CN117363683A - 一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法 - Google Patents
一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117363683A CN117363683A CN202311295141.6A CN202311295141A CN117363683A CN 117363683 A CN117363683 A CN 117363683A CN 202311295141 A CN202311295141 A CN 202311295141A CN 117363683 A CN117363683 A CN 117363683A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- enzyme
- benzodiazepine
- filtrate
- resolution
- acetate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 50
- UROWRFYCWSNTOI-UHFFFAOYSA-N 2-(1H-1,2-benzodiazepin-3-yl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=NNc2ccccc2C=C1 UROWRFYCWSNTOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 40
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 title claims abstract description 26
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 title claims abstract description 26
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 title claims abstract description 26
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 title claims abstract description 26
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 title claims description 20
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 92
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 92
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 64
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 33
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 claims abstract description 31
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 claims abstract description 31
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims abstract description 15
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims abstract description 7
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 67
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 39
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 20
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 19
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- BYTRSUQNZQHUTO-UHFFFAOYSA-N acetic acid 1H-1,2-benzodiazepine Chemical compound C(C)(=O)O.N1N=CC=CC2=C1C=CC=C2 BYTRSUQNZQHUTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 9
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 claims description 8
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 claims description 8
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 7
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 6
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 6
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 claims description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 5
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 5
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 5
- 238000007599 discharging Methods 0.000 claims description 5
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 5
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 5
- 238000004064 recycling Methods 0.000 claims description 5
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical class [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 claims description 3
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 claims description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 3
- 239000004927 clay Substances 0.000 claims description 3
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 claims description 3
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 claims description 3
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 8
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 abstract description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 abstract description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 72
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 3
- ULGJWNIHLSLQPZ-UHFFFAOYSA-N 7-[(6,8-dichloro-1,2,3,4-tetrahydroacridin-9-yl)amino]-n-[2-(1h-indol-3-yl)ethyl]heptanamide Chemical compound C1CCCC2=NC3=CC(Cl)=CC(Cl)=C3C(NCCCCCCC(=O)NCCC=3C4=CC=CC=C4NC=3)=C21 ULGJWNIHLSLQPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 108010003977 aminoacylase I Proteins 0.000 description 2
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N D-cystine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CSSC[C@@H](N)C(O)=O LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
- C12P41/005—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of carboxylic acid groups in the enantiomers or the inverse reaction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
- C12N11/082—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
- C12N11/082—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
- C12N11/087—Acrylic polymers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种脂酶苯并二氮杂‑乙酸酯的酶拆分方法，具体包括以下步骤：S1、将苯并二氮杂‑乙酸酯加去离子水配兑成0.6‑1.3mol/L的底物溶液，用PH调节剂调节pH，过滤于拆分釜中按每2000‑3000ml过滤底液；S2、水解酶酶柱的准备，S3、酶解拆分，S4、脱色结晶成品化处理，本发明涉及生物工程技术领域。该脂酶苯并二氮杂‑乙酸酯的酶拆分方法，可实现通过采用控制底物与水解酶之间的反应速率来控制整个酶拆分产物的纯度，很好的达到了既高效又充分的对苯并二氮杂‑乙酸酯进行酶拆分处理的目的，大大简化了苯并二氮杂‑乙酸酯的酶拆分方法，减少了酶解拆分后的产物杂质含量，确保产物纯度能够达到要求，从而对苯并二氮杂‑乙酸酯的酶拆分生产十分有益。
