CN117466776A - 对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物及制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明实施例提供了一种对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物及制备方法和应用，属于微生物药物领域。本发明提供的抑制剂结构通式为：其组成和结构均已表征且确认。生物活性评价揭示，本发明所提供的抗菌药物对SβLs和MβLs及其介导之耐药细菌均有良好的抑制性能，对酶的半抑制浓度达微摩尔级，使得抗生素灭杀耐药细菌的活力提高2‑16倍，且细胞毒性低。

Description

对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌 药物及制备方法和应用
技术领域
本发明涉及微生物药物技术领域，特别涉及酶抑制剂及其制备方法和应用领域。
背景技术
β-内酰胺类抗生素是指化学结构中具有β-内酰胺环的一大类抗生素，包括临床最常用的青霉素类(Penicillins)、头孢类(Cephalosporins)、碳青霉烯类(Carbapenems)和单环β-内酰胺类(Monobactams)等。此类抗生素具有杀菌活性强、毒性低、适应症广及临床疗效好的优点，被广泛用于治疗细菌引起的感染性疾病。然而，这些抗生素在临床、农业和畜牧业方面的过度使用，导致大量产β-内酰胺酶(β-Lactamases,βLs)的耐药细菌产生，这些耐药细菌阻抗几乎所有的β-内酰胺类抗生素。
这些耐药细菌通过生产β-内酰胺酶从而获得耐药性或多重(泛)耐药性。β-内酰胺酶数目众多，通常被分为A、B、C、D四个类群。A、C和D类β-内酰胺酶称为丝氨酸β-内酰胺酶(Serine-β-lactamases,SβLs)，B类酶称为金属β-内酰胺酶(Metallo-β-lactamases,MβLs)。
近年来，临床上分离到产MβLs和/或SβLs的耐药菌种明显增加，如鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、超广谱β-内酰胺酶(ESBL)大肠杆菌等，其耐药性越来越强，以至发展到携带NDM-1的超级细菌，严重加剧了抗生素耐药危机。
对于SβLs介导的耐药细菌感染，目前临床上已有如克拉维酸(Clavulanic acid)、舒巴坦(Sulbactam)及他唑巴坦(Tazobactam)等酶抑制剂与抗生素联用来治疗。例如，阿维巴坦，第一个FDA批准的SβLs抑制剂(2015)，对A、C和D类β-内酰胺酶具有抑制作用，而其衍生物瑞来巴坦(Relebactam)及纳库巴坦(Nacubactam)，皆对A和C类酶有抑制活性。但是，这些已经公开的SβLs抑制剂则对MβLs介导的超级耐药细菌无效，而MβLs介导的耐药细菌(也称为超级细菌)能水解几乎所有的β-内酰胺类抗生素致使其失效。
不仅如此，迄今文献所报道的所有SβLs抑制剂，均对MβLs没有活性，即对MβLs介导的超级耐药细菌无效；而MβLs抑制剂则对SβLs不敏感，即对SβLs介导的耐药细菌也无效。显然，一种对MβLs和SβLs有双重抑制性能的，即对多(重)耐药细菌具有广谱抑制效能的酶抑制剂/药物，极具临床应用价值！但迄今却为空白。
发明内容
本发明实施例提供了一种对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物及制备方法和应用，通过生物活性评价数据包括动物实验证实，本发明酶抑制剂对SβLs和MβLs均有良好的抑制性能，其对酶的半抑制浓度达微摩尔级，使得抗生素灭杀耐药细菌的活力提高达16倍，且细胞毒性低。一方面，本发明实施例提供了一种对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物，所述抑制剂结构通式为：
其中，R1为苯基、苄基、具有1-5个碳原子的烷基、环戊烷基、环己烷基、萘基、硝基苄基、卤代苄基、被苯基取代的具有1-5个碳原子的烷基或者被环己烷基取代的具有1-5个碳原子的烷基；
R2为苯基、具有1-5个碳原子的烷基、环戊烷基、环己烷基、吲哚基、吡啶基、被苯基取代的具有1-5个碳原子的烷基、被环己烷基取代的具有1-5个碳原子的烷基或者被环戊烷基取代的具有1-5个碳原子的烷基。
具体的，本发明所述R1为下列任意一种：
具体的，本发明所述R2为下列任意一种：
