CN117511782A - 一种处理低c/n污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法 - Google Patents
一种处理低c/n污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117511782A CN117511782A CN202311440272.9A CN202311440272A CN117511782A CN 117511782 A CN117511782 A CN 117511782A CN 202311440272 A CN202311440272 A CN 202311440272A CN 117511782 A CN117511782 A CN 117511782A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- denitrification
- culture medium
- denitrifying bacteria
- screening
- aerobic denitrifying
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 106
- 238000012216 screening Methods 0.000 title claims abstract description 50
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 48
- 239000010865 sewage Substances 0.000 title claims abstract description 46
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 109
- MMDJDBSEMBIJBB-UHFFFAOYSA-N [O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[NH6+3] Chemical compound [O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[NH6+3] MMDJDBSEMBIJBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 29
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 11
- 239000010802 sludge Substances 0.000 claims abstract description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 38
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 37
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 32
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 30
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 21
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 19
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 19
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 19
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 18
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 claims description 17
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 claims description 17
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 16
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 16
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 16
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 16
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 16
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 claims description 14
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 claims description 14
- 239000006152 selective media Substances 0.000 claims description 10
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 9
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 9
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 9
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 9
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 claims description 9
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 9
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 7
- 229910021380 Manganese Chloride Inorganic materials 0.000 claims description 7
- GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L Manganese chloride Chemical compound Cl[Mn]Cl GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 7
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 claims description 7
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 7
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 7
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 7
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 7
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 7
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 7
- 239000011565 manganese chloride Substances 0.000 claims description 7
- 235000002867 manganese chloride Nutrition 0.000 claims description 7
- 229940099607 manganese chloride Drugs 0.000 claims description 7
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000011684 sodium molybdate Substances 0.000 claims description 7
- 235000015393 sodium molybdate Nutrition 0.000 claims description 7
- TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N sodium molybdate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Mo]([O-])(=O)=O TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 7
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 claims description 7
- ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-1,3-oxazolidin-2-one Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1CC1NC(=O)OC1 ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 5
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 claims description 4
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 claims description 4
- 239000003086 colorant Substances 0.000 claims description 4
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 claims description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 abstract description 12
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 10
- 238000005273 aeration Methods 0.000 abstract description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 abstract description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 abstract description 2
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N Nitrous acid Chemical compound ON=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 abstract 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract 1
- 230000001360 synchronised effect Effects 0.000 abstract 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 18
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 8
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 4
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 4
- JVMRPSJZNHXORP-UHFFFAOYSA-N ON=O.ON=O.ON=O.N Chemical compound ON=O.ON=O.ON=O.N JVMRPSJZNHXORP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N ammonia nh3 Chemical compound N.N XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000006799 invasive growth in response to glucose limitation Effects 0.000 description 1