Description
技术领域
本发明涉及生物工程技术领域，具体为一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法。
背景技术
人们熟知可以用蛋白水解酶水解酯。在某些情况下，当底物酯具有一个或多个手性碳原子时，该蛋白水解酶可以同外消旋混合物中的一种对映体比另一种对映体更快地反应。对于适当的底物，这种化学选择性可以用作该混合物拆分的基础。此种选择性水解反应的产物为反应的对映体的羧酸和醇，而未反应的对映体仍然为酯。随后所述酯和酸的易分离性成为羧酸或醇部分立体化学纯化的基础。
一般而言，当手性和复杂性残留于分子的羧酸部分时，则用酯酶或蛋白酶制备相应的手性酸，而当复杂性和手性残留于醇部分时，那么则用脂酶制备手性醇。然而，人们已知用脂酶拆分手性酸的部分实例。
该方法的立体化学纯度通常取决于外消旋物的每种异构体的水解速率，如相对速率差异越大，最终手性产物的纯度则越高。不论能否发现适当的酶，选择性水解给定的化合物的适当酶的选择通常凭经验决定。因此，作为有用的酶，该酶必须以所需化合物为底物、仅选择性水解适当的对映体并产生可接受的对映体过量。
参考中国专利公开号为CN1062604C的氨基酰化水解酶拆分混旋蛋氨酸制左旋蛋氨酸的方法，通过使用氨基酸酰化酶(E，C、3、5、1、14)作为水解酶，其效率高、收率78％，酶来源广，成本低；直接拆分，不需固化，产品与副产品分离回收工序简单。不足的是酶只能使用一次。
参考中国专利公开号为CN1306092A的固定化氨基酰化水解酶拆分外消旋氨基酸生产左旋氨基酸的方法，是载体便宜，容量大，固定化酶活力高达500～700μ/g载体·h，半衰期长达240天，固定化酶再生容易；运用本发明可拆分一切α-氨基酸，如丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸，缬氨酸等α-氨基酸。同时，运用本发明生产左旋氨基酸可以简化反应产物的提纯步骤，而且收率也比可溶性自由酶高；生产过程中酶的成本大大下降；应用本发明生产过程可以实现自动化控制节省劳力；利用固定化氨基酰化水解酶连续生产的总成本约是利用水溶性酶的分批拆分方法的80％。
综合分析以上参考专利，可得出以下缺陷：现有的苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法操作复杂，且酶解拆分后的产物杂质较多，从而导致产物纯度无法达到要求，不能实现通过采用控制底物与水解酶之间的反应速率来控制整个酶拆分产物的纯度，无法达到既高效又充分的对苯并二氮杂-乙酸酯进行酶拆分处理的目的，从而对苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分生产十分不利。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，解决了现有的苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法操作复杂，且酶解拆分后的产物杂质较多，从而导致产物纯度无法达到要求，不能实现通过采用控制底物与水解酶之间的反应速率来控制整个酶拆分产物的纯度，无法达到既高效又充分的对苯并二氮杂-乙酸酯进行酶拆分处理目的的问题。
(二)技术方案
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，具体包括以下步骤：
S1、将苯并二氮杂-乙酸酯加去离子水配兑成0.6-1.3mol/L的底物溶液，用PH调节剂调节pH，过滤于拆分釜中按每2000-3000ml过滤底液；
S2、使用阴离子交换树脂经平衡后，装柱，将水解酶制成1000-1500μ/ml水溶酶，在42-45℃以0.01-0.05mL/min·g载体的流速匀速通过载体柱，进行酶的固定化，当固定化酶活力达到300-400μ/g载体时，固酶完毕；
S3、将步骤S1的过滤液底物在40-50℃保温状态下，匀速通过步骤S2取的水解酶酶柱，在2-5℃保温20-30h进行酶拆分；
S4、拆分液升温到70-80℃加入脱色剂进行脱色处理，分批次过滤，然后得到的脱色过滤液在60-70℃真空减压浓缩至原体积的1/2-1/4，冷却至0-5℃，搅拌结晶后于0-6℃下结晶2-3h，离心分离，分离后经洗涤剂洗涤，干燥得产品。
优选的，所述步骤S1中PH调节剂为NaOH溶液、Na2CO3溶液或NH3·H2O溶液中的一种，调节溶液PH为6.5-10，使配制的苯并二氮杂-乙酸酯底物溶液为弱碱性。
优选的，所述步骤S2中水解酶为为全细胞培养物、酶提取物、分离的酶或与大孔丙烯酸树脂连接的分离的酶，其中酶提取物是从新鲜动物内脏中进行提取的蛋白水解酶。
优选的，所述步骤S4中脱色剂为活性炭、活性白土或离子交换树脂中的一种，通过使用脱色剂将拆分液中的杂质进行吸附，从而脱色澄清。
优选的，所述步骤S3中过滤液底物通过酶柱的流速为0.01-0.03ml/min·g，通过控制过滤液底物通过酶柱的流速使过滤液底物与酶柱中的水解酶充分反应。
优选的，所述步骤S4中洗涤剂为乙醇或甲醇中的一种，且洗涤剂的加入量为底物重量2-5倍，通过利用洗涤剂溶解产物表面的有机成份，确保产物的纯度达到要求。
优选的，所述步骤S4中对脱色处理后的产物进行分批次过滤具体过程如下：
T1、先选择所需尺寸的滤网安装至过滤设备处，再将待滤液通过输送泵一次输送5-9mL通入滤网进行过滤处理；
T2、重复步骤T1操作5-9次，直至将待滤液全部过滤完成；
T3、收集过滤下来的滤液，并将过滤出来的滤渣排出清洗回收再利用。
