CN117402919A - 一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸的方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及微生物发酵培养技术领域，具体公开了一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸的方法与应用。本发明的生产天冬氨酸族氨基酸的方法，发酵培养基中含有的VB1，发酵时流加柠檬酸或其盐，其中，发酵培养基中初始含有的VB1与流加柠檬酸或其盐后的培养基中含有的柠檬酸的质量比为(3×10‑6～10×10‑6)：1；发酵培养基中初始VB1的浓度为40‑80μg/L，流加柠檬酸或其盐后的培养基中含有的柠檬酸的浓度为8‑12g/L。本发明通过调控三羧酸循环，平衡菌体生长和产物代谢之间的关系，获得了一种转化率高的发酵生产天冬氨酸族氨基酸的新方法。

Description

一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸的方法与应用
技术领域
本发明涉及微生物发酵培养技术领域，具体地说，涉及一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸的方法与应用。
背景技术
天冬氨酸族氨基酸包括天冬氨酸、天冬酰胺、赖氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸，是由草酰乙酸接受由谷氨酸转来的氨基形成。其发酵的所需的碳源主要为葡萄糖，通过包括糖酵解途径，磷酸戊糖途径，三羧酸循环和乙醛酸循环。代谢流路的反应由酶来优化流量分布，对于氨基酸产量的提高具有很大的影响。
现有技术中已公开了通过流加较多的柠檬酸钠能够对柠檬酸脱氢酶产生一定的抑制作用，适当削弱三羧酸循环，能够减少副产物的生成及能量的损失，从而对于提高苏氨酸产率有积极意义。
但削弱三羧酸循环也会影响菌体生长，而发酵结果的高效实现，不仅依赖于流量分布的优化，也同样依赖于菌株生长性能的匹配，否则最终整体发酵结果也无法十分理想。因此有必要对如何进一步提升发酵生产天冬氨酸族氨基酸的性能进行继续研究。
发明内容
为了克服现有技术的缺点，本发明提供一种可提升天冬氨酸族氨基酸发酵生产转化率的方法。
为了实现该目的，本发明的技术方案如下：
一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸的方法，发酵培养基中含有的VB1，发酵时流加柠檬酸或其盐，其中，发酵培养基中初始含有的VB1与流加柠檬酸或其盐后的培养基中含有的柠檬酸的质量比为(3×10-6～10×10-6)：1；发酵培养基中初始VB1的浓度为40-80μg/L，流加柠檬酸或其盐后的培养基中含有的柠檬酸的浓度为8-12g/L。
本发明在研究时发现，在天冬氨酸族氨基酸生物合成中，若三羧酸途径流量过大，会生成过量的二氧化碳，导致生成氨基酸的代谢流减少。减弱三羧酸循环和乙醛酸支路，可以使更多的碳架流转向氨基酸的合成，提高发酵过程中氨基酸产酸水平。
而用相关酶活相关联的代谢流分析，菌体中糖酵解途径相对于三羧酸循环要过量才可保证持续理想的产物生成效果，但当糖酵解途径通量超出三羧酸循环的代谢能力时(三羧酸循环被过度减弱时)，将致使糖酵解途径生成的丙酮酸积累，且会通过其他途径进行代谢以缓解持续的“溢流”，进而导致酸及副产物的生成。
菌体生长和产物合成对ATP利用存在竞争关系。提高胞内ATP供应量，可通过添加特定量的辅助能量物质，如柠檬酸或者柠檬酸盐，实现碳源合成ATP量的提高。此时，三羧酸循环被特定量的辅助能量物质增强，但是随着三羧酸循环增强，菌体生长会过大，进而又使糖转化产物降低。
此外，丙酮酸转变成乙酰-CoA，经过丙酮酸脱氢酶在内的多酶复合体作用，其中硫胺素焦磷酸是其中的关键辅因子。硫胺素(VB1)可以对该反应进行调控，硫胺素含量降低，丙酮酸转变成乙酰-CoA减弱，菌体生长受限，放出的二氧化碳下降，代谢产物降低，转化率升高。硫胺素含量上升，丙酮酸转变成乙酰-CoA增强，菌体生长好，二氧化碳升高，代谢产物增强，转化率下降。