更加具体的，本发明所述抑制剂为下列任意一种或者多种组合：
第二方面，本发明提供一种对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物的制备方法，包括如下步骤：
S1：将R1对应的酸溶于无水四氢呋喃中，加入N,N′-羰基二咪唑(CDI)室温搅拌1h后再加入盐酸羟胺搅拌过夜。
S2：反应完全后，将S1反应获得的溶液用5％KHSO4溶液洗至弱碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，用蒸馏水和饱和食盐水依次洗涤，无水Na2SO4干燥，滤除干燥剂，减压浓缩得相应的酰胺类物质A。
S3：将所述酰胺类物质A溶于无水四氢呋喃，低温下加入吡啶，搅拌后缓慢滴加R2对应的氯甲酸酯，至反应完全后，洗涤萃取合并有机相，再次洗涤，干燥纯化得目标产物。
更进一步的，本发明所述步骤S3是在0℃下加入吡啶，搅拌10-30min后缓慢滴加R2对应的氯甲酸酯，至反应完全后，反应溶液用1M HCl溶液洗涤，乙酸乙酯萃取，合并有机相，用蒸馏水和饱和食盐水依次洗涤，无水Na2SO4干燥，滤除干燥剂，减压浓缩后经硅胶柱层析纯化。
第三方面，本发明提供一种抗菌药物在MβLs和/或SβLs介导的耐药菌抑制药物中的应用，所述抗菌药物如上述结构所示。
第四方面，本发明提供了对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物在非治疗为目的的耐药菌抑制中的应用。
进一步的，本发明提供了对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物在SβLs和MβLs介导的耐药菌感染为治疗目的的抗菌药物中的应用。
第五个方面，本发明提供了一种药物，药物中含有本发明上述抗菌药物和β-内酰胺类抗生素。
本发明提供的对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物及制备方法和应用，具有以下优点：
本发明提供的对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物，其组成和结构均已表征且确认。生物活性评价揭示，这些抗菌药物对SβLs和MβLs均有良好的抑制性能。
当使用美罗培南或头孢唑啉作为底物，20μM的本发明抑制剂对MβLs NDM-1、IMP-1和SβLs OXA-48、KPC-2的抑制百分比高达90％以上，而其半抑制浓度(IC50值)最低分别达0.64μM和0.57μM。
本发明的细胞毒性评价表明，本发明抑制剂在高达200μM的浓度时，超过80％的测试细胞仍保持活力，表明这些抑制剂的细胞毒性低。
附图说明
为更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。显而易见，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，便可根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例2提供的抗菌药物1f的核磁共振氢谱；
图2为本发明实施例2提供的抗菌药物1f的核磁共振碳谱；
图3为本发明实施例13提供的抗菌药物3a的核磁共振氢谱；
图4为本发明实施例13提供的抗菌药物3a的核磁共振氢谱；
图5为本发明实施例19提供的抑制剂在分别使用50μM美罗培南和头孢唑啉作为底物时MβLs NDM-1,IMP-1,ImiS和L1的抑制百分比分析图；
图6为本发明实施例19提供的抑制剂在使用50μM头孢唑啉作为底物时SβLs KPC-2和OXA-48的抑制百分比分析图；
图7为本发明实施例21提供的体外抑菌活性评价图；
图8为本发明实施例22提供的动物实验测定的肝脏(A)细菌负荷图；
图9为本发明实施例22提供的动物实验测定的脾脏(B)细菌负荷图；
图10为本发明实施例22提供的动物实验中测定的肝脏(A)细菌负荷图；
图11为本发明实施例22提供的动物实验中测定的脾脏(B)细菌负荷图；
图12为本发明实施例23动物实验中不同浓度抑制剂下细胞存活率数据图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供了一种对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物，所述抑制剂结构通式为：
其中，R1为下列任意一种：
其中，R2为下列任意一种：