优选的，所述步骤T1中所需滤网的尺寸为100-200目，通过采用这种尺寸的滤网能够将脱色剂与试剂之间充分的筛分出来，确保滤液中无杂质。
优选的，所述步骤S3中过滤液底物匀速通过水解酶酶柱时要使用加压泵，确保过滤液底物在水解酶酶柱中的压力达到0.05-0.1MPa，通过控制滤液供压的压力，来控制过滤液底物在酶柱中的流速。
优选的，所述步骤S4中干燥所采用的干燥设备为智能烘干机，在控制温度在70-90℃的条件下干燥处理。
(三)有益效果
本发明提供了一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法。与现有技术相比具备以下有益效果：该脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，具体包括以下步骤：S1、将苯并二氮杂-乙酸酯加去离子水配兑成0.6-1.3mol/L的底物溶液，用PH调节剂调节pH，过滤于拆分釜中按每2000-3000ml过滤底液；S2、使用阴离子交换树脂经平衡后，装柱，将水解酶制成1000-1500μ/ml水溶酶，在42-45℃以0.01-0.05mL/min·g载体的流速匀速通过载体柱，进行酶的固定化，当固定化酶活力达到300-400μ/g载体时，固酶完毕，S3、酶解拆分，S4、脱色结晶成品化处理，可实现通过采用控制底物与水解酶之间的反应速率来控制整个酶拆分产物的纯度，很好的达到了既高效又充分的对苯并二氮杂-乙酸酯进行酶拆分处理的目的，大大简化了苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，减少了酶解拆分后的产物杂质含量，确保产物纯度能够达到要求，从而对苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分生产十分有益。
附图说明
图1为本发明酶拆分方法的流程图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1，本发明实施例提供三种技术方案：一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，具体包括以下实施例：
实施例1
一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，具体包括以下步骤：
S1、将苯并二氮杂-乙酸酯加去离子水配兑成1mol/L的底物溶液，用PH调节剂调节pH，过滤于拆分釜中按每2500ml过滤底液，PH调节剂为NaOH溶液，调节溶液PH为8，使配制的苯并二氮杂-乙酸酯底物溶液为弱碱性；
S2、使用阴离子交换树脂经平衡后，装柱，将水解酶制成1200μ/ml水溶酶，在43℃以0.03mL/min·g载体的流速匀速通过载体柱，进行酶的固定化，当固定化酶活力达到350μ/g载体时，固酶完毕，水解酶为为全细胞培养物；
S3、将步骤S1的过滤液底物在40-50℃保温状态下，匀速通过步骤S2取的水解酶酶柱，在3℃保温25h进行酶拆分，过滤液底物通过酶柱的流速为0.02ml/min·g，通过控制过滤液底物通过酶柱的流速使过滤液底物与酶柱中的水解酶充分反应，过滤液底物匀速通过水解酶酶柱时要使用加压泵，确保过滤液底物在水解酶酶柱中的压力达到0.08MPa，通过控制滤液供压的压力，来控制过滤液底物在酶柱中的流速；
S4、拆分液升温到75℃加入脱色剂进行脱色处理，分批次过滤，然后得到的脱色过滤液在65℃真空减压浓缩至原体积的1/3，冷却至3℃，搅拌结晶后于3℃下结晶2.5h，离心分离，分离后经洗涤剂洗涤，干燥得产品，脱色剂为活性炭，通过使用脱色剂将拆分液中的杂质进行吸附，从而脱色澄清，洗涤剂为乙醇，且洗涤剂的加入量为底物重量3倍，通过利用洗涤剂溶解产物表面的有机成份，确保产物的纯度达到要求，干燥所采用的干燥设备为智能烘干机，在控制温度在80℃的条件下干燥处理。
本发明实施例，步骤S4中对脱色处理后的产物进行分批次过滤具体过程如下：
T1、先选择所需尺寸的滤网安装至过滤设备处，再将待滤液通过输送泵一次输送5-9mL通入滤网进行过滤处理，所需滤网的尺寸为150目，通过采用这种尺寸的滤网能够将脱色剂与试剂之间充分的筛分出来，确保滤液中无杂质；
T2、重复步骤T1操作7次，直至将待滤液全部过滤完成；
T3、收集过滤下来的滤液，并将过滤出来的滤渣排出清洗回收再利用。
实施例2
一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，具体包括以下步骤：
S1、将苯并二氮杂-乙酸酯加去离子水配兑成0.6mol/L的底物溶液，用PH调节剂调节pH，过滤于拆分釜中按每2000ml过滤底液，PH调节剂为Na2CO3溶液，调节溶液PH为6.5使配制的苯并二氮杂-乙酸酯底物溶液为弱碱性；
S2、使用阴离子交换树脂经平衡后，装柱，将水解酶制成1000μ/ml水溶酶，在42℃以0.015mL/min·g载体的流速匀速通过载体柱，进行酶的固定化，当固定化酶活力达到300μ/g载体时，固酶完毕，水解酶为为酶提取物，其中酶提取物是从新鲜动物内脏中进行提取的蛋白水解酶；
S3、将步骤S1的过滤液底物在40℃保温状态下，匀速通过步骤S2取的水解酶酶柱，在2℃保温20h进行酶拆分，过滤液底物通过酶柱的流速为0.01ml/min·g，通过控制过滤液底物通过酶柱的流速使过滤液底物与酶柱中的水解酶充分反应，过滤液底物匀速通过水解酶酶柱时要使用加压泵，确保过滤液底物在水解酶酶柱中的压力达到0.05MPa，通过控制滤液供压的压力，来控制过滤液底物在酶柱中的流速；