一般而言，本领域发酵生产时，在培养基中加入硫胺素，是为了促进菌株生长，进而帮助提升发酵效果，但如上述所述，本发明发现硫胺素的添加也会对转化率产生不利影响。此外，现有技术教导的是柠檬酸或者柠檬酸盐会减弱三羧酸循环，进而有利于苏氨酸的生产，但本发明发现特定柠檬酸或者柠檬酸盐的加入实际实现了碳源合成ATP量的提高，反而有利于产物合成，且三羧酸循环的增强也有利于菌体的生长。
最终本发明通过配方调控三羧酸循环，平衡菌体生长和产物代谢之间的关系，进而进一步提升了发酵生产天冬氨酸族氨基酸的转化率。具体通过控制硫胺素、柠檬酸的比例关系，以及发酵培养基中硫胺素和硫胺素的浓度，在降低丙酮酸脱氢酶的活力，降低二氧化碳的排放的同时提高三羧酸循环，促进菌体生长，进而达到提升转化率的目的。
在具体研发时，本发明曾进行过VB1添加量多少对发酵结果的影响试验。具体采用的方案是在目前实施例1的基础上，不流加柠檬酸，并改变VB1的浓度，从中发现，当培养基中的VB1的浓度为100μg/L时，产酸186g/L，转化率65.3％，理论酸6532g，最高OD600值35。当培养基中的VB1的浓度为80μg/L时，产酸183g/L，转化率67.4％，理论酸6615g，最高OD600值33。当培养基中的VB1的浓度为60μg/L时，产酸187g/L，转化率68.1％，理论酸6645g，最高OD600值33。当培养基中的VB1的浓度为40μg/L时，产酸184g/L，转化率68％，理论酸6640g，最高OD600值30。当培养基中的VB1的浓度为20μg/L时，产酸163g/L，转化率68.2％，理论酸5720g，最高OD600值29。从中可知，降低硫胺素VB1的浓度，虽然菌体生长受到不良影响，但可以提升发酵转化率。
此外，本发明在研发时，还曾进行过柠檬酸添加量多少对发酵结果的影响试验。具体采用的方案是在目前实施例1的基础上，改变柠檬酸的浓度，从中发现，当培养基中的柠檬酸的浓度为8g/L时，产酸192g/L，转化率67.9％，理论酸6775g，最高OD600值34。当培养基中的柠檬酸的浓度为12g/L时，产酸196g/L，转化率68.3％，理论酸6795g，最高OD600值36。当培养基中的柠檬酸的浓度为14g/L时，产酸189g/L，转化率67.5％，理论酸6720g，最高OD600值35。从中可知，菌株的生长和转化率先随柠檬酸浓度的增加而提升，后随柠檬酸浓度的进一步增加而下降。并非加入较多柠檬酸就有利于赖氨酸的生产。
优选，发酵培养基中初始含有的VB1与流加柠檬酸或其盐后的培养基中含有的柠檬酸的质量比为6×10-6：1；发酵培养基中初始VB1的浓度为60μg/L，流加柠檬酸或其盐后的培养基中含有的柠檬酸的浓度为10g/L。
本发明的方法中，所述发酵培养基的碳源包括葡萄糖或蔗糖，氮源包括硫酸铵或氨水。
本发明的方法中，当所述天冬氨酸族氨基酸为赖氨酸时，所述发酵培养基包括：葡萄糖19-21g/L，H3PO4 1.2-1.7g/L，KCl 0.4-0.6g/L，MgSO4 0.6-0.8g/L，糖蜜9-11g/L，玉米浆58-62g/L，豆粕水解液29-31g/L，MnSO4 0.0018-0.0022g/L，FeSO4 0.0018-0.0022g/L，VB1 40-80μg/L，生物素190-210μg/L；流加葡萄糖、硫酸铵、氨水、苏氨酸和柠檬酸或其盐；
和/或，发酵菌为大肠杆菌。
本发明的方法中，当所述天冬氨酸族氨基酸为赖氨酸时，所述种子培养基包括：葡萄糖39-41g/L，KH2PO4 1.4-1.6g/L，MgSO4 1.4-1.6g/L，糖蜜11-13g/L，玉米浆24-26g/L，硫酸铵11-13g/L，MnSO4 0.0015-0.0025g/L，FeSO4 0.0015-0.0025g/L。
本发明的方法中，当所述天冬氨酸族氨基酸为赖氨酸时，所述发酵培养条件还包括：
发酵温度36-38℃，发酵压力控制0.07-0.09MPa，通气量0.8-1.2vvm；
控制发酵过程残糖为0.8-1.2g/L，苏氨酸添加量与葡萄糖添加量的质量比为(0.0014-0.0016):1，发酵氨氮浓度0.8-1.2g/L，以氨水进行pH调控，发酵pH值为6.7-7.1。
本发明的方法中，当所述天冬氨酸族氨基酸为苏氨酸时，所述发酵培养基包括：葡萄糖38-42g/L，玉米浆6-8g/L，豆粕水解液3-7g/L，MgSO4·7H2O 0.4-0.6g/L，KH2PO4 1.8-2.2g/L，VB1 40-80μg/L，流加葡萄糖、氨水和柠檬酸或其盐；
和/或，发酵菌为大肠杆菌。
本发明的方法中，当所述天冬氨酸族氨基酸为苏氨酸时，所述种子培养基包括：葡萄糖18-22g/L，玉米浆10-20g/L，豆粕水解液3-7g/L，MgSO4·7H2O 0.4-0.6g/L，KH2PO41.8-2.2g/L。
本发明的方法中，当所述天冬氨酸族氨基酸为苏氨酸时，所述发酵培养条件还包括：
通气量0.5-0.8vvm，转速300-700rpm，压力控制0.06-0.08MPa，pH 7.0-7.2，温度36-38℃，溶氧18-22％；
待发酵液中的残糖量为0.1-0.2g/L时开始流加葡萄糖溶液，使葡萄糖的浓度控制在0.8-1.2g/L，氮源氨水作为pH调节剂。
本发明还提供一种上述方法在提升天冬氨酸族氨基酸的发酵糖酸转化率上的应用。
本发明的方法中，所述天冬氨酸族氨基酸包括天冬氨酸、天冬酰胺、赖氨酸、苏氨酸或甲硫氨酸。
本发明的有益效果至少在于：
本发明提供了一种新的天冬氨酸族氨基酸发酵生产控制方案，通过配方调控三羧酸循环，平衡菌体生长和产物代谢之间的关系。在优化流量分布的同时，使菌体生长不受影响，以达到更好地提升转化率的目的。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的优选实施方式进行详细说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的，并不是用于对本发明的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下，可以对本发明进行各种修改和替换。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到或按本领域常规方法制备。
本发明中，具体实施方式中使用的生产赖氨酸的发酵菌为MHZ-0914。MHZ-0914现已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101，保藏编号CGMCC No.22648，保藏日期2021年6月1日，分类命名为大肠埃希氏菌Escherichia coli。
采用的生产苏氨酸的发酵菌为大肠杆菌MHZ-0216-5，大肠杆菌MHZ-0216-5的构建方法参见中国专利申请CN113846132A。
本发明实施例中，实验方法如下：
(1)添加硫胺素和柠檬酸下赖氨酸发酵实验；
(2)添加硫胺素和柠檬酸下苏氨酸发酵实验；
具体流程为：
①将一级种子液接入10L发酵罐内进行二级种子培养；
②将二级种子液接入发酵培养基，50L发酵罐内进行发酵培养。
条件控制：
①氨浓度控制：作为氨基酸生产所需的氮源的氨浓度，在培养基中不能处于低的状态，否则将导致碱性氨基酸生产率降低。在L-赖氨酸的菌株MHZ-0914发酵过程，流加氨水的同时，流加硫酸铵保持发酵液中氨浓度在0.8-1.2g/L，优选1g/L。
②糖浓度和pH控制：通过考察发酵过程中菌体在产酸、糖、氨消耗情况，获得两者间比例关系。据此以pH反馈信号为控制条件，发酵液中以零糖控制，使得pH反馈系统向发酵罐中流加氨的同时实现糖的补加，使用凯氏定氮仪监测发酵过程中游离氨的含量，每6h记录一次。
转化率和理论酸(单次生产所获得的氨基酸总量)两个参数直接影响终产品的成本。转化率高可以降低葡萄糖成本，理论酸高可以降低设备及所有物料人工的成本。若转化率和理论酸均高，则说明方案更优，若两方案比较时出现了这两个参数一高一低的情况，则在理论酸差距不大(±2％)时，转化率高更佳；在转化率相差不大(±1％)时，理论酸高更佳。
实施例1