- 230000001546 nitrifying effect Effects 0.000 description 1
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 1
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
- C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/02—Separating microorganisms from their culture media
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/36—Adaptation or attenuation of cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
- C02F2101/00—Nature of the contaminant
- C02F2101/30—Organic compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
- Y02W10/00—Technologies for wastewater treatment
- Y02W10/10—Biological treatment of water, waste water, or sewage
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Hydrology & Water Resources (AREA)
- Environmental & Geological Engineering (AREA)
- Water Supply & Treatment (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法，本发明能够解决现有好氧反硝化菌在低C/N污水中脱氮效率不高、亚硝酸积累的现象。所述方法以河滩湿地好氧污泥为菌种来源，首先以液体富集培养基进行曝气培养，再进行低C/N驯化培育，最终得到低C/N好氧反硝化菌群；该方法筛选到的菌群能在低C/N状况下耐受较高的硝态氮，具有很好的降解COD和硝态氮活性，可在好氧条件下实现同步硝化‑反硝化；筛选得到的菌群能够适应低C/N比环境，大幅度节省外加碳源，提高污水的脱氮效率，对减少污水脱氮过程的碳排放量具有较大应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及环境微生物及水处理生物脱氮领域，具体涉及一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法。
背景技术
随着人们生活质量的不断提高，我国污水处理厂进水原水呈现有机物浓度愈来愈低、氨氮营养物质浓度愈来愈高的趋势，即污水C/N不断降低的现象，加剧了传统污水处理的难度。我国传统的污水脱氮工艺对低C/N污水的处理不甚理想，往往需要额外投加大量有机物以满足正常微生物反硝化脱氮需求，迫切需要一种适应低C/N污水环境的生物脱氮技术方法。
目前，传统生物脱氮主要包括氨化、硝化和反硝化三个阶段。首先是氨化细菌在有氧或缺氧条件下，将有机氮转化为氨氮，硝化细菌在有氧状态下，将氨氮转化成亚硝酸盐氮，再氧化成硝酸盐氮，最后反硝化细菌在缺氧状态下将亚硝酸盐氮或硝酸盐氮还原为氮气。好氧反硝化作为一种新兴的生物脱氮技术，将反硝化作用与硝化作用在同一好氧反应体系中进行，减少基建投资的同时又将硝化产酸、反硝化产碱进行中和；将反硝化阶段提前，有效利用了污水中的有机碳源，极大程度缓解了传统反硝化过程有机碳源不足的问题，降低了操作难度和运行成本。
现阶段好氧反硝化菌的筛选过程较为繁琐，且现阶段筛选得到的好氧反硝化菌在低C/N污水中的脱氮效率不高，不能直接应用于低C/N污水处理。
发明内容
本发明能够解决现有好氧反硝化菌在低C/N污水中的脱氮效率不高，不能直接应用于低C/N污水处理的问题。因而提供一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法。
一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法具体按以下步骤进行：
一、细菌富集：将河滩湿地底泥接种到富集培养基中进行培养，使所述底泥中的细菌得到富集，得到富集培养基悬浮液；
二、好氧反硝化菌的初筛：①将处于对数期的所述富集培养基悬浮液接种到BTB选择培养基上进行培养，直至所述BTB选择培养基长出菌落；②从长出菌落中挑选形态不同的、颜色呈蓝色的单菌落分别接种到反硝化培养基中进行培养，诱导其进行好氧反硝化脱氮，得到在好氧条件下具有脱氮能力的反硝化菌，即好氧反硝化菌；③将所述好氧反硝化菌采用无菌水稀释100倍，利用平板划线法进行分离纯化，重复挑取单株进行平板划线，获得纯化菌种；④将纯化菌种接种于反硝化培养基中进行培养，测定培养一定时间后培养基中硝酸盐氮的含量，得到脱氮效率高的好氧反硝化菌；
三、好氧反硝化菌的驯化：将脱氮效率高的好氧反硝化菌接种于C/N比为10的反硝化培养基中培养一定时间，得到培养基悬浮液；逐渐降低反硝化培养基的C/N比至4，得到低C/N比反硝化培养基；将培养基悬浮液接种至低C/N比反硝化培养基继续培养，得到驯化后培养基悬浮液；
四、好氧反硝化菌的复筛：将驯化后培养基悬浮液接种至反硝化培养基，通过测定培养前后培养基中硝酸盐浓度筛选得到脱氮效率高的复筛好氧反硝化菌和脱氮效率高的培养基悬浮液；将脱氮效率高的培养基悬浮液接种至BTB选择培养基上进行培养，BTB选择培养基上生长有蓝色菌落，即为高效好氧反硝化菌。
本发明的有益效果：
本发明即处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选及驯化方法，通过选择具有一定环境条件的湿地河滩底泥，配合不同培养时间内合适的培养基，在好氧条件下对筛选得到的微生物进行低C/N驯化与模拟废水的脱氮强化，可以得到在曝气培养条件下大量降解COD和硝酸盐氮活性强的好氧反硝化菌，较快实现了处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选及驯化。相较于传统的好氧反硝化菌的筛选方法，本发明解决了好氧反硝化菌在低C/N污水中的脱氮效率不高，不能直接应用于低C/N污水处理的问题，操作容易，筛选效率较高。
本发明相较于传统的生物脱氮工艺，极大程度地提高了生物脱氮效率及微生物在低C/N环境下的耐受性，具有较大的经济效益和环境效益。本发明选择含有丰富微生物群落的湿地河滩底泥作为菌种来源，通过菌种的好氧富集、好氧初筛、低碳驯化与模拟废水的脱氮强化实验筛选得到了具有较强脱氮效率的好氧反硝化菌。
附图说明
图1为实施例中不同C/N下A2菌总氮去除率曲线图；
图2为实施例中不同温度下A2菌总氮去除率曲线图；
图3为实施例中不同pH下A2菌总氮去除率曲线图。
具体实施方式
具体实施方式一：本实施方式一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法具体按以下步骤进行：
一、细菌富集：将湿地河滩底泥接种到富集培养基中进行培养，使所述底泥中的细菌得到富集，得到富集培养基悬浮液；
二、好氧反硝化菌的初筛：①将处于对数期的所述富集培养基悬浮液接种到BTB选择培养基上进行培养，直至所述BTB选择培养基长出菌落；②从长出菌落中挑选形态不同的、颜色呈蓝色的单菌落分别接种到反硝化培养基中进行培养，诱导其进行好氧反硝化脱氮，得到在好氧条件下具有脱氮能力的反硝化菌，即好氧反硝化菌；③将所述好氧反硝化菌采用无菌水稀释100倍，利用平板划线法进行分离纯化，重复挑取单株进行平板划线，获得纯化菌种；④将纯化菌种接种于反硝化培养基中进行培养，测定培养一定时间后培养基中硝酸盐氮的含量，得到脱氮效率高的好氧反硝化菌；
三、好氧反硝化菌的驯化：将脱氮效率高的好氧反硝化菌接种于C/N比为10的反硝化培养基中培养一定时间，得到培养基悬浮液；逐渐降低反硝化培养基的C/N比至4，得到低C/N比反硝化培养基；将培养基悬浮液接种至低C/N比反硝化培养基继续培养，得到驯化后培养基悬浮液；
四、好氧反硝化菌的复筛：将驯化后培养基悬浮液接种至反硝化培养基，通过测定培养前后培养基中硝酸盐浓度筛选得到脱氮效率高的复筛好氧反硝化菌和脱氮效率高的培养基悬浮液；将脱氮效率高的培养基悬浮液接种至BTB选择培养基上进行培养，BTB选择培养基上生长有蓝色菌落，即为高效好氧反硝化菌。
具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：该方法还包括好氧反硝化菌的保存，保存方式分为两种：
第一种：将高效好氧反硝化菌的菌落接种到富含硝酸盐氮的反硝化培养基中，取处于对数生长期且具有最好脱氮效果的菌落于牛肉膏蛋白胨固体斜面培养基中低温保存备用；
第二种：将高效好氧反硝化菌的菌落接种到富含硝酸盐氮的反硝化培养基中，取对数期的反硝化培养基悬浮液接种到BTB选择培养基上进行培养，直至所述BTB选择培养基表面长出蓝色菌落；然后重复执行步骤三和步骤四，直至获得脱氮效果稳定的菌落保存备用。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤一所述富集培养基配方为：柠檬酸钠5.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾1.0g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钠30.0g/L，pH调节为7.2～7.4。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤二中所述培养的条件均为：摇床转速120rpm，培养温度25～30℃，培养时间72h。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤二所述的BTB选择培养基配方为：柠檬酸钠5.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾1.0g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钠30.0g/L，琼脂20g/L，1％溴麝香草酚蓝水溶液1mL，pH调节为7.2～7.4。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤二所述的反硝化培养基配方为：柠檬酸钠4.0g/L，氯化钠1.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾0.1g/L，磷酸二氢钾0.1g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钙0.1g，微量元素2mL；所述微量元素的配方为：每升该微量元素中含有三氯化铁1.5g，硼酸0.15g，硫酸铜0.03g，碘化钾0.03g，钼酸钠0.06g，氯化锰0.12g，硫酸锌0.12g，氯化钴0.12g。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤三所述逐渐降低反硝化培养基的C/N比至4是将C/N比按照10、8、6、4依次降低。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤四所述的BTB选择培养基配方为：柠檬酸钠5.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾1.0g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钠30.0g/L，琼脂20g/L，1％溴百里酚蓝水溶液1mL，pH调节为7.2～7.4。其它与具体实施方式一相同。
具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式二不同的是：所述富含硝酸盐氮的反硝化培养基的配方为：柠檬酸钠4.0g/L，氯化钠1.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾0.1g/L，磷酸二氢钾0.1g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钙0.1g，微量元素2mL；所述微量元素的配方为：每升该微量元素中含有三氯化铁1.5g，硼酸0.15g，硫酸铜0.03g，碘化钾0.03g，钼酸钠0.06g，氯化锰0.12g，硫酸锌0.12g，氯化钴0.12g。其它与具体实施方式二相同。
具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式二不同的是：所述牛肉膏蛋白胨固体斜面培养基的配方为：牛肉膏5g/L，蛋白胨5g/L，氯化钠10g/L，琼脂20g/L。其它与具体实施方式二相同。
通过以下实施例验证本发明的效果：
一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法具体按以下步骤进行：
一、细菌富集：将湿地河滩底泥接种到富集培养基中进行培养，对污泥样品或池塘水中的微生物进行富集培养，在富集培养基中加入高浓度硝酸盐氮，得到富集培养基悬浮液；富集培养基配方为：柠檬酸钠5.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾1.0g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钠30.0g/L，pH调节为7.2～7.4；
二、好氧反硝化菌的初筛：①将处于对数期的所述富集培养基悬浮液(即悬浮液中细菌处于对数生长期，相应OD600约大于0.8)到BTB选择培养基上进行培养，直至所述BTB选择培养基长出菌落；②从长出菌落中挑选形态不同的、颜色呈蓝色的单菌落分别接种到反硝化培养基中进行培养(培养温度25-30℃，培养时间72h，摇床转速120rpm)，诱导其进行好氧反硝化脱氮，得到在好氧条件下具有脱氮能力的反硝化菌，即好氧反硝化菌；③将所述好氧反硝化菌采用无菌水稀释100倍，利用平板划线法进行分离纯化，重复挑取单株进行平板划线，获得纯化菌种，选择菌落形态清晰的培养基，对不同菌落进行拍照标记，并依次命名为菌A、菌B、菌C等；④将纯化菌种接种于反硝化培养基中进行培养，测定培养一定时间后培养基中硝酸盐氮的含量，得到脱氮效率高的好氧反硝化菌；步骤②中所述BTB选择培养基配方为：柠檬酸钠5.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾1.0g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钠30.0g/L，琼脂20g/L，1％溴麝香草酚蓝水溶液1mL，pH调节为7.2～7.4；反硝化培养基配方为：柠檬酸钠4.0g/L，氯化钠1.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾0.1g/L，磷酸二氢钾0.1g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钙0.1g，微量元素2mL；所述微量元素的配方为：每升该微量元素中含有三氯化铁1.5g，硼酸0.15g，硫酸铜0.03g，碘化钾0.03g，钼酸钠0.06g，氯化锰0.12g，硫酸锌0.12g，氯化钴0.12g；
三、好氧反硝化菌的驯化：将脱氮效率高的好氧反硝化菌接种于C/N比为10的反硝化培养基中培养72h，得到培养基悬浮液；反硝化培养基的C/N比按照10、8、6、4依次降低，得到低C/N比反硝化培养基；将培养基悬浮液接种至低C/N比反硝化培养基继续培养(培养温度25～30℃，培养时间72h，摇床转速120rpm)，得到驯化后培养基悬浮液；培养基以柠檬酸钠为碳源，硝酸钾为氮源，并不断降低培养基的C/N比，10、8、6、4；接种量为1％的溶液，通过柠檬酸钠为碳源构成的培养溶液，可以使得好氧反硝化菌迅速繁殖，较快地适应低碳环境；
四、好氧反硝化菌的复筛：将驯化后培养基悬浮液接种至反硝化培养基，通过测定培养前后培养基中硝酸盐浓度筛选得到脱氮效率高的复筛好氧反硝化菌和脱氮效率高的培养基悬浮液；将脱氮效率高的培养基悬浮液接种至BTB选择培养基上进行培养，BTB选择培养基上生长有蓝色菌落，即为高效好氧反硝化菌；
步骤四中筛选方法为BTB选择培养基与反硝化培养基复筛得到的目的菌种，通过BTB选择培养基初筛与反硝化培养基复筛可以简单有效地筛选出好氧反硝化菌。
本实施例还包括好氧反硝化菌的保存，保存方式分为两种：
第一种：将高效好氧反硝化菌的菌落接种到富含硝酸盐氮的反硝化培养基中，取处于对数生长期且具有最好脱氮效果的菌落于牛肉膏蛋白胨固体斜面培养基中低温保存备用；富含硝酸盐氮的反硝化培养基配方为：柠檬酸钠4.0g/L，氯化钠1.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾0.1g/L，磷酸二氢钾0.1g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钙0.1g，微量元素2mL；所述微量元素的配方为：每升该微量元素中含有三氯化铁1.5g，硼酸0.15g，硫酸铜0.03g，碘化钾0.03g，钼酸钠0.06g，氯化锰0.12g，硫酸锌0.12g，氯化钴0.12g；牛肉膏蛋白胨固体斜面培养基配方为：牛肉膏5g/L，蛋白胨5g/L，氯化钠10g/L，琼脂20g/L；
第二种：将高效好氧反硝化菌的菌落接种到富含硝酸盐氮的反硝化培养基中，取对数期的反硝化培养基悬浮液接种到BTB选择培养基上进行培养，直至所述BTB选择培养基表面长出蓝色菌落；然后重复执行步骤三和步骤四，直至获得脱氮效果稳定的菌落保存备用；富含硝酸盐氮的反硝化培养基配方为：柠檬酸钠4.0g/L，氯化钠1.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾0.1g/L，磷酸二氢钾0.1g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钙0.1g，微量元素2mL；所述微量元素的配方为：每升该微量元素中含有三氯化铁1.5g，硼酸0.15g，硫酸铜0.03g，碘化钾0.03g，钼酸钠0.06g，氯化锰0.12g，硫酸锌0.12g，氯化钴0.12g；BTB选择培养基配方为：柠檬酸钠5.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾1.0g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钠30.0g/L，琼脂20g/L，1％溴麝香草酚蓝水溶液1mL；
将按照上述富集驯化方法筛选驯化出的单菌落接种到扩大培养基中培养，然后将处于对数生长期的扩大培养基悬浮液接种到含有氮的污水中处理，测试脱氮效果。
本实施例提供了一种处理低C/N污水的好氧反硝化聚磷菌的驯化筛选方法，采用本发明的驯化筛选方法，可获得具有良好脱氮效果的菌落。本方法通过对湿地河滩底泥中的微生物进行人工富集，挑选单个菌落在富含硝酸盐氮且以硝酸盐氮为唯一氮源的培养中进行驯化，迫使微生物只能利用硝氮作为氮源供其自身繁殖，使其逐步适应设定的反硝化条件，定向选育对硝酸盐氮具有较高降解能力的微生物。由于培养基中只有硝酸盐氮等必要营养物质可以被利用，使得该菌能够以硝酸盐氮为电子受体，克服了传统反硝化阶段碳源不足的问题，操作容易，筛选效率较高。
本发明驯化出的处理低C/N污水的好氧反硝化菌，主要针对城市低C/N(CN≤4)污水进行脱氮处理，能够大幅度节省外加碳源，提高污水脱氮效率，对减少污水脱氮过程的碳排放量具有较大应用价值。
向上述富含硝酸盐氮的反硝化培养基中加入不同量的柠檬酸钠，控制该培养基的C/N分别为11、9、7、5、3，之后向该培养基中接种通过本发明筛选驯化的菌种A2菌，在温度为25℃，pH为7条件下测定接种前与接种48h后培养基内的总氮含量，计算总氮的去除率，结果如图1所示。由图1可以看出C/N从11降至3时，总氮去除率仅有1.8％的降低率，说明通过本发明筛选驯化后的A2菌可以耐受较低的C/N，从而可以大幅度节省外加碳源且拥有较高的脱氮效率。
向上述富含硝酸盐氮的反硝化培养基中接入本发明筛选驯化出的A2菌，放置于不同温度的生化培养箱中，设定温度分别为5℃、10℃、15℃、20℃、25℃。在C/N为3，pH为7条件下测定接种前与接种48h后培养基内的总氮含量，计算总氮的去除率，结果如图2所示。由图2可以看出温度对总氮的去除率影响很大，在低温下去除率很低，仅有40％-50％左右，但当水温升至20℃以上时，去除率可达到80％左右，而除东北寒冷地区的冬季时期以外，待处理污水、尤其是生活污水，水温度均可维持在20℃-30℃，说明A2菌在常规水温的污水脱氮过程中均适用。
向上述富含硝酸盐氮的反硝化培养基中滴加盐酸溶液或氢氧化钠溶液，控制该培养基的pH值分别为5、6、7、8、9，之后向该培养基中接种本发明筛选驯化出的A2菌，在温度为25℃，C/N为3的条件下测定接种前与接种48h后培养基内的总氮含量，计算总氮的去除率，结果如图3所示。由图3可以看出在pH＝5偏酸性的生长环境下，A2菌的总氮去除率较低，仅有27％，但在中性和偏碱性的生长环境下总氮去除率可以达到85％左右，这表明A2菌适用于普遍存在的中性和偏碱性污水脱氮。
Claims (10)
1.一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法，其特征在于处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法具体按以下步骤进行：
一、细菌富集：将河滩湿地底泥接种到富集培养基中进行培养，使所述底泥中的细菌得到富集，得到富集培养基悬浮液；
二、好氧反硝化菌的初筛：①将处于对数期的所述富集培养基悬浮液接种到BTB选择培养基上进行培养，直至所述BTB选择培养基长出菌落；②从长出菌落中挑选形态不同的、颜色呈蓝色的单菌落分别接种到反硝化培养基中进行培养，诱导其进行好氧反硝化脱氮，得到在好氧条件下具有脱氮能力的反硝化菌，即好氧反硝化菌；③将所述好氧反硝化菌采用无菌水稀释100倍，利用平板划线法进行分离纯化，重复挑取单株进行平板划线，获得纯化菌种；④将纯化菌种接种于反硝化培养基中进行培养，测定培养一定时间后培养基中硝酸盐氮的含量，得到脱氮效率高的好氧反硝化菌；
三、好氧反硝化菌的驯化：将脱氮效率高的好氧反硝化菌接种于C/N比为10的反硝化培养基中培养一定时间，得到培养基悬浮液；逐渐降低反硝化培养基的C/N比至4，得到低C/N比反硝化培养基；将培养基悬浮液接种至低C/N比反硝化培养基继续培养，得到驯化后培养基悬浮液；
四、好氧反硝化菌的复筛：将驯化后培养基悬浮液接种至反硝化培养基，通过测定培养前后培养基中硝酸盐浓度筛选得到脱氮效率高的复筛好氧反硝化菌和脱氮效率高的培养基悬浮液；将脱氮效率高的培养基悬浮液接种至BTB选择培养基上进行培养，BTB选择培养基上生长有蓝色菌落，即为高效好氧反硝化菌。
2.根据权利要求1所述的一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法，其特征在于该方法还包括好氧反硝化菌的保存，保存方式分为两种：
第一种：将高效好氧反硝化菌的菌落接种到富含硝酸盐氮的反硝化培养基中，取处于对数生长期且具有良好脱氮效果的菌落于牛肉膏蛋白胨固体斜面培养基中低温保存备用；
第二种：将高效好氧反硝化菌的菌落接种到富含硝酸盐氮的反硝化培养基中，取对数期的反硝化培养基悬浮液接种到BTB选择培养基上进行培养，直至所述BTB选择培养基表面长出蓝色菌落；然后重复执行步骤三和步骤四，直至获得脱氮效果稳定的菌落保存备用。
3.根据权利要求1所述的一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法，其特征在于步骤一所述富集培养基配方为：柠檬酸钠5.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾1.0g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钠30.0g/L，pH调节为7.2～7.4。
4.根据权利要求1所述的一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法，其特征在于步骤二中所述培养的条件均为：摇床转速120rpm，培养温度25～30℃，培养时间72h。
5.根据权利要求1所述的一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法，其特征在于步骤二所述的BTB选择培养基配方为：柠檬酸钠5.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾1.0g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钠30.0g/L，琼脂20g/L，1％溴麝香草酚蓝水溶液1mL，pH调节为7.2～7.4。
6.根据权利要求1所述的一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法，其特征在于步骤二所述的反硝化培养基配方为：柠檬酸钠4.0g/L，氯化钠1.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾0.1g/L，磷酸二氢钾0.1g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钙0.1g，微量元素2mL；所述微量元素的配方为：每升该微量元素中含有三氯化铁1.5g，硼酸0.15g，硫酸铜0.03g，碘化钾0.03g，钼酸钠0.06g，氯化锰0.12g，硫酸锌0.12g，氯化钴0.12g。
7.根据权利要求1所述的一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法，其特征在于步骤三所述逐渐降低反硝化培养基的C/N比至4是将C/N比按照10、8、6、4依次降低。
8.根据权利要求1所述的一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法，其特征在于步骤四所述的BTB选择培养基配方为：柠檬酸钠5.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾1.0g/L，磷酸二氢钾1.0g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钠30.0g/L，琼脂20g/L，1％溴百里酚蓝水溶液1mL，pH调节为7.2～7.4。
9.根据权利要求2所述的一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法，其特征在于所述富含硝酸盐氮的反硝化培养基的配方为：柠檬酸钠4.0g/L，氯化钠1.0g/L，硝酸钾2.0g/L，磷酸氢二钾0.1g/L，磷酸二氢钾0.1g/L，硫酸镁0.2g/L，氯化钙0.1g，微量元素2mL；所述微量元素的配方为：每升该微量元素中含有三氯化铁1.5g，硼酸0.15g，硫酸铜0.03g，碘化钾0.03g，钼酸钠0.06g，氯化锰0.12g，硫酸锌0.12g，氯化钴0.12g。
10.根据权利要求2所述的一种处理低C/N污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法，其特征在于所述牛肉膏蛋白胨固体斜面培养基的配方为：牛肉膏5g/L，蛋白胨5g/L，氯化钠10g/L，琼脂20g/L。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311440272.9A CN117511782A (zh) | 2023-11-01 | 2023-11-01 | 一种处理低c/n污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311440272.9A CN117511782A (zh) | 2023-11-01 | 2023-11-01 | 一种处理低c/n污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117511782A true CN117511782A (zh) | 2024-02-06 |
Family
ID=89740995
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311440272.9A Pending CN117511782A (zh) | 2023-11-01 | 2023-11-01 | 一种处理低c/n污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117511782A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117865333A (zh) * | 2024-03-06 | 2024-04-12 | 中国海洋大学 | 基于强化种间互营过程提升纤维素驱动反硝化效能的方法 |
-
2023
- 2023-11-01 CN CN202311440272.9A patent/CN117511782A/zh active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117865333A (zh) * | 2024-03-06 | 2024-04-12 | 中国海洋大学 | 基于强化种间互营过程提升纤维素驱动反硝化效能的方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN117511782A (zh) | 一种处理低c/n污水的好氧反硝化菌的筛选驯化方法 | |
| CN106434469B (zh) | 一种耐低温硝化菌剂及其制备方法和应用 | |
| CN114395505B (zh) | 一种低温反硝化菌及其应用 | |
| CN101130786A (zh) | 一种培养海洋光合细菌光-暗发酵耦联制氢的方法 | |
| CN109081447B (zh) | 一种小球藻-不动杆菌-假单胞菌联合去除养殖废水氮、磷的方法 | |
| JP7055304B2 (ja) | ラクトバチルス・パラファラギニス株ｇｂｗ－ｈｂ１９０３およびその応用 | |
| CN116426443B (zh) | 具有群体感应行为的菌株及其在促进厌氧氨氧化脱氮上的应用 | |
| CN109762748B (zh) | 一种去除氨氮的菌剂制备方法及其应用 | |
| CN112358041B (zh) | 一种同步反硝化脱氮和产甲烷除cod的颗粒污泥培养方法 | |
| CN111269861B (zh) | 一株具有降解苯胺和脱氮能力的雷氏普罗维登斯菌及其应用 | |
| CN115287209A (zh) | 一种复合微生物菌剂及其在处理猪尿废水中的应用 | |
| CN114605030A (zh) | 一种碳汇释氧型养殖污水资源化利用的方法 | |
| CN111763645A (zh) | 一种硝化-反硝化细菌复合微生态制剂的联合发酵方法 | |
| CN110697883B (zh) | 一种强化膜生物反应器脱氮功能并减缓膜污染的方法 | |
| CN109110927B (zh) | 一种小球藻-不动杆菌联合去除养殖废水氮、磷的方法 | |
| CN107022494B (zh) | 一株松色二胞菌BN-h1以及生物菌降解剂及其制备方法和应用 | |
| CN111547847A (zh) | 一种复合微生物强化a/o工艺去除污水总氮的装置及方法 | |
| KR101889468B1 (ko) | 고효율의 질소 및 인 제거를 위한 친환경 미생물 슬러지를 이용한 연속 회분식 활성 슬러지법에 의한 오염 해수 처리 방법 | |
| CN112746031B (zh) | 一种硝化细菌的混合培养方法 | |
| CN117384791B (zh) | 一株促进厌氧铁氨氧化过程的假单胞菌及其在处理污水中的应用 | |
| CN114292782B (zh) | 一种加强兼氧fmbr处理农药废水工艺的菌 | |
| CN114105294B (zh) | 一种高盐高氨氮有机废水生物处理系统的构建及使用方法 | |
| CN114538695B (zh) | 一种利用微生物处理变性淀粉工业废水的方法 | |
| CN117886448B (zh) | 一种减少聚磷菌与聚糖菌竞争强化生物除磷的方法 | |
| CN116179423A (zh) | 人工微生物多细胞高氨氮废水处理菌群、促进剂及其构建方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |