的。

在各方面，在前述方法中的任一种中，Tn3支架单体包含：包含SEQ ID NO:5、SEQID NO:23或SEQ ID NO:24的βA链；包含SEQ ID NO:6的βB链；包含SEQ ID NO:17的βC链；包含SEQ ID NO:18的βD链；包含SEQ ID NO:19的βE链；包含SEQ ID NO:20的βF链；以及包含SEQ ID NO:21的βG链。在各方面，βA链由SEQ ID NO:5组成。在各方面，βA链由SEQ ID NO:23组成。在各方面，βA链由SEQ ID NO:24组成。在各方面，βB链由SEQ ID NO:6组成。在各方面，βC链由SEQ ID NO:17组成。在各方面，βD链由SEQ ID NO:18组成。在各方面，βE链由SEQ IDNO:19组成。在各方面，βF链由SEQ ID NO:20组成。在各方面，βG链由SEQ ID NO:21组成。

具体实施方式

本文提供了作为抗分化簇(CD)40配体(CD40L)-人肌腱蛋白C(T n3)蛋白融合蛋白的第三纤连蛋白III型(Fn3)蛋白结构域的Tn3支架及其在自身免疫性疾病中的使用方法。在各方面，提供的组合物和方法用于治疗狼疮性肾炎。

还提供了包括施用Tn3支架与免疫抑制剂和/或皮质类固醇以治疗狼疮性肾炎的方法。

定义：

除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语均具有与本主题所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同的含义。本文所提及的所有出版物、专利申请、专利和其他参考文献以引用方式整体明确地并入。在发生冲突的情况下，应以本说明书(包括定义)为准。另外，本文所描述的材料、方法和实例仅是说明性的，而非限制性的。

除非上下文另外明确规定，否则如在本说明书和所附权利要求书中所使用的，单数形式“一个/种(a/an)”和“所述(the)”包括复数指示物。

范围在本文中可以表示为从“约”一个特定值，和/或至“约”另一特定值。当表达这样的一个范围时，另一方面包括从一个具体值和/或至另一个具体值。类似地，当通过使用先行词“约”将值表示为近似值时，应当理解，特定值形成另一方面。应进一步了解，每个范围的端点相对于另一个端点，并且与另一个端点无关地均为有效的。如本文所用，术语“约”是指在特定使用的上下文中，与所述数值相差正负15％的范围。例如，约10将包括8.5至11.5的范围。术语“约”还考虑了测量值中的典型误差或不精确性。

如本文所用，术语“受试者”是指需要对其进行诊断、预后或治疗的任何受试者，例如，人或非人哺乳动物。术语“受试者”可以指受疾病影响、可能受疾病影响或疑似受疾病影响的人或非人哺乳动物。术语“受试者”和“患者”在本文中可互换使用。在各方面，受试者是哺乳动物。哺乳动物包括灵长类动物，诸如人、猴、黑猩猩和猿，以及非灵长类动物，诸如家养动物，包括实验室动物(诸如兔和啮齿动物，例如豚鼠、大鼠或小鼠)和家庭宠物和农场动物(例如猫、狗、猪、牛、绵羊、山羊、马、兔)，以及非家养动物，诸如野生动物、鸟、爬行动物、鱼等。

如本文所用，术语“有需要的受试者”包括可受益于或将受益于本文所述方法的受试者。需要治疗的受试者包括但不限于已经患有病状或病症的受试者、易于患病状或病症的受试者、疑似患有病状或病症的受试者，以及需要预防、改善或逆转病状或病症的受试者。

如本文所用，术语“正常受试者”是指未受任何疾病影响或未被怀疑受疾病或病状影响的任何健康受试者，例如，人或非人哺乳动物。

如本文所用，“治疗(treating或treat)”描述了出于对抗疾病、病状或病症的目的而对受试者进行的管理和护理，并且包括施用在本文所述的方法中使用的VIB4920，以减轻疾病、病状或病症的症状或并发症，或消除疾病、病状或病症。因此，术语“治疗(treat或treating)”既指治疗(therapeutic)措施，也指预防(prophylactic或preventative)措施，其中目的是预防、减缓(减轻)或改善疾病(例如，狼疮性肾炎)的进展。有益的或期望的临床结果包括但不限于症状减轻、疾病程度降低、疾病状态稳定(即，不恶化)、疾病进展延迟或减缓、疾病状态改善或缓和以及逆转疾病(无论是部分的还是全部的)。术语“治疗”还可以包括体外细胞或动物模型的治疗。

当提及核酸序列或蛋白质序列时，术语“同一性”用于表示两个序列之间的相似性。除非另外指明，否则本文所述的百分比同一性是使用BLAST算法使用默认参数确定的，所述算法可在万维网地址获得：blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi。

附图说明

并入本文并形成说明书一部分的附图示出了一些实例、实施方案和/或特征，但不是唯一的或排他性的。本文公开的实施方案和附图旨在被认为是说明性的而不是限制性的。

图1是总结本文提供的试验设计的研究流程图。简而言之，多达114名患有活动性LN的合格受试者将在第0周开始接受MMF和甲泼尼龙的诱导疗法。受试者将根据以下任一时间表接受总计1000mg甲泼尼龙：第0天，1000mg甲泼尼龙，IV；或第0天和第1天，500mg甲泼尼龙，IV。受试者也将在第0天、或在完成甲泼尼龙后的第二天开始接受泼尼松25mg/天，并在第8周逐渐减少至5mg/天。将在第8周评估受试者的肾脏反应。在第10周，将尿蛋白与肌酸酐比率(UPCR)>0.75的六十六名受试者按2:1随机分配至VIB4920与安慰剂。无随机分组资格的受试者将在第8周研究访视后完成研究参与，并将根据临床试验中心研究者或治疗医师的判断提供进一步的护理。随机分组的受试者将在第10周、第12周、第14周、第18周、第22周、第26周、第30和第34周静脉内接受VIB4920(1500mg)或安慰剂，并将继续MMF(2-3g/天)和泼尼松(5mg/天)。主要终点将在第38周进行评估，并且受试者将随访至第60周。

本文描述了用于使用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架治疗自身免疫性病症的方法。在各方面，所述Tn3支架用于治疗狼疮的方法中。在各方面，所述狼疮是SLE。在一个方面，所述狼疮是狼疮性肾炎(LN)。在各方面，所述方法包括通过施用Tn3支架与吗替麦考酚酯(MMF)的组合来治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎。在各方面，所述方法包括通过施用Tn3支架与MMF和甲泼尼龙的组合来治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎。在各方面，所述方法包括通过施用Tn3支架与环磷酰胺的组合来治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎。在各方面，所述Tn3支架与CD40L结合。在各方面，所述Tn3支架的单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ IDNO:11，所述BC环包含SEQ ID NO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ IDNO:14，所述EF环包含SEQ ID NO:15，并且所述FG环SEQ ID NO:16。在一个具体方面，所述Tn3支架是VIB4920。在各方面，提供了减少或消除活动性LN中的CD40L结合的方法。在各方面，还提供了减少活动性LN中的CD40L结合的方法，如通过以下任一项所确定的：(1)实现肾脏反应；减少或消除抗dsDNA抗体；(3)减少或消除低补体血症；(4)减少或消除SLE疾病活动性和/或损害累积；和/或(5)预防肾衰竭。

Tn 3支架

本文提供了用于治疗狼疮性肾炎的包含Tn3支架的组合物。在各方面，所述组合物可以包含如国际申请号PCT/US2012/059477和PCT/US2019/052997中所述的氨基酸序列，所述国际申请以引用方式整体并入本文。在各方面，所述组合物可以包含如SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列或由所述氨基酸序列组成(本文称为VIB4920或达佐达利贝普，本文可互换使用)。VIB4920包含与人血清白蛋白(HSA)蛋白融合的二价CD40L特异性Tn3蛋白。

在各方面，Tn3支架包含CD40L特异性单体亚基，其中所述单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，并且其中所述Tn3支架与CD40L特异性结合。在各方面，所述Tn3支架包含单个CD40L特异性单体亚基。在各方面，所述Tn3支架包含串联连接的两个CD40L特异性单体亚基。在各方面，所述Tn3支架包含直接连接的两个CD40L特异性单体亚基。在各方面，两个CD40L特异性单体亚基通过接头连接。在其他方面，接头包含肽接头，其可以是柔性肽接头。在各方面，所述肽接头包含(G_mX)_n序列，其中X是丝氨酸(S)、丙氨酸(A)、甘氨酸(G)、Leu(L)、异亮氨酸(I)或缬氨酸(V)；m和n是整数值；m是1、2、3或4；并且，n是1、2、3、4、5、6或7。

在各方面，所述Tn3支架包含接头，所述接头包含功能性部分。在各方面，所述功能性部分是免疫球蛋白或其片段。在各方面，所述免疫球蛋白或其片段包含Fc结构域。在各方面，所述Fc结构域不能诱导至少一种FcγR介导的效应子功能。在各方面，所述至少一种FcγR介导的效应子功能是ADCC。

在各方面，所述Tn3支架包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11或由其组成，所述BC环包含SEQ ID NO:12或由其组成，所述CD环包含SEQ ID NO:13或由其组成，所述DE环包含SEQ IDNO:14或由其组成，所述EF环包含SEQ ID NO:15或由其组成，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16或由其组成。在各方面，所述Tn3支架包含SEQ ID NO:1或由其组成。在各方面，β链A包含SEQ ID NO:5或由其组成，β链B包含SEQ ID NO:6或由其组成，β链C包含SEQ ID NO:17或由其组成，β链D包含SEQ ID NO:18或由其组成，β链E包含SEQ ID NO:19或由其组成，β链F包含SEQ ID NO:20或由其组成，并且β链G包含SEQ ID NO:21或由其组成。

在各方面，一个或多个CD40L特异性Tn3单体具有β链A，其包含IEV(SEQ ID NO:5)、RLDAPSQIEV(SEQ ID NO:23)或SQIEV(SEQ ID NO:24)或由其组成。在各方面，Tn3支架可以包含一个或多个具有相同或不同β链A序列的CD40L特异性Tn3单体。例如，第一CD40L特异性Tn3单体β链A可以包含IEV(SEQ ID NO:5)或由其组成，并且第二CD40L特异性Tn3单体β链A可以包含RLDAPSQIEV(SEQ ID NO:23)或SQIEV(SEQ ID NO:24)或由其组成。

在各方面，本公开的Tn3支架单体包含：包含SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:23或SEQ IDNO:24的βA链；包含SEQ ID NO:6的βB链；包含SEQ ID NO:17的βC链；包含SEQ ID NO:18的βD链；包含SEQ ID NO:19的βE链；包含SEQ ID NO:20的βF链；以及包含SEQ ID NO:21的βG链。在各方面，βA链由SEQ ID NO:5组成。在各方面，βA链由SEQ ID NO:23组成。在各方面，βA链由SEQ ID NO:24组成。在各方面，βB链由SEQ ID NO:6组成。在各方面，βC链由SEQ ID NO:17组成。在各方面，βD链由SEQ ID NO:18组成。在各方面，βE链由SEQ ID NO:19组成。在各方面，βF链由SEQ ID NO:20组成。在各方面，βG链由SEQ ID NO:21组成。

Tn3支架可以具有如SEQ ID NO:1中所示和上文所述的氨基酸序列，或者它可以具有相对于如SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的一个或多个氨基酸残基变化。例如，如果Tn3支架具有相对于SE Q ID NO:1中所示的氨基酸序列的氨基酸序列变化，则所述变化可以是接头之一。Tn3支架包含分隔两个CD40L特异性单体的Gly15接头和分隔CD40L特异性单体与HSA序列的Gly10接头。这些接头中的两者或一者可以被改变，并且可以被(G_mX)_n的氨基酸序列替换，其中X是丝氨酸(S)、丙氨酸(A)、甘氨酸(G)、Leu(L)、异亮氨酸(I)或缬氨酸(V)；m和n是整数值；m是1、2、3或4；并且，n是1、2、3、4、5、6或7。例如，可以改变一个或两个接头，以使其具有包含GGGGSGGGGS(SEQ ID NO:7)、GGGGSGGGGSGGGGS(S EQ ID NO:8)、GGGGGGGGGG(SEQ ID NO:9)或GGGGGGGG GGGGGGG(SEQ ID NO:10)中的一者的氨基酸序列。如果Tn3支架具有相对于SEQ ID NO:1中提供的氨基酸序列的氨基酸序列，则它可能是由于与两个CD40L特异性单体融合的HSA氨基酸序列发生了变化。与两个CD40L特异性单体融合的HSA可以改变为相对于与两个CD40L特异性Tn3单体融合的HSA，但在选自由以下组成的组的位置处的至少一个氨基酸取代(相对于全长成熟HSA中的位置进行编号)除外：407、415、463、500、506、508、509、511、512、515、516、521、523、524、526、535、550、557、573、574和580；其中所述至少一个氨基酸取代不包含位置573处的赖氨酸(K)至谷氨酸(E)。

示例性Tn3支架示于表1中。在各方面，Tn3支架包含与表1中所示的SEQ ID NO:1–SEQ ID NO:24中的任一者至少约或至多约50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或多达约100％的同一性。在各方面，可以修饰来自表1的序列中的任一个。在各方面，修饰包含一个或多个截短、缺失、插入及其组合。修饰可以发生在表1中提供的任何残基处和来自表1的任何数目的残基中。在各方面，修饰可以包含0-3、0-5、0-10、0-20、1-3、1-5、1-10、1-20、3-8、3-10、3-15、5-8、5-10或5-20个残基。在各方面，修饰可以发生在0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、300、400或450个残基中。

表1.包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架的示例性序列

如果Tn3支架相对于SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有氨基酸序列变化，则所述变化可以是针对CD40L特异性Tn3单体中的一者或两者的氨基酸序列，只要其不会不利地影响Tn3支架的体内功效，例如，氨基酸序列的变化使得CD40L特异性Tn3单体中的一者或两者具有如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:22中所示的氨基酸序列。在各方面，第一个或两个N末端氨基酸残基(SQ)可以不存在和/或被替代性氨基酸残基取代。

在各方面，Tn3支架包含至少一个与异源部分结合的CD40L特异性单体亚基。在各方面，所述异源部分选自由以下组成的组：蛋白质、肽、蛋白质结构域、接头、药物、毒素、细胞毒性剂、显像剂、放射性核素、放射性化合物、有机聚合物、无机聚合物、聚乙二醇(PEG)、生物素、白蛋白、人血清白蛋白(HSA)、HSA FcRn结合部分、抗体、抗体结构域、抗体片段、单链抗体、结构域抗体、白蛋白结合结构域、酶、配体、受体、结合肽、非FnIII支架、表位标签、重组多肽聚合物、细胞因子，以及所述部分中的两者或更多者的组合。

在各方面，所述异源部分是抗体。在各方面，所述抗体选自由以下组成的组：抗体的Fc结构域、抗体片段和单链抗体。在各方面，所述异源部分是显像剂；例如，放射性核素或生物素。在各方面，所述异源部分是药物；例如，细胞毒性剂或放射性化合物。

在各方面，Tn3支架包含至少一个(例如两个)直接或通过接头与PEG融合或缀合的CD40L特异性单体亚基。在各方面，Tn3支架包含至少一个直接或通过接头与白蛋白融合或缀合的CD40L特异性单体亚基。在各方面，所述白蛋白是人血清白蛋白(HSA)。在各方面，所述HSA是变体HSA。在各方面，变体HSA的氨基酸序列是SEQ ID NO:4。在各方面，变体HSA与天然HSA或天然HSA片段相比具有至少一种改善的性质。在各方面，改善的性质是与天然HSA或天然HSA片段的血浆半衰期相比，改变的血浆半衰期。在各方面，改变的血浆半衰期是与天然HSA或天然HSA片段的血浆半衰期相比，更长的血浆半衰期。在各方面，改变的血浆半衰期是与天然HSA或天然HSA片段的血浆半衰期相比，更短的血浆半衰期。

治疗方法

在本文的各方面，方法涉及通过施用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架来治疗狼疮性肾炎。在各方面，CD40L特异性单体与至少一种其他疗法组合施用。在各方面，所述至少一种其他疗法可以是标准护理疗法。在各方面，所述Tn3支架与CD40L结合。在各方面，所述Tn3支架的单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ ID NO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ ID NO:15，并且所述FG环SEQ ID NO:16。在各方面，所述Tn3支架是VIB4920(即，SEQ ID NO:1)。

在各方面，所述Tn3支架与免疫抑制剂组合施用。在各方面，向受试者施用预备方案，所述预备方案包含足以降低受试者中免疫反应的量的至少一种免疫抑制剂。在各方面，通过确定以下一者或多者的水平来确定免疫反应：嘌呤从头合成、细胞因子(例如，IL-2或IFN-γ)、血液中的补体、免疫球蛋白、淋巴细胞计数、白细胞计数及其组合。

在本公开的治疗方案中，可以利用任何免疫抑制剂。在各方面，所述免疫抑制剂选自由以下组成的组：硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯、环孢菌素、甲氨蝶呤、来氟米特、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、氮芥及其组合。在各方面，所述免疫抑制剂是硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯或环磷酰胺。在各方面，所述免疫抑制剂是吗替麦考酚酯(MMF)。在各方面，所述Tn3支架与MMF和甲泼尼龙组合施用。在一个具体方面，所述Tn3支架是VIB4920。在各方面，所述Tn3支架与环磷酰胺组合施用。在一个具体方面，所述Tn3支架是VIB4920。

在各方面，在首次施用VIB4920之前施用MMF至少约八周、九周、十周、十一周、十二周或更多周。在各方面，如果受试者对MMF有反应，则不用VIB4920治疗受试者。在各方面，如果受试者到用MMF治疗的第8周对MMF有反应，则不用VIB4920治疗受试者。

在各方面，所述Tn3支架与MMF或环磷酰胺和一种或多种额外的疗法组合施用。在各方面，所述Tn3支架与MMF或环磷酰胺和泼尼松组合施用。在各方面，所述Tn3支架与MMF和泼尼松组合施用。在各方面，所述Tn3支架与环磷酰胺和泼尼松组合施用。在各方面，所述Tn3支架与狼疮性肾炎的任何标准护理疗法组合施用。在一个具体方面，所述Tn3支架是VIB4920。

在各方面，提供了一种方法，所述方法包括向患有狼疮性肾炎的受试者施用预备方案，所述预备方案包括以足以降低受试者中免疫反应的量施用至少一种免疫抑制剂；以及约1000-2000mg的VIB4920。在各方面，VIB4920的施用剂量为约：1000-2000mg、1200-1800mg、1400-1600mg或1450-1550mg。在各方面，VIB4920以约1400mg、1450mg、1500mg、1550mg或1600mg的剂量施用。VIB4920可以根据本文提供的任何时间表施用。在各方面，VIB4920约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。

自身免疫性疾病或病症的治疗可以是抑制B细胞或T细胞介导的免疫反应的形式，所述形式可以是类别转换抗体的减少，循环B细胞亚群的减少，血浆活性的减少或浆细胞和浆细胞基因特征的减少。自身免疫性疾病或病症的治疗可以是炎症标志物的减少。炎症标志物可以是以下中的一者或多者：自身抗体水平、浆细胞(PC)或PC基因特征(以基因IGHA1、IGJ、IGKC、IGKV4-1和TNFRSF17的表达为表征的特征)、循环B细胞亚群和类别转换抗体。自身免疫性疾病或病症的治疗可以是临床体征和症状的减少，诸如通过受试者或医师的总体评估测量的那些。临床体征和症状可以包括以下中的一者或多者：关节炎、疼痛、疲劳、发热、不适、皮疹、虚弱或器官功能障碍的体征(如蛋白尿或肾功能丧失)。

在各方面，狼疮性肾炎的治疗的特征可在于，相对于用VIB4920治疗前的水平，疾病或病症的临床症状减少至少约10％、约20％、约30％、约40％、约50％或更多，或炎症减少，或疾病或病症的生物标志物减少。任何这些症状或炎症或生物标志物的减少可以是所述症状或炎症或生物标志物相对于在开始用VIB4920治疗之前它们的水平减少至少约25％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约75％或更多。减少可以使得自身免疫性疾病或病症被定性为缓解。如果VIB4920用于减轻炎症性疾病或病症中的炎症的方法中，则炎症性疾病或病症可以是狼疮性肾炎、皮肤狼疮或SLE。

在各方面，与所治疗的受试者的24小时基线测量值相比，本文公开的任何方法均导致尿蛋白/肌酸酐比率(UPCR)提高至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约70％、至少约75％或更大。

在各方面，与所治疗的受试者的基线测量值相比，本文公开的任何方法均导致eGFR(肾小球滤过率)提高至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约40％、至少约45％、至少约50％、至少约55％、至少约60％、至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％或更大。在各方面，本文公开的任何方法导致eGFR(肾小球滤过率)提高至≥120ml/min/1.73m²。

在各方面，接受治疗的受试者包括患有自身免疫性病症的受试者。在各方面，自身免疫性病症包括LN、系统性红斑狼疮(SLE)、肾衰竭、肾病及其组合。在各方面，受试者是成人受试者。在各方面，受试者是儿科。在各方面，受试者包含根据1982年美国风湿病学会(ACR)标准的1997年更新版、2012年系统性狼疮国际合作诊所(SLICC)标准或2019年欧洲风湿病联盟(EULAR)/ACR标准确定的SLE。在各方面，基于24小时尿液收集，受试者具有UPCR≥1.5。在各方面，受试者具有肾活检，其导致选自由以下组成的组的类别的ISN/RPS LN：III类、IV类或与III类或IV类组合的V类，以及改良的NIH活动性指数≥1(Bajema IM等人Revision of the International Societ y of Nephrology/Renal Pathology Societyclassification for lupus ne phritis:clarification of definitions and modifiedNational Institutes o f Health activity and chronicity indices.Kidneyinternational.2018；93(4):789-96)。

给药

在本文公开的任何方法中施用的Tn3支架(例如，VIB4920)的剂量可以是介于约500mg与约3000mg之间的剂量。在各方面，Tn3支架的施用剂量为约：800mg、850mg、900mg、950mg、1000mg、1050mg、1100mg、1150mg、1200mg、1250mg、1300mg、1350mg、1400mg、1450mg、1500mg、1550mg、1600mg、1650mg、1700mg、1750mg、1800mg、1850mg、1900mg、1950mg、2000mg、2050mg、2100mg、2150mg、2200mg、2250mg、2300mg、2350mg、2400mg、2450mg、2500mg、2550mg、2600mg、2650mg、2700mg、2750mg、2800mg、2850mg、2900mg、2950mg、3000mg、3050mg、3100mg、3150mg、3200mg、3250mg、3300mg、3350mg、3400mg、3450mg、3500mg、3550mg、3600mg、3650mg、3700mg、3750mg、3800mg、3850mg、3900mg、3950mg、4000mg、4050mg、4100mg、4150mg、4200mg、4250mg、4300mg、4350mg、4400mg、4450mg、4500mg、4550mg、4600mg、4650mg、4700mg、4750mg、4800mg、4850mg、4900mg、4950mg或约5000mg。在各方面，Tn3支架以介于约1500mg与约3000mg之间的剂量施用。在各方面，Tn3支架以选自由以下组成的组的剂量施用：1500mg和3000mg。在各方面，Tn3支架以约1500mg的剂量施用。在各方面，Tn3支架以约3000mg的剂量施用。在各方面，Tn3支架的施用剂量可以为：约500mg、约750mg、约900mg、约1000mg、约1250mg、约1500mg、约1750mg、约2000mg、约2250mg、约2500mg或约3000mg。例如，Tn3支架以约1500mg的剂量施用。

在各方面，根据本文提供的任一时间表，在第10周、第12周、第14周、第18周、第22周、第26周、第30周和第34周以1500mg的剂量静脉内施用Tn3支架，持续8个剂量。

在各方面，在本文公开的任何方法中使用的Tn3支架可以约每隔一周施用或可以每月施用两次。在各方面，Tn3支架可以约每月施用一次。在各方面，Tn3支架约每2周施用一次，持续至少2个、3个、4个、5个、6个或更多个剂量，并且此后约每月施用一次。在各方面，Tn3支架约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。在各方面，Tn3支架约每2周施用一次，持续至少3个剂量，并且此后约每月施用一次。Tn3支架可以通过静脉内或皮下注射施用。在各方面，Tn3支架通过静脉内注射施用。在各方面，Tn3支架通过静脉内输注施用。

在各方面，本说明书提供了一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用Tn3支架；其中所述Tn3支架以约1500mg的剂量施用，并且其中Tn3支架约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。在各方面，本说明书提供了一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用Tn3支架；其中所述Tn3支架以约1500mg的剂量施用，并且其中所述Tn3支架约每2周施用一次，持续至少3个剂量，并且此后约每月施用一次。在各方面，在本文公开的方法中额外施用泼尼松。

在本文公开的任何方法中，以标准护理剂量施用泼尼松。在各方面，泼尼松以约1mg/天、约2mg/天、约3mg/天、约4mg/天、约5mg/天、约6mg/天、约7mg/天、约8mg/天、约9mg/天、约10mg/天、约11mg/天、约12mg/天、约13mg/天、约14mg/天、约15mg/天、约16mg/天、约17mg/天、约18mg/天、约19mg/天、约20mg/天、约21mg/天、约22mg/天、约23mg/天、约24mg/天、约25mg/天、约26mg/天、约27mg/天、约28mg/天、约29mg/天、约30mg/天、约35mg/天、约40mg/天或约50mg/天的剂量施用。在各方面，泼尼松以25mg/天的剂量施用。在各方面，泼尼松的施用逐渐减少，使得最初施用较高的剂量，并且然后减少。减量可以每天、每周或每月进行。在各方面，每周进行减量。减量可以包括将泼尼松的施用从50mg/天减少至1mg/天。在各方面，泼尼松的施用从25mg/天的初始施用逐渐减少至5mg/天。在各方面，泼尼松的施用从第0天的25mg/天的初始施用逐渐减少，或在完成甲泼尼龙后的第二天逐渐减少，并且逐渐减少至第8周的5mg/天。

在本文公开的任何方法中，以标准护理剂量施用甲泼尼龙。在各方面，甲泼尼龙以约1mg/天、约5mg/天、约10mg/天、约20mg/天、约30mg/天、约50mg/天、约100mg/天、约150mg/天、约200mg/天、约250mg/天、约300mg/天、约350mg/天、约400mg/天、约500mg/天、约600mg/天、约700mg/天、约800mg/天、约900mg/天、约1000mg/天、约1250mg/天、约1500mg/天或约2000mg/天的剂量施用。在各方面，甲泼尼龙以约1-5mg/天、约5-10mg/天、约10-20mg/天、约20-30mg/天、约30-50mg/天、约50-100mg/天、约100-150mg/天、约150-200mg/天、约200-250mg/天、约250-300mg/天、约300-350mg/天、约350-400mg/天、约400-500mg/天、约500-600mg/天、约600-700mg/天、约700-800mg/天、约800-900mg/天、约900-1000mg/天、约1000-1250mg/天、约1250-1500mg/天或约1500-2000mg/天的剂量施用。在各方面，甲泼尼龙以500mg/天的剂量施用。在各方面，甲泼尼龙以1000mg/天的剂量施用。

在本文公开的方法的各方面，在施用VIB4920之前，已向受试者施用一种或多种用于治疗狼疮的标准护理疗法。在各方面，在施用VIB4920之前施用一种或多种标准护理疗法约1周、约2周、约3周、约4周、约5周、约6周、约7周、约8周、约9周、约10周、约11周、约12周、约13周、约14周、约15周、约20周、约25周、约30周、约35周、约40周、约50周、约52周或更长时间。

在各方面，本说明书提供了一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用VIB4920与吗替麦考酚酯(MMF)的组合；其中所述VIB4920以约1500mg的剂量施用。在各方面，所述MMF以任何标准护理剂量施用。在一个具体方面，MMF以约1克/天、约2克/天、约3克/天或约4克/天的剂量施用。在一个方面，MMF以2克/天施用。在各方面，MMF以3克/天施用。在各方面，额外施用甲泼尼龙。在各方面，额外施用泼尼松。在各方面，VIB4920约每两周、三周、四周施用一次，或约每月施用一次。在各方面，VIB4920约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。在各方面，VIB4920约每2周施用一次，持续至少3个剂量，并且此后约每月施用一次。在各方面，在施用VIB4920之前，已向受试者施用用于治疗狼疮的任何标准护理疗法。在各方面，在施用VIB4920之前，已向受试者施用MMF和/或泼尼松。

在各方面，本说明书提供了一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用VIB4920与环磷酰胺的组合，其中所述VIB4920以约1500mg的剂量施用。在各方面，所述环磷酰胺以任何标准护理剂量施用。在各方面，额外施用泼尼松。在各方面，VIB4920约每两周、三周、四周施用一次，或约每月施用一次。在各方面，VIB4920约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。在各方面，VIB4920约每2周施用一次，持续至少3个剂量，并且此后约每月施用一次。在各方面，在施用VIB4920之前，已向受试者施用用于治疗狼疮的任何标准护理疗法。在各方面，在施用VIB4920之前，已向受试者施用环磷酰胺和/或泼尼松。

在各方面，VIB4920与本文公开的任何疗法相继施用。在各方面，VIB4920与本文公开的任何疗法同时施用。在各方面，在施用VIB4920之前，已向受试者施用用于治疗狼疮的任何标准护理疗法。

VIB4920的剂量和给药方案可以使得由施用VIB4920以治疗任何自身免疫性/炎症性疾病或病症所实现的任何治疗效果可被认为是“持久的”。VIB4920在自身免疫性/炎症性疾病或病症的治疗中的“持久”效果是这样的效果，其中在施用VIB4920疗程的最后剂量后，VIB4920实现的治疗效果维持(尽管不再施用VIB4920)至少4周、至少6周、至少8周、至少10周、至少12周、至少16周、至少20周或至少24周。

反应

在各方面，提供了包括通过施用VIB4920在患有LN的受试者中实现肾脏反应的方法。可以在任何时期评价反应。在各方面，在施用VIB4920之前、期间或之后评价反应。在各方面，在施用VIB4920之后评价反应。在各方面，在施用VIB4920后第0周、第1周、第2周、第3周、第4周、第5周、第6周、第7周、第8周、第9周、第10周、第12周、第14周、第16周、第18周、第20周、第22周、第24周、第26周、第28周、第30周、第32周、第34周、第36周、第38周、第40周、第42周、第44周、第46周、第48周、第50周、第52周、第54周、第56周、第58周、第60周、第62周、第64周、第66周、第68周或第70周评价反应。在各方面，在第8周评价反应。

在各方面，反应是完全反应。在各方面，完全反应包括实现24小时UPCR≤0.5。在各方面，反应包括实现小于约或高达约0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9或3的24小时UPCR。在各方面，反应包括实现小于约或高达约0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1的24小时UPCR。在各方面，完全反应包括实现约0.1-0.5；0.1-0.6；或0.3-0.6的24小时UPCR。

在各方面，反应包括实现大于约或高达约：50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195或200ml/min/1.73m²的估计的肾小球滤过率。

在各方面，反应包括将抗dsDNA抗体减少或消除至少约5-10倍、10-50倍、1-20倍、1-5倍、5-25倍、10-40倍或1-10倍。在各方面，反应包括将抗dsDNA抗体减少或消除至少约：5倍、10倍、15倍、20倍、25倍、30倍、35倍、40倍、45倍、50倍、55倍、60倍、65倍、70倍、75倍、80倍、85倍、90倍、95倍、100倍、105倍、110倍、115倍、120倍、125倍、130倍、135倍、140倍、145倍、150倍、155倍、160倍、165倍、170倍、175倍、180倍、185倍、190倍、195倍、200倍、205倍、210倍、215倍、220倍、225倍、230倍、235倍、240倍、245倍或250倍。

在各方面，完全反应还包括以下中的任一项：非活性尿沉渣，如通过以下方式所确定的：(a)在没有月经和感染的情况下，尿RBC报告为小于5-10/hpf；(b)在不存在感染，和/或不存在RBC和WBC管型的情况下，尿WBC报告为小于5-10/hpf。在各方面，完全肾脏反应包括实现以下中的任一项：基于24小时收集，UPCR≤0.75；估计的肾小球滤过率(eGFR)≥120ml/min/1.73m²，或如果<120ml/m in/1.73m²，则>基线处eGFR的80％；和/或根据本文所述的泼尼松给药限制，从第8周起，泼尼松≤5mg/天。

在各方面，反应包括实现以下中的任一项：(1)第26周、第48周和第60周时的完全肾脏反应；和/或第26周、第38周、第48周和第60周时的总体肾脏反应；(2)总体肾脏反应包括以下中的任一项：基于24小时尿液收集，UPCR与基线相比提高≥50％；估计的eGFR≥120ml/min/1.73m2，或如果<120ml/min/1.73m2，则为基线处eGFR的80％；和/或从第8周起，泼尼松≤5mg/天；(3)第26周、第38周、第48周和第60周时的UPCR，基于24小时尿液收集；(4)第26周、第38周、第48周和第60周时的抗dsDNA抗体；(5)第26周、第38周、第48周和第60周时的C3水平；(6)第26周、第38周、第48周和第60周时的C4水平；(7)第26周、第38周、第48周和第60周时的SLEDAI-2K；(8)第26周和第60周时的SLICC/ACR-DI；和/或(9)肾脏治疗失败。

在各方面，是包括向有需要的受试者施用包含VIB4920的组合物的方法。在各方面，向受试者施用至少一种额外的治疗剂。在各方面，所述施用足以至少减轻肾脏病状的症状。在各方面，所述病状包括LN。在各方面，所述症状包括肌肉疼痛、发热、皮疹、肿胀、关节疼痛、高血压、肾衰竭及其组合。在各方面，与基线相比或与缺乏施用的其他可比较受试者相比，所述施用足以使UPCR提高至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。

制剂

在各方面，VIB4920是澄清至乳白色、无色至黄色液体，不含或几乎不含可见颗粒。VIB4920可以以各种方式和各种浓度配制。

在各方面，VIB4920被配制为约10-50mg/mL、30-80mg/mL、80-100mg/mL、90-120mg/mL、90-150mg/mL、80-150mg/mL、100-150mg/Ml或50-150mg/mL。在各方面，VIB4920以约10mg/mL、15mg/mL、20mg/mL、25mg/mL、30mg/mL、35mg/mL、40mg/mL、45mg/mL、50mg/mL、55mg/mL、60mg/mL、65mg/mL、70mg/mL、75mg/mL、80mg/mL、85mg/mL、90mg/mL、95mg/mL、100mg/mL、105mg/mL、110mg/mL、115mg/mL、120mg/mL、125mg/mL、130mg/mL、135mg/mL、140mg/mL、145mg/mL、150mg/mL、155mg/mL、160mg/mL、165mg/mL、170mg/mL、175mg/mL、180mg/mL、185mg/mL、190mg/mL、195mg/mL至约200mg/mL的浓度配制。在各方面，VIB4920以100mg/mL配制。

在各方面，VIB4920的制剂包含至少一种额外的成分。在各方面，额外的成分包括缓冲液。在各方面，缓冲液是磷酸钠缓冲液，但也可以使用其他缓冲液。磷酸钠缓冲液可以以约1-5mM、1-10mM、2-10mM、5-15mM、5-10mM、8-20mM、10-20mM或5-20mM的浓度配制。在各方面，磷酸钠以约1mM、2mM、3mM、4mM、5mM、6mM、7mM、8mM、9mM，10mM、11mM、12mM、13mM、14mM、15mM、16mM、17mM、18mM、19mM至约20mM的浓度配制。在各方面，VIB4920的制剂包含10mM的磷酸钠缓冲液。

在各方面，VIB4920的制剂包含至少一种额外的成分。在各方面，额外的成分包括糖。在各方面，糖包括蔗糖，但也可使用其他糖。蔗糖可以以约50-100mM、75-125mM、100-200mM、150-250mM、150-300mM、200-300mM、225-325mM或230-280mM的浓度配制。在各方面，蔗糖以约50mM、55mM、60mM、65mM、70mM、75mM、80mM、85mM、90mM、95mM、100mM、105mM、110mM、115mM、120mM、125mM、130mM、135mM、140mM、145mM、150mM、155mM、160mM、165mM、170mM、175mM、180mM、185mM、190mM、195mM、200mM、205mM、210mM、215mM、220mM、225mM、230mM、235mM、240mM、245mM、250mM、255mM、260mM、265mM、270mM、275mM、280mM、285mM、290mM、295mM或高达约300mM的浓度配制。在各方面，VIB4920的制剂包含250mM蔗糖。

在各方面，VIB4920的制剂包含至少一种额外的成分。在各方面，额外的成分包含表面活性剂。表面活性剂可用作制剂中的消泡剂、润湿剂、分散剂、增稠剂和/或乳化剂。在各方面，表面活性剂包含泊洛沙姆188，但也可使用其他表面活性剂。泊洛沙姆188可以以约0-0.02％重量/体积、0.01-0.02％重量/体积、0-1％重量/体积或0.001-0.05％重量/体积的浓度配制。在各方面，泊洛沙姆188以约0％重量/体积、0.1％重量/体积、0.2％重量/体积、0.3％重量/体积、0.4％重量/体积、0.5％重量/体积、0.6％重量/体积、0.7％重量/体积、0.8％重量/体积、0.9％重量/体积、1％重量/体积的浓度配制。在各方面，VIB4920的制剂包含0.02％重量/体积的泊洛沙姆188。任何上述浓度都可以在pH为碱性、中性或酸性时使用。在各方面，pH是中性的。在各方面，pH为6-8。在各方面，pH为6.5-7.5。在各方面，pH为7。在各方面，pH为7+/1 0.5。在各方面，pH为7.4。在各方面，VIB4920的制剂在pH为7.4时包含0.02％重量/体积的泊洛沙姆188。在各方面，组合物包含在10mM磷酸钠缓冲液、250mM蔗糖和0.02％重量/体积泊洛沙姆188(pH 7.4)中的100mg/mL的VIB4920。在各方面，一小瓶VIB4920在5mL中含有500mg。

在各方面，VIB4920制剂的制备可以以多种方式进行。在各方面，在制备制剂之前，可以将VIB4920平衡至室温约15分钟，但不长于2小时。在制备制剂之前，可以对VIB4920小瓶进行评价，以确保没有颗粒或颗粒减少，并且颜色与之前描述的没有差异。

在各方面，将使用三瓶各含5mL的VIB4920来制备1500mg VIB4920的剂量。在各方面，可从一袋250mL的0.9％生理盐水中取出15mL，并用15ml VIB4920(3个小瓶各5mL)替换。袋的内容物可通过翻转轻轻混合，但不应摇动。如果观察到变色或颗粒，则不得施用该袋。

稀释后的VIB4920可以在施用前储存，自首次刺穿VIB4920小瓶起在2℃至8℃下冷藏最多24小时，或自首次刺穿VIB4920小瓶起在室温下冷藏最多4小时。

本文还提供了一种包含VIB4920的药物组合物。在各方面，药物组合物为单位剂型。在各方面，药物组合物包含药学上可接受的赋形剂。示例性赋形剂可以包括右旋糖、氯化钠、蔗糖、乳糖、纤维素、木糖醇、山梨糖醇、麦芽糖醇、明胶、PEG、PVP及其任何组合。在各方面，药物组合物包含VIB4920和缓冲液、糖、表面活性剂及其组合中的至少一者。

在各方面，赋形剂选自由以下组成的组：磷酸钠缓冲液、蔗糖、泊洛沙姆188及其组合。在各方面，VIB4920的制剂包含在10mM磷酸钠缓冲液、250mM蔗糖和0.02％重量/体积泊洛沙姆188(pH 7.4)中的约100mg/mL 的VIB4920。在各方面，一小瓶VIB4920在5mL中含有500mg。

施用

本文还提供了包含VIB4920的药物组合物的施用。在各方面，将药物组合物施用于有需要的受试者。施用可以是预防性的。在各方面，施用有效治疗有需要的受试者。在各方面，施用有效减少或消除不良事件。

在一些情况下，包含VIB4920的药物组合物通过选自以下的途径施用：皮下注射或输注、肌内注射或输注、皮内注射或输注、经皮施用、静脉内(“i.v.”)施用、鼻内施用、淋巴管内注射或输注和口服施用。在一些情况下，通过淋巴内微导管向受试者输注包含VIB4920的药物组合物。在各方面，通过输注泵静脉内施用包含VIB4920的药物组合物。

在各方面，药物组合物的施用在一段时间内进行。在各方面，按分钟、小时、天、周或月进行施用。在各方面，施用在约5分钟、10分钟、15分钟、20分钟、25分钟、30分钟、35分钟、40分钟、45分钟、50分钟、55分钟、60分钟、65分钟、70分钟、75分钟、80分钟、85分钟、90分钟、95分钟、100分钟、105分钟、110分钟、115分钟、120分钟、125分钟、130分钟、135分钟、140分钟、145分钟、150分钟、155分钟、160分钟、165分钟、170分钟、175分钟、180分钟、185分钟、190分钟、195分钟、长达约200分钟的时间段内进行。在各方面，施用在90分钟的时间段内进行。

试剂盒

本文还提供了包含Tn3支架的试剂盒。在各方面，VIB4920包含在容器中。合适的容器包括小瓶、管、注射器、袋及其组合。在各方面，容器是冷冻的。在各方面，容器不是冷冻的。在各方面，将包含VIB4920的容器储存在2℃至8℃(36℉至46℉)下。

在各方面，VIB4920包含在小瓶中。小瓶可包含任何量的VIB4920。在各方面，小瓶包含约0.5-1mL、0.5-1.5mL、1-2mL、2-4mL、1-5mL、5-10mL或1-10mL。在各方面，小瓶包含5mL的VIB4920。一小瓶VIB4920可包含约10-50mg、50-100mg、100-300mg、200-500mg、300-500mg、300-600mg、350-650mg、400-800mg、400-1000mg或500-1000mg的浓度。在各方面，小瓶包含约500mg的VIB4920。在各方面，一小瓶VIB4920在5mL中含有500mg。在各方面，VIB4920包含在含有500mg/5mL VIB4920的容器中。

在各方面，包含VIB4920的试剂盒或容器在本文提供的任何步骤期间不摇动。

在各方面，对包含VIB4920的试剂盒或容器进行标记。

本领域技术人员将认识到或能够仅使用常规实验确定本文所述的具体方面的许多等效物。此类等效物意图由以下权利要求涵盖。

实施方案

1.一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架，其中所述Tn3支架与CD40L结合，其中所述CD40L特异性单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ ID NO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ ID NO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16，其中所述包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架以约1500mg的剂量施用，并且其中所述Tn3支架约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。

2.一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架，其中所述Tn3支架与CD40L结合，其中所述CD40L特异性单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ ID NO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ ID NO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16，其中所述包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架以约1500mg的剂量施用，并且其中所述Tn3支架约每2周施用一次，持续至少3个剂量，并且此后约每月施用一次。

3.一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架与吗替麦考酚酯(MMF)的组合，其中所述Tn3支架与CD40L结合，其中所述单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ IDNO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ IDNO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16，并且其中所述Tn3支架以约1500mg的剂量施用。

4.一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架与环磷酰胺的组合，其中所述Tn3支架与CD40L结合，其中所述单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ ID NO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ ID NO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16，并且其中所述Tn3支架以约1500mg的剂量施用。

5.如实施方案4所述的方法，其中在施用所述Tn3支架之前施用所述环磷酰胺至少约八周、十周、十二周或更多周。

6.如实施方案5所述的方法，其中在施用所述Tn3支架之前施用所述环磷酰胺至少约八周。

7.如实施方案5所述的方法，其中在施用所述Tn3支架之前施用所述环磷酰胺至少约十周。

8.如实施方案5所述的方法，其中在施用所述Tn3支架之前施用所述环磷酰胺至少约十二周。

9.如实施方案3-8中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架约每两周、三周、四周施用一次，或约每月施用一次。

10.如实施方案3-8中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。

11.如实施方案3-8中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架约每2周施用一次，持续至少3个剂量，并且此后约每月施用一次。

12.如实施方案1-11中任一项所述的方法，其中静脉内施用所述Tn3支架。

13.如实施方案1-12中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架包含串联连接的两个CD40L特异性单体亚基。

14.如实施方案1-13中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架：a.结合CD40L，从而减少或防止CD40L与CD40的结合；b.减少或消除CD40介导的信号传导；或c.a和b。

15.如实施方案1-14中任一项所述的方法，其中至少一个CD40L特异性单体亚基与选自由以下组成的组的异源部分融合或缀合：蛋白质、肽、蛋白质结构域、接头、药物、毒素、细胞毒性剂、显像剂、放射性核素、放射性化合物、有机聚合物、无机聚合物、聚乙二醇(PEG)、生物素、白蛋白、人血清白蛋白(HSA)、HSA FcRn结合部分、抗体、抗体结构域、抗体片段、单链抗体、结构域抗体、白蛋白结合结构域、酶、配体、受体、结合肽、非FnIII支架、表位标签、重组多肽聚合物和细胞因子。

16.如实施方案13-15中任一项所述的方法，其中所述两个CD40L特异性单体亚基中的至少一个与PEG缀合或与人血清白蛋白(HSA)融合。

17.如实施方案16所述的方法，其中所述HSA是包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的变体HSA。

18.如实施方案1-17中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架包含SEQ ID NO:1的序列。

19.如实施方案1-18中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架是VIB4920。

20.如实施方案1-19中任一项所述的方法，其中所述受试者被进一步施用泼尼松。

21.如权利要求1-20中任一项所述的方法，其中所述受试者被进一步施用甲泼尼龙。

22.如实施方案1-21中任一项所述的方法，其中所述受试者在施用所述Tn3支架之前接受一种或多种标准护理疗法。

23.如实施方案22所述的方法，其中所述标准护理疗法是吗替麦考酚酯(MMF)。

24.如实施方案22所述的方法，其中所述标准护理疗法是环磷酰胺。

25.如实施方案22所述的方法，其中所述标准护理疗法是泼尼松。

26.如权利要求22所述的方法，其中所述标准护理疗法是甲泼尼龙。

27.如权利要求1-26中任一项所述的方法，其中所述受试者患有活动性狼疮，任选地其中所述受试者具有改良的NIH活动性指数≥1。

28.一种用于减少或治疗有需要的受试者的自身免疫性病状的方法，所述方法包括施用包含Tn3支架的组合物，所述Tn3支架包含CD40L特异性单体亚基，其中所述CD40L特异性单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ ID NO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ ID NO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16，其中所述施用有效减少所述自身免疫性病状，如通过以下中的至少一项所确定的：a.基于24小时尿液收集，尿蛋白/肌酸酐比率为0.7-0.8；b.估计的肾小球滤过率大于约120ml/min/1.73m2；c.估计的肾小球滤过率大于施用前肾小球滤过率的约80％；d.施用后，泼尼松施用小于约5mg/天；或e.a-d的任何组合。

29.如实施方案28所述的方法，其包括预备方案，所述预备方案包括在所述施用之前施用至少一种治疗剂。

30.如实施方案29所述的方法，其中所述至少一种治疗剂包括免疫抑制剂。

31.如实施方案29所述的方法，其中所述至少一种治疗剂包括类固醇。

32.如实施方案29-31中任一项所述的方法，其中所述至少一种治疗剂包括免疫抑制剂和类固醇。

33.如实施方案32所述的方法，其中所述免疫抑制剂包括吗替麦考酚酯(MMF)。

34.如实施方案33所述的方法，其中所述MMF以约2-3g/天的剂量施用。

35.如实施方案32所述的方法，其中所述类固醇包括泼尼松。

36.如实施方案32所述的方法，其中所述类固醇包括甲泼尼龙。

37.如实施方案35所述的方法，其中所述泼尼松以约5mg/天的剂量施用。

38.如实施方案28-37中任一项所述的方法，其中所述组合物包含约1500mg的所述包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架。

39.如实施方案28-38中任一项所述的方法，其中所述施用是静脉内的。

40.如实施方案32-38中任一项所述的方法，其中所述施用与所述免疫抑制剂和所述类固醇同时进行。

41.如实施方案32-40中任一项所述的方法，其中所述自身免疫性病状包括系统性红斑狼疮。

42.如实施方案32-41中任一项所述的方法，其中在所述施用之前，基于24小时尿液收集，所述受试者包含大于约1.5的尿蛋白/肌酸酐比率。

43.一种改善系统性红斑狼疮阳性受试者的肾功能的方法，所述方法包括以1500mg向所述受试者施用包含Tn3支架的药物组合物，所述Tn3支架包含CD40L特异性单体亚基，其中所述受试者的尿蛋白/肌酸酐比率在大于1.5的范围内，其中所述受试者还被施用了吗替麦考酚酯(MMF)和泼尼松，其中所述MMF不超过3g/天，并且其中所述泼尼松不超过5mg/天。

44.如实施方案43所述的方法，其中所述肾功能得到改善，如通过以下所确定的：a.基于24小时尿液收集，尿蛋白/肌酸酐比率为0.7-0.8；b.估计的肾小球滤过率大于约120ml/min/1.73m2；c.估计的肾小球滤过率大于施用前肾小球滤过率的约80％；d.施用后，泼尼松施用小于约5mg/天；或e.a-d的任何组合。

45.如实施方案43-44中任一项所述的方法，其中所述系统性红斑狼疮阳性受试者患有狼疮性肾炎。

46.如实施方案43-45中任一项所述的方法，其中所述MMF以约2-3g/天的剂量施用。

47.如实施方案43-46中任一项所述的方法，其中所述泼尼松以5mg/天施用。

48.如实施方案43-47中任一项所述的方法，其中在所述包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架之前施用所述MMF和所述泼尼松。

49.如实施方案43-47中任一项所述的方法，其中所述MMF和所述泼尼松与所述包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架同时施用。

50.如实施方案43-49中任一项所述的方法，其中所述CD40L特异性单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ ID NO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ ID NO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16。

51.如实施方案43-50中任一项所述的方法，其中就所述包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架而言，所述受试者未经治疗。

52.如前述实施方案中任一项所述的方法，其中所述βA链包含SEQ ID NO:5、SEQID NO:23或SEQ ID NO:24，其中所述βB链包含SEQ ID NO:6，其中所述βC链包含SEQ ID NO:17，其中所述βD链包含SEQ ID NO:18，其中所述βE链包含SEQ ID NO:19，其中所述βF链包含SEQ ID NO:20，并且其中所述βG链包含SEQ ID NO:21。

53.如实施方案52所述的方法，其中所述βA链由SEQ ID NO:5组成。

54.如实施方案52所述的方法，其中所述βA链由SEQ ID NO:23组成。

55.如实施方案52所述的方法，其中所述βA链由SEQ ID NO:24组成。

56.如实施方案52所述的方法，其中所述βB链由SEQ ID NO:6组成。

57.如实施方案52所述的方法，其中所述βC链由SEQ ID NO:17组成。

58.如实施方案52所述的方法，其中所述βD链由SEQ ID NO:18组成。

59.如实施方案52所述的方法，其中所述βE链由SEQ ID NO:19组成。

60.如实施方案52所述的方法，其中所述βF链由SEQ ID NO:20组成。

61.如实施方案52所述的方法，其中所述βG链由SEQ ID NO:21组成。

实施方案集合2

1.一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用达佐达利贝普，其中所述达佐达利贝普以约1500mg的剂量施用，其中所述达佐达利贝普约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。

2.一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用约1500mg剂量的达佐达利贝普，其中所述达佐达利贝普约每2周施用一次，持续3个剂量，并且此后约每月施用一次。

3.一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用达佐达利贝普与吗替麦考酚酯(MMF)的组合，其中所述达佐达利贝普以约1500mg的剂量施用。

4.如实施方案3所述的方法，其中在首次施用所述达佐达利贝普之前施用所述MMF至少约八周、九周、十周、十一周、十二周或更多周。

5.一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：向所述受试者施用达佐达利贝普与环磷酰胺的组合，其中所述达佐达利贝普以约1500mg的剂量施用。

6.如实施方案5所述的方法，其中在首次施用所述达佐达利贝普之前施用所述环磷酰胺至少约八周、九周、十周、十一周、十二周或更多周。

实施方案集合3

1.一种治疗狼疮性肾炎的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用：a)预备方案，所述预备方案包括以足以降低受试者中免疫反应的量施用至少一种免疫抑制剂；以及b)约1000-2000mg达佐达利贝普，其中所述达佐达利贝普约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。

2一种治疗狼疮性肾炎的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用：a)预备方案，所述预备方案包括：i.以足以降低受试者中免疫反应的量施用免疫抑制剂；和ii.以足以减少受试者中炎症的量施用皮质类固醇；以及b)约1000-2000mg达佐达利贝普，其中所述达佐达利贝普约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。

3.如实施方案1-2中任一项所述的方法，其中所述免疫抑制剂选自由以下组成的组：硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯、环孢菌素、甲氨蝶呤、来氟米特、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、氮芥及其组合。

4.如实施方案3所述的方法，其中所述免疫抑制剂选自由以下组成的组：硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯、环磷酰胺和环孢菌素。

5.如实施方案3或4所述的方法，其中所述免疫抑制剂是吗替麦考酚酯。

6.如实施方案4或5所述的方法，其中所述免疫抑制剂是环磷酰胺。

7.如实施方案25-30中任一项所述的方法，其中在首次施用所述达佐达利贝普之前施用所述免疫抑制剂至少约八周、九周、十周、十一周、十二周或更多周。

8.如实施方案6-7中任一项所述的方法，其中所述环磷酰胺每4周施用一次。

9.如实施方案6-7中任一项所述的方法，其中所述环磷酰胺每2周施用一次。

10.如实施方案1-9中任一项所述的方法，其中施用约1200-1800mg的所述达佐达利贝普。

11.如实施方案10所述的方法，其中施用约1500mg的所述达佐达利贝普。

12.如实施方案2所述的方法，其中所述预备方案进一步包括向所述受试者施用皮质类固醇。

13.如实施方案2-12中任一项所述的方法，其中所述皮质类固醇是泼尼松。

14.如实施方案1-13中任一项所述的方法，其中所述皮质类固醇的施用是逐渐减少的。

实施例

实施例1–用于活动性狼疮性肾炎的VIB4920：一项VIB4920治疗活动性狼疮性肾炎的2a期随机安慰剂对照双盲多中心试验

VIB4920治疗活动性狼疮性肾炎的2a期、随机、双盲、安慰剂对照多中心试验将在按以下任一标准分类为系统性红斑狼疮(SLE)的18岁及以上成人中进行：1982年美国风湿病学会(ACR)标准的1997年更新版、2012年系统性狼疮国际合作诊所(SLICC)标准或2019年欧洲风湿病联盟(EULAR)/ACR标准，基于第-1次访视时或第-1次访视前14天内的24小时尿液收集，UPCR≥1.5，以及第-1次访视时的肾活检文件记录为ISN/RPS LN：III类、IV类或与III类或IV类组合的V类，以及改良的NIH活动性指数≥1。

研究设计

合格的受试者将经历针对LN的诱导疗法，其中MMF、甲泼尼龙和快速皮质类固醇的剂量逐渐减少至每天5mg泼尼松。将在用MMF和皮质类固醇治疗8周后评估受试者的早期肾脏反应，并且将UPCR>0.75的受试者随机分配至用VIB4920或安慰剂治疗。继续使用MMF和低剂量皮质类固醇。

简而言之，多达114名患有活动性LN的合格受试者将在第0周开始接受MMF和甲泼尼龙的诱导疗法。受试者也将在第0周开始接受泼尼松25mg/天，并在第8周逐渐减少至5mg/天。将在第8周评估受试者的肾脏反应。在第10周，将尿蛋白与肌酸酐比率(UPCR)大于0.75的六十六名受试者按2:1随机分配至VIB4920与安慰剂。无随机分组资格的受试者将在第8周研究访视后完成研究参与，并将根据临床试验中心研究者或治疗医师的判断提供进一步的护理。随机分组的受试者将在第10周、第12周、第14周、第18周、第22周、第26周、第30和第34周静脉内接受VIB4920(1500mg)或安慰剂，并将继续MMF(2-3g/天)和泼尼松(5mg/天)。主要终点将在第38周进行评估，并且受试者将随访至第60周。

随机分组

合格的受试者将按2:1随机分组。用于随机分组的UPCR>0.75的标准对应于完全肾脏反应的主要终点定义的UPCR组分。

分层

根据基线和第8周时的蛋白尿水平对将受试者随机分配至VIB4920与安慰剂进行分层，这是基于：1)基线时UPCR<3；2)基线时UPCR≥3，其在第8周时提高了≥25％；以及3)基线时UPCR≥3，其在第8周时提高了<25％。第8周时蛋白尿减少≥25％预示第24周时的肾脏反应。与第8周蛋白尿减少<25％的受试者相比，第8周蛋白尿减少≥25％的受试者在第24周时的肾脏反应的比值比(95％置信区间)为3.2(2.1-5.1)(Dall'Era M,Stone D,LevesqueV,Cisternas M,Wofsy D.Identification of biomarkers that predict response totreatment of lupus nephritis with mycophenolate mofetil or pulse cyclophosphamide.Arthritis care&research.2011；63(3):351-7)。

施用

VIB4920的稀释溶液将在约90分钟内通过输注泵静脉内施用。如果受试者出现输注反应，则可以减慢或中断输注。VIB4920将由训练有素的医务人员施用，这些医务人员已做好处理过敏反应、严重超敏反应和输注相关反应的准备。对于严重超敏反应或严重且危及生命的输注反应，应立即停用VIB4920。

监测

每次输注前必须评估生命体征，输注期间约每30分钟进行一次评估。每次输注完成后，IV管线应在受试者体内保留至少1小时。

在前3次输注完成后的2小时内和剩余输注完成后的1小时内，必须约每30分钟一次评估受试者的生命体征。

安慰剂

安慰剂为0.9％生理盐水。根据本文提供的时间表，将在第10周、第12周、第14周、第18周、第22周、第26周、第30周和第34周静脉内施用安慰剂。安慰剂将是一袋250mL的0.9％生理盐水。应遮盖输液袋。安慰剂将根据为VIB4920提供的说明书进行施用。

主要目标

评价VIB4920拮抗CD40L在活动性LN中实现完全肾脏反应的功效。次要目标是评价VIB4920拮抗CD40L在活动性LN中关于以下方面的功效：(1)实现肾脏反应；(2)减少抗dsDNA抗体；(3)减少低补体血症；(4)减少SLE疾病活动性和损害累积；和/或(5)预防肾脏治疗失败事件。次要安全性目标是评价VIB4920拮抗CD40L在活动性LN中的安全性：(1)严重不良事件；(2)特别关注的不良事件；和/或(3)血清免疫球蛋白水平。

主要终点

将在第38周评估主要终点，即完全肾脏反应。主要终点是第38周时的完全肾脏反应，其被定义为以下所有项：(1)基于24小时收集，UPCR≤0.75；(2)估计的肾小球滤过率(eGFR)≥120ml/min/1.73m2，或如果<120ml/min/1.73m2，则>基线处eGFR的80％；(3)根据本文规定的泼尼松给药限制，从第8周起，泼尼松≤5mg/天。

次要功效终点包括：(1)第26周、第48周和第60周时的完全肾脏反应；并且如本文所定义；(2)第26周、第38周、第48周和第60周时的总体肾脏反应，其被定义为以下所有项：(a)基于24小时尿液收集，UPCR与基线相比提高≥50％；(b)估计的eGFR≥120ml/mi n/1.73m2，或如果<120ml/min/1.73m2，则为基线处eGFR的80％；以及(c)根据本文描述的泼尼松给药限制，从第8周起，泼尼松≤5mg/天；(3)第26周、第38周、第48周和第60周时的UPCR，基于24小时尿液收集；(4)第26周、第38周、第48周和第60周时的抗d sDNA抗体；(5)第26周、第38周、第48周和第60周时的C3水平；(6)第26周、第38周、第48周和第60周时的C4水平；(7)第26周、第38周、第48周和第60周时的SLEDAI-2K；(8)第26周和第60周时的SLICC/ACR-DI；和/或(9)本文定义的肾脏治疗失败。

次要安全性终点包括：(1)严重不良事件；(2)不良事件，诸如：(a)过敏反应；(b)3级或以上的输注反应；(c)3级或以上的超敏反应；(d)3级或以上的感染；和/或(e)血栓栓塞事件；(3)第26周、第38周、第48周和第60周时的血清IgM和IgG水平。

完全肾脏反应将被定义为三个标准的综合。当前试验的主要终点的每个组分的基本原理如下：

1.基于24小时收集，UPCR≤0.75。基于0.7至0.8范围内的UPCR是LN中良好长期肾脏结果的预测因子的证据，选择UPCR≤0.75的截止值(Dall'Era M,Cisternas MG,SmilekDE,Straub L,Houssiau FA,Cervera R等人Predictors of long-term renal outcome inlupus nephritis trials:lessons learned from the Euro-Lupus Nephritiscohort.Arthritis Rheumatol.2015；67(5):1305-13；Tamirou F,Lauwerys BR,Dall'EraM,Mackay M,Rovin B,Cervera R等人A proteinuria cut-off level of 0.7g/day after12months of treatment best predicts long-term renal outcome in lupusnephritis:data from the MAINTAIN Nephritis Trial.Lupus Sci Med.2015；2(1):e000123。在BLISS-LN试验中，UPCR≤0.7是主要功效肾脏反应定义的组分(Furie R,RovinBH,Houssiau F,Malvar A,Teng YKO,Contreras G等人Two-Year,Randomized,ControlledTrial of Belimumab in Lupus Nephritis.The New England journal ofmedicine.2020；383(12):1117-28)。

2.估计的肾小球滤过率(eGFR)≥120ml/min/1.73m²，或如果<120m./min/1.73m²，则>基线处eGFR的80％。将使用CKD-EPI公式计算eGFR(Levey AS,Stevens LA,Schmid CH,Zhang YL,Castro AF,3rd,Feldman HI等人Anew equation to estimate glomerularfiltration rate.Annals of internal medicine.2009；150(9):604-12)。eGFR≥120ml/min/1.73m²被包括在内，因为eGFR高值下的变化百分比可能会产生误导，并导致受试者被误认为没有肾脏反应。

3.根据本文规定的泼尼松给药限制，从第8周起，泼尼松≤5mg/天。

探索性终点

探索性功效终点包括第38周肾活检的组织学活性的变化。

探索性研究药剂终点包括：(1)VIB4920的血浆浓度和非区室药代动力学(PK)参数；以及(2)对VIB4920的ADA。将使用用于重复测量的纵向模型研究药代动力学参数与基线疾病特征和临床结果(包括蛋白尿)之间的关联。

其他研究细节

累积目标：66名随机受试者。根据实际的随机分组速率，可入组多达114名受试者，以将66名受试者随机分组。

研究持续时间：50个月：约36个月的入组时间+14个月的受试者研究参与时间。

治疗描述：在第10周、第12周、第14周、第18周、第22周、第26周、第30周和第34周静脉内施用VIB4920 1500mg或安慰剂，同时继续施用MMF和泼尼松。

分析时间。由于主要终点发生在研究完成之前，因此，将在活跃的研究受试者完成第38周评估并将第38周之前收集的数据冻结时对第38周之前的主要和次要终点进行分析。其他次要终点的分析将在受试者完成第60周之前的研究参与并锁定所有收集的数据后进行。

主要终点的初步分析。根据本文提供的主要终点定义，主要终点是在第38周达到完全肾脏反应的受试者的比例，并且将被计算为二元反应(是或否)，从而指示受试者在第38周是否符合完全肾脏反应的标准。主要终点的初步分析将在mITT样品上进行，并且旨在检验以下假设：

零假设：在第38周达到完全肾脏反应的受试者比例在VIB4920组与安慰剂组之间没有差异。

备择假设：与安慰剂组相比，在第38周达到完全肾脏反应的受试者比例在VIB4920组中更大。

将使用精确逻辑回归分析进行单侧检验，以确定在VIB4920组中达到完全肾脏反应的受试者比例是否高于安慰剂组。精确逻辑回归模型将使用完全肾脏反应状态的二元反应变量作为因变量，使用治疗组作为自变量，并使用本文定义的三级分层因子作为协变量。比较治疗组的检验将使用α＝0.10的1类单侧误差率进行评价。主要估计目标被定义为VIB4920组与安慰剂组中在第38周达到完全肾脏反应而没有由于狼疮性肾炎恶化而提前中断治疗的狼疮性肾炎受试者的比例的差异。估计目标的目标人群将是符合mITT分析人群标准的受试者。将通过最能反映估计目标的方法对并发事件进行分析。复合变量策略将应用于以下并发事件，其中受试者在第38周之前因本文提供的原因中断研究治疗，使得他们将在主要估计目标中被分析为没有达到完全肾脏反应。治疗方针策略将应用于在第38周之前因本文所述原因而中断的受试者，因为这些受试者将继续接受肾脏反应随访，并将在第38周时根据完全肾脏反应标准进行分析。对于按照本文所述调整MMF和泼尼松剂量的受试者，也将采用所述治疗策略，并将在第38周时根据完全肾脏反应标准对受试者进行分析。计算主要终点的变量在第38周时的缺失数据将根据最适当的归类法进行归类。将使用第38周时受试者的定点UPCR结果对缺失第38周的24小时UPCR结果的受试者进行归类。将通过从第34周评估中取最后一次观察结果(LOCF)对由于UPCR或eGFR信息缺失而无法在第38周时评估其反应标准的受试者的完全肾脏反应状态进行归类。根据统计分析计划中的规范，将通过多次归类对由于本文所述原因而未符合中断的并发事件标准但缺失第34周和第38周评估的受试者进行归类。

主要终点的支持性分析。将在符合mITT分析人群标准的受试者中重复主要终点的初步分析，并采用以下假设评估终点定义和主要估计目标的稳健性。将使用24小时UPCR≤0.5作为完全反应的UPCR标准进行敏感性分析，并使用非活性尿沉渣作为完全反应的附加标准进行额外的分析。非活性尿沉渣将被定义为符合以下所有标准：在没有月经和感染的情况下，尿RBC报告为小于5-10/hpf；在不存在感染，并且不存在RBC和WBC管型的情况下，尿WBC报告为小于5-10/hpf。额外的敏感性分析将使用复合变量策略，将缺失第38周估计值的所有受试者定义为未达到完全反应，并使用完全病例分析。将对PP样品重复主要终点的主要估计量。将对PP样品中的受试者子集进行额外的敏感性分析，这些受试者完成了第38周的访视，接受了8个剂量的VIB4920或安慰剂中的7个，并且没有影响功效评估的重大方案偏离。

次要功效终点的分析。本文提供了次要功效终点、终点定义以及分析终点的时间点。所有次要推论分析均被认为是支持性的；组间差异检验的p值将在不进行多重比较调整的情况下呈现。所有次要分析都将使用mITT和PP样品。对于肾脏反应终点，将通过最能反映估计目标的方法对并发事件进行分析。复合变量策略将应用于以下并发事件，其中受试者在终点之前因本文提供的原因中断研究治疗，使得他们将在估计目标中被分析为没有达到肾脏反应。治疗方针策略将应用于在终点之前因本文提供的原因而中断的受试者，因为这些受试者将继续接受肾脏反应随访，并将在终点时根据肾脏反应标准进行分析。对于按照本文所述调整MMF和泼尼松剂量的受试者，也将采用所述治疗策略，并将在终点时根据肾脏反应标准对受试者进行分析。计算肾脏反应的变量在终点时的缺失数据将根据最适当的归类法进行归类。将使用终点时受试者的定点UPCR结果对缺失终点的24小时UPCR结果的受试者进行归类。将通过从最近一次评估中取LOCF对由于UPCR或eGFR信息缺失而无法在终点时评估其肾脏反应标准的受试者的肾脏反应状态进行归类，条件是最近一次评估在被归类的终点的4周内。由于本文提供的原因而未符合中断的并发事件标准、并且由于UPCR或eGFR信息缺失而无法在终点时评估其肾脏反应标准、并且在终点的4周内没有进行评估的受试者将被排除在分析之外。零假设认为研究组之间的次要终点(以平均值或比例测量)没有差异。备择假设认为研究组之间存在差异。

计划进行以下分析，以评价研究治疗在研究过程中的影响：(1)将使用精确逻辑回归模型，以时间点肾脏反应状态的二元反应变量为因变量、以治疗组为自变量、并以三级分层因子为协变量，分析符合完全肾脏反应和总体肾脏反应标准的受试者的比例。探索性分析还将考虑当使用第8周访视(而不是第-1次访视)时的UPCR和eGFR评估来定义变化的参考点时，符合总体肾脏反应标准的受试者的比例。从第8周起变化的总体肾脏反应定义将被定义为以下所有项：(a)基于24小时尿液收集，UPCR与第8周相比提高≥50％，或UPCR≤0.75；和(b)eGFR≥120ml/min/1.73m2，或如果<120ml/min/1.73m2，则>第8周时eGFR的80％；和(c)根据本文规定的泼尼松给药限制，从第8周起，泼尼松≤5mg/天。

对于作为连续测量的第38周的UPCR水平的次要终点，将使用描述性统计(包括中位数和自引导BCa置信区间)在每个组中总结绝对值和相对于基线的变化百分比。将使用基于秩的Wilcoxon-Mann-Whitney(WMW)检验来评价VIB4920组中的UPCR水平是否低于安慰剂组。因估计的eGFR或泼尼松用量过多而未能达到主要终点的受试者将被归类为WMW检验的最低等级。支持性分析将以本文定义的分层因子作为协变量进行van Elteren检验。探索性分析将由各治疗组从第8周开始的变化百分比的描述性统计摘要组成。开始使用VIB4920或安慰剂后，抗dsDNA检测呈阴性的受试者比例的变化将按组汇总，并将使用精确条件逻辑回归模型进行分析，所述模型以时间点抗dsDNA状态的二元反应变量为因变量、以治疗组为自变量、并以第10周时的抗dsDNA状态为协变量。探索性分析还将使用用于二元变量的精确方法考虑受试者体内抗dsDNA状态相对于基线的变化。开始使用VIB4920或安慰剂后，C3和C4低补体血症受试者比例的变化将按组汇总，并使用精确条件逻辑回归模型进行分析，所述模型以时间点测试结果(C3或C4)状态的二元反应变量为因变量、以治疗组为自变量、并以第10周时的测试结果为协变量。探索性分析还将使用用于二元变量的精确方法考虑受试者体内C3和C4状态相对于基线的变化。开始使用VIB4920或安慰剂后，SLEDAI-2K评分的变化将按组汇总，并使用协方差分析(ANCOVA)模型进行分析，所述模型以时间点的SLEDAI-2K评分为因变量、以治疗组为自变量、并以第0周的SLEDAI-2K评分为协变量。将使用ANCOVA模型分析从随机分组开始的SLEDAI-2K评分变化的探索性分析，所述模型以时间点的SLEDAI-2K评分为因变量、以治疗组为自变量、并以第10周的SLEDAI-2K评分为协变量。如果正态假设的有效性存在问题，还将进行WMW检验。开始使用VIB4920或安慰剂后，SLICC/ACR-DI评分的变化将按组汇总，并使用ANCOVA模型进行分析，所述模型以时间点的SLICC/ACR-DI评分为因变量、以治疗组为自变量、并以第0周的SLICC/ACR-DI评分为协变量。如果正态假设的有效性存在问题，还将进行WMW检验。

研究人群

LN是SLE的一种常见且严重的表现，具有发展成终末期肾病的高风险。可用于LN的疗法具有不完全的功效和高毒性。合格的研究人群将是患有活动性LN的受试者，这些受试者适于进行有临床指征的肾活检并用MMF治疗。受试者必须具有1.5或更高的UPCR，因为完全肾脏反应的主要终点要求UPCR≤0.75，并且为了符合主要终点，蛋白尿应该需要至少50％的提高。受试者不得患有活动性或潜伏性感染，因为感染是研究药剂的潜在风险。VIB4920对胎儿造成伤害的风险尚不清楚，而MMF已知会对胎儿造成伤害。因此，如果受试者为有生育能力的女性或为具有有生育能力的伴侣的男性，则受试者不得怀孕、哺乳或不愿意使用避孕措施。

入选标准：符合以下所有标准的受试者有资格作为研究受试者入组：(1)年龄在18岁或以上；(2)按以下任一标准进行系统性红斑狼疮(SLE)分类：1982年美国风湿病学会(ACR)标准的1997年更新版、2012年系统性狼疮国际合作诊所(SLICC)标准或2019年欧洲风湿病联盟(EULAR)/ACR标准；(3)UPCR≥1.5，基于第-1次访视时或第-1次访视前14天内的24小时尿液收集；和(4)第-1次访视时的肾活检文件记录为ISN/RPS LN：III类、IV类或与III类或IV类组合的V类，以及改良的NIH活动性指数≥1。

排除标准：符合这些标准中的任一项的受试者无资格作为研究受试者入组：

1.不能或不愿提供书面知情同意或遵守研究方案。

2.对MMF或霉酚酸钠治疗有禁忌症；或研究者认为MMF或霉酚酸钠治疗不适当。

3.在第0次访视前90天或5个半衰期(以较长者为准)内接受过生物药剂或研究药剂治疗。

4.在第0次访视前6个月内使用利妥昔单抗(Rituximab)或其他B细胞耗竭剂。

5.之前接受过VIB4920治疗。

6.在第0次访视前4周内接种过减毒活疫苗。

7.需要使用全身性皮质类固醇治疗的合并症，包括在第0次访视前12个月内需要3个或更多个疗程的全身性皮质类固醇的合并症。

8.目前患有恶性肿瘤或有恶性肿瘤病史，但在第0次访视前>12个月接受过充分治疗的基底细胞癌、鳞状细胞癌或原位宫颈癌除外。

9.终末期肾病，定义为eGFR<20ml/min/1.73m²。

10.移植史。

11.有以下血栓栓塞风险：

a.近期或复发的深静脉血栓形成或动脉血栓栓塞。

b.在第0次访视前12周内接受过固定或大手术。

c.抗凝血酶III、蛋白S或蛋白C的先天性或遗传性缺陷病史。

d.抗磷脂综合征病史。

e.以下抗磷脂抗体中的任一种：

i.狼疮抗凝物测试呈阳性，或

ii.抗β₂-糖蛋白I IgG ELISA滴度≥40GPL，或

iii.抗心磷脂IgG ELISA滴度≥40GPL。

12.对VIB4920制剂的任何组分有严重过敏史或超敏反应史。

13.以下实验室异常中的任一种：

a.外周B细胞计数<5/μl。

b.中性粒细胞减少(绝对中性粒细胞计数<1000/mm³)。

c.贫血(血红蛋白<8g/dL)。

d.血小板减少症(血小板<50,000/mm³)。

e.天冬氨酸氨基转移酶或丙氨酸氨基转移酶≥正常值上限的2倍。

14.当前或之前感染结核病的证据，包括以下任何一项：

a.QuantiFERON-TB Gold或TB Gold Plus测试呈阳性。

b.T-SPOT.TB测试呈阳性。

c.纯化蛋白衍生(PPD)结核菌素呈阳性，定义为>5mm硬结。

15.人免疫缺陷病毒(HIV)感染。

16.当前或既往的乙型肝炎(HBV)感染。

17.目前或既往的丙型肝炎病毒(HCV)感染，但经充分治疗且有持续病毒学反应记录的HCV除外。

18.活动性细菌、病毒、真菌或机会性感染。

19.研究者认为参与本研究可能会带来额外风险的严重、复发性或慢性感染史。

20.研究者认为会干扰受试者遵守研究方案的能力的严重精神疾病史。

21.当前药物滥用，或第0次访视前12个月内有药物滥用史。

22.缺乏外周静脉通路。

23.妊娠。

24.哺乳期。

25.有生育能力的女性或具有有生育能力的伴侣的男性在研究期间不愿采取医学上可接受的避孕措施。

26.既往或当前的医学问题，或体检或实验室检查发现上述未列出的问题，且研究者认为这些问题可能会给参与研究带来额外风险，可能会影响受试者遵守研究要求的能力，或可能会影响研究数据的质量或解释。

除了预先安排的数据审查和计划的安全性监测之外，DSMB可能被要求进行特别审查。DSMB将应方案主席或DAIT/NIAID的要求审查任何可能影响安全性的事件。此外，在随机分组的受试者中发生的以下事件将触发一项专门全面的DSMB安全性审查：(1)至少可能与研究药剂有关的任何死亡；(2)涉及两名不同受试者的两起4级感染性AE；(3)涉及两名不同受试者的两起2级或以上的血栓栓塞事件；和/或(4)两起危及生命的输注反应、超敏反应或过敏反应事件，其导致研究药剂提前停用。DSMB将在向申办方通知所述事件后两周内审查安全性数据。如果DSMB未在两周内对安全性数据进行审查，则将暂停研究入组，并且不再让新的受试者签署知情同意书。已参见筛选的受试者可继续接受筛选评估，并且已入组的受试者将继续按计划进行DSMB审查。在对数据进行审查后，DSMB将就研究的进行和/或继续提出建议。

肾脏治疗失败

肾脏治疗失败的特征为以下中的任一项：

1.蛋白尿恶化，定义为以下两种情况：

a.UPCR≥1.5，和

b.与先前最低值相比，UPCR增加≥50％。必须至少间隔一周进行两次连续评价。第一次评价可以基于定点尿液或24小时尿液收集。确认性评价必须基于24小时尿液收集。

2.肾功能进行性恶化，定义为以下两种情况：

a.血清肌酸酐≥1.5，和

b.与先前最低值相比，血清肌酸酐增加≥50％。必须至少间隔一周进行两次连续评价。

3.试验期间可能会出现其他肾脏治疗失败事件，包括研究者因受试者肾炎恶化或未能充分改善而决定中断研究疗法，或接受禁用的治疗LN的免疫抑制性或免疫调节性药物。这些事件将由肾脏治疗失败事件裁定委员会(由方案主席、DAIT/NIAID医学监查员和ITN临床试验医师组成)以设盲的方式进行评价。

随机分组

在第10周，符合所有以下标准的受试者将按2:1随机分配，以接受VIB4920治疗与安慰剂治疗。

1.基于24小时尿液收集，第8周UPCR>0.75。

2.到第4周时，MMF剂量为2-3g/天，并保持不变。

3.到第8周时，泼尼松剂量为5mg/天，并保持不变。

根据基线和第8周时的蛋白尿水平对随机分配进行分层，如下所示：

基线时UPCR<3

基线时UPCR≥3，其在第8周时提高了≥25％

基线时UPCR≥3，其在第8周时提高了<25％

随机分组将由过敏、免疫学和移植统计和临床协调中心(DAIT-SACCC)执行。

毒性预防和管理

如果受试者出现3级或以上的感染，则必须暂停VIB4920或安慰剂。对于有症状的或无症状的SARS-CoV-2感染，也必须暂停VIB4920或安慰剂。

如果受试者出现研究者认为严重的任何AE，则也可能暂停VIB4920或安慰剂。

如果感染或AE消退，则VIB4920或安慰剂可在下一个计划剂量重新开始。

受试者如出现以下任何一种不良事件，VIB4920或安慰剂将永久停用：

a.过敏反应，根据本文提供的定义进行定义。

b.3级或以上的输注反应

c.3级或以上的超敏反应

d.血栓栓塞事件

e.4级感染

f.3级或以上的机会性感染

g.恶性肿瘤

h.符合以下标准的肝功能异常：ALT或AST增加>正常上限(ULN)的3倍，同时胆红素增加>ULN的2倍。如果VIB4920或安慰剂因上述任一事件而永久停用，则将遵循下文提供的程序。

对受试者的风险和益处

过敏反应、严重过敏反应和输注相关反应。

VIB4920是一种工程化的外来蛋白质，并且因此可在输注后诱导急性反应，包括IgE介导的过敏反应或超敏反应以及类过敏反应。这些反应可能是严重的或致命的，并且可以包括心肺、皮肤和胃肠体征和症状，诸如胸痛、低血压、呼吸困难、支气管痉挛、呼吸衰竭、荨麻疹、瘙痒性血管性水肿、恶心、呕吐、腹泻、虚脱和昏迷。输注反应可包括输注部位的局部反应、发热、荨麻疹、关节痛、支气管痉挛、喘息、咳嗽、头晕、呼吸困难、疲劳、头痛、高血压、低血压、肌痛和呕吐。

对VIB4920制剂的任何组分具有严重过敏史或反应史的受试者可能不符合参与本研究的条件。VIB4920将由训练有素的医务人员施用，这些医务人员已做好处理过敏反应、严重超敏反应和输注相关反应的准备。将在输注期间监测生命体征，并且输注后将在临床试验中心对受试者进行一小时的观察。

免疫复合物疾病

由于可能产生ADA，免疫复合物疾病是施用VIB4920的潜在风险。如本文所述，仅在剂量≤100mg时观察到ADA对VIB4920的药代动力学的影响。免疫复合物疾病表现可包括关节痛、血清病、肾炎和血管炎。

感染

CD40:CD40L共刺激途径是全面免疫反应(包括宿主对病原体的免疫反应)发展的中心。因此，干扰所述共刺激途径可增加感染的风险。在临床前研究中，一只食蟹猴出现了机会性真菌感染，而另一只猴出现了与本文所述的全身性感染一致的体征。在人体中，存在几例非严重的疱疹AE。还有一起病因不明的4级脑炎SAE，研究者认为与VIB4920无关。

如果受试者患有活动性细菌、病毒、真菌或机会性感染，或者如果他们患有可能带来额外风险的当前或近期感染，则他们将不符合参与条件。具有当前或既往肺结核、人免疫缺陷病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)或丙型肝炎病毒(HCV)证据的受试者将不符合参与条件，但经充分治疗且有持续病毒学反应记录的HCV除外。

建议受试者在参与研究之前接种最新的标准疫苗。在入组研究的4周内、VIB4920治疗期间、VIB4920停用后12周内，不允许接种减毒活疫苗。

在试验参与期间存在感染的风险，包括SARS-CoV-2和其他类型的感染的风险。受试者将被教育并告知严格遵守美国疾病控制和预防中心(CDC)关于降低SARS-CoV-2感染风险的建议的重要性，以及因研究治疗而导致对SARS-CoV-2疫苗接种的免疫反应可能不达标的风险。研究期间允许接种SARS-CoV-2疫苗，但强烈建议尽可能在接受研究药物治疗之前完成接种。在研究执行期间，如果受试者出现3级或以上的感染，则暂停VIB4920。如果受试者出现症状性或无症状的SARS-CoV-2感染，则也将暂停VIB4920。

如果受试者出现4级感染或3级或以上的机会性感染，则将永久停用VIB4920。

血栓栓塞

靶向CD40L的抗体引起的静脉和动脉血栓栓塞性AE导致这些药剂的药物开发计划中断。随后的非临床实验鉴定了由于CD40L和抗CD40抗体的免疫复合物结合Fc受体而引起的血小板活化作为血栓栓塞的可能原因。VIB4920是一种缺乏Fc结构域并且在临床前研究中不会促进血小板聚集或血栓栓塞效应的工程化蛋白质。VIB4920在动物或人体中均未发生血栓栓塞事件。

血栓栓塞是LN的已知风险，尤其是在具有肾病范围蛋白尿的受试者中。预计VIB4920不会增加这一原有风险。作为一项额外的安全措施，具有血栓栓塞事件的若干风险因素的受试者将被排除在试验之外，这些风险因素包括近期或复发的深静脉血栓或动脉血栓栓塞、近期的固定或大手术、抗凝血酶III、蛋白S和蛋白C的先天性或遗传性缺陷病史、抗磷脂综合征病史以及高风险抗磷脂抗体谱。

子宫内暴露

尚未进行胚胎-胎儿研究。怀孕和哺乳期受试者将不符合参与试验的条件，并且有生育能力的女性受试者将需要使用至少一种高效避孕方法。具有有生育能力的女性伴侣的男性受试者也将被要求使用避孕措施。

伴随药物

受试者应入组霉酚酸酯风险评价和缓解策略(REMS)项目。

所有受试者将在第0天开始接受吗替麦考酚酯(MMF)。必须在第4周之前达到2至3g/d的最大耐受剂量。除本文规定的情况外，MMF将以最大耐受剂量维持到第60周。第38周后，由于临床不耐受，允许使用1至1.5g/d的剂量。eGFR<25mL/min/1.73m²的受试者将接受每日两次1g的最大MMF剂量。霉酚酸钠可以以同等剂量替代MMF。

MMF可暂停最长7天，或剂量可减至≥1g/d，持续最长14天，原因如下：(1)临床不耐受；(2)白细胞减少症≤2000/mm3；和/或(3)嗜中性粒细胞减少症≤1500/mm3。暂停或减少剂量后，必须在≤4周内达到2至3g/d的先前最大耐受剂量。如果第二次需要停用或减至小于目标剂量的剂量，则将永久停用MMF。

泼尼松。受试者将在第0天或在完成甲泼尼龙后的第二天开始接受25mg/d泼尼松。根据表2，从第8周开始，泼尼松将逐渐减少至5mg/d。泼尼松将以5mg/d持续至第60周。泼尼松的施用将按照处方信息进行。

表2.示例性泼尼松递减时间表

研究周	泼尼松的剂量(mg/天)
		0-2	25
2	20
		4	15
6	10
		8	5

随机分组后，根据临床试验中心研究者的判断，泼尼松可在非肾性SLE疾病活动性研究期间增加一次，并在与SLE无关的病状研究期间增加一次。剂量可以增加≤14天，不超过25mg/d。可使用同等剂量的另一种皮质类固醇替代泼尼松。泼尼松剂量不得超过5mg/d，持续>14天。在第34周与第38周之间，泼尼松剂量不得超过5mg/d。在随机分组前不允许泼尼松的剂量调整。

甲泼尼龙。受试者将根据以下任一时间表接受总计1000mg甲泼尼龙：第0天，1000mg甲泼尼龙，IV；或第0天和第1天，500mg甲泼尼龙，IV。先前在第-1次访视或第-1次访视前14天内接受过1000mg甲泼尼龙IV的受试者将不会在第0天接受额外的甲泼尼龙IV。先前在第-1次访视或第-1次访视前14天内接受过少于1000mg甲泼尼龙IV的受试者将在第0天根据下式接受额外剂量的甲泼尼龙IV，其中X是先前接受的静脉内剂量，并且Y是在第0天施用的静脉内剂量：1000mg–X＝Y。甲泼尼龙的施用将根据处方信息进行。

非甾体抗炎药。由于可能对肾功能造成不良影响，不建议试验期间开始使用非甾体类抗炎药(NSAID)。但必要时，为控制症状，允许使用NSAID。

低丙球蛋白血症的治疗。在与方案主席和DAIT/NIAID医学监查员协商后，临床试验中心研究者可自行决定对具有感染性AE的受试者的低丙球蛋白血症进行治疗。

SARS-CoV-2疫苗。如果SARS-CoV-2疫苗具有FDA紧急使用授权或获得FDA批准，则允许使用。强烈建议在研究药物首次给药之前完成疫苗接种。

预防性药物

骨质疏松症的治疗和预防。在本试验期间，强烈建议采取预防和治疗骨质疏松症的措施。这些措施可包括以下措施中的任一种措施或所有措施：碳酸钙或柠檬酸钙(1500mg/d)；维生素D(高达2000IU/d)；和/或双膦酸盐。

胆固醇控制。根据临床试验中心研究者的判断，可以用胆固醇降低剂诸如他汀类药物治疗受试者。

抗疟药。除非有禁忌症，否则鼓励用抗疟药剂诸如羟氯喹进行治疗。

血压控制。除非有禁忌症，否则所有尚未服用血管紧张素转化酶抑制剂(ACEi)或血管紧张素受体阻断剂(ARB)的受试者均可开始服用此类药剂。应调整剂量以达到小于130mmHg的目标收缩压。如果单一药剂不控制收缩压，则可使用药物组合，包括ACEi、ARB、钙通道阻滞剂和/或β阻滞剂。

在各方面，上述预防性药物都不是必需的。

禁用药物

免疫抑制性和免疫调节性药物。除了本文规定的方案授权药物外，禁止使用免疫抑制性和免疫调节性药物。禁用的免疫抑制性药物包括但不限于环磷酰胺、硫唑嘌呤、利妥昔单抗、奥凯利珠单抗、贝利木单抗、依库珠单抗、阿巴西普、血浆置换/血浆交换和钙调磷酸酶抑制剂。除治疗伴有感染性AE的低丙球蛋白血症外，禁用静脉注射免疫球蛋白。

除非治疗过敏反应、超敏反应或输注反应，否则禁止口服和静脉注射皮质类固醇。

在参与研究期间，禁止使用研究药剂或治疗。

在用研究药剂治疗期间以及停用研究药剂后12周，禁用减毒活疫苗。

救援药物

允许使用救援药物治疗过敏反应、超敏反应和输注反应，所述救援药物包括但不限于肾上腺素、皮质类固醇、苯海拉明、对乙酰氨基酚和支气管扩张剂。允许用于非肾性SLE疾病活动性的泼尼松剂量的暂时增加。不允许用于如本文所述的肾脏治疗失败、狼疮性肾炎恶化和肾病复发的救援药物。需要额外的免疫调节性或免疫抑制性药物的受试者将停用本文所述的研究药物。

避孕

所有有生育能力的女性受试者在研究期间不得怀孕，并且在其参与试验的研究期间必须通过禁欲或使用至少一种高度有效的、医学上可接受的避孕形式而保持性不活跃。定期禁欲和体外射精是不可接受的避孕方法。医学上可接受的节育形式包括可注射或可植入的孕激素、宫内节育器、雌激素阴道环、双侧输卵管闭塞或男性伴侣绝育。根据MMF REMS指南(Mycophenolate REMS.2020)，允许将口服避孕药作为避孕方法与屏障法结合使用。如果使用男性伴侣绝育(输精管结扎术并提供无精子症证明文件)，则绝育必须在女性受试者进入研究之前进行，并且所述男性必须是受试者的唯一伴侣。

具有有生育能力的女性伴侣的未经绝育的男性受试者必须使用带有杀精子剂的避孕套。建议有生育能力的女性伴侣也使用如上所述的高效节育方法。

研究评估

表5和表6列出了每次研究访视时进行的研究评估。

简言之，一般评估包括：知情同意：在进行任何研究评估或程序之前，将获得书面知情同意；合格标准：在筛选期评估参与研究的资格；人口统计数据：年龄、性别和种族；病史：将采集病史以确定受试者是否患过除研究疾病以外的任何临床重大疾病或接受过任何医疗手术；生命体征：将在第-1次访视时获得身高；将在所有访视时获得体重、体温、脉搏、血压和呼吸；全面体检，包括以下身体系统：皮肤、呼吸、心血管、胃肠、神经、肌肉骨骼以及头部、耳朵、眼睛、鼻子和喉咙(HEENT)。有限体检，包括与受试者临床主诉和研究访视时的临床状态相关的所有身体系统；狼疮病史，以确定诊断日期、狼疮性肾炎发病日期和当前狼疮性肾炎复发的发病日期。

不良事件。将评估受试者的AE；伴随药物。将记录所有伴随药物及其适应症。

疾病特异性评估包括：全身性红斑狼疮疾病活动性指数2000(SLEDAI-2K)；和/或系统性红斑狼疮国际合作诊所/美国风湿病学会系统性红斑狼疮损害指数(SLICC/ACR-DI)。

临床实验室评估包括：血液学：CBC、差值和血小板计数；化学：AST、ALT、胆红素、碱性磷酸酶、白蛋白、肌酸酐、根据CKD-EPI公式计算的eGFR(Levey AS,Stevens LA,SchmidCH,Zhang YL,Castro AF,3rd,Feldman HI等人Anew equation to estimate glom erularfiltration rate.Annals of internal medicine.2009；150(9):604-12)；CD19；HIV。除非在第-1次访视后30天内进行了测试，且有记录的测试结果；乙型肝炎：表面抗体、核心抗体和表面抗原。除非在第-1次访视后30天内进行了测试，且有记录的测试结果；丙型肝炎：RNA或抗体。除非在第-1次访视后30天内进行了测试，且有记录的测试结果；结核病检测：QuantiFERON–TB Gold或TB Gold Plus。除非在第-1次访视后30天内进行了测试。T-SPOT.TB测试或PPD结核菌素测试可替代。在不确定的QuantiFERON-TB Gold或TB GoldPlus测试的情况下，PPD结核菌素测试可替代；血清妊娠；尿妊娠；定点尿液：蛋白质、肌酸酐、蛋白质与肌酸酐的比率、白蛋白与肌酸酐的比率；尿液分析；24小时尿液：蛋白质、肌酸酐、蛋白质-肌酸酐比率；血清免疫球蛋白：IgG、IgA、IgM；抗磷脂抗体：狼疮抗凝物、抗糖蛋白I IgG、抗心磷脂IgG；抗dsDNA；C3、C4；和/或肾活检组织学：ISN/RPS分类(Bajema IM,Wilhelmus S,Alpers CE,B ruijn JA,Colvin RB,Cook HT等人Revision of theInternational So ciety of Nephrology/Renal Pathology Society classificationfor lupus nephritis:clarification of definitions,and modified NationalInstitut es of Health activity and chronicity indices.Kidneyinternational.2018；93(4):789-96；Weening JJ,D'Agati VD,Schwartz MM,Seshan S V,Alpers CE,Appel GB等人The classification of glomerulonephriti s in systemiclupus erythematosus revisited.Kidney international.2004；65(2):521-30)、活动指数、慢性指数以及包括血栓性微血管病在内的血管病变的评估。

VIB4920评估包括：血浆PK测定、尿液PK测定、血浆ADA测定、血浆sCD40L测定及其组合。

机理性评估包括但不限于：PBMC测定、血清测定、全血DNA测定、全血RNA测定、尿液测定、肾活检测定、本文提供的任何其他测定及其组合。

程序

受试者将在基线和第38周时接受诊断性肾活检。将在这两次活检时收集额外的研究活检核心。

计划外访视

计划外(U)访视。如果定期计划的访视之间出现疾病活动性增加或其他问题，则应指示受试者联系研究者，并要求受试者返回研究中心接受“计划外”访视。表5概述了计划外(U)访视期间获得的评估结果。如果未指明访视目的，则研究者可自行决定省略计划外访视的一些评估。

中断(DSC)和安全性随访访视(表6)。在以下任一情况下，将根据表6对受试者进行随访，诸如：提前停用VIB4920或安慰剂；如本文所述，随机分组的受试者撤回同意或以其他方式不能继续参与试验；中断访视(DSC)将在提前停用VIB4920或安慰剂或提前退出研究后14天内完成。受试者将在DSC后12周(DSC+12)完成一次额外的安全性随访访视。在第48周时或之后中断的受试者无需进行DSC+12访视。将根据临床试验中心研究者的判断提供进一步的护理。

访视窗口。研究访视应在表3规定的期限内进行。第0次访视必须在第-1次访视的28天内进行。所有其他计划的研究访视必须在表3规定的期限内进行。

表3.示例性访视窗口

机理性分析

在本研究中，将在同一时间点收集连续的肾活检、尿液和血液样本，肾活检仅限于两次关键的研究访视。目标是分析靶组织(肾脏)、尿液和血液中免疫细胞群的频率、表型和功能特征，并量化血清中与LN和CD40:CD40L信号传导阻断相关的可溶性介质。这些研究将探索与临床反应结果相关的免疫特征，并将有助于确定与安慰剂相比，VIB4920的全身性治疗会在尿液和/或血液中引起哪些肾脏免疫学变化(如果有的话)。机理性研究将涉及多个问题，但将根据可用的组织和血液的量进行优先级排序。

机理性假设。B细胞生发中心形成、重链类别的转换和保护性免疫反应的发展都依赖于CD40:CD40L相互作用。CD40和CD40L的上调以及CD40L的异常表达是SLE的特征，并且B细胞被认为在疾病发病机制中起着重要作用。因此，本试验将检验以下假设：VIB4920将通过阻断CD40:CD40L共刺激途径来干扰B细胞活化，从而减少LN肾中的活化B细胞。

肾活检。本研究将在基线和VIB4920治疗后第38周收集肾活检。使用AMP开发和实施的技术对从冷冻肾活检中分选出的CD45+细胞进行单细胞RNAseq可用于解决以下研究问题：VIB4920是否增加肾脏中幼稚B细胞与活化B细胞、幼稚B细胞与记忆B细胞和/或幼稚B细胞与ABC细胞的比率？VIB4920是否减少肾脏中骨髓细胞的数量和活化状态？还是引入一种新状态？VIB4920是否降低肾脏中骨髓细胞中的干扰素评分？VIB4920是否调节肾脏中潜在致病性Tfh、Tph和其他CD4 T细胞亚群(例如CXCR5-PD-1hiCXCR3+IL-10+)和CD8 T细胞亚群？可审查临床病理学肾活检切片的结构和免疫学变化。

尿液。LN和其他肾病中的尿淋巴细胞和足细胞与炎症细胞特征和疾病活动性的生物标志物的鉴定有关。尿液mRNA足细胞损伤标志物可用于监测进展风险和对治疗的反应。由于不可能对受试者的肾脏进行多次连续活检，因此肾脏对疗法反应的尿液生物标志物将特别有用。预计尿液细胞的免疫特征反映在肾组织中观察到的特征。此外，尿液B细胞的自体反应特征可能比外周血更准确地反映肾脏对疗法的反应。因此，将收集尿液样本，并且可以利用AMP开发和实施的技术及其他可用的分析技术，通过单细胞流式细胞术和RNA-seq对造血和非造血细胞群进行分析。还可以对尿液蛋白质组学进行评估。

外周血细胞。可以进行流式细胞术或质量细胞术、单细胞RNAs eq、ATACseq和DNA甲基化测序以分析VIB4920处理对活的低温保存血液白细胞中特定免疫细胞群的频率和功能状态的影响。在治疗前和治疗后的不同时间点比较循环细胞的水平。将在治疗组之间进行额外的比较，以评价治疗对特定细胞表型和特征的影响，并鉴定与临床反应结果相关的表型和/或特征。将解决以下研究问题：VIB4920是否减少血液中ABC和浆细胞的数量和频率？VIB4920是否降低血液中记忆B细胞的百分比？VIB4920是否恢复来自SLE受试者的B细胞的改变的DNA甲基化和组蛋白编码修饰？VIB4920是否减少血液中CD14或CD16骨髓细胞的活化？VIB4920是否降低血液中Tfh、T ph和其他活化的CD4 T细胞(例如CXCR5-PD-1hiCXCR3+IL-10+)和/或CD8 T细胞的频率？VIB4920是否降低血液白细胞中干扰素诱导基因的表达，继发于自身抗体滴度和含DNA或RNA的IC的降低？

血清和血浆测定。在治疗前和治疗后的不同时间点比较可溶性免疫参数的水平。另外，可以评估可溶性免疫参数的水平与循环B细胞、T细胞和骨髓群体的频率和活化状态的相关性。最后，将在治疗组之间进行比较，以评价治疗干预对可溶性免疫参数的循环水平的影响。将收集并储存受试者血清和血浆，利用经过验证的平台进行纵向分析，以解决以下研究问题：VIB4920是否降低抗DNA和抗RNA自身抗体滴度？VIB4920是否调节CXCL13、IL-21和IL-10以及其他可溶性介质的水平？VIB4920是否在血浆中生成ADA和/或调节sCD40L水平？

全血分析可包括RNA和/或DNA测定。在各方面，全血测定包括RNA测定。生物药物的全身性治疗已被证明可调节自身免疫性疾病中的基因表达；因此，全血可用于评价由于疾病的免疫调节或VIB4920治疗的全身性质而引起的外周循环的变化。将从入组受试者中收集全血，用于评价治疗期间和治疗后基因表达的总体变化。可以使用定量方法在全血中研究在肾组织、尿液和/或血液白细胞中发现受治疗调节的分子的基因表达。在各方面，全血测定包括DNA测定。遗传差异可以部分地决定对VIB4920阻断CD40L的反应。因此，将从所有同意的受试者中收集DNA，以允许对特定等位基因进行HLA分型，并对已报道与SLE或药物相关效应相关的基因进行单核苷酸多态性分析。

研究完成

受试者完成。不符合随机分组条件的受试者将在第8周研究访视后完成研究。随机分组受试者将在60周研究访视时完成研究。

受试者终止规则和退出标准。受试者将因以下原因提前终止研究：(1)在随机分组前发生以下任何情况：(a)受试者符合本文定义的蛋白尿恶化标准；(b)受试者符合本文定义的肾功能进行性恶化标准；(c)受试者停用MMF；(2)受试者选择撤销对所有未来研究活动(包括随访)的同意；(3)受试者“失访”(即，由于试图与受试者重新建立联系的努力失败，无法进一步随访)；(4)受试者死亡；(5)研究者不再认为参与研究符合受试者的最佳利益。

受试者替换。如果随机分组的受试者未接受任何剂量的VIB4920或安慰剂的任何部分，则将替换受试者。

提前退出研究后进行随访。如果随机分组的受试者退出研究(如本文所述)且可用，则将要求受试者完成随访(如表6所述)。这将结束他们的研究参与。

研究停止规则。如果发生本文列出的任何事件，DSMB将专门审查安全性数据。在对数据进行审查后，DSMB将就研究的进行和/或继续提出建议。

下表4中提供了研究定义。

表4：研究定义

/>

/>

/>

/>

COVID 19导致的特殊考虑因素

临床试验开展可能受到COVID-19公共卫生紧急情况的影响。这些影响可能包括试验场地关闭、旅行限制、试验场地人员和研究空间的有限可用性、生物样本的后勤问题以及试验场地人员或试验受试者感染SARS-CoV-2。这些因素可能导致难以完成方案规定的评估和程序，从而导致不可避免的方案偏离和方案修改。

在COVID-19公共卫生突发事件期间，试验的开展将遵循以下原则：任何开始、继续或停止入组研究的决定都将考虑COVID-19公共卫生突发事件对受试者安全的潜在影响。停用研究药剂或中断受试者参与研究的决定将基于受试者的安全性和福利。这一决定将由申办方DAIT/NIAID与研究小组和试验中心研究者协商做出，并考虑到：VI B4920可能会干扰受试者免疫系统产生针对SARS-CoV-2的中和抗体的能力，并可能显著增加感染的严重程度。COVID-19筛查或检测程序由当地卫生当局或临床试验所在的卫生系统强制执行，无需修改方案。由于SARS-CoV-2感染或公共卫生紧急事件的影响，为保护受试者的安全，可立即对方案进行紧急修改，并同时通知IRB。申办方D AIT/NIAID将根据现行指南向卫生部门提交修订文件。在某些情况下，受试者可能无法前往研究现场，或者当地机构政策或其他因素可能会限制进入研究现场。申办方DAIT/NIAID在与研究团队和临床试验中心研究者协商后将确定进行评估和程序的替代方法是否必要且可行。将收集因COVID-19公共卫生紧急情况造成的研究访视影响，以记录并评价对受试者安全性和试验结果的潜在影响。未能进行必要的研究评估和程序，或使用替代方法进行研究评估或程序，将作为方案偏离记录在案。

伦理考虑和对良好临床实践的依从性

本临床研究将采用《工业指南：E6良好临床实践综合指南》中规定的良好临床实践(GCP)，并根据本研究方案中规定的标准进行。在研究开始之前，研究方案和知情同意书文件将由IRB审查和批准。

对方案或同意书材料的任何修改也将在实施前获得IRB的批准。

/>

/>

表6：事件时间表：中断和安全性随访

¹DSC＝中断访视

²DSC访视后12周进行DSC+12访视。在第48周访视时或之后中断的受试者不需要。

³仅在自上一次评估以来已过去≥24周时收集SLICC/ACR-DI。

周	DSC1	DSC+122
			访视	DSC	DSC+12
全血DNA测定	x
			全血RNA测定	x
尿液测定	x

表7.用于诊断过敏反应的临床标准

PEF，峰值呼气流量；BP，血压。

*儿童的低收缩压被定义为1个月至1岁低于70mm Hg，1岁至10岁低于(70mm Hg+[2x年龄])，以及11岁至17岁低于90mm Hg。

改编自第二次美国国立过敏与传染病研究所/食品过敏与过敏反应网络

通过引用并入

本专利申请出于所有目的以引用的方式整体并入以下专利申请：PCT/US2012/059477和PCT/US2019/052997。本文引用的所有参考文献、文章、出版物、专利、专利公开和专利申请通过引用整体并入。然而，对本文所引用的任何参考文献、文章、出版物、专利、专利出版物和专利申请的提及不被视为并且不应当被视为对其构成有效的现有技术或形成世界上任何国家的公知常识的一部分的承认或任何形式的暗示。

序列表

<110> 维莱生物公司（VIELA BIO, INC.）

<120> CD40L拮抗剂及其在治疗狼疮性肾炎中的用途

<130> HOPA-013/02WO 308248-2577

<140> PCT/US2022/030290

<141> 2022-05-20

<150> US 63/236,520

<151> 2021-08-20

<150> US 63/191,514

<151> 2021-05-21

<160> 24

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 785

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 1

Ser Gln Ile Glu Val Lys Asp Val Thr Asp Thr Thr Ala Leu Ile Thr

1 5 10 15

Trp Ser Asp Asp Phe Gly Glu Tyr Val Trp Cys Glu Leu Thr Tyr Gly

20 25 30

Ile Lys Asp Val Pro Gly Asp Arg Thr Thr Ile Asp Leu Trp Tyr His

35 40 45

His Ala His Tyr Ser Ile Gly Asn Leu Lys Pro Asp Thr Glu Tyr Glu

50 55 60

Val Ser Leu Ile Cys Arg Ser Gly Asp Met Ser Ser Asn Pro Ala Lys

65 70 75 80

Glu Thr Phe Thr Thr Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly

85 90 95

Gly Gly Gly Gly Arg Leu Asp Ala Pro Ser Gln Ile Glu Val Lys Asp

100 105 110

Val Thr Asp Thr Thr Ala Leu Ile Thr Trp Ser Asp Asp Phe Gly Glu

115 120 125

Tyr Val Trp Cys Glu Leu Thr Tyr Gly Ile Lys Asp Val Pro Gly Asp

130 135 140

Arg Thr Thr Ile Asp Leu Trp Tyr His His Ala His Tyr Ser Ile Gly

145 150 155 160

Asn Leu Lys Pro Asp Thr Glu Tyr Glu Val Ser Leu Ile Cys Arg Ser

165 170 175

Gly Asp Met Ser Ser Asn Pro Ala Lys Glu Thr Phe Thr Thr Gly Gly

180 185 190

Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala

195 200 205

His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu

210 215 220

Ile Ala Phe Ala Gln Tyr Leu Gln Gln Ser Pro Phe Glu Asp His Val

225 230 235 240

Lys Leu Val Asn Glu Val Thr Glu Phe Ala Lys Thr Cys Val Ala Asp

245 250 255

Glu Ser Ala Glu Asn Cys Asp Lys Ser Leu His Thr Leu Phe Gly Asp

260 265 270

Lys Leu Cys Thr Val Ala Thr Leu Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala

275 280 285

Asp Cys Cys Ala Lys Gln Glu Pro Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Gln

290 295 300

His Lys Asp Asp Asn Pro Asn Leu Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val

305 310 315 320

Asp Val Met Cys Thr Ala Phe His Asp Asn Glu Glu Thr Phe Leu Lys

325 330 335

Lys Tyr Leu Tyr Glu Ile Ala Arg Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro

340 345 350

Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys Arg Tyr Lys Ala Ala Phe Thr Glu Cys

355 360 365

Cys Gln Ala Ala Asp Lys Ala Ala Cys Leu Leu Pro Lys Leu Asp Glu

370 375 380

Leu Arg Asp Glu Gly Lys Ala Ser Ser Ala Lys Gln Arg Leu Lys Cys

385 390 395 400

Ala Ser Leu Gln Lys Phe Gly Glu Arg Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val

405 410 415

Ala Arg Leu Ser Gln Arg Phe Pro Lys Ala Glu Phe Ala Glu Val Ser

420 425 430

Lys Leu Val Thr Asp Leu Thr Lys Val His Thr Glu Cys Cys His Gly

435 440 445

Asp Leu Leu Glu Cys Ala Asp Asp Arg Ala Asp Leu Ala Lys Tyr Ile

450 455 460

Cys Glu Asn Gln Asp Ser Ile Ser Ser Lys Leu Lys Glu Cys Cys Glu

465 470 475 480

Lys Pro Leu Leu Glu Lys Ser His Cys Ile Ala Glu Val Glu Asn Asp

485 490 495

Glu Met Pro Ala Asp Leu Pro Ser Leu Ala Ala Asp Phe Val Glu Ser

500 505 510

Lys Asp Val Cys Lys Asn Tyr Ala Glu Ala Lys Asp Val Phe Leu Gly

515 520 525

Met Phe Leu Tyr Glu Tyr Ala Arg Arg His Pro Asp Tyr Ser Val Val

530 535 540

Leu Leu Leu Arg Leu Ala Lys Thr Tyr Glu Thr Thr Leu Glu Lys Cys

545 550 555 560

Cys Ala Ala Ala Asp Pro His Glu Cys Tyr Ala Lys Val Phe Asp Glu

565 570 575

Phe Lys Pro Leu Val Glu Glu Pro Gln Asn Leu Ile Lys Gln Asn Cys

580 585 590

Glu Leu Phe Glu Gln Leu Gly Glu Tyr Lys Phe Gln Asn Ala Leu Leu

595 600 605

Val Arg Tyr Thr Lys Lys Val Pro Gln Val Ser Thr Pro Thr Leu Val

610 615 620

Glu Val Ser Arg Asn Leu Gly Lys Val Gly Ser Lys Cys Cys Lys His

625 630 635 640

Pro Glu Ala Lys Arg Met Pro Cys Ala Glu Asp Tyr Leu Ser Val Val

645 650 655

Leu Asn Gln Leu Cys Val Leu His Glu Lys Thr Pro Val Ser Asp Arg

660 665 670

Val Thr Lys Cys Cys Thr Glu Ser Leu Val Asn Arg Arg Pro Cys Phe

675 680 685

Ser Ala Leu Glu Val Asp Glu Thr Tyr Val Pro Lys Glu Phe Asn Ala

690 695 700

Glu Thr Phe Thr Phe His Ala Asp Ile Cys Thr Leu Ser Glu Lys Glu

705 710 715 720

Arg Gln Ile Lys Lys Gln Thr Ala Leu Val Glu Leu Val Lys His Lys

725 730 735

Pro Lys Ala Thr Lys Glu Gln Leu Lys Ala Val Met Asp Asp Phe Ala

740 745 750

Ala Phe Val Glu Lys Cys Cys Lys Ala Asp Asp Lys Glu Thr Cys Phe

755 760 765

Ala Glu Glu Gly Lys Lys Leu Val Ala Ala Ser Gln Ala Ala Leu Gly

770 775 780

Leu

785

<210> 2

<211> 83

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 2

Ile Glu Val Lys Asp Val Thr Asp Thr Thr Ala Leu Ile Thr Trp Ser

1 5 10 15

Asp Asp Phe Gly Glu Tyr Val Trp Cys Glu Leu Thr Tyr Gly Ile Lys

20 25 30

Asp Val Pro Gly Asp Arg Thr Thr Ile Asp Leu Trp Tyr His His Ala

35 40 45

His Tyr Ser Ile Gly Asn Leu Lys Pro Asp Thr Glu Tyr Glu Val Ser

50 55 60

Leu Ile Cys Arg Arg Gly Asp Met Ser Ser Asn Pro Ala Lys Glu Thr

65 70 75 80

Phe Thr Thr

<210> 3

<211> 83

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 3

Ile Glu Val Lys Asp Val Thr Asp Thr Thr Ala Leu Ile Thr Trp Ser

1 5 10 15

Asp Asp Phe Gly Glu Tyr Val Trp Cys Glu Leu Thr Tyr Gly Ile Lys

20 25 30

Asp Val Pro Gly Asp Arg Thr Thr Ile Asp Leu Trp Tyr His His Ala

35 40 45

His Tyr Ser Ile Gly Asn Leu Lys Pro Asp Thr Glu Tyr Glu Val Ser

50 55 60

Leu Ile Cys Arg Ser Gly Asp Met Ser Ser Asn Pro Ala Lys Glu Thr

65 70 75 80

Phe Thr Thr

<210> 4

<211> 585

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 4

Asp Ala His Lys Ser Glu Val Ala His Arg Phe Lys Asp Leu Gly Glu

1 5 10 15

Glu Asn Phe Lys Ala Leu Val Leu Ile Ala Phe Ala Gln Tyr Leu Gln

20 25 30

Gln Ser Pro Phe Glu Asp His Val Lys Leu Val Asn Glu Val Thr Glu

35 40 45

Phe Ala Lys Thr Cys Val Ala Asp Glu Ser Ala Glu Asn Cys Asp Lys

50 55 60

Ser Leu His Thr Leu Phe Gly Asp Lys Leu Cys Thr Val Ala Thr Leu

65 70 75 80

Arg Glu Thr Tyr Gly Glu Met Ala Asp Cys Cys Ala Lys Gln Glu Pro

85 90 95

Glu Arg Asn Glu Cys Phe Leu Gln His Lys Asp Asp Asn Pro Asn Leu

100 105 110

Pro Arg Leu Val Arg Pro Glu Val Asp Val Met Cys Thr Ala Phe His

115 120 125

Asp Asn Glu Glu Thr Phe Leu Lys Lys Tyr Leu Tyr Glu Ile Ala Arg

130 135 140

Arg His Pro Tyr Phe Tyr Ala Pro Glu Leu Leu Phe Phe Ala Lys Arg

145 150 155 160

Tyr Lys Ala Ala Phe Thr Glu Cys Cys Gln Ala Ala Asp Lys Ala Ala

165 170 175

Cys Leu Leu Pro Lys Leu Asp Glu Leu Arg Asp Glu Gly Lys Ala Ser

180 185 190

Ser Ala Lys Gln Arg Leu Lys Cys Ala Ser Leu Gln Lys Phe Gly Glu

195 200 205

Arg Ala Phe Lys Ala Trp Ala Val Ala Arg Leu Ser Gln Arg Phe Pro

210 215 220

Lys Ala Glu Phe Ala Glu Val Ser Lys Leu Val Thr Asp Leu Thr Lys

225 230 235 240

Val His Thr Glu Cys Cys His Gly Asp Leu Leu Glu Cys Ala Asp Asp

245 250 255

Arg Ala Asp Leu Ala Lys Tyr Ile Cys Glu Asn Gln Asp Ser Ile Ser

260 265 270

Ser Lys Leu Lys Glu Cys Cys Glu Lys Pro Leu Leu Glu Lys Ser His

275 280 285

Cys Ile Ala Glu Val Glu Asn Asp Glu Met Pro Ala Asp Leu Pro Ser

290 295 300

Leu Ala Ala Asp Phe Val Glu Ser Lys Asp Val Cys Lys Asn Tyr Ala

305 310 315 320

Glu Ala Lys Asp Val Phe Leu Gly Met Phe Leu Tyr Glu Tyr Ala Arg

325 330 335

Arg His Pro Asp Tyr Ser Val Val Leu Leu Leu Arg Leu Ala Lys Thr

340 345 350

Tyr Glu Thr Thr Leu Glu Lys Cys Cys Ala Ala Ala Asp Pro His Glu

355 360 365

Cys Tyr Ala Lys Val Phe Asp Glu Phe Lys Pro Leu Val Glu Glu Pro

370 375 380

Gln Asn Leu Ile Lys Gln Asn Cys Glu Leu Phe Glu Gln Leu Gly Glu

385 390 395 400

Tyr Lys Phe Gln Asn Ala Leu Leu Val Arg Tyr Thr Lys Lys Val Pro

405 410 415

Gln Val Ser Thr Pro Thr Leu Val Glu Val Ser Arg Asn Leu Gly Lys

420 425 430

Val Gly Ser Lys Cys Cys Lys His Pro Glu Ala Lys Arg Met Pro Cys

435 440 445

Ala Glu Asp Tyr Leu Ser Val Val Leu Asn Gln Leu Cys Val Leu His

450 455 460

Glu Lys Thr Pro Val Ser Asp Arg Val Thr Lys Cys Cys Thr Glu Ser

465 470 475 480

Leu Val Asn Arg Arg Pro Cys Phe Ser Ala Leu Glu Val Asp Glu Thr

485 490 495

Tyr Val Pro Lys Glu Phe Asn Ala Glu Thr Phe Thr Phe His Ala Asp

500 505 510

Ile Cys Thr Leu Ser Glu Lys Glu Arg Gln Ile Lys Lys Gln Thr Ala

515 520 525

Leu Val Glu Leu Val Lys His Lys Pro Lys Ala Thr Lys Glu Gln Leu

530 535 540

Lys Ala Val Met Asp Asp Phe Ala Ala Phe Val Glu Lys Cys Cys Lys

545 550 555 560

Ala Asp Asp Lys Glu Thr Cys Phe Ala Glu Glu Gly Lys Lys Leu Val

565 570 575

Ala Ala Ser Gln Ala Ala Leu Gly Leu

580 585

<210> 5

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 5

Ile Glu Val

1

<210> 6

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 6

Ala Leu Ile Thr Trp

1 5

<210> 7

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 接头

<400> 7

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10

<210> 8

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 接头

<400> 8

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

1 5 10 15

<210> 9

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 接头

<400> 9

Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly

1 5 10

<210> 10

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 接头

<400> 10

Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly Gly

1 5 10 15

<210> 11

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 11

Lys Asp Val Thr Asp Thr Thr

1 5

<210> 12

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 12

Ser Asp Asp Phe Gly Glu Tyr Val Trp

1 5

<210> 13

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 13

Lys Asp Val Pro Gly Asp Arg

1 5

<210> 14

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 14

Trp Tyr His His Ala His

1 5

<210> 15

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 15

Gly Asn Leu Lys Pro Asp Thr Glu

1 5

<210> 16

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 16

Arg Ser Gly Asp Met Ser Ser Asn Pro Ala

1 5 10

<210> 17

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 17

Cys Glu Leu Thr Tyr Gly Ile

1 5

<210> 18

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 18

Thr Thr Ile Asp Leu

1 5

<210> 19

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 19

Tyr Ser Ile

1

<210> 20

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 20

Tyr Glu Val Ser Leu Ile Cys

1 5

<210> 21

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 21

Lys Glu Thr Phe Thr Thr

1 5

<210> 22

<211> 85

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 22

Ser Gln Ile Glu Val Lys Asp Val Thr Asp Thr Thr Ala Leu Ile Thr

1 5 10 15

Trp Ser Asp Asp Phe Gly Glu Tyr Val Trp Cys Glu Leu Thr Tyr Gly

20 25 30

Ile Lys Asp Val Pro Gly Asp Arg Thr Thr Ile Asp Leu Trp Tyr His

35 40 45

His Ala His Tyr Ser Ile Gly Asn Leu Lys Pro Asp Thr Glu Tyr Glu

50 55 60

Val Ser Leu Ile Cys Arg Ser Gly Asp Met Ser Ser Asn Pro Ala Lys

65 70 75 80

Glu Thr Phe Thr Thr

85

<210> 23

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 23

Arg Leu Asp Ala Pro Ser Gln Ile Glu Val

1 5 10

<210> 24

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 合成构建体

<400> 24

Ser Gln Ile Glu Val

1 5

Claims (33)

1.一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：

向所述受试者施用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架，

其中所述Tn3支架与CD40L结合，

其中所述CD40L特异性单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ IDNO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ IDNO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16，

其中所述包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架以约1500mg的剂量施用，并且

其中所述Tn3支架约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。

2.一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：

向所述受试者施用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架，

其中所述Tn3支架与CD40L结合，

其中所述CD40L特异性单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ IDNO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ IDNO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16，

其中所述包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架以约1500mg的剂量施用，并且

其中所述Tn3支架约每2周施用一次，持续至少3个剂量，并且此后约每月施用一次。

3.一种用于治疗有需要的受试者的狼疮性肾炎的方法，所述方法包括：

向所述受试者施用包含CD40L特异性单体亚基的Tn3支架与环磷酰胺的组合，

其中所述Tn3支架与CD40L结合，

其中所述单体亚基包含被命名为A、B、C、D、E、F和G的七条β链和被命名为AB、BC、CD、DE、EF和FG的六个环区，其中所述AB环包含SEQ ID NO:11，所述BC环包含SEQ ID NO:12，所述CD环包含SEQ ID NO:13，所述DE环包含SEQ ID NO:14，所述EF环包含SEQ ID NO:15，并且所述FG环包含SEQ ID NO:16，并且

其中所述Tn3支架以约1500mg的剂量施用。

4.如权利要求3所述的方法，其中在施用所述Tn3支架之前施用所述环磷酰胺至少约八周、十周、十二周或更多周。

5.如权利要求4所述的方法，其中在施用所述Tn3支架之前施用所述环磷酰胺至少约八周。

6.如权利要求4所述的方法，其中在施用所述Tn3支架之前施用所述环磷酰胺至少约十周。

7.如权利要求4所述的方法，其中在施用所述Tn3支架之前施用所述环磷酰胺至少约十二周。

8.如权利要求2-7中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架约每两周、三周、四周施用一次，或约每月施用一次。

9.如权利要求2-7中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架约每2周施用一次，持续至少2个剂量，并且此后约每月施用一次。

10.如权利要求2-7中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架约每2周施用一次，持续至少3个剂量，并且此后约每月施用一次。

11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中静脉内施用所述Tn3支架。

12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架包含串联连接的两个CD40L特异性单体亚基。

13.如权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架：

a.结合CD40L，从而减少或防止CD40L与CD40的结合；

b.减少或消除CD40介导的信号传导；或

c.a和b。

14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中至少一个CD40L特异性单体亚基与选自由以下组成的组的异源部分融合或缀合：蛋白质、肽、蛋白质结构域、接头、药物、毒素、细胞毒性剂、显像剂、放射性核素、放射性化合物、有机聚合物、无机聚合物、聚乙二醇(PEG)、生物素、白蛋白、人血清白蛋白(HSA)、HSA FcRn结合部分、抗体、抗体结构域、抗体片段、单链抗体、结构域抗体、白蛋白结合结构域、酶、配体、受体、结合肽、非FnIII支架、表位标签、重组多肽聚合物和细胞因子。

15.如权利要求12-14中任一项所述的方法，其中所述两个CD40L特异性单体亚基中的至少一个与PEG缀合或与人血清白蛋白(HSA)融合。

16.如权利要求15所述的方法，其中所述HSA是包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列的变体HSA。

17.如权利要求1-16中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架包含SEQ ID NO:1的序列。

18.如权利要求1-17中任一项所述的方法，其中所述Tn3支架是达佐达利贝普。

19.如权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述受试者被进一步施用泼尼松。

20.如权利要求1-19中任一项所述的方法，其中所述受试者在施用所述Tn3支架之前接受一种或多种标准护理疗法。

21.如权利要求20所述的方法，其中在施用所述Tn3支架后继续所述标准护理疗法。

22.如权利要求20所述的方法，其中所述标准护理疗法是环磷酰胺。

23.如权利要求20所述的方法，其中所述标准护理疗法是泼尼松。

24.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述βA链包含SEQ ID NO:5、SEQ IDNO:23或SEQ ID NO:24，其中所述βB链包含SEQ ID NO:6，其中所述βC链包含SEQ ID NO:17，其中所述βD链包含SEQ ID NO:18，其中所述βE链包含SEQ ID NO:19，其中所述βF链包含SEQID NO:20，并且其中所述βG链包含SEQ ID NO:21。

25.如权利要求24所述的方法，其中所述βA链由SEQ ID NO:5组成。

26.如权利要求24所述的方法，其中所述βA链由SEQ ID NO:23组成。

27.如权利要求24所述的方法，其中所述βA链由SEQ ID NO:24组成。

28.如权利要求24所述的方法，其中所述βB链由SEQ ID NO:6组成。

29.如权利要求24所述的方法，其中所述βC链由SEQ ID NO:17组成。

30.如权利要求24所述的方法，其中所述βD链由SEQ ID NO:18组成。

31.如权利要求24所述的方法，其中所述βE链由SEQ ID NO:19组成。

32.如权利要求24所述的方法，其中所述βF链由SEQ ID NO:20组成。

33.如权利要求24所述的方法，其中所述βG链由SEQ ID NO:21组成。