本实施例提供一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸-赖氨酸的方法，采用产L-赖氨酸的菌株：MHZ-0914。具体如下：
种子培养基(g/L)：葡萄糖40，KH2PO4 1.5，MgSO4 1.5，糖蜜12，玉米浆25，硫酸铵12，MnSO4 0.002，FeSO4 0.002。
发酵培养基：葡萄糖20g/L，H3PO4 1.5g/L，KCl 0.5g/L，MgSO4 0.7g/L，糖蜜10g/L，玉米浆60g/L，豆粕水解液30g/L，MnSO4 0.002g/L，FeSO4 0.002g/L，生物素200μg/L，VB1 60μg/L。
流加葡萄糖600g/L，硫酸铵500g/L，总氮：苏氨酸4g/L，柠檬酸。
上述发酵底物均于121℃灭菌20min。
种子罐中分别接入上述L-赖氨酸生产菌株，待OD600值达到0.8时接入发酵罐中进行发酵，发酵接种比为20％，初始发酵底糖(葡萄糖)浓度20g/L，发酵温度36-38℃，发酵压力控制0.08MPa，通气量1vvm，培养36h，连续向发酵罐中流加可发酵型糖，其为浓度为600g/L的高浓度葡萄糖液，流加的硫酸铵浓度为500g/L，流加的总氮为苏氨酸，总氮添加量占糖液添加量体积的22％，流加柠檬酸，发酵过程残糖为1g/L，发酵氨氮(无机游离氨NH4 +，由硫酸铵+氨水提供)浓度0.8-1.2g/L，发酵过程柠檬酸浓度为10g/L，以氨水进行pH调控，发酵pH值为6.7-7.1，当发酵罐中的培养液体积至发酵罐体积的70％时放料，放料体积为培养基体积的5％，发酵时间36h。发酵过程中，测定发酵过程酸，游离氨。
发酵结果表明，产酸197g/L，转化率69.5％，理论酸6950g，最高OD600值36。
实施例2
本实施例提供一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸-赖氨酸的方法，采用产L-赖氨酸的菌株：MHZ-0914。具体方法与实施例1相同，区别仅在于，发酵培养基中初始含有的VB1与流加柠檬酸后的培养基中含有的柠檬酸的质量比为3.3×10-6：1。
具体发酵培养基中，VB1的浓度为40μg/L，发酵过程柠檬酸浓度为12g/L，发酵结果表明，产酸197g/L，转化率68.5％，理论酸6820g，最高OD600值36。
实施例3
本实施例提供一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸-赖氨酸的方法，采用产L-赖氨酸的菌株：MHZ-0914。具体方法与实施例1相同，区别仅在于，发酵培养基中初始含有的VB1与流加柠檬酸后的培养基中含有的柠檬酸的质量比为10×10-6：1。
具体发酵培养基中，VB1的浓度为80μg/L，发酵过程柠檬酸浓度为8g/L，发酵结果表明，产酸198g/L，转化率68.2％，理论酸6850g，最高OD600值36。
对比例1
本对比例提供一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸-赖氨酸的方法，采用产L-赖氨酸的菌株：MHZ-0914。具体方法与实施例1相同，区别仅在于，发酵培养基中初始含有的VB1与流加柠檬酸后的培养基中含有的柠檬酸的质量比为2.5×10-6：1。
具体发酵培养基中，VB1的浓度为20μg/L，发酵过程柠檬酸浓度为8g/L，发酵结果表明，产酸190g/L，转化率69.0％，理论酸6600g，最高OD600值31。
对比例2
本对比例提供一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸-赖氨酸的方法，采用产L-赖氨酸的菌株：MHZ-0914。具体方法与实施例1相同，区别仅在于，发酵培养基中初始含有的VB1与流加柠檬酸后的培养基中含有的柠檬酸的质量比为8.3×10-6：1。
具体发酵培养基中，VB1的浓度为100μg/L，发酵过程柠檬酸浓度为12g/L，发酵结果表明，产酸194g/L，转化率66.5％，理论酸6910g，最高OD600值39。
实施例4
本实施例提供一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸-苏氨酸的方法，采用产L-苏氨酸的菌株：MHZ-0216-5。具体如下：