S4、拆分液升温到70℃加入脱色剂进行脱色处理，分批次过滤，然后得到的脱色过滤液在60℃真空减压浓缩至原体积的1/2，冷却至0℃，搅拌结晶后于0℃下结晶2h，离心分离，分离后经洗涤剂洗涤，干燥得产品，脱色剂为活性白土，通过使用脱色剂将拆分液中的杂质进行吸附，从而脱色澄清，洗涤剂为甲醇，且洗涤剂的加入量为底物重量2倍，通过利用洗涤剂溶解产物表面的有机成份，确保产物的纯度达到要求，干燥所采用的干燥设备为智能烘干机，在控制温度在70℃的条件下干燥处理。
本发明实施例，步骤S4中对脱色处理后的产物进行分批次过滤具体过程如下：
T1、先选择所需尺寸的滤网安装至过滤设备处，再将待滤液通过输送泵一次输送5-9mL通入滤网进行过滤处理，所需滤网的尺寸为100目，通过采用这种尺寸的滤网能够将脱色剂与试剂之间充分的筛分出来，确保滤液中无杂质；
T2、重复步骤T1操作5次，直至将待滤液全部过滤完成；
T3、收集过滤下来的滤液，并将过滤出来的滤渣排出清洗回收再利用。
实施例3
一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，具体包括以下步骤：
S1、将苯并二氮杂-乙酸酯加去离子水配兑成1.3mol/L的底物溶液，用PH调节剂调节pH，过滤于拆分釜中按每3000ml过滤底液，PH调节剂为NH3·H2O溶液，调节溶液PH为10，使配制的苯并二氮杂-乙酸酯底物溶液为弱碱性；
S2、使用阴离子交换树脂经平衡后，装柱，将水解酶制成1500μ/ml水溶酶，在45℃以0.05mL/min·g载体的流速匀速通过载体柱，进行酶的固定化，当固定化酶活力达到400μ/g载体时，固酶完毕，水解酶为与大孔丙烯酸树脂连接的分离的酶；
S3、将步骤S1的过滤液底物在50℃保温状态下，匀速通过步骤S2取的水解酶酶柱，在5℃保温30h进行酶拆分，过滤液底物通过酶柱的流速为0.03ml/min·g，通过控制过滤液底物通过酶柱的流速使过滤液底物与酶柱中的水解酶充分反应，过滤液底物匀速通过水解酶酶柱时要使用加压泵，确保过滤液底物在水解酶酶柱中的压力达到0.1MPa，通过控制滤液供压的压力，来控制过滤液底物在酶柱中的流速；
S4、拆分液升温到80℃加入脱色剂进行脱色处理，分批次过滤，然后得到的脱色过滤液在70℃真空减压浓缩至原体积的1/4，冷却至5℃，搅拌结晶后于6℃下结晶3h，离心分离，分离后经洗涤剂洗涤，干燥得产品，脱色剂为离子交换树脂，通过使用脱色剂将拆分液中的杂质进行吸附，从而脱色澄清，洗涤剂为乙醇，且洗涤剂的加入量为底物重量5倍，通过利用洗涤剂溶解产物表面的有机成份，确保产物的纯度达到要求，干燥所采用的干燥设备为智能烘干机，在控制温度在90℃的条件下干燥处理。
本发明实施例，步骤S4中对脱色处理后的产物进行分批次过滤具体过程如下：
T1、先选择所需尺寸的滤网安装至过滤设备处，再将待滤液通过输送泵一次输送5-9mL通入滤网进行过滤处理，所需滤网的尺寸为200目，通过采用这种尺寸的滤网能够将脱色剂与试剂之间充分的筛分出来，确保滤液中无杂质；
T2、重复步骤T1操作9次，直至将待滤液全部过滤完成；
T3、收集过滤下来的滤液，并将过滤出来的滤渣排出清洗回收再利用。
应用实例
采用本发明实施例1-3的拆分方法分别对脂酶苯并二氮杂-乙酸酯进行酶拆分处理，得到三组产物，然后测定这三组产物的纯度，然后与现有拆分方法的产物纯度(对照组)进行对比，详见表1。
表1实验产物纯度数据表
由表1可知采用本发明实施例1-3的拆分方法所得到的产物纯度明显要高于现有的拆分方法产物纯度，因此本发明可实现通过采用控制底物与水解酶之间的反应速率来控制整个酶拆分产物的纯度，很好的达到了既高效又充分的对苯并二氮杂-乙酸酯进行酶拆分处理的目的，大大简化了苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，减少了酶解拆分后的产物杂质含量，确保产物纯度能够达到要求，从而对苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分生产十分有益。
同时本说明书中未作详细描述的内容均属于本领域技术人员公知的现有技术。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (10)
1.一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，其特征在于：具体包括以下步骤：
S1、将苯并二氮杂-乙酸酯加去离子水配兑成0.6-1.3mol/L的底物溶液，用PH调节剂调节pH，过滤于拆分釜中按每2000-3000ml过滤底液；
S2、使用阴离子交换树脂经平衡后，装柱，将水解酶制成1000-1500μ/ml水溶酶，在42-45℃以0.01-0.05mL/min·g载体的流速匀速通过载体柱，进行酶的固定化，当固定化酶活力达到300-400μ/g载体时，固酶完毕；
S3、将步骤S1的过滤液底物在40-50℃保温状态下，匀速通过步骤S2取的水解酶酶柱，在2-5℃保温20-30h进行酶拆分；
S4、拆分液升温到70-80℃加入脱色剂进行脱色处理，分批次过滤，然后得到的脱色过滤液在60-70℃真空减压浓缩至原体积的1/2-1/4，冷却至0-5℃，搅拌结晶后于0-6℃下结晶2-3h，离心分离，分离后经洗涤剂洗涤，干燥得产品。
2.根据权利要求1所述的一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，其特征在于：所述步骤S1中PH调节剂为NaOH溶液、Na2CO3溶液或NH3·H2O溶液中的一种，调节溶液PH为6.5-10，使配制的苯并二氮杂-乙酸酯底物溶液为弱碱性。
3.根据权利要求1所述的一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，其特征在于：所述步骤S2中水解酶为为全细胞培养物、酶提取物、分离的酶或与大孔丙烯酸树脂连接的分离的酶，其中酶提取物是从新鲜动物内脏中进行提取的蛋白水解酶。