本发明实施例为了验证抑制剂抑制丝氨酸β-内酰胺酶(Serine-β-lactamases,SβLs)和金属β-内酰胺酶(Metallo-β-lactamases,MβLs)的抑制百分率、对SβLs和/或MβLs介导的耐药细菌的抑菌效果、动物实验中对活体生物内对耐药菌的抑制效果进行了评价，分别合成了如下结构式的抗菌药物1a、1b、1c、1d、1e、1f、1g、2a、2b、2c、2d、2e、3a、3b、3c、4a、4b、4c，通过这些物质的实验能够归纳出符合上述R1和R2条件的物质都具有类似的功能和效果。1a、1b、1c、1d、1e、1f、1g、2a、2b、2c、2d、2e、3a、3b、3c、4a、4b、4c的结构式分别如下：
实施例1：对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物1a的合成
将乙酸(3mmol)溶于15mL无水四氢呋喃中，加入CDI(4.5mmol)室温搅拌1.5h后再加入盐酸羟胺(4.5mmol)搅拌过夜。TLC监测反应完全后，将反应溶液用5％KHSO4溶液洗至弱碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，用蒸馏水和饱和食盐水依次洗涤，无水Na2SO4干燥，滤除干燥剂，减压浓缩得白色N-羟基乙酰胺。所得N-羟基乙酰胺(2mmol)溶于5mL无水四氢呋喃，0℃下加入吡啶(3mmol)，搅拌30min后缓慢滴加氯甲酸戊酯(3mmol)。TLC监测反应至完全后，反应溶液用1M HCl溶液洗涤，乙酸乙酯萃取，合并有机相，用蒸馏水和饱和食盐水依次洗涤，无水Na2SO4干燥，滤除干燥剂，减压浓缩后经硅胶柱层析纯化得对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物1a。
实施例2：对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物1f的合成
将苯丁酸(3mmol)溶于10mL无水四氢呋喃中，加入CDI(4.5mmol)室温搅拌1h后再加入盐酸羟胺(4.5mmol)搅拌过夜。TLC监测反应完全后，将反应溶液用5％KHSO4溶液洗至弱碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，用蒸馏水和饱和食盐水依次洗涤，无水Na2SO4干燥，滤除干燥剂，减压浓缩得白色N-羟基苯丁酰胺。所得N-羟基苯丁酰胺(2mmol)溶于5mL无水四氢呋喃，0℃下加入吡啶(3mmol)，搅拌10min后缓慢滴加氯甲酸苄酯(3mmol)，产生大量白色沉淀。TLC监测反应至完全后，反应溶液用1M HCl溶液洗涤，乙酸乙酯萃取，合并有机相，用蒸馏水和饱和食盐水依次洗涤，无水Na2SO4干燥，滤除干燥剂，减压浓缩后经硅胶柱层析纯化得对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物1f。
抗菌药物1f为白色固体，氢谱和化学位移、碳谱、及质谱数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.01(s,1H)，7.45–7.30(m,5H)，7.28(d,J＝7.2Hz,2H)，7.20(t,J＝7.2Hz,4H)，5.27(s,2H)，2.59(t,J＝7.6Hz,2H)，2.13(t,J＝7.3Hz,2H)，1.83(p,J＝8.2,7.5Hz,2H)。13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:170.49，154.59，141.96，135.26，129.24，129.11，128.95，128.87，126.39，71.04，34.80，31.73，27.01。HRMS(ESI)m/z:314.1312(Calcd.for[M+Na]+314.1386)，具体如说明书附图1和附图2所示。
实施例3-18：对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物的合成
与实施例1和实施例2不同的是，实施例3-18分别采用了如下物质进行合成：
实施例3-18的合成中溶剂无水四氢呋喃的量、加入CDI后的搅拌时间和加入吡啶的量及加入后的搅拌时间根据反应物质的不同略有调整，但是根据实验反馈，调整的幅度都很小，均能够根据本发明实施例1和2给出的数据不经过创造性劳动获取最佳值。
本发明实施例制备的抗菌药物结构表征数据举例：抑制剂3a为淡黄色固体，氢谱和化学位移、碳谱、及质谱数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:11.92(s,1H)，7.37(q,J＝3.9,3.4Hz,16H)，5.22(s,2H)，2.10–2.04(m,2H)，1.61(t,J＝10.5Hz,7H)，1.37(q,J＝7.1Hz,2H)，1.20–1.06(m,3H)，0.81(t,J＝11.3Hz,2H)。13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ:170.92，168.41，135.28，129.23，129.11，128.91，70.99，36.96，32.97，32.60，29.90，26.59，26.24。HRMS(ESI)m/z:302.1315(Calcd.for[M+Na]+302.1362)，具体如说明书附图3和附图4所示。
实施例19：本发明抑制剂对β-内酰胺酶的抑制活性评价
本实施例通过测定抑制百分比实现抑制剂对β-内酰胺酶的抑制活性评价，抑制百分比越高，说明在该抑制剂作用下，β-内酰胺酶(MβLs和SβLs)水解抗生素的速率越低，即抑制效果越好。
抑制百分比测定方法：在安捷伦UV8453紫外光谱仪上测定HYD23对β-内酰胺酶(MβLs和SβLs)的稳态抑制实验。选取美罗培南(MER)作为β-内酰胺酶的底物在波长300nm处监测美罗培南的水解。抑制剂浓度为20μM，在25℃下监测水解速率，每组实验平行三次取平均值。计算抑制剂对β-内酰胺酶的抑制百分比。抑制百分比的计算公式：抑制百分比＝(1-Vi/V0)×100％(V0是指在无抑制剂存在下，酶水解抗生素的速率，Vi指在抑制剂存在下，酶水解抗生素的速率。)
本发明抑制剂对SβLs和MβLs均有良好的抑制性能。使用美罗培南或头孢唑啉作为底物，20μM的本发明抑制剂对MβLs NDM-1,IMP-1和SβLs OXA-48KPC-2的抑制百分比高达90％以上(如说明书附图5和附图6所示)，附图中NDM-1、IMP-1、L1和ImiS是MβLs家族中具有代表性的抗生素耐药靶蛋白，SβLs OXA-48、KPC-2是SβLs家族中具有代表性的抗生素耐药靶蛋白。
实施例20：本发明抑制剂对β-内酰胺酶的抑制活性评价
对β-内酰胺酶抑制活性的评价通过测定抗菌药物的半抑制浓度(IC50值)来实现。IC50是指酶和底物的浓度确定时，使酶促反应速率降低50％的抑制剂浓度。将梯度浓度的抑制剂与酶预混相同的时间，利用UV-Vis光谱仪测定酶水解底物的速率，并计算抑制百分比。对不同抑制剂的浓度与相对应的抑制百分比通过GraphPad Prism软件拟合得出IC50值。
IC50值的具体测定步骤如下：
选用MβLs(NDM-1和IMP-1)和SβLs(OXA-48和KPC-2)进行活性评价。用DMSO溶解本发明抑制剂(DMSO＜5％))，并使用缓冲液BufferA(KPC-2:pH＝8.5；NDM-1:pH 8.0；OXA-48、IMP-1:pH＝7.5)(稀释至终浓度为0～50μM。用BufferA将美罗培南溶解并稀释至50μM。将梯度浓度的抑制剂与酶预混7h后通过Agilent UV 8453分光光度计测定300nm波长处酶水解抗生素的速率。未加入抑制剂的酶水解底物速率及加入5％DMSO的酶水解底物速率分别作为对照。每组实验平行三次，取其平均值。以抑制剂浓度为20μM时，测定抑制百分比。将不同浓度下测得的抑制百分比与抑制剂浓度进行非线性拟合可得IC50值。具体如表1所示。
表1：本发明抑制剂对MβLs NDM-1和IMP-1以及SβLs KPC-2和OXA-48的半抑制浓度(IC50，μM)
注：因在缓冲液中的溶解度较小，故取本发明抑制剂的测试浓度为0～50μM。
表1数据显示，本发明抑制剂对SβLs和MβLs均有良好的抑制性能，尤其是抗菌药物1f对测试的MβLs和SβLs的半抑制浓度(IC50值)分别低达0.64和0.57μM。
实施例21：本发明抑制剂的体外抑菌活性评价
本实施例按照美国临床与实验室标准协会(CLSI)标准，采用肉汤微量稀释法测定美罗培南单用、本发明抑制剂单用、以及美罗培南与本发明抑制剂联用对耐药菌的最低抑菌浓度(MIC值)来评价其抑菌能力。在5mL的MH液体培养基中分别接种携带pET26b-NDM-1,pET26b-IMP-1,pET26b-KPC-2或pET26b-OXA-48。将菌液稀释至1×105CFU/mL后，以MH培养基中培养至OD600为0.5的菌株为接种量。使用DMSO溶解本发明抑制剂，并将其稀释至256μg/mL(DMSO＜5％)。配制0.25～1024μg/mL的美罗培南(MER)(按2倍稀释)和抑制剂储存溶液。测定本发明抑制剂协同MER的抑菌能力，将100μL菌液、50μL抑制剂(64μg/mL)和50μL抗生素(0.0625～256μg/mL)溶液混合，37℃孵育16～24小时。每组实验平行三次。具体数据见表2(表中A部分是在本发明实施抑制剂1-18(64μg/mL)协同下，美罗培南对大肠杆菌-MβL(E.coli-NDM-1、E.coli-IMP-1)和大肠杆菌-SβL(E.coli-KPC-2、E.coli-OXA-48)的MIC值；表中B部分是在本发明实施例2的抗菌药物1f(64μg/mL)协同下，美罗培南对大肠杆菌(E.coli)、临床上分离的耐药菌(EC04,EC06,EC07,EC08,EC10,EC24)和肺炎克雷伯菌(pneumonia-KPC-NDM)的MIC值。)
表2：本发明抑制剂协同下美罗培南的最小抑菌浓度(MIC)数据。
从上述数据可看出，在本发明抑制剂的协同作用下，抗生素美罗培南对耐药细菌E.coli-NDM-1、E.coli-IMP-1、E.coli-KPC-2、E.coli-OXA-48及EC10的灭杀能力大幅提升。此外，通过说明附图7也可直接观察到本发明抑制剂的协同抑菌效能。其中，联用剂量为64μg/mL的实施例2的抗菌药物1f，使得美罗培南治疗E.coli-NDM-1的活力提高了8倍。联用64μg/mL的本发明实施例16的抗菌药物4a，使得美罗培南治疗E.coli-OXA-48的活力提高了16倍。
按相同方法，通过临床上分离的耐药菌(EC04,EC06,EC07,EC08,EC10,EC24)、产MβLs及产SβLs的耐药菌、以及非耐药菌对实施例2的抗菌药物1f进行了评价，测定了在其协同下抗生素的最低抑制浓度(MIC值)(见表2的B部分)。结果表明，实施例2的抗菌药物1f显著提高了抗生素的抗菌活性，使得美罗培南对EC04,EC06,EC08,EC10,EC24的灭杀活性分别提高了2-4倍(即MIC值降低了2-4倍)。
实施例22：本发明抑制剂在动物体内的抑菌活性评价
本实施例通过动物实验，探究了本发明抑制剂是否能够在小鼠体内发挥协同抗菌作用。具体的，本实施例通过腹腔注射耐药菌E.Coli-NDM-1和E.Coli-OXA-48进行感染，建立昆明小鼠的全身模型。小鼠采用无菌水和标准饲料定量饲喂。将小鼠随机分为4组(6雄+6雌)。将耐药菌E.Coli-NDM-1和E.Coli-OXA-48分别在MH中培养至OD600为0.8，取其100μL注入小鼠腹腔。感染3h后，将浓度为20mg/kg的(MER+实施例2的抗菌药物1f)、实施例2的抗菌药物1f、MER经腹腔注射入感染小鼠体内。相同条件下饲养并解剖。取出肝脏和脾脏，经无菌PBS洗涤、匀浆并连续稀释后，取10μL浆液涂布于LB琼脂板上，37℃培养12h后对菌落进行计数。以上动物实验已获得西安交通大学动物医学委员会批准，所有步骤均符合《西安交通大学实验动物护理和使用指南》。
如说明书附图8-11所示，动物(小鼠)实验表明，本发明抑制剂可协同美罗培南极有效地治疗小鼠感染的E.coli-NDM-1和E.coli-OXA-48。给药量为20mg/kg的实施例2的抗菌药物1f协同10mg/kg的美罗培南，使得小鼠脾脏和肝脏感染的E.coli-NDM-1的定殖量大幅降低，一周后仍无细菌繁殖(见说明书附图8和附图9)；同给药剂量的实施例16的4a抗菌药物协同美罗培南，使得小鼠的肝和脾组织的E.coli-OXA-48几乎全部被杀死(见说明书附图10和附图11)。
本发明抑制剂治疗E.coli-NDM-1和E.coli-OXA-48的效能随给药浓度和用药时间的不同而呈依赖性变化。显然，本发明抑制剂对小鼠感染的E.coli-NDM-1和E.coli-OXA-48有很好的治疗效果。这预示：本发明抑制剂具有成为临床治疗SβLs或/和MβLs介导之耐药细菌的感染的潜在药物的可能性。
实施例23：本发明抑制剂对细胞的毒性评价
本实施例通过小鼠成纤维细胞(L929)检测实施例2的1f抗菌药物的细胞毒性。将密度为1.0×10-4的L929细胞移值入96孔板中并培养24h。然后将梯度浓度(25、50、100、200、400、600和800μM)的实施例2的1f抗菌药物溶液分别加入并培养48h。在96孔板中注入99μL完全培养基和1μL仅含细胞的DMSO混合液进行细胞活力的评估。孵育4h，大幅振摇使细胞分散。去除培养基后，每孔加入100μL CCK8和100μL新鲜培养基。Microplate Reader检测成型产物在490nm波长处的吸光度值并进行分析。每组实验平行三份，结果如说明书附图12所示。
本实施例的细胞毒性评价表明，本发明抑制剂在高达200μM的浓度时，超过80％的测试细胞仍保持活力，说明本发明抑制剂的细胞毒性低。因此，本发明的抑制剂可应用于抗耐药菌药物中。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的构思和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (10)

1.一种对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物，其特征在于，所述抑制剂结构通式为：
其中，R1为苯基、具有1-5个碳原子的烷基、环戊烷基、环己烷基、萘基、硝基苯基、硝基苄基、卤代苄基、被苯基取代的具有1-5个碳原子的烷基或者被环己烷基取代的具有1-5个碳原子的烷基；
R2为苯基、具有1-5个碳原子的烷基、环戊烷基、环己烷基、吲哚基、吡啶基、被苯基取代的具有1-5个碳原子的烷基、被环己烷基取代的具有1-5个碳原子的烷基或者被环戊烷基取代的具有1-5个碳原子的烷基。
2.根据权利要求1所述一种对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物，其特征在于，所述R1为下列任意一种：
3.根据权利要求1所述一种对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物，其特征在于，所述R2为下列任意一种：
4.根据权利要求1所述一种对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物，其特征在于，所述抑制剂为下列任意一种或者多种组合：
5.如权利要求1-4任一项所述对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
S1：将R1对应的酸溶于无水四氢呋喃中，加入N,N′-羰基二咪唑室温搅拌后再加入盐酸羟胺搅拌过夜；
S2：反应完全后，将S1反应获得的溶液用5％KHSO4溶液洗至弱碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，用蒸馏水和饱和食盐水依次洗涤，无水Na2SO4干燥，滤除干燥剂，减压浓缩得相应的酰胺类物质A；
S3：将所述酰胺类物质A溶于无水四氢呋喃，低温下加入吡啶，搅拌后缓慢滴加R2对应的氯甲酸酯，至反应完全后，洗涤萃取合并有机相，再次洗涤，干燥纯化得目标产物。
6.根据权利要求5所述一种对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物的制备方法，其特征在于，所述步骤S3是在0℃下加入吡啶，搅拌10-30min后缓慢滴加R2对应的氯甲酸酯，至反应完全后，反应溶液用1MHCl溶液洗涤，乙酸乙酯萃取，合并有机相，用蒸馏水和饱和食盐水依次洗涤，无水Na2SO4干燥，滤除干燥剂，减压浓缩后经硅胶柱层析纯化。
7.权利要求1-4任一项所述对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物在非治疗为目的的耐药菌抑制中的应用。
8.权利要求1-4任一项所述对MβLs和SβLs及其介导之耐药细菌具有双重抑制性能的抗菌药物在对SβLs和/或MβLs介导的耐药菌感染为治疗目的的抗菌药物中的应用。
9.一种抗菌药物在对MβLs和/或SβLs介导的耐药菌的抑制药物中的应用，其特征在于，所述抗菌药物结构通式为：其中，R1为苯基、苄基、具有1-5个碳原子的烷基、环戊烷基、环己烷基、萘基、硝基苄基、卤代苄基、被苯基取代的具有1-5个碳原子的烷基或者被环己烷基取代的具有1-5个碳原子的烷基；
R2为苯基、具有1-5个碳原子的烷基、环戊烷基、环己烷基、吲哚基、吡啶基、被苯基取代的具有1-5个碳原子的烷基、被环己烷基取代的具有1-5个碳原子的烷基或者被环戊烷基取代的具有1-5个碳原子的烷基。
10.一种药物，其特征在于，所述药物含有权利要求1-4任一项所述的抗菌药物和β-内酰胺类抗生素。
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