种子培养基：葡萄糖20g/L，玉米浆15g/L，豆粕水解液5g/L，MgSO4·7H2O 0.5g/L，KH2PO4 2g/L。
发酵培养基：葡萄糖40g/L，玉米浆7g/L，豆粕水解液7g/L，MgSO4·7H2O 0.5g/L，KH2PO4 2g/L，VB1 60μg/L，流加500g/L的葡萄糖溶液、25％的氨水和柠檬酸。
将已经灭菌的L-苏氨酸种子培养基加入无菌的种子罐10L中，加水调节种子培养基初定容至6L，接入种子液200mL。培养条件：通气量0.8vvm，转速300rpm，培养pH7.0，温度37℃，溶氧20％。种子生长至OD600值为10时停止培养。
将已经灭菌的L-苏氨酸发酵培养基接入无菌的发酵罐50L中，加入无菌水定容至15L；取种子罐中种子液3L接入发酵罐中。发酵过程控制条件：0.5-0.8vvm，300-700rpm，罐压0.07MPa，pH7.0，温度37℃，溶氧20％，发酵周期36h。
流加柠檬酸，使其在培养基中的浓度为10g/L，待发酵液中残糖量为0.1g/L时开始流加碳源，氮源氨水作为pH调节剂控制pH7.0，配置500g/L的葡萄糖溶液作为流加碳源，利用25％的氨水作为流加氮源，发酵过程控制pH7.0，发酵过程中发酵液中葡萄糖的浓度控制在1g/L左右。
使用SBA生物传感仪测定葡萄糖含量，凯氏定氮仪测定游离氨含量，HPLC测定L-苏氨酸含量。
发酵结果表明，产酸121g/L，转化率57.3％，理论酸2780g，最高OD600值33。
实施例5
本实施例提供一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸-苏氨酸的方法，采用产L-苏氨酸的菌株：MHZ-0216-5。具体方法与实施例4相同，区别仅在于，发酵培养基中初始含有的VB1与流加柠檬酸后的培养基中含有的柠檬酸的质量比为3.3×10-6：1。
具体发酵培养基中，VB1的浓度为40μg/L，发酵过程柠檬酸浓度为12g/L，发酵结果表明，产酸119g/L，转化率56.7％，理论酸2720g，最高OD600值32。
实施例6
本实施例提供一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸-苏氨酸的方法，采用产L-苏氨酸的菌株：MHZ-0216-5。具体方法与实施例4相同，区别仅在于，发酵培养基中初始含有的VB1与流加柠檬酸后的培养基中含有的柠檬酸的质量比为10×10-6：1。
具体发酵培养基中，VB1的浓度为80μg/L，发酵过程柠檬酸浓度为8g/L，发酵结果表明，产酸118g/L，转化率56.6％，理论酸2712g，最高OD600值33。
对比例3
本对比例提供一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸-苏氨酸的方法，采用产L-苏氨酸的菌株：MHZ-0216-5。具体方法与实施例4相同，区别仅在于，发酵培养基中初始含有的VB1与流加柠檬酸后的培养基中含有的柠檬酸的质量比为2.5×10-6：1。
具体发酵培养基中，VB1的浓度为20μg/L，发酵过程柠檬酸浓度为8g/L，发酵结果表明，产酸112g/L，转化率56.8％，理论酸2521g，最高OD600值29。
对比例4
本对比例提供一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸-苏氨酸的方法，采用产L-苏氨酸的菌株：MHZ-0216-5。具体方法与实施例4相同，区别仅在于，发酵培养基中初始含有的VB1与流加柠檬酸后的培养基中含有的柠檬酸的质量比为8.3×10-6：1。
具体发酵培养基中，VB1的浓度为100μg/L，发酵过程柠檬酸浓度为12g/L，发酵结果表明，产酸120g/L，转化率54.6％，理论酸2830g，最高OD600值38。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种发酵生产天冬氨酸族氨基酸的方法，发酵培养基中含有的VB1，发酵时流加柠檬酸或其盐，其特征在于，发酵培养基中初始含有的VB1与流加柠檬酸或其盐后的培养基中含有的柠檬酸的质量比为(3×10-6～10×10-6)：1；发酵培养基中初始VB1的浓度为40-80μg/L，流加柠檬酸或其盐后的培养基中含有的柠檬酸的浓度为8-12g/L。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵培养基中初始含有的VB1与流加柠檬酸或其盐后的培养基中含有的柠檬酸的质量比为6×10-6：1；发酵培养基中初始VB1的浓度为60μg/L，流加柠檬酸或其盐后的培养基中含有的柠檬酸的浓度为10g/L。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基的碳源包括葡萄糖或蔗糖，氮源包括硫酸铵或氨水。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，当所述天冬氨酸族氨基酸为赖氨酸时，所述发酵培养基包括：葡萄糖19-21g/L，H3PO41.2-1.7g/L，KCl 0.4-0.6g/L，MgSO4 0.6-0.8g/L，糖蜜9-11g/L，玉米浆58-62g/L，豆粕水解液29-31g/L，MnSO4 0.0018-0.0022g/L，FeSO40.0018-0.0022g/L，VB1 40-80μg/L，生物素190-210μg/L；流加葡萄糖、硫酸铵、氨水、苏氨酸和柠檬酸或其盐；
和/或，发酵菌为大肠杆菌。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，当所述天冬氨酸族氨基酸为赖氨酸时，所述种子培养基包括：葡萄糖39-41g/L，KH2PO41.4-1.6g/L，MgSO4 1.4-1.6g/L，糖蜜11-13g/L，玉米浆24-26g/L，硫酸铵11-13g/L，MnSO4 0.0015-0.0025g/L，FeSO4 0.0015-0.0025g/L。
6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，当所述天冬氨酸族氨基酸为赖氨酸时，所述发酵培养条件还包括：
发酵温度36-38℃，发酵压力控制0.07-0.09MPa，通气量0.8-1.2vvm；
控制发酵过程残糖为0.8-1.2g/L，苏氨酸添加量与葡萄糖添加量的质量比为(0.0014-0.0016)：1，发酵氨氮浓度0.8-1.2g/L，以氨水进行pH调控，发酵pH值为6.7-7.1。
7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，当所述天冬氨酸族氨基酸为苏氨酸时，所述发酵培养基包括：葡萄糖38-42g/L，玉米浆6-8g/L，豆粕水解液3-7g/L，MgSO4·7H2O 0.4-0.6g/L，KH2PO4 1.8-2.2g/L，VB1 40-80μg/L，流加葡萄糖、氨水和柠檬酸或其盐；
和/或，发酵菌为大肠杆菌。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，当所述天冬氨酸族氨基酸为苏氨酸时，所述种子培养基包括：葡萄糖18-22g/L，玉米浆10-20g/L，豆粕水解液3-7g/L，MgSO4·7H2O0.4-0.6g/L，KH2PO4 1.8-2.2g/L。
9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，当所述天冬氨酸族氨基酸为苏氨酸时，所述发酵培养条件还包括：
通气量0.5-0.8vvm，转速300-700rpm，压力控制0.06-0.08MPa，pH 7.0-7.2，温度36-38℃，溶氧18-22％；
待发酵液中的残糖量为0.1-0.2g/L时开始流加葡萄糖溶液，使葡萄糖的浓度控制在0.8-1.2g/L，氮源氨水作为pH调节剂。
10.权利要求1-9任一项所述的方法在提升天冬氨酸族氨基酸的发酵糖酸转化率上的应用。
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