CN117398379A - 抗坏血酸在制备提高认识水平的产品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了抗坏血酸在制备提高认识水平的产品中的应用，抗坏血酸及其衍生物可以显著提高中老年小鼠的认识水平，且不同的给药方式对认识水平的影响具有区别；进一步本发明首次发现抗坏血酸和AKK菌的联合使用，可以增加口服给药方式的成年小鼠的认识水平。本发明显示了其在生物医药领域中的潜在的应用价值；综上，本发明提供的抗坏血酸在制备提高认识水平中的应用，具有重要的意义和临床应用价值。

Description

抗坏血酸在制备提高认识水平的产品中的应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体是抗坏血酸在制备提高认识水平的产品中的应用。

背景技术

抗坏血酸(Ascorbic acid，AA)，俗称维生素C(VC)，是机体正常运作所必需的基本化合物之一。1928年，由匈牙利生物化学家阿尔伯特·森特-戈尔盖首次描述并分离出它。抗坏血酸名字的由来是源于坏疽病，起初，该化合物的缺乏只与这种疾病的发展有关。植物和大多数动物可以由葡萄糖通过多步骤途径产生抗坏血酸，然而，在人类、其他灵长类动物、豚鼠和一些食果蝙蝠，由于合成抗坏血酸最后一步所需的L-古洛内酯氧化酶的缺乏，使得机体无法自身合成抗坏血酸。因此，必须在膳食中提供抗坏血酸。

抗坏血酸具有广泛的生物活性。目前已知，抗坏血酸对人体正常生理活动的维持起着不可或缺的作用，它负责许多过程，具有保护动脉血管内皮细胞免遭体内有害物质损害，调节白细胞对微生物的吸收，降低胆固醇水平，以及加速伤口愈合的作用。除此之外，该化合物还具有调节胶原蛋白的生成，减缓皮肤的衰老过程，降低血压等重要功能。抗坏血酸在上述过程中的参与部分是基于其抗氧化和抗炎特性。但是其对认知水平的影响还未见报道。

认知水平是指对信息的处理能力，主要包括专注力、判断能力、思维能力、记忆力等。认知能力是人们成功的完成活动最重要的心理条件。知觉、记忆、注意、思维和想象的能力都被认为是认知能力。认知能力，是人脑加工、储存和提取信息的能力，即人们对事物的构成、性能、与他物关系、发展动力、发展方向以及基本规律的把握能力。人们的认知特点对于社会经济状况都有显着的影响，增强认知能力也已经被发现与财富增长和预期寿命的增加有关。而一直以来，人们普遍认为，像数学和阅读这样的能力，是具有家族性的，但影响这些性状基因的复杂系统在很大程度上却不为人们所了解。

发明内容

本发明提供了抗坏血酸及其衍生物在制备提高认识水平的产品中的应用，具有重要的意义和临床应用价值。

为达此目的，本发明提供如下的技术方案：

本发明的第一个方面，提供了抗坏血酸及其衍生物在制备提高认识水平的产品中的应用。

在本发明人，认识水平主要是指对新事物的认识能力。提高机体的认识水平对于因年龄或者疾病导致的认识水平下降具有重要的意义。

在本发明中，抗坏血酸衍生物包括但不限于抗坏血酸纳等。

优选的，所述产品为注射剂。

优选的，所述注射用抗坏血酸及其衍生物的浓度为0.1-1mg/kg。

优选的，所述产品为口服剂，且所述产品中还包括AKK。

在本发明中AKK细菌为嗜黏蛋白阿克曼菌，是一种肠道有益菌，会随着肠炎的发展而逐渐减少，补充Akk菌或它的外膜蛋白Amuc_1100能减轻肠炎症状，调节脾脏、肠道和肠系膜淋巴结中的免疫应答，降低肠道中的炎症水平，预防肠炎导致的肠癌；[1]Akk菌与肥胖、糖尿病、心血管代谢疾病呈负相关；提高“渐冻症”小鼠模型的嗜黏蛋白阿克曼菌浓度，可以改善症状、延长生存期。本发明首次发现，抗坏血酸衍生物与AKK均联合口服使用，可以增加成年小鼠的认识水平。

优选的，所述口服用抗坏血酸及其衍生物的浓度为0.1-0.5mg/g。

优选的，所述产品包括药物、化妆品、护肤品。

本发明的第二个方面，提供了一种提高认识水平的产品，包括抗坏血酸及其衍生物。

优选的，注射用产品中抗坏血酸及其衍生物的浓度为0.1-1mg/kg；口服用产品中抗坏血酸及其衍生物的浓度为0.1-0.5mg/g，且口服用产品中还包括AKK。

优选的，所述产品的给药方式包括：静脉注射，每两天给药一次；口服给药，每天一次。

优选的，所述注射用抗坏血酸的浓度为0.1-1mg/kg；口服用抗坏血酸的浓度为0.1-0.5mg/g。

优选的，所述产品的给药方式包括：静脉注射，每两天给药一次；口服给药，每天一次。

优选的，产品优先适用于中年及老年机体。

本发明通过实验发现不同的给药方式影响抗坏血酸对不同年龄段的机体的认识水平的影响。具体的，静脉注射抗坏血酸可以通过提高成年及中老年小鼠的认知。口服抗坏血酸可以提高中老年小鼠认知，口服抗坏血酸和AKK菌也可以提高成年小鼠认知。

与现有技术相比，本发明有益效果及显著进步在于：本发明首次提出抗坏血酸在制备提高认识水平中的应用，并验证了两种方式均可以提高认知。

附图说明

为更清楚地说明本发明的技术方案，下面将对本发明的实施例所需使用的附图作一简单介绍。

显而易见地，下面描述中的附图仅是本发明中的部分实施例的附图，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图，但这些其他的附图同样属于本发明实施例所需使用的附图之内。

图1A为本发明实施例1的注射组与对照组，以及口服灌胃组与对照组成年小鼠旷场实验结果图及统计图；

图1B为本发明实施例1的两种类别处理成年小鼠新物体识别实验结果图；

图2为本发明实施例1的两种类别处理中老年小鼠(13M)新物体识别实验结果图；

图3A为本发明实施例1的成年小鼠注射抗坏血酸组和对照组小鼠粪便16s rRNA测序主要物种富集分析；

图3B为本发明实施例1的成年小鼠口服灌胃抗坏血酸组和对照组小鼠粪便16srRNA测序主要物种富集分析；

图4为本发明实施例2的四组处理成年小鼠旷场实验分析和结果统计图。

图5为本发明实施例2的四组处理成年小鼠新物体结果统计图。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案、有益效果及显著进步更加清楚，下面，将结合本发明实施例中所提供的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。

显然，所有描述的这些实施例仅是本发明的部分实施例，而不是全部的实施例；基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。

还需要说明的是，以下的具体实施例可以相互结合，对于其中相同或相似的概念或过程可能在某些实施例中不再赘述。

下面，以具体的实施例对本发明的技术方案进行详细说明。

实施例1静脉注射抗坏血酸可以提高成年(9M)及中老年小鼠(13M)认知水平

实验方法：

1.1、实验分组：

静脉注射实验组：使用1mg/kg的抗坏血酸，通过尾静脉注射方式，每隔一天注射10月龄C57BL/6老年雌性小鼠一次，持续给药4周。

灌胃实验组：用抗坏血酸对成年小鼠灌胃处理，每隔一天灌胃10月龄C57BL/6老年雌性小鼠一次，持续给药4周。

对照组：注射或者灌胃溶剂组(10％ DMSO)。

1.2、矿场实验

该装置是基于一个正方形的场(50×50×30厘米)。一盏灯位于场地上方150厘米处，中心区域的照明大约是100lx。在每个实验开始时，小鼠被放置在一个15×15厘米的中心区域。实验开始时，将小鼠置于中心，记录10分钟内小鼠在中心区域的时间。

1.3、新物体识别

在进行训练和测试前3天，每天抚摸实验小鼠1min，避免刺激小鼠，使其消除与测试者的陌生感。在进行测试或训练前1天，将小鼠放在测试的房间内，适应测试环境。开始训练，将A，B两个物体放在一侧壁的左右两端，小鼠背朝两物体放入场地内，并且小鼠鼻尖距离两物的长度要一致。放入后立即开启录像设备，实验者立即离开测试房间，记录小鼠与这两个物体接触的情况，包括鼻子或嘴巴触及物体的次数和距离物体2-3cm范围内探究的时间。小鼠放入10min结束后，立即将小鼠放回原来饲养的鼠笼内，在1小时后再进行测试。这时将场地内的B物体换作C物体，仍将小鼠背向两物体，鼻尖据两物体距离相同，观察2-5min时间，同样用录像设备录像，观察者离开测试房间，观察指标同上。

实验结果：

成年小鼠的实验结果如图1所示，矿场实验用以评估这些小鼠的焦虑行为。焦虑水平可以从老鼠呆在笼子角落的时间来确定。在矿场实验的10min内，各组小鼠在中心待的时间与在角落待的时间之比与对照组相比无显著差异(图1A)。在小鼠健康基础上我们进行新物体识别，发现与对照组相比，静脉注射抗坏血酸处理后小鼠更倾向的触碰新物体，具有更显著的新物体识别水平，而口服灌胃组与对照相比也就有差异(图1B)，但是差异相对于注射组相对更小。

中老年小鼠的实验结果如图2所示，并且静脉注射抗坏血酸至中老年小鼠也能显著提高其新物体识别水平(图2)，但是口服抗坏血酸不能提高成年小鼠认知。

进一步，我们分析了两种处理方式对于成年小鼠肠道微生物的影响，发现静脉注射组与对照相比能在成年小鼠显著富集AKK菌，而口服灌胃组则没有(图3A、B)。

综上所述，静脉注射抗坏血酸可以通过提高成年及中老年小鼠的认知。口服抗坏血酸可以提高中老年小鼠认知，但是口服抗坏血酸不能提高成年小鼠认知。

实施例2口服灌胃抗坏血酸和AKK(Akkermansia muciniphila)可以提高成年小鼠认知水平

实验方法

2.1、采用AKK菌液和抗坏血酸对成年小鼠灌胃处理。

细菌计数和灌胃：(1)将冻存于-80℃冰箱分装好的细菌解冻，取100μl的解冻液，用高压灭菌培养基梯度稀释到一定倍数(一般需要稀释到1012 -1017倍)。(2)吸取100μl稀释后的菌液均匀的滴在平板各部分，然后用火焰灭菌处理的涂布棒快速均匀涂布菌液直到平板液体变干。(3)将涂布好的平板标记好后放于厌氧培养袋中，并快速将厌氧产气包和厌氧指示剂一并放到厌氧培养袋中。(4)待平板在厌氧培养袋中生长繁育7天左右，可在平板中用肉眼看到白色菌落，对平板中的白色菌落进行计数并乘以其稀释的相应倍数即可得出每毫升的冻存液中含有多少的活菌落。(5)将记好数的细菌用无菌PBS按比例稀释到2×109/200μl的细菌浓度，并计算相对应的甘油的浓度。(6)小鼠灌胃，对于菌液处理组每只小鼠灌胃2×109/200μl，对照组小鼠灌胃用无菌PBS稀释的实验组小鼠灌胃的甘油相对应得浓度。

2.2、采用同实施例1相同的方法进行矿场实验和新物体识别实验

实验结果

本实施例对于成年小鼠通过口服灌胃抗坏血酸，并同时添加AKK菌处理，就可以显著提高提高成年小鼠的新物体识别的能力(图5)。各组小鼠的旷场实验结果无差异(图4)。

在上述说明书的描述过程中：

术语“本实施例”、“本发明实施例”、“如……所示”、“进一步的”、“进一步改进的技术分方案”等的描述，意指该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中；在本说明书中，对上述术语的示意性表述不是必须针对相同的实施例或示例，而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点等可以在任意一个或者多个实施例或示例中以合适的方式结合或组合；此外，在不产生矛盾的前提下，本领域的普通技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合或组合。

最后应说明的是：

以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非是对其的限制；

尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换，而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围，本领域技术人员根据本说明书内容所做出的非本质改进和调整或者替换，均属本发明所要求保护的范围。

Claims (9)

1.抗坏血酸及其衍生物在制备提高认识水平的产品中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品为注射剂。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述注射用抗坏血酸及其衍生物的浓度为0.1-1mg/kg。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品为口服剂，且所述产品中还包括AKK。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述口服用抗坏血酸及其衍生物的浓度为0.1-0.5mg/g。

6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括药物、化妆品、护肤品。

7.一种提高认识水平的产品，其特征在于，包括抗坏血酸及其衍生物。

8.如权利要求7所述的提高认识水平的产品，其特征在于，注射用产品中抗坏血酸及其衍生物的浓度为0.1-1mg/kg；口服用产品中抗坏血酸及其衍生物的浓度为0.1-0.5mg/g，且口服用产品中还包括AKK。

9.如权利要求7所述的提高认识水平的抗产品，其特征在于，所述产品的给药方式包括：静脉注射，每两天给药一次；口服给药，每天一次。