4.根据权利要求1所述的一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，其特征在于：所述步骤S4中脱色剂为活性炭、活性白土或离子交换树脂中的一种，通过使用脱色剂将拆分液中的杂质进行吸附，从而脱色澄清。
5.根据权利要求1所述的一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，其特征在于：所述步骤S3中过滤液底物通过酶柱的流速为0.01-0.03ml/min·g，通过控制过滤液底物通过酶柱的流速使过滤液底物与酶柱中的水解酶充分反应。
6.根据权利要求1所述的一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，其特征在于：所述步骤S4中洗涤剂为乙醇或甲醇中的一种，且洗涤剂的加入量为底物重量2-5倍，通过利用洗涤剂溶解产物表面的有机成份，确保产物的纯度达到要求。
7.根据权利要求1所述的一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，其特征在于：所述步骤S4中对脱色处理后的产物进行分批次过滤具体过程如下：
T1、先选择所需尺寸的滤网安装至过滤设备处，再将待滤液通过输送泵一次输送5-9mL通入滤网进行过滤处理；
T2、重复步骤T1操作5-9次，直至将待滤液全部过滤完成；
T3、收集过滤下来的滤液，并将过滤出来的滤渣排出清洗回收再利用。
8.根据权利要求7所述的一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，其特征在于：所述步骤T1中所需滤网的尺寸为100-200目，通过采用这种尺寸的滤网能够将脱色剂与试剂之间充分的筛分出来，确保滤液中无杂质。
9.根据权利要求1所述的一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，其特征在于：所述步骤S3中过滤液底物匀速通过水解酶酶柱时要使用加压泵，确保过滤液底物在水解酶酶柱中的压力达到0.05-0.1MPa，通过控制滤液供压的压力，来控制过滤液底物在酶柱中的流速。
10.根据权利要求1所述的一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法，其特征在于：所述步骤S4中干燥所采用的干燥设备为智能烘干机，在控制温度在70-90℃的条件下干燥处理。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311295141.6A CN117363683A (zh) | 2023-10-09 | 2023-10-09 | 一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311295141.6A CN117363683A (zh) | 2023-10-09 | 2023-10-09 | 一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117363683A true CN117363683A (zh) | 2024-01-09 |
Family
ID=89399506
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311295141.6A Pending CN117363683A (zh) | 2023-10-09 | 2023-10-09 | 一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117363683A (zh) |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998029561A1 (en) * | 1996-12-27 | 1998-07-09 | Smithkline Beecham Plc | Enzymatic resolution of benzodiazepine-acetic acid esters with a lipase |
| CN101063156A (zh) * | 2007-04-30 | 2007-10-31 | 江南大学 | 一种酶拆分制备(r)－6－羟基－8－氯辛酸乙酯的方法 |
| CN111499498A (zh) * | 2020-04-27 | 2020-08-07 | 江苏惠利生物科技有限公司 | 一种从发酵液中提取高纯度羟基酪醇的方法 |
| CN116813466A (zh) * | 2023-08-28 | 2023-09-29 | 江苏惠利生物科技有限公司 | 一种α-酮戊二酸的制备工艺 |
-
2023
- 2023-10-09 CN CN202311295141.6A patent/CN117363683A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1998029561A1 (en) * | 1996-12-27 | 1998-07-09 | Smithkline Beecham Plc | Enzymatic resolution of benzodiazepine-acetic acid esters with a lipase |
| CN101063156A (zh) * | 2007-04-30 | 2007-10-31 | 江南大学 | 一种酶拆分制备(r)－6－羟基－8－氯辛酸乙酯的方法 |
| CN111499498A (zh) * | 2020-04-27 | 2020-08-07 | 江苏惠利生物科技有限公司 | 一种从发酵液中提取高纯度羟基酪醇的方法 |
| CN116813466A (zh) * | 2023-08-28 | 2023-09-29 | 江苏惠利生物科技有限公司 | 一种α-酮戊二酸的制备工艺 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 陈来同: "《生物化学产品制备技术》", 31 January 2004, 科学技术文献出版社, pages: 244 - 246 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2460799C2 (ru) | Способ получения кристаллов гидрохлорида основной аминокислоты | |
| KR100282076B1 (ko) | 디-판토텐산 칼슘의 제조 방법 | |
| KR20110025917A (ko) | ５－메틸－３－니트로메틸－헥산산 에스테르의 입체선택적 효소 가수분해 방법 | |
| Chibata | Industrial application of immobilized enzyme systems | |
| CN101186944B (zh) | 一种氨基酸生物拆分的新方法 | |
| CN111662898A (zh) | 一种脂肪酶固定化新技术及其应用于对映体拆分的方法 | |
| EP2284174B1 (en) | Intermediates for the preparation of benzoxazine derivatives and process for their preparation | |
| US20070141684A1 (en) | Preparation of gamma-amino acids having affinity for the alpha-2-delta protein | |
| Sato et al. | Optical resolution of racemic amino acids by aminoacylase | |
| CN117363683A (zh) | 一种脂酶苯并二氮杂-乙酸酯的酶拆分方法 | |
| Arosio et al. | Chemo‐enzymatic dynamic kinetic resolution of amino acid thioesters | |
| US6949658B2 (en) | Process for producing optically active α-amino acid and optically active α-amino acid amide | |
| JP3140549B2 (ja) | α−置換カルボン酸の光学異性体の分離法 | |
| WO1991019002A1 (en) | A process for chiral enrichment of asymmetric primary amines | |
| CN115057791A (zh) | 一种左卡尼汀的工业化制备方法 | |
| CA1206435A (en) | Method for the production of l-phenylalanine through the reuse of phenylalanine ammonia lyase | |
| CN112480127A (zh) | 一种生产丝裂霉素的新方法 | |
| US7449325B2 (en) | Process for enzymatically producing either optically active N-substituted β-amino acids or esters thereof or optically active N-substituted 2-homopipecolic acids or esters thereof | |
| CN115181032B (zh) | 一种基于选择性共结晶/成盐拆分dl-缬氨酸外消旋化合物的方法 | |
| EP1074630B1 (en) | Microbial production of levodione | |
| EP0751224B1 (en) | Process for producing (r)-2-amino-1-phenylethanol or halogenated derivative thereof, process for producing optically active phenylserine or halogenated derivative thereof, and novel compound 3-(3-chlorophenyl)serine | |
| CN102226208A (zh) | D-天冬酰胺的制备方法 | |
| CN117844876A (zh) | 基于动态动力学拆分合成3-氰基丙酸衍生物的方法、3-氰基丙酸衍生物及γ-氨基丁酸衍生物 | |
| CN117778340A (zh) | 一种kred突变体及利用其制备(3r,4s)-n-boc-3-氟-4-羟基哌啶的方法 | |
| CN106636292B (zh) | (1r,4s)-(－)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-烯-3-酮